自金槍魚油，PUFA組成為ALA 1.6%, AA 9.8%, EPA7.8%, DPA 16.4%, DHA 50.8% )和甘油lKg加入混合罐中，在磁力攪拌的情況下，如圖1所示，反應(yīng)物經(jīng)栗輸送流經(jīng)填充床酶反應(yīng)器5 (酶反應(yīng)的溫度為50°C，物料跟固定化脂肪酶Novozym 435接觸時(shí)間為5min)，然后在熱處理裝置7中進(jìn)行熱處理，在100°C的狀態(tài)下滯留3min，然后經(jīng)冷卻裝置8降溫到50°C后回到物料罐1中，固定化脂肪酶Novozym435的用量為100g，反應(yīng)溫度為50°C，整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)置于壓力為lOOPa的真空狀態(tài)下。調(diào)整物料的流量使其在系統(tǒng)中循環(huán)反應(yīng)，12小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，PUFA的轉(zhuǎn)化率為91.4%,甘油三酯含量為65.7%，甘油二酯含量為27.2%，單甘油酯的含量為7.2%。24小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，PUFA的轉(zhuǎn)化率為95.2%，甘油三酯含量為68.6%，甘油二酯含量為30.2%，單甘油酯的含量為1.2%。
[0025]實(shí)施例2
[0026]在混合罐中加入甘油lKg，CLA乙酯濃縮物9Kg(CLA含量為80.3% )，在磁力攪拌的情況下，如圖1所示，反應(yīng)物經(jīng)栗輸送流經(jīng)酶反應(yīng)器5 (酶反應(yīng)的溫度為50°C，物料跟固定化脂肪酶Novozym435接觸時(shí)間為5min)，然后在熱處理裝置7中進(jìn)行熱處理，在110°C的狀態(tài)下滯留2.5min，然后經(jīng)冷卻裝置8降溫到50°C后回到物料罐1中，固定化脂肪酶Novozym435的用量為100g，反應(yīng)溫度為50°C，整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)置于壓力為lOOPa的真空狀態(tài)下。調(diào)整物料的流量使其在系統(tǒng)中循環(huán)反應(yīng)，12小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，CLA的轉(zhuǎn)化率為93.1%，甘油三酯含量為68.4 %，甘油二酯含量為22.5%，單甘油酯的含量為9.2%。24小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，CLA的轉(zhuǎn)化率為96.2%，甘油三酯含量為70.6%，甘油二酯含量為25.7%，單甘油酯的含量為4.3%。
[0027]對比實(shí)施例1
[0028]將10Kg PUFA濃縮物(來自金槍魚油，PUFA組成為ALA 1.6%, AA 9.8%, EPA7.8%, DPA 16.4%, DHA 50.8% )和甘油lKg加入混合罐中，在磁力攪拌的情況下，反應(yīng)物經(jīng)栗輸送流經(jīng)酶反應(yīng)器(酶反應(yīng)的溫度為50°C，物料跟固定化脂肪酶NOVOZym435接觸時(shí)間為5min)，然后回到物料罐中，固定化脂肪酶Novozym435的用量為100g，反應(yīng)溫度為50°C，整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)置于壓力為lOOPa的真空狀態(tài)下。調(diào)整物料的流量使其在系統(tǒng)中循環(huán)反應(yīng)，12小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，PUFA的轉(zhuǎn)化率為51.8%，甘油三酯含量為28.9%，甘油二酯含量為49.7%，單甘油酯的含量為22.4% ;24小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組，PUFA的轉(zhuǎn)化率為74.2%，甘油三酯含量為38.5%，甘油二酯含量為44.6%，單甘油酯的含量為16.
[0029]對比實(shí)施例2
[0030]在混合罐中加入甘油lKg，CLA乙酯濃縮物9Kg(CLA含量為80.3% )，10g脂肪酶NOVOZym435，在磁力攪拌的情況下，反應(yīng)物經(jīng)栗輸送流經(jīng)酶反應(yīng)器(酶反應(yīng)的溫度為50°C，物料跟固定化脂肪酶Novozym435接觸時(shí)間為5min)，然后回到物料罐中，固定化脂肪酶Novozym435的用量為100g，反應(yīng)溫度為50°C，整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)置于壓力為lOOPa的真空狀態(tài)下。調(diào)整物料的流量使其在系統(tǒng)中循環(huán)反應(yīng)，12小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，CLA的轉(zhuǎn)化率為64.2 %，甘油三酯含量為34.8 %，甘油二酯含量為43.7 %，單甘油酯的含量為21.4%。24小時(shí)后取樣分析反應(yīng)產(chǎn)物組成，CLA的轉(zhuǎn)化率為78.6%，甘油三酯含量為40.1 %，甘油二酯含量為47.5%，單甘油酯的含量為13.4%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種甘油酯型PUFA的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)PUFA的?；w與甘油混合后，與固定化脂肪酶接觸進(jìn)行反應(yīng)，整個(gè)反應(yīng)置于真空條件下； (2)將步驟(1)反應(yīng)后的物料于90?120°C熱處理至少1.5nmin，η = (150_T)/20，Τ為熱處理的溫度；將物料冷卻至步驟(1)的反應(yīng)溫度后，再加入步驟(1)的混合物料中，循環(huán)步驟⑴和⑵的反應(yīng)； (3)當(dāng)反應(yīng)基本達(dá)到平衡，分離反應(yīng)產(chǎn)物，回收油相，最后對油相進(jìn)行純化，獲得甘油酯型的PUFA產(chǎn)物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述PUFA的?；w與甘油的摩爾比為1.0?2.5。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述反應(yīng)的溫度為45?55°C，反應(yīng)時(shí)間不低于5min。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述熱處理溫度為100?110°C，熱處理時(shí)間為2.5?8min。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述熱處理溫度為100?110°c，熱處理時(shí)間為2.5?8min。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述PUFA的?；w為富含PUFA的脂肪酸或脂肪酸短鏈醇酯。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述真空條件為反應(yīng)系統(tǒng)中的壓強(qiáng)為lOOPa以下。8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶為來源于根酶屬、曲霉屬、毛酶屬、細(xì)菌、酵母菌、動物胰臟中的一種或兩種以上的混合物。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種甘油酯型PUFA的制備方法，包括如下步驟：(1)PUFA的?；w與甘油混合后，與固定化脂肪酶接觸進(jìn)行反應(yīng)，整個(gè)反應(yīng)置于真空條件下；(2)將步驟(1)反應(yīng)后的物料于90～120℃熱處理至少1.5nmin，n＝(150-T)/20，T為熱處理的溫度；將物料冷卻至步驟(1)的反應(yīng)溫度后，再加入步驟(1)的混合物料中，循環(huán)步驟(1)和(2)的反應(yīng)；(3)當(dāng)反應(yīng)基本達(dá)到平衡，分離反應(yīng)產(chǎn)物，回收油相，最后對油相進(jìn)行純化，獲得甘油酯型的PUFA產(chǎn)物。本方法通過熱處理控制甘油酯的組成，提高了反應(yīng)進(jìn)行的效率，縮短了反應(yīng)時(shí)間，提高了甘油三酯的得率，PUFA?；w的轉(zhuǎn)化率在90％以上。
【IPC分類】C12P7/64
【公開號】CN105420300
【申請?zhí)枴緾N201510902861
【發(fā)明人】謝應(yīng)根, 王衛(wèi)飛, 王永華, 嚴(yán)慧玲, 楊博, 馬永鈞, 周小敏
【申請人】華南理工大學(xué)
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年12月9日