多重抗藥性大腸桿菌特異性抗體的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種與多重抗藥性（MDR)大腸桿菌菌株的LPS 025b抗原特異性結(jié)合 的抗體。
【背景技術(shù)】
[0002] 脂多糖（LPS)是大腸桿菌病原體表面上數(shù)量最多的抗原。一般說來，LPS具有三 個(gè)結(jié)構(gòu)部分：1)脂類A(亦稱為內(nèi)毒素），ii)核心寡糖，及iii)〇-抗原。后者由3-6個(gè)糖 的重復(fù)亞單位組成（取決于血清型）。脂類A和核心0S在一種單個(gè)腸道桿菌種中是相對(duì)地 非常保守的，但是，抗體接近它們是有限制的。另一方面，〇-抗原是極易接近的，但是，其結(jié) 構(gòu)多樣（在大腸桿菌中，有大約180種不同的0-型）。
[0003] 0-抗原的抗體能夠與大腸桿菌表面結(jié)合，因此，它們用于診斷（如流行病學(xué)研究 的〇-型）以及作為治療措施。但是，由于結(jié)構(gòu)變化多樣，〇-抗原特異性抗體的廣譜保護(hù)非 常麻煩。
[0004] 大腸桿菌引起的腸胃外感染很常見，導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率較高。最近發(fā)現(xiàn)的大腸 桿菌多重抗藥性（MDR)菌株導(dǎo)致的感染占大腸桿菌感染的很大一部分。
[0005] 由于這些MDR菌株已經(jīng)進(jìn)化為對(duì)臨床使用的大多數(shù)抗生素具有耐藥性，因此，針 對(duì)它們的治療方案很受限制。因此，替代的治療方案，如單克隆抗體（mAbs)被動(dòng)免疫法在 將來具有良好的前景。
[0006] 過去幾年里，出現(xiàn)了定義明確的MDR大腸桿菌克隆譜系ST131-025b:H4,該譜系 導(dǎo)致的感染占所有腸胃外大腸桿菌感染的大約10%，以及占MDR大腸桿菌感染的大約 一半(Peirano et al. Int J Antimicrob Agents 2010Apr ;35 (4):316-21 ;Rogers et al.J Antimicrob Chemother 2011Jan ；66(1):1-14 ；ffoodford et al. FEMS MicrobiolRev 2011Sep ;35(5) :736-55.)。屬于該譜系的菌株表現(xiàn)出有限的異質(zhì)性，因此，可認(rèn)為與抗原 庫非常類似。屬于這一簇的大多數(shù)菌株表達(dá)〇25b抗原，因此，采用編碼合成此抗原的酶的 特異性基因（LPS合成位點(diǎn)內(nèi)）來鑒定此克?。–lermont et al.J Antimicrob Chemother 2008May ;61 (5) : 1024-8.)。或者，可以利用025分型血清的凝集作用，但是，正如基因差異 所示，這種譜系的〇抗原（因此，被稱為〇25b)與標(biāo)準(zhǔn)的025抗原不同。但是，025分型血 清無法區(qū)分非-MDR 025和MDR 025b克隆。
[0007] Rogers et al. (J Antimicrob Chemother 2011 Jan ;66 (1) : 1-14)描述 了利用 三個(gè)主要特點(diǎn)，即其血清組（〇25b)、其系統(tǒng)發(fā)育組（B2)和其ST(ST131)檢測大腸桿菌 025b-ST131菌株。這三個(gè)特點(diǎn)被公開用于協(xié)助檢測。描述了各種分子技術(shù)，即MLST、基于 PCR的快速檢測法、重復(fù)序列PCR和PFGE。包括各種免疫球蛋白的多克隆抗血清（抗025a 菌株）用于測定025抗原，不區(qū)分亞型。
[0008] Jadhav et al. (PL0S ONE 2011 ;6(3) :el8063)描述了對(duì) 025b 亞群呈陽性的菌株 的毒性特點(diǎn)和基因親和力，所述〇25b亞群與B2-025b-ST131-CTX-M-15有毒的/多重抗藥 性型連接。對(duì)人類臨床分離菌進(jìn)行了分析，并劃分為各種血清型，得到了毒性標(biāo)記譜。采用 抗0-抗原多克隆抗血清-01至0173,通過血清型鑒定了 025陽性菌株。025陽性菌株進(jìn)一 步通過靶向rfb025b亞群基因位點(diǎn)的等位基因特異性PCR進(jìn)行基因分型。
