專利名稱：合成多糖、其制備方法以及含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有肝素的抗凝和抗血栓形成藥理學(xué)活性的新的合成多糖。
肝素屬于糖胺聚糖(GAG)家族，它們是天然不均一硫酸酯化的多糖。
肝素制劑是含有10-100個以上單糖單元的鏈的混合物。除了大小上的不同外，還存在著結(jié)構(gòu)上的不同，這表現(xiàn)在單糖的性質(zhì)和它們所攜帶的取代基上(L.Roden糖蛋白和糖胺聚糖的生物化學(xué)(Biochemistry ofGlycoproteins and Glycosaminoglycans),Lennarz W.J.編，PlenumPress,New York and London,267-371,1980)。
天然GAG的每個家族通常有一類藥理學(xué)活性。所有均可組合于可從天然產(chǎn)物得到的制劑中。因此，例如肝素和硫酸乙酰肝素具有抗血栓形成活性，所述活性與對多種凝固因子的同時作用有關(guān)。肝素可以催化，具體地講是通過抗凝血酶Ⅲ(AT Ⅲ)催化與血液凝固級聯(lián)反應(yīng)有關(guān)的兩種酶即Ⅹa因子和Ⅱa因子(或凝血酶)的抑制作用。低分子量肝素(LMWH)制劑含由4-30個單糖形成的鏈并且對Ⅹa因子作用的選擇性強于對凝血酶。
某些合成的寡糖，特別是在EP84999中描述的那些，經(jīng)抗凝血酶Ⅲ對Ⅹa因子有選擇性抑制，而對凝血酶沒有任何活性。
已知Ⅹa因子的抑制作用需要經(jīng)抗凝血酶結(jié)合區(qū)(ABR)使肝素與ATⅢ結(jié)合，而Ⅱa因子(凝血酶)的抑制作用需要經(jīng)ABR與AT(Ⅲ)結(jié)合，以及經(jīng)不太確定的結(jié)合區(qū)(TBR)與凝血酶結(jié)合。
對應(yīng)于肝素ABR區(qū)的合成寡糖是已知的，并在靜脈血栓形成中有抗血栓形成活性。在EP529715和EP621282和加拿大專利2040905中描述了這些化合物。
然而，這些寡糖在抑制動脈血栓形成時的效力因其不能抑制凝血酶而受到影響。
能夠經(jīng)AT(Ⅲ)激活劑抑制凝血酶的肝素型糖胺多糖的合成存在很大的困難，并且確實從未成功過。
為了再現(xiàn)凝血酶和Ⅹa因子抑制劑產(chǎn)物的活性，已提出通過不干擾生物活性的結(jié)構(gòu)(“間隔基”)連接兩個小寡糖(ABR和TBR)。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)可相對簡單地合成新多糖衍生物，而且所述衍生物有生物活性。具體地講，它們是抗凝血劑和抗血栓形成藥。此外，為了用合成方法生產(chǎn)這些多糖，可選擇性地修飾它們的結(jié)構(gòu)，具體地講，除去不想要的與特定蛋白質(zhì)相互作用的硫酸酯取代基。因此，可以得到作為強抗血栓形成藥和抗凝血劑的多糖，所述多糖還可逃避體內(nèi)蛋白質(zhì)如血小板因子4(PF4)的作用，所述血小板因子4可中和肝素對凝血酶的影響。
因此，已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，根據(jù)糖骨架所攜帶的烷基和硫酸酯基團的排列情況，硫酸酯化和烷基化多糖可以是強抗血栓形成劑和抗凝血劑。
更廣義地講，已發(fā)現(xiàn)通過制備多糖序列，可以準確地修飾GAG型活性以得到具有肝素特性的高活性產(chǎn)物。
因此，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明涉及含抗凝血酶Ⅲ-結(jié)合區(qū)的新的合成多糖及其鹽，特別是其可藥用鹽，所述結(jié)合區(qū)由共攜帶兩個羧酸功能基團和至少4個硫酸基團的5個單糖的序列組成，該結(jié)合區(qū)在其非還原末端連接一個凝血酶-結(jié)合區(qū)，所述凝血酶-結(jié)合區(qū)含有由選自己糖、戊糖或脫氧糖的10-25個單糖組成的序列，在所述單糖中，所有羥基均各自獨立地被(C1-C6)烷基醚化或以硫酸酯基團的形式被酯化。
優(yōu)選，本發(fā)明涉及上述定義的多糖和其鹽，特別是，其可藥用鹽，其特征在于其所有羥基均被甲基醚化或以硫酸酯基團的形式被酯化。
具體地講，本發(fā)明的產(chǎn)物是由下式代表的多糖
-其中波浪狀的線表示在吡喃糖環(huán)平面之下或之上的鍵，
表示含n個相同或不同單糖單元的多糖Po，所述多糖Po經(jīng)其異頭碳與Pe相連，
是選自己糖、戊糖和相應(yīng)脫氧糖的吡喃糖結(jié)構(gòu)單糖單元的圖示，所述單糖單元經(jīng)其異頭碳與另一單糖單元相連，并且所述單糖單元的羥基被相同或不同的基因-X取代，基團X選自(C1-C6)烷基和磺基，-n是10-25的整數(shù)，-Pe代表一個五糖結(jié)構(gòu)
其中-R1代表(C1-C6)烷基或磺基，-R1a代表R1，或與其所連接的氧原子以及同一環(huán)上帶有羧基的碳原子一起形成如下基團C-CH2-O-R代表(C1-C6)烷基，-W代表氧原子或亞甲基，或其一種鹽，特別是可藥用鹽。
總體上講，在本說明書中應(yīng)注意波浪狀的線代表吡喃糖環(huán)平面之下或之上的鍵。
Po中所含的單糖可以彼此相同或彼此不同，糖苷間的鍵可以是α或β型。
這些單糖優(yōu)選選自D或L己糖如阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖galose、艾杜糖、半乳糖和太羅糖(在這種情況下h=2)或選自D或L戊糖如核糖、阿拉伯糖、木糖和來蘇糖(在這種情況下h=2)。也可以使用其他單糖例如脫氧糖(h=1和/或-CH2OX=CH3)。
在五糖Pe的情況下，當單元W表示氧原子并且R1a如R1所定義時，這些五糖構(gòu)成了具體在專利EP300099、EP529715、EP621282和EP649854以及文獻中所描述的已知化合物。從文獻C.van Boeckel和M.Petitou,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.,1993,32,1671-1690中描述的合成子可得到所述化合物。
在五糖Pe的情況下，R1a與R1不同和/或W代表碳原子時，用構(gòu)成本發(fā)明另一方面的新合成子制備這些五糖。
在五糖Pe的情況下，當L-艾杜糖醛酸型單元被一個其構(gòu)象被橋鎖定的單元取代時，用構(gòu)成本發(fā)明另一方面的新合成子制備這些五糖。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明涉及用于制備式(Ⅰ)化合物的新中間體。
多糖部分Po可由10-25個烷基化和二-或三硫酸酯化的單糖單元組成。
多糖部分Po可由10-25個烷基化和單-或二硫酸酯化的單糖單元組成。
多糖部分Po可由10-25個不帶電荷的和/或帶部分電荷的和/或全部帶電荷的烷基化單糖單元組成。
帶電荷或不帶電荷的單元可分散在整個鏈中，相反，也可將其集中在帶電荷或不帶電荷的糖區(qū)中。
鍵可以是1,2；1,3；1,4；1,5；1,6；和α或β鍵。
在本說明書中，已選用構(gòu)象1C4代表L-艾杜糖醛酸，用4C4代表D-葡萄糖醛酸，但眾所周知，單糖單元的構(gòu)象在溶液中一般會發(fā)生改變。因此，L-艾杜糖醛酸可以是1C42So或4C1構(gòu)象。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是式(Ⅰ.A.)的化合物和其鹽，特別是其可藥用鹽
其中
表示多糖Po的具體家族，所述多糖Po經(jīng)其異頭碳與(Ⅰ)所定義的Pe相連，
如(Ⅰ)所定義，-OX如(Ⅰ)所定義，對于相同的單糖，OX可以相同或不同，-[]m中所含的單糖形成重復(fù)m次的二糖，[]t中所含的單糖形成重復(fù)t次的二糖，-m是1-8,t是0-5,p是0-1，應(yīng)理解5≤m+t≤12。
優(yōu)選的化合物是其陰離子對應(yīng)于式(Ⅰ.1)的鹽以及相應(yīng)的酸
其中t代表5、6或7，陽離子是可藥用單價陽離子。其陰離子對應(yīng)于式(Ⅰ.2)的鹽以及相應(yīng)的酸也是有利的，
其中t代表5、6或7，陽離子是可藥用單價陽離子。
其陰離子具有式(Ⅰ.3)的鹽以及相應(yīng)的酸是特別優(yōu)選的
其中m代表1、2或3,t代表2、3、4或5，陽離子是可藥用單價陽離子。
根據(jù)本發(fā)明其他優(yōu)選的化合物是式(Ⅱ.A)的化合物可其可藥用鹽
其中
代表多糖Po的具體家族，所述多糖經(jīng)其異頭碳與(Ⅰ)所定義的Pe相連，
如(Ⅰ)所定義，-OX如(Ⅰ)所定的，對于相同的單糖，OX可以相同或不同，-[]m’中所含的單糖形成重復(fù)m’次的二糖，[]t’中所含的單糖形成重復(fù)t’次的二糖，[]p’中所含的單糖形成重復(fù)p’次的二糖，-m’是1-5,t’是0-24,p’是0-24，應(yīng)理解10≤m’+t’≤25。
本發(fā)明優(yōu)選的鹽是其陽離子選自堿金屬陽離子的鹽，更優(yōu)選的是其中陽離子是Na+或K+的鹽。
下列多糖是特別優(yōu)選的·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]5-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]6-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]11-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]13-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]15-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-O-2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]5-O-2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1 4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽。
本發(fā)明還涉及制備式(Ⅰ)化合物的方法，其中，在第一步中，合成所需多糖(Ⅰ)的完全保護的前體，所述前體含有Pe區(qū)(該區(qū)如反應(yīng)路線1所示)的保護的前體，所述Pe區(qū)在其非還原末端連接著一個硫酸酯化的多糖Po的保護前體，在第二步中，引入和/或解蔽帶有負電荷的基團。反應(yīng)路線1-當W=O或C時五糖Pe的結(jié)構(gòu)；字母DEFGH用來表示所涉及的單糖
在第一種方法中，可以使用五糖的四糖部分EFGH的完全保護的前體。然后加入在其還原末端含有Pe所缺單元D的多糖Po，以便在偶聯(lián)后得到整個ABR。
在另一種方法中，可以使用五糖的二糖部分GH的完全保護的前體。然后加入在其還原末端含有Pe所缺單元DEF的TBR多糖Po前體，以便在偶聯(lián)后得到整個ABR。
這些Pe前體按照以上的描述從文獻中記載的或構(gòu)成本發(fā)明一部分的合成子合成。
Po的多糖前體部分根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的反應(yīng)，用合成寡糖的方法(G.J.Boons，四面體，1996,52,1095-1121)進行合成，或當將一個供給糖苷鍵的寡糖與一個接受糖苷鍵的寡糖偶聯(lián)以生成其大小等于兩個反應(yīng)物質(zhì)大小總合的另一個寡糖時，用寡糖來合成。
重復(fù)該反應(yīng)順序直至得到所需的式(Ⅰ)化合物。根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的規(guī)則，所需最終化合物上電荷的性質(zhì)和分布確定了在合成各步驟中所用化學(xué)物質(zhì)的性質(zhì)。
制備本發(fā)明Po前體的優(yōu)選方法如下反應(yīng)路線2所示反應(yīng)路線2-TBR保護的前體的合成
術(shù)語“臨時性的”是指僅在有限的步驟中保留的取代基，術(shù)語“半永久性的”是指在大部分步驟中保留的取代基，術(shù)語“永久性的”是指一直保留到合成結(jié)束的取代基；永久性取代基在最后的步驟中脫除。某些永久性取代基可以構(gòu)成最終分子的一部分。
在反應(yīng)路線2中，(a)表示供給糖苷鍵的單糖，其中Z是羥基功能基的臨時保護基，Y是異頭碳活化子，各Tn可以相同或不同，是其它所有羥基功能基的臨時性、半永久性或永久性取代基。含有未取代的羥基的化合物(b)表示接受糖苷鍵的單糖，其中，各Tn可以相同或不同，是羥基的臨時性、半永久性或永久性取代基。T1是異頭位置的臨時性、半永久性或永久性保護基。當需要激活異頭碳時將其除去。
為了合成本發(fā)明的化合物，將糖苷鍵供體(a)與糖苷鍵接受體(b)反應(yīng)生成二糖(c)。
通過脫除T1并引入Y將以上得到的二糖(c)特異性地轉(zhuǎn)變成糖苷鍵供體(d)和/或通過脫除Z將其轉(zhuǎn)變成糖苷鍵接受體(e)。
然后，將糖苷鍵供體(d)與糖苷鍵接受體(e)反應(yīng)生成其中t表示1的四糖(f)。
重復(fù)該反應(yīng)順序生成其中t大于1的寡糖或多糖(f)。
還可以使用反應(yīng)路線2中所示的方法制得大量完全保護的寡糖或多糖如(g)，其中寡糖[]m和[]t是本發(fā)明化合物不同帶電區(qū)域的完全保護的前體。
在該方法隨后的步驟中，將化合物如(f)和(g)轉(zhuǎn)變成糖苷鍵供體并與Pe完全保護的前體的非還原末端單元偶聯(lián)。
如上所述，當(g)是與完全保護的寡糖(該寡糖是Pe結(jié)構(gòu)殘基的前體)的非還原末端單元偶聯(lián)時，糖苷鍵供體多糖(g)的非還原末端單元的寡糖可以構(gòu)成Pe的一部分。
本發(fā)明的化合物可從它們的完全保護的多糖前體開始用如下順序的反應(yīng)獲得-通過除去在骨架形成期間用于保護它們的Tn基團將需轉(zhuǎn)化為磺基的醇功能基和羧酸脫保護，然后-隨后引入磺基。
本發(fā)明的化合物自然可使用寡糖合成領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的各種策略制備出來。
上述方法是本發(fā)明的優(yōu)選方法。但式(Ⅰ)化合物也可采用糖化學(xué)的其它已知方法制備，例如在P.M.Collins和R.J.Ferrier的“單糖及其化學(xué)和它們在天然產(chǎn)物中的作用”(Monosaccharides,Their chemistry andtheir roles in natural products),J.Wiley&sons,1995和G.J.Boons，四面體(Tetrahedron),1996,52,1095-1121。
當W表示氧原子并且R1a是R1時，五糖Pe部分的前體按照寡糖合成方法制備，尤其是按照專利EP84999、EP301618、EP454220和EP529715以及專利申請EP93204769和EP94202470中所述的方法制備。當采取完全保護時，可使用適宜的保護基在非還原末端單元(D)的4位獲得游離羥基。然后采用已知的寡糖合成方法將Pe的完全保護的前體在該位偶合。
其中W表示碳原子并且R1a是R1的五糖Pe
其中R是R1的五糖Pe如式(Ⅰ)所定義，它可由下式的合成子獲得
其中T1和Tn可以相同或不同，表示臨時性的、半永久性或永久性的取代基，Z是羥基保護基，它自身可按照上述的C.Van Boeckel和M.Petitou的標準方法，通過產(chǎn)游離基單糖和含雙鍵的單糖間的游離基反應(yīng)，然后將所得的C-二糖轉(zhuǎn)化為合成子(Ⅱ.1)的合成方法獲得。
式(Ⅱ.1)的合成子，它尤其可用于合成式(Ⅱ)化合物，其結(jié)構(gòu)式為
(Ⅱ.1)或化合物90該合成子按照下面的路線圖22描述的反應(yīng)路線制備。
其中取代基R1a構(gòu)成鎖定構(gòu)型的L-艾杜糖醛酸單元一部分的下式的五糖Pe
其中R和R1如式(Ⅰ)所定義，W表示氧原子，可由下式的合成子獲得
其中T1和Tn可以相同或不同，表示臨時性的、半永久性或永久性的取代基，Z是羥基保護基，它自身可按照M.K.Guriar等在文獻四面體通訊(Tetrahedron letters),1995,36,11,1937-1940,1933-1936和1994,35,14,2241-2244中描述的方法合成獲得。
式(Ⅲ.1)的合成子，它尤其可用于合成式(Ⅲ)化合物，其結(jié)構(gòu)式為
該合成子按照下面的路線圖34描述的反應(yīng)路線制備。
中間體(Ⅱ.1)和(Ⅲ.1)是新中間體，它們尤其可用于制備本發(fā)明的式(Ⅰ)化合物。
五糖Pe可由二糖合成子(Ⅱ.1)或(Ⅲ.1)以上述C.A.A.Van Boeckel和M.Petitou的Angew.Chem.Int.Ed.Engl.出版物中描述的方法獲得。
上面采用的術(shù)語半永久性基團應(yīng)指糖基化反應(yīng)后當糖骨架含有所需數(shù)量的單元時，可首先除去的基團，而不除去或不會不利地影響其它基團的存在，由此可將所希望的功能基引入到它們占有的位置上。
永久性基團是在引入代替半永久性基團的功能基期間能夠維持OH功能基保護作用的基團。
這些基團選自那些能夠與在半永久性基團除去之后所引入的功能基相容的基團。另外它們是對于引入這些功能基的反應(yīng)而言是惰性的基團并且它們的除去不會對這些功能基產(chǎn)生不利影響。
依據(jù)本發(fā)明，永久性基團優(yōu)選是(C1-C6)烷基。
半永久和/或臨時性基團的實例可列舉芐基和乙酰基、乙酰丙?；?、對甲氧基芐基等。
目的化合物的艾杜糖醛酸單元的3位取代基及取代基R1可存在于起始的合成子中。
在制備化合物(Ⅰ)的方法中使用的保護基是那些在糖化學(xué)中常用的，例如TW Greene的“有機合成中的保護基”(Protective Groups inOrganic Synthesis)中的實例(John Wiley&sons,New York,1981)。
保護基最好選自，例如乙?；?、鹵代甲基、苯甲酰基、乙酰丙?；?、芐基、取代的芐基、任意取代的三苯甲基、四氫吡喃基、烯丙基、戊烯基、叔丁基二甲基甲硅烷基(tBDMS)或三甲基甲硅烷基乙基等。
活化基團是那些糖化學(xué)中常用的，例如G.J.Boons，四面體(Tetrahedron),1996,52,1095-1121中的實例。這些活化基團選自例如亞氨酸酯、硫糖苷、戊烯基糖苷、黃原酸酯、亞磷酸酯和鹵原子。
上述方法可獲得鹽形式的本發(fā)明化合物。為獲得相應(yīng)的酸，將鹽形式的本發(fā)明化合物與酸形式的陽離子交換樹脂接觸。
為獲得所需的鹽，然后可將酸形式的本發(fā)明化合物用堿中和。
為制備式(Ⅰ)化合物的鹽，可使用與式(Ⅰ)化合物形成可藥用鹽的任何無機或有機堿。
優(yōu)選使用氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣或氫氧化鎂作為堿。式(Ⅰ)化合物的鈉或鈣鹽是優(yōu)選的鹽。
在該方法的步驟(a)中，使用的保護基是糖化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員常用的那些，例如按照EP84999或TW Greene的“有機合成中的保護基”(Protective Groups in Organic Synthesis),J.Wiley&sons,1995中所述的那些。
這樣獲得的式(Ⅰ)化合物可任意地被成鹽。
上面的式(Ⅰ)化合物也包括其中一個或多個氫或碳原子被它們的放射性同位素，如氚或碳-14替代的那些化合物。這樣標記的化合物可用于藥代動力學(xué)、代謝或研究工作中，以及在生物化學(xué)試驗中作為配體。
本發(fā)明的化合物構(gòu)成了生化和藥理研究的主題，這顯示了它們具有十分有益的性質(zhì)。
本發(fā)明的化合物與AT Ⅲ選擇性結(jié)合的親和力等于或大于肝素，并具有肝素的抗凝和抗血栓形成特性。
按照J.Reyers等在“血栓形成研究”(Thrombosis Research),1980,18,669-674中描述的方法，在組織促凝血酶原激酶誘發(fā)的靜脈郁血的大鼠模型中，以及在按照Umetsu等在Thromb.Harmost.,1978,39,74-83中所述的通過在頸動脈和頸靜脈之間植入分路形成的大鼠動脈血栓形成模型中，通過靜脈內(nèi)和皮下途徑給藥評價了式(Ⅰ)產(chǎn)物總的抗血栓形成活性。在這兩個實驗?zāi)Ｐ椭?，本發(fā)明化合物的ED50與其它已知的合成肝素類化合物至少在相同的水平上或較它們的ED50要低(ED50介于5-500μg/kg)。本發(fā)明的化合物具有特定的作用，它們的抗凝和抗血栓形成活性特別有益。
基于它們的生化和藥理活性，本發(fā)明的化合物是特別有用的藥物。它們的毒性與它們的用途完全相容。它們還十分穩(wěn)定并且作為藥物特定產(chǎn)品的活性成分尤其適合。
此外，本發(fā)明的化合物不會被大劑量的陽離子血小板蛋白，如血栓形成過程中在這些蛋白激活期間釋放的血小板因子4(PF4)所中和。本發(fā)明的化合物對治療和預(yù)防動脈和靜脈血栓形成尤其有益。
它們可用于各種由凝血系統(tǒng)的止血狀況改變所引起的疾病，尤其是在心血管和腦血管系統(tǒng)障礙中表現(xiàn)出來的病癥，例如與動脈粥樣硬化和與糖尿病有關(guān)的血栓栓塞，如非穩(wěn)定性心絞痛、中風、血管成形術(shù)、動脈內(nèi)膜切除術(shù)和血管內(nèi)修復(fù)術(shù)后的再狹窄；或者與血栓溶解后的血栓再形成、梗塞、缺血性癡呆、外周動脈疾病、血液透析和心房纖維性顫動有關(guān)的血栓栓塞，或在應(yīng)用主動脈冠脈搭橋術(shù)的人造血管期間的血栓栓塞。這些產(chǎn)物另外可用于治療或預(yù)防靜脈血栓栓塞，例如肺栓塞。它們可用于預(yù)防或治療在外科介入術(shù)期間出現(xiàn)的或與其他疾病，如癌癥和細菌或病毒感染同時出現(xiàn)的血栓形成并發(fā)癥。當它們在假體安裝期間使用時，本發(fā)明的化合物可涂覆假體，從而使它們具有血液相容性。特別是可將它們與假體(移植片固定膜)相結(jié)合。在這種情況下，可任意按照EP649854所述，在還原或非還原末端引入一適宜的臂對它們進行化學(xué)修飾。
