本發(fā)明屬于中藥技術領域，涉及中藥的檢測方法，尤其是癃清制劑的質量控制方法。

背景技術：

癃清片是目前市場上銷售的一種清熱解毒，涼血通淋的中藥。用于下焦?jié)駸崴碌臒崃?，癥見尿頻、尿急、尿痛、腰痛、小腹墜脹。臨床藥效學實驗研究證明，癃清片適宜于治療老年人泌尿系統(tǒng)感染，有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛作用，用于治療泌尿系統(tǒng)感染的有效中成藥。

本發(fā)明治療尿路感染及前列腺炎的藥物(癃清片)具有明確地抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、利尿、改善微循環(huán)、增強機體免疫的作用。其組方中金銀花、黃柏、黃連、敗醬草、白花蛇舌草清熱解毒；赤芍、丹皮、仙鶴草散瘀涼血；澤瀉、車前子利水通淋。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部公開癃清片的處方和制法為：以上十味，澤瀉粉碎成細粉，過篩，備用；白花蛇舌草、仙鶴草、金銀花、敗醬草加水煎煮二次，每次1小時，濾過，合并濾液，濾液濃縮成相對密度為1.25～1.30（50℃）的清膏；其余車前子等五味用60%乙醇加熱回流三次，第一次3小時，第二次2小時，第三次1小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮成相對密度為1.25～1.30（50℃）的清膏。與上述清膏合并，加入澤瀉細粉及輔料適量，混勻，制粒，干燥，壓制成1000片，或包薄膜衣，即得。每片0.6g。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部“癃清片”品種項下的檢測指標包括：鑒別項下包括澤瀉顯微鑒別，鹽酸小檗堿、丹皮酚、芍藥苷薄層色譜鑒別；含量測定項下包括鹽酸小檗堿的液相色譜測定。

《中華人民共和國藥典》2015年版一部增補版“癃清膠囊” 品種項下的檢測指標包括：鑒別項下包括澤瀉顯微鑒別，黃連、黃柏、鹽酸小檗堿、丹皮酚、芍藥苷、金銀花、綠原酸薄層色譜鑒別；含量測定項下包括鹽酸小檗堿、鹽酸黃柏堿的液相色譜測定。

據文獻記載[張曉靜,劉德福,丁菲菲,田華,鄧雁如,郭利平. HPLC法測定癃清片中表小檗堿、黃連堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿和丹皮酚[J]. 現代藥物與臨床,2015,05:527-530.]，采用HPLC法同時測定癃清片中表小檗堿、黃連堿、鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿、丹皮酚6種成分。

上述處方中有金銀花藥材，市場上經常有以價格較低的山銀花替代金銀花的現象，因此，有必要對制劑中的金銀花與山銀花進行區(qū)別鑒定。

技術實現要素：

（1）本發(fā)明的目的在于提供一種能夠定性檢測一種清熱解毒涼血通淋藥物的質量控制方法，本方法具有檢測手段簡單、檢測結果更加準確的特點。

（2）本發(fā)明具體的技術方案

一種癃清制劑中山銀花的薄層色譜方法，由如下步驟組成。

對照品溶液的制備；取灰氈毛忍冬皂苷乙0.5-1mg，川續(xù)斷皂苷乙0.5-1mg，分別加甲醇1-2ml溶解，制成對照品溶液。

供試品溶液的制備；取癃清片20片，研細，取粉末2-5g，各加甲醇30ml，超聲或回流處理20min-50min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，加鹽酸使呈酸性，過濾，濾液用氫氧化鈉溶液調至pH值至7，用水飽和正丁醇萃取2次，每次30ml，加氨試液30ml洗滌，正丁醇蒸干，殘渣加甲醇溶解并定容至2ml，制得供試品溶液。

對照藥材溶液制備：取山銀花對照藥材0.5-1g，各加甲醇10ml，制備方法同供試品，制得對照藥材溶液。

薄層色譜條件：采用薄層色譜進行鑒別，色譜條件為：以三氯甲烷-甲醇-水（5：3：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點清晰，日光下檢視。

