一種用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株ghmc422及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422，該菌株屬于鹽單胞菌菌屬(Halomonas sp.)，保藏名稱：鹽單胞菌GHMC422，保藏單位：中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：中國(guó)武漢，保藏日期：2009年8月28日，保藏編號(hào)：CCTCC NO：M209184；該菌株具有高效有機(jī)物降解能力，能快速有效的去除受有機(jī)物污染海水中的有機(jī)物，并且對(duì)海水養(yǎng)殖生物沒(méi)有毒害致病作用。本發(fā)明對(duì)去除海水養(yǎng)殖環(huán)境中高濃度有機(jī)物污染具有安全、環(huán)保、高效的特點(diǎn)。CCTCC NO：M20918420090828
【專利說(shuō)明】
一種用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株 GHMC422及在處理有機(jī)物污染海水中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)，在海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)飛速發(fā)展的同時(shí)，養(yǎng)殖"自身污染"問(wèn)題日益凸現(xiàn)出 來(lái)，其中養(yǎng)殖過(guò)程產(chǎn)生的有機(jī)物污染物常常會(huì)引發(fā)海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖的水體發(fā)臭、沉積環(huán)境惡 化，導(dǎo)致水中溶解氧降低，養(yǎng)殖魚類死亡，水體生態(tài)平衡破壞。
[0003] 海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖系統(tǒng)作為一種高密度、高投餌的人工養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)，影響?zhàn)B殖環(huán)境 最根本的原因在于養(yǎng)殖過(guò)程中產(chǎn)生的大量殘餌、糞便及死亡動(dòng)植物殘骸等有機(jī)物的沉積。 目前的物理和化學(xué)去除有機(jī)污染物方法都存有一定的局限性。其中物理方法存在效率低 下，成本高的缺點(diǎn);化學(xué)方法雖然見(jiàn)效快，但常引起二次污染。為達(dá)到對(duì)有機(jī)污染物快速、高 效去除，本發(fā)明擬從海水養(yǎng)殖環(huán)境沉積物中富集分離純化獲得一株微生物，并將其用于對(duì) 有機(jī)物污染的治理中。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株 GHMC422，該菌株具有高效的有機(jī)物降解能力，能快速有效地去除海水環(huán)境中的有機(jī)物。
[0005] 本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供上述用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422 在處理海水中有機(jī)污染物中的應(yīng)用。
[0006] 經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明所述的鹽單胞菌菌株GHMC422對(duì)海水養(yǎng)殖生物沒(méi)有毒害致病 作用。
[0007] 本發(fā)明的第一個(gè)目的是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種用于海洋有機(jī)物降解的 鹽單胞菌菌株GHMC422,該菌株屬于鹽單胞菌菌屬(Halomonas sp.)，保藏名稱:鹽單胞菌 GHMC422，保藏單位：中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：中國(guó)武漢，保藏日期:2009年8月 28日，保藏編號(hào)：CCTCC NO:M209184。
