專利名稱：從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種釘螺殺滅劑，尤其是涉及一種從植物中提取的生物堿—白屈菜紅堿在殺滅血吸蟲中間宿主釘螺中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
血吸蟲病是流行于世界74個(gè)國家的人畜共患寄生蟲病，據(jù)WHO估計(jì)，全世界有6億人處于感染血吸蟲的危險(xiǎn)環(huán)境中，其中約2億人受到感染。中國的長江流域及其以南的12個(gè)省(市、自治區(qū))均有流行，全中國有434個(gè)流行縣，受感染威脅的人口6600余萬，慢性病人84萬，推算年新感染或再感染人數(shù)達(dá)20來萬，有螺面積384599.97h m2。消滅中間宿主—釘螺，控制和阻斷血吸蟲病的傳播是防治血吸蟲病的重要對策。
現(xiàn)有消滅釘螺的方法有改變環(huán)境滅螺法、物理滅螺法、生物滅螺法及化學(xué)殺滅劑滅螺法?；瘜W(xué)殺滅劑滅螺效果比較持久，可因地域確定使用范圍，是滅螺方法中使用較多的方法。目前，國內(nèi)外常用的化學(xué)殺滅劑滅螺法為化學(xué)化學(xué)殺滅劑滅螺。曾推廣使用的五氯酚鈉，殺螺效果好，價(jià)格低，但對人畜和水生動植物有嚴(yán)重危害，環(huán)境污染重，已被世界衛(wèi)生組織(WHO)禁止使用。氯硝柳胺是目前仍在使用的化學(xué)殺螺劑，藥效好，但釘螺接觸化學(xué)殺滅劑后明顯離水上爬，降低了殺螺效果，且價(jià)格昂貴，對非靶生物毒性大，影響該藥的推廣和應(yīng)用。WHO及我國始終致力于滅螺化學(xué)殺滅劑的研究，期望研制出殺螺效果好、毒性低、少污染、價(jià)低廉的殺螺劑。
植物殺螺劑因其來源廣、資源豐富、毒性低、易降解、污染小而備受關(guān)注。自1933年Archibald R.G首次報(bào)道Balanitaceae科的Balanites ageyptiace果實(shí)用以控制血吸蟲病以來，植物殺螺劑的研究受到高度重視。全世界已對1000多種植物的殺螺作用進(jìn)行了測試，篩選出近百種對螺類有殺滅和抑制作用的植物，并進(jìn)行了有效殺螺化學(xué)成分的分析。我國通過對500余種植物資源的研究，已發(fā)現(xiàn)有數(shù)十種植物對釘螺有強(qiáng)烈的毒殺作用，諸如油茶(Camellia)、赤桉(Euealyptus camldultensis)、異葉心桉(E.cordataf)、商陸(Phytolaccecandra)、黃果茄(Solanum xanthocarpum)、重樓(Rhigome paridis)、盾葉薯蕷(Dioscorea gingiberensis)、竹節(jié)香附(Anemone raddeana)、禾葉山麥冬(Liriope graminisolia)、檳榔(Areca catechu L.)等。已闡明了植物殺螺藥主要有效成分為皂甙、鞣質(zhì)、萘醌、烯基酚、黃酮、一萜、倍半萜、生物堿及呋喃香豆素等類化合物。含生物堿類植物具有殺螺作用已引起關(guān)注。文獻(xiàn)已報(bào)道的具有殺螺作用的生物堿，有從黃果茄中提取的甾體生物堿、喹嗪生物堿，從豆科植物calparnia aurea中提取的灌豆堿，從檳榔種子中提取的檳榔堿，從烏頭中提取的二萜生物堿，從麻風(fēng)樹種子中提取的麻風(fēng)樹堿。
雖然到目前為止尚未研究出一種較好的能推廣的植物性滅螺藥物，但植物殺螺劑資源豐富，具有可就地取材，易生物降解的優(yōu)點(diǎn)，使植物殺螺劑的研究仍備受關(guān)注。
從1993年開始，本發(fā)明者對血水草的殺滅釘螺及日本血吸蟲尾蚴的作用進(jìn)行了研究。血水草(Eomecon chionantha Hance)為罌粟科(Papaveraceae)白屈菜族(Chelidonium)血水草屬(Eomecon)植物，別名水黃蓮、廣扁線、捆仙繩、牛黃等，多年生草本植物，是我國獨(dú)屬、獨(dú)種的特有物種，野生資源豐富，廣泛分布于我國長江流域、華南、華東、西南地區(qū)，西北秦嶺也有分布，特別在長江中下游血吸蟲疫區(qū)分布廣泛，生長在山野、路旁、溪邊、林邊等較潮濕的泥土內(nèi)，取材容易。民間用于治療毒蛇咬傷、瘡癤、無名腫毒、急性結(jié)膜炎等。本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，從血水草根及根莖中提取的生物堿，稱血水草生物堿(Eomecon chiorantha Alkaloids，簡稱ECA)。ECA具有殺滅釘螺及日本血吸蟲尾蚴的作用，能抑制釘螺上爬，對魚類毒性較低。
