專利名稱：新的白屈菜堿衍生物、其制備方法及其用于制備藥劑的用途的制作方法
說明書本發(fā)明涉及新的白屈菜堿衍生物及其制備方法；本發(fā)明還涉及所述化合物在與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂，尤其是癌癥相關(guān)的疾病的預防、治療、跟蹤控制(follow up)、術(shù)后治療中的用途以及包含所述白屈菜堿衍生物的試劑盒。
眾所周知，在各種不同的藥用植物例如水飛雉、槲寄生、黑茗、金光菊、匍匐風鈴草以及白屈菜(Chelidonium majus)中包含的物質(zhì)，可以被用于不同類型的疾病。因此，白屈萊能有效地治療疣并可用于不同的膽汁疾病。白屈菜含有總量約0.1-1重量％的大約30種生物堿，其中包括白屈菜赤堿、sanguinhrine、小檗堿和白屈菜堿。白屈菜堿已知具有解痙和止痛效果。此外，還已知道，新鮮植物的黃色乳狀汁液由于含有白屈菜堿，能抑制細胞分裂。然而，對于細胞分裂的影響可以在許多種細胞培養(yǎng)物中觀察到，例如在腫瘤和非癌癥細胞中。出于該原因，人們已經(jīng)試圖提供一種白屈菜堿衍生物，其對腫瘤細胞具有特定的效果，但對非變質(zhì)的細胞，例如非腫瘤細胞僅有低的效果或完全沒有影響。因此，Jalilian et al(2001)描述了可能用作抗腫瘤活性物質(zhì)的合成白屈菜堿衍生物。這些衍生物是被標記的氟苯甲酸酯，使得能夠?qū)εc微管結(jié)構(gòu)的相互反應進行研究。Grynkiewicz et al(2001)描述了多種對中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有效果的白屈菜堿衍生物。所公開的衍生物具有對于白屈菜堿母物質(zhì)尚未公開的抗血清素能性的效果。
另一種白屈菜堿衍生物是秋葵素，其是來源于白屈菜生物堿的三聚化合物，與硫代磷酸三疊氮化合物一起用于癌癥的治療。正如已經(jīng)描述的，秋葵素的抗腫瘤效果已經(jīng)在細胞培養(yǎng)物和動物實驗中進行了檢測。此外，一些公開的內(nèi)容揭示了，在前列腺癌、結(jié)腸直腸癌和乳癌的情況下秋葵素在人體中具有治療效果。然而，迄今為止還不能確定，在大量不同的秋葵素中所包含的哪些活性物質(zhì)產(chǎn)生上述抗腫瘤效果。目前，沒有一種正在使用的試劑在EU成員國中被正式批準。
除了對這些物質(zhì)結(jié)構(gòu)和組成的疑問以外，還沒有證據(jù)證明大部分使用的物質(zhì)的有效性(Hopf，2002)。
因此，本發(fā)明的目的是提供其他的白屈菜堿衍生物，該衍生物在它們的結(jié)構(gòu)上能明確地確定并可以證明其導致了抗腫瘤的效果。
本發(fā)明通過提供新型的具有抗腫瘤效果的白屈菜堿衍生物解決了上述問題，所述的白屈菜堿衍生物選自白屈菜堿乙酸酯、白屈菜堿三氟乙酸酯、白屈菜堿三氯甲基碳酸酯、白屈菜堿甲基琥珀酸酯、白屈菜堿乙基草酸酯、N-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷、苯基丙氨酸白屈菜堿酯、脯氨酸白屈菜堿酯和/或丙氨酸白屈菜堿酯。
令人驚訝的是，可以證明合成的白屈菜堿衍生物具有抗腫瘤效果。
本發(fā)明還涉及含有根據(jù)本發(fā)明的白屈菜堿衍生物的藥劑，任選地與藥學可接受的載體、助劑和/或賦形劑聯(lián)用。
術(shù)語“白屈菜堿衍生物”、“根據(jù)本發(fā)明的化合物”和“藥劑”將被用作同義詞，即，在出現(xiàn)關(guān)于根據(jù)本發(fā)明的化合物或白屈菜堿衍生物的表述時，它們還涉及含有包含這些結(jié)構(gòu)的藥劑。白屈菜堿衍生物或根據(jù)本發(fā)明的化合物或藥劑可以以治療量與生物體接觸。
本文中使用的“治療量”這一表述是指下面所述的量，即，能夠預防或改善病癥或敏感的、病理生理學狀況的癥狀。在本發(fā)明的一個特定實施方式中，給藥的量足以抑制癌癥的生長，所述量基本上能防止或抑制在接受者中的癌擴散、腫瘤血管生成、腫瘤侵襲和/或癌轉(zhuǎn)移。因此，本發(fā)明涉及含有本發(fā)明化合物的藥劑或藥物，其中任選一并含有藥物助劑。
本發(fā)明的化合物在預防的情況下用于健康人體中的量和在治療的情況下用于患者中的量被處方化，且根據(jù)常規(guī)醫(yī)藥實踐確定的劑量考慮了治療的病癥、每一個患者個體的狀態(tài)、給藥部位、給藥方法和對于主治醫(yī)生公知的其它因素。類似地，如同醫(yī)生和本領(lǐng)域其它普通技術(shù)人員所周知的，本發(fā)明化合物的給藥劑量取決于腫瘤的特征、本發(fā)明化合物在血漿中的體內(nèi)半衰期、本發(fā)明化合物在處方中的濃度，還取決于給藥的路線、給藥的部位和速率、每一個個體(人類和動物)的臨床耐受性、患者的病理學影響等。通常，優(yōu)選的是，每個個體和每次給藥的劑量約0.1-1000mg；特別優(yōu)選的是10-500mg的劑量，進一步更優(yōu)選的是200-400mg，尤其是300mg。還可以在連續(xù)給藥的過程中使用不同的劑量。
例如，注射(肌肉內(nèi)或皮下或血管內(nèi))被設(shè)想作為本發(fā)明化合物的治療給藥途徑，例如做成膠囊或載體粘合的本發(fā)明化合物，盡管其以氣溶膠、通過導液管或虹吸管的形式提供也是可行的。其它優(yōu)選的路線包括用于口服給藥的懸浮液、片劑、膠囊等，用于液體配方的市售的噴霧劑、凍干的或氣霧化的吸入劑以及用于直腸或陰道給藥的栓劑。選擇的參數(shù)的適合性，例如劑量、方式，助劑的選擇等可以通過從患者，例如人類或動物提取血清等分試樣，并在應用的過程中測試而確定。選擇地或共存地，免疫系統(tǒng)的T細胞或其它細胞的量可以采用常規(guī)的方法確定，從而能獲得對患者的免疫構(gòu)型的全面調(diào)查。此外，對于期望的效果，可以觀察患者的臨床狀況而獲得。尤其是可以確定癌的生長和轉(zhuǎn)移。當癌癥與其它的疾病例如感染并發(fā)時，也可以對后者進行另外的共監(jiān)視。
通常，本發(fā)明的含水配方和干燥化合物均可以與賦形劑混合以在治療前提供例如與溶劑的穩(wěn)定效果。根據(jù)本發(fā)明的化合物的含水溶液可以是本發(fā)明化合物的懸浮液或溶液。
本發(fā)明的化合物可以與防腐劑一起包含在溶液中。懸浮液或溶液的適宜的防腐劑的例子包括苯酚、芐醇、間甲酚、羥苯甲酸甲酯、對羥苯甲酸丙酯、氯芐烷銨、氯芐乙銨。通常，根據(jù)本發(fā)明的化合物的配方可以包括一定量的某些組分，所述的量不會對穩(wěn)定劑型的制備產(chǎn)生不利的影響，適合于有效、安全的藥物給藥。例如，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員周知的其它藥學可接受的賦形劑可以構(gòu)成根據(jù)本發(fā)明化合物或配方的一部分。例如，這些賦形劑包括鹽、各種填料、輔助的緩沖劑、螯合劑、抗氧化劑、共溶劑等。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方式中，本發(fā)明的化合物與脂質(zhì)體、siosomes和/或niosomes聯(lián)用。