本發(fā)明的化合物在用帶小孔的氣球進行的動脈內(nèi)膜切除術(shù)期間還可用作助劑。
本發(fā)明的化合物特別穩(wěn)定，因此特別適于作為作為藥物的活性成分。
在另一方面，本發(fā)明的主題是一種含有如上定義的合成多糖作為活性成分的藥物組合物。
本發(fā)明優(yōu)選涉及含有式(Ⅰ)、(Ⅰ.1)、(Ⅰ.2)或(Ⅰ.3)化合物或者其一種可藥用鹽作為活性成分并任意地含有一種或多種惰性的適宜賦形劑的藥物組合物。
在每劑量單位中，活性成分以適于預(yù)想的每日劑量的量存在。通常，按照計劃給藥的劑量和類型來調(diào)整每劑量單位，例如片劑、明膠膠囊等，扁囊劑、安瓿、糖漿等，滴劑和透皮或透粘膜貼劑，使這樣的一個劑量單位含有0.1-100mg，優(yōu)選含有0.5-50mg的活性成分。
本發(fā)明的化合物還可與其他對所需的治療有用的活性成分聯(lián)合使用，例如抗血栓形成劑、抗凝劑或抗血小板凝集劑，如雙嘧達莫、阿司匹林、噻氯匹定、氯吡格雷或糖蛋白Ⅱb/Ⅲa復(fù)合物的拮抗劑。
將藥物組合物進行配制以對包括人的哺乳動物給藥，以治療上述疾病。
如此獲得的藥物組合物可有益地呈現(xiàn)各種形式，如可注射或可飲用的溶液、片劑、包衣片或明膠膠囊?？勺⑸淙芤菏莾?yōu)選的藥物形式。本發(fā)明的藥物組合物尤其可用于預(yù)防或治療血管壁疾病，例如動脈粥樣硬化、在術(shù)后、腫瘤形成或血凝失調(diào)后觀察到的凝固性過高，它們是由細菌性、病毒性或酶激活劑引發(fā)的。劑量可隨患者的年齡、體重和健康狀況，所醫(yī)治疾患的性質(zhì)和嚴重程度以及給藥途徑有很大變化。劑量為每次給藥約0.1-100mg，優(yōu)選0.5-50mg，每日一次或多次，以連續(xù)或間隔方式給藥。
本發(fā)明還有一主題是含有上述一種化合物作為活性成分并任意地與另一種活性成分結(jié)合的藥物組合物。制備這些組合物以便于經(jīng)消化道或非胃腸途徑給藥。
在本發(fā)明的口服、舌下、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、透皮、透粘膜、局部或直腸給藥的藥物組合物中，活性成分可與標準藥物賦形劑混合以單位給藥形式給藥于動物和人。適宜的給藥單位形式包括如片劑、明膠膠囊、粉劑、顆粒的口服形式和口服混懸液和溶液，舌下和頰給藥形式，皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)或眼內(nèi)給藥形式以及直腸給藥形式。
當制備片劑形式的固體組合物時，將主要活性成分與藥物賦形劑，如明膠、淀粉、乳糖、硬脂酸鎂、滑石或阿拉伯膠等混合。片劑可用蔗糖或其他適宜的材料包衣，或者可經(jīng)處理使它們具有緩慢或延遲釋放活性成分的功能以及使它們連續(xù)地釋放預(yù)定量的活性成分。
明膠膠囊制劑可通過將活性成分與稀釋劑混合，然后傾入軟或硬明膠膠囊中獲得。
可在水中分散的粉末或顆?？珊信c分散劑、潤濕劑或助懸劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)以及甜味劑或增味劑混合的活性成分。
直腸給藥利用的栓劑可用在直腸溫度下熔融的粘合劑，例如可可脂或聚乙二醇制備。
對于非胃腸、鼻內(nèi)或眼內(nèi)給藥，利用的是無菌的可注射溶液、等滲的鹽溶液或水懸浮液，它們含有藥理學(xué)上相容的分散劑和/或潤濕劑，例如丙二醇或丁二醇。
對于透粘膜給藥，活性成分可在促進劑如膽汁鹽的存在下或在親水性聚合物的存在下進行配制，所述親水性聚合物是例如羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、果膠、淀粉、明膠、酪蛋白，丙烯酸、丙烯酸酯和它們的共聚物，乙烯基聚合物或共聚物，乙烯醇，烷氧基聚合物，聚環(huán)氧乙烷聚合物和聚醚類，或者它們的混合物。
活性成分也可任意地與一種或多種賦形劑或添加劑一起配制為微囊形式。
活性成分還可與環(huán)糊精，例如α-、β-或γ-環(huán)糊精，2-羥丙基-β-環(huán)糊精或甲基-β-環(huán)糊精形成配合物形式。
活性成分也可通過含有活性成分的小球或者通過引入到血管中的血管內(nèi)擴張器釋放。這樣不會對活性成分的藥理作用產(chǎn)生不利影響。
皮下給藥是優(yōu)選的途徑。
下面的方法、制備例和反應(yīng)路線說明了用于獲得本發(fā)明多糖的各種中間體的合成。
下面的實施例也是說明而非限制本發(fā)明。
采用下面的縮略語TBDMS叔丁基二甲基甲硅烷基；Lev乙酰丙?；?；Bn芐基；Bz苯甲?；?；TLC薄層層析；Olm三氯亞氨代乙?；?trichloroacetimidyl)；LSIMS液態(tài)次級離子質(zhì)譜；ESIMS電子噴霧離子化質(zhì)譜；TMS三甲基甲硅烷基；TSP三甲基甲硅烷基四氘代丙酸鈉；Tf三氟甲磺酸；MS分子篩；All烯丙基；PMB對甲氧基芐基；SE三甲基甲硅烷基乙基。
Dowex,Sephadex,Chelex和Toyopearl為注冊商標。在下述的方法、制備例和實施例中，有關(guān)催化亞氨酸酯偶聯(lián)、乙酰丙酸酯裂解、催化硫糖苷偶聯(lián)、皂化、甲基化和對甲氧基芐基的選擇性脫保護、寡糖和多糖經(jīng)芐基醚或酯的氫解進行的脫保護和硫酸化、酯的皂化或硫酸化的通用操作均可利用適宜的中間體按下述通用方法進行。
通用方法方法1．經(jīng)三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯催化與亞氨酸酯的偶聯(lián)。
在氬氣氛和-20℃下，在4埃分子篩的存在下往亞氨酸酯和糖基受體的二氯甲烷溶液(17.5ml/mol)中加入三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯的二氯甲烷溶液(1M,0.2mol/mol亞氨酸酯)。10-20分鐘后(TLC)，加入固體碳酸氫鈉。將溶液過濾，用水洗滌，干燥并蒸發(fā)至干。方法2．乙酰丙?；牧呀?。
將待脫保護的化合物溶于2/1乙醇/甲苯混合液(42ml/mmol)中并加入乙酸肼(5mol/mol)。將混合物攪拌15-30分鐘(TLC)后濃縮。方法3．經(jīng)N-碘代琥珀酰亞胺/三氟甲磺酸銀催化與硫糖苷的偶聯(lián)。
在無光化性玻璃制造的園底燒瓶中，在有4埃分子篩存在下，將硫糖苷和糖基受體溶于無水甲苯中(18ml/mol硫糖苷)。將該混合物在室溫攪拌1小時。使其冷卻到0℃并加入N-碘代琥珀酰亞胺(3mol/mol硫糖苷)，然后加入三氟甲磺酸銀(0.28mol/mol硫糖苷)。10-15分鐘后(TLC)，加入固體碳酸氫鈉。過濾后，溶液用1M硫代硫酸鈉水溶液和水洗滌，干燥并蒸發(fā)。方法4.皂化、甲基化和對甲氧基芐基的選擇性脫保護。
酯的皂化。將需皂化的化合物溶于1/1二氯甲烷/甲醇混合液中(4ml/mmol)。加入甲醇鈉并將該混合物攪拌20分鐘，然后用Dowex50H+樹脂中和。將溶液濃縮，該化合物無需純化即可用于下步反應(yīng)。
甲基化。于0℃往上述粗產(chǎn)物和碘甲烷在N,N-二甲基甲酰胺(7ml/mmol)中的混合物中少量多次加入氫化鈉。待反應(yīng)完成后，將混合物傾入水中，用乙酸乙酯萃取。有機相用水洗滌，干燥并蒸發(fā)至干。
對甲氧基芐基的裂解。將上述化合物溶于9/1乙腈/水混合液(20ml/mmol)。于0℃，加入硝酸鈰銨(0.5mol/mol)。將該反應(yīng)混合物攪拌2小時(TLC監(jiān)測)，加入飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取，干燥并蒸發(fā)。方法5．寡糖和多糖的脫保護和硫酸化。
芐基醚和芐基酯的氫解。將化合物的冰醋酸溶液在氫氣氛下(40巴)、在5％Pd/C催化劑(兩倍于化合物的質(zhì)量)的存在下攪拌6-12小時(TLC)。過濾后，產(chǎn)物可直接用于下步。
酯的皂化。將5M氫氧化鈉水溶液(加入量以添加結(jié)束時氫氧化鈉的濃度為0.5M為準)加到酯的甲醇溶液中(150ml/mmol)。2-5小時后，加入水，使混合物通過SephadexG-25凝膠柱(1.6×115cm)，用水洗脫。濃縮洗脫液，使它們通過Dowex50H+柱(2ml)并凍干。在該階段，經(jīng)1HNMR證實，所有的保護基均被脫去。如果需要，可將產(chǎn)物進一步氫化和/或皂化。
硫酸化。將三乙基胺/三氧化硫配合物(5mol/mol羥基功能基)加到需硫酸化的化合物的二甲基甲酰胺溶液(5mg/ml)中。于55℃一天后，將該溶液加載到SephadexG-25柱(1.6×115cm)的頂端，用0.2M氯化鈉洗脫。將含產(chǎn)物的餾分濃縮并經(jīng)同樣的柱用水洗脫脫鹽。凍干后獲得終產(chǎn)物。
反應(yīng)路線3單糖6和9的合成
制備例12,4,6-三-O-乙酰基-3-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(2)。
將1,2,4,6-四-O-乙?；?3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖1(69g,O.19mmol),(B.Helferich等，J.prakt.Chem.,132,321(1932))溶于甲苯(580ml)。加入乙硫醇(28ml,0.38mmol)，然后滴加三氟硼烷乙醚化物的溶液(1M甲苯溶液，190ml)。將該混合物攪拌1.5小時(TLC)，加入固體碳酸氫鈉，過濾，用水洗滌，干燥并濃縮。經(jīng)硅膠柱層析(3/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)得到2(37g,54％)。[α]D-26(c=1，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3),δ5.05-4.96(m,2H,H-2,H-4),4.39,(d,1H,J=9.5Hz,H-1),4.18-4.12(m,2H,H-6,H-6′),3.60(m,1H,H-5),3.50(dd,1H,J=9.3 Hz,H-3),3.41 (s,3H,OCH3),2.65-2.53(m,2H,SCH2CH3),2.12,2.11,2.09(3s,9H,3 Ac),1.25(t,1H,SCH2CH3)。制備例24,6-O-亞芐基-3-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(3)。
將化合物2(37g,0.1mmol)溶于1/2甲醇/二氯甲烷混合液(1.5L)中。加入2M甲醇鈉溶液(150ml)。室溫0.5小時后，該混合物用Dowex50(H+)樹脂中和，過濾并濃縮。
將上面的粗品化合物溶于無水乙腈(1L)并加入α,α-二甲氧基甲苯(30ml,0.2mol)和樟腦磺酸(2.3g,10mmol)。將該混合物攪拌1.5小時(TLC)，加入三乙胺(1.4ml)，濃縮。所得殘余物在乙醚中沉淀，得到3(27g,81％)。[α]D-60(c=1.63，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)δ7.51-7.34(m,5H,Ph),5.55(s,1H,C6H5CH),4.56(d,1H,J=9.2Hz,H-1),2.75(m,2H,SCH2CH3),1.32(t,3H,SCH2CH3)。
C16H22O5S(326.41)的元素分析計算值C,58.58；H,6.79；S,9.82。實測值C,58.99；H,6.74；S,9.75。制備例32-O-芐基-4,6-O-亞芐基-3-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(4)。
于0℃，將氫化鈉(2.00g,83.3mmol)加到3(23g,71.0mmol)和芐基溴(11ml,93.0mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(200ml)溶液中。將該混合物攪拌2小時(TLC)，加入甲醇，將反應(yīng)混合物傾入水中。用乙酸乙酯萃取，用水洗滌，干燥并濃縮。將殘余物在乙醚中沉淀，獲得4(18.8g,63％)。熔點123℃。[α]D-35(c=0.63，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)δ7.50-7.25(m,10H,2Ph),5.55(s,1H,C5H5CH),4.54(d,1H,J=9.7Hz,H-1),4.34(m,1H,H-6),3.75(t,1H,J=10.2Hz,H-6′),3.65(s,3H,OCH3),3.60-3.33(m,4H,H-5,H-4,H-3,H-2),2.75(m,2H,SCH2CH3),1.32(t,3H,SCH2CH3)。
C23H28O5S(416.54)的元素分析計算值C,66.32；H,6.78；S,7.70。實測值C,66.25；H,7.28；S,7.54。制備例42,6-二-O-芐基-3-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(5)在氬氣氛下，將三氟乙酸酐(0.65ml,4.50mmol)的三氟乙酸(16ml,0.21mmol)溶液加到4(28.8g,69.0mmol)和三乙基甲硅烷(33ml,0.21mmol)的二氯甲烷(120ml)溶液中。將該混合物攪拌2小時，用乙酸乙酯稀釋，加入1M氫氧化鈉水溶液調(diào)至pH9。該混合物用乙酸乙酯萃取，用水洗滌，干燥并蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)硅膠層析純化(3/1，然后2/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到5(17.4g,60％)。[α]D-47(c=1，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(m,10H,2Ph),4.47(d,1H,J=9.3Hz,H-1),3.66(s,3H,OCH3),3.61-3.40(m,2H,H-4 and H-5),3.36-3.19(m,2H,H-2and H-3),2.73(m,2H,SCH2CH3),1.31(t,3H,SCH2CH3)。
C23H30O5S(418.55)的元素分析計算值C,66.00；H,7.22；S,7.66。實測值C,65.62；H,7.28；S,7.21。制備例52,6-二-芐基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(6)將化合物5(17.3g,41.4mmol)溶于無水二氧六環(huán)(400ml)中。加入乙酰丙酸(9.60g,83.0mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(16g,86mmol)和4-二甲氨基吡啶(1g,8.3mmol)。將該混合物攪拌4小時，用乙酸乙酯萃取，依次用5％硫酸氫鉀水溶液、水、飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(6/1甲苯/乙酸乙酯)，得到6(19.9g,93％)。[α]D-5(c=1.46，二氯甲烷)。LSIMS，正模式m/z硫甘油+NaCl,539(M+Na)+；硫甘油+KF,555(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ7.40-7.20(m,10H,2Ph),4.92(m,1H,H-4),2.8-2.4(m,6H,SCH2CH3和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16(s,3H,O(CvO)CH2CH2(C:O)CH3),1.32(t,1H,J=7.3Hz,SCH2CH3)。
C28H36O7S(516.65)的元素分析計算值C,65.09；H,7.02；S,6.21。實測值:C,65.30；H,7.03；S,5.75。制備例64,6-O-亞芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(7)將三氟甲磺酸(1.10ml,0.012mol)加到市售的3-O-甲基葡糖(135g,0.7mol)的烯丙醇(1L)懸浮液中。將該混合物于120℃加熱2小時。加入三乙胺(2ml)中和并蒸發(fā)至干。
將α,α-二甲氧基甲苯(136ml,0.9mol)和樟腦磺酸(25g,0.13mmol)加到溶于N,N-二甲基甲酰胺(2L)的上述粗品化合物中。該混合物在真空下于80℃加熱1小時。加入三乙胺(21ml)中和，用乙酸乙酯萃取，用水洗滌，干燥并濃縮，得到固體的α/β混合物=3/2,(144g,57％)。該混合物用乙醇重結(jié)晶，得到純的7-α(60g,26％)。部分母液經(jīng)硅膠柱層析(3/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到純的7-β(7.6g),7-α/β(6.8g)和純的7-α(1.4g)。
化合物7-β:[α]D-43(c=1，二氯甲烷)。熔點131℃。
1H NMR(CDCl3)δ7.50-7.26(m,5H,Ph),6.01-5.90(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.55(s,1H,C6H5CH),5.38-5.32(m,2H,OCH2(CH:CH2)),4.47(d,1H,J=7.5Hz,H-1),4.42-4.32(m,2H,H-6′and OCH2(CH:CH2)),4.21→4.15(m,1H,OCH2(CH:CH2)),3.80(dd,1H,J=10.2 Hz,H-6),3.67(s,3H,OCH3)。
C17H22O6(322.36)的元素分析計算值C,63.34；H,6.88。實測值C,63.23；H,7.12。制備例72-O-乙酰基-4,6-O-亞芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(8)將7(11.5g,35.7mmol)溶于二氯甲烷(100ml)并加入乙酸酐(4.0ml,42.8mmol)、三乙胺(6.40mg,46.4mmol)和4-二甲氨基吡啶(440mg,3.60mmol)。該混合物攪拌2小時后(TLC)，依次用5％硫酸氫鉀水溶液、水、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，干燥并蒸發(fā)至得到固體8(12.3g,95％)。熔點115℃。[α]D-68(c=1，二氯甲烷)。LSIMS，正模式m/z硫甘油+NaCl,387(M+Na)+；硫甘油+KF,403(M+K)+。1HNMR(CDCl3)δ7.51-7.34(m,5H,Ph),5.98-5.78(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.56(s,1H,C6H5C6H5CH),5.32-5.17(m,2H,OCH2(CH:CH2)),4.99(dd,J=8Hz,1H,H-2),4.55(d,J=7.9Hz,1H,H-1),4.39-4.29(m,2H,H-6 andOCH2(CH:CH2)),4.14-4.04(m,1H,OCH2(CH:CH2))3.82(t,J=10.2Hz,1H,H-6′),3.60(s,3H,OCH3),2.12(s,3H,Ac)。
C19H24O7(366.39)的元素分析計算值C,62.63；H,6.64。實測值C,62.63；H,6.64。制備例82-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(9)于0℃將三氟乙酸酐(306μl,2.10mmol)的三氟乙酸(10ml)溶液加到8(12.0g,33.3mmol)和三乙基甲硅烷(21.3ml,133mmol)的無水二氯甲烷(50ml)溶液中。將該混合物攪拌4小時(TLC)，用乙酸乙酯稀釋并加入1M氫氧化鈉水溶液調(diào)至pH9。該混合物用乙酸乙酯萃取，用水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(8/5環(huán)己烷/丙酮)，得到純的9(10g,82％)。[α]D-40(c=1.06，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)δ7.35-7.28(m,5H,Ph),5.87-5.79(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.28-5.14(m,2H,OCH2(CH:CH2)),4.43(d,1H,J=7.9Hz,H-1),4.41-4.28(m,1H,OCH2(CH:CH2)),4.10-4.02(m,1H,OCH2(CH:CH2),3.77-3.75(m,2H,H-6和H-6′),3.51(s,3H,OCH3),3.30(dd,1H,J=8.9Hz,H-3),2.8(d,1H,OH)。
C19H26O7(366.39)的元素分析計算值C,62.28；H,7.15。實測值C,61.73；H,7.19。
反應(yīng)路線4二糖13和14的合成
