組合的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物癌癥的方法，且涉及可用于該治療的組合。特別是， 該方法涉及新的組合，其包含PI3K抑制劑：2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯 基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪唑-4-羧酸或其藥物可接受的鹽，和MEK抑制劑： N- {3- [3-環(huán)丙基-5- (2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四 氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，涉及 包含該組合的藥物組合物，且涉及使用該組合治療癌癥的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 通常，癌癥由控制細(xì)胞分裂、分化和細(xì)胞凋亡的正常過(guò)程中的失調(diào)而產(chǎn)生。凋亡 (程序性細(xì)胞死亡）在胚胎發(fā)育和各種疾病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，所述疾病如變性神 經(jīng)元疾?。╠egenerative neuronal diseases)、心血管疾病和癌癥。一種最常見(jiàn)的涉及激 酶調(diào)節(jié)凋亡的研宄途徑是從細(xì)胞表面生長(zhǎng)因子受體向細(xì)胞核的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)（Crews and Erikson, Cell, 74:215-17, 1993)〇
[0003] 磷酸肌醇3-激酶（PI3K)途徑是人癌癥中最?；罨闹磺以谥掳┳饔弥械闹?要性是良好建立的。（Samuels Y和Ericson K. Oncogenic PI3K and its role in cancer. Current Opinion in Oncology，2006; 18:77-82)〇
[0004] PI3K途徑和癌癥之間的聯(lián)系得到了研宄的證實(shí)，所述研宄鑒別出在編碼PllO a 蛋白的PIK3CA基因中的體細(xì)胞突變。隨后，已經(jīng)在眾多癌癥中鑒別出PIK3CA中的突變， 所述癌癥包括結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、卵巢癌和肺癌。與PIK3CA不同，尚未在 0亞型中鑒別出體細(xì)胞突變。但是，在過(guò)表達(dá)研宄中，已經(jīng)暗示PI3K0亞型是PTEN腫瘤 抑制物的喪失或滅活在體外和在體內(nèi)誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)化所必需的（Torbett NE, Luna A, Knight ZA,等人，A chemical screen in diverse breast cancer cell lines reveals genetic enhancers and suppressors of sensitivity to PI3K isotype-selective inhibition. Biochem J2008 ；415:97-110 ；Zhao JJjLiu ZjWang LjShin EjLoda MFjRoberts TMjThe oncogenic properties of mutant pllOa and pllOb phosphatidyl inositol 3-kinases in human mammary epithelial cells.Proc Natl Acad Sci USA2005 ; 102:18443-8)〇 與 該發(fā)現(xiàn)相一致，已經(jīng)在一些膀胱癌、結(jié)腸癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和白血病中鑒別出PIK3CB基 因的過(guò)表達(dá)，并且siRNA介導(dǎo)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系中的pll〇0的敲低（knockdown) 會(huì)導(dǎo)致腫瘤體外和體內(nèi)生長(zhǎng)的抑制（Pu P，Kang C，Zhang Z，等人，Downregulation of PIK3CB by siRNA suppresses malignant glioma cell growth in vitro and in vivo. Technolo Cancer Res Treat 2006;5:271-280)。使用 shRNA 的更新的數(shù)據(jù)證實(shí)，減量 調(diào)節(jié)pllOe且不減量調(diào)節(jié)pllOa，會(huì)導(dǎo)致PI3K途徑滅活，并隨后在體外和在體內(nèi)滅活 缺乏 PTEN 的癌細(xì)胞中的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)（Wee S，Wiederschain，Maira S_M，Loo A，Miller C，等人，PTEN-deficient cancers depend on PIK3CB. Proc Natl Acad Sci 2008; 105:13057-13062)。與PIK3CB信號(hào)傳遞在沒(méi)有PTEN的腫瘤中的作用相一致，據(jù)報(bào)道， PllO 0是在沒(méi)有PTEN的前列腺癌模型中的轉(zhuǎn)化表型所必需的（Jia S，Liu Z，Zhang S，Liu P, Zhang L,等人，Essential roles of PI (3)K-pll0b in cell growth, metabolism and tumorgenesis.Nature2008;10:1038)?？傊?，這些發(fā)現(xiàn)表明PI3K pll〇0是癌癥治療中有 希望的祀點(diǎn)。
