一種何首烏促進生根培養(yǎng)基及其配制方法
【技術領域】
[0001 ]本發(fā)明屬于何首烏組織培養(yǎng)技術領域，特別涉及一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，還 涉及一種何首烏促進生根培養(yǎng)基的配制方法。
【背景技術】
[0002] 何首烏，是寥科何首烏屬多年生纏繞藤本植物，塊根肥厚，長橢圓形，黑褐色，其塊 根入藥，可安神、養(yǎng)血、活絡、消癰，是常見的中藥材。
[0003] 目前組織培養(yǎng)是何首烏人工快速繁殖的常用手段之一，然而現有的組織培養(yǎng)技術 中何首烏出根培養(yǎng)的發(fā)根率不高，影響何首烏的組培快繁效率，同時因不能發(fā)根而造成大 量何首烏芽苗褐化死亡，浪費生產資源。

【發(fā)明內容】

[0004] 基于現有技術存在上述問題，本發(fā)明提供一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其以1/2 MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有NAA(萘乙酸）、KT(激動素）、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和 白砂糖，其具有發(fā)根率高、節(jié)約生產資源的優(yōu)點。
[0005] -種何首烏促進生根培養(yǎng)基，以1/2 MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有NAA(萘乙 酸）、ΚΤ(激動素）、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖。
[0006] 1/2 MS培養(yǎng)基為常規(guī)MS培養(yǎng)基大量元素濃度減少一半而制成，MS培養(yǎng)基為高鹽培 養(yǎng)基，采用1/2MS培養(yǎng)基可以降低無機鹽的濃度，更有利于促進何首烏芽發(fā)根。
[0007] 4(萘乙酸）的濃度為0.2-0.811^/1，1〇'(激動素）的濃度為0.1-0.6 11^/1，含鈰可 溶性化合物的濃度為〇.1-〇.211^，瓊脂粉的濃度為8~118/1，蔗糖的濃度為25~358/1。
[0008] NAA(萘乙酸）的濃度為0 · 3-0 · 7mg/L，KT(激動素）的濃度為0 · 2-0 · 4 mg/L，含鈰可 溶性化合物的濃度為0.14-0.1811^，瓊脂粉的濃度為9~1(^/1，鹿糖的濃度為28~338/1。
[0009] 所述的何首烏葉片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.3~6.6。
[0010] 所述的何首烏葉片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.4。
[0011] 所述的含鈰可溶性化合物是硝酸鈰，還可以是氧化鈰和氯化鈰，稀土元素鈰能促 調節(jié)細胞內酶的活性，促進細胞合成生物堿，調節(jié)細胞生長和分化，何首烏芽苗生根。
[0012] -種何首烏促進生根培養(yǎng)基的配制方法，其包括以下步驟： 步驟SlO溶解配制培養(yǎng)基：用蒸餾水溶解1/2 MS基礎培養(yǎng)基各成分，并添加 NAA(萘乙 酸）、KT(激動素）、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖； 步驟S20高溫滅菌:將步驟SlO配制好的培養(yǎng)基放于高壓滅菌鍋中，于120~121°C高溫滅 菌20~21分鐘，冷卻凝固。
[0013] 步驟SlO還包括步驟SI 1調節(jié)pH值:使用HCL和KOH滴定調節(jié)培養(yǎng)基pH值至6.4。
【具體實施方式】
[0014] 實施例一:配制何首烏促進生根培養(yǎng)基。
[0015] 根據表1所示的1/2 MS培養(yǎng)基配方以及表2所示的何首烏促進生根培養(yǎng)基配方，配 制本發(fā)明所述的何首烏促進生根培養(yǎng)基。
[0016] 用天平稱取1/2 MS培養(yǎng)基中的各成分以及NAA(萘乙酸）、KT(激動素）、含鈰可溶性 化合物、瓊脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入適量蒸餾水，攪拌溶解，并調節(jié)PH值至6.4,定 容至1000mL。將三角瓶封口，置于高壓滅菌鍋中，于121°C滅菌20min，然后置于超凈工作臺 中自然冷卻，備用。
[00Π ]將冷卻到50-60°C時將培養(yǎng)基分裝至組織培養(yǎng)瓶中，晾涼，待其凝固后將組織培養(yǎng) 瓶封口，備用。
[0018] 表1 1/2 MS培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0019] 表2何首烏促進生根培養(yǎng)基的成分及其用量。
[0020]實施例二:本發(fā)明所述的何首烏促進生根培養(yǎng)基的測試 根據表1所示的1/2 MS培養(yǎng)基配方以及表3所示的何首烏促進生根培養(yǎng)基配方，參照實 施例一所述的培養(yǎng)基制備方法，分別配制各試驗組、對照組的何首烏促進生根培養(yǎng)基。