[0008] 本發(fā)明中的用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422的篩選分離鑒定過(guò)程 為:取海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)的沉積物，在實(shí)驗(yàn)室利用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)后，分離純化菌株，根據(jù) 菌株對(duì)餌料有機(jī)物降解能力的強(qiáng)弱，最終篩選出一株對(duì)餌料有機(jī)物有較強(qiáng)降解能力的菌 株，編號(hào)為GHMC422,然后根據(jù)菌株的菌落形態(tài)特征、培養(yǎng)特征和生理生化特征，及其 16SrDNA基因序列經(jīng)與Genbank中已登陸的基因序列進(jìn)行對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，菌株GHMC422經(jīng)鑒 定為鹽單胞菌屬，命名為鹽單胞菌(Halomonas sp. )GHMC422。
[0009] 本發(fā)明的第二個(gè)目的是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：上述用于海洋有機(jī)物降解的 鹽單胞菌菌株GHMC422在處理海水中有機(jī)污染物中的應(yīng)用。
[0010] 在處理有機(jī)物污染海水中的具體過(guò)程為：取經(jīng)上述分離純化的鹽單胞菌 (Halomonas sp. )GHMC422單菌落，于活化擴(kuò)大培養(yǎng)基中培養(yǎng)40-48h，按海水與菌液體積比 為40-60:1，將鹽單胞菌(他1〇!11〇11&8 8?.)6!1^422接種于含餌料有機(jī)物的海水中，25-281€ 十旦溫振蕩培養(yǎng)3_5d。
[0011] 上述活化擴(kuò)大培養(yǎng)基的組成優(yōu)選為：蛋白胨5.0g，酵母膏l(xiāng).Og，磷酸高鐵O.lg，陳 海水1000 mUpH 7.6-8.2,121°C滅菌20min。
[0012] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明從海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖區(qū)沉積物中篩選得 到的新菌株，對(duì)餌料有機(jī)物有較強(qiáng)的降解能力，在I _5d內(nèi)對(duì)餌料有機(jī)物的COD去除率達(dá)21.6 ~43.3%〇
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1是實(shí)施例2中菌株GHMC422的PCR產(chǎn)物瓊脂糖電泳圖；
[0014]圖2是實(shí)施例3中菌株GHMC422的電鏡圖片；
[0015] 圖3是實(shí)施例5中投加菌株GHMC422的高濃度餌料有機(jī)物海水中的生化耗氧量 (BOD)變化圖。
[0016] 圖4是實(shí)施例5中投加菌株GHMC422的高濃度餌料有機(jī)物海水中的化學(xué)耗氧量 (COD)變化圖。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。
[0018] 實(shí)施例1
[0019] 用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422的篩選 [0020] 一、材料準(zhǔn)備
[0021] 1、菌源和實(shí)驗(yàn)廢水
[0022] (1)菌源有20多年養(yǎng)殖歷史的深圳市大鵬澳海水魚類網(wǎng)箱養(yǎng)殖場(chǎng)區(qū)的沉積物。 [0023] (2)實(shí)驗(yàn)廢水（含高濃度餌料有機(jī)物海水）：雜魚糜5 8，陳海水100〇11^，？!17.6~ 8.2，121°C 滅菌 20min。
[0024] 2、培養(yǎng)基
[0025] (1)選擇培養(yǎng)基:雜魚糜20g，陳海水1000 mUpH 7.6~8.2，121°(：滅菌2〇11^11。
[0026] (2)分離及斜面培養(yǎng)基：蛋白胨5g，酵母膏l(xiāng)g，磷酸高鐵O.lg，瓊脂粉20g，陳海水 1000mL，pH 7.6~8.2。
[0027] (3)活化擴(kuò)大培養(yǎng)基：蛋白胨5g，酵母膏Ig，磷酸高鐵0 · Ig，陳海水1000 mL，pH 7 · 6 ~8 · 2〇
[0028] 3、實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
[0029]美國(guó) HACH BOD Trak測(cè)定儀；
[0030] 廣東海利電磁式空氣壓縮機(jī)AC0-009E;
[0031] 蘇州安泰超凈工作臺(tái)SW-CJ-1BU;
[0032] 上海精宏生化培養(yǎng)箱SHP-150;
[0033]蘇州歐倍振蕩培養(yǎng)箱0BS-2F;
[0034] 德國(guó) HYDR0-BI0S-KIEL 采泥器；
