一種利用魷魚制備醫(yī)用傷口敷料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用魷魚制備醫(yī)用傷口敷料的制備方法，屬于敷料制備領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]膠原蛋白是一類重要的纖維蛋白家族，普遍存在于動物體中，是主要的細(xì)胞外膜蛋白，約占總蛋白的25%?30%。膠原蛋白是結(jié)締組織的重要組成部分，幾乎存在于所有器官的間質(zhì)組織中，有助于組織、器官的穩(wěn)定和維持其結(jié)構(gòu)的完整。由于其獨(dú)特的生化功能，膠原蛋白被應(yīng)用于多個工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域，如生物醫(yī)藥、醫(yī)用材料、食品、化妝美容等。通常膠原蛋白是從哺乳動物、牛、豬等的皮和骨等原材料中提取。然而，在瘋牛病和口蹄疫爆發(fā)后，人們對從水生環(huán)境中尋找提取膠原的替代原料產(chǎn)生了極大的興趣，也因此海洋膠原蛋白替代哺乳動物膠原蛋白被應(yīng)用具有重要意義。
[0003]魷魚屬軟體動物門，頭足綱，槍烏賊科，是一種重要的海洋水產(chǎn)品。目前，魷魚加工已成為國內(nèi)水產(chǎn)品加工業(yè)的重要組成部分，但加工副產(chǎn)物魷魚皮因加工工藝等所限，無良好的增值途徑，一般被簡單的加工成飼料或掩埋處理。魷魚皮含有豐富膠原蛋白，水產(chǎn)動物的膠原蛋白因其低抗原性、低過敏性、易酶解等優(yōu)點(diǎn)，有著巨大的研究和應(yīng)用價值。
[0004]醫(yī)用敷料是一種一次性使用的醫(yī)療護(hù)理用品，使用后的敷料是一種具有高度危險性的醫(yī)療廢物，容易造成交叉感染和環(huán)境污染，需要進(jìn)行集中處理。我國每年產(chǎn)生大量的敷料廢物，給處理工作和環(huán)境保護(hù)造成巨大的壓力，如何對這種危險醫(yī)療廢物進(jìn)行減量化已引起人們的高度重視。
[0005]傳統(tǒng)的紗布敷料存在無法保持創(chuàng)面潤濕，創(chuàng)面愈合延遲，常常與傷口粘在一起，更換時易引起傷口開裂，一方面損傷新生組織，不利于傷口愈合，敷料被浸透時，病原體易通過，引起傷口感染，吸液量小，每次的使用量大，資源浪費(fèi)大，產(chǎn)生的廢物量多的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對目前傳統(tǒng)傷口敷料存在無法保持傷口創(chuàng)面潤濕，創(chuàng)面愈合延遲，更換時易引起傷口開裂，使病原體易通過，引起傷口感染的問題，提供了一種利用魷魚軟骨制備殼聚糖和魷魚皮膠原復(fù)配改性制得的醫(yī)用傷口敷料，本發(fā)明的傷口敷料充分利用了魷魚軟骨殼聚糖較低的灰分含量、較強(qiáng)的黏性以及較高的水分和脂肪結(jié)合能力，同時魷魚膠原的低抗原性、低過敏性、易酶解等優(yōu)點(diǎn)使其具有可生物降解性，不僅解決了傳統(tǒng)傷口敷料存在無法保持傷口創(chuàng)面潤濕，更換時易引起傷口開裂的缺陷，也解決了使用后需要集中處理，容易造成交叉感染和環(huán)境污染的不足，具有極佳的應(yīng)用前景。
[0007 ]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(1)取2?3kg魷魚，用刀切下魷魚皮備用，分離出魷魚軟骨，將其移入IL燒杯中，用質(zhì)量濃度為8%的鹽酸溶液浸沒軟骨，室溫下浸泡脫鈣25?35min，取出后用蒸餾水沖洗后再放入鍋中，加熱至90?100°C，煮沸脫脂10?20min;
(2)脫脂后按料液比為1:15將魷魚軟骨浸入濃度為0.03mol/L的次氯酸鈉溶液中，以200?300w的功率微波處理3?5min，再將處理后的混合液移入布氏漏斗抽濾得到濾渣，放入烘箱中于55?65 °C下干燥9?12h得魷魚軟骨甲殼素；
