本發(fā)明涉及一種適用于進行離子交換色譜的組合物。更確切地說，本發(fā)明涉及一種改良組合物和用于制備離子交換組合物的方法，其中樹脂載體粒子經(jīng)由分散劑材料不可逆地連接到細樹脂分層粒子。本發(fā)明組合物可以用于常規(guī)柱色譜中，但最尤其適合高效液相色譜。

背景技術(shù)：

一般來說，離子交換色譜采用管柱。這些管柱填充有樹脂，樹脂常常呈具有吸附活性表面或已涂有吸附活性物質(zhì)的表面的顆粒形式。

在本領(lǐng)域中普遍認為，極佳的色譜載體由多個離散粒子組成，這些粒子形狀規(guī)則，優(yōu)選是球形，表面含大量表層淺孔。為了使管柱給出可再現(xiàn)的色譜結(jié)果，載體粒子理想地應該表面規(guī)則并且其表面特征是可容易再現(xiàn)的。

用于執(zhí)行液相色譜分析的材料是已知的，其中僅色譜載體材料的薄外表面可用于與液體介質(zhì)主動地交換離子。舉例來說，Small等人在美國專利第4,101,460號(1978)中描述了離子交換組合物的制備和用途，所述離子交換組合物包含組分A，一種至少在可用表面上具有離子交換位點的不可溶合成樹脂襯底，并且具有組分B，一種不可逆地連接著的細粉狀不可溶材料。

在以上現(xiàn)有技術(shù)靜電方法中，樹脂載體粒子通常通過懸浮聚合工藝形成。在樹脂載體粒子的聚合過程中經(jīng)常使用分散劑材料以在產(chǎn)生粒子時維持粒子在反應溶液中分開，防止所要大小的粒子彼此粘住和形成更大的聚集粒子。然后通過使樹脂載體粒子在室溫下暴露于濃硫酸中持續(xù)幾分鐘而使所述粒子略微磺化。此操作使得在樹脂載體粒子的表面上產(chǎn)生了非常薄的一層磺酸鹽位點并且允許如胺化乳膠珠粒等細樹脂分層粒子的靜電連接。

因此，在以上現(xiàn)有技術(shù)靜電方法中，有必要通過至少在細分層粒子的表面形成正電荷或負電荷，從而使那些粒子官能化，以便靜電連接。此操作通過使乳膠衍生粒子胺化或磺化來進行。如果乳膠胺化，那么樹脂載體粒子磺化。在乳膠磺化的情況下，樹脂載體粒子胺化。然后使乳膠和載體粒子彼此接觸，促使一層單珠粒膠乳粒子靜電連接到樹脂載體粒子的表面。這產(chǎn)生了薄膜陰離子交換或薄膜陽離子交換樹脂珠粒。

Barretto等人的美國專利第5,532,279號(“'279專利”)在第1-3欄中描述了各種用于制造這類離子交換組分B粒子以靜電方式分層在組分A粒子上的聚集物的現(xiàn)有技術(shù)方法。此外，它描述了一種離子交換組合物，所述離子交換組合物包含合成樹脂載體粒子、能夠使載體粒子懸浮在水性介質(zhì)中以抑制或防止聚集的分散劑以及細合成樹脂分層粒子。所述復合物可以通過使合適的分散劑與單體在所述單體不可溶的水溶液中接觸來形成。在適合懸浮聚合的條件下，單體將聚合形成樹脂載體粒子，其中分散劑不可逆地連接到那些粒子。分散劑是通過共價鍵結(jié)或永久性物理纏結(jié)而不可逆地連接到合成樹脂載體粒子的。分散劑還通過共價鍵結(jié)或通過靜電力連接到細分層粒子。結(jié)果是形成了載體粒子-分散劑-分層粒子復合物。

'279專利披露，離子交換組合物可以通過形成分散劑不可逆地連接到載體粒子的合成樹脂載體粒子-分散劑復合物制成。然后可以使所述復合物以含水漿料形式與細樹脂分層粒子在適合形成樹脂分層粒子不可逆地連接到分散劑的樹脂載體粒子-分散劑-樹脂分層粒子復合物的條件下混合。實際上，分散劑在載體粒子與分層粒子之間形成了不可逆的橋。分散劑不可逆地連接到樹脂載體粒子。分散劑含有離子官能團或可能具反應性的官能團，這些官能團可以通過另外的化學過程在載體粒子聚合之后采用。'279專利中所述類型的離子交換組合物由賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)以商品名稱OmniPac^TM出售，包括OmniPac^TM PAX-100、OmniPac^TM PAX-500、OmniPac^TM PCX-100和OmniPac^TM PCX-500管柱。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

