用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種分析方法，尤其是涉及用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：該方法為于150mL燒瓶中加入碘鹽、碳酸氫鹽或碳酸鹽、酸、乙醇及水，之后加入待測(cè)青蒿素樣品，加熱反應(yīng)并冷卻后，利用全自動(dòng)電位滴定儀以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定并計(jì)算樣品含量即可；本發(fā)明方法簡(jiǎn)單、成本低廉、不需要使用大型儀器即可準(zhǔn)確測(cè)定青蒿素含量。
【專利說明】用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種分析方法，尤其是涉及用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法。

【背景技術(shù)】
[0002] 如圖1所示青蒿素是一種含有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯，于上個(gè)世紀(jì)70年代由我國科 學(xué)家從黃花蒿中分離出的一種活性單體成分，在治療腦型瘧、惡性瘧、間日瘧等疾病方面具 有高效、低毒、速效、使用安全等優(yōu)點(diǎn)。盡管目前單一使用青蒿素類藥物已經(jīng)使得瘧原蟲產(chǎn) 生抗藥性，基于青蒿素類藥物的聯(lián)合療法仍然是WHO推薦的針對(duì)瘧疾的首選療法，其中青 蒿素類藥物仍然作為治療瘧疾的重要藥物之一。從80年代中期開始，國內(nèi)研宄人員在青蒿 素的基礎(chǔ)上又相繼成功研發(fā)出青蒿琥酯、蒿甲醚和雙氫青蒿素等新藥，但這些新藥都是以 青蒿素為原料半合成制得，因此，青蒿素作為青蒿素類抗瘧藥物的原料，在抗瘧藥物的生產(chǎn) 中有著重要的作用。
[0003] 因此，針對(duì)青蒿素類藥物的含量測(cè)定方法研宄也得到了廣泛的關(guān)注，并開發(fā)出了 一系列的青蒿素等藥物含量測(cè)定方法，如TLC法，堿處理后紫外可見分光光度測(cè)定法，GC， HPLC-CD，HPLC-UV，HPLC-ELSD，HPLC-MS等。其中，高效液相色譜法是通用的青蒿素類藥物 的含量測(cè)定方法，堿處理后紫外可見分光光度測(cè)定法也常用于青蒿素和青蒿琥酯的含量測(cè) 定，這兩種方法也是《中國藥典》收錄的含量測(cè)定方法。
[0004] 堿處理后紫外可見分光光度測(cè)定法目前主要用于青蒿素的含量測(cè)定。其通常的操 作步驟為，通過使用NaOH處理青蒿素乙醇溶液30分鐘，使青蒿素反應(yīng)生成在292nm波長 處有明顯吸收的衍生物，對(duì)衍生物在292nm波長處的吸光度進(jìn)行測(cè)量并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì) 算出相應(yīng)的青蒿素含量。該方法操作簡(jiǎn)單，使用的儀器-紫外可見光譜儀也較為普遍。但 是，在實(shí)際測(cè)量中，特別是測(cè)定復(fù)方制劑中青蒿素類藥品或者植物提取液中的青蒿素的含 量時(shí)，往往會(huì)因?yàn)槠渌s質(zhì)在292nm波長處的背景干擾而導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。
[0005] 高效液相色譜法（HPLC-UV/HPLC-DAD)是目前廣泛使用的青蒿素類藥物含量測(cè)定 方法之一，《中國藥典》中通常將樣品溶解后直接進(jìn)樣，以外標(biāo)法測(cè)定青蒿素類藥物的含量。 需要注意的是，在測(cè)定青蒿素類藥品與其他藥品制成的復(fù)方藥物中或植物提取物中的青蒿 素含量時(shí)，雖都可以采用HPLC法，但由于樣品中雜質(zhì)的干擾，使得一些分析方法不能直接 使用，需要進(jìn)行衍生化處理后進(jìn)行測(cè)定。比如，在測(cè)定黃花蒿藥材中青蒿素的含量時(shí)，由于 青蒿素最大吸收波長在205nm左右，提取物中的其他成分比較復(fù)雜，使得直接使用紫外檢 測(cè)器（UV或DAD)檢測(cè)器測(cè)定會(huì)有一定干擾，需將青蒿素類藥品進(jìn)行柱前衍生化，然后再進(jìn) 行測(cè)定。青蒿素與堿反應(yīng)后生成292nm處有吸收的物質(zhì)，之后將其在pH5.6-6. 0定量轉(zhuǎn)化 為最大吸收波長在260nm處有吸收的物質(zhì)，再使用HPLC進(jìn)行測(cè)定。