制備例92-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-4-O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(10)將硫代糖苷6(17.4g,33.7mmol)和糖基受體9(10.3g,28.1mmol)溶于二氯甲烷(150ml)。加入4埃分子篩并將該混合物攪拌1小時。于-20℃和氬氣氛下，加入N-碘代琥珀酰亞胺(8.30g,33.7mmol)和三氟甲磺酸(0.30ml,3.30mmol)在二氯乙烷和乙醚的混合液(415ml,1∶1)中的溶液。將該混合物攪拌10分鐘(TLC)，加入碳酸氫鈉并過濾，依次用1M硫代硫酸鈉水溶液、水、飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(11/1二氯甲烷/乙酸乙酯)得到純凈的二糖10-α(11.7g,52％)。[α]D+38(c=1.01，二氯甲烷)。1HNMR(CDCl3)δ7.35-7.23(m,15H,3Ph),5.90-5.80(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.47(d,1H,J=3.6Hz,H-1′),5.27-5.14(m,2H,OCH2(CH∶CH2)),5.05-4.90(m,2H,H-4′和H-2),4.42(d,1H,J=7.6Hz,H-1),4,38-4,32(m,1H,OCH2(CH:CH2)),4.15-4.0(m,1H,OCH2(CH:CH2)),3.90(dd,1H,J=8.8Hz,H-4),3.54,3.34(2s,6H,2OCH3),2.75-2.40(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16,2.10(2s,6H,Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C45H56O14(820.94)的元素分析計算值C,65.84；H,6.88。實測值C,65.74；H,6.90。制備例102-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-4-O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖丙-1’-烯基苷(11)將1,5-環(huán)辛二烯雙[甲基二苯基膦]六氟磷酸銥(5.80mg,0.70μmol)加到10(1.36g,1.66mmol)在不合過氧化物的四氫呋喃(4.30ml)的溶液中。將該溶液脫氣，放置在氬氣氛下，引入氫氣。該混合物攪拌10分鐘(TLC)并蒸發(fā)。將殘余物回收到二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(3/1甲苯/乙酸乙酯)，得到純凈的11(1.04g,76％)。[α]D+47(c=1.1，二氯甲烷)。LSIMS，正模式m/z硫甘油+NaCl,951(M+Na)+；硫甘油+KF,967(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.34-7.23(m,15H,3Ph),6.21-6.16(m,1H,O(CH:CH)CH3),5.45(d,1H,J=3.5Hz,H-1′),5.13-4.97(m,3H,H-4′,H-2和O(CH:CH)CH3),4.6(d,1H,J=7.55Hz,H-1),3.96(dd,1H,J=8.9Hz,H-4,),3.54,3.34(2s,6H,2OCH3),2.74-2.36(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.15,2.08(2s,6H,Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)1.56-1.51(dd,3H,O(CH:CH)CH3)。
C45H56O14(820.94)的元素分析計算值C,65.84；H,6.88。實測值C,66.21；H,6.92。制備例112-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-4-O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-α,β-D-吡喃葡糖(12)將氯化汞(3.9g,14.3mmol)在丙酮和水的混合液(26ml,5/1)中的溶液滴加到11(7.8g,9.53mmol)和氧化汞在相同溶劑(80ml)中的溶液中。將該混合物攪拌1小時，過濾并濃縮。用二氯甲烷萃取，萃取液用飽和碘化鉀水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(10/1，然后4/1二氯甲烷/丙酮)，得到12(6.70g,90％)。[α]D+92(c=1.37，二氯甲烷)。TLC,RF0.31,14/1二氯甲烷/丙酮。1H NMR(CDCl3)δ7.37-7.24(m,15H,3Ph),5.46(d,1H,J=3.5Hz,H-1′),5.37(d,J=3.6Hz,H-1α),4.58(d,J=8Hz,H-1β),3.54,3.39,3.36(3s,6H,2OCH3),2.75-2.4(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16, 2.15(2s,6H,Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16,2.15(2s,6H,Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C42H52O14(780.83)的元素分析計算值C,64.60；H,6.71。實測值C,65.09；H,6.82。制備例122-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-4-O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(13)將化合物12(5.00g,6.4mmol)溶于二氯甲烷(50ml)并在氬氣氛下加入三氯乙腈(3.9ml,38.8mmol)和碳酸鉀(1.6g,11.6mmol)。將該混合物攪拌16小時(TLC)并過濾。濾液經(jīng)硅膠柱純化(8/1，然后4/1二氯甲烷/丙酮)，得到亞氨酸酯混合物(α/β=60/40)13(5.22,87％)。TLC,RF0.66和0.51,20/1二氯甲烷/丙酮。1HNMR(CDCl3)δ8.62-8.59(2s,1H,N:H-αandβ),7.37-7.23(m,15H,3Ph),6.51(d,J=3.7Hz,H-1α),5.81(d,J=7.1Hz,H-1β),5.50(d,1H,J=3.5Hz,H-1′),3.55,3.41,3.37(3s,9H,3OCH3),2.75-2.40(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16,2.07,2.04(3s,6H,Ac和(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C44H52Cl3NO14(925.26)的元素分析計算值C,57.12；H,5.66；N,1.51。實測值C,57.31；H,5.87；N,1.55。制備例132-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-4-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(14)按照方法2處理化合物10(3.11g,3.80mmol)，得到14(2.70g,97％)。[α]D+25(c=1.7，二氯甲烷)。LSIMS，正模式m/z硫甘油+NaCl,745(M+Na)+；硫甘油+KF,761(M+K)+。1H NMR(CDCl3)d7.33-7.20(m,15H,3Ph),5.87-5.78(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.50(d,1H,J=3.5Hz,H-1′),5.30-5.17(m,2H,OCH2(CH:CH2)),5.02(dd,1H,H-2),4.43(d,1H,J=7.6Hz,H-1),4.34-4.28(m,1H,OCH2(CH:CH2)),4.12-4.02(m,1H,OCH2(CH:CH2)),3.63,3.36(2s,6H,2OCH3),2.10(s,3H,Ac)。
C40H50O12(722.84)的元素分析計算值C,66.47；H,6.97。實測值C,66.31；H,7.24。
反應(yīng)路線5寡糖19的合成
制備例14O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(15)按照方法1處理亞氨酸酯13(4.22g,4.56mmol)和糖基受體14(2.63g,3.64mmol)的混合物。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱純化(3/2，然后1/1甲苯/乙醚)，得到四糖15(4.31g,80％)。[α]D+52(c=0.66，二氯甲烷)。1HNMR(CDCl3)δ7.35-7.23(m,30H,6Ph),5.83-5.79(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.47(d,2H,J=3.5Hz,H-1and H-1′),5.25-5.14(m,2H,OCH2(CH:CH2)),4.38(d,1H,J=7.7Hz,H-1″),4.30(d,1H,J=8Hz,H-1),4.32-4.25(m,1H,OCH2(CH:CH2)),4.08-4.02(m,1H OCH2(CH:CH2)),3.56,3.53,3.34,3.27(4s,12H,4OCH3),2.78-2.40(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.15,2.09,1.85(3s,9H,2 Ac and O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C82H100O25(1485.7)的元素分析計算值C,66.29；H,6.78。實測值C,66.10；H,6.79。制備例15O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖(16)按照制備例10處理化合物15(2.30g,1.54mmol)。10分鐘后，將N-溴代琥珀酰亞胺(0.30g,1.70mmol)在二氯甲烷(15ml)和水(5.50ml)中的溶液加到該反應(yīng)混合物中。將混合物攪拌5分鐘(TLC)。用二氯甲烷稀釋，用飽和硫酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(3/2甲苯/乙酸乙酯)，得到純凈的16(1.57g，兩步收率71％)。[α]D+69(c=0.87，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)δ7.38-7.20(m,30H,6 Ph),5.47(d,1H,J=3.5Hz,H-1和H-1′),5.36(d,1H,J=3.5Hz,H-1α),4.55(d,1H,J=8Hz,H-1),4.36(d,1H,J=8Hz,H-1″),3.56,3.54,3.39,3.36,3.28(5s,9H,3OCH2),2.75-2.35(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16,2.13,2.12,1.86(4s,9H,2Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。制備例16O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(17)將16(1.5g,1.04mmol)、三氯乙腈(0.63ml,6.22mmol)和碳酸鉀(0.26g,1.87mmol)在二氯甲烷(15ml)中的混合物在室溫攪拌16小時。將溶液過濾并濃縮。經(jīng)硅膠柱純化(4/1甲苯/丙酮+1‰三乙胺)，得到17(1.47g,89.6％),TLC,RF0.5,7/2甲苯/丙酮。制備例17O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(18)按照方法2對15(1.3g,0.87mmol)進行脫乙酰丙?；?，得到18(1.05g,86％)。[α]D+40(c=0.6，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)δ7.36-7.23(m,30H,6Ph),5.83-5.78(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.50(d,1H,J=3.5Hz,H-1),5.47(d,1H,J=3.5Hz,H-1′),5.25-5.21(dd,1H,J=1.6Hz,J=17Hz,OCH2(CH:CH2)),5.16-5.13(dd,1H,J=1.4Hz,J=10Hz,OCH2(CH:CH2)),4.38(d,1H,J=6.5Hz,H-1″),4.31(d,1H,J=6.5Hz,H-1),4.08-4.02(m,1H,OCH2(CH:CH2)),3.59(m,1H,H-4),3.67,3.53,3.39,3.29(4s,12H,4OCH3),2.09,1.86(2s,6H,2Ac)。制備例18O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖烯丙苷(19)按照方法1處理18(842mg,0.53mmol)和17(1.17g,0.74mmol)的混合物。產(chǎn)物經(jīng)ToyopearlHW-50柱(110×3.2cm,1/1二氯甲烷/乙醇)純化，得到19(1.44g,85％)。[α]D+57(c=1.01，二氯甲烷)。1H NMR(CDCl3)d 7.35-7.20(m,60H,12Ph),5.83-5.78(m,1H,OCH2(CH:CH2)),5.24-5.21(dd,1H,OCH2(CH:CH2)),5.16-5.13(dd,1H,OCH2(CH:CH2)),3.59,3.56,3.51,3.47,3.33,3.26(6s,24H,8OCH3),2.75-2.35(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.15,2.09,1.85,1.84(4s,15H,4Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)；主要異頭質(zhì)子的δ5,48；4.37；4.29；4.23ppm。
C156O47H188(2815.51)的元素分析計算值C,66.56；H,6.73。實測值C,66.22；H,6.75。
反應(yīng)路線6多糖29的合成
制備例19O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖(20)按照制備例15處理化合物19(720mg,0.25mmol)。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱純化(3/2,然后4/3甲苯/乙酸乙酯)，得到20(555mg,78％)。[α]D+70(c=0.94，二氯甲烷)。TLC,RF0.43,1/1甲苯/乙酸乙酯。制備例20O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(21)如制備例16處理化合物20(540mg,0.195mmol)。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱純化(3/2甲苯/乙酸乙酯+1‰三乙胺)，得到亞氨酸酯混合物(α/β=27/73)21(455mg,80％)。TLC,RF0.48,3/2甲苯/乙酸乙酯。1H NMR(CDCl3)δ8.60,8.59(2s,1H,N:Hα和β),7.35-7.21(m,60H,12Ph),2.75-2.40(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C∶O)CH3),2.16,2.06,2.04,1.85,1.84(5s,15H,4 Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
主要異頭質(zhì)子的1H NMR(CDCl3)δ:6.50；5.79；5.51；5.48；4.29；4.25ppm。
反應(yīng)路線7寡糖28的合成
制備例212,4,6-三-O-乙?；?3-O-甲基-1-硫代-α-D-吡喃葡糖苯苷(22)1,2,46-四-O-乙酰基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖1(5.23g,14.4mmol)溶于甲苯(45ml)。加入苯硫酚(3.0ml,28.8mmol)，然后滴加三氟硼烷乙醚化物(1.77ml,14.4mmol)，再將混合物于50℃加熱0.5小時。用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(5/2環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到22-α(1.00g,17％)和22-β(2.71g,46％)。1HNMR22-α,RF0.44,3/2環(huán)己烷/乙酸乙酯。[α]D+230(c=1，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,435(M+Na)+；+KF,451(M+K)+1H NMR(CDCl3)δ7.46-7.27(m,5H,Ph),5.89(d,1H,J=5.6Hz,H-1),5.05-4.97(m,2H,H-2和H-4),4.49-4.42(m,1H,H-5),4.25-4.18(m,1H,H-6),4.05-4.00(m,1H,H-6′),3.66,(dd,1H,J=9.5Hz,H-3),3.51(s,3H,OCH3),2.16,2.12,2.00(3s,9H,3Ac)。
C19H24O8S(412.46)的元素分析計算值C,55.33；H,5.87；S,7.77。實測值C,55.25；H,5.90；S,7.75。制備例224,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-1-硫代-α-D-吡喃葡糖苯苷(23)將化合物22(970mg,2.35mmol)溶于2/1甲醇/二氯甲烷(18ml)中。加入2M甲醇鈉溶液(150ml)。于室溫0.5小時后，該混合物用Dowex50(H+)樹脂中和，過濾并濃縮。
將α,α-二甲氧基甲苯(0.7ml,4.0mmol)和樟腦磺酸(51mg,0.22mmol)加到上述粗反應(yīng)混合物在乙腈(22ml)中的混合液中。將該混合物攪拌1小時，加入三乙胺(0.50ml)中和并濃縮。
于0℃將氫化鈉(73.0mg,2.80mmol)加到上述粗產(chǎn)物和碘甲烷(163μl,4.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(9ml)中的溶液中。將該混合物攪拌1小時并加入甲醇。該混合物用乙酸乙酯萃取，用水洗滌，干燥并濃縮，獲得固體形式的23(840mg,94％)。熔點178℃。[α]D+330(c=1,二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,411.4(M+Na)+；+KF,427.4(M+K)+.1H NMR(CDCl3)δ7.50-7.24(m,10H,2Ph),5.71(d,1H,J=3.4Hz,H-1),5.52(s,1H,C6H5CH),3.62(s,3H,OCH3),3.55(s,3H,OCH3)。
C21H24O5S(388.48)的元素分析計算值C,64.92；H,6.23；S,8.25。實測值C,64.87；H,6.17；S,7.85。制備例236-O-芐基-2,3-二-O-甲基-1-硫代-α-D-吡喃葡糖苯苷(24)按照制備例4處理化合物23(792mg,0.47mmol)。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱純化(7/2，然后2/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到24(318mg,80％)。[α]D+243(c=1，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,413(M+Na)+；+KF,429(M+K)+.1H NMR(CDCl3)δ7.52-7.22(m,10H,2Ph),5.71(d,1H,J=5.3Hz,H-1),3.64和3.49(2s,6H,2OCH3),3.36(dd,1H,H-3)。