在本發(fā)明的一個實施例中，提供一種用于制造適用于離子交換色譜的離子交換組合物的方法。所述方法包含以下步驟：形成中性乙烯基聚合物載體粒子不可逆地結(jié)合到分散劑的第一復合物。分散劑具有可電離位點，所述可電離位點在中性pH下不電離并且在強堿性或強酸性條件下電離。

在強堿性或強酸性條件下，在所述復合物與細分層粒子的含水漿料之間形成混合物，在細分層粒子的表面上用離子交換位點官能化，使得分散劑包括已電離位點。使分散劑的已電離位點靜電結(jié)合到細粒子離子交換位點的一部分，產(chǎn)生載體粒子-分散劑-細分層粒子復合物。

在本發(fā)明的另一個實施例中，形成一種適用于離子交換色譜的離子交換組合物。中性乙烯基聚合物載體粒子不可逆地結(jié)合到具有可電離位點的分散劑，所述可電離位點在中性pH下不電離并且在強酸性或強堿性條件下電離。細分層粒子用離子交換位點使其表面官能化?？呻婋x位點的一部分電離并且靜電結(jié)合到細分層粒子離子交換位點的一部分，產(chǎn)生載體粒子-分散劑-細分層粒子復合物。

附圖說明

圖1展示使用現(xiàn)有技術(shù)CarboPac^TM PA20 3×150mm管柱分離的色譜圖，其中首先使載體粒子的表面磺化以產(chǎn)生負表面，帶正電荷的膠乳粒子靜電連接到所述負表面。

圖2展示使用根據(jù)本發(fā)明的管柱的色譜圖。

圖3展示使用根據(jù)本發(fā)明的管柱的色譜圖。

圖4展示使用根據(jù)本發(fā)明的管柱的色譜圖。

圖5展示使用根據(jù)本發(fā)明的管柱的色譜圖。

圖6展示使用根據(jù)本發(fā)明的管柱的色譜圖。

圖7是比較根據(jù)本發(fā)明在各種pH下聚集的管柱的運行時間的表格。

圖8A到圖8D是比較根據(jù)本發(fā)明在各種pH水平下聚集的管柱的運行時間的圖表。

圖9A和圖9B是比較根據(jù)本發(fā)明在各種pH水平下聚集的管柱的運行時間的圖表。

具體實施方式

本發(fā)明的離子交換組合物包括中性乙烯基聚合物(例如合成樹脂)載體粒子、能夠使載體粒子懸浮在水性介質(zhì)中以抑制或防止聚集的分散劑以及細合成樹脂分層粒子。分散劑通過共價鍵結(jié)或通過永久性纏結(jié)或通過這兩者而不可逆地連接到載體粒子，并且還靜電連接到分層粒子。

中性乙烯基聚合物載體粒子可以由任何可與特定相關(guān)分散劑反應的合成樹脂材料形成，如通過引用并入的'279專利中所述。舉例來說，以下是合適的：合成聚合物樹脂，如聚(苯酚-甲醛)、聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸、苯乙烯于聚乙烯或聚丙烯上的接枝聚合物；聚-(芳乙烯)樹脂，如由苯乙烯、α-甲基苯乙烯、乙烯基甲苯、苯乙烯和類似不飽和單體、單亞乙烯基單體以及共聚物衍生的那些聚-(芳乙烯)樹脂。本發(fā)明的中性乙烯基載體粒子(如'279專利中的那些)是“中性”的，也就是說不包括可供靜電連接的離子交換位點，如美國專利第4,101,468號。

本發(fā)明的載體粒子可以通過眾所周知的懸浮聚合技術(shù)形成，這種技術(shù)涉及使單體小液滴懸浮在其不可溶的水性介質(zhì)中，如'279專利中所述。因此，樹脂載體粒子可以包含交聯(lián)聚合物或共聚物珠粒，如含有以重量計介于約2％到約100％之間的二乙烯基苯單體的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。在其最優(yōu)選實施例中，苯乙烯-二乙烯基苯共聚物含有以重量計介于約25％到約80％之間的二乙烯基苯單體。