例如，其可以通過如下方式實現(xiàn)，將根據(jù)本發(fā)明的化合物夾裹在脂質(zhì)體中或固定在脂質(zhì)體的表面上。本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的是，尤其是將組分耦合在脂質(zhì)體的表面或夾裹在脂質(zhì)體的內(nèi)部或者僅僅簡單地與脂質(zhì)體混合時，脂質(zhì)體的人工膜或天然膜可以具有免疫刺激的效果。這樣的脂質(zhì)體的配方以非腸胃途徑使用。使用公知的方法，例如噴霧，這樣的處方可以通過在鼻腔的黏膜上經(jīng)鼻使用。在一個優(yōu)選的方式中，使用噴霧的上述治療處理適合于治療肺癌或耳-鼻-喉區(qū)域中的腫瘤。尤其是在鼻部給藥中，本發(fā)明的化合物必須以以下的狀態(tài)在黏膜上使用，使其能滲透黏膜或被黏膜吸收。因此，水皰必須與黏液生物可相容并具有一定程度的親水性。例如，對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，這樣的結(jié)構(gòu)由EP0682528獲知，該文獻的教導包含在本發(fā)明的公開中。脂質(zhì)體組合物可以含有一種或多種其它的藥物載體，這些載體選自表面活性物質(zhì)和吸收促進劑，例如聚氧乙烯醇醚、膽汁酸鹽及其衍生物、梭鏈孢酸及其衍生物、油酸、卵磷脂、溶血卵磷脂、Tween21-85等；水吸收性聚合物，例如糖原糠醛(glycofurol)、聚乙二醇200-7500、聚乙烯吡咯烷酮、丙二醇或聚丙烯酸、明膠、纖維素及其衍生物等；能抑制酶分解的物質(zhì)，例如抑酶肽；有機溶劑，例如醇，如乙醇、甘油、芐醇等；或乙酸乙酯等；疏水劑，例如植物油、大豆油、花生油、可可油、玉米油、橄欖油、向日葵油、“Miglyols”或它們的混合物等；pH-調(diào)節(jié)劑，例如硝酸、磷酸、乙酸、檸檬酸等；防腐劑和滲透壓調(diào)節(jié)劑，例如甘油、氯化鈉、對羥基苯甲酸甲酯、苯甲酸等；脂質(zhì)體和/或乳液配方，例如卵磷脂等；微膠囊配方；推進劑，例如丁烷。
在本發(fā)明的另一個實施方式中優(yōu)選的是，將根據(jù)本發(fā)明的化合物任選地彼此聯(lián)用、耦合至載體或封裝在脂質(zhì)體中，其中，在本發(fā)明的意義上，這種封裝在脂質(zhì)體中并不是必然暗示本發(fā)明的化合物存在于脂質(zhì)體的內(nèi)部，在本發(fā)明的意義上，封裝還可以暗示將本發(fā)明的化合物與脂質(zhì)體的膜聯(lián)用，例如將該化合物固定在外膜上。本發(fā)明化合物在脂質(zhì)體中或在其上的這種表示在下述的這樣一些情況下是有利的，其中，本領(lǐng)域技術(shù)人員選擇如下脂質(zhì)體，使得后者具有免疫刺激效果。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，對脂質(zhì)體的免疫刺激效果進行修飾的各種方法可以由DE19851282獲知。脂質(zhì)可以是普通的脂質(zhì)，例如酯和酰胺；或復雜的脂質(zhì)，例如糖脂，如腦苷脂或神經(jīng)節(jié)苷脂、鞘脂類或磷酸脂類。
在本發(fā)明的意義上，可以是包含本發(fā)明化合物的藥物組分的載體可以是蛋白質(zhì)，作為它們免疫行為的結(jié)果，其對抗體回應進行刺激，也可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的助劑，例如QS21、GPI-0100或其它的皂甙，水-油乳液，例如Montanide、多溶素、聚精氨酸化合物等，如磷酸鹽緩沖的鹽水、水、各種洗滌劑、無菌溶液等。
本發(fā)明定義中的藥劑是在藥物領(lǐng)域中的任何試劑，其可以用于包括腫瘤的患者的預防、診斷、治療、跟蹤控制或術(shù)后恢復治療，使得能至少暫時性地確保它們的整體狀況或生物體特定區(qū)域狀況的病理學改變。因此，例如，本發(fā)明意義上的藥劑可以是疫苗或治療劑。除了本發(fā)明的化合物以外，本發(fā)明定義中的藥劑還可以含有例如其可接受的鹽或成分。例如可以是諸如磷酸等無機酸的鹽，或有機酸的鹽。
此外，這些鹽可以不含有羧基并由無機堿(例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氫氧化鐵)衍生得到，或者由有機堿(例如異丙胺、三甲胺、2-乙氨基乙醇、組氨酸等衍生得到。液體載體的例子是不含有其它的材料或活性成分的無菌水溶液，例如水，或者是含有緩沖液例如具有生理性pH的磷酸鈉、生理鹽水或上述兩者的無菌水溶液，例如磷酸鹽緩沖的氯化鈉溶液。其他的液體載體可以包含超過一種的緩沖鹽，例如氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖、丙二醇、聚乙二醇等。但是，藥劑的液體組合物還可以含有不包括水的液相。這樣另外液相的例子是甘油、植物油、有機酯或水-油乳液。相對于全部的藥物成分，該藥物組合物或藥劑通常包括至少0.1重量％的根據(jù)本發(fā)明的化合物。用于將根據(jù)本發(fā)明的藥劑給藥的劑量或劑量范圍是足夠高或?qū)挼?，以便獲得形成中性抗體期望的預防或治療效果。在這一點上，劑量不能任意確定，否則會出現(xiàn)不期望的副作用。通常，劑量根據(jù)患者的年齡、體質(zhì)、性別而改變，當然也取決于疾病的程度。個體劑量的確定取決于基本疾病和出現(xiàn)的其它癥狀。通過使用公知的途徑和方法，確切的劑量可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員獲得，例如由作為劑量函數(shù)或作為使用途徑或藥物載體等函數(shù)的癌癥生長確定。取決于患者，劑量可以根據(jù)單獨確定。例如，患者剛剛能耐受的藥劑量可以是，其在血漿中或在特定器官中的范圍為0.1-10000μm，優(yōu)選為1-100μm。此外，劑量可以基于患者身體的體重進行計算。在這種情況下，藥劑的常規(guī)劑量必須在如下的范圍內(nèi)調(diào)整，例如0.1μg-100μg/每kg體重，優(yōu)選為1-50μg/kg。此外，還可以基于特定的器官而不是基于患者整體來確定。這種情況例如是，當通過手術(shù)將例如放入生物聚合物中的本發(fā)明的藥劑放置在接近特定的器官的情況。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，可以將肽或重組的蛋白質(zhì)以期望的方式釋放出來的許多生物聚合物是已知的。例如，這樣的凝膠可以包括1-1000μg本發(fā)明的氨基酸序列，例如肽、重組的蛋白質(zhì)或藥劑/ml凝膠組合物，優(yōu)選為5-500μg/ml，特別優(yōu)選為10-100μg/ml。在這樣的情況下，治療劑作為固體、凝膠狀或液態(tài)的組合物給藥。
在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方式中，載體選自填料、稀釋劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、溶解阻滯劑、吸收促進劑、浸潤劑、吸收劑和/或潤滑劑。