（3）本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果是：

本發(fā)明在癃清制劑在原標準基礎上，建立了山銀花的薄層鑒別方法，篩選出重現性好、專屬性強、斑點顯色清晰、結果易判斷的方法納入標準中修訂后的質量標準，提高了藥品的質量控制，使藥品的定性檢測更加準確，質量更加容易控制。

下面結合附圖和具體實施方式對本發(fā)明做詳細說明，并非對發(fā)明的限制。凡依照本發(fā)明公開內容進行的本領域等同替換，均屬于本發(fā)明的保護范圍。

附圖說明

圖1為本發(fā)明山銀花的薄層鑒別色譜圖，其中從左至右為山銀花對照藥材、川續(xù)斷皂苷乙、毛氈毛忍冬皂苷乙、金銀花對照藥材、癃清片樣品、自制癃清片樣品、自制含山銀花癃清片樣品。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的說明。

實施例1

一、材料

供試品：癃清片，天津中新藥業(yè)集團股份有限公司隆順榕制藥廠，批號：151208。

對照品：灰氈毛忍冬皂苷乙對照品，中國食品藥品檢定研究院，批號

111814-201102；

川續(xù)斷皂苷乙對照品，中國食品藥品檢定研究院，批號111813-201001。

對照藥材：金銀花對照藥材，中國食品藥品檢定研究院，批號121060-200805；

山銀花對照藥材，中國食品藥品檢定研究院，批號121595-201001。

自制癃清片樣品：按照藥典公布的處方與工藝，制備癃清片樣品。

自制含山銀花癃清片樣品：按照藥典公布的處方與工藝，將金銀花替換為山銀花，制備癃清片樣品。

二、測定

(1)對照品溶液的制備；取灰氈毛忍冬皂苷乙0.5mg，川續(xù)斷皂苷乙0.5mg，分別加甲醇1ml溶解，制成對照品溶液。

(2)供試品溶液的制備；取癃清片20片，研細，取粉末2g，加甲醇30ml，超聲或回流處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，加鹽酸使呈酸性，過濾，濾液用氫氧化鈉溶液調至pH值至7，用水飽和正丁醇萃取2次，每次30ml，加氨試液30ml洗滌，正丁醇蒸干，殘渣加甲醇溶解并定容至2ml，制得供試品溶液。

（3）對照藥材溶液制備：取金銀花對照藥材與山銀花對照藥材各0.5g，各加甲醇10ml，制備方法同供試品，制得對照藥材溶液。

（4）自制癃清片樣品溶液制備：取自制癃清片樣品20片，同供試品溶液制備方法制備自制癃清片樣品溶液。

（5）自制含山銀花癃清片樣品溶液制備：取自制含山銀花癃清片樣品20片，同供試品溶液制備方法制備自制含山銀花癃清片樣品溶液。

(6)采用薄層色譜進行鑒別，色譜條件為：以三氯甲烷-甲醇-水（5：3：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點清晰，日光下檢視。

（7）結果判定：供試品溶液色譜圖與山銀花對照藥材、灰氈毛忍冬皂苷乙對照品、川續(xù)斷皂苷乙對照品比較，如在相應位置顯相同顏色斑點，說明制劑中含有山銀花。

三、結果

癃清片供試品與自制癃清片樣品溶液色譜圖與山銀花對照藥材、灰氈毛忍冬皂苷乙對照品、川續(xù)斷皂苷乙對照品比較，癃清片與山銀花最上面的一個斑點以及川續(xù)斷皂苷乙斑點對應位置顯相同顏色斑點，說明制劑中不含有山銀花；自制含山銀花癃清片樣品溶液色譜圖與山銀花對照藥材、灰氈毛忍冬皂苷乙對照品、川續(xù)斷皂苷乙對照品比較，在相應位置顯相同顏色斑點，說明制劑中含有山銀花。