本發(fā)明的細分層粒子可以由合成聚合物(例如樹脂)形成，所述合成聚合物經(jīng)過選擇以適當?shù)剡B接到特定分散劑材料并且不可逆地連接到分散劑的一個或多個官能團。優(yōu)選地，分層粒子通過乳液聚合形成并且將衍生自不可溶于其將接觸的溶劑中的單體混合物。聚合可以通過常規(guī)乳液聚合技術(shù)進行，如通過在合適的乳化劑存在下，加熱并攪拌單體于合適溶劑中的懸浮液?；蛘?，聚合可以通過懸浮法、本體法或溶液法進行，然后通過如球磨機、棒磨機等機械構(gòu)件將樹脂研磨到所要大小。

細樹脂分層粒子可以由任何眾所周知的合成離子交換樹脂形成，如結(jié)合上文所述和'279專利中的合成樹脂載體粒子所述。優(yōu)選地，分層粒子將由交聯(lián)聚合物形成。分層粒子可以適當?shù)赜删?芳乙烯)樹脂形成，所述聚(芳乙烯)樹脂如以下共聚物：苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、二乙烯基苯-乙烯基苯甲基氯共聚物或甲基丙烯酸酯-乙烯基苯甲基氯共聚物。分層粒子可以選自用于形成用作陽離子交換或陰離子交換組合物的聚集物的已知分層粒子中的任一種，如'279專利中所披露。

分層粒子可以衍生自乳膠乳液。在一個優(yōu)選實施例中，分層粒子包含含有以重量計約0.25％到約100％的交聯(lián)單體的交聯(lián)聚合物或共聚物。在其最優(yōu)選實施例中，分層粒子包含含有以重量計介于約1％到約5％之間的交聯(lián)單體的交聯(lián)聚合物或共聚物。

優(yōu)選地，分層粒子的中值直徑介于0.002到0.08微米范圍內(nèi)，同時載體粒子與分層粒子的中值直徑比介于100:1與5,000:1之間的范圍內(nèi)，如Pohl(1983)的美國專利第4,376,047號中所述。

本發(fā)明的分散劑材料經(jīng)過優(yōu)選地選擇，使得其含有將不可逆地連接到載體粒子和分層粒子的官能位點。分散劑抑制或防止在懸浮期間在用于聚合的水性介質(zhì)中聚集。在一個最優(yōu)選的實施例中，分散劑包含以重量計介于約0.1％到約25％之間的分散劑于水中。

分散劑具有可電離位點，所述可電離位點在中性pH下不電離并且在強堿性或強酸性條件下電離。因此，分散劑不包括在中性pH下電離的離子位點(如磺酸鹽)。舉例來說，為了制造陰離子交換組合物，分散劑可以是醇，優(yōu)選地聚乙烯醇，其在中性pH下不電離，但其在強堿性條件下去質(zhì)子化，從而形成離子交換位點，所述離子交換位點在分層粒子連接到載體粒子上的分散劑期間靜電結(jié)合到分層粒子上帶相反電荷的離子交換位點，從而形成產(chǎn)生本發(fā)明的載體粒子-分散劑-細分層粒子離子交換組合物。

分散劑與載體粒子的不可逆連接可以通過共價鍵結(jié)或永久性物理連接完成，如通過引用并入的'279專利的第6欄第3-54行中所闡述。

如本文所用的術(shù)語“不可逆地連接”意指大多數(shù)分散劑粒子將不會因為強電解質(zhì)溶液或如在使用本發(fā)明的新穎組合物使液體通過離子交換床時形成的剪切力而從與樹脂載體粒子或樹脂分層粒子的連接中移開。如本文所用的“不可逆地連接”包括分散劑通過共價鍵結(jié)或永久性纏結(jié)連接到樹脂載體粒子。如本文所用的“不可逆地連接”還包括分散劑通過連接時的靜電力連接到細樹脂分層粒子。即使在將pH調(diào)整到分散劑不再電離的pH之后，細分層粒子仍然保持連接。假設即使在分散劑不再處于電離狀態(tài)時細分層粒子仍然保持連接是歸因于以下事實：在由靜電引力所致的連接過程期間，聚合物分散劑和細分層粒子變成永久性纏結(jié)?！安豢赡孢B接”不包括單獨的物理吸附。

所述復合物和其形成模式與'279專利的復合物和其形成模式的顯著差異是細分層粒子與分散劑的不可逆連接模式。如上文所闡述，聚乙烯醇是用于制造陰離子交換組合物的優(yōu)選分散劑。還可以使用其它分散劑，如聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯膠或聚丙烯酰胺，只要其包括在中性pH條件下不電離并且在強堿性或強酸性條件下去質(zhì)子化或質(zhì)子化并因此電離的位點即可。