(3)取50?10g上述制得的魷魚軟骨甲殼素放入帶有攪拌器、滴液漏斗和溫度計(jì)的三口燒瓶中，將燒瓶移入水浴鍋加熱升溫至80?90°C，再按料液比為1:10向燒瓶中加入質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液，啟動攪拌器以300?400r/min的轉(zhuǎn)速保溫攪拌反應(yīng)5?7h后，過濾得濾出物，用真空干燥機(jī)干燥后得魷魚殼聚糖；
(4)將上述備用的魷魚皮瀝干后，按料液比為1:5和濃度為0.02mol/L的氫氧化鈉溶液混合，用玻璃棒攪拌，邊攪拌邊向混合液中滴加物料總質(zhì)量I?2%的質(zhì)量濃度為30%的雙氧水，繼續(xù)攪拌2?3min后將混合液放入冰箱，在4?6°C下靜置2?3天，脫色除雜蛋白；
(5)取500?600g預(yù)處理后的魷魚皮裝入陶瓷罐中，向里加入I?2L食用白醋，用攪拌棒攪拌均勾后移入低溫冷柜，在6?8 °C下磁力攪拌2?3天，攪拌轉(zhuǎn)速為200?300r/min，攪拌結(jié)束后以10000?12000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心10?15min，分離得到上清液；
(6)將上清液移入2?4°C的冰水浴中，向里逐滴滴加質(zhì)量濃度為20%的氯化鈉溶液，直至無沉淀物析出，將混合液放入臥式離心機(jī)，高速離心5?1min分離去除沉淀物得到上清液，將上清液裝入透析袋中，置于10倍體積的蒸餾水中進(jìn)行透析，直至透析液中用濃度為
0.2mol/L的硝酸銀溶液檢測不到鹽離子為止，得到透析袋中的魷魚皮膠原蛋白，經(jīng)真空凍干機(jī)凍干備用；
(7)稱取20?30g魷魚皮膠原蛋白凍干品，倒入200?300mL濃度為0.lmol/L的乙酸溶液中，再加入3?5g魷魚殼聚糖，用玻璃棒攪拌均勾后，于4?5 °C下冷凍離心8?12min進(jìn)行脫氣處理，離心轉(zhuǎn)速為7000?9000r/min，將脫氣后的混合液倒入5 X 5 X Icm的不銹鋼模具中，放入凍干機(jī)內(nèi)層板，先降溫至3?5°C進(jìn)行預(yù)凍I?2h，再降至-10?-5°C凍干后即得一種利用魷魚制備的醫(yī)用傷口敷料。
[0008]本發(fā)明的具體應(yīng)用方法:本發(fā)明制得的醫(yī)用傷口敷料可以用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用醫(yī)用酒精將創(chuàng)面周圍皮膚擦拭干凈，再選用比創(chuàng)面大3?5cm的本發(fā)明制得的敷料覆蓋創(chuàng)面，之后再以無菌紗布包扎，使敷料與創(chuàng)面緊貼，更換時間根據(jù)創(chuàng)面滲出液而定，滲出液多，敷料吸收飽和應(yīng)及時更換，滲出液少，可隔I?3天更換，如用在面部等特殊部位，可采取相應(yīng)的方式進(jìn)行固定。
[0009]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明的傷口敷料充分利用了魷魚軟骨殼聚糖較低的灰分含量、較強(qiáng)的黏性以及較高的水分和脂肪結(jié)合能力，同時魷魚膠原的低抗原性、低過敏性、易酶解等優(yōu)點(diǎn)使其具有可生物降解性，不僅解決了傳統(tǒng)傷口敷料存在無法保持傷口創(chuàng)面潤濕，更換時易引起傷口開裂的缺陷，也解決了使用后需要集中處理，容易造成交叉感染和環(huán)境污染的不足，具有極佳的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0010]取2?3kg魷魚，用刀切下魷魚皮備用，分離出魷魚軟骨，將其移入IL燒杯中，用質(zhì)量濃度為8%的鹽酸溶液浸沒軟骨，室溫下浸泡脫鈣25?35min，取出后用蒸餾水沖洗后再放入鍋中，加熱至90?100°C，煮沸脫脂10?20min;脫脂后按料液比為1:15將魷魚軟骨浸入濃度為0.03mol/L的次氯酸鈉溶液中，以200