[0009] Mora et al. (Int.J. Antimicrobial Agents 2011 ;37 (1):16-21)描述了產(chǎn) CTX-M-14大腸桿菌臨床分離菌中的某些克隆組的出現(xiàn)，其中有025b :H4-B2-ST131。0型用 特異性〇抗血清處理（多克?。?。
[0010] Clermont et al. (J Antimicrob Chemother 2008May ;61 (5) : 1024-8)公開了 025b ST131大腸桿菌的等位基因特異性pabB PCR試驗(yàn)。
[0011] Szijartoetal,(FEMSMicrobiolLett2012 ;332:131-6)描述了以 LPS分子核 心結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的大腸桿菌分離菌的分子分型。分離菌的核心類型采用分別靶向核心操縱子 中的基因和對(duì)R1-4和K-12核心類型具有特異性的引物，采用PCR進(jìn)行測定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的是提供特異性改善的大腸桿菌MDR菌株的抗體，用于預(yù)防或治療由 攜帶LPS 025b的菌株引起的大腸桿菌感染。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供能夠快速、可靠的 診斷MDR大腸桿菌的手段和方法。
[0013] 本發(fā)明的目的通過本發(fā)明的主題實(shí)現(xiàn)。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明，提供了一種與多重抗藥性（MDR)大腸桿菌菌株的025b抗原特異性結(jié) 合的分離抗體。
[0015] 特別地，所述抗體是單克隆抗體。
[0016] 特別地，所述抗體只與025b抗原特異性結(jié)合，或與025a和025b抗原共享的表位 交叉特異性結(jié)合。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體的方面，例如，所述抗體與025b和025或025a抗原交叉特異 性結(jié)合的親和力相等、大于相等、類似或不同。
[0018] 特別地，相對(duì)大腸桿菌的025a抗原，本發(fā)明的抗體優(yōu)選與025b抗原結(jié)合，或與這 種兩種抗原結(jié)合的親和力至少相等。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施例，抗體與〇25b抗原結(jié)合的親和力比與025a抗原結(jié) 合的親和力至少大2倍，特別是結(jié)合025b或025a時(shí)，兩者的親和力和/或親合力差別至少 是兩倍，或至少是三倍，至少是四倍，至少是五倍，或甚至至少是10倍。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體方面，與025b特異性結(jié)合的特征在于，采用免疫測定法， 優(yōu)選免疫印跡法、ELISA或其它免疫學(xué)方法進(jìn)行測定時(shí)，與025b抗原結(jié)合的親和力大于抗 025或025a大腸桿菌菌株的多克隆血清與025b抗原結(jié)合的親和力。親和力更高，特別地相 差至少兩倍，或至少三倍、至少四倍、至少5-倍，或甚至至少10-倍。
[0021] 特別地，本發(fā)明抗體靶向的025b抗原在一個(gè)或多個(gè)，及特別是在大多數(shù)ST131菌 株中普遍存在。
[0022] 特別地，抗體識(shí)別的表位存在于膠囊化（encapsulated)和非膠囊化 ST131-025b:H4菌株的表面上，如突變株的表面上。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面，抗體具有全長單克隆抗體或其抗體片段的結(jié)合位點(diǎn)， 包括至少一個(gè)摻入結(jié)合位點(diǎn)的抗體域，其中，抗體優(yōu)選是選自鼠科動(dòng)物抗體、美洲駝馬 (lama)抗體、兔抗體、羊抗體、?？贵w、嵌合抗體、人源化的或人抗體、重鏈抗體、Fab、Fd、 scFv和單域抗體，如VH、VHH或VL，優(yōu)選是人IgG抗體或鼠源性IgG抗體。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面，抗體結(jié)合025b抗原的親和力Kd小于10 7M，優(yōu)選小于 10 SM，特別是在單體狀態(tài)。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，抗體在包含活的野生型MDR大腸桿菌菌株的血清 樣品中顯不具有體外殺菌效用。