[0035] 日本HIRAYAMA高壓滅菌器HVN-85;
[0036] 日立H-7650透射電子顯微鏡；
[0037] PC818 型 PCR 儀；
[0038]電泳儀及電泳槽；
[0039]加熱板及滴定儀；
[0040] 凝膠紫外觀測(cè)儀等。
[0041] 二、菌株的分離與篩選 [0042] 1、菌株的富集
[0043] 取大鵬澳海水魚類網(wǎng)箱養(yǎng)殖場(chǎng)沉積物表層以下5cm處的沉積物放入采樣袋，再放 入0°C冰盒中帶回實(shí)驗(yàn)室。取250g沉積物加到2L的富集瓶中，加入750mL滅選擇培養(yǎng)基，并加 入適量的纖維棉，在室溫條件下連續(xù)曝氣富集培養(yǎng)2個(gè)月，中間據(jù)情況不定期添加滅菌海水 和選擇培養(yǎng)基。
[0044] 2、有機(jī)物降解細(xì)菌的分離純化
[0045]挑選并直接沖洗細(xì)菌附著量較大的纖維棉，得到富集菌液，適當(dāng)稀釋，均勻涂布于 分離培養(yǎng)基平板上，28°C培養(yǎng)3d，待菌落長(zhǎng)出后，挑取形態(tài)各異的單菌落，在分離培養(yǎng)基平 板上進(jìn)行劃線分離，直至得到純的單菌落。將分離純化的細(xì)菌接種至斜面培養(yǎng)基中并于冰 箱4°C保存。
[0046] 3、有機(jī)物降解細(xì)菌的篩選
[0047]通過(guò)用BOD及COD值來(lái)衡量菌株對(duì)餌料有機(jī)物的利用能力，以有機(jī)物的可生化降解 性(BOD5/COD〇)來(lái)表示5d時(shí)間里細(xì)菌利用餌料有機(jī)物的降解能力。
[0048]取分離純化得到的菌株于活化擴(kuò)大培養(yǎng)基中25-28 °C培養(yǎng)40-48h，按海水與菌液 體積比40-60:1，接種到含高濃度餌料有機(jī)物的海水中，取不接種菌液的餌料有機(jī)物海水作 為空白對(duì)照，25-28 °C溫度振蕩培養(yǎng)，反應(yīng)時(shí)間l-5d，監(jiān)測(cè)餌料有機(jī)物海水的BOD及COD。 [0049] 經(jīng)過(guò)篩選獲得一株編號(hào)為GHMC422的菌株，即海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422。
[0050] 實(shí)施例2
[0051 ] 海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422的鑒定 [0052] 1、對(duì)海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422的鑒定
[0053] 對(duì)海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422進(jìn)行了生理生化的鑒定以及16S rDNA分子的鑒 定，從分子水平，并結(jié)合細(xì)菌形態(tài)學(xué)特征及生理生化特性分析確定菌株的種屬。
[0054] 16S rDNA序列分析主要按照以下步驟：
[0055] (1)細(xì)菌核DNA的提?。?br>[0056] 1)用高壓滅菌的牙簽挑單菌落接種于擴(kuò)大培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)過(guò)夜，取1.5mL菌液于 Eppendorf管內(nèi)，8000rpm室溫離心5min，徹底除去上清。
[0057] 2)加 STE(Sodium-Tris-EDTA)緩沖液1.5mL洗滌一次，離心棄上清，再加入0.6mLTE (Tris-EDTA)緩溶液，重懸細(xì)菌。
[0058] 3)加 30yL 10mg/mL 的溶菌酶，37°C 水浴 45min。
[0059] 4)加65yL 10 %的SDS(十二烷基磺酸鈉），20mg/mL的蛋白酶K3yL，50°C水浴2h，至 溶液變清。
[0060] 5)加入等體積酚氯仿抽提三次，直至看不到蛋白質(zhì)為止。
[0061 ] 6)在上清液中加入I /10體積的3M的NaAc (pH5 · 2)。
[0062] 7)加入等體積的異丙醇，沉淀DNA。用玻璃棒纏繞挑出DNA細(xì)絲，再用體積百分含量 為70%的乙醇洗滌一次，自然晾干，并將DNA溶于IOOyL TE溶液中。
[0063] 8)加入終濃度為50yg/mL的Rnase(RNA酶），37°C，30min，去除RNA，-20°C保存?zhèn)溆谩?br>[0064] (2)16S rDNA基因的PCR擴(kuò)增
[0065] Pl(上游引物）JTFW-AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG-3')
[0066] P2(下游引物hHgSRG'-AAG TCG TAA CAA GGT AAC C-3')
