專利名稱：一種用活體螺旋藻制備螺旋藻多肽粉的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用活體螺旋藻制備螺旋藻多肽粉的方法。
背景技術(shù)：
螺旋藻體內(nèi)優(yōu)質(zhì)高蛋白含量高達(dá)60 70%，是魚類的3倍，是肉類的4倍，是雞蛋 的5倍多，而葉綠素含量是蔬菜的10倍多。此外，維生素B3的含量大約是大豆的6. 4倍；β-胡蘿卜素大約是普通胡蘿卜中含量的4倍；螺旋藻中大約含有11種脂肪酸，其中的亞油酸和亞麻酸都是人體必需脂肪酸；螺旋藻含有人和動物必需的常量和微量元素，不但含有大量的鐵，而且可以與蛋白質(zhì)和藻藍(lán)素螯合形成有機(jī)鐵，因而有利于被吸收利用；同時(shí)螺旋藻具有富集硒、鋅、碘的能力。螺旋藻是一種理想的營養(yǎng)保健品，市場前景美好。目前螺旋藻的應(yīng)用存在如下問題其一，螺旋藻有較濃的腥味，口味較差。其二，為增強(qiáng)吸收，螺旋藻通常要制備成螺旋藻多肽，目前制備螺旋藻多肽通常是使用螺旋藻干粉加水配制成懸濁液，再用生物酶工程技術(shù)水解螺旋藻蛋白制備螺旋藻多肽，但螺旋藻干粉活性成份已大量損失，使最終產(chǎn)品活性不足。其三，現(xiàn)有的一般生物酶工程技術(shù)水解螺旋藻蛋白制備螺旋藻多肽的方法酶解程度較低，有效酶解時(shí)間較短，提取率較低，原料浪費(fèi)嚴(yán)重?，F(xiàn)有技術(shù)中，CN101095458A所公開的螺旋藻多肽的制備方法，其包括了干粉配制溶液、中性蛋白酶脫腥、細(xì)胞破壁、酶法水解(纖維素酶和果膠酶、木瓜蛋白酶)、離心過濾、濃縮干燥等步驟，采用酶解(中性蛋白酶)和物理處理環(huán)糊精包裹)相結(jié)合的辦法進(jìn)行脫腥。另外，CN1204651A公開了螺旋藻多肽的制備方法及含有這些多肽的藥劑和應(yīng)用，所述方法使用螺旋藻干粉，在酸性、堿性或中性環(huán)鏡中借助鎂、鈣、磷、硒等離子水解催化，并結(jié)合多種水解蛋白酶以得到螺旋藻多肽。上述方法中均采用螺旋藻干粉為原料，選擇細(xì)胞破碎提取蛋白質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用活體螺旋藻制備螺旋藻多肽粉的方法，已解決現(xiàn)有的螺旋藻干粉提取螺旋藻多肽方法提取率低，成品多肽含量少，口味差的缺點(diǎn)。此方法提取率高，能有效的保持螺旋藻多肽產(chǎn)品的活性成分，同時(shí)此方法制備的螺旋藻多肽無腥味，口味較好。本方法相對于現(xiàn)有技術(shù)中螺旋藻多肽的制備方法的優(yōu)點(diǎn)在于(I)采用活體螺旋藻為原料制備螺旋藻多肽，比起現(xiàn)有技術(shù)采用螺旋藻干粉為原料，能增加最終產(chǎn)品的活性，并且在制備工藝上能減少前處理的步驟，提高生產(chǎn)效率；(2)在脫腥處理上，出乎意料的發(fā)現(xiàn)，采用風(fēng)味蛋白酶能很好的解決螺旋藻多肽腥味大及口味差的問題，比現(xiàn)有技術(shù)中采用酶解后再用環(huán)糊精包裹的技術(shù)更為簡便，更利于生產(chǎn)擴(kuò)大化；(3)選擇紅曲霉用于酶解螺旋藻，顯著延長酶解時(shí)間，使藻泥酶解充分，提高提取率。(4)選擇最優(yōu)的酶解方案，即通過堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、紅曲霉組合以提高螺旋藻多肽的水解度，并且通過試驗(yàn)確定了最優(yōu)的酶解試驗(yàn)的參數(shù)。本發(fā)明的技術(shù)方案如下(1)活體螺旋藻過濾清洗、浙水處理；將活體螺旋藻過濾清洗，調(diào)節(jié)pH后將藻泥進(jìn)行浙水處理，使藻泥的含水量達(dá)到小于 90%。(2)第一步酶解堿性蛋白酶； 將處理好的藻泥裝入反應(yīng)罐內(nèi)，加入堿性蛋白酶，完成第一步酶解反應(yīng)。(3)第二步酶解風(fēng)味蛋白酶；在第一步酶解完成后加入風(fēng)味蛋白酶，完成第二步酶解反應(yīng)。(4)第三步酶解紅曲霉；在第二步酶解完成后加入紅曲霉，完成第三步酶解反應(yīng)。(5)噴霧干燥。使用噴霧干燥塔噴霧干燥，所得即為活體螺旋藻多肽粉?，F(xiàn)有技術(shù)中評價(jià)螺旋藻多肽制備方法常采用的指標(biāo)是螺旋藻蛋白的水解度，本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)中螺旋藻多肽的制備方法的優(yōu)點(diǎn)除了提取率高，水解度高之外，由于采用活體螺旋藻為原料制備螺旋藻多肽，比起現(xiàn)有技術(shù)采用螺旋藻干粉為原料，能增加最終產(chǎn)品的活性。