研究發(fā)現(xiàn)，血水草生物堿含苯駢菲啶(Benzophenanthrdine)型生物堿，主要為白屈菜紅堿(Chelerythrine)、血根堿(Sanguinarine)及原阿片型生物堿原阿片堿(Protopine)、α-別隱品堿(α-allocyptopine)。
白屈菜紅堿還廣泛存在于其他罌粟科白屈菜族植物中，因而白屈菜紅堿也可從其他罌粟科植物提取。
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，白屈菜紅堿能治療哮喘、支氣管炎、痢疾等疾病，還具有鎮(zhèn)痛、護(hù)肝、抗腫瘤等作用，但迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)它有其它用途的文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種來源廣泛，價(jià)格較低，對環(huán)境污染少，殺螺效果好的釘螺殺滅劑。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的(1)白屈菜紅堿的提取秋季采新鮮血水草根及根莖洗凈晾干，完全干燥后碾成粗末，稱量，采用乙醇滲漉，減壓濃縮，酸水溶解，鹽析法提取白屈菜紅堿。
用高效液相色譜(HPLC)進(jìn)行白屈菜紅堿含量測定。
白屈菜紅堿結(jié)構(gòu)式為 分子式為C21H18NO4。
白屈菜紅堿也可從其他罌粟科植物，如博落回中提取。
(2)白屈菜紅堿在殺滅血吸蟲中間宿主釘螺中的應(yīng)用本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)，將白屈菜紅堿配制成濃度1.6-100.0mg/L的水溶液，浸泡釘螺96h，對釘螺的殺滅率可達(dá)44-100％；當(dāng)濃度為3.1mg/L時(shí)，殺螺率≥85％；當(dāng)濃度為6.3mg/L時(shí)，殺螺率≥88％；當(dāng)濃度為12.5mg/L時(shí)，殺滅率≥96％；當(dāng)濃度為25.0mg/L時(shí)，殺滅率為100％；當(dāng)白屈菜紅堿濃度為50mg/L時(shí)，釘螺浸泡72h，殺滅率即達(dá)100％；當(dāng)濃度＝100.0mg/L時(shí)，釘螺浸泡48h，殺滅率即可達(dá)100％。
本發(fā)明的有益效果白屈菜紅堿在低濃度下就有明顯殺滅釘螺的作用，這一發(fā)現(xiàn)，為殺滅血吸蟲中間宿主釘螺，預(yù)防血吸蟲病，提供了一種來源廣泛，價(jià)格較低，對環(huán)境污染少，殺螺效果好，具有重要開發(fā)和應(yīng)用前景的殺螺劑；同時(shí)，有利于血水草及其他含有同類生物堿植物的開發(fā)利用，并可提供供化學(xué)合成的分子結(jié)構(gòu)，為化學(xué)合成同類殺螺劑奠定基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
按WHO“殺螺劑實(shí)驗(yàn)室終篩方法”中規(guī)定的浸泡法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室白屈菜紅堿殺滅釘螺試驗(yàn)。樣品白屈菜紅堿含量為98％。
(1)將白屈菜紅堿配制成不同濃度水溶液8組(濃度分別為100.0mg/L、50.0mg/L、25.0mg/L、12.5mg/L、6.25mg/L、3.125mg/L、1.5625mg/L、0.78125mg/L)，每組2000ml。設(shè)去氯水空白對照；
(2)前1日從流行區(qū)采回釘螺，試驗(yàn)當(dāng)日選用活釘螺，按50只為一組裝入特制尼龍袋中；(3)每500ml溶液中投入釘螺1袋(即1只釘螺/10ml藥液)，每組濃度樣品溶液放入釘螺4袋，置25℃培養(yǎng)箱中，恒溫下，24h、48h、72h、96h每組各取出1袋螺，去氯水清洗2次，置室溫下72h；(4)用水測法及敲擊法鑒定每只釘螺的死活，并記錄，計(jì)算每組釘螺的死亡數(shù)及死亡率。