填料、稀釋劑優(yōu)選淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和二氧化硅；粘合劑優(yōu)選羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮；濕潤劑優(yōu)選甘油；分裂劑優(yōu)選瓊脂，碳酸鈣和碳酸鈉；溶解阻滯劑優(yōu)選石蠟；吸收促進劑優(yōu)選季銨化合物；浸透劑優(yōu)選鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯；吸附劑優(yōu)選高嶺土和膨潤土；潤滑劑優(yōu)選滑石、硬脂酸鈣和硬脂酸鎂、固體聚乙二醇或上述物質(zhì)的混合物。
在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的化合物作為凝膠、藥粉、粉末、片劑、緩釋劑、預混物、乳液、液體配方、滴劑、濃縮液、顆粒、糖漿、小丸、大丸劑、膠囊、氣溶膠、噴霧劑和/或吸入劑和/或在這些方式下使用。片劑、糖衣藥片、膠囊、丸劑和顆粒劑可以具有常規(guī)的涂層和任選包括不透明劑的外殼，并可以具有如下組成，使得有效物質(zhì)的釋放任選以延遲的方式僅或優(yōu)選在腸道中的適宜部位進行，其中末端聚合物和石蠟可以用作灌封物質(zhì)。
例如，本發(fā)明的藥物可以以任何口服容許的劑型用于口服給藥，包括膠囊、片劑、含水懸浮液和溶液，但并不限定于此。在使用片劑口服給藥的情況下，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還添加潤滑劑，例如硬脂酸鎂。對于以膠囊的形式口服給藥，適宜使用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。在含水懸浮液的口服給藥中，將活性物質(zhì)與乳化劑和懸浮劑組合使用。另外，如果需要，可以添加特定的甜味劑和/或調(diào)味劑和/或著色劑。
活性物質(zhì)，即本發(fā)明的化合物，任選地可以與一種或多種上述的載體物質(zhì)形成微膠囊的形式。
除了活性物質(zhì)以外，栓劑還可以含有常規(guī)的水溶性或水不溶性載體物質(zhì)，例如聚乙二醇、脂肪，如可可脂和高級酯(例如C14醇與C16脂肪酸的酯)或這些物質(zhì)的混合物。
除了活性物質(zhì)以外，軟膏、糊劑、乳膏和凝膠還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如動物和植物脂肪、蠟、石蠟、淀粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚硅氧烷、膨潤土、二氧化硅、滑石和氧化鋅或這些物質(zhì)的混合物。
除了活性物質(zhì)以外，粉劑和噴霧劑還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如乳糖、滑石、二氧化硅、氫氧化鋁、硅酸鈣和聚酰胺粉末或這些物質(zhì)的混合物。此外，噴霧劑還可以含有常規(guī)的推進劑，例如含氯氟烴。
除了活性物質(zhì)以外，溶液和乳液還可以含有常規(guī)的載體物質(zhì)，例如溶劑、增溶劑和乳化劑，例如水、乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油、尤其是棉籽油、花生油、玉米油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油，甘油、甘油縮甲醛、四氫糠醇、聚乙二醇和脫水山梨糖醇的脂肪酸酯或這些物質(zhì)的混合物。為了不經(jīng)腸胃使用，溶液和乳液還可以以無菌和血液等滲的形式存在。
除了活性物質(zhì)以外，懸浮液還可以含有常規(guī)的載體，例如液體稀釋劑，如水、乙醇、丙二醇；懸浮劑，如乙氧基化的異硬脂酸醇、聚氧乙烯山梨糖醇和脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁(aluminium metahydroxide)、膨潤土、瓊脂和黃蓍膠或這些物質(zhì)的混合物。
藥物可以為凍干無菌注射配方的形式，例如作為無菌注射的含水或含油懸浮液存在。該懸浮液還可以采用本領(lǐng)域中已知的方法，通過使用適宜的分散劑或濕潤劑(例如Tween 80)和懸浮劑進行配制。無菌注射配方還可以是在無毒的、非腸道容許的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢允褂玫娜菰S的載體和溶劑包括甘露糖醇、水、Ringer溶液和等滲壓氯化鈉溶液。此外，通常使用無菌、非揮發(fā)性的油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的，可以使用任意柔和的非揮發(fā)性的油，包括合成的一或二甘油酯。脂肪酸，例如油酸及其甘油酯衍生物可以在注射劑的制備中使用，例如天然的藥物可容許的油，例如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化的形式。這些油溶液或懸浮液還可以含有長鏈醇或類似的醇作為稀釋劑或分散劑。
上述的配方還可以含有著色劑、防腐劑以及氣味和味道改善添加劑，例如薄荷油和桉葉油，以及甜味劑，例如糖精。優(yōu)選的是，根據(jù)本發(fā)明的化合物以全部混合物的約0.1-99.5重量％，更優(yōu)選為約0.5-95重量％的濃度存在于上述藥物配方中。
除了本發(fā)明的化合物以外，上述藥物制劑還可以進一步含有其它的藥物活性物質(zhì)。上述藥物制劑的制備采用根據(jù)公知方法的常規(guī)途徑，例如通過將活性物質(zhì)與載體物質(zhì)混合。
在人類和動物中，上述制劑可以經(jīng)口、直腸、非腸道(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下途徑)、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、局部(粉劑、軟膏、滴劑)使用，并且可在空腔、體腔中的炎癥治療中使用。對于口服治療，注射溶液、溶液和懸浮液、凝膠、湯劑(brew-up)配方、乳液、軟膏、滴劑均可以作為適宜的制劑。對于局部治療，可以使用眼藥和皮膚的配方、銀和其它的鹽、耳部滴劑、眼膏、粉劑或溶液。對于動物，給藥還可以通過具有適宜配方的飼料或飲用水進行。此外，在人類和動物中還可以使用凝膠、藥劑、粉末、片劑、緩釋片劑、預混物(Premix)、濃縮劑、顆粒、小丸、大丸劑、膠囊、氣溶膠、噴霧劑和/或吸入劑。此外，本發(fā)明的化合物可以包含在其它載體材料中，例如塑料(用于局部治療的塑料鏈)、膠原或骨質(zhì)粉。
在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物在配方中的加入濃度為0.1-99.5，優(yōu)選為0.5-95，特別優(yōu)選為20-80重量％。即，本發(fā)明的化合物在上述的藥物配方例如片劑、丸劑、顆粒劑等中存在的濃度為全部混合物的0.1-99.5重量％。與載體物質(zhì)結(jié)合獲得單一劑量形式的有效物質(zhì)即本發(fā)明化合物的量，可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)待治療的寄主、被治療的腫瘤和特定的給藥方式而改變。一旦寄主或患者的狀況得到改善，制劑中活性化合物的比率可以進行改變，以得到維持劑量。然后，根據(jù)于癥狀，給藥的劑量或頻率或兩者被降低到維持改善狀況的水平。一旦癥狀緩和達到期望的程度，治療應當停止。然而，如果疾病癥狀復發(fā)，患者可能需要長期的間歇治療。因此，化合物的比率，即它們在藥物制劑全部混合物中的濃度，以及其組成或結(jié)合是可以改變的，可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員進行改變和調(diào)整。