C21H26O5S(390.50)的元素分析計算值C,64.59；H,6.71；S,8.21。實測值C,64.05；H,6.88；S,7.74。制備例24O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-1-硫代-α-D-吡喃葡糖苯苷(25)按照方法1處理化合物13(436mg,0.47mmol)和24(153mg,0.39mmol)。產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱純化(SephadexLH20,1/1乙醇/二氯甲烷)，得到純凈的25(309mg,68％)。[α]D+144(c=1，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,1175(M+Na)+；+KF,1191(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.51-7.21(m,25H,5 Ph),5.73(d,1H,J=5.2Hz,H-1),5.48(d,1H,J=3.5Hz,H-1″),4.4 6(d,1H,J=8Hz,H-1′),3.7,3.54,3.5,3.31(4s,12H,4OCH3),2.70-2.41(m,4,H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.16,2.01(2s,6H,1Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C63H76O18S的元素分析計算值C,65.61；H,6.64；S,2.78。實測值C,65.02；H,6.60；S,2.72。制備例25O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(27)于-25℃和氬氣氛下，在4埃分子篩(400mg)的存在下，將N-碘代琥珀酰亞胺(92mg,0.38mmol)和三氟甲磺酸(37.5μl,0.38mmol)在1/11,2-二氯乙烷/乙醚(22ml)中的溶液加到25(451mg,0.39mmol)和26(434mg,0.31mmol)(P.Westerduin等，生物有機藥物化學(xué)(BioOrg.Med.Chem.,1994,2,1267))在1,2-二氯乙烷(7.5ml)中的溶液中。30分鐘后，加入固體碳酸氫鈉。過濾溶液，用硫代硫酸鈉溶液和水洗滌，干燥并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)SephadexLH-20柱純化(1/1二氯甲烷/乙醇)，然后經(jīng)硅膠柱純化(1/1，然后2/3環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到純凈的27(487mg,64％)。[α]D+63(c=0.54，二氯甲烷)。TLC,RF0.28,2/1環(huán)己烷/乙酸乙酯。ESIMS,正模式m/z+NaCl,2454(M+Na)+；+KF,2469(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ7.38-7.2(m,50H,10Ph),3.56,3.52,3.48,3.46,3.44,3.42,3.39,3.30,3.17(9s,27H,9OCH3),2.75-2.4(m,4H,O(C:O)CH2CH2C:O)CH3),2.15,1.98,1.97,1.87,(4s,12H,3Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)；主要異頭質(zhì)子5.57；5.47；5.30；5.18；4.57；4.29；4.08。制備例26O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙酰基-2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(28)按照方法2，對27(498mg,0.2mmol)進行脫乙酰丙酰化，得到28(402mg,84％)。[α]D+64(c=1，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z2352.9(M+NH4)+.1H NMR(CDCl3)δ7.38-7.20(m,50H,10Ph),3.67,3.52,3.49,3.46,3.44,3.41,3.40,3.28,3.17(9s,27H,9Ac),2.65(d,1H,J=2.14Hz,OH),1.98,1.96,1.87(3s,9H,3Ac)；主要異頭質(zhì)子5.55；5.4 9；5.30；5.18；4.56；4.31；4.08。
C127H152O41(2334.48)的元素分析計算值C,65.34；H,6.56。實測值C,65.40；H,6.62。制備例27O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(29)按照方法1處理21(340mg,1.16mmol)和28(256mg,1.09mmol)的混合物。殘余物經(jīng)ToyopearlHW-40柱純化(3.2×70cm,1/1二氯甲烷/乙醇)，得到含15個單體的純29(421mg,76％)。[α]D+65(c=1，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+KF,2584.3(M+2K)2+；1736.5(M+3K)3+。1H NMR(CDCl3)δ7.35-7.18(m,105H,21Ph),2.75-2.4(m,4H,O(C∶O)CH2CH2(C:O)CH3),2.15,1.97,1.95,1.87,1.84,1.83(6s,24H,7Ac,和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)；主要異頭質(zhì)子5.55；5.48；5.30；5.18；4.56；4.29；4.22；4.08。
反應(yīng)路線8多糖91的合成(實施例1)
制備例28O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙酰基-2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(30)按照方法2處理化合物29(342mg,0.067mmol)，得到30(253mg,75％)。[α]D+59(c=0.92，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+KF,2535.6(M+2K)2+。主要異頭質(zhì)子的1H NMR(CDCl3)δ:5.55；5.50；5.48；5.30；4.56；4.30；4.22；4.08。
C275H328O85(4993.37)的元素分析計算值C,65.57；H,6.60。實測值C,65.09；H6.57。制備例29O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙?；?3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙酰基-6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]6-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(31)按照方法1處理17(32.7mg,20.6mmol)和30(80.7mg,16.3mmol)的混合物。產(chǎn)物經(jīng)ToyopearlHW-40柱純化(1/1二氯甲烷/乙醇)，得到含19個單體的31(60mg,59％)。[α]D+61(c=0.82，二氯甲烷)。ESIMS,正模式m/z+NaCl,2162.4(M+3Na)3+；+KF,2178.5(M+3K)3+。
主要異頭質(zhì)子的1H NMR(CDCl3)δ:5.55；5.48；5.30；5.17；4.56；4.22；4.08。
反應(yīng)路線9二糖37的合成
制備例30O-(4,6-二-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-6-O-三苯甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(33)在氬氣氛下，往32(50.0g,0.105mol)(J.Westman和M.Nilsson,糖化學(xué)雜志(J.Carbohydr.Chem.),1995,14(7),949-960)的二氯甲烷(620ml)懸浮液中加入三乙胺(35ml,0.252mol)、三苯甲基氯(29.3g,0.105mol)和4-二甲氨基吡啶(1.28g,10mmol)。使該混合物保持回流2小時(TLC)，冷卻到室溫，用二氯甲烷稀釋(500ml)，然后依次用冷卻的10％硫酸氫鉀水溶液、水和飽和氯化鈉溶液洗滌。將該溶液干燥，濃縮并濾過一硅膠柱(65/35，然后50/50甲苯/丙酮)，獲得粗產(chǎn)物33，該產(chǎn)物的純度足以用于下步反應(yīng)。對分析樣品進行層析。[α]D+53(c=0.74，二氯甲烷)。ESIMS，負模式m/z715(M-H)-。1H NMR(CD2Cl2)δ7.52-7.25(m,20H,4Ph),5.42(s,C6H5CH),4.97(d,J=3.5Hz,H-1′),4.40(d,J=9.6Hz,H-1),3.82(t,J=9.3Hz,H-3′),3.70,3.68(m,2H,H-3,H-4),3.60(dd,J≈2.0,11.0Hz,H-6a),3.55(td,J=5.2,9.7,9.7Hz,H-5′),3.49-3.45(m,3H,H-2,H-2′,H-5),3.38(dd,J=10.5Hz,H-6′a),3.33(dd,H-6′b),3.30-3.27(m,2H,H-4′,H-6b),2.90-2.77(m,2H,SCH2CH3),1.40-1.37(t,3H,CH2CH3)。
C40H44O10S的元素分析計算值C,67.02；H,6.19；S,4.47。實測值C,66.38；H,6.19；S,4.19。制備例31O-(4,6-二-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3-二-O-甲基-6-O-三苯甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(34)在氬氣氛下，將碘甲烷(34ml,0.536mol)滴加到化合物33(64.1g)的N,N-二甲基甲酰胺(600ml)溶液中。將該溶液冷卻到0℃，緩慢地加入氫化鈉(13.5g,0.536mol)。將該懸浮液在室溫攪拌2小時，然后冷卻至0℃并滴加甲醇(35ml)，之后攪拌2小時，用乙酸乙酯(500ml)和水(600ml)稀釋。水相用乙酸乙酯萃取，有機相用水洗滌，干燥并濃縮。殘余物34的純度足以用于下步。分析樣品經(jīng)硅膠柱純化(70/30環(huán)己烷/丙酮)。[α]D+45(c=0.83，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,795(M+Na)+；+KF,811(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ7.52-7.19(m,20H,4Ph),5.51(d,J=3.3Hz,H-1′),5.43(s,C6H5CH),4.45(d,J=9.8Hz,H-1),3.60,3.59,3.51,3.49(4s,12H,4OCH3),2.86(q,2H,J=7.5Hz,SCH2CH3),1.40(t,3H,SCH2CH3)。
C44H52O10S的元素分析計算值C,68.37；H,6.78；S,4.15。實測值C,68.28；H,6.98；S,4.09。制備例32O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-2,3-二-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(35)將粗產(chǎn)物34(67.4g)的懸浮液在60％乙酸水溶液(470ml)中于80℃加熱2小時。將該反應(yīng)混合物冷卻，過濾并濃縮。殘余物用甲醇鈉(940mg)的甲醇(200ml)溶液處理1小時。然后該溶液用Dowex50WX4(H+)樹脂中和，之后過濾，濃縮并經(jīng)硅膠柱純化(60/40甲苯/丙酮)，獲得35(27.9g，三步收率60％)。[α]D+26(c=1.07，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,465(M+Na)+；+KF,481(M+K)+。1HNMR(CDCl3)δ5.62(d,J=3.9Hz,H-1′),4.35(d,J=9.8Hz,H-1),3.64,3.64,3.59,3.58(4s,12H,4OCH3),1.29(t,3H,J=7.4Hz,SCH2CH3)。
C18H34O10S.H2O的元素分析計算值C,46.94；H,7.87；S,6.96。實測值C,47.19；H,7.72；S,6.70。制備例33O-(6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(36)將三醇35(5.86g,13.2mmol)和N-乙?；溥?3.21g,29.1mmol)在1,2-二氯乙烷(120ml)中的溶液回流16小時。再加入另一部分N-乙?；溥?440mg,3.96mmol)并將該混合物攪拌4小時。使其冷卻到室溫，然后加入甲醇(2ml)。將該混合物再攪拌1小時，然用二氯甲烷(1L)稀釋，依次用冷的1M鹽酸溶液、冷水、飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)層析(3.5/1甲苯/丙酮)得到二乙酸酯36(3.97g,57％)。[α]D+33(c=1.90，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,549(M+Na)+；+KF,565(M+K)+。1HNMR(CDCl3)δ5.51(d,J=3.9Hz,H-1′),4.34(d,J=9.8Hz,H-1),3.64,3.63,3.59,3.56(4s,12H,4OCH3),2.11,2.06(2s,6H,2Ac),1.31(t,3H,J=7.4Hz,SCH2CH3)。
C22H38O12的元素分析計算值C,50.17；H,7.27；S,6.09。實測值C,50.15；H,7.49；S,5.89。制備例34O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(37)在氬氣氛下，往二乙酸酯36(19.4g,36.8mmol)的二氧六環(huán)溶液中加入乙酰丙酸(7.53ml,73.5mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(14.1g,73.5mmol)和4-二甲氨基吡啶(900mg,7.35mmol)。將該混合物攪拌3.5小時，用二氯甲烷(1.5L)稀釋，然后依次用水、10％硫酸氫鉀水溶液、水、2％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，然干燥并濃縮。殘余物經(jīng)層析(97/3，然后79/21二氯甲烷/丙酮)得到衍生物37(21.8g,95％)。[α]D+40(c=0.72，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,647(M+Na)+；+KF,663(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ5.56(d,J=3.9Hz,H-1′),4.35(d,J=9.8Hz,H-1),3.64,3.60,3.58,3.55(4s,12H,4OCH3),2.76-2.71(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.19,2.08,2.07(3s,9H,2Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.31(t,3H,J=7.4Hz,SCH2CH3)。
C27H44O14S的元素分析計算值C,51.91；H,7.10；S,5.13。實測值C,51.88；H,7.05；S,4.96。
反應(yīng)路線10二糖38和40的合成
制備例35O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(38)往硫代糖苷37(9.53g,15.3mmol)在1/1二氯甲烷/乙醚混合液(180ml)中的溶液中加入水(1.4ml,76.3mmol)、N-碘代琥珀酰亞胺(6.84g,30.5mmol)和三氟甲磺酸銀(0.51g,1.98mmol)。15分鐘后(TLC)，加入飽和的碳酸氫鈉水溶液(5ml)，反應(yīng)混合物用二氯甲烷(1.5L)稀釋，用水洗滌、1M硫代硫酸鈉水溶液和2％碳酸氫鈉水溶液洗滌。將該溶液干燥并濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(80/40，然后100/0乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到無需鑒別即可用于下步的固體。在氬氣氛下，將上述化合物(7.88g,13.6mmol)的二氯甲烷(120ml)溶液用碳酸銫(7.08g,21.7mmol)和三氯乙腈(6.81ml,67.9mmol)處理。40分鐘后(TLC)，該混合物過濾，濃縮并純化(85/15甲苯/丙酮)，得到亞氨酸酯38(9.16g，兩步收率83％)。[α]D+118(c=1.00，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,746(M+Na)+；741(M+NH4)+。1H NMR(CDCl3)δ8.66,8.65(2s,1H,α和βN:H),6.52(d,J=3.6 Hz,H-1α),5.70(d,J=7.5Hz,H-1β),5.58(d,J=3.7Hz,H-1′),2.78-2.57(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.18,2.07,2.06(3s,9H,2AC和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C27H40Cl3NO12·0.5H2O的元素分析計算值C,44.18；H,5.63；N,1.98。實測值C,44.14；H,5.61；N,1.97。制備例36O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(39)按照方法3，在1/2二氯甲烷乙醚混合液(105ml)中，將硫糖苷37(10.6g,16.94mmol)用2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(4.8ml,33.90mmol)處理。所得殘余物經(jīng)層析純化(1/1丙酮/二氯甲烷)，得到化合物39(9.80g,85％)，該化合物為差向異構(gòu)體混合物形式(α/β65/35)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,703(M+Na)+。1H NMR(CDCl3)δ5.58(d,J=3.9Hz,H-1′),4.94(d,J=3.5Hz,H-1),4.26(d,J=7.7Hz,H-1β),2.76-2.56(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.17,2.08,2.05(3s,9H,2Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.18-0.88(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.02(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C30H52O15Si的元素分析計算值C,52.92；H,7.69。實測值C,53.29；H,7.75。制備例37O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(40)按照方法2，在1/2甲苯/乙醇混合液(21ml/mmol)中，將化合物39(9.41g,13.82mmol)用乙酸肼(10mol/mol)處理。殘余物經(jīng)層析(60/40丙酮/甲苯)，得到40α(4.81g,60％)和40α/40β混合物(3.06g,37％)。40α:[α]D+132(c=0.61，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,605(M+Na)+；+KF,621(M+K)+。1HNMR(CDCl3)δ5.55(d,J=3.8Hz,H-1),4.95(d,J=3.6Hz,H-1),2.10,2.08(2s,6H,2Ac),1.16-0.89(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.02(s,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C25H46O13Si的元素分析計算值C,51.53；H,7.96。實測值C,51.37；H,8.06。
反應(yīng)路線11四糖41的合成
制備例38O-(6-O-乙酰基-4-O-乙?；；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-[O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-]2-6-(O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(41)按照方法3，將硫代糖苷37(4.21g,6.74mmol)和糖基受體40(3.57g,6.13mmol)在1/2二氯甲烷/乙醚混合液(105ml)中處理。殘余物經(jīng)硅膠層析(3/1，然后9/1丙酮/環(huán)己烷)，得到41(4.81g,69％)。[α]D+143(c=0.56,二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,1167(M+Na)+；+KF,1183(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ5.57(d,J=3.9Hz,H-1″′),5.44,5.41(2d,J=3.8Hz,H-1″,H-1′),4,96(d,J=3.6Hz,H-1),2.78-2.58(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.18,2.12,2.12,2.09,2.06,(5s,15H,4Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.21-0.97(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.03(S,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C50H84O27Si的元素分析計算值C,52.44；H,7.39。實測值C,52.29；H,7.46。
反應(yīng)路線12四糖42的合成