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，抗體在體外刺激吞噬細(xì)胞吸收活的野生型MDR大 腸桿菌菌株。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，所述抗體與命名為8D5-1G10或8D10-C8的抗體結(jié) 合的表位相同。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，所述抗體包括與命名為8D5-1G10或8D10-C8的抗 體相同的結(jié)合位點(diǎn)。
[0029] 根據(jù)本發(fā)明的具體方面，本發(fā)明提供特異性結(jié)合到多重抗藥性（MDR)大腸桿菌菌 株的〇25b抗原的分離單克隆抗體，其包括抗體8D5-1G10,或源自抗體8D5-1G10,或抗體 8D5-1G10的功能活性變體的抗原-結(jié)合位點(diǎn)，優(yōu)選其中所述抗體8D5-1G10具有以下特點(diǎn)：
[0030] a)以保藏號(hào)DSM 26763保藏的宿主細(xì)胞產(chǎn)生的抗體輕鏈可變區(qū)；與/或
[0031] b)以保藏號(hào)DSM26762保藏的宿主細(xì)胞產(chǎn)生的抗體重鏈可變區(qū)；
[0032] c)或采用（a)與/或（b)的功能活性變體。
[0033] 根據(jù)具體的實(shí)施例，所述抗體是8D5-1G10抗體或其功能活性變體。
[0034] 本發(fā)明其它抗體在此列出，命名為6D1-1B2和8A1-1G8。這些抗體是具有類似 8D5-1G10的⑶R序列的克隆，在此本發(fā)明中亦理解為功能活性⑶R變體。
[0035] 特別地，命名為8D5-1G10的抗體由抗體輕鏈和抗體重鏈組成，抗體輕鏈包括以保 藏號(hào)DSM 26763保藏的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含的質(zhì)粒編碼序列所編碼的可變區(qū)，抗體重 鏈包括以保藏號(hào)DSM 26762保藏的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含的質(zhì)粒編碼序列所編碼的可 變區(qū)。
[0036] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，抗體源自8D5-1G10抗體，其中
[0037] -抗體輕鏈的可變區(qū)是通過以保藏號(hào)DSM 26763保藏的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含 的質(zhì)粒進(jìn)行編碼，或其功能活性變體；與/或；
[0038] -抗體重鏈的可變區(qū)是通過以保藏號(hào)DSM26762保藏的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含 的質(zhì)粒進(jìn)行編碼，或其功能活性變體。
[0039] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，所述抗體源自一個(gè)抗體，其中
[0040] -抗體輕鏈的可變區(qū)是通過以保藏號(hào)DSM 26763保藏的宿主細(xì)胞產(chǎn)生，或其功能 活性變體；與/或
[0041] _抗體重鏈的可變區(qū)是通過以保藏號(hào)DSM 26762保藏的宿主細(xì)胞產(chǎn)生，或其功能 活性變體。
[0042] 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)具體方面，本發(fā)明提供一分離的單克隆抗體，所述抗體與 025a和025b抗原共享的表位特異性結(jié)合，以及所述抗體包括抗體8D10-C8,或源自抗體 8D10-C8,或是抗體8D10-C8的功能活性變體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，優(yōu)選其中抗體8D10-C8的特 征是：
[0043] a)以保藏號(hào)DSM28171保藏的宿主細(xì)胞產(chǎn)生的抗體輕鏈可變區(qū)；與/或
[0044] b)以保藏號(hào)DSM28172保藏的宿主細(xì)胞產(chǎn)生的抗體重鏈可變區(qū)；
[0045] c)或采用（a)與/或（b)的功能活性變體。