本領(lǐng)域技術(shù)人員需要注意的因素是，本發(fā)明化合物可以以不同的途徑與生物體，優(yōu)選人類或動物接觸。另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員還需要熟悉的因素是，藥劑可以以不同的劑量使用。給藥應當以這樣一種方式進行，即，盡可能有效地消除腫瘤，或通過預防性的給藥以避免該疾病的發(fā)生。給藥的濃度和方式可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過途徑試驗確定。本發(fā)明化合物的優(yōu)選給藥方式是口服給藥為粉劑、片劑、液體混合劑、滴劑、膠囊等形式，直腸給藥為栓劑、溶液等形式，非腸道給藥為注射液、輸液和溶液、氣體吸入劑、氣溶膠、粉末和膏藥的形式，局部給藥為涂油膏、膏藥、敷料、洗劑等形式。與本發(fā)明的化合物接觸最好是以預防或治療的方式。在預防的給藥中，應至少能避免上述腫瘤的形成，其能顯著減少腫瘤的增長或能基本完全消除腫瘤。在接觸治療中，患者的癌癥疾病已經(jīng)存在，業(yè)已存在于身體中的腫應當被消除或抑制其增長。為了這個目的的優(yōu)選給藥方式例如是皮下、舌下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)和/或局部給藥。
在本發(fā)明化合物的使用中，除了上述濃度以外，在一個優(yōu)選實施方式中，該化合物還可以以每24小時0.05-500mg/kg體重的總量使用，優(yōu)選為5-100mg/kg體重。有利地是，該治療量能夠避免或者改善癥狀或相應的病理學生理狀況。這一給藥量足以抑制腫瘤的生長。
顯而易見的是，劑量取決于年齡、健康狀況、受藥人的體重、疾病的程度、必要的同步處理的方式、治療的頻率和期望效果的類型以及副作用。0.05-500mg/kg體重的每日劑量可以作為單劑量或多劑量使用，從而獲得期望的結(jié)果。這一每日的劑量值可用于包括傳染病的腫瘤疾病的預防和治療中，例如誘發(fā)或共誘發(fā)癌癥的傳染病，如肝炎，尤其是B型肝炎傳染病。尤其是，藥劑通常每日進行1-7次給藥，或選擇性或附加地作為連續(xù)輸液進行。這樣的給藥可以用作慢性疾病或急癥的治療。當然，與載體物質(zhì)聯(lián)用以獲得單劑量形式的活性物質(zhì)的量，可以根據(jù)治療主體和給藥的特定方式而改變。在優(yōu)選的方式中，將每日劑量分成2-5次給藥，其中，在每一次給藥中，將1-2片具有0.05-500mg/kg體重的活性物質(zhì)含量的片劑給藥。當然，還可以選擇更高含量的活性物質(zhì)，，例最高至5000mg/kg的濃度。片劑還可以是緩釋片劑，其中每日給藥的次數(shù)減少至1-3次。緩釋片劑的活性物質(zhì)的含量可以是3-3000mg。如果活性物質(zhì)-如上所述-是通過注射給藥時，宿主優(yōu)選每日與本發(fā)明的化合物接觸1-8次，或通過使用持續(xù)輸液時，優(yōu)選每日的量為1-4000mg。這一優(yōu)選的每日總量在人類和動物藥物中均是有利的。有時可能需要偏離上述的劑量，這取決于用于治療宿主的種類和體重、疾病的類型和程度、配方類型和藥物給藥的方式、以及給藥的時間或間隔。因此，在某些情況下可能優(yōu)選的是，將藥劑以少于上述的量與生物體接觸，在另外的情況下，上述規(guī)定的活性物質(zhì)的量必須被超過。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以容易地確定每一個病例中需要的最佳劑量以及活性物質(zhì)給藥的類型。
在本發(fā)明另一個特別優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的化合物以1-80，尤其是3-30mg/kg體重一次給藥。與每日的總量同樣，每次使用的一次給藥劑量也可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員改變。類似地，根據(jù)本發(fā)明使用的化合物可以以上述單一的濃度和配方與飼料或飼料配方或飲用水混合用于獸藥中。一次劑量優(yōu)選包括在一次給藥中給藥的活性物質(zhì)的量以及通常對應于1天、半天的劑量或1/3天、1/4天的劑量的活性物質(zhì)的量。因此，劑量單元可以優(yōu)選含有1、2、3或4或更多的一次劑量或0.5、0.3或0.25個單獨劑量。在一個優(yōu)選方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物的每日劑量分為2-10次給藥，優(yōu)選為2-7次，更優(yōu)選為3-5次。當然，根據(jù)本發(fā)明的試劑的持續(xù)輸液也是可以的。
在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的實施方式中，在本發(fā)明化合物的每一次口服給藥中，使用1-10個片劑或膠囊，優(yōu)選為4-8個片劑或膠囊，更特別優(yōu)選為6個片劑或膠囊。根據(jù)本發(fā)明的片劑可以具有對本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的包衣涂層和外殼，或可以按如下方式組成，即，使得僅在受體的優(yōu)選的特定部分釋放活性物質(zhì)。
在本發(fā)明另一個優(yōu)選的實施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物與至少一種其它公知的藥劑一起使用。即，本發(fā)明的化合物可以與公知的藥物一起用于預防或治療中。這樣的組合可以同時給藥，例如合在一個藥物配方中給藥，或者也可以分別給藥，例如以片劑、注射或其它藥劑的組合的方式，同時或在不同的時間給藥，目的在于獲得期望的預防或治療效果。這些公知的藥劑可以是增強根據(jù)本發(fā)明的化合物的效果的藥劑。
當然，還可以在治療中，例如在作為區(qū)域治療的聯(lián)合治療中，單獨或與其它藥劑一起使用本發(fā)明的化合物，尤其是藥劑；例如在肝癌的情況下優(yōu)選采用這種方式。
本領(lǐng)域技術(shù)人員都知道，通過氧化劑或加成形成劑降低谷胱甘肽的濃度在特定腫瘤疾病中是有利的。為此目的，優(yōu)選提高作為化療劑的鉑絡(luò)合物的濃度或根據(jù)本發(fā)明化合物的濃度。