[0005] 促細(xì)胞分裂劑-活化的蛋白質(zhì)（MAP)激酶/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK)激酶 (下文稱為MEK)已知與大量細(xì)胞過(guò)程的調(diào)節(jié)相關(guān)。Raf家族（B-Raf，C-Raf等人）激 活MEK家族（MEK-1，MEK-2等）且MEK家族激活ERK家族（ERK-1和ERK-2)。廣泛來(lái) 說(shuō)，RAF/MEK/ERK途徑的信號(hào)傳導(dǎo)活化控制mRNA轉(zhuǎn)移。這包括與細(xì)胞周期相關(guān)的基因。 因此，該途徑的過(guò)度活化會(huì)引起不受控制的細(xì)胞增殖。由于ERK過(guò)度活化造成的RAF/ MEK/ERK途徑的反常在約30 %的所有人惡性腫瘤中被發(fā)現(xiàn)（Allen，LF，et al. Semin. Oncol. 2003. 30 (5Suppl 16) : 105-16)。可以經(jīng)由 PI3K/AKT 和 RAF/MEK/ERK 傳導(dǎo)信號(hào)的 RAS 在15%的所有癌癥中具有突變的致癌蛋白（Davies, H.et al. Nature. 2002. 417:949-54)。 同樣地，活化性BRAF突變已經(jīng)在特定的腫瘤類型（例如黑素瘤）被高頻率鑒定出來(lái) (Davies, H. et al. Nature. 2002. 417:949-54)。盡管在人癌癥中不經(jīng)常出現(xiàn)MEK本身的活化 性突變，但是MEK由于其在ERK途徑中的重要作用而被認(rèn)為是治療人癌癥的重要藥物靶標(biāo)。 此外，MEK抑制活性有效地誘導(dǎo)了 ERK1/2活性的抑制和細(xì)胞增殖的抑制（The Journal of Biological Chemistry, vol. 276, No. 4, pp. 2686-2692, 2001)，期望該化合物顯示出對(duì)由不 期望的細(xì)胞增殖引起的疾病如腫瘤發(fā)生和/或癌癥的作用。
[0006] 有用的是提供一種改善的療法，該療法向經(jīng)受癌癥作用的個(gè)體提供更有效的和/ 或增強(qiáng)的治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案提供一種組合，其包含：
[0008] ⑴結(jié)構(gòu)⑴的化合物：
[0010] 或其藥物可接受的鹽；和
[0011] (ii)結(jié)構(gòu)（II)的化合物：
[0013] 或其藥物可接受的鹽或溶劑化物。
[0014] 本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案提供在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體應(yīng)給藥 治療有效量的組合，該組合為2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎 啉基）-lH_苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基 甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6,8_二甲 基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其 藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗锏慕M合。
[0015] 本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案提供在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體應(yīng)給藥 治療有效量的組合，該組合為2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎 啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基 甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6,8_二甲 基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其 藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗锏慕M合，其中該組合在規(guī)定 的期間內(nèi)給藥，且其中該組合在一段持續(xù)的時(shí)間內(nèi)給藥。
[0016] 本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案提供在需要的人中治療癌癥的方法，其包括向該人體應(yīng)給藥 治療有效量的組合，該組合為2-甲基-1-{[2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎 啉基）-lH-苯并咪唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基 甲基）-1，3_丙二醇鹽，和N-{3-[3-環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6,8_二甲 基-2, 4, 7-三氧代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其 藥物可接受的鹽或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗锏慕M合，其中所述組合的化 合物相繼給藥。
[0017] 發(fā)明詳沐