形成離子交換復合物的方法包括形成如上文所闡述的載體粒子不可逆地結(jié)合到分散劑的復合物。將這種復合物與細分層粒子的含水漿料混合，所述細分層粒子含有帶有與已電離分散劑位點的電荷相反的電荷的離子交換位點。關(guān)于使用聚乙烯醇的陰離子交換組合物，分層粒子上的離子交換位點是堿性的，并且不可逆地靜電結(jié)合到去質(zhì)子化聚乙烯醇分散劑。分層粒子表面上的合適的離子交換位點包括三甲基季銨、二甲基乙醇季銨和甲基二乙醇季銨離子交換位點。用于陰離子交換組合物的優(yōu)選分層粒子是羥基處于β位或γ位的季胺。

關(guān)于醇分散劑，合適的強堿性條件是pH至少12，優(yōu)選地至少12.5到14.0。在分層粒子聚集期間，pH越高，電離的醇位點的數(shù)量越多。優(yōu)選地，分散劑的已電離位點靜電結(jié)合到大部分(例如超過10％)的細粒子離子交換位點。這使得連接到載體粒子的分層粒子的濃度更高。這又促使運行時間變長，并且因此產(chǎn)生了提高特定應用的色譜材料的容量的能力。應注意，術(shù)語“運行時間”也可以被稱作“保留時間”，它表示將特定化學物質(zhì)從色譜柱上洗脫下來所需的時間。

本發(fā)明也適用于陽離子交換組合物。在這種情況下，分散劑在中性pH下不電離并且在強酸性條件下，適當?shù)卦谛∮?、優(yōu)選地小于2的pH下電離。這種類型的合適的分散劑是聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺和氧化胺聚合物分散劑。關(guān)于陽離子交換組合物，細分層粒子上的離子交換位點是酸性的并且在強酸性條件下不可逆地結(jié)合到分散劑上的已電離位點。這種類型的合適的離子交換位點包括磺酸或膦酸陽離子交換位點。

在一個實施例中，本發(fā)明的載體粒子-分散劑-細分層粒子復合物可以在填充到色譜柱中之前形成。在第二優(yōu)選實施例中，首先將載體粒子和分散劑的復合物填充到色譜柱中，并且然后向管柱中添加分層粒子，形成三組分復合物。用于執(zhí)行第二實施例的方法的合適方法如下：1.使用足以裝滿管柱且至少過量10％的量的粒子，在超聲波浴中制備連接有分散劑的合適粒子于表面活性劑與氫氧化鈉的混合物中的漿料。2.將漿料轉(zhuǎn)移到下面連有空管柱的漿料儲集器。3.通過在高壓力下，通常在至少3倍于預計管柱將使用的流速的流速下，將漿料泵吸到管柱中，從而將粒子填充到空管柱中。4.然后從漿料儲集器取下管柱并且將進口端配件連接到管柱。5.將細分層粒子漿料分散于足量氫氧化鈉中，從而使?jié){料pH達到14。6.然后將這份漿料以低流速，通常為管柱的預計操作流速的25％或更小的流速泵送通過填充柱，所述填充柱含有經(jīng)分散劑涂布的粒子。7.最后，通過用去離子水沖洗管柱來去除過量細分層粒子。

以上方法中的任一種優(yōu)于形成三組分復合物的現(xiàn)有技術(shù)方法的優(yōu)勢在于，本發(fā)明方法使用常規(guī)靜電乳膠涂布方法，在更短的時間內(nèi)產(chǎn)生組合物并且與大量市售固定相是相容的。分層粒子與載體粒子-分散劑復合物在色譜柱中原位靜電結(jié)合的優(yōu)勢包括：如碘離子或高氯酸根等可極化離子的色譜性能改良，如蛋白質(zhì)或DNA等大分子的色譜性能更好，并且如蛋白質(zhì)等大分子殘留更少。

樹脂載體粒子和細樹脂分層粒子經(jīng)過選擇，使得樹脂分層粒子的外表面上的離子交換位點是將其離子與應從溶液中去除的離子物質(zhì)交換的位點。因此，組合物可以制備成使得取決于想要從溶液中去除的離子的性質(zhì)，其在細樹脂分層粒子上具有陽離子或陰離子交換位點。合適的陽離子或陰離子交換分層粒子是本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員眾所周知的。