通常，存在本發(fā)明化合物彼此之間的優(yōu)選比例和/或與其它治療劑或效果增強劑(例如輸送抑制劑、新陳代謝抑制劑、用于腎排泄或葡糖化(glucuronidation)的抑制劑，例如丙磺舒、對乙酰氨基酚、阿司匹林、氯羥去甲安定、甲腈咪胺、雷尼替丁、Colifibrate、消炎痛、優(yōu)洛芬、萘普生等)的優(yōu)選比例，其中活性物質(zhì)以最佳的比例存在。最佳比例被定義為本發(fā)明化合物與其它治療劑的比例，其中，總體治療效果大于各個單獨治療劑的效果的總和。通常，當這些試劑以10∶1-1∶10、20∶1-1∶20、100∶1-1∶100、500∶1-1∶500的比例存在時發(fā)現(xiàn)最佳比例。在某些情況下，極少量的治療劑就足以提高一種或多種其它藥劑的效果。此外，為了降低逐漸增加的耐受的危險和/或提高治療效果，組合使用本發(fā)明的化合物是特別有利的。當然，本發(fā)明的化合物可以與其它公知的抗腫瘤劑一起使用。這樣的藥劑對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的。因此，本發(fā)明的化合物可以與所有常規(guī)的藥劑，尤其是其它的藥物一起給藥，尤其適合與腫瘤藥物聯(lián)用，既可以是單獨的藥劑，也可以是聯(lián)用的藥劑。它們可以單獨給藥或與其他藥物聯(lián)合給藥。
在一個優(yōu)選的方式中，本發(fā)明的化合物與其它公知的藥劑以約0.005-1的比例一起給藥。優(yōu)選的是，本發(fā)明的化合物與比例為0.05∶約0.5份的其它抗病毒劑以及最多為約1份的所述公知藥劑一起給藥。藥物組合物可以以材料的形式存在或作為與其它的材料，例如防腐劑、緩沖物質(zhì)、用于調(diào)整溶液滲透壓的試劑等一起的水溶液存在。
在一個優(yōu)選的方式中，藥劑還作為腫瘤形成后的疫苗或作為預防性的接種疫苗使用。有利地是，接種疫苗以這樣一種方式進行，即，在使用后，在生物體中能防止癌癥的擴散或形成。當然，也可以在腫瘤顯現(xiàn)之前或剛顯現(xiàn)之后立刻接種疫苗，或作為治療劑多次使用。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的事實是，腫瘤的治療在腫瘤形成轉(zhuǎn)移后的任何時間點進行都是有利的，因此本發(fā)明定義中的接種疫苗也可以是在腫瘤形成后的數(shù)周、數(shù)月、數(shù)年或數(shù)十年進行本發(fā)明藥劑的給藥。
本發(fā)明還涉及試劑盒及其在藥物中的用途。在優(yōu)選的方式中，將本發(fā)明的化合物或含有其的試劑盒用于聯(lián)合治療，尤其是用于治療腫瘤。在特別優(yōu)選的方式中，所述聯(lián)合治療包括化學治療、細胞生長繁殖抑制治療和/或放射治療。在本發(fā)明的一個特別優(yōu)選的實施方式中，聯(lián)合治療為輔助的生物特異性形式的治療，并且，在一個特別優(yōu)選的方式中，所述的治療方式是免疫治療。此外，在一個特別優(yōu)選的方式中，聯(lián)合治療包括包括基因治療和/或使用本發(fā)明化合物的治療。各種聯(lián)合治療，特別是用于腫瘤的治療對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是公知的。例如，在聯(lián)合治療的范圍中，可以設(shè)想使用細胞生長繁殖抑制劑的治療或例如對特定的腫瘤區(qū)域照射放射線，且使用本發(fā)明的化合物作為抗腫瘤劑，將該治療與基因治療結(jié)合。因此，將本發(fā)明的化合物用于提高腫瘤細胞對于細胞生長繁殖抑制劑和/或放射線的敏感性是特別優(yōu)選的。此外，根據(jù)本發(fā)明化合物優(yōu)選的用途是抑制細胞的活力、增殖速率和/或誘發(fā)程序性細胞死亡以及細胞循環(huán)停止。
在一個優(yōu)選實施方式中，被治療或避免的腫瘤疾病或癌癥選自耳-鼻-喉范圍的癌癥疾病或腫瘤疾病，肺、縱隔、胃腸道、泌尿生殖系統(tǒng)、婦科系統(tǒng)、乳房、內(nèi)分泌系統(tǒng)、皮膚、骨骼的腫瘤疾病，軟組織肉瘤、間皮瘤、黑瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的螯生物，在嬰兒期中的腫瘤疾病或癌癥，淋巴瘤，白血病，癌旁的綜合癥、無基本癌癥的轉(zhuǎn)移瘤(CUP-并發(fā)癥)、腹膜乳房癌素、惡性免疫缺陷和/或癌轉(zhuǎn)移瘤。
更具體地說，腫瘤可以包括下述類型的癌乳腺癌、前列腺癌和結(jié)腸癌；各種形式的在支氣管中開始的肺癌；骨髓癌、黑瘤、肝細胞瘤、神經(jīng)母細胞瘤；乳頭狀瘤；胺前體攝取脫羧細胞瘤、迷芽瘤、鰓原瘤；惡性癌癥-并發(fā)癥；癌癥-心臟疾病、癌(例如沃克癌、基礎(chǔ)細胞-癌、嗜鹼扁平細胞癌、Brown-Pearce癌、導管癌、埃爾利希癌、原位癌、癌-2癌、美克耳細胞癌、粘液性癌、非-小細胞支氣管癌、oat-細胞癌、乳頭狀癌、硬癌、細支氣管-小泡癌、小支氣管癌、鱗狀上皮細胞癌和過渡型細胞癌)；組織細胞功能性紊亂；白血病(例如涉及B-細胞白血病、總細胞白血病、中性細胞白血病、T-細胞白血病、慢性T-細胞白血病、HTLV-II-聯(lián)合白血病、急性淋巴囊腫白血病、慢性淋巴囊腫白血病、肥大細胞白血病和脊髓白血病)；惡性組織細胞增殖、霍奇金癌癥、非霍奇金淋巴瘤、單獨血漿細胞癌；網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞組織增殖、成軟骨細胞瘤；軟骨瘤、軟骨肉瘤；纖維瘤、纖維肉瘤；大細胞癌；組織細胞增殖；脂肪瘤、脂肪肉瘤；白血病性肉瘤；間皮瘤；粘液瘤；粘液肉瘤；骨瘤；骨皮瘤；尤因皮瘤；滑膜瘤；腺纖維瘤；腺淋巴瘤；癌肉瘤；脊索瘤、顱咽管瘤、無性細胞瘤、錯構(gòu)瘤、間質(zhì)瘤；中腎瘤；肌肉瘤、成釉細胞瘤、牙骨質(zhì)瘤；牙瘤；畸胎瘤；胸腺瘤、成絨(毛)膜細胞瘤；腺肌肉瘤、腺瘤；膽管瘤；珠光瘤；圓柱瘤；半胱胺加氧酶瘤、囊腺瘤；粒層細胞癌；兩性胚細胞瘤；汗腺腺瘤；島狀細胞瘤；Leydig細胞癌；乳突淋瘤；塞爾托利細胞癌、囊細胞癌、平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；成肌細胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；橫紋肌瘤；橫紋肌肉瘤；室管瘤；神經(jīng)節(jié)細胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤；成神經(jīng)管細胞瘤、腦(脊)膜瘤；神經(jīng)鞘瘤；成神經(jīng)細胞瘤；神經(jīng)上皮瘤、纖維神經(jīng)瘤、神經(jīng)瘤、副神經(jīng)節(jié)瘤、非嗜鉻副神經(jīng)節(jié)瘤、血管角質(zhì)瘤、嗜酸性的成血管淋巴增殖；硬化型血管瘤；血管肉瘤；血管球瘤；血管內(nèi)皮瘤；血管瘤；血管外皮細胞瘤、血管肉瘤；淋巴管瘤、淋巴管瘤、淋巴管肉瘤；松果體瘤；葉狀膀胱肉瘤；血管肉瘤；淋巴管肉瘤；多發(fā)性黏液瘤、卵巢瘤；肉瘤(例如尤因肉瘤、實驗、卡波濟氏肉瘤和肥大細胞肉瘤)；瘤(例如骨狀瘤、胸腔瘤、消化系統(tǒng)瘤、結(jié)腸直腸瘤、肝瘤、胰腺瘤、腦垂體瘤、睪丸瘤、眼眶瘤、頭部和頸部腫瘤、中央神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、耳部腫瘤、骨盆腫瘤、呼吸道腫瘤和泌尿生殖器腫瘤)；多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤和頸部平上皮結(jié)構(gòu)不良。