[0018] 本發(fā)明涉及具有抗增殖活性的組合。適當(dāng)?shù)?，所述方法涉及治療癌癥的方法，其通 過(guò)共同給藥：
[0019] 2-甲基-1-{ [2-甲基-3-(三氟甲基）苯基]甲基}-6-(4-嗎啉基）-IH-苯并咪 唑-4-羧酸，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽， (以下稱為化合物A，或其藥物可接受的鹽，適當(dāng)?shù)貫槠?-氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二 醇鹽），該化合物由結(jié)構(gòu)I表示：
[0021] 和N-{3-[3_環(huán)丙基-5-(2-氟-4-碘-苯基氨基）-6, 8-二甲基-2, 4, 7-三氧 代-3, 4, 6, 7-四氫-2H-吡啶并[4, 3-d]嘧啶-1-基]苯基}乙酰胺，或其藥物可接受的鹽 或溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铮ㄒ韵路Q為化合物B或其藥物可接受的鹽或 溶劑化物，適當(dāng)?shù)貫槠涠谆鶃嗧咳軇┗铮?br>[0022] 該化合物由結(jié)構(gòu)II表示：
[0024] 化合物A可按照國(guó)際申請(qǐng)?zhí)枮镻CT/US2011/052857的專利申請(qǐng)中描述的實(shí)施例31 所制備。
[0025] 適當(dāng)?shù)兀衔顰為2-氨基-2-(羥基甲基）-1,3-丙二醇鹽的形式?；衔顰的 2_氨基-2-(羥基甲基）-1，3-丙二醇鹽可按照國(guó)際申請(qǐng)?zhí)枮镻CT/US2011/052857的專利申 請(qǐng)中描述的實(shí)施例86所制備。
[0026] 化合物B以及其藥物可接受的鹽和溶劑化物，可用作MEK活性的抑制劑，特別是治 療癌癥，其在如下中公開(kāi)并要求保護(hù)：國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP2005/011082，該申請(qǐng)的國(guó)際申請(qǐng) 日為2005年6月10日；國(guó)際公開(kāi)號(hào)為WO 2005/121142且國(guó)際公開(kāi)日為2005年12月22 日，其整個(gè)公開(kāi)在此引入作為參考，化合物B為實(shí)施例4-1的化合物?；衔顱可按照國(guó)際 申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP2005/011082所述的制備?；衔顱可按照美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)US 2006/0014768 制備，2006年1月19日公開(kāi)，其整個(gè)公開(kāi)在此引入作為參考。
[0027] 適當(dāng)?shù)兀衔顱為二甲基亞砜溶劑化物的形式。適當(dāng)?shù)?，化合物B為鈉鹽的形 式。適當(dāng)?shù)?，化合物B為溶劑化物的形式，該溶劑化物選自：水合物、乙酸、乙醇、硝基甲烷、 氯苯、1-戊醇、異丙醇、乙二醇和3-甲基-1-丁醇的溶劑化物。這些溶劑化物和鹽形式可通 過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員由國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/JP2005/011082或美國(guó)專利公開(kāi)號(hào)US 2006/0014768 的描述制備。
[0028] 給藥治療有效量的本發(fā)明的組合相比單獨(dú)組分化合物是有利的，因?yàn)楫?dāng)相比于單 獨(dú)給藥治療有效量的組分化合物時(shí)，該組合提供以下一種或多種改善的性質(zhì)：i)與活性最 大的單個(gè)藥物（agent)相比有更高的抗癌作用，ii)協(xié)同的或高度協(xié)同的抗癌活性，iii)提 供增強(qiáng)的抗癌活性和減少的副作用分布的給藥方案，iv)毒性作用分布減少，V)治療窗口 增加，或者vi)組分化合物中的一個(gè)或兩者的生物利用度增加。
[0029] 本發(fā)明的各化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)手性原子，或者可以以兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體存 在。因此，本發(fā)明的化合物包括對(duì)映異構(gòu)體的混合物以及純化的對(duì)映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體 富集的混合物。還應(yīng)當(dāng)理解所有的互變異構(gòu)體和互變異構(gòu)體的混合物均包括在化合物A和 其可藥用鹽以及化合物B和其可藥用鹽或溶劑化物的范圍內(nèi)。
[0030] 本發(fā)明的化合物可以形成溶劑化物，其可以理解為由溶質(zhì)（在本發(fā)明中，化合物A 或其鹽和/或化合物B或其鹽）和溶劑形成的各種化學(xué)計(jì)量的復(fù)合物。用于本發(fā)明目的的 這些溶劑不可以干擾溶質(zhì)的生物學(xué)活性。合適溶劑的實(shí)例包括但不限于：水、甲醇、二甲基 亞砜、乙醇和乙酸。適當(dāng)?shù)?，所使用的溶劑為可藥用的溶劑。適當(dāng)?shù)?，所用的溶劑為水或?甲基亞砜。
[0031] 本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地制備本發(fā)明化合物的可藥用鹽。
[0032] 本發(fā)明還包括使用本發(fā)明的組合治療癌癥的方法，其中給藥以前藥形式的化合物 A或其可藥用鹽和/或化合物B或其可藥用鹽或溶劑化物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地制 備本發(fā)明化合物的可藥用前藥。