試驗(yàn)表明，白屈菜紅堿可抑制釘螺上爬，其殺螺試驗(yàn)效果如下表所示。
白屈菜紅堿浸殺釘螺試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

注1、每組釘螺數(shù)均為50只；2、“釘螺死亡數(shù)及死亡率”欄中，每一浸泡時(shí)間欄的左小欄數(shù)字為釘螺死亡絕對數(shù)，右小欄數(shù)字為死亡百分?jǐn)?shù)。
應(yīng)用BL-New Century(USB版本)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，使用Bliss法計(jì)算得出釘螺浸泡24h，LC50為42.43222213mg/L，95％可信限為30.21641-59.58659mg/L；釘螺浸泡48h，LC50為7.800626700mg/L，95％可信限為6.568344-9.264096mg/L；釘螺浸泡72h，LC50為3.419651595mg/L，95％可信限為2.880072-4.060320mg/L；釘螺浸泡96h，LC50為1.893746861mg/L，95％可信限為1.598336-2.243755mg/L。
以上試驗(yàn)結(jié)果表明，在低濃度下，白屈菜紅堿就有明顯殺滅釘螺的作用。當(dāng)其水溶液濃度分別為100.0mg/L、50.0mg/L、25.0mg/L，釘螺各浸泡48h、72h、96h，殺滅率均可達(dá)100％。
權(quán)利要求
1.從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用，其特征在于，所述白屈菜紅堿殺滅釘螺的水溶液濃度≥3.1mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用，其特征在于，所述白屈菜紅堿殺滅釘螺的水溶液濃度≥6.3mg/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用，其特征在于，所述白屈菜紅堿殺滅釘螺的水溶液濃度≥12.5mg/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用，其特征在于，所述白屈菜紅堿殺滅釘螺的水溶液濃度≥25.0mg/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用，其特征在于，所述白屈菜紅堿殺滅釘螺的水溶液濃度≥50.0mg/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用，其特征在于，所述白屈菜紅堿殺滅釘螺的水溶液濃度≥100.0mg/L。
全文摘要
從植物中提取的白屈菜紅堿殺滅釘螺的應(yīng)用。將白屈菜紅堿配制成濃度1.5－100.0mg/L的水溶液，浸泡釘螺96h，對釘螺的殺滅率可達(dá)44－100％；當(dāng)濃度為3.1mg/L時(shí)，殺螺率≥85％；當(dāng)濃度為6.3mg/L時(shí)，殺螺率≥88％；當(dāng)濃度為12.5mg/L時(shí)，殺滅率≥96％；當(dāng)濃度為25.0mg/L時(shí)，殺滅率為100％；當(dāng)白屈菜紅堿濃度為50mg/L時(shí)，釘螺浸泡72h，殺滅率即達(dá)100％；當(dāng)濃度＝100.0mg/L時(shí)，釘螺浸泡48h，殺滅率即可達(dá)100％。本發(fā)明的有益效果白屈菜紅堿來源廣泛，價(jià)格較低，在低濃度下就有明顯殺滅釘螺的作用，而對人畜和水生有益動物毒性低，對環(huán)境污染少，為殺滅血吸蟲中間宿主釘螺，預(yù)防血吸蟲病感染，提供了一種具有重要開發(fā)和應(yīng)用前景的化學(xué)殺滅劑。
文檔編號A01P9/00GK101069510SQ20071003518
公開日2007年11月14日 申請日期2007年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月20日
發(fā)明者彭飛, 劉年猛, 孫慧, 劉銘, 黃瓊瑤 申請人:湖南師范大學(xué)