制備例39O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰基丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]2-6-(O-乙?；?2,3-二-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(42)按照方法1，將亞氨酸酯38(1.10g,1.52mmol)和糖基受體36(806mg,1.38mmol)在1/2二氯甲烷/乙醚混合液(22ml)中處理。產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析(2.5/1，然后3/1乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到42(1.12g,71％)。[α]D+95(c=1.00，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,1111(M+Na)+；+KF,1127(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ5.55(d,J=3.9Hz,H-1),5.39,5.37(2d,J=3.8 and 3.9Hz,H-1″,H-1′),4,34(d,J=9.7Hz,H-1),2.84-2.51(m,6H,SCH2CH3,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.17,2.10,2.09,2.08,2.04,(5s,15H,4Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.30(t,3H,J7.4Hz,SCH2CH3)。
C47H76O26S的元素分析計算值C,51.83；H,7.03；S,2.94。實測值C,51.66；H,7.02；S,2.94。
反應(yīng)路線13多糖47的合成
制備例40[O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]3-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(43)如制備例37，將41(4.71g,4.11mmol)進行反應(yīng)，經(jīng)柱層析(3/2環(huán)己烷/丙酮)，得到衍生物43(4.11g,95％)。[α]D+154(c=0.63，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,1069(M+Na)+；+KF,1085(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ5.46,5.46(2d,3H,J=3.9Hz,H-1′,H-1″,H-1),4.95(d,J=3.5Hz,H-1),2.81(d,J=4.4Hz,OH),2.11,2.09,2.08(3s,12H,4Ac),1.19-0.97(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.03,(s,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C45H78O25Si的元素分析計算值C,51.61；H,7.51。實測值C,51.39；H,7.54。制備例41O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]6-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(44)按照制備例38，處理硫代糖苷42(3.86g,3.54mmol)和糖基受體43(3.60g,3.44mmol)。產(chǎn)物經(jīng)柱層析(7/2，然后2/1二氯甲烷/丙酮)，得到44(5.71g,80％)。[α]D+161(c=0.65，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2072.8，化學(xué)質(zhì)量=2074.2，實驗質(zhì)量=2074±1a.m.u.1H NMR(CDCl3)δ5.54,(d,J=3.8Hz,H-1單元NR),5.47-5.40(m,6H,H-1),4.95(d,J=3.7Hz,H-1單元R),2.84-2.51(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.17,2.13,2.12,2.11,2.11,2.08,2.05(7s,27H,8Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3,1.18-0.97(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.03(s,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C90H148O51Si的元素分析計算值C,52.12；H,7.19。實測值C,51.98；H,7.25。制備例42[O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]7-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(45)于0℃將1M水合肼在3/2乙酸/吡啶混合液(7.3ml)中的溶液加到化合物44(3.00g,1.45mmol)的吡啶(5ml)溶液中。攪拌20分鐘后，蒸發(fā)反應(yīng)混合物，用二氯甲烷(400ml)稀釋，用10％硫酸氫鉀水溶液、水、2％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。將溶液干燥并濃縮，殘余物經(jīng)層析，得到45(2.43g,85％)。[α]D+167(c=0.57，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=1974.8，化學(xué)質(zhì)量=1976.1，實驗質(zhì)量=1975±2a.m.u.1H NMR(CDCl3)δ5.47-5.40(m,7H,H-1),4.95(d,J=3.7Hz,H-1單元R),2.80(d,J=4.4Hz,OH),2.13,2.11,2.10,2.08,2.07(5s,24H,8Ac),1.18-0.97(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.03(s,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C85H142O49Si的元素分析計算值C,51.66；H,7.24。實測值C,51.32；H,7.26。制備例43O-(6-O-乙酰基-4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]10-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(46)按照制備例38,處理化合物42(1.35g,1.24mmol)和化合物45(2.38g,1.20mmol)。殘余物經(jīng)層析(4/3環(huán)己烷/丙酮)，得到46(1.56g,71％)。[α]D+166(c=0.88，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=3001.3，化學(xué)質(zhì)量=3003.2，實驗質(zhì)量=3004±1a.m.u.1H NMR(CDCl3)δ5.54,(d,J=3.8Hz,H-1單元NR),5.47-5.40,(m,10H,H-1),4.95(d,J=3.7Hz,H-1單元R),2.81-2.51(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.17,2.13,2.12,2.11,2.11,2.08,2.05(7s,39H,12Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.17-0.96(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.03(s,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C130H212O75Si的元素分析計算值C,51.99；H,7.12。實測值C,51.63；H,7.12。制備例44(6-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-[O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]10-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(47)(a)將糖苷46(400mg,0.133mmol)在2/1三氟乙酸/二氯甲烷混合液(2ml)中的溶液攪拌1.5小時(TLC)。該溶液在2/1甲苯/乙酸正丙酯混合液(12ml)中稀釋，濃縮并與甲苯-起蒸發(fā)(5×10ml)。殘余物經(jīng)純化(4/3丙酮/環(huán)己烷)，得到固體(364mg)。
(b)上面得到的固體溶于二氯甲烷(2.5ml)中。加入碳酸銫(65mg,0.200mmol)和三氯乙腈(63ml,0.620mmol)，攪拌2.5小時后過濾(Celite)，濃縮并經(jīng)硅膠柱純化(50/50/0.1環(huán)己烷/丙酮/三乙胺)，得到亞氨酸酯47(348mg,86％)。[α]D+185(c=0.91，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=3044.1，化學(xué)質(zhì)量=3047.3，實驗質(zhì)量=3046.9±0.2a.m.u.1H NMR(CD2Cl2)δ8.61,8.58(2s,1H,α和βN:H),6.35(d,J=3.7Hz,H-1a單元R),5.59,(d,J=7.5Hz,H-1b單元R),5.38(d,J=3.8Hz,H-1單元NR),5.32-5.25(m,10H,H-1),2.64-2.40(m,4H,O(C:O)CH2CH3(C:O)CH3),2.02,1.96,1.95,1.94,1.93,1.89(6s,39H,12Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C127H200Cl3NO25的元素分析計算值C,50.06；H,6.61；N,0.46。實測值C,49.93；H,6.52；N,0.42。
反應(yīng)路線14寡糖50的合成
制備例45(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]26-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(48)按照制備例44，處理化合物41(200mg,0.174mmol)。該反應(yīng)混合物經(jīng)硅膠柱層析(3/2甲苯/丙酮)，得到亞氨酸酯48(230mg,77％)。ESIMS，正模式m/z,+NaCl,1210(M+Na)+；+KF,1226(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.66-8.64(2s,1H,α和βN:H),6.51(d,J=3.6Hz,H-1β),5.71(d,J=7.5Hz,H-1β),2.90-2.52(m,4H,O(CvO)CH2CH2(C:O)CH3),2.17,2.11,2.11,2.09,2.05(5s,4Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。制備例46O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]2-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(49)按照制備例36，處理亞氨酸酯48(73mg,0.061mmol)和糖基受體26(82mg,0.059mmol)?；衔锝?jīng)SephadexLH-20層析柱(1/1二氯甲烷/乙醇)，然后經(jīng)硅膠柱(3/1甲苯/丙酮)純化，得到衍生物49(98mg,69％)。[α]D+95(c=1.01，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2414.97，化學(xué)質(zhì)量=2416.97，實驗質(zhì)量=2416.2。1HNMR(CDCl3)δ7.43-7.20(m,30H,6Ph),5.55(d,J=3.9Hz,H-1單元NR),5.50(d,J=3.9Hz,H-1單元NR-3),5.44,5.38(2d,J=3.7和3.9Hz,H-1單元NR-1,單元NR-2),5.29(d,J=6.8Hz,H-1單元R-1),5.17(d,J=3.5Hz,H-1單元R-2),4.56(d,J=3.7Hz,H-1單元R),4.10(d,J=7.9Hz,H-1單元R-3),2.81-2.50(m,4H,O(C:O)Ch2CH2(C:O)CH3), 2.17,2.15,2.11,2.09,2.05,2.00(7s,21H,6Ac and O(C:O)CH2CH3(C:O)CH3)。
C120H158Cl3O51的元素分析計算值C,59.63；H,6.59。實測值C,59.23；H,6.58。制備例47[O-(6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-]3-O-(芐基-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基糖醛酸)-(1-4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-O-(芐基-2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基糖醛酸)-(1-4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(50)按照制備例37，將八糖49(120mg,0.050mmol)進行反應(yīng)。殘余物經(jīng)硅膠柱層析(3/1甲苯/丙酮)，得到化合物50(95mg,83％)。[α]D+80(c=0.62，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2316.9，化學(xué)質(zhì)量=2318.4，實驗質(zhì)量=2318.2±0.4a.m.u.1H NMR(CDCl3)δ7.42-7.12(m,30H,6Ph),5.50,5.46,5.43,5.40(d,J=3.9,3.9,3.7,3.7Hz,H-1單元NR,單元NR-1,單元NR-2,單元NR-3),2.14,2.10,2.09,2.08,2.00,1.88(6s,18H,6Ac)。
C115H152O49的元素分析計算值C,59.57；H,6.60。實測值C,59.49；H,6.61。
反應(yīng)路線15多糖97的合成(實施例4)
制備例48O-(6-O-乙?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-]15-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(51)按照制備例39，處理亞氨酸酯47(84mg,0.027mmol)和糖基受體50(62mg,0.027mmol)。殘余物首先經(jīng)ToyopearlHW-40柱，然后經(jīng)硅膠柱(1/1環(huán)己烷/丙酮)純化，得到衍生物51(71mg，非最佳收率51％)。[α]D+136(c=0.95，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=5200.11，化學(xué)質(zhì)量=5203.39，實驗質(zhì)量=5203.5。1HNMR(CDCl3)δ7.42-7.18(m,30H,6Ph),5.54(d,J=3.8Hz,H-1單元NR),5.51-5.40(m,15H-1),5.30(d,J=6.8Hz,H-1unit R-1),5.17(d,J=3.5Hz,H-1單元R-2),4.56(d,J=3.7Hz,H-1單元R),4.09(d,J=7.9Hz,H-1單元R-3),2.85-2.53(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.17,2.16,2.13,2.11,2.08,2.05,2.00,1.88(8s,57H,18Ac和O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
C240H350O123·4H2O的元素分析計算值C,54.64；H,6.84。實測值C,54.51；H,6.79。
反應(yīng)路線16二糖57的合成
制備例49O-(4,6-O-對甲氧基亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(53)于+5℃和氬氣氛下，將茴香醛縮二甲醇(35.8ml,0.21mol)和樟腦磺酸(4.44g,19.1mmol)加入到化合物52(73.89g,0.19mmol)(W.E.Dick Jr和J.E.Hodge，糖化學(xué)中的方法(Methods in Carbohydrate Chemistry),7,1976,15-18)在3.5/1乙腈/N,N-二甲基甲酰胺混合液(990mmol)中的溶液中。在室溫攪拌1.5小時后，加入三乙胺(2.96ml,21.0當量)中和該混合物。將混合物濃縮，糖漿狀物質(zhì)經(jīng)硅膠柱純化(100/0，然后50/50二氯甲烷/甲醇)，得到53(58.6g,61％，非最佳收率)。[α]D+47(c=1.03，甲醇)。ESIMS，正模式m/z,503(M-H)-。1HNMR(CD3OD)δ7.41,6.89(2d,4H,CH3OC6H4),5.51(s,CHC6H4),5.20(d,J=3.6Hz,H-1,),4.39(d,J=7.1Hz,H-1),3.78(s,3H,CH3OC6H4),2.75(q,2H,J=7.0Hz,SCH2CH3),1.29(t,3H,SCH2CH3)。
C22H32O11S的元素分析計算值C,52.37；H,6.39；S,6.35。實測值C,52.15；H,6.61；S,5.84。制備例50O-(2,3-二-O-乙酰基-4,6-對甲氧基亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3,6-三-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(54)于0℃下，將三乙胺(65ml,0.47mol)和乙酸酐(89ml,0.94mol)滴加到53(47.22g,93.6mmol)在二氯甲烷(450ml)中的懸浮液中。然后加入4-二甲氨基吡啶(5.71g,46.8mmol)并將該混合物在室溫攪拌1.5小時。加入甲醇(45ml,1.12mol)使反應(yīng)停止，然后依次用冷的10％硫酸氫鉀水溶液、水、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌。將該溶液干燥，濃縮并結(jié)晶(環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到54(64.9g,97％)。[α]D+21(c=1.00，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z,+NaCl,737(M+Na)+,+KF,753(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ7.34,6.86(2d,4H,CH3OC6H4),5.43(s,CHC6H4),5.34(d,J=4.1Hz,H-1,),4.54(d,J=9.9Hz,H-1),3.78(s,3H,CH3OC6H4),2.74-2.60(m,2H,SCH2CH3),2.10,2.06,2.03,2.01(4s,15H,5Ac),1.26(t,3H,SCH2CH3)。
C32H42O16S的元素分析計算值C,53.78；H,5.92；S,4.49。實測值C,53.74；H,6.08；S,4.40。制備例51O-(2,3-二-O-乙?；?4-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3,6-三-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(55)和O-(2,3-二-O-乙?；?4-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3-二-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(56)將54(25.0g,35.0mmol)、硼烷/三甲胺配合物(20.4g,0.28mol)和分子篩(33g,4埃)在甲苯(810ml)中的混懸液在氬氣氛下攪拌1小時。使該混合物冷卻到0℃，然后緩慢地加入氯化鋁(14.0g,0.11mol)。將反應(yīng)物攪拌25分鐘(TLC)，傾入冷卻的20％硫酸氫鉀水溶液中，并在0℃攪拌1小時，然后過濾(Celite)。有機相用水、2％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化，得到55(7.37g,29％)和56(1.36g,6％)。55的分析樣品在環(huán)己烷/乙酸乙酯混合液中結(jié)晶。[α]D+30(c=1.00，二氯甲烷)。熔點151-153℃。ESIMS，正模式m/z,+NaCl,739(M+Na)+,+KF,755(M+K)+。1HNMR(CDCl3)δ7.19,6.87(2d,4H,CH3OC6H4),5.36(d,J=3.5Hz,H-1′),4.54(s,2H,C6H4CH2),4.53(d,J=9.0Hz,H-1),2.70-2.65(m,2H,SCH2CH3)。
C32H42O16S的元素分析計算值C,53.62；H,6.19；S,4.47。實測值C,53.57；H,6.21；S,4.43。
