藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)的試劑盒，本發(fā)明還公開了使用該試劑盒檢測(cè)的方法。當(dāng)患者血漿、抗體釋放液和相應(yīng)的藥物致敏紅細(xì)胞發(fā)生陽性反應(yīng)，與未致敏的紅細(xì)胞發(fā)生陰性反應(yīng)；或?qū)⑺幬锾砑拥窖獫{中，血漿或抗體釋放液中的藥物抗體與正常紅細(xì)胞產(chǎn)生陽性反應(yīng)，而未添加藥物的血漿或放散液與正常紅細(xì)胞產(chǎn)生陰性反應(yīng)。根據(jù)結(jié)果準(zhǔn)確診斷出引起溶血性貧血的藥物種類，指導(dǎo)臨床正確選擇合適的藥物用于對(duì)患者的治療。該方法具有準(zhǔn)確性好，適用于試管法或微柱凝膠卡法檢測(cè)。
【專利說明】藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物檢測(cè)領(lǐng)域，尤其是涉及藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，本發(fā)明還涉及使用該試劑盒檢測(cè)藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著藥物品種的大量增加，尤其是抗生素類在臨床的大量使用，使得藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血病例大量增加，由于免疫因素從而引起紅細(xì)胞大量破壞，臨床上出現(xiàn)貧血、黃疸、醬油色尿等溶血表現(xiàn)，輕則影響治療效果，重則延誤病情危及患者生命安全。
[0003]如何避免患者因使用藥物而導(dǎo)致藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血，就必須要對(duì)患者進(jìn)行藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血進(jìn)行及時(shí)準(zhǔn)確的檢測(cè)，停止使用能使患者產(chǎn)生藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的藥物，指導(dǎo)臨床為患者選擇合適的藥物，來提高治療效果。
[0004]目前，對(duì)于藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)在臨床均未得到有效開展。其原因是藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)屬于免疫血液學(xué)檢測(cè)范圍，而免疫血液學(xué)檢測(cè)僅在臨床醫(yī)院的輸血科或血庫(kù)進(jìn)行，輸血科或血庫(kù)僅負(fù)責(zé)輸血前檢查的內(nèi)容，均未開展藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)工作，因此對(duì)于藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血患者不能得到及時(shí)的檢測(cè)診斷，導(dǎo)致患者致死率高達(dá)30%以上。
[0005]藥物有時(shí)會(huì)引起對(duì)藥物本身的抗體形成，形成的藥物抗體可以致敏或吸附在患者紅細(xì)胞上，導(dǎo)致患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性，引起患者紅細(xì)胞破壞，產(chǎn)生免疫性溶血，患者血色素下降。結(jié)果是:1、治療患者所使用的藥物療效被降低或抑制。2、患者因藥物誘導(dǎo)的溶血導(dǎo)致貧血。
[0006]為了避免因藥物引起的溶血性貧血，提高藥物的治療效果，需要對(duì)藥物引起的溶血性貧血進(jìn)行血清學(xué)檢查，以確定是哪種藥物引起的溶血性貧血，來指導(dǎo)臨床正確選擇合適的藥物用于對(duì)患者的治療。
[0007]目前檢測(cè)藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血尚無檢測(cè)試劑盒，也沒有能檢測(cè)免疫性溶血性貧血究竟是那種藥物引起的檢測(cè)試劑。本發(fā)明用于檢測(cè)確認(rèn)藥物引起患者溶血性貧血的藥物種類，指導(dǎo)臨床正確選擇合適的藥物用于對(duì)患者的治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的在于提供檢測(cè)藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的試劑盒，使用該試劑盒可以準(zhǔn)確判斷出是哪種藥物引起的溶血性貧血；本發(fā)明還公開了使用該試劑盒的使用方法，該方法準(zhǔn)確性好，適用于試管法或微柱凝膠卡法檢測(cè)。
[0009]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明可采用下述技術(shù)方案:
本發(fā)明所述的檢測(cè)藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的試劑盒，包括藥物稀釋液、抗體釋放試劑和抗體篩查試劑。對(duì)于直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血患者，利用血清學(xué)方法確認(rèn)是何種藥物導(dǎo)致的溶血性貧血。藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血患者血漿或抗體釋放液中的藥物抗體與其相應(yīng)的藥物致敏的紅細(xì)胞可以發(fā)生陽性反應(yīng)，而與未致敏的紅細(xì)胞發(fā)生陰性反應(yīng)；或在藥物添加到血漿或抗體釋放液中條件下，血漿或抗體釋放液中的藥物抗體與正常紅細(xì)胞產(chǎn)生陽性反應(yīng)，而未添加藥物的血漿或放散液與正常紅細(xì)胞產(chǎn)生陰性反應(yīng)。采用患者近期使用的藥物制備藥物致敏紅細(xì)胞檢測(cè)患者血漿中相應(yīng)的抗體；將藥物添加到血漿或放散液中，檢測(cè)患者血漿、放散液中相應(yīng)的抗體。確定藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血是哪種藥物引起的溶血性貧血，來指導(dǎo)臨床正確選擇合適的藥物用于對(duì)患者的治療，并為臨床選擇合適的藥物用于治療提供依據(jù)。
[0010]所述藥物稀釋液包括巴比妥緩沖液、磷酸鹽緩沖液和牛血清白蛋白溶液。
[0011]所述抗體篩查試劑為廣譜抗人球蛋白試劑，即抗IgG和抗C3d。
[0012]所述藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)分別使用藥物致敏紅細(xì)胞和酶處理紅細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。
[0013]所述抗體釋放試劑是將抗體從紅細(xì)胞上解離的試劑，即放散洗脫試劑。
[0014]所述抗體釋放試劑為熱放散試劑、檸檬酸放散試劑、氯仿/三氯乙烯放散試劑、二甲苯放散試劑、甘氨酸-鹽酸/乙二胺四乙酸二鈉放散試劑中的一種或幾種。
[0015]所述的酶處理紅細(xì)胞為菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、無花果酶處理的紅細(xì)胞中的一種或幾種。
[0016]本發(fā)明試劑盒的檢測(cè)方法，包括下述步驟: 第一步，選擇正常人O型紅細(xì)胞，患者近期使用的藥物制備藥物致敏紅細(xì)胞；
第二步，使用抗體釋放試劑將結(jié)合在紅細(xì)胞膜表面的抗體釋放下來，制備抗體釋放
液；
第三步，使用藥物致敏紅細(xì)胞進(jìn)行藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的檢測(cè)；
第四步，使用酶處理的正常人O型紅細(xì)胞進(jìn)行藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的檢測(cè)。
[0017]本發(fā)明的目的在于通過試管法或微柱凝膠卡法檢測(cè)藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血，當(dāng)結(jié)果符合表1和表2時(shí)可以確定是該藥物引起的溶血性貧血。
[0018]表1使用藥物致敏紅細(xì)胞進(jìn)行藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的檢測(cè)結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:它包括藥物稀釋液、抗體釋放試劑和抗體篩查試劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述藥物稀釋液包括巴比妥緩沖液、磷酸鹽緩沖液和牛血清白蛋白溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述抗體篩查試劑為廣譜抗人球蛋白試劑，即抗IgG和抗C3d。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)分別使用藥物致敏紅細(xì)胞和酶處理紅細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述抗體釋放試劑是將抗體從紅細(xì)胞上解離的試劑，即放散洗脫試劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述抗體釋放試劑為熱放散試劑、檸檬酸放散試劑、氯仿/三氯乙烯放散試劑、二甲苯放散試劑、甘氨酸-鹽酸/乙二胺四乙酸二鈉放散試劑中的一種或幾種。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述的酶處理紅細(xì)胞為菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、無花果酶處理的紅細(xì)胞中的一種或幾種。
8.使用權(quán)利要求1所述的藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)方法，其特征在于，所述方法包括下述步驟: 第一步，選擇正常人O型紅細(xì)胞，患者近期使用的藥物制備藥物致敏紅細(xì)胞； 第二步，使用抗體釋放試劑將結(jié)合在紅細(xì)胞膜表面的抗體釋放下來，制備抗體釋放液； 第三步，使用藥物致敏紅細(xì)胞進(jìn)行藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的檢測(cè)； 第四步，使用酶處理的正常人O型紅細(xì)胞進(jìn)行藥物誘導(dǎo)型溶血性貧血的檢測(cè)。
【文檔編號(hào)】G01N33/68GK103675297SQ201310674565
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月13日
【發(fā)明者】周珍禎, 陳芳芳 申請(qǐng)人:江蘇中濟(jì)萬泰生物醫(yī)藥有限公司