[0033] 當(dāng)涉及給藥方案（給藥方案）時(shí)，術(shù)語(yǔ)"天"、"每天"等是指日歷上一天內(nèi)的時(shí)間， 其從子夜開(kāi)始，結(jié)束于下一個(gè)子夜。
[0034]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)"治療"及其相關(guān)表述表示治療性治療。當(dāng)涉及具體的病 癥時(shí)，治療表示：（1)改善或預(yù)防該病癥的一個(gè)或多個(gè)生物學(xué)表現(xiàn)的狀況，（2)干擾（a)引 起或響應(yīng)于該病癥的生物學(xué)級(jí)聯(lián)中的一個(gè)或多個(gè)點(diǎn)，或（b)該病癥的一個(gè)或多個(gè)生物學(xué)表 現(xiàn)，（3)減輕與該病癥或其治療相關(guān)的一個(gè)或多個(gè)癥狀、作用或副作用，或者（4)減緩該病 癥的進(jìn)展，或者減緩該病癥的一個(gè)或多個(gè)生物學(xué)表現(xiàn)。由此，也包括了預(yù)防性治療。本領(lǐng)域 技術(shù)人員將會(huì)理解"預(yù)防"不是絕對(duì)的術(shù)語(yǔ)。在醫(yī)學(xué)中，將"預(yù)防"理解為預(yù)防性給藥以基 本上減少病癥或其生物學(xué)表現(xiàn)的可能性或嚴(yán)重性，或者以延緩這種病癥或其生物學(xué)表現(xiàn)的 開(kāi)始。例如，當(dāng)受試者被認(rèn)為處于患癌癥的高風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，例如當(dāng)受試者具有強(qiáng)大的癌癥家族史 時(shí)或者當(dāng)受試者已經(jīng)暴露于致癌物質(zhì)時(shí)，預(yù)防性治療是合適的。
[0035]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)"有效量"表示產(chǎn)生例如研宄者或臨床醫(yī)師所尋求的組織、 系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物學(xué)或藥學(xué)響應(yīng)的藥物或藥用制劑的量。此外，術(shù)語(yǔ)"治療有效量"表 示，與沒(méi)有接受該量的相應(yīng)受試者相比，引起疾病、病癥或副作用的改進(jìn)治療、治愈、預(yù)防或 減輕的量，或者引起疾病或病癥的進(jìn)展的速率降低的量。該術(shù)語(yǔ)還包括在其范圍內(nèi)有效地 增強(qiáng)正常生理功能的量。
[0036] 除非另有所述，如本文所使用的術(shù)語(yǔ)"組合"及其相關(guān)表述表示同時(shí)給藥或者以任 何分開(kāi)的順序給藥治療有效量的化合物A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽。優(yōu)選地， 如果給藥不是同時(shí)的，那么所述化合物以彼此緊密相鄰的時(shí)間給藥。此外，化合物是否以相 同的劑型給藥是無(wú)關(guān)緊要的，例如一個(gè)化合物可以局部給藥，另一個(gè)化合物可以口服給藥。 適當(dāng)?shù)?，化合物A通過(guò)靜脈內(nèi)給藥且化合物B 口服給藥。
[0037] 如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)"組合試劑盒"，表示用于給藥根據(jù)本發(fā)明的化合物A或其 可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽的一種或多種藥物組合物。當(dāng)該兩種化合物同時(shí)給藥 時(shí)，所述組合試劑盒可以含有在單個(gè)藥物組合物如片劑或在分開(kāi)的藥物組合物中的化合物 A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽或溶劑化物。當(dāng)不同時(shí)給藥所述化合物時(shí)，所述 組合試劑盒將含有在分開(kāi)的藥物組合物中的化合物A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用 鹽或溶劑化物。該組合試劑盒可以包括在在單個(gè)包裝中的分開(kāi)的藥物組合物中，或在分開(kāi) 包裝中的分開(kāi)的藥物組合物中的化合物A或其可藥用鹽和化合物B或其可藥用鹽或溶劑化 物。
[0038] 在一個(gè)方面中提供了包含下列成分的組合試劑盒：
[0039] 化合物A，或其藥物可接受的鹽，以及藥物可接受的載體；和
[0040] 化合物B，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，以及藥物可接受的載體。
[0041] 在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案中該組合試劑盒包含以下成分：
[0042] 化合物A，或其藥物可接受的鹽，以及藥物可接受的載體；和
[0043] 化合物B，或其藥物可接受的鹽或溶劑化物，以及藥物可接受的載體，
[0044] 其中各成分以適于順序、分開(kāi)和/或同時(shí)給藥的形式提供。
[0045] 在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合試劑盒包含：
[0046] 第一容器，其包含化合物A或其可藥用鹽以及可藥用載體；和
[0047] 第二容器，其包含化合物B或其可藥用鹽以及可藥用載體；和用于容納所述第一 容器和第二容器的容器裝置。
[0048] 所述"組合試劑盒"還可以提供說(shuō)明書(shū)，如劑量和給藥說(shuō)明書(shū)。這些劑量和給藥說(shuō) 明書(shū)可以為向醫(yī)師提供的類型，例如藥物產(chǎn)品標(biāo)簽，或者它們可以為由醫(yī)師提供的類型，如 向患者提供的說(shuō)明書(shū)。
[0049] 如本文所述，術(shù)語(yǔ)"化合物