[0046] 根據(jù)具體的實(shí)施例，抗體是8D10-C8抗體或其功能活性變體。
[0047] 特別地，命名為8D10-C8的抗體由抗體輕鏈和抗體重鏈組成，抗體輕鏈包括保藏 號(hào)DSM28171的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含的質(zhì)粒編碼序列所編碼的可變區(qū)，抗體重鏈包括 保藏號(hào)DSM 28172的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含的質(zhì)粒編碼序列所編碼的可變區(qū)。
[0048] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，抗體源自8D10-C8抗體，其中
[0049]-抗體輕鏈的可變區(qū)是通過保藏號(hào)DSM28171的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含的質(zhì)粒 進(jìn)行編碼，或其功能活性變體；與/或
[0050]-抗體輕鏈的可變區(qū)是通過保藏號(hào)DSM28172的大腸桿菌宿主細(xì)胞中包含的質(zhì)粒 進(jìn)行編碼，或其功能活性變體。
[0051] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，所述抗體源自一個(gè)抗體，其中
[0052]-抗體輕鏈的可變區(qū)是通過保藏號(hào)DSM 28171的宿主細(xì)胞產(chǎn)生，或其功能活性變 體；與/或
[0053]-抗體重鏈的可變區(qū)是通過保藏號(hào)DSM28172的宿主細(xì)胞產(chǎn)生，或其功能活性變 體。
[0054] 具體地說，功能活性變體是⑶R變體，例如，該變體包括⑶R，更具體地是包括⑶R 環(huán)序列，含序列一致性至少60 %，優(yōu)選至少70 %、80 %或90 %的氨基酸序列。
[0055] 特別地，抗體源自這樣的抗體，采用各自的CDR序列，或CDR突變體，包括功能活性 的⑶R變體，如一個(gè)⑶R環(huán)內(nèi)具有1、2或3個(gè)點(diǎn)突變。
[0056] 具體地說，功能活性變體與母抗體在氨基酸序列中，優(yōu)選在CDR中，至少有一個(gè)點(diǎn) 突變不同，其中每個(gè)CDR氨基酸序列中點(diǎn)突變的數(shù)量是0、1、2或3個(gè)。
[0057] 根據(jù)進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供包含以下核苷酸序列的質(zhì)粒：
[0058] A
[0059]-對(duì)保藏號(hào)DSM 26763的宿主細(xì)胞中包含的命名為8D5-1G10-LC的抗體輕鏈可變 區(qū)進(jìn)行編碼；與/或
[0060]-對(duì)保藏號(hào)DSM 26762的宿主細(xì)胞中包含的命名為8D5-1G10-HC的抗體重鏈可變 區(qū)進(jìn)行編碼；
[0061] 或 B
[0062]-對(duì)保藏號(hào)DSM 28171的宿主細(xì)胞中包含的命名為8D10-C8-LC的抗體輕鏈可變區(qū) 進(jìn)行編碼；與/或
[0063] -對(duì)保藏號(hào)DSM 28172的宿主細(xì)胞中包含的命名為8D10-C8-HC的抗體重鏈可變區(qū) 進(jìn)行編碼。
[0064] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供一種表達(dá)盒，包括表達(dá)本發(fā)明抗體輕 鏈與/或重鏈的編碼序列，所述表達(dá)盒或編碼序列源自選自由本發(fā)明質(zhì)粒組成的群組中的 質(zhì)粒。
[0065] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供一種制備本發(fā)明抗體的方法，其中宿 主細(xì)胞采用本發(fā)明的質(zhì)?；虮磉_(dá)盒轉(zhuǎn)化。
[0066]根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供包含本發(fā)明質(zhì)?；虮磉_(dá)盒的宿主細(xì) 胞。
[0067] 特別地，宿主細(xì)胞保藏號(hào)為
[0068] A
[0069] DSM 26763 與 / 或 DSM 26762;
[0070]或 B