[0067] 在50yL的反應(yīng)體積中，加入IyL模板DNA(0. lug)，0.5yLPl和P2(終濃度為0.5μΜ)，1 yL dNTP(每種NTPO · 2mM)，0· 5yLTaq聚合酶（2U)和5yL10 XPCR緩沖液。PCR擴(kuò)增條件為：94°C 預(yù)變性5min，在94°C變性30s，61-65°C退火30s，72°C延伸lmin，循環(huán)30次；最后72°C終延伸 IOmin0
[0068] (3)PCR產(chǎn)物的回收
[0069] 將PCR產(chǎn)物以1%瓊脂糖凝膠(質(zhì)量百分比)進(jìn)行電泳后，在紫外燈下切取含欲回收 片段的凝膠，放入1.5mL離心管中加2倍體積TE，65°C水浴IOmin后加等體積水飽和酚抽提一 次離心后取上層水相再用酚-氯仿-異戊醇抽提一次，收集上清加0.1倍體積的l〇mol/L乙酸 銨和2倍體積無(wú)水乙醇沉淀，離心，用體積百分含量為70%的乙醇洗沉淀一次，風(fēng)干后溶于 適量滅菌雙蒸水。
[0070] (4) 16S rDNA的部分序列測(cè)定和分析
[0071 ] P-f：CACGACGTTGTAAAACGACAGTTTGATCCTGGCTC；
[0072] P-r：GGATAACAATTTCACACAGGAAGGAGGTGATCCAGCC 〇
[0073] 加入 IyL 模板 0嫩（<0.叫8)，卩〇財(cái)廣增30個(gè)循環(huán)（94°(：111^11，551€308,72 1€211^11)。采 用ABI PRISM測(cè)序試劑盒中染料終止劑終止反應(yīng)。然后，在Applied Biosystem373A DNA測(cè) 序儀上測(cè)序。測(cè)得的16S rDNA序列采用BLAST軟件與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)比較分析，最終從分子 水平上確定該菌的種屬。
[0074] 2、16S rDNA序列測(cè)定
[0075]本發(fā)明采用對(duì)16S rDNA序列測(cè)定和分析的方法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分子水平的鑒定。以細(xì) 菌的核DNA為模板，以16S rDNA基因的PCR擴(kuò)增的通用引物為引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到長(zhǎng)度 為1499bp的擴(kuò)增帶用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，如圖1所示。PCR產(chǎn)物經(jīng)純化后，測(cè)定其全序 列。 AGAGTTTGAT CCTGGCTCAG ATTGMffiCT GGCGGCAGGC CTAACAttTG CMGiTCGAGC 60 GGAMCG/VTC CTAGCTTGCT AGGAGGCGTC GAGCGGCGGA CGGGTGAGTA ACGCATAGGA UQ ATCTGCCCGG TAGTGGGGGA TAACCTGGGG AMCCCAGGC TAATACCGCA TACGTCCTAC 180 GGGmMMC AGGGGCTGTT CGGACCTTGC €CTAXGGGAT GAGGCTATGT GGSSTTAGCT 240 GGTTGGTGAG GTAATGGCTC ACCAAGGCGA CGATCCGTAG CTGGTCTGAG AGGATGATCA 300 GCCACATCGG GACTGAGACA CGGCCCGAAC TCCTACGGGA GGCAGCAGTG GGGAATATTG 360 GACMTGGGC GCAAGCCTGA TCCAGCCATG CCGCGTGTGT GMGMGGCC CTCGGGTTGT 420 AAAGCACTTT CAGTGGGGAA GAAATCCTCG GGGCTAATAC CCTCGAGGGA GGACATCACC 4:80: CACAGAAGAA GCACCGGCTA ACTCCGTGCC AGCAGCCGCG GTAATACGGA GGGTGCGAGC 540 GTTAATCGGA ATTACTGCrGC GTAAAGCCrCG CGTAGGCGGC CTGATAAGCC GGTTGTGAAA 600 GCCCCGGGCT CAACCTGGGA ACGGCATCCG GMCTGTCAG GCTAGAGTGC AGGAGAGGAA 660 GGTAGAATTC CCGGTGTAGC GGTGMATGC GTAGAGATCG GGAGGAATAC CAGTGGCGAA 720
