一株富鐵產(chǎn)朊假絲酵母菌株及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一株富鐵產(chǎn)航假絲酵母菌株及其應(yīng)用，屬于微生物發(fā)酵工業(yè)技術(shù)領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 鐵是人和動物維持生命和發(fā)育的必需營養(yǎng)物質(zhì)，是構(gòu)成血紅素、肌紅蛋白、細(xì)胞色 素等的重要成分，參與體內(nèi)氧的運(yùn)送和組織呼吸過程W及一系列新陳代謝反應(yīng)，并具有增 強(qiáng)免疫的功能。膳食中鐵的缺乏會引起貧血，免疫功能低下，并誘發(fā)多種疾病，例如貧血性 屯、臟病、舌炎、口角炎及各種感染性疾病和癌癥等。仔豬貧血癥也是由于缺鐵引起的一種W 血紅蛋白含量降低、紅細(xì)胞數(shù)減少、皮膚粘膜蒼白及生長受阻為特征的疾病，是嚴(yán)重危害周 齡哺乳仔豬的一種微量元素缺乏癥。
[0003] 微量元素鐵一般W無機(jī)鹽形態(tài)補(bǔ)充，但由于鐵離子對粘膜的刺激、胃腸道副作用 較大且吸收率低等原因限制了其使用。研究低毒高效補(bǔ)鐵劑一直是開發(fā)的方向。利用生物 轉(zhuǎn)化法，將無機(jī)狀態(tài)的鐵轉(zhuǎn)化成有機(jī)狀態(tài)的鐵，可W提高生物體對鐵的利用率，是開發(fā)新型 鐵源，提高鐵的利用率的主要措施。
[0004] 近年來，用微生物、特別是用酵母菌為載體富集人及動物所必需的微量元素W求 有機(jī)形態(tài)、制造成本較低廉而富有多種營養(yǎng)的微量元素產(chǎn)品已引起人們的關(guān)注。富鐵酵母 是W酵母為載體，將無機(jī)鐵轉(zhuǎn)化為有機(jī)鐵的發(fā)酵產(chǎn)品。已有實驗表明，富鐵酵母具有較高的 生物利用率。食用富鐵酵母安全性好，除含有高含量高吸收率的鐵元素外，還可提供相當(dāng)數(shù) 量的蛋白、必需氨基酸及豐富的維生素、甘露寡糖及一些重要的營養(yǎng)輔助因子等。W高鐵食 用酵母作為強(qiáng)化食品及飼料的鐵源是預(yù)防鐵缺乏和缺鐵性貧血的一項行之有效的措施。 陽〇化]現(xiàn)有的富鐵酵母產(chǎn)品多是由隨機(jī)得到的酵母菌種進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)富鐵酵母，對酵母 菌種缺少系統(tǒng)的篩選和育種過程。因此，酵母菌種的遺傳穩(wěn)定性差，不同酵母菌種對鐵的抗 性和富集效果差異較大，產(chǎn)品缺乏穩(wěn)定性，不利于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
[0006] 產(chǎn)航假絲酵母又名食用圓酵母，其蛋白質(zhì)和維生素B的含量都比啤酒酵母高，在 培養(yǎng)基中無需加入任何生長因子即可生長。目前，對于產(chǎn)航假絲酵母的研究主要集中于其 富砸、富含活性膚和乙硫氨酸抗性等方面，而對于產(chǎn)航假絲酵母的富鐵特性尚未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是提供一株富鐵產(chǎn)航假絲酵母菌株及其應(yīng)用。
[0008] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：
[0009] 一株富鐵產(chǎn)航假絲酵母菌株，其為產(chǎn)航假絲酵母（Candidautilis)BLCC4-0021， 已于2015年10月16日保藏于位于中國武漢市武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中屯、，其保 藏編號為CCTCCN0:M2015611。
[0010] 上述產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021在生產(chǎn)富鐵酵母產(chǎn)品中的應(yīng)用也是本發(fā)明保護(hù)的 范圍。
[0011] 本發(fā)明的另一目的是提供一種富鐵酵母產(chǎn)品，其活性成分為上述產(chǎn)航假絲酵母 化CC4-0021或其發(fā)酵產(chǎn)物。
[0012] 本發(fā)明中所述的發(fā)酵產(chǎn)物是指W產(chǎn)航假絲酵母為載體，將無機(jī)鐵轉(zhuǎn)化為有機(jī)鐵的 發(fā)酵產(chǎn)品，即富鐵酵母。
[0013] 上述富鐵酵母產(chǎn)品中，所述產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的發(fā)酵產(chǎn)物按照如下方法 制備：在含無機(jī)鐵的發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵上述產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021，得到發(fā)酵產(chǎn)物。
[0014] 所述含無機(jī)鐵的發(fā)酵培養(yǎng)基中的無機(jī)鐵選自硫酸亞鐵、硝酸鐵、Ξ氯化鐵、硫酸鐵 錠或硫酸鐵；優(yōu)選為硫酸亞鐵。
[0015] 所述無機(jī)鐵在所述含無機(jī)鐵的發(fā)酵培養(yǎng)基中的濃度為400-1200μg/mL;優(yōu)選為 400μg/血。