在另一個優(yōu)選的實施方式中，被治療和避免的腫瘤疾病或癌癥選自耳-鼻-喉范圍內(nèi)的腫瘤，包括內(nèi)鼻腔癌、鼻竇癌、鼻咽癌、唇癌、口腔癌、口咽癌、喉癌、下咽部癌、耳癌、唾液腺癌；神經(jīng)節(jié)細胞瘤；肺癌，包括非-小細胞支氣管癌、小細胞支氣管癌、縱隔癌；胃腸道癌，包括食道癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、膽囊癌和膽管癌、小腸癌、結(jié)腸和直腸癌以及肛門癌；泌尿生殖器癌，包括腎癌、輸尿管癌、膀胱癌、前列腺癌、尿道癌、陰莖和睪丸癌；婦科癌癥，包括子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、子宮癌、惡性滋養(yǎng)層疾病、卵巢癌、輸卵管癌(Tuba Faloppii)；腹腔癌，乳房癌，內(nèi)分泌器官癌，包括甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌，內(nèi)分泌胰腺癌、致癌性腫瘤和致癌性并發(fā)癥、多內(nèi)分泌瘤、骨肉瘤和軟組織肉瘤、間皮瘤、皮膚癌、黑素瘤，包括皮膚和皮內(nèi)黑素瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌；嬰兒期的癌癥，包括成視網(wǎng)膜細胞瘤、Wilms癌、膀胱癌、成神經(jīng)細胞瘤、尤因肉瘤癌癥族、橫紋肌肉瘤；淋巴瘤，包括非霍奇金淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基本淋巴瘤、霍奇金疾病；白血病，包括急性白血病、慢性白血病和淋巴組織白血病，血漿細胞瘤、骨髓塑料化綜合癥、瘤形成綜合癥、無基本癌癥的轉(zhuǎn)移瘤(CUP-并發(fā)癥)、peritoneale致癌性轉(zhuǎn)移瘤、免疫力缺陷相關(guān)的惡性腫瘤，包括AIDS相關(guān)的惡性腫瘤，如Kaposi肉瘤、與AIDS聯(lián)發(fā)的淋巴瘤、與AIDS聯(lián)發(fā)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤、與AIDS聯(lián)發(fā)的霍奇金疾病和與AIDS聯(lián)發(fā)的肛門和生殖器癌、移植相關(guān)的惡性腫瘤、轉(zhuǎn)移瘤性癌，包括腦部轉(zhuǎn)移瘤、肺部轉(zhuǎn)移瘤、肝部轉(zhuǎn)移瘤、骨轉(zhuǎn)移瘤、胸膜和心包轉(zhuǎn)移瘤以及惡性腹水。
在另一個優(yōu)選的實施方式中，被治療和避免的腫瘤疾病或癌癥選自乳房癌；胃腸癌，包括結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、小腸癌；卵巢癌；子宮頸癌；肺癌；前列腺癌；腎細胞癌和/和肝轉(zhuǎn)移瘤。
通過下述的實施例對本發(fā)明進行詳細的說明，但這些實施例不是用來限定本發(fā)明。
1、白屈菜堿乙酸酯的制備將1g白屈菜堿溶解在10ml的干吡啶中，加入2ml乙酸酐。接著在室溫下放置(24h)，將混合物倒入100ml冰水中，用乙醚萃取沉淀的粗產(chǎn)物，用水重復洗滌乙醚相。接著，在真空下移除溶劑，從乙醇重結(jié)晶剩余的粗產(chǎn)物。
產(chǎn)率0.9g(理論量的約85％)2、白屈菜堿酯的制備一般流程將300mg白屈菜堿溶解在30ml干氯仿中，加入1.2倍摩爾量的各自的酰基氯。
接著加入3ml吡啶，將反應混合物在室溫下放置過夜。
操作/提純
加入另外的100ml氯仿，然后用水洗滌有機相4-5次。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中移除溶劑，從乙醇重結(jié)晶殘留的粗產(chǎn)物1或2次(重結(jié)晶～-20℃)。
2.1白屈菜堿三氟乙酸酯的制備(A101)批量300mg白屈菜堿，380mg三氟乙酸酐產(chǎn)率300mg(理論量的81％)；m.p.＝140-42℃2.2白屈菜堿三氟甲基碳酸酯的制備(A102) 批量300mg白屈菜堿，270mg三氯甲基氯甲酸酯產(chǎn)率200mg(理論量的48.1％)；m.p.＝154-57℃2.3琥珀酸白屈菜堿甲基酯的制備(A103) 批量300mg白屈菜堿，300mg琥珀酸甲基酯氯化物產(chǎn)率200mg(理論量的52.9％)；m.p.＝84-85℃3.白屈菜堿乙基草酸酯的制備3.1用于與碳酰氯和酸酐反應的通常流程-稱量白屈菜堿一水合物和2倍摩爾量的相應羧酸氯或酸酐(過量10％)放入錐形瓶中。
-加入約10ml吡啶。
-振蕩反應批量并在室溫下放置3天。
-將混合物放入分液漏斗中，加入約20ml乙醚，然后用水洗滌5-6次。
-蒸發(fā)溶劑。
-提純反應
白屈菜堿一水合物(Fluka Ch425201/1)與草酸酯氯化物(Lancaster)的反應 白屈菜堿一水合物m.w.＝371.39g/mol草酸酯氯化物m.w.＝136.53g/mol白屈菜堿乙基草酸酯m.w.＝453.42g/molC24H23NO8產(chǎn)率25.9％(80.4mg)-起始重量0.3106g白屈菜堿一水合物和0.2805g草酸酯氯化物閃蒸色譜(在庚烷-乙醚混合物82v/v中的1％三乙胺)白屈菜堿乙基草酸酯(S2)的反應和制備在IR光譜和質(zhì)譜中示出(

圖1和2)。
4.N-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷4.1用于與異氰酸酯和異硫氰酸酯反應的通常流程-稱量白屈菜堿一水合物和2倍摩爾量的相應異氰酸酯或異硫氰酸酯(過量10％)放入單頸燒瓶中。
-加入約40ml乙腈。
-在回流下煮沸反應批量4小時。
-蒸發(fā)溶劑。
-提純。
反應白屈菜堿一水合物(Fluka Ch425201/1)與3-三氟甲基苯基異氰酸酯(Riedel-de Ha nAG)的反應
白屈菜堿一水合物m.w.＝371.39g/mol3-三氟甲基苯基異氰酸酯m.w.＝187.11g/molN-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷m.w.＝540.47g/mol，C28H23F3N2O6產(chǎn)率34.8％(104.4mg)-起始重量0.3001g白屈菜堿一水合物和0.3502g N-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷。
柱色譜(在庚烷-乙酸乙酯混合物83v/v中的5％CH2Cl2)-在甲苯中重結(jié)晶N-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷(S5)的制備通過IR光譜和質(zhì)譜示出(圖3和4)。
5.苯丙氨酸白屈菜堿酯的制備5.1用于與FMOC保護的氨基酸反應的一般流程-稱量白屈菜堿一水合物、等摩爾量的FMOC-保護的氨基酸和兩倍摩爾量氨基酸的二環(huán)己基碳化二亞胺(過量10％)放入單頸燒瓶中。
-加入約50ml乙酸乙酯。
-在室溫下攪拌反應批量3天。
-蒸發(fā)乙酸乙酯。
-移除二環(huán)己基脲；加入四氯化碳，加熱并熱過濾(殘渣為二環(huán)己基脲)。
-蒸發(fā)四氯化碳。
-移除保護性基團加入約4ml嗎啉并放置30分鐘。
-蒸發(fā)嗎啉。
-提純。