[0021 ]表3何首烏促進生根培養(yǎng)基。
[0022] 在超凈工作臺中選取生長正常、無褐化的何首烏叢生芽，將叢生芽取出，用無菌手 術刀將叢生芽分割成單芽，并將生長良好、無褐化、強壯的單芽接種于表3所示各試驗組、對 照組的培養(yǎng)基中，然后于光暗周期為12h光照/12h黑暗、光照強度為20001UX、溫度為25±2 °C的條件下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)20天后統計何首烏芽發(fā)根率和平均單株發(fā)根數。
[0023] 表4何首烏促進生根養(yǎng)基測試結果。
[0024]由表4所示的結果得知，稀土元素鈰對何首烏生根起這巨大的促進作用，可以將發(fā) 根率提高到90%以上，同時單株發(fā)根數也提高到5條以上，可以大大提高何首烏移栽成活率。 另外從試驗組2、6、7與其他實驗組的結果得知，稀土元素鈰的使用量對何首烏生根促進作 用有影響，使用濃度太高不會取得更好的促進效果，反而會起抑制作用。
【主權項】
1. 一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，以1/2 MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有 NAA(萘乙酸）、KT(激動素）、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖。2. 根據權利要求1所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，所述的1/2 MS培養(yǎng) 基為常規(guī)MS培養(yǎng)基大量元素濃度減少一半而制成。3. 根據權利要求1所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，NAA(萘乙酸）的濃 度為0.2-0.8mg/L，KT(激動素）的濃度為0.1-0.6 mg/L，含鈰可溶性化合物的濃度為0.1-〇.2mM，瓊脂粉的濃度為8~llg/L，蔗糖的濃度為25~35g/L。4. 根據權利要求2所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，NAA(萘乙酸）的濃 度為0.3-0.7mg/L，KT(激動素）的濃度為0.2-0.4mg/L，含鈰可溶性化合物的濃度為0.14- 0.18mM，瓊脂粉的濃度為9~10g/L，蔗糖的濃度為28~33g/L。5. 根據權利要求1至3的其中之一所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，所 述的何首烏葉片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.3~6.6。6. 根據權利要求4的所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，所述的何首烏葉 片誘導培養(yǎng)基的pH值為6.4。7. 根據權利要求1至3的其中之一所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，其特征在于，所 述的含鈰可溶性化合物是硝酸鈰，還可以是氧化鈰和氯化鈰。8. -種何首烏促進生根培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于，其包括以下步驟： 步驟S10溶解配制培養(yǎng)基：用蒸餾水溶解1/2 MS基礎培養(yǎng)基各成分，并添加 NAA(萘乙 酸）、KT(激動素）、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖； 步驟S20高溫滅菌:將步驟S10配制好的培養(yǎng)基放于高壓滅菌鍋中，于120~121°C高溫滅 菌20~21分鐘，冷卻凝固。9. 根據權利要求7所述的一種何首烏促進生根培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于，所述的 步驟S10還包括步驟SI 1調節(jié)pH值:使用HCL和K0H滴定調節(jié)培養(yǎng)基pH值至6.4。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種何首烏促進生根培養(yǎng)基，屬于何首烏組織培養(yǎng)技術領域，該培養(yǎng)基以1/2？MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，并添加有NAA（萘乙酸）、KT（激動素）、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖，其具有發(fā)根率高、節(jié)約生產資源的優(yōu)點。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN105519438
【申請?zhí)枴緾N201610011325
【發(fā)明人】何志鏗
【申請人】佛山市金藍領教育科技有限公司
【公開日】2016年4月27日
【申請日】2016年1月9日