使待解析的離子物質(zhì)通過管柱，在所述管柱中，不同離子歸因于對填充材料上的離子交換位點的不同吸引程度而得以分離。為了從管柱中移出離子，使洗脫劑通過管柱，洗脫劑也連接到這類位點，從而驅(qū)動離子，使得可以收集到離子進行分析。通常，這些洗脫劑具有與待解析的離子相同的電荷并且是不同的化學類型。

本發(fā)明的離子交換組合物尤其適合用作管柱填充材料，用于通過在管柱上的差異性保留，以色譜方式分離溶液中帶相反電荷的離子物質(zhì)。這可以通過使這種溶液與色譜柱接觸來實現(xiàn)，色譜柱包括由本發(fā)明組合物形成的離子交換粒子填充床。粒子上的離子交換位點吸引有待從溶液中去除的離子。

待采用的洗脫劑的范圍、其流速和離子交換色譜的參數(shù)是本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員眾所周知的。

為了說明本發(fā)明，提供其實踐的以下非限制性實例。

實例1

制備樹脂載體粒子-分散劑復合物(共價或永久性纏結(jié)).

可以將20克75％過氧化苯甲酰于230克二乙烯基苯(實際上含有55％的二乙烯基苯)和230克乙基乙烯基苯的混合物中的溶液以細小液滴形式分散在1600mL含有水和8克聚乙烯醇(Polysciences Inc.目錄號4398，125,000克/摩爾，88％水解)的水溶液中?？梢酝ㄟ^在反應容器內(nèi)維持氮氣氛圍來保護整個混合物隔絕空氣?？梢詫⒒旌衔锛訜岬?0℃并且在此溫度下保持二十小時，在此期間發(fā)生聚合。可以從樹脂粒子中排出液體并且然后可以用水洗滌以去除水溶性產(chǎn)物，從而得到呈球形粒子形式的白色不透明聚合物。

實例2

制備經(jīng)過陰離子交換基團官能化的乳膠衍生分層粒子-(陽離子表面活性劑)

用30.5克水、0.13克碳酸氫鈉、0.13克過硫酸鉀和4.5克12.5％MA溶液(磺基丁二酸二己酯鈉)制備水溶液，同時用氮氣凈化。接著，向所述水溶液中添加8.29克乙烯基苯甲基氯、0.91克二乙烯基苯(實際上含有55％的二乙烯基苯)和0.40克乙烯基膦酸二乙酯，同時攪拌以形成乳液并且維持氮氣凈化。向水溶液中添加3克10％焦亞硫酸鈉溶液，同時攪拌并且維持氮氣凈化。將整個混合物放置在16盎司細頸瓶中并且用氮氣脫氣五分鐘。給瓶子加蓋并且在保持在32℃下的水浴中翻滾18小時以完成聚合并且形成乳膠。向乳膠中添加6.84克70％Triton X-405(乙氧基化壬基苯酚)溶液并且攪拌以使其穩(wěn)定。通過4號濾紙過濾白色不透明混合物以從乳膠中去除任何凝結(jié)物。通過向47.86克乳膠中添加86.12克1M 1,4-二氮雜雙環(huán)(2.2.2)辛烷，攪拌混合物5分鐘，并且然后將混合物在烘箱中于85℃下放置24小時來使乳膠官能化。所得乳膠或細分層粒子5％與二乙烯基苯交聯(lián)并且95％與乙烯基苯甲基氯交聯(lián)，并且經(jīng)過二-叔胺1,4-二氮雜雙環(huán)(2,2,2)辛烷官能化。胺化乳膠的最終大小是約235nm。

實例3

制備與乳膠聚集的樹脂載體粒子-分散劑復合物.