反應白屈菜堿一水合物(Fluka Ch425201/1)與N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-苯基丙氨酸(Aldrich)的反應 白屈菜堿一水合物m.w.＝371.39g/molN-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-苯基丙氨酸m.w.＝387.44g/mol二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)m.w.＝206.33g/mol苯基丙氨酸白屈菜堿酯m.w.＝500.52g/molC29H28N2O6產(chǎn)率41.1％(113.9mg)-起始重量0.277g白屈菜堿一水合物、0.2902g N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-苯基丙氨酸和0.3662g二環(huán)己基碳化二亞胺-閃蒸色譜(在庚烷-乙酸乙酯混合物73v/v中的1％三乙胺)苯基丙氨酸白屈菜堿酯(S9)的制備通過IR光譜和質(zhì)譜示出(圖5和6)。
6.脯氨酸白屈菜堿酯的制備6.1用于與FMOC保護的氨基酸反應的一般流程反應白屈菜堿一水合物(Fluka Ch425201/1)與N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-脯氨酸(Aldrich)的反應
白屈菜堿一水合物m.w.＝371.39g/molN-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-脯氨酸m.w.＝337.38g/mol二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)m.w.＝206.33g/mol脯氨酸白屈菜堿酯m.w.＝450.47g/mol，C25H26N2O6產(chǎn)率36.3％(101.3mg)-起始重量0.2789g白屈菜堿一水合物、0.2790g N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-脯氨酸和0.3705g二環(huán)己基碳化二亞胺-閃蒸色譜(在庚烷-乙酸乙酯混合物73v/v中的1％三乙胺)脯氨酸白屈菜堿酯(S10)的制備通過IR光譜和質(zhì)譜示出(圖7和8)。
7.丙氨酸白屈菜堿酯的制備7.1用于與FMOC保護的氨基酸反應的一般流程反應白屈菜堿一水合物(Fluka Ch425201/1)與N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-丙氨酸(Aldrich)的反應
白屈菜堿一水合物m.w.＝371.39g/molN-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-丙氨酸m.w.＝311.32g/mol二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)m.w.＝206.33g/mol丙氨酸白屈菜堿酯m.w.＝424.43g/mol，C23H24N2O6產(chǎn)率33.5％(101.0mg)-起始重量0.3015g白屈菜堿一水合物、0.2660g N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-丙氨酸和0.3698g二環(huán)己基碳化二亞胺-閃蒸色譜(在庚烷-乙酸乙酯混合物73v/v中的1％三乙胺)丙氨酸白屈菜堿酯(S11)的制備通過IR光譜和質(zhì)譜示出(圖9和10)。
在MTT細胞毒性試驗中獲得下述結(jié)果。這些數(shù)值是IC50值，單位是ng/ml。正如所看到的，白屈菜堿三氯甲基碳酸酯具有與天然的白屈菜堿類似的活性；與天然白屈菜堿相比，白屈菜堿三氟乙酸酯和白屈菜堿甲基琥珀酸酯分別具有大約高5倍(4-10倍)和大約高30倍(50-150倍)的活性。
權(quán)利要求
1.具有抗腫瘤效果的新型白屈菜堿衍生物，選自包括白屈菜堿乙酸酯、白屈菜堿三氟乙酸酯、白屈菜堿三氯甲基碳酸酯、白屈菜堿甲基琥珀酸酯、白屈菜堿乙基草酸酯、N-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷、苯丙氨酸白屈菜堿酯、脯氨酸白屈菜堿酯和/或丙氨酸白屈菜堿酯的一組物質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的白屈菜堿衍生物，其特征在于，所述的抗腫瘤效果是調(diào)節(jié)細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂。
3.含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的白屈菜堿衍生物的藥劑和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑，任選地與藥學可接受的載體、助劑和/或賦形劑聯(lián)用。
4.根據(jù)上述權(quán)利要求的藥劑，其特征在于，所述的載體選自填料、稀釋劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、溶解阻滯劑、吸收促進劑、浸潤劑、吸收劑和/或潤滑劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4中任一項的藥劑，其特征在于，所述的載體是脂質(zhì)體、siosome和/或niosome。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑在與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂相關(guān)的疾病的預防、治療、跟蹤控制、術(shù)后治療中的用途。
7.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的疾病是腫瘤疾病。
8.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的腫瘤疾病選自贅生腫瘤、發(fā)炎性腫瘤和/或膿腫、積液和水腫。
9.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的腫瘤是固態(tài)腫瘤或白血病。
10.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的固態(tài)腫瘤是泌尿生殖道和/或胃腸道的腫瘤。
11.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其特征在于，所述的腫瘤是結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、小腸癌、卵巢癌、子宮頸癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、腎細胞癌、腦部腫瘤、頭一喉腫瘤、肝癌和/或上述腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤。