因此，本發(fā)明還引入螺旋藻多肽的活性的測定。(一)實(shí)驗(yàn)方法1、螺旋藻蛋白水解度的測定蛋白質(zhì)水解度的測定采用pH-stat法(Adler-Nissen, 1986),螺旋藻蛋白水解度(DH)以水解斷裂的肽鍵數(shù)目(h)占總鍵數(shù)目(htJ的百分?jǐn)?shù)來確定，即DH = h/htotX100%2、螺旋藻多肽的活性的測定螺旋藻中藻藍(lán)蛋白是一種具有生物活性功能的天然藻藍(lán)素蛋白，是螺旋藻中重要的活性物質(zhì)。因此，測定螺旋藻多肽中藻藍(lán)蛋白的含量能較好的反映螺旋藻多肽的活性。藻藍(lán)蛋白濃度的測定，參考[曲文娟等，鈍頂螺旋藻藍(lán)蛋白的脈沖超聲輔助提取技術(shù)，食品科學(xué)，2007年5期，135-138]中的方法，藻藍(lán)蛋白的特征吸收在620nm，異藻藍(lán)蛋白的特征吸收在650nm。提取液中藻藍(lán)蛋白濃度(C)按公式(I)計(jì)算C= (A620nm-O. 474A650nm)/5. 34, (mg/ml)3、不同酶解配方對螺旋藻蛋白水解度的影響酶法水解蛋白質(zhì)是目前獲得多肽的主要途徑，該方法優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約成本、產(chǎn)品安全性高、無副作用。水解用酶的選擇是生產(chǎn)螺旋藻多肽的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)選用了常見的商業(yè)化的蛋白酶及紅曲霉處理螺旋藻，均采用在35°C，水解60、90、120、180分鐘。本發(fā)明所用蛋白酶及紅曲霉均由市面上購得，蛋白酶包括堿性蛋白酶(酶活力為40萬U/g)、風(fēng)味蛋白酶(酶活力為I. 5萬U/g)、木瓜蛋白酶。結(jié)果見表I。表I不同酶解配方對螺旋藻蛋白水解度(DH(% ))的影響
權(quán)利要求
1.一種用活體螺旋藻制備螺旋藻活性多肽粉的方法，其特征在于選取活體螺旋藻，進(jìn)行以下各項(xiàng)操作步驟 (1)活體螺旋藻過濾清洗、浙水處理 將活體螺旋藻過濾清洗，調(diào)節(jié)PH后將藻泥進(jìn)行浙水處理，使藻泥的含水量達(dá)到小于90%, (2)第一步酶解 將處理好的藻泥裝入反應(yīng)罐內(nèi)，加入堿性蛋白酶，完成第一步酶解反應(yīng)， (3)第二步酶解 在第一步酶解完成后加入風(fēng)味蛋白酶，完成第二步酶解反應(yīng)， (4)第三步酶解 在第二步酶解完成后加入紅曲霉，完成第三步酶解反應(yīng)， (5)噴霧干燥 使用噴霧干燥塔噴霧干燥。
2.權(quán)利要求I所述的螺旋藻活性多肽粉的制備方法，其特征在于所述各項(xiàng)操作步驟為 (1)將活體螺旋藻過濾清洗，PH達(dá)到8.5時(shí)將藻泥進(jìn)行浙水處理，使藻泥的含水量小于90%, (2)將處理好的藻泥裝入反應(yīng)罐內(nèi)，加入堿性蛋白酶，酶活力為40萬U/g，按照質(zhì)量百分百計(jì)算，堿性蛋白酶為藻泥的O. 05%，進(jìn)行加溫、攪拌，酶解溫度為45-50°C，作用時(shí)間為70分鐘， (3)加入風(fēng)味蛋白酶，酶活力為I.5萬U/g，按照質(zhì)量百分百計(jì)算，風(fēng)味蛋白酶為藻泥的O.03%，進(jìn)行加溫、攪拌，酶解溫度為45-50°C，作用時(shí)間為60分鐘， (4)加入紅曲霉，按照質(zhì)量百分百計(jì)算，紅曲霉為藻泥的O.15%，溫度為45-50°C，作用時(shí)間為180分鐘， (5)使用噴霧干燥塔噴霧干燥。
全文摘要
一種用活體螺旋藻制備螺旋藻多肽粉的方法?，F(xiàn)有制備螺旋藻多肽通常是使用螺旋藻干粉加水配制成懸濁液，再用生物酶工程技術(shù)水解螺旋藻蛋白制備螺旋藻多肽，但螺旋藻干粉活性成份已大量損失，使最終產(chǎn)品活性不足，提取率低，不能消除螺旋藻的腥味。本發(fā)明采用活體螺旋藻為原料，通過堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、紅曲霉三步酶解法制備螺旋藻多肽粉，本發(fā)明具有提取率高，能有效的保持螺旋藻多肽產(chǎn)品的活性成分，制備的螺旋藻多肽無腥味，口味較好的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號A23J3/14GK102613384SQ20121011396
公開日2012年8月1日 申請日期2012年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月18日
發(fā)明者劉錦勝 申請人:劉錦勝