對類似于實例1的樹脂載體粒子-分散劑復合物進行干燥，使得其所有水分小于2％。在這種情況下，樹脂載體粒子是用55％二乙烯基苯制備的6μm樹脂，其中在合成期間，使用聚乙烯醇(PVA)作為分散劑。向100克甲醇中添加15克干的樹脂載體粒子，并且聲處理15分鐘以形成樹脂載體粒子和甲醇的混合物。接著，向樹脂/甲醇混合物中添加100克去離子水并且攪拌5分鐘。然后過濾這份樹脂/甲醇/水混合物，形成過濾后的樹脂的濕濾餅。然后用去離子水洗滌這份過濾后的樹脂兩次。用12克pH 14(1M NaOH)水溶液稀釋3克過濾后的樹脂，形成NaOH/樹脂混合物。將這份NaOH/樹脂混合物聲處理5分鐘以確保良好混合。在攪拌這份NaOH/樹脂混合物的同時，添加2克來自實例2的陰離子交換乳膠溶液并且攪拌15分鐘，形成聚集的樹脂。過濾聚集的樹脂并且然后用20克pH 14水溶液洗滌。將聚集的樹脂在50克pH 14水溶液中制成漿料，攪拌5分鐘，并且然后過濾。接著，重復這一步驟，其中將樹脂用50克pH 14水溶液再制成漿料，攪拌5分鐘，并且然后過濾。在過濾后，用丙酮/堿水溶液執(zhí)行制漿-洗滌步驟三次。制漿-洗滌步驟包括：用丙酮和pH 14NaOH水溶液(各20克)的50/50混合物形成樹脂漿料，攪拌5分鐘，過濾經(jīng)過攪拌的漿料，并且用相同的50/50混合物(總共40克)洗滌。用去離子水洗滌這份聚集的樹脂兩次(不調(diào)整pH)，并且然后將其填充到色譜柱中，其用于圖2。

使用類似方法制備圖3到6中所用的色譜柱，其例外之處在于用于形成NaOH/樹脂混合物的NaOH溶液對于圖3來說是pH 13.5(0.32M NaOH)，對于圖4來說是pH 13(0.10M NaOH)，對于圖5來說是pH 12.5(0.032M)并且對于圖6來說是pH 12.0(0.01M NaOH)。類似于pH 14聚集的乳膠復合物，將pH 13.5、13、12.5和12聚集的乳膠復合物進行洗滌并且制成漿料，其例外之處在于洗滌溶液、漿料溶液和丙酮/堿水溶液的水溶液部分的pH類似于聚集pH。類似于pH 14聚集，這些聚集的乳膠復合物用去離子水洗滌兩次(不調(diào)整pH)，并且然后填充到色譜柱中。

實例4

(使用現(xiàn)有技術(shù)色譜柱所得的離子分離的色譜圖)

在這個實例中，使用由戴安公司(Dionex Corporation)出售的市售表面磺化的CarboPac^TMPA20(3×150mm)管柱。它一般通過美國專利第6,248,798號中所述的方法制成。使用電化學電池(Dionex ED50)，并且四重波形示出在下表1中。

表1.

分離參數(shù)如下。

管柱：CarboPac PA20

洗脫劑：10mM KOH

洗脫劑來源：Dionex EGC 500KOH濾筒

流速：0.5mL/min

注射體積：10μL

墊圈：2mil

溫度：30℃

檢測：積分安培法，四重脈沖波形

工作電極：PTFE金一次性電極

參比電極：銀/氯化銀

標準：對于以下所列分析物來說濃度是10mg/L

峰：

1.海藻糖

2.半乳糖胺

3.葡糖胺

4.半乳糖

5.葡萄糖

6.甘露糖

分離色譜圖示出在圖1中。應注意，y軸表示以納米庫侖(nC)為單位的所測量到的電荷。

實例5

(使用根據(jù)本發(fā)明的復合物分離)

用實例3的復合物填充管柱(3mm內(nèi)部直徑×150mm長度)，其中在pH 14.0下進行聚集。其它參數(shù)如下：

管柱：實例1的樹脂，在pH 14下聚集

洗脫劑：10mM KOH

洗脫劑來源：Dionex EGC 500KOH濾筒

流速：0.5mL/min

注射體積：10μL

墊圈：2mil

溫度：30℃

檢測：積分安培法，四重脈沖波形

工作電極：PTFE金一次性電極

參比電極：銀/氯化銀

標準：對于以下所列分析物來說濃度是10mg/L

峰：

1.海藻糖

2.半乳糖胺

3.葡糖胺

4.半乳糖

5.葡萄糖

6.甘露糖

分離色譜圖示出在圖2中。

實例6

除了在pH 13.5下進行聚集之外，這個實例與實例5相同。分離色譜圖示出在圖3中。

實例7

除了在pH 13.0下進行聚集之外，這個實例與實例5相同。分離色譜圖示出在圖4中。

實例8

除了在pH 12.5下進行聚集之外，這個實例與實例5相同。分離色譜圖示出在圖5中。

實例9

除了在pH 12.0下進行聚集之外，這個實例與實例5相同。分離色譜圖示出在圖6中。

實例10

圖7是比較運行時間(分鐘)和pH(例如5-9)的表格。

圖8A到8D以及9A和9B是展示根據(jù)圖7的表格，運行時間和聚集(aggl)pH(例如5-9)的圖表。