不對(duì)青蒿素進(jìn)行衍生化 也可以使用其它檢測(cè)器直接測(cè)定，如蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD)，質(zhì)譜（MS)等。HPLC法準(zhǔn)確 可靠、重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)，可廣泛用于青蒿素類藥物原料、制劑及生物樣品分析。但由于使 用HPLC-UV法進(jìn)行含量測(cè)定復(fù)雜樣品時(shí)常需對(duì)樣品進(jìn)行柱前衍生化處理，以排除干擾，而 使用MS，ELSD等檢測(cè)器則較為昂貴。而且，HPLC檢測(cè)耗時(shí)長，單個(gè)樣品檢測(cè)時(shí)間通常在10 分鐘以上，使用的甲醇、乙腈等HPLC級(jí)試劑及色譜柱等耗材價(jià)格較貴，從而使得HPLC法檢 測(cè)青蒿素類藥物成本較高。
[0006] 雖然目前青蒿素類藥物的含量測(cè)定有很多方法。但是目前所使用的測(cè)定青蒿素類 藥物含量的方法有的儀器昂貴、有的使用成本很高、有的樣品處理方法復(fù)雜、有的結(jié)果誤差 較大，往往不能滿足生產(chǎn)、科研中需要快速、簡(jiǎn)單、成本低廉并能夠測(cè)定大量樣品時(shí)的需要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的主要是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種方法簡(jiǎn)單、成本低廉、不需要 使用大型儀器即可準(zhǔn)確測(cè)定青蒿素含量的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法。
[0008] 本發(fā)明通過如下方式實(shí)現(xiàn)：
[0009] 一種用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：該方法為于150mL燒瓶中 加入碘鹽、碳酸氫鹽或碳酸鹽、酸、乙醇及水，之后加入待測(cè)青蒿素樣品，加熱反應(yīng)并冷卻 后，利用全自動(dòng)電位滴定儀以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定并計(jì)算樣品含量即可；
[0010] 所述碘鹽為碘化鉀或碘化鈉，用量為樣品中青蒿素物質(zhì)的量的5-10倍；
[0011] 所述碳酸氫鹽及碳酸鹽為碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀中的任意一種，用 量為IO-IOOOmg;
[0012] 所述酸為硫酸或鹽酸；
[0013] 所述加熱溫度為O-KKTC;
[0014] 所述加熱時(shí)間為0-24小時(shí)；
[0015] 所述實(shí)驗(yàn)所用使用儀器為電位滴定儀，儀器中采用電極為氧化還原電極。
[0016] 本發(fā)明具有如下效果：
[0017] 1)方法簡(jiǎn)單：本發(fā)明的原理青蒿素中過氧橋與碘離子定量反應(yīng)生成單質(zhì)碘，使用 全自動(dòng)電位滴定儀以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定反應(yīng)產(chǎn)生的單質(zhì)碘，依據(jù)消耗的硫代硫酸鈉 標(biāo)準(zhǔn)溶液體積計(jì)算青蒿素含量，實(shí)驗(yàn)原理為氧化還原滴定。通過以下公式計(jì)算得出樣品中 青蒿素的含量。m(樣品中青蒿素質(zhì)量）=(N*V*282. 33)/2,其中，N為Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的 物質(zhì)的量濃度，V為消耗Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，282. 33為青蒿素的分子量。在《藥學(xué)通 報(bào)》1980年15卷第8期中，朱漢松在"青蒿素的滴定分析法" 一文中報(bào)道了利用電位滴定 儀測(cè)定青蒿素含量的方法。但該方法是用NaOH溶液水解青蒿素，再通過標(biāo)準(zhǔn)HCl溶液利用 酸堿滴定測(cè)定剩余NaOH含量，計(jì)算水解反應(yīng)所消耗NaOH含量，進(jìn)而計(jì)算青蒿素含量。該方 法為酸堿滴定法，在實(shí)驗(yàn)原理及實(shí)驗(yàn)方法上與本專利中涉及內(nèi)容有很大的差異。