化合物56[α]D+19(c=1.11，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z,+NaCl,697(M+Na)+,+KF,713(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ7.17,6.84(2d,4H,CH3OC6H4),5.36(d,J=4.5Hz,H-1′),4.54(d,J=10.1Hz,H-1),4.49(s,2H,C6H4CH2),2.69-2.64(m,2H,SCH2CH3),2.02,2.01,2.00,1.96(4s,12H,4Ac),1.25(t,3H,SCH2CH3)。
C30H42O15S的元素分析計算值C,53.40；H,6.27；S,4.75。實測值C,53.29；H,6.39；S,4.53。制備例52O-(2,3-三-O-乙酰基-4-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3,6-三-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(57)于0℃下，將乙酸酐(1.47ml,15.5mmol)加到55(5.6g,7.77mmol)、三乙胺(1.19ml,8.54mol)和4-二甲氨基吡啶(190mg,1.55mmol)在二氯甲烷(40ml)中的混合物中。在室溫攪拌40分鐘(TLC)后，混合物用二氯甲烷(50ml)稀釋，用冷卻的10％硫酸氫鉀水溶液、水飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。將該溶液干燥，濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(35/65乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到57(5.66g,96％)。[α]D+44(c=1.03，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z,+NaCl,781(M+Na)+,+KF,797(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.15,6.85(2d,4H,CH3OC5H4),5.30(d,J=4.2Hz,H-1′),4.53(d,J=10.0Hz,H-1),2.69-2.64(m,2H,SCH2CH3),2.09,2.07,2.04,2.01,2.00,1.98(6s,18H,6Ac),1.25(t,3H,SCH2CH3)。
C34H46O17S的元素分析計算值C,53.82；H,6.11；S,4.22。實測值C,53.77；H,6.24；S,4.09。
反應(yīng)路線17三糖62的合成
制備例534,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(59)于0℃下，將氫化鈉(500mg,19.9mmol)加入化合物58(2.59g,8.29mmol)(A.F.Bochkov等，Izv.Akad.Nauk SSSR,Ser.Khim.(1968),(1),179)和碘甲烷(1.70ml,19.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25ml)中的混合物中，然后讓該混合物的溫度回升到20℃。將混合物攪拌30分鐘(TLC)，然后加入甲醇。將該混合物傾入水中，用乙酸乙酯萃取。有機相依次用1M硫代硫酸鈉水溶液和水洗滌，干燥并濃縮。殘余物在乙醚中研制，得到59(0.42g,15％)；母液經(jīng)硅膠柱純化(12/1甲苯/丙酮)，然結(jié)晶，得到另外一部分59(1.6g，總收率71％)。熔點108℃。[α]D-78(c=1.00，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z，硫甘油+NaCl,363(M+Na)+，硫甘油+KF,379(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.51-7.33(m,5H,Ph),5.52(s,1H,C6H5CH),4.45(d,1H,J=9.8Hz,H-1),3.64(s,3H,OCH3),3.62(s,3H,OCH3),2.78-2.68(m,2H,SCH2CH3),1.31(t,3H,J=2.7Hz,SCH2CH3)。
C17H24O5S(340.44)的元素分析計算值C,59.98；H,7.11；S,9.42。實測值C,59.91；H,7.15；S,8.96。制備例544,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(60)將化合物59(23.0g,67.5mmol)和2-(三甲基甲硅烷基)乙醇(19.4ml,135mmol)溶于2/1乙醚/二氯甲烷混合液(345ml)中，加入4埃分子篩(11g)。使該混合物在25℃攪拌1小時后，加入N-碘代琥珀酰亞胺(49.7g,220mmol)，然后于0℃加入三氟甲磺酸銀(2.20g,8.78mmol)。將該混合物攪拌20分鐘(TLC)，然后加入固體碳酸氫鈉。該混合物用二氯甲烷稀釋，濾過硅藻土(Celite)，依次用1M硫代硫酸鈉水溶液和水洗滌，干燥并蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(15/1，然后5/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到60β(4.20g.15％)和60α(8.40g,31％)。
化合物60α:[α]D+96(c=0.4，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z,,419(M+Na)+；435(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.52-7.35(m,5H,Ph),5.54(s,1H,C6H5CH),4.98(d,1H,J=3.7Hz,H-1),3.64(s,3H,OCH3),3.62(s,3H,OCH3),1.24-0.96(m,2H,OCH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,OCH2CH2Si(CH3)3)。
C20H32O6S(396.56)的元素分析計算值C,60.58；H,8.13；。實測值C,60.26；H,8.39。制備例556-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(61)
將化合物60(21.1g,53.3mmol)溶于二氯甲烷(154ml)。在室溫加入三乙基甲硅烷(34ml,213mmol)，然后滴加三氟乙酸(16.3ml,213mmol)和三氟乙酸酐(0.49ml,3.47mmol)。將該混合物攪拌2小時，加入1M氫氧化鈉水溶液直至pH為堿性。傾析分離后，水相用乙酸乙酯萃取，然后與有機相合并，干燥并濃縮。殘余物經(jīng)硅膠柱純化(14/1，然后12/1二氯甲烷/丙酮)，獲得61(12.5g,59％)。[α]D+100(c=1.45，二氯甲烷)。1H NMRδ7.40-7.20(m,5H,Ph),4.98(d,1H,J=3.5Hz,H-1),3.62(s,3H,OCH3),3.49(s,3H,OCH3),1.14-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C20H30O6Si(398.58)的元素分析計算值C,60.27；H,8.60。實測值C,60.18；H,8.81。制備例56O-(2,3,6-三-O-乙?；?4-O-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基-(1→4)-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(62)按照方法3，處理硫代糖苷57(19.1g,25.1mmol)和糖基受體61(7.5g,18.7mmol)的混合物，經(jīng)硅膠柱純化(20/1，然后10/1二氯甲烷/丙酮)后，獲得62(19.7g,95％)。[α]D+90(c=1.15，二氯甲烷)。
C52H74O23Si(1095.24)的元素分析計算值C,57.03；H,6.81。實測值C,57.38；H,6.85。
反應(yīng)路線18寡糖66的合成
制備例57O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基-(1→4)-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(63)按照方法4，處理化合物62(19.7g,18.0mmol)，經(jīng)硅膠柱純化(3/1，然后2/1甲苯/丙酮)后，獲得化合物63(11.2g，三步收率79％)。[α]D+95(c=1.15，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,829(M+Na)+；+KF,845(M+K)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.34-7.25(m,5H,Ph),5.60(d,1H,J=3.8Hz,H-1″),4.96(d,1H,J=3.8Hz,H-1),4.29(d,1H,J=8.0Hz,H-1′),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。制備例58O-(2,3,6-三-O-乙?；?4-O-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(64)按照方法3，處理硫代糖苷57(6.87g,9.10mmol)和糖基受體63(6.67g,8.30mmol)的混合物，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(2/5甲苯/丙酮)后，獲得64(10.7g,86％)。[α]D+90(c=0.83，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z+NaCl,1525(M+Na)+；+KF,1541(M+K)+。1H NMR(CDCl3)δ7.33-7.25(m,5H,Ph),7.15-6.84(m,4H,C5H4OCH3),5.56(d,1H,J=3.9Hz,H-1″),5.29(d,1H,J=4.0Hz,H-1″″),4.97(d,1H,J=8.1Hz,H-1),4.27(d,1H,J=7.9Hz,H-1′),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C70H106O33Si(1503.69)的元素分析計算值C,55.91；H,7.11。實測值C,56.05；H,7.24。制備例59[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(65)按照方法4，處理化合物64(10.7g,7.2mmol)，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(2/1，然后6/5甲苯/丙酮)后，獲得65(6.50g，三步收率74％)。[α]D+102(c=0.68，二氯甲烷)。1HNMR(CDCl3)δ7.33-7.25(m,5H,Ph),5.65(d,1H,J=3.8HzH-1″″),5.62(d,1H,J=3.8Hz,H-1″),4.98(d,1H,J=3.7Hz,H-1),4.31(d,1H,J=8.1Hz,H-1),4.29(d,1H,J=7.9Hz,H-1′),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C56H98O26Si(1215.48)的元素分析計算值C,55.34；H,8.13。實測值C,55.31；H,8.19。制備例60O-(2,3,6-三-O-乙酰基-4-O-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-乙?；?β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1-4)]2-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(66)按照方法3，處理硫代糖苷57(4.03g,5.31mmol)和糖基受體65(5.78g,4.75mmol)的混合物，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(2/5甲苯/丙酮)后，獲得66(8.63g,95％)。[α]D+94(c=0.74，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=1910.08，化學(xué)質(zhì)量=1912.14，實驗質(zhì)量=1911.61±0.12a.m.u.1H NMR(CDCl3)δ7.33-7.25,(m,5H,Ph),7.15-6.83(m,4H,C6H4OCH3),5.62(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元R-2),5.60(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元NR-2),5.30(d,1H,J=4.0Hz,H-1單元NR),4.98(d,1H,J=3.7Hz,H-1單元R),4.71(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元NR-1),4.30(d,1H,J=8.1Hz,H-1單元C),4.29(d,1H,J=8.4Hz,H-1單元R-1),2.08(s,3H,Ac),2.07(s,3H,Ac),2.03(s,3H,Ac),1.99(s,3H,Ac),1.98(s,3H,Ac),1.96(s,3H,Ac),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C88H138O43Si(1912.14)的元素分析計算值C,55.28；H,7.27。實測值C,55.61；H,7.35。
反應(yīng)路線19寡糖72的合成
制備例61[O-(2,3,6-三-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(67)按照方法4，處理化合物66(8.63g,4.50mmol)，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(3/2，然后4/3甲苯/丙酮)后，獲得67(5.67g，三步收率77％)。[α]D+102(c=0.70，二氯甲烷)。ESIMS，正模式m/z，硫甘油+NaCl,1645.9(M+Na)+。1HNMR(CDCl3)δ7.33-7.32(m,5H,Ph),5.65(d,2H,J=3.8Hz,H-1單元NR和H-1單元NR-2),5.62(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元R-2),4.98(d,1H,J=3.7Hz,H-1單元R),4.31(d,1H,J=8.1Hz,H-1單元NR-1),4.30(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元C),4.29(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元R-1),1.08-0.91(m,2H,CH2CH3Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C74H130O36Si(1912.14)的元素分析計算值C,54.73；H,8.07。實測值C,54.61；H,8.07。制備例62O-(2,3,6-三-O-乙?；?4-O-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(68)按照方法3，處理硫代糖苷57(1.47g,1.95mmol)和糖基受體67(2.89g,1.77mmol)的混合物。殘余物濾過硅膠柱(3/2環(huán)己烷/丙酮)后，獲得68(3.71g,92％)。分析樣品經(jīng)硅膠柱純化(3/2甲苯/丙酮)。[α]D+99(c=0.58，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2319.03,化學(xué)質(zhì)量=2320.59，實驗質(zhì)量=2319.03±0.12 a.m.u.1H NMR(CDCl3)δ7.33-7.32,(m,5H,Ph),7.15-6.83(m,4H,C6H4OCH3),5.62(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元R-2),5.60(d,2H,J=3.8Hz,H-1單元NR-2和單元C),5.29(d,1H,J=4.0Hz,H-1單元NR),4.97(d,1H,J=3.7Hz,H-1單元R),4.70(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元NR-1),4.30(d,2H,J=8.1Hz,H-1單元NR-3和單元R-3),4.29(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元R-1),2.08(s,3H,Ac),2.06(s,3H,Ac),2.02(s,3H,Ac),1.99(s,3H,Ac),1.98(s,3H,Ac),1.96(s,3H,Ac),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C106H170O53Si(2320.59)的元素分析計算值C,54.86；H,7.38。實測值C,54.76；H,7.45。制備例63[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(69)按照方法4，處理化合物68(3.61g,1.55mmol)，殘余物經(jīng)硅膠柱純化(4/5甲苯/丙酮)后，獲得69(2.22g，三步收率70％)。[α]D+103(c=0.80,二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2031.01，化學(xué)質(zhì)量=2032.38，實驗質(zhì)量=2032.38 a.m.u.1HNMR(CDCl3)δ7.33-7.32(m,5H,Ph),5.65(d,1H,J=3.8Hz H-1單元NR),5.64(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元NR-2),5.62(d,2H,J=3.8Hz,H-1單元C and單元R-2),4.97(d,1H,J=3.7Hz,H-1單元R),4.30(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元NR-1),4.29(d,3H,J=7.9Hz,H-1單元R-1,unit R-3和單元NR-3),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C92H162O46Si(2032.38)的元素分析計算值C,54.37；H,8.03。實測值C,54.51；H,8.04。制備例64O-(4-O-乙酰丙?；?2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖2-(三甲基甲硅烷基)乙基苷(70)將化合物69(855mg,0.42mmol)溶于二氯甲烷(8ml)中，于25℃加入三乙胺(83μl,0.59mmol)、4-二甲氨基吡啶(5.14mg,0.04mmol)和乙酰丙酸酐(117mg,0.55mmol)。攪拌2小時(TLC)后，加入二氯甲烷，該混合物用10％硫酸氫鉀水溶液洗滌，然后用水洗滌，干燥并蒸發(fā)至干。該粗品化合物無需純化即可用于下步。分析樣品經(jīng)硅膠柱純化(5/4環(huán)己烷/丙酮)，得到純凈的70。[α]D+101(c=0.89，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2129.05，化學(xué)質(zhì)量=2130.48，實驗質(zhì)量=2130.00 a.m.u.1HNMR(CDCl3)δ7.33-7.32(m,5H,Ph),5.65(d,3H,J=3.8Hz,H-1單元NR,單元NR-2和單元C),5.63(d,2H,J=3.8Hz,H-1單元R-2),5.02(t,1H,J=10.1Hz,H-4單元NR),4.98(d,1H,J=3.7Hz,H-1單元R),4.32(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元NR-1),4.30(d,2H,J=7.9Hz,H-1單元NR-3和單元R-3),4.29(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元R-1),2.80-2.50(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.18(s,3H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.08-0.91(m,2H,CH2CH2Si(CH3)3),0.00(s,9H,CH2CH2Si(CH3)3)。
C97H168O48Si(2032.38)的元素分析計算值C,54.69；H,7.95。實測值C,54.55；H,8.07。制備例65O-(4-O-乙酰丙?；?2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖(71)如制備例44(a)處理化合物70(876mg,0.41mmol)。殘余物經(jīng)硅膠柱純化，獲得異構(gòu)體混合物(α/β=60/40)71(600mg，兩步收率50％)。[α]D+89(c=0.74，二氯甲烷)。ESIMS，正模式單種同位素質(zhì)量=2028.97,化學(xué)質(zhì)量=2030.24，實驗質(zhì)量=2030.19+0.19 a.m.u.
