一種檢測(cè)生物硫化氫的偶氮類熒光探針及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種檢測(cè)生物硫化氫的熒光探針，其熒光發(fā)射波長(zhǎng)>500nm，本發(fā)明的熒光探針穩(wěn)定性好，能夠長(zhǎng)期保存使用；能夠有效避免來(lái)自生物大分子背景熒光的干擾；本身無(wú)熒光，只有在與H2S反應(yīng)后才有熒光，因此，檢測(cè)信噪比高，靈敏度好；具有優(yōu)秀的選擇性，能在復(fù)雜生物樣品中特異性地檢測(cè)H2S；具有良好的生物膜通透性，能用于活細(xì)胞中生物硫化氫的特異性檢測(cè)。本發(fā)明的熒光探針結(jié)構(gòu)式為。
【專利說(shuō)明】一種檢測(cè)生物硫化氫的偶氮類熒光探針及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬生物檢測(cè)領(lǐng)域，涉及一種檢測(cè)生物硫化氫的熒光探針及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]硫化氫(H2S)，是一種無(wú)色、易燃、具有臭雞蛋氣味的氣體，長(zhǎng)期以來(lái)被認(rèn)為是有毒物質(zhì)。但近期的研究表明，哺乳動(dòng)物可在H2S合成酶的催化作用下以高半胱氨酸或半胱氨酸為原料合成少量的H2S，并利用它作為信號(hào)分子調(diào)控血管舒張、炎癥反應(yīng)、葡萄糖代謝等生理過程。H2S是繼N0、C0后第三個(gè)被發(fā)現(xiàn)的氣體信使。它可以通過打開血管平滑肌中的ATP敏感性鉀離子通道而擴(kuò)張血管，從而達(dá)到降血壓的效果。H2S還具有促血管生成、血管重塑、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗血小板凝聚等心血管保護(hù)作用，并對(duì)心臟、腎臟等器官的缺血一再灌注損傷具有保護(hù)作用。在炎癥反應(yīng)中，H2S可通過抑制NF-κ B的激活而下調(diào)許多促炎癥基因(如iN0S、C0X-2等)及炎癥細(xì)胞分子、粘附分子的水平。哺乳動(dòng)物體內(nèi)H2S的合成障礙將導(dǎo)致阿爾海默癥、高血壓、糖尿病等疾病。目前，對(duì)H2S生理功能及作用機(jī)制的研究正在進(jìn)一步進(jìn)行中，而H2S釋放劑也被作為具有潛在治療效果的藥物受到廣泛關(guān)注。因而，發(fā)展快速、靈敏、簡(jiǎn)便的檢測(cè)生物H2S的方法不僅對(duì)H2S的功能研究具有巨大的推動(dòng)作用，同時(shí)也是篩選具有潛在治療意義的H2S供體分子所必需的技術(shù)手段。
[0003]傳統(tǒng)的檢測(cè)H2S的方法包括分光光度法及電化學(xué)法。但這兩種方法的檢測(cè)誤差較大，而且只能測(cè)定血漿或組織勻漿中的H2S,不能用于測(cè)定細(xì)胞甚至活體組織中的H2S。熒光探針檢測(cè)法是近兩年來(lái)發(fā)展起來(lái)的新方法。該方法利用H2S的還原性或親核性，設(shè)計(jì)可與H2S特異性反應(yīng)的熒光探針，這些熒光探針本身無(wú)熒光，與H2S反應(yīng)后可生成具有強(qiáng)熒光的產(chǎn)物，因而可用于生物H2S的靈敏檢測(cè)。由于小分子熒光探針具有體積小、生物膜通透性良好的優(yōu)點(diǎn)，因而熒光探針法除適用于檢測(cè)血漿、組織勻漿中的H2S,還適用于活細(xì)胞甚至是動(dòng)物組織中H2S的檢測(cè)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)生物硫化氫的偶氮類熒光探針，是一種新型的特異性檢測(cè)生物硫化氫(H2S)的小分子熒光探針，該熒光探針本身在生理環(huán)境中無(wú)熒光，但可與H2S特異性快速反應(yīng)，生成具有強(qiáng)熒光的產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)H2S的特異性檢。所述熒光探針的熒光發(fā)射波長(zhǎng)>500nm，具有式(I)所示的結(jié)構(gòu):
【權(quán)利要求】
1.一種檢測(cè)生物硫化氫的偶氮類熒光探針，其特征在于，該探針的熒光發(fā)射波長(zhǎng)>500nm，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為:
2.根據(jù)權(quán)利要求 1所述的偶氮類熒光探針在檢測(cè)生物硫化氫中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK104031637SQ201410285548
【公開日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年6月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月24日
【發(fā)明者】李新, 胡永洲, 程娟 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)