[0071] DSM 28171 與 / 或 DSM 28172。
[0072] 具體的實(shí)施例涉及一種制備本發(fā)明抗體的方法，其中本發(fā)明的宿主細(xì)胞在一定條 件下培養(yǎng)或保持，從而制備所述抗體。
[0073] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供鑒定候選抗體的方法，包括：
[0074] (a)提供包含抗體或抗體產(chǎn)生細(xì)胞的樣品；及
[0075] (b)對(duì)樣品中的抗體或樣品產(chǎn)生的抗體與命名為8D5-1G10或8D10-C8的抗體識(shí)別 的表位的結(jié)合進(jìn)行評(píng)價(jià)，其中抗體和表位之間的陽性反應(yīng)鑒定該抗體為候選抗體。
[0076] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供鑒定候選抗體的方法，包括：
[0077] (a)提供包含抗體或抗體產(chǎn)生細(xì)胞的樣品；及
[0078] (b)對(duì)樣品中的抗體或樣品產(chǎn)生的抗體與ST131-025b:H4菌株的025b抗原及 非-MDR大腸桿菌菌株的025b抗原，或025a抗原的結(jié)合進(jìn)行評(píng)價(jià)，其中相對(duì)于025抗原或 〇25a抗原，抗體與025b抗原之間的特異性陽性反應(yīng)鑒定該抗體為候選抗體。
[0079] 特別地，候選抗體是一種候選保護(hù)性抗體，如用于治療，或候選診斷抗體。
[0080] 此外，根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的具體方面，本發(fā)明提供一種制備本發(fā)明抗體的方法，包 括
[0081] (a)提供一種根據(jù)本發(fā)明鑒定的候選抗體；及
[0082] (b)制備一種候選抗體的單克隆抗體，或人源化抗體或人源抗體，或它們的衍生 物，所述衍生物與候選抗體具有相同表位結(jié)合特異性。
[0083] 根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)具體方面，本發(fā)明提供一種制備本發(fā)明抗體的方法，包括
[0084](a)采用命名為8D5-1G10或8D10-C8的抗體識(shí)別表位對(duì)非人動(dòng)物進(jìn)行免疫；
[0085](b)從分離的B-細(xì)胞形成永生化細(xì)胞系；
[0086] (c)篩選b)中獲得的細(xì)胞系，鑒定細(xì)胞系產(chǎn)生與表位結(jié)合的單克隆抗體；及
[0087](d)產(chǎn)生所述單克隆抗體，或該抗體的人源化抗體或人源抗體，或它們的衍生物， 該衍生物其與所述單克隆抗體具有相同表位結(jié)合特異性。
[0088] 根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)具體方面，本發(fā)明提供一種制備本發(fā)明抗體的方法，包括
[0089] (a)采用ST131_025b:H4菌株的025b抗原對(duì)非人動(dòng)物進(jìn)行免疫，并分離產(chǎn)生抗體 的B-細(xì)胞；
[0090] (b)從分離的B-細(xì)胞形成永生化細(xì)胞系；
[0091] (c)篩選細(xì)胞系，鑒定產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞系，相對(duì)于大腸桿菌的025抗原或 〇25a抗原，所述單克隆抗體優(yōu)選與025b抗原結(jié)合；及
[0092] (d)產(chǎn)生所述單克隆抗體，或該抗體的人源化抗體或人源抗體，或它們的衍生物， 該衍生物與所述單克隆抗體具有相同表位結(jié)合特異性。
[0093] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供本發(fā)明抗體的醫(yī)療用途。具體地說，抗體提 供用于處理承受MDR大腸桿菌感染風(fēng)險(xiǎn)或遭受MDR大腸桿菌感染的對(duì)象的用途，包括使對(duì) 象服用有效劑量的抗體，限制對(duì)象的感染或使所述感染引起的病情好轉(zhuǎn)，優(yōu)選用于治療或 預(yù)防腎盂腎炎、第二次菌血癥、膿毒病、腹膜炎、腦膜炎和呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎。