[0018] 2)成本低廉、不需要使用大型儀器即可準(zhǔn)確測(cè)定青蒿素含量：本發(fā)明提供的方法 的具體步驟為于150mL燒瓶中加入碘鹽、碳酸氫鹽（或碳酸鹽）、酸、乙醇及水，之后加入待 測(cè)青蒿素樣品。加熱反應(yīng)并冷卻后，利用全自動(dòng)電位滴定儀以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定并 計(jì)算樣品含量；該方法成本低廉，只需使用硫代硫酸鈉等常用分析純化學(xué)試劑，價(jià)格便宜同 時(shí)所需的化學(xué)試劑均為分析常用試劑，容易購買獲得；操作簡(jiǎn)單快捷，能夠在較短時(shí)間內(nèi)測(cè) 定樣品中青蒿素含量。實(shí)驗(yàn)只需全自動(dòng)電位滴定儀，該儀器價(jià)格便宜，利于普及，同時(shí)滴定 精度較傳統(tǒng)手工滴定法精度高，由儀器自動(dòng)控制，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。
[0019] 3)本發(fā)明提供的方法能夠快速、簡(jiǎn)單、成本低廉并能夠測(cè)定大量青蒿素類藥物含 量的方法不但能夠有利于青蒿素類藥物生產(chǎn)及銷售過程中的質(zhì)量控制，而且在青蒿素的品 種選育、藥材收購及提取等過程中具有很重要的應(yīng)用價(jià)值。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020] 圖1為青蒿素結(jié)構(gòu)式；
[0021] 圖2為青蒿素標(biāo)準(zhǔn)曲線。

【具體實(shí)施方式】
[0022] 實(shí)例一、不同反應(yīng)時(shí)間下，測(cè)定青蒿素含量：
[0023] 取含量為98%的青蒿素，0. 3g碘化鉀及50mg碳酸氫鈉，加入2mL20%硫酸，IOmL 乙醇及IOmL水，70 °C反應(yīng)，之后將其冷卻。在瑞士萬通905型全自動(dòng)電位滴定儀上利用 0.lmol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。結(jié)果如下表所示：
[0024] 表1反應(yīng)時(shí)間15min
[0025]
[0026]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：該方法為于150mL燒瓶中加 入碘鹽、碳酸氫鹽或碳酸鹽、酸、乙醇及水，之后加入待測(cè)青蒿素樣品，加熱反應(yīng)并冷卻后， 利用全自動(dòng)電位滴定儀以硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定并計(jì)算樣品含量即可。
2. 如權(quán)利要求1所述的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述碘鹽為 碘化鉀或碘化鈉，用量為樣品中青蒿素物質(zhì)的量的5-10倍。
3. 如權(quán)利要求1所述的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述碳酸氫 鹽及碳酸鹽為碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀中的任意一種，用量為l〇-l〇〇〇mg。
4. 如權(quán)利要求1所述的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述酸為硫 酸或鹽酸。
5. 如權(quán)利要求1所述的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述加熱溫 度為 0-100 °c。
6. 如權(quán)利要求1所述的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述加熱時(shí) 間為0-24小時(shí)。
7. 如權(quán)利要求1所述的用于測(cè)定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述實(shí)驗(yàn)所 用使用儀器為電位滴定儀，儀器中采用電極為氧化還原電極。
【文檔編號(hào)】G01N27/42GK104483369SQ201410755798
【公開日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年12月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月10日
【發(fā)明者】黃宇, 樊艷茹, 張霞, 陳靖, 馮軍 申請(qǐng)人:寧夏醫(yī)科大學(xué)