12.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其特征在于，所述的固態(tài)腫瘤是乳腺、支氣管、結(jié)腸直腸和/或前列腺癌和/或上述腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤。
13.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其特征在于，所述的泌尿生殖道的腫瘤是膀胱癌和/或該腫瘤的轉(zhuǎn)移瘤。
14.根據(jù)權(quán)利要求6-13中任一項的用途，其特征在于，所述的跟蹤控制是對抗腫瘤治療效果的監(jiān)視。
15.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑被用于轉(zhuǎn)移、侵襲和/或血管生成的預防(prophylaxis)、防止(prevention)、診斷、弱化、治療、跟蹤控制和/或術(shù)后治療。
16.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的跟蹤控制是對抗腫瘤治療效果的監(jiān)視。
17.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑被用于聯(lián)合治療。
18.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的聯(lián)合治療包括化療、使用細胞生長繁殖抑制劑的治療和/或放射治療。
19.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的聯(lián)合治療包括輔助的、生物特異形式的治療。
20.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的治療形式是免疫治療。
21.根據(jù)上述任一權(quán)利要求在提高腫瘤細胞對細胞生長繁殖抑制劑和/或放射線敏感性的用途。
22.根據(jù)上述任一權(quán)利要求用于抑制細胞的生存能力、增殖速率以引發(fā)細胞死亡和/或細胞循環(huán)停止的用途。
23.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑被制備成凝膠、藥粉、粉末、片劑、緩釋片劑、預混物、乳液、液體配方、滴劑、濃縮液、顆粒、糖漿、小丸、大丸劑、膠囊、氣溶膠、噴霧劑和/或吸入劑，并以該形式使用。
24.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑在制劑中存在的濃度為0.1-99.5重量％，優(yōu)選為0.5-95.0重量％，更優(yōu)選為20.0-80.0重量％。
25.根據(jù)上述權(quán)利要求的用途，其特征在于，所述的制劑被口服、皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)和/或局部使用。
26.根據(jù)上述任一權(quán)利要求的用途，其特征在于，至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑以每24小時0.05-500mg/kg、優(yōu)選5-100mg/kg體重的總量使用。
27.根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物的制備方法，其特征在于，通過使白屈菜堿與吡啶和乙酸酐反應，得到白屈菜堿乙酸酯。
28.根據(jù)上述權(quán)利要求的方法，其特征在于，將白屈菜堿、吡啶和乙酸酐的混合物在室溫下培養(yǎng)至少12小時，隨后將該混合物倒入冰水中，使得粗產(chǎn)物沉淀，并用乙醚萃取該粗產(chǎn)物。
29.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其特征在于，通過使白屈菜堿與氯仿和相應的?；确磻?，向白屈菜堿、氯仿和相應的?；鹊幕旌衔镏屑尤脒拎?，在室溫下培養(yǎng)得到的混合物至少4小時，得到白屈菜堿三氟乙酸酯、白屈菜堿三氯甲基碳酸酯、和/或白屈菜堿甲基琥珀酸酯
30.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其特征在于，通過使白屈菜堿一磷酸酯與草酸酯氯化物反應，得到白屈菜堿乙基草酸酯。
31.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其特征在于，通過使白屈菜堿一水合物與3-三氟甲基苯基異氰酸酯反應，得到N-(3-三氟甲基苯基)白屈菜堿尿烷。
32.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其特征在于，通過使白屈菜堿一水合物與N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-苯丙氨酸反應，得到苯丙氨酸白屈菜堿酯。
33.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其特征在于，通過使白屈菜堿一水合物與N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-脯氨酸反應，得到脯氨酸白屈菜堿酯。
34.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其特征在于，通過使白屈菜堿一水合物與N-(9-芴基甲基氧基羰基)-L-丙氨酸反應，得到丙氨酸白屈菜堿酯。
35.治療腫瘤疾病的方法，其特征在于，將至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑與生物體接觸，優(yōu)選人類或動物。
36.根據(jù)上述權(quán)利要求的方法，其特征在于，所述的接觸通過口服、注射、局部、陰道、直腸和/或鼻進行。
37.用于治療腫瘤疾病的藥劑的制備方法，其特征在于，將至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑與藥學可接受的載體一起使用。
38.含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1或2的白屈菜堿衍生物和/或根據(jù)權(quán)利要求3-5中任一項的藥劑的試劑盒，任選地帶有用于將試劑盒成分組合的信息。
39.根據(jù)上述權(quán)利要求的試劑盒在預防或治療腫瘤疾病中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的白屈菜堿衍生物，其制備方法，所述化合物用于在與細胞生長、細胞分化和/或細胞分裂，尤其是癌癥相關(guān)的預防、治療、跟蹤控制、術(shù)后恢復治療中的用途，以及含有本發(fā)明白屈菜堿衍生物的試劑盒。
文檔編號A61P35/00GK1878775SQ200380110791
公開日2006年12月13日 申請日期2003年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月5日
發(fā)明者措澤·B.·扎拉馬 申請人:措澤·B.·扎拉馬