1H NMR(CDCl3)δ7.33-7.32(m,5H,Ph),5.65(d,3H,J=3.8Hz H-1單元NR,單元NR-2和單元C),5.63(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元R-2),5.33(d,1H,J=3.2Hz,H-1α單元R),5.02(t,1H,J=10.1Hz,H-4單元NR),4.59(d,1H,J=5.3Hz,H-1β單元R),4.32(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元NR-1),4.30(d,2H,J=7.9Hz,H-1單元NR-3和單元R-3),4.29(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元R-1),2.80-2.50(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.18(s,3H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。制備例66O-(4-O-乙酰丙酰基-2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡糖三氯亞氨代乙酸酯(72)往71(593mg,0.29mmol)的二氯甲烷(7ml)溶液中加入碳酸鉀(72.2mg,0.52mmol)和三氯乙腈(176μl,1.75mmol)。將該混合物攪拌16小時，過濾并蒸發(fā)。殘余物濾過硅膠(5/4環(huán)己烷/丙酮+0.1‰三乙胺)，獲得差向異構(gòu)體混合物形式的(α/β=47/53)亞氨酸酯72(414mg,46％)。[α]D+86(c=0.84，二氯甲烷)。1HNMR(CDCl3)δ7.33-7.32(m,5H,Ph),6.50(d,1H,J=3.5Hz,H-1α單元R),5.65(d,1H,J=8.2Hz,H-1β,單元R),5.65(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元NR),5.64(d,2H,J=3.8Hz,H-1單元R-2 and單元C),5.61(d,1H,J=3.8Hz,H-1單元R-2),5.02(t,1H,J=10.1Hz,H-4單元NR),4.37(d,1H,J=7.9Hz,H-1單元R-1),4.30(d,3H,J=7.9Hz,H-1單元NR-1,單元NR-3和單元R-3),2.80-2.50(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.18(s,3H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3)。
反應(yīng)路線20多糖73的合成
制備例67O-(4-O-乙酰丙?；?2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(73)將糖基受體26(220mg,0.16mmol)和亞氨酸酯72(344mg,0.16mmol)溶解于1/2二氯甲烷/乙醚混合物(5ml)中。加入4埃分子篩(750mg/mmol),將混合物在25℃下放置1小時，再將混合物冷卻至-25℃，加入1M叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯的二氯甲烷溶液(0.20mol/1mol亞氨酸酯)。攪拌15分鐘后，加入固體碳酸氫鈉，將混合物過濾，濃縮。將殘余物置于ToyopearlHW-50柱上(1/1二氯甲烷/乙醇)，將包含糖基受體的餾分返回反應(yīng)中，再進行如上的處理。在硅膠柱上進行連續(xù)純化(5/4，然后1/1甲苯/丙酮)，得到餾分73α/β=7/3(107mg)和餾分73α/β=9/1(201mg)，總收率為57％(308mg)。1HNMR(CDCl3)δ7.33-7.25(m,35H,7Ph),5.65(d,3H,J=3.5Hz,H-1單元A,單元C和單元E),5.57(d,1H,J=3.9Hz,H-1單元G),5.52(d,1H,J=3.3Hz,H-1單元I),5.29(d,1H,J=6.8Hz,H-1單元L),5.17(d,1H,J=3.5Hz,H-1單元K),4.56(d,1H,J=3.5Hz,H-1單元M),4.31(d,3H,J=7.9Hz,H-1單元B,單元D和單元F),4.27(d,1H,J=8.0Hz,H-1單元H),4.08(d,1H,J=8.0Hz,H-1單元J),2.80-2.50(m,4H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),2.18(s,3H,O(C:O)CH2CH2(C:O)CH3),1.97(s,3H,Ac),1.81(s,3H,Ac)。
反應(yīng)路線21合成多糖74和75
制備例68[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(74)按照方法2處理化合物73(130mg,38.2mmol)，將粗產(chǎn)物用硅膠柱純化，得到74(118mg,93％)。[α]D+78(c=0.48，二氯甲烷)；ESIMS，正模式單一同位素質(zhì)量=3301.49；化學(xué)質(zhì)量=3303.65；實測質(zhì)量=3302.40原子量單位。1H NMR(CDCl3)δ7.33-7.25(m,35H,7Ph),5.64(d,3H,J=3.5Hz,H-1單元A,單元C和單元E),5.57(d,1H,J=3.9Hz,H-1單元G),5.52(d,1H,J=3.3Hz,H-1單元I),5.29(d,1H,J=6.8Hz,H-1單元L),5.17(d,1H,J=3.5Hz,H-1單元K),4.56(d,1H,J=3.5Hz,H-1單元M),4.31(d,3H,J=7.9Hz,H-1單元B,單元D和單元F),4.27(d,1H,J=8.0Hz,H-1單元H),4.08(d,1H,J=8.0Hz,H-1單元J),1.97(s,3H,Ac),1.81(s,3H,Ac)。制備例69O-(2,6-二-O-芐基-4-O-乙酰丙酸基-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,6-二-O-芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2-O-乙?；?6-O-芐基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(6-O-芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3,6-二-O-乙?；?2-O-芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3,6-三-O-芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(75)將糖基受體74(112mg,33.9mmol)和亞氨酸酯17(59.1mg,37.2mmol)(見制備例16)溶解于甲苯(2ml)中。加入4埃分子篩(42mg)，將混合物在25℃下放置1小時，再將混合物冷卻至-20℃，加入1M叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯的甲苯溶液(0.20mol/1mol亞氨酸酯)。攪拌15分鐘后，加入固體碳酸氫鈉，將混合物過濾，濃縮。將殘余物置于ToyopearlHW-50柱上(1/1二氯甲烷/乙醇)，將包含受體和17-聚體的餾分返回反應(yīng)中，再進行如上的處理。在ToyopearlHW-50柱和硅膠柱上連續(xù)進行純化，得到75(71mg,44％)。[a]D+80(c=0.26，二氯甲烷)；ESIMS，正模式單一同位素質(zhì)量=4728.10；化學(xué)質(zhì)量=4731.26；實測質(zhì)量=4731.27±0.39原子量單位。主要異頭質(zhì)子的1H NMR(CHCl3)δ:5.64；5.57；5.52；5.48；5.47；5.29；5.17；4.56；4.50；4.29；4.27；4.08ppm。
反應(yīng)路線22用于合成具有糖苷間C-連接的五糖Pe的合成子的制備
制備例702,3-二-O-甲基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-D-吡喃葡糖甲苷(77)在氬氣氛下，向76(D.Trimmell,W.M.Doane,C.R.Russel,C.E.Rist,糖研究(Carbohydr.Res),(1969)11,497)(15.84g,71.3mmol)的二氯甲烷(300ml)溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(14.0g,92.9mmol)、三乙胺(15ml,108mmol)和4-二甲氨基吡啶(260mg,2.13mmol)。在室溫下攪拌15小時后，將溶液用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。將殘余物用快速層析法純化(1.3/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到77(22.79g,95％)，為無色漿液。[α]D+87(c=1.2，氯仿)。制備例712,3-二-O-甲基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-D-吡喃木-4-己酮糖甲苷(78)在氬氣氛及-70℃下，向草酰氯(5.4ml,61.9mmol)的二氯甲烷(120ml)溶液中加入二甲亞砜(8.7ml,123mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液。15分鐘后，滴加入77(18.78g,55.8mmol)的二氯甲烷溶液。在磁力攪拌15分鐘后，加入三乙胺(37ml,265mmol),15分鐘后，將混合物升溫至室溫。加入水(150ml)，水相用二氯甲烷(150)萃取。合并有機相，用硫酸鎂干燥，濃縮。殘余物用快速層析純化(9/1，再4/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到78(17.3g,93％)，為無色油。[α]D+98(c=1.0，氯仿)。制備例724-脫氧-2,3-二-O-甲基-4-C-亞甲基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-α-D-吡喃木己酮糖甲苷(79)在氬氣氛下，向甲基三苯基溴化鏻(43.3g,127mmol)的四氫呋喃(250ml)懸浮液中滴加入1.6M正丁基鋰的正己烷溶液(75ml)。在室溫下30分鐘后，將混合物冷卻至-70℃。然后加入78(13.97g,41.8mmol)的四氫呋喃(60ml)溶液。在-70℃下30分鐘后，將混合物升溫至室溫。1小時后，加入飽和氯化銨水溶液(300ml)，水相用乙醚萃取。有機相用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。將殘余物用快速層析法純化(7/1，再4/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到79(8.30g,60％)，為無色油。[α]D+151(c=1.3，氯仿)。制備例73甲基4-脫氧-2,3-二-O-甲基-4-C-亞甲基-α-D-吡喃木己酮糖甲苷(80)向79(8.50g,25.6mmol)的5/1二氯甲烷/甲醇混合物(250ml)溶液中加入樟腦磺酸(pH1)。在原料完全消失后(TLC,1/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，加入三乙胺將溶液中和。濃縮后，將殘余物用快速層析法純化(1/1，再1/2環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到80(5.32g,95％)，為無色漿液。D+239(c=1.0，氯仿)。制備例742,4,6-三-O-乙?；?3-O-甲基-1-硒代-β-D-吡喃葡糖苯苷(83)方法1在氬氣氛下，將苯硒酚(5.7ml,53.7mmol)加至81(E.L.Hirst E.Percival,糖化學(xué)中的方法，(1963)2,145)(1/1的端基異構(gòu)體混合物13.05g,36.0mmol)的二氯甲烷(120ml)溶液中。將反應(yīng)介質(zhì)冷卻至0℃，滴加入48％的三氟硼烷乙醚合物溶液(8.8ml,71.9mmol)。在室溫下3小時后，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷(100ml)稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。粗化合物83(8.17g,68％(從81計))直接用于脫乙酰反應(yīng)。方法2在0℃及氬氣氛下，將硼氫化鈉(510mg,14.6mmol)加至二苯基聯(lián)硒化物(2.27g,7.27mmol)的乙醇懸浮液中。如果反應(yīng)介質(zhì)在15分鐘內(nèi)其原有的黃色不消失，則再加入一部分三氟硼烷乙醚合物。在氬氣氛下，將溶液轉(zhuǎn)移至82(A.K.Sen,K.K.Sakar,N.Banerji，糖化學(xué)雜志(J.Carbohydr.Chem.),(1988)7,645)(4.22g,11.0mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中?；亓?小時后，將混合物放置以冷卻至室溫，濾出溴化鈉，濃縮濾液。將殘余物溶解于二氯甲烷(100ml)中，用1M氫氧化鈉水溶液(50ml)和飽和氯化銨水溶液(50ml)洗滌。水相用二氯甲烷(20ml)萃取，有機相用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。將殘余物用快速層析法純化(1.7/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，再用乙酸乙酯結(jié)晶，得到83(4.35g,86％)。m.p.101-102℃。[α]D-20(c=1.0，氯仿)。制備例753-O-甲基-1-硒代-β-D-吡喃葡糖苯苷(84)將由82(32.3g,84.3mmol)獲得的粗產(chǎn)物83溶解于甲醇(500毫升)中，向其中緩慢地加入鈉(1.2g)。1小時后，加入IR-120(H+)樹脂中和溶液，過濾，濃縮。將殘余物用快速層析法純化(1.5/1/1環(huán)己烷/乙酸乙酯/丙酮)，得到漿液形式的84(22.7g,81％(從82計))。[a]D-58(c=1.0，甲醇)。制備例764,6-O-亞芐基-3-O-甲基-1-硒代-β-D-吡喃葡糖苯苷(85)在氬氣氛下，向三醇84(7.56g,23.0mmol)的乙腈(150毫)溶液中加入對甲苯磺酸(45mg)和苯甲醛縮二甲醇(5.4ml,3.6mmol)。在室溫下攪拌2小時后，加入碳酸鉀(1.5g)。30分鐘后，將溶液過濾，濃縮。將殘余物用快速層析法純化(3.5/1環(huán)己烷/乙酸乙酯)，得到白色結(jié)晶形式的85(8.55g,88％)。m.p.123-124℃(環(huán)己烷/乙酸乙酯)。[α]D-38(c=1.0，氯仿)。制備例774,6-O-亞芐基-3-O-甲基-2-O-(4-脫氧-6-O-二甲基甲硅烷基-2,3-二-O-甲基-4-C-亞甲基-α-D-吡喃木己糖甲苷)-1-硒代-β-D-吡喃葡糖苯苷(86)在氬氣氛及-70℃下，將1.6M正丁基鋰溶液(7.0ml,11.2mmol)加至放置在Schlenck管內(nèi)的85(4.3og,10.2mmol)的四氫呋喃(30毫升)溶液中。10分鐘后，加入二氯二甲基甲硅烷(5.0ml,41.2mmol)，將反應(yīng)介質(zhì)升溫至室溫。3小時后，將混合物濃縮，加入80(2.10g,9.62mmol)和咪唑(985mg,14.4mmol)的四氫呋喃(20毫升)溶液。在室溫下30分鐘后，將溶液濃縮，加入水(50毫升)，混合物用二氯甲烷萃取。有機相用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。通過快速層析法純化86的分析樣品(25/1甲苯/丙酮，其包含0.5％的三乙胺)。得到一種無色漿液，收率為90％。
1H NMR(400MHz,C6D6)d7.77-6.99(m,10H,芳族),5.51(m,1H,C:CH2),5.24(m,1H,C:CH2),5.16(s,1H,CHPh),4.85(d,1H,J=3.7Hz,H-1),4.81(d,1H,J=9.8Hz,H-1′),4.45(m,1H,H-5),4.38(dd,1H,J=10.8Hz,4.8Hz,H-6a),4.33(dd,1H,J=6.2Hz,H-6b),4.20(m,1H,J=9.2Hz,H-3),4.05(dd,1H,J=10.3Hz,4.9Hz,H-6a′),3.87(dd,1H,J=8.1Hz,H-2′),3.52,3.38,3.31和3.27(s,3H,OCH3),3.37(t,1H,J=10.3Hz,H-6b′),3.35(t,1H,H-4′),3.32(dd,1H,H-2),3.22(dd,1H,J=9.3Hz,H-3′),3.05(ddd,1H,J=9.3Hz,H-5′),0.38和0.37(s,3H,Si(CH3)2.MS(m/z):714(M+NH4)+。制備例78游離基閉環(huán)反應(yīng)(形成87)和甲硅烷基醚的裂解(88)在8小時內(nèi)，向由85(10.2mmol)和80(9.62mmol)獲得的粗產(chǎn)物86的甲苯(850毫)溶液中加入脫氣甲苯(14ml)中的三丁基氫化錫(6.1ml,22.7mmol)和2,2’-偶氮二異丁腈(200mg,1.22mmol)的溶液。
在游離基閉環(huán)后，將混合物濃縮，將殘余物溶解于四氫呋喃中。加入過量(20當量)的氫氟酸(40％的水溶液)。在完全脫甲硅烷化后(TLC，4/1甲苯/丙酮)，加入碳酸氫鈉固體中和溶液，過濾，濃縮。主要化合物88可通過結(jié)晶純化，m.p.105℃。[a]D+119(c=1.1,氯仿)。13C NMR(62.896MHz,CDCl3)d137.29(芳族季碳),128.88-125.96(芳族101.11(CHPh),97.64(C-1),83.52(C-2),82.7 6,81.95,80.84,72.01,71.92 and 64.31(C-3,C-5,C-2′,C-3′,C-4′,C-5′),75.19(C-1′),69.41(C-6′),62.69(C-6),60.93,60.70,58.31和55.20(OCH3),38.80(C-4),25.58(亞甲基C)。C24H36O10·H2O(502.558)的元素分析計算值C,57.36；H,7.62實測值C,57.31；H,7.54。制備例796-O-乙酰基-4-C-(2-O-乙?；?4,6-O-亞芐基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基甲基)-4-脫氧-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(89)在催化量的4-二甲氨基吡啶存在下，使化合物88在1/1乙酸酐/吡啶中進行定量乙?；＝?jīng)濃縮和層析處理后得到產(chǎn)物。[a]D+87(c=1.0，氯仿)。1H NMR(500MHz,CDCl3)見表1．13C NMR(62.896MHz,CDCl3)d170.81,169.80(C:O),137.18(芳族季碳),128.92-125.95(芳族C),101.31(CHPh),97.51(C-1),83.22(C-2),81.94,69.25和63.83(C-5,C-4′,C-5′),81.81(C-3),78.78(C-3′),72.74(C-2′),71.96(C-1′),69.49(C-6′),64.17(C-6),60.64,59.82,58.30和55.19(OCH3),39.00(C-4),26.47(亞甲基C),20.91,20.76(OCOCH3)。質(zhì)譜(m/z):586(M+NH4)+,569(M+H)+,554(M-OMe+NH3)+,537(M-OMe)+。C28H40O12·H2O(586.632)的元素分析計算值C,57.33；H,7.22實測值C,57.28；H,7.07。
合成過程的最后一部分涉及將89轉(zhuǎn)化成亞氨酸酯90。為此，用氰基硼氫化鈉和鹽酸將亞芐基打開。釋放出的羥基以對甲氧基芐基醚的形式保護。在脫乙?；?，伯醇官能團通過選擇性引入叔丁基二甲基甲硅烷基醚進行保護，所得到的化合物被甲基化。通過在Jones條件下進行氧化，得到糖醛酸，其被芐基化。隨后，裂解對甲氧基芐基醚，在此位置上引入乙酰丙酸酯。采用硫酸/乙酸/乙酸酐混合物體系使異頭甲基基團以及6′位的芐基醚乙酸解，得到兩種異頭乙酸酯的混合物。在位置1的選擇性脫乙酰化過程采用二甲基甲酰胺中的肼，溶解于二氯甲烷中的異頭物混合物在1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-十一碳-7-烯存在下，用三氯乙腈轉(zhuǎn)化成90。
反應(yīng)路線23-五糖99的合成
制備例80O-(2,3-二-O-苯甲?；?4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3,6-三-O-苯甲?；?1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(92)在20分鐘內(nèi)，將苯甲酰氯(24.5ml,211mmol)滴加至冷卻(0℃)的化合物91(16.7g,35.2mmol)(J.Westman和M.Nilsson，糖化學(xué)雜志，1995,14(7),949-960)的吡啶(202ml)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌20小時；TLC表明，轉(zhuǎn)化率大約為50％。將混合物用水和二氯甲烷稀釋。萃取后，有機相用10％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮。再按照上述過程用苯甲酰氯處理。粗產(chǎn)物用硅膠柱進行層析處理，得到22g的化合物92。
TLC∶Rf=0.80，硅膠，9/1v/v甲苯/乙醇。制備例81O-(2,3-二-O-苯甲酰基-4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲?；?β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(94)在氮氣氛下，將硫代糖苷92(1.05g,1.05mmol)、化合物93(200mg,1.05mmol)(Jeanioz等，有機化學(xué)雜志(J.Org.Chem.)1961,26,3939-3944)和粉狀4埃分子篩(1.1g)在甲苯(18ml)中的混合物攪拌15分鐘。然后，將混合物冷卻至-20℃，再向其中加入新制備的N-碘代琥珀酰胺(1.11mmol)和三氟甲磺酸(0.125mmol)在1/1v/v二氯甲烷/二噁烷(6ml)中的溶液。10分鐘后，對紅色的反應(yīng)混合物進行過濾，用二氯甲烷稀釋，萃取，依次用10％硫代硫酸鈉溶液、10％碳酸氫鈉溶液和水洗滌，用硫酸鎂干燥，然后進行真空濃縮。殘余物用硅膠層析柱進行純化，得到1.25g化合物94。
TLC∶Rf=0.55，硅膠，4/6v/v庚烷/乙酸乙酯。制備例82O-(4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(95)將叔丁醇鉀(約50mg)加至化合物94(1.24g,1.11mmol)的1/1v/v二氯甲烷/二噁烷(7ml)溶液中。將混合物攪拌1小時，然后再加入50mg的叔丁醇鉀；再將混合物攪拌60分鐘。將反應(yīng)混合物用Dowex50WX8H+樹脂中和，過濾，真空濃縮。硅膠層析柱處理后，分離出665mg油狀的化合物95。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，85/15v/v二氯甲烷/甲醇。制備例83O-(4,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(96)在氬氣氛下，將氫化鈉(387mg,9.65mmol)加至冷卻下(5℃)的化合物95(660mg,1.1mmol)的無水四氫呋喃(8ml)溶液中。滴加入碘甲烷(0.51ml,8.22mmol)，再在室溫下將混合物攪拌20小時。用甲醇破壞過量的氫化鈉，將混合物倒入50ml冰冷的水中。用乙酸乙酯萃取(3次，各20ml)后，有機相用氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮，得到690mg的純化合物96。
TLC∶Rf=0.25，硅膠，95/5v/v二氯甲烷/甲醇。制備例84O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(97)將純化合物96(690mg,1.03mmol)溶解于80％乙酸(7.3ml)中，在40℃下，將其攪拌20小時。真空濃縮混合物，與甲苯進行共蒸發(fā)。用硅膠層析柱進行處理，8/1/1二氯甲烷/乙酸乙酯/甲醇洗脫，得到569mg的化合物97。
TLC∶Rf=0.40，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例85O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(98)將1-苯甲酰氧基-1H-苯并三唑(227mg,1.05mmol)和三乙胺(1.15mmol)加至化合物97(560mg,0.96mmol)的二氯甲烷溶液中，將混合物在室溫下攪拌20小時。用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用10％碳酸氫鈉溶液和水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)至干。產(chǎn)物用硅膠層析柱純化，得到600mg化合物98。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇制備例86O-(2,3-二-O-苯甲?；?4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(99)按照制備化合物94的過程，將化合物98轉(zhuǎn)化成化合物99。偶聯(lián)反應(yīng)在5℃下進行。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，2/8v/v庚烷/乙酸乙酯。
反應(yīng)路線24-七糖104的合成
