一種晚櫻葉揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種晚櫻葉揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。制備方法包括以下步驟：取晚櫻葉陰干粉碎，加入原料4~6倍的60~70%的乙醇溶液，連續(xù)逆流超聲提取1~2次，提取液濃縮，濃縮液用有機(jī)溶劑萃取，再經(jīng)無水硫酸鈉干燥、減壓濃縮等步驟，得到淡黃色的晚櫻葉揮發(fā)油。本發(fā)明具有工藝簡單、得率高、可連續(xù)操作等優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)藥效學(xué)評價，所得晚櫻葉揮發(fā)油對腫瘤細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用。將晚櫻葉揮發(fā)油與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
【專利說明】一種晚櫻葉揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種晚櫻葉揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 櫻花為薔薇科植物，不僅具有很高的觀賞價值，而且具有多種藥用價值，葉及花作 為傳統(tǒng)的中藥材，具有平喘、潤腸的功效。日本晚櫻是櫻花中的優(yōu)點(diǎn)品種，其花大、重瓣、顏 色鮮艷、氣味芳香、花期長，在我國廣泛栽培。
[0003] 植物揮發(fā)油是中藥重要有效成分，具有抗氧化、祛痰、止咳、抗菌、消炎等功能。經(jīng) 研究表明，日本晚櫻葉揮發(fā)油以含氧化合物為主，以醛、酯和醇類含量最高，主要包含苯甲 醛、香豆素、植物醇等。天然苯甲醛廣泛存在于薔薇科植物中，可用作食用香料，具有抑制癌 細(xì)胞生成、阻止癌細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的作用，而對于正常細(xì)胞無傷害，對霉菌和細(xì)菌均具有一 定的抑制作用。香豆素不僅是一種重要的香料，還具有抗腫瘤、抗凝血、抗氧化等多種藥用 功能。因此，日本晚櫻葉揮發(fā)油具有廣泛的應(yīng)用價值，可應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、保健品、香料等 行業(yè)。
[0004] 腫瘤是目前危害人類健康的主要疾病之一，醫(yī)學(xué)界在不斷的研究和開發(fā)新的抗癌 藥物，從天然植物中尋找具有抗癌活性的化合物是研究開發(fā)抗癌藥的重要途徑。植物揮發(fā) 油因其特殊的香味和作用可作為抗癌藥物來研究。
[0005] 通過文獻(xiàn)檢索，在有關(guān)晚櫻葉揮發(fā)油的研究報(bào)道中，未見到抗癌活性的研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為滿足臨床需要，擴(kuò)大用藥品種，更好地治療腫瘤疾病，本發(fā)明提供一種晚櫻葉揮 發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下： 晚櫻葉陰干，粉碎；取晚櫻葉粉末置于連續(xù)逆流超聲提取器中，加入原料4飛倍的 60?70%的乙醇溶液，控溫5(T60°C，重復(fù)提取廣2次，每次9(Tl20min ;提取液濃縮，用有機(jī) 溶劑萃取2~3次，后經(jīng)無水硫酸鈉干燥、減壓濃縮等步驟得到晚櫻葉揮發(fā)油。
[0008] 所述的有機(jī)溶劑為石油醚或乙醚中的任意一種。
[0009] 晚櫻葉揮發(fā)油在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0010] 通過體外腫瘤細(xì)胞體外抑制試驗(yàn)，觀察晚櫻葉揮發(fā)油的抗腫瘤作用，結(jié)果表明晚 權(quán)葉揮發(fā)油對腹水型S180、肝癌及黑色素瘤B16均有一定的抑制作用，具有顯著抗癌活性， 且其毒副作用小。
[0011] 本發(fā)明的有益效果通過以下實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證： 實(shí)驗(yàn)方法： 1、 受試提取物：晚櫻葉揮發(fā)油 2、 細(xì)胞株:腹水瘤細(xì)朐株S180、肝癌細(xì)朐株BEL-7404及黑色素瘤細(xì)朐株B16。
[0012] 3、給藥劑量和方法 晚搜葉揮發(fā)油組：l〇mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。
[0013] 陰性對照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0014] 陽性對照組：30mg/kg/天，5-氟尿啼陡肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0015] 灌胃后2h，用HPLC檢測血漿藥物濃度。
[0016] 4、種植瘤模型的建立與給藥 (1)皮下種植：分別將上述細(xì)胞培養(yǎng)至90%融合，收集細(xì)胞，取2X10 6細(xì)胞懸液，注射 至小鼠肋下皮下組織，于術(shù)后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計(jì)算藥物對 模型動物存活率的影響。
[0017] (2)脾內(nèi)種植瘤肝轉(zhuǎn)移模型：取2X106細(xì)胞懸液注射至小鼠脾包膜內(nèi)，于術(shù)后15 天取脾和肝臟，測量瘤重和肝轉(zhuǎn)移數(shù)。
[0018] (3)給藥方式：種植瘤細(xì)胞同時給藥。
[0019] 5、結(jié)果 結(jié)果如表1、表2和表3顯示，晚櫻葉揮發(fā)油用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移 的作用，可延長實(shí)驗(yàn)小鼠的生存期。
[0020] 表1晚櫻葉揮發(fā)油對種植瘤的抑制作用（n=20,^ ±S)

【權(quán)利要求】
1. 一種晚櫻葉揮發(fā)油的制備方法，其特征在于包括以下步驟：晚櫻葉陰干，粉碎； 取晚櫻葉粉末置于連續(xù)逆流超聲提取器中，加入原料4飛倍的60~70%的乙醇溶液，控溫 5(T6(TC，重復(fù)提取1~2次，每次9(Tl20min ;提取液濃縮，用有機(jī)溶劑萃取2~3次，后經(jīng)無水 硫酸鈉干燥、減壓濃縮等步驟得到晚櫻葉揮發(fā)油。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種晚櫻葉揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶 劑為石油醚或乙醚中的任意一種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1~2所述方法制備的晚櫻葉揮發(fā)油在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P35/00GK104306482SQ201410550357
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月17日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司