[0094] 特別地，抗體用于消滅MDR大腸桿菌，優(yōu)選ST131-025b:H4菌株，而不考慮該菌株 表達(dá)的莢膜多糖。
[0095] 根據(jù)具體的方面，本發(fā)明進(jìn)一步提供一種處理方法，其中處理承受MDR大腸桿菌 感染風(fēng)險(xiǎn)或遭受MDR大腸桿菌感染的對(duì)象，方法包括，使對(duì)象服用有效劑量的抗體，以限制 對(duì)象的感染或使所述感染引起的病情好轉(zhuǎn)，優(yōu)選用于治療或預(yù)防腎盂腎炎、第二次菌血癥、 膿毒病、腹膜炎、腦膜炎和呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的方法。
[0096] 特別地，所述處理方法用于消滅MDR大腸桿菌，優(yōu)選ST131-025b:H4菌株，而不考 慮菌株表達(dá)的莢膜多糖。
[0097] 根據(jù)具體的一方面，采用本發(fā)明抗體的免疫療法可以有效防御活細(xì)菌挑戰(zhàn)，如各 種動(dòng)物模型中測定的挑戰(zhàn)。
[0098] 抗體可以特異性中和致命的內(nèi)毒素血癥。這種功能活性可以在合適的體內(nèi)模型中 (采用純化LPS挑戰(zhàn)）測定。
[0099] 所述抗體在通過補(bǔ)體介導(dǎo)殺滅MDR大腸桿菌方面特別有效，例如，如體外血清殺 菌試驗(yàn)（SBA)測定的那樣，例如，殺滅細(xì)菌比對(duì)照樣品（不加入抗體或不相關(guān)對(duì)照mAb)至 少尚20 %。
[0100] 所述抗體在通過抗體介導(dǎo)吞噬作用殺滅MDR大腸桿菌方面特別有效，例如，如體 外調(diào)理吞噬殺菌試驗(yàn)（0PK)測定的那樣，例如，輸入細(xì)菌的吸收量比對(duì)照樣品（不加入抗體 或加入不相關(guān)對(duì)照mAb)至少高20%，或最終cfu數(shù)比對(duì)照樣低20%。
[0101] 所述抗體在通過中和內(nèi)毒素功能殺滅MDR大腸桿菌方面特別有效，例如，如體外 LAL試驗(yàn)所測定的那樣，或Toll樣受體4(TLR4)報(bào)告試驗(yàn)測定的那樣，與對(duì)照樣品（不加入 抗體或加入不相關(guān)對(duì)照mAb)相比，內(nèi)毒素活性下降至少20%。
[0102] 根據(jù)一個(gè)具體實(shí)施例，抗體以腸胃外或粘膜制劑施用。
[0103] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供本發(fā)明抗體的藥物制劑，優(yōu)選包括腸胃外 或粘膜制劑，可選包含藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
[0104] 根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供本發(fā)明抗體的診斷用途，用于檢測或測定 對(duì)象中表達(dá)LPS 025b抗原的MDR菌株導(dǎo)致的大腸桿菌感染，如上下尿路感染，包括膀胱炎 或尿道炎，上行性或血源性腎盂腎炎，特別是糖尿病患者中的，以及菌血癥、膿毒病、腹膜炎 或腸道定植。
[0105] 特別地，提供本發(fā)明所述用途的抗體，其中通過在體外用所述抗體接觸對(duì)象的體 液樣品，測定所述對(duì)象的全身性MDR大腸桿菌感染，其中抗體的特異性免疫反應(yīng)確定感染。
[0106] 特別地，測試體液樣品的特異性免疫反應(yīng)，樣品選自尿液、血液、血液分離物或血 液培養(yǎng)、抽出物、唾液、插管患者灌洗液和大便。
[0107] 特別地，本發(fā)明的診斷用途指的是根據(jù)臨床標(biāo)本中回收的純大腸桿菌，體外測定 大腸桿菌的血清型。
[0108] 根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明抗體的診斷制劑，可選包含帶標(biāo)記的抗體與/ 或其它帶標(biāo)記的診斷試劑，如利用各自的靶抗原特異性識(shí)別抗體或抗體免疫復(fù)合物的試 劑，與/或固定至少其中一種抗體和診斷試劑的固相。診斷制劑可以是組合物的形式提供 或作為試劑盒部分提供，例如，包含各組分，如包括以下各項(xiàng)的組分：
[0109] a)診斷抗體制劑，與/或
[0110] b)其它診斷試劑，
[0111] 與/或固定至少一種抗體和診斷試劑的固相，固相作為獨(dú)立的組分，或作為以上 a)與/或b)任一組分的載體。
[0112] 本發(fā)明優(yōu)選的診斷分析包括將本發(fā)明的抗體固定在固相上，例如，乳膠珠粒、金顆