?300w的功率微波處理3?5min，再將處理后的混合液移入布氏漏斗抽濾得到濾渣，放入烘箱中于55?65°C下干燥9?12h得魷魚軟骨甲殼素;取50?10g上述制得的魷魚軟骨甲殼素放入帶有攪拌器、滴液漏斗和溫度計(jì)的三口燒瓶中，將燒瓶移入水浴鍋加熱升溫至80?90°C，再按料液比為1:10向燒瓶中加入質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液，啟動攪拌器以300?400r/min的轉(zhuǎn)速保溫攪拌反應(yīng)5?7h后，過濾得濾出物，用真空干燥機(jī)干燥后得魷魚殼聚糖；將上述備用的魷魚皮瀝干后，按料液比為1: 5和濃度為0.02mol /L的氫氧化鈉溶液混合，用玻璃棒攪拌，邊攪拌邊向混合液中滴加物料總質(zhì)量I?2%的質(zhì)量濃度為30%的雙氧水，繼續(xù)攪拌2?3min后將混合液放入冰箱，在4?6 °C下靜置2?3天，脫色除雜蛋白；取500?600g預(yù)處理后的魷魚皮裝入陶瓷罐中，向里加入I?2L食用白醋，用攪拌棒攪拌均勻后移入低溫冷柜，在6?8°C下磁力攪拌2?3天，攪拌轉(zhuǎn)速為200?300r/min，攪拌結(jié)束后以10000?12000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心10?15min，分離得到上清液;將上清液移入2?4°C的冰水浴中，向里逐滴滴加質(zhì)量濃度為20%的氯化鈉溶液，直至無沉淀物析出，將混合液放入臥式離心機(jī)，高速離心5?1min分離去除沉淀物得到上清液，將上清液裝入透析袋中，置于10倍體積的蒸餾水中進(jìn)行透析，直至透析液中用濃度為
0.2mol/L的硝酸銀溶液檢測不到鹽離子為止，得到透析袋中的魷魚皮膠原蛋白，經(jīng)真空凍干機(jī)凍干備用;稱取20?30g魷魚皮膠原蛋白凍干品，倒入200?300mL濃度為0.lmol/L的乙酸溶液中，再加入3?5g魷魚殼聚糖，用玻璃棒攪拌均勾后，于4?5°C下冷凍離心8?12min進(jìn)行脫氣處理，離心轉(zhuǎn)速為7000?9000r/min，將脫氣后的混合液倒入5X5 X Icm的不銹鋼模具中，放入凍干機(jī)內(nèi)層板，先降溫至3?5°C進(jìn)行預(yù)凍I?2h，再降至-10?-5°C凍干后即得一種利用魷魚制備的醫(yī)用傷口敷料。
[0011]實(shí)例 I
取2kg魷魚，用刀切下魷魚皮備用，分離出魷魚軟骨，將其移入IL燒杯中，用質(zhì)量濃度為8%的鹽酸溶液浸沒軟骨，室溫下浸泡脫鈣25min，取出后用蒸餾水沖洗后再放入鍋中，加熱至90°C，煮沸脫脂1min;脫脂后按料液比為1:15將魷魚軟骨浸入濃度為0.03mol/L的次氯酸鈉溶液中，以200w的功率微波處理3min，再將處理后的混合液移入布氏漏斗抽濾得到濾渣，放入烘箱中于55°C下干燥9h得魷魚軟骨甲殼素;取50g上述制得的魷魚軟骨甲殼素放入帶有攪拌器、滴液漏斗和溫度計(jì)的三口燒瓶中，將燒瓶移入水浴鍋加熱升溫至800C，再按料液比為1:1O向燒瓶中加入質(zhì)量濃度為40%的氫氧化鈉溶液，啟動攪拌器以300r/min的轉(zhuǎn)速保溫攪拌反應(yīng)5h后，過濾得濾出物，用真空干燥機(jī)干燥后得魷魚殼聚糖;將上述備用的魷魚皮瀝干后，按料液比為I: 5和濃度為0.02mol/L的氫氧化鈉溶液混合，用玻璃棒攪拌，邊攪拌邊向混合液中滴加物料總質(zhì)量1%的質(zhì)量濃度為30%的雙氧水，繼續(xù)攪拌2min后將混合液放入冰箱，在4°C下靜置2天，脫色除雜蛋白；取500g預(yù)處理后的魷魚皮裝入陶瓷罐中，向里加入IL食用白醋，用攪拌棒攪拌均勻后移入低溫冷柜，在6°C下磁力攪拌2天，攪拌轉(zhuǎn)速為200r/min，攪拌結(jié)束后以1000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心1min，分離得到上清液;將上清液移入2°C的冰水浴中，向里逐滴滴加質(zhì)量濃度為20%的氯