[0016] 上述方法中，發(fā)酵的溫度為23~28°C，發(fā)酵的時間為20~2地，發(fā)酵培養(yǎng)基的初 始抑為4.0~6.0。
[0017] 上述方法中，在所述發(fā)酵前，還包括如下步驟：
[0018] 將產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的斜面種子接種在滅菌后的種子培養(yǎng)基中，在 28-32°C搖床（180巧m)振蕩培養(yǎng)14-1化，得到液體種子液。
[0019] 所述種子培養(yǎng)基的組成為：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，蒸饋水 1000血。
[0020] 上述的富鐵酵母產(chǎn)品在作為飼料添加劑和/或食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑中的應(yīng)用也是本 發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0021] 本發(fā)明的第Ξ個目的是提供一種預(yù)防保育豬缺鐵性貧血的微生態(tài)制劑。
[0022] 該微生態(tài)制劑是由產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的發(fā)酵產(chǎn)物8-12份、硫酸亞鐵8-12 份、氯化鉆0. 04-0. 08份、硫酸銅0. 6-1. 0份、VBi2〇. 2-0. 4份、Vc8-12份、巧樣酸8-12份、 載體55-65份和乳酸菌復(fù)配而成；
[0023] 復(fù)配后的微生態(tài)制劑中，乳酸菌的活菌數(shù)大于或等于108c化/g。
[0024] 所述載體為玉米淀粉和石粉中的任一種或二者的混合物。
[00巧]優(yōu)選的，所述乳酸菌為植物乳桿菌LP化actobacillusplantarum)，已于2010年 06月21日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中屯、，其保藏編號為：CCTCCΜ2010150;記載在申請 人的另一項專利"一株可用于生物防腐保鮮的乳酸菌及其應(yīng)用"（CN101914475Β)中。 [00%] 優(yōu)選的，所述微生態(tài)制劑由產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的發(fā)酵產(chǎn)物10份、硫酸亞鐵 10份、氯化鉆0.06份、硫酸銅0.8份、VBi2〇. 3份、Vc10份、巧樣酸10份、載體60份和乳酸 菌復(fù)配而成；
[0027] 復(fù)配后的微生態(tài)制劑中，乳酸菌的活菌數(shù)為5X108c化/邑。
[0028] 載體為玉米淀粉和石粉的混合物，淀粉和石粉的質(zhì)量比為7:3。
[0029] 本發(fā)明的有益效果：
[0030] (1)本發(fā)明利用紫外誘變的方法選育出一株新的產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021，該菌 株具有高濃度無機(jī)鐵耐受性，在進(jìn)行高生物量發(fā)酵的同時還具有較高的轉(zhuǎn)鐵富鐵能力，該 菌株為高效富鐵的酵母菌株，可W用來制備富鐵酵母產(chǎn)品。
[0031] (2)本發(fā)明的菌株發(fā)酵生產(chǎn)富鐵產(chǎn)品的原料來源廣泛、操作簡便、發(fā)酵周期短，而 且酵母中有機(jī)鐵含量高，其對于飼料添加方面，安全無毒，對預(yù)防仔豬貧血及促生長作用均 極明顯，且改善了母豬的繁殖性能，提高了母豬初乳中鐵含量，通過給母豬補(bǔ)鐵間接給仔豬 補(bǔ)鐵，既避免仔豬應(yīng)激，又利于環(huán)境保護(hù)。
【附圖說明】
[0032] 圖1:富鐵產(chǎn)航假絲酵母生長曲線；
[0033] 圖2:鐵富集曲線；
[0034] 圖3:各試驗組仔豬照片。
【具體實施方式】
[0035] 結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，應(yīng)該說明的是，下述說明僅是為了解釋本 發(fā)明，并不對其內(nèi)容進(jìn)行限定。
[0036] 實施例1:菌株的紫外誘變篩選
[0037] 1材料與方法
[0038] 1. 1試驗設(shè)備：UV2000分光光度計、離屯、機(jī)、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、振蕩培養(yǎng)箱 等。
[0039] 1. 2試驗材料
[0040]1. 2. 1菌種
[0041] 產(chǎn)航假絲酵母（Candidautilis)，山東寶來利來生物工程股份有限公司生物研究 院保臧。
[0042] 1. 2. 2試劑
[0043] 硫酸亞鐵、鹽酸徑胺、鄰二氮菲、醋酸鋼，均是分析純。
[0044]1. 2. 3培養(yǎng)基配方
[0045] 斜面保存培養(yǎng)基：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，瓊脂15g，蒸饋水 1000血。
[0046] 種子培養(yǎng)基：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，蒸饋水lOOOmL。
[0047] 液體發(fā)酵培養(yǎng)基：同種子培養(yǎng)基。
[0048]1. 3方法