[0076] GGCGGCCTTC TGGACTGACA CTGACGCTGA GGTGCGAAAG CGTGGGTAGC AMCAGGATT 7:80: AGATACCCTG GTAGTCCACG CCGTMACGA TGTCGACTAG CCGTTGGGGT CCTTGAGACC 840 TTTeTGGCGC AGTTAAGeCG ATMGTGGAC GGCCTGGGGA GTAGGGCCGG AASGTTMA4 900 CTCAAATGAA TTGACGGGGG CCCGCACAAG CGGTGGAGCA TGTGGTTTAA TTCGATGCAA 9：6〇 CGCGAAGAAC CTTACCTACC CTTGACATCG AGAGAACTTG GCAGAGATGC CTTGGTGCCT 1020 TCGGGAACTC TaGAaeGT GCTG?TGGC CGTCGTCAGC TCGTGTTGTG AMTGTTGGG 1080 TTAAGTCCCG TAACGAGCGC AACCCTTGTC CCTATTTGCC AGCGATTCGG TTGGGAACTC 1140 TAGGGAGACT GCCGGTGACA AACCGGAGGA ACX；TGGGGAC GACGTCAGGT CATCATGGCC 1200 CTTACGGGTA GGGCTACACA CGTGCTACAA TGGCCGGTAC AMGGGTTGC GMGCCGCGA 1260 GGTGGAGCCA ATCCCGAMA GCCGGTCTCA GTCCGGATCG GAGTCTGCAA CTCGACTCCG 1320 TGAAGTCGGA ATCGCTAGTA ATCGTGAATC AGAATGTCAC GGTGMTACG TTCCCGGGCC 1380 TTGTACACAC CGCCCGTCAC ACCATGGGAG TGGACTGCAC CAGAAGTGGT TAGCCTAACT 1440 TCGGAGGGCG ATCACCACGG TGTGGTTCAT GACTGGGGTG AAGTCGTAAC AAGGTAACC 1499
[0077] 實(shí)施例3
[0078] 海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422菌落形態(tài)、生理和生化特征
[0079]海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422菌落形態(tài)、生理和生化特征見(jiàn)表1-1;細(xì)胞形態(tài)見(jiàn)圖 2〇
[0080] 表1-1海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422的菌落形態(tài)特征以及主要的生理生化特征
[0082] 備注："+" ：90%以上的菌株為陽(yáng)性，：90%以上的菌株為陰性。
[0083] 實(shí)施例4
[0084]海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422的確定
[0085] 將海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422長(zhǎng)度為1499bp的16S rDNA基因序列與GenBank中 已登錄的基因序列進(jìn)行比對(duì)分析，海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422與鹽單胞菌屬(Halomonas sp.)菌株的同源性高達(dá)98.4%以上。
[0086]綜合菌株的生理生化及分子鑒定結(jié)果，可確定海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422為鹽 單胞菌屬（Halomonas sp·)，菌株GH\C422命名為鹽單胞菌（Halomonas sp.)GH\C422。鹽單 胞菌(Halomonas sp. )GHMC422已于2009年8月28日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（簡(jiǎn)稱 CCTCC)，保藏編號(hào):CCTCC NO:M209184，保藏地址：中國(guó)武漢，具體地址為湖北省武漢市武昌 珞珈山武漢大學(xué)保藏中心。
[0087] 本發(fā)明分離、篩選的海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422,具有較強(qiáng)的有機(jī)物降解能力。 這就拓寬了人們對(duì)鹽單胞菌屬(Halomonas sp.)在其功能方面的應(yīng)用研究思路，并為去除 受有機(jī)物污染海水中的有機(jī)物提供了有用的菌源和技術(shù)，并且對(duì)海水養(yǎng)殖生物沒(méi)有毒害致 病作用，具有安全、環(huán)保和高效的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
