專利名稱：模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb₁的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及天然藥物中間體的分離提純方法，尤其是一種模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1W方法。
背景技術：
人參皂苷Rb1具有降低膽固醇濃度、益智、抗氧化等作用，同時還可作為抗癌藥物收3和他2的原料，是人參皂苷及三七皂苷中的重要有效成分。由于在三七皂苷中，除了人參皂苷Rb1，還含有其他的三七皂苷成分及人參皂苷，所以在人參皂苷Rb1的提純制備過程中，關鍵的步驟就是對其分離，目前對人參皂苷Rb1的分離方法主要是大孔吸附樹脂法和傳統(tǒng)的甲醇、乙醇提取法，但都無法進行高純度的規(guī)模化分離，無法滿足實際的需求。查閱公開文獻，近年來采用模擬移動床的分離技術已有很多報道。其中與本發(fā)明比較相關的是“模擬移動床色譜拆分20 (S)和20 (R)-人參皂苷Rg3對映體”，公開(公告) 號CN101230080，專利申請。該申請公開了一種人參皂苷Rg3對映體的模擬移動床色譜分離方法，應用模擬移動床色譜系統(tǒng)，采用含十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)固定相，流動相采用甲醇和水的混合溶液從20 (R)-人參皂苷Rg3和20 (S)-人參皂苷Rg3的混合物中分離出高純度的20 (R)-人參皂苷Rg3和20 (S)-人參皂苷Rg3。但是目前未見到有關模擬移動床色譜系統(tǒng)分離人參皂苷Rb1的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1的方法，解決人參皂苷 Rb1的分離提取純度低，無法規(guī)?；蛛x制備的問題。本發(fā)明采用的技術方案如下模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1的方法，以三七皂苷提取物為原料，應用模擬移動床色譜法分離制備人參皂苷Rb1,模擬移動床色譜的固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相采用甲醇和水的混合溶液，甲醇與水的體積比比例為70 30。模擬移動床色譜系統(tǒng)由4 8根色譜柱組成，色譜柱分為三個帶解吸帶；精制帶；吸附帶，，每個帶由1 4根相同的色譜柱串聯(lián)組成。模擬移動床色譜系統(tǒng)的操作參數(shù)是進樣液流速W為0. 5 3mL/min ；洗脫液流速Ud為4 60mL/min ；萃取液流速Ue為2 30mL/min ；萃余液流速Ur 為2 30mL/min ；切換時間Ts為1 6min。上述的三七皂苷提取物通過提取純化手段從三七藥材中得到，三七皂苷提取物中人參皂苷Rb1的質(zhì)量百分比純度為40 60%，進入模擬移動床色譜分離的三七皂苷提取物用上述模擬移動床分離的流動相溶解，溶解后三七皂苷提取物的濃度為50 200mg/mL。上述的模擬移動床色譜系統(tǒng)的操作溫度為15 40°C。本發(fā)明與現(xiàn)有同類技術相比，其顯著的有益效果體現(xiàn)在模擬移動床色譜系統(tǒng)分離的人參皂苷Rb1產(chǎn)品的質(zhì)量百分比純度達到92%以上。 由于模擬移動床分離過程的連續(xù)性，生產(chǎn)的自動化程度高，生產(chǎn)效率高，且溶劑可以回收利用，分離過程中不接觸有毒溶劑，真正實現(xiàn)了清潔生產(chǎn)。


圖1為本發(fā)明模擬移動床色譜系統(tǒng)的結構示意圖；圖2為本發(fā)明人參皂苷Rb1產(chǎn)品的HPLC圖譜。
具體實施例方式下面結合附圖用實施例對本發(fā)明作具體說明1.樣品溶液的配制通過乙醇回流提取和硅膠柱層析分離，從三七飲片中制得三七皂苷提取物，三七皂苷提取物中人參皂苷Rb1的質(zhì)量百分比純度為40 60%。將得到的三七皂苷提取物溶于流動相中，沉降，經(jīng)0. 45 μ m濾膜過濾得到濃度為200mg/mL的溶液，作為模擬移動床色譜的進樣溶液。此過程可以去除部分雜質(zhì)及糖類，減少了設備中色譜柱的污染，延長了色譜柱的使用壽命。2.色譜柱的裝填與流動相的組成使用勻漿法填裝8根色譜柱，色譜柱規(guī)格50mmX 100mm，填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，粒徑為20 40 μ m。經(jīng)過勻漿法裝填后的色譜柱對稱性一致，以萘和尿嘧啶為考察物柱效為800以上。流動相為甲醇和水的混合溶液，甲醇與水的比例為70 30。3.模擬移動床色譜系統(tǒng)及操作參數(shù)模擬移動床色譜系統(tǒng)包括洗脫泵、進樣泵、萃取泵、流量計、色譜柱、高壓電磁閥、 單向閥和單片機控制器及計算機組成。洗脫泵流量0 SOmL/min，壓力O 30Mpa ；進樣泵流量O 10mL/min，壓力O 40Mpa ；萃取泵流量O 80mL/min，壓力O 30Mpa ；色譜柱工作溫度15 40°C。如圖1所示，三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)由8根色譜柱組成，分為三個帶 解吸帶有1根色譜柱；精制帶由4根色譜柱組成；吸附帶由3根色譜柱組成，通過三帶模擬移動床色譜控制系統(tǒng)，定時控制電磁閥的開閉，使進樣口，進流動相口，萃取液出口，萃余液出口沿流動相的方向定時變換，高純度的人參皂苷Rb1產(chǎn)品從萃取液出口獲得。模擬移動床色譜系統(tǒng)分離制備人參皂苷Rb1的具體操作參數(shù)為進樣液流速UF為
0.5 3mL/min ；洗脫液流速UD為4 60mL/min ；萃取液流速UE為2 30mL/min ；萃余液流速UR為2 30mL/min ；切換時間Ts為1 6min。4.產(chǎn)品濃縮將從萃取液出口獲得的萃取液(E)用薄膜旋轉蒸發(fā)器濃縮至近干，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重，控制濃縮溫度和烘干溫度小于等于60°C，得到人參皂苷Rb1產(chǎn)
P
ΡΠ O5.產(chǎn)品檢驗采用日本島津LC-IOAT高效液相色譜儀，SPD-IOA紫外檢測器，Agilent色譜柱， 色譜柱規(guī)格4. 6 X 150mm, ODS填料，粒徑5 μ m,流動相為乙腈和水，體積比為30 70，流速
1.OmL/min，檢測波長203nm，產(chǎn)品檢測譜圖見圖2。通過外標法測定產(chǎn)品中人參皂苷Rb1的質(zhì)量百分比純度為92%以上。
權利要求
1.一種模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1的方法，其特征在于該方法以三七皂苷提取物為原料，應用模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1，模擬移動床色譜的固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相采用甲醇和水的混合溶液，甲醇與水的體積比比例為 70 30，模擬移動床色譜系統(tǒng)由4 8根色譜柱組成，色譜柱分為三個帶解吸帶；精制帶； 吸附帶，每個帶由1 4根相同的色譜柱串聯(lián)組成，模擬移動床色譜系統(tǒng)的操作參數(shù)是進樣液流速Uf為0. 5 3mL/min ；洗脫液流速Ud為4 60mL/min ；萃取液流速Ue為2 30mL/ min ；萃余液流速Uk為2 30mL/min ；切換時間Ts為1 6min。
2.根據(jù)權利要求1所述的模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1的方法，其特征在于 所說的的三七皂苷提取物通過提取純化手段從三七藥材中得到，三七皂苷提取物中含人參皂苷Rb1的質(zhì)量百分比純度為40 60%，進入模擬移動床色譜分離的三七皂苷提取物用模擬移動床分離的流動相溶解，溶解后三七皂苷提取物的濃度為50 200mg/mL。
3.根據(jù)權利要求1所述的模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1的方法，其特征在于 所說的模擬移動床色譜系統(tǒng)的操作溫度為15 40°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種模擬移動床色譜分離制備人參皂苷Rb1的方法，解決人參皂苷Rb1的分離提取純度低，無法規(guī)模化分離制備的問題。本發(fā)明以三七皂苷提取物為原料，應用模擬移動床色譜法分離制備人參皂苷Rb1，模擬移動床色譜的固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相采用甲醇和水的混合溶液。本發(fā)明分離制備的人參皂苷Rb1產(chǎn)品的質(zhì)量百分比純度達到92％以上。由于模擬移動床分離過程的連續(xù)性，生產(chǎn)的自動化程度高，生產(chǎn)效率高，且溶劑可以回收利用，分離過程中不接觸有毒溶劑，真正實現(xiàn)了清潔生產(chǎn)。
文檔編號B01D15/10GK102336799SQ20101023365
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月22日 優(yōu)先權日2010年7月22日
發(fā)明者叢景香, 唐曉丹, 張偉, 李芊, 林炳昌, 王紹艷 申請人:遼寧科技大學