[0088] 實(shí)施例5
[0089]海洋有機(jī)物降解菌株GHMC422的應(yīng)用
[0090] 應(yīng)用實(shí)例一：
[0091] 取實(shí)施例1中經(jīng)分離純化的鹽單胞菌屬(Halomonas sp.)GHMC422單菌落，于活化 擴(kuò)大培養(yǎng)基中培養(yǎng)40_48h，按海水與菌液體積比為40-60:1，接種到含餌料有機(jī)物的海水 中，設(shè)空白對(duì)照，攪拌子攪拌培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25-28°C，連續(xù)監(jiān)測(cè)餌料有機(jī)物海水的BOD(生化 耗氧量），反應(yīng)2-7d。
[0092] 從圖3可以看出，接種鹽單胞菌屬(Halomonas sp.)GHMC422菌株的餌料有機(jī)物海 水中的BOD隨時(shí)間逐漸增大，4-7d維持穩(wěn)定。鹽單胞菌屬(Halomonas sp. )GHMC422菌株在4-7d對(duì)有機(jī)物有較強(qiáng)的降解能力。
[0093] 應(yīng)用實(shí)例二：
[0094] 取實(shí)施例1中經(jīng)分離純化的鹽單胞菌屬(Halomonas sp.)GHMC422單菌落，于活化 擴(kuò)大培養(yǎng)基中培養(yǎng)40_48h，按海水與菌液體積比為40-60:1，接種到含餌料有機(jī)物的海水 中，設(shè)空白對(duì)照，攪拌子攪拌培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25-28°C，連續(xù)監(jiān)測(cè)餌料有機(jī)物海水中的COD(化 學(xué)耗氧量），反應(yīng)l-5d。
[0095] 從圖4可以看出，接種鹽單胞菌屬(Halomonas sp.)GHMC422菌株的餌料有機(jī)物海 水中的COD在Id內(nèi)迅速減少，海水中的COD去除率為43.3%，之后基本維持在該水平。鹽單胞 菌屬(Halomonas sp. )GHMC422菌株能迅速有效地降低餌料有機(jī)物海水中的C0D。
[0096] 應(yīng)用實(shí)例三：
[0097] 取實(shí)施例1中經(jīng)分離純化的鹽單胞菌(Halomonas sp. )GHMC422單菌落，于活化擴(kuò) 大培養(yǎng)基中培養(yǎng)40_48h，按海水與菌液體積比為40-60:1，接種到裝有2L過(guò)濾海水的玻璃圓 缸中，并以不加菌液的過(guò)濾海水為對(duì)照，分別放養(yǎng)有4 0尾體長(zhǎng)約I c m的班節(jié)對(duì)奸(P e n a e u s monodon)4下苗和20尾體長(zhǎng)約3cm的黑鯛（Sparus macrocephalus)仔魚，各分3個(gè)平行實(shí)驗(yàn) 組，水溫25-28 °C，96h后，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析蝦苗存活率在75 %~85.5 %，仔魚存活率在在75 %~ 85.5%，存活率在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的之間無(wú)顯著差異?？梢?jiàn)，鹽單胞菌（Halomonas sp.) GHMC422對(duì)海水養(yǎng)殖生物沒(méi)有毒害致病作用。
[0098]上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的 限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422，其特征是:該菌株屬于鹽單胞菌 菌屬(Halomonas sp.)，保藏名稱:鹽單胞菌GHMC422，保藏單位:中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心， 保藏地址：中國(guó)武漢，保藏日期：2009年8月28日，保藏編號(hào):CCTCC NO:M209184。2. 權(quán)利要求1所述的用于海洋有機(jī)物降解的鹽單胞菌菌株GHMC422在處理海水中有機(jī) 污染物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C02F3/34GK105861377SQ201610301668
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年5月9日
【發(fā)明人】古小莉, 黃洪輝, 孟霞
【申請(qǐng)人】中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所