制備例87O-(4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(100)按照制備化合物95相同的過程，將化合物99轉(zhuǎn)化成化合物100。
TLC∶Rf=0.35，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例88O-(4,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(101)按照制備化合物96相同的過程，將化合物100轉(zhuǎn)化成化合物101。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例89O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(102)按照制備化合物97相同的過程，將化合物101轉(zhuǎn)化成化合物102。
TLC∶Rf=0.35，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例90O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(103)
按照制備化合物98相同的過程，將化合物102轉(zhuǎn)化成化合物103。
TLC∶Rf=0.40，硅膠，7.0/1.5/1.5v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例91O-(2,3-二-O-苯甲?；?4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-O-苯甲酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(104)按照制備化合物99相同的過程，將化合物103與二糖2進行偶聯(lián)反應(yīng)。
TLC∶Rf=0.40，硅膠，7.0/1.5/1.5v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。
反應(yīng)路線25-寡糖109的合成
制備例92O-(4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(105)按照制備化合物95相同的過程，將化合物104轉(zhuǎn)化成化合物105。
TLC∶Rf=0.60，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例93O-(4,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(106)按照制備化合物96相同的過程，將化合物105轉(zhuǎn)化成化合物106。
TLC∶Rf=0.70，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例94O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(107)在40℃下，將化合物106(5.05g,2.0mmol)的80％乙酸(50ml)溶液攪拌20小時。將混合物進行真空濃縮，與甲苯進行共蒸發(fā)。將殘余物溶解于乙酸乙酯中，用水進行萃取，水相再用二氯甲烷萃取，有機相用硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到2.68g的化合物107。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例95O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(108)按照制備化合物98相同的過程，將化合物107轉(zhuǎn)化成化合物108。
TLC∶Rf=0.80，硅膠，7.5/1.5/1.5v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例96O-(2,3-二-O-苯甲酰基-4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(109)在氬氣氛下，將硫代糖苷92(1.97g,2.0mmol,3.5當量)、七糖108(0.86g,0.57mmol)和粉狀4埃分子篩在甲苯(22ml)中的混合物攪拌15分鐘。然后在室溫下向其中滴加新制備的N-碘代琥珀酰胺(496mg,2.2mmol)和三氟甲磺酸(0.808mmol)在1/1v/v二氯甲烷/二噁烷(12ml)中的溶液。10分鐘后，對反應(yīng)混合物進行過濾，用二氯甲烷稀釋，萃取，依次用10％硫代硫酸鈉溶液、10％碳酸氫鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，然后進行真空濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠層析柱進行純化處理，得到1.09g化合物109。
TLC∶Rf=0.80，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。
反應(yīng)路線26-寡糖115的合成
制備例97O-(4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)]2-(1→4)-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(110)按照制備化合物95相同的過程，將化合物109轉(zhuǎn)化成化合物110。
TLC∶Rf=0.25，硅膠，5.0/2.5/2.5v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例98O-(4,6-O-亞芐基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(111)按照制備化合物96相同的過程，將化合物110轉(zhuǎn)化成化合物111。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例99O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(112)按照制備化合物97相同的過程，將化合物111轉(zhuǎn)化成化合物112。
TLC∶Rf=0.20，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例100O-(6-O-苯甲酰基-2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(113)按照制備化合物98相同的過程，將化合物112轉(zhuǎn)化成化合物113。
TLC∶Rf=0.20，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例101O-(6-O-苯甲酰基-4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-1,6-脫水-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡萄糖(114)將1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(48mg,0.25mmol)、乙酰丙酸(29mg,0.25mmol)和二甲氨基吡啶(4mg,0.033mmol)加至化合物113(320mg,0.167mmol)的二噁烷(1ml)溶液中。在氮氣氛下，將反應(yīng)混合物攪拌3小時。加入二氯甲烷和水，萃取后，有機相用水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠層析柱純化，得到312mg的化合物114。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例102O-(6-O-苯甲?；?4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-1,6-二-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-α,β-D-吡喃葡萄糖(115)將在乙酸酐(2.25ml)、乙酸(50μl)和三氟乙酸(0.14ml)混合物中的化合物114(312mg,0.155mmol)的溶液在室溫下攪拌4小時。加入甲苯(10ml)后，將混合物濃縮，并與甲苯進行共蒸發(fā)(3次，10ml)。經(jīng)硅膠層析柱純化后，得到324mg的化合物115。
TLC∶Rf=0.65，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇反應(yīng)路線27-寡糖117的合成
制備例103O-(6-O-苯甲酰基-4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-O-α,β-D-吡喃葡萄糖(116)將化合物115(324mg,0.153mmol)和嗎啉(22.3μl,0.256mmol)的甲苯(2ml)溶液在35℃下攪拌4小時。然后，再加入嗎啉(22.3μl)，再將反應(yīng)混合物在35℃下攪拌20小時。用水迅速將混合物冷卻。在用二氯甲烷萃取后，有機相依次用0.1N鹽酸和水洗滌，用硅膠層析柱純化，分離到280mg的化合物116。
TLC∶Rf=0.45，硅膠，6/2/2v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。制備例104O-(6-O-苯甲酰基-4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-6-O-乙酰基-2,3-二-O-甲基-O-α,β-D-吡喃葡萄糖三氯亞氨代乙酸酯(117)將三氯乙腈(39μl,0.39μl)和碳酸銫(4.7mg)加至化合物116(138mg,0.066mmol)的二氯甲烷(1.5ml)溶液中。在攪拌2小時后，將混合物過濾，濃縮，將殘余物在硅膠層析柱上進行純化，得到152mg的亞氨酸酯117。
TLC∶Rf=0.35，硅膠，8/1/1v/v/v甲苯/乙酸乙酯/乙醇。
反應(yīng)路線28-二糖128的合成
制備例1052-O-芐基-4,6-O-亞芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(119)將化合物118(60g)(商品)與芐基溴(50.5ml)溶解于二甲基甲酰胺(858ml)中。在冷卻至10℃后，滴加入20％氫氧化鈉水溶液。攪拌1小時后，將溫度升至20℃，再將混合物攪拌20小時。然后，將溶液倒入冰-水與甲苯的混合物中，萃取。將有機相濃縮，粗產(chǎn)物用結(jié)晶法進行純化，得到30.0g的化合物119。
TLC∶Rf=0.60，硅膠，7/3v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例1062-O-芐基-4,6-O-亞芐基-3-O-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(120)將化合物119(26.4g)溶解于二甲基甲酰胺(211ml)中，并冷卻至5℃。在氮氣氛下，加入氫化鈉(2.5g)。然后，滴加入4-甲氧基芐基氯(13.3g)，將混合物在室溫下攪拌1小時。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水洗滌兩次，濃縮，得到40.7g的純化合物120。
TLC∶Rf=0.80，硅膠，7/3v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例1072-O-芐基-3-O-對甲氧基芐基-α-D-吡喃葡糖甲苷(121)將化合物120(34.9g)溶解于60％乙酸水溶液中。將混合物在60℃下攪拌4小時。用甲苯稀釋混合物，濃縮。用硅膠層析柱進行純化，得到26.4g的化合物121。
TLC∶Rf=0.07，硅膠，7/3v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例1082-O-芐基-3-O-對甲氧基芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(122)在氮氣氛下，將化合物121(26.4g)溶解于二氯甲烷(263ml)中。在室溫下，向其中加入四氟硼酸三甲基氧鎓(11.6g)和2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶(17.4g)。4小時后，將混合物倒入冰-水中，用二氯甲烷萃取。有機相用碳酸氫鈉洗滌，濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠層析柱進行純化，得到18.5g的化合物122。
TLC∶Rf=0.25，硅膠，7/3v/v甲苯/乙酸乙酯制備例1092,4,6-三-O-乙酰基-3-O-甲基-1-硫代-α-L-吡喃艾杜糖乙苷(124)將化合物123(1,2,4,6-四-O-乙?；?3-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖)(Jaurand等，Bio.Med.Chem.Lett.1992,2,897-900)(48.4g)溶解于甲苯(175ml)中。在氮氣氛下，加入乙硫醇(20ml)和三氟化硼乙醚合物的甲苯(134ml)溶液。攪拌1小時后，加入碳酸氫鈉水溶液(400ml)，將混合物再攪拌1小時。然后，將混合物倒入乙酸乙酯中。有機相用水洗滌兩次，濃縮。用硅膠層析柱進行純化，得到29.6g的化合物124。
TLC∶Rf=0.45，硅膠，6/4v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例110O-(2,4,6-三-O-乙?；?3-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-2-O-芐基-3-O-對甲氧基芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(125)在氮氣氛下，將化合物122(17.5g)與化合物124(28.2g)溶解于甲苯(525ml)中。在加入4埃分子篩后，將反應(yīng)混合物冷卻至-20℃。在連續(xù)氮氣流下，向其中滴加入新制備的1/1v/v二氯甲烷/二噁烷中的0.1MN-碘代琥珀酰胺(17.4g)和三氟甲磺酸(1.38mol)的溶液。10分鐘后，對紅色反應(yīng)混合物進行過濾，依次用硫代硫酸鈉溶液、碳酸氫鈉溶液洗滌。有機相經(jīng)真空濃縮，分離得到30.0g的化合物125。
TLC∶Rf=0.45，硅膠，8/2v/v二氯甲烷/乙酸乙酯。制備例111O-(3-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-2-O-芐基-3-O-對甲氧基芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(126)將化合物125(30.0g)溶解于460ml的1/1v/v甲醇/二噁烷中，加入叔丁醇鉀。15分鐘后，將反應(yīng)混合物用Dowex50WX8H+樹脂中和，真空濃縮。用硅膠層析柱純化后，得到17.4g的化合物126。
TLC∶Rf=0.25，硅膠，95/5v/v二氯甲烷/甲醇。制備例112O-(4,6-O-異亞丙基-3-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基-(1→4)-2-O-芐基-3-O-對甲氧基芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(127)在氮氣氛下，將化合物126(17.4g)溶解于二甲基甲酰胺(77ml)中。加入2,2-二甲氧基丙烷(26ml)和對甲苯-磺酸，然后將混合物攪拌30分鐘。用碳酸氫鈉水溶液稀釋混合物，再用乙酸乙酯萃取，在蒸出溶劑后，得到19.7g的化合物127。
TLC∶Rf=0.45，硅膠，95/5v/v二氯甲烷/甲醇。制備例113O-(4,6-O-異亞丙基-2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-2-O-芐基-3-O-甲氧基芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(128)將化合物127(18.5g)溶解于二甲基甲酰胺(24.4ml)中，并將其冷卻至0℃。在氮氣氛下，加入氫化鈉(1.47g；60％油分散液)和碘甲烷(2.36ml)。1小時后，用甲醇破壞過量的氫化鈉，混合物用二氯甲烷萃取，濃縮，得到20.0g的化合物128。
TLC∶Rf=0.85，硅膠，95/5v/v二氯甲烷/甲醇。
反應(yīng)路線29-二糖138的合成
制備例114O-(4,6-O-異亞丙基-2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(129)將化合物128(18.4g)溶解于二氯甲烷(838ml)和水(168ml)中。加入2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(7.1g)，將混合物在4℃下攪拌18小時。將混合物倒入碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷萃取。有機相濃縮后，得到12.7g的化合物129。
TLC∶Rf=0.40，硅膠，95/5v/v二氯甲烷/甲醇。制備例115O-(4,6-O-異亞丙基-2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(130)將化合物129(10.5g)溶解于無水二甲基甲酰胺(178ml)中，然后在氮氣氛下冷卻至0℃。加入氫化鈉(1.91g；60％油分散液)，隨后再滴加芐基溴(3.3ml)。30分鐘后，反應(yīng)完成，過量的氫化鈉用甲醇破壞。加入水，將混合物用乙酸乙酯萃取兩次。蒸發(fā)出溶劑后，得到13.6g的化合物130。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例116O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖基)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(131)將化合物130溶解于77/33(v/v)乙酸/水中，攪拌過夜。將混合物與甲苯共蒸發(fā)兩次，用硅膠層析柱純化，得到11.5g的化合物13l。
TLC∶Rf=0.09，硅膠，1/1v/v甲苯/乙酸乙酯TLC∶Rf=0.68，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例117O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(132)
將2,2,6,6-四甲基-1-哌啶基氧(33mg)、碳酸氫鈉溶液(40ml)、溴化鉀(218mg)和四丁基氯化銨(289mg)加至化合物131(11.6g)的二氯甲烷(60ml)溶液中。將混合物冷卻至0℃，在15分鐘內(nèi)再加入飽和氯化鈉溶液(44ml)、飽和碳酸氫鈉溶液(21.8ml)和次氯酸鈉(1.3M,50ml)的混合物。在攪拌1小時后，混合物用水稀釋，用二氯甲烷萃取(3次)。有機相用氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到13.4g的粗化合物132。
TLC∶Rf=0.14，硅膠，9/1v/v二氯甲烷/甲醇。制備例118O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(133)在氮氣氛下，將化合物132溶解于二甲基甲酰胺(110ml)中。加入碳酸氫鉀(6.7g)和芐基溴(10.7ml)，將混合物攪拌90分鐘。加入乙酸乙酯和水，萃取后，濃縮有機相。用硅膠層析柱純化，得到9.9g的化合物133。
TLC∶Rf=0.43，硅膠，4/6v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例119O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(134)在氮氣氛下，將化合物133(9.9g)溶解于300ml的甲醇中并加熱回流。滴加入1M的甲醇鈉的甲醇(65.2ml)溶液，將混合物攪拌并加熱回流3小時。再將混合物冷卻至室溫，加入1N氫氧化鈉(22.2ml)，將反應(yīng)混合物攪拌90分鐘。將反應(yīng)混合物用Dowex50WX8H+樹脂中和，過濾，將混合物濃縮。將粗產(chǎn)物溶解于二甲基甲酰胺(192ml)中，在氮氣氛下加入分子篩。再加入碳酸氫鉀(3.2g)和芐基溴(4.8ml)，將混合物攪拌5小時。在加入乙酸乙酯和水后，進行萃取，將兩相分離，將有機相濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠層析柱純化，得到6.19g的化合物134和1.88g的原料化合物133。
TLC∶Rf=0.55，硅膠，4/6v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例120O-(4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(135)將化合物134(6.2g)溶解于40ml二噁烷中。加入乙酰丙酸(2.1g)、二氯己基碳化二亞胺(3.75g)和4-二甲氨基吡啶(0.2g)，在氮氣氛下，將混合物攪拌2小時。加入乙醚(95ml)，濾出沉淀。將濾液用硫酸氫鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮。由乙醚/庚烷進行結(jié)晶，得到6.2g的化合物135。
TLC∶Rf=0.26，硅膠，95/5v/v二氯甲烷/丙酮。制備例121O-(4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-1,3-二-O-乙?；?2-O-芐基-6-O-甲基-α,β-D-吡喃葡萄糖(136)在氮氣氛下，將化合物135(6.1g)溶解于乙酸酐(256ml)中，并冷卻至-20℃。在30分鐘內(nèi)，滴加入硫酸(4.9ml)在乙酸酐(49ml)中的混合物。60分鐘后，加入乙酸鈉，直到混合物的pH值呈中性。然后，加入乙酸乙酯和水，濃縮有機相。用硅膠層析柱純化，得到4.2g的化合物136。
TLC∶Rf=0.24，硅膠，8/2v/v二氯甲烷/乙酸乙酯。制備例122O-(4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-3-O-乙?；?2-O-芐基-6-O-甲基-α,β-D-吡喃葡萄糖(137)將化合物136(4.2g)溶解于四氫呋喃(42ml)中，加入哌啶(4.1ml)。將混合物在室溫下攪拌過夜。加入乙酸乙酯，混合物用0.5N鹽酸洗滌。將有機相濃縮，殘余物用硅膠層析柱純化，得到3.2g的化合物137。
TLC∶Rf=0.33，硅膠，1/1v/v二氯甲烷/乙酸乙酯。制備例123O-(4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-3-O-乙酰基-2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡萄糖三氯亞氨代乙酸酯(138)在氮氣氛下，將化合物137(1.59g)溶解于無水二氯甲烷中。加入三氯乙腈(1.1ml)和碳酸銫(72mg)，將混合物攪拌1小時。濾出碳酸銫，將濾液濃縮。用硅膠層析柱純化，得到1.57g的化合物138。
TLC∶Rf=0.60，硅膠，3/7v/v甲苯/乙酸乙酯。
反應(yīng)路線30-四糖140合成
制備例124O-(4-O-乙酰丙酰基-2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3-O-乙?；?2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(139)在氮氣氛下，使化合物133(300mg)與化合物138(455.6mg)的混合物與甲苯共蒸發(fā)，并溶解于二氯甲烷(6ml)中。在加入4埃分子篩后，將混合物冷卻至-20℃。攪拌20分鐘后，加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(15mol％，相對于化合物138)。10分鐘后，用碳酸氫鈉水溶液使混合物停止反應(yīng)。濾出分子篩后，濾液用二氯甲烷稀釋，用水洗滌，濃縮，用硅膠層析柱純化，得到560mg的化合物139。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，3/7v/v甲苯/乙酸乙酯。制備例125O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3-O-乙?；?2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(140)將化合物139(532.6mg)溶解于吡啶(1.9ml)中，并室溫下加入乙酸(2.4ml)和水合肼(0.3ml)在吡啶(1.9ml)中的混合物中。攪拌9分鐘后，加入二氯甲烷和水。分離出有機相，依次用0.1N鹽酸、碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。將有機相濃縮，用硅膠層析柱純化，得到451mg的化合物140。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，3/7v/v甲苯/乙酸乙酯。
反應(yīng)路線31-多糖142的合成
制備例126O-(6-O-苯甲酰基-4-O-乙酰丙?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-O-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3-O-乙酰基-2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(141)將化合物117(144mg,0.064mmol)與化合物140(76g,0.058mmol)的混合物與甲苯進行共蒸發(fā)，并溶解于1/2v/v二氯甲烷/乙醚(3.0ml)中。在氮氣氛下，加入4埃分子篩(140mg)，將混合物冷卻至0℃。再加入四丁基二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(0.1M二氯甲烷溶液，128μl),15分鐘后，用碳酸氫鈉溶液使混合物停止反應(yīng)。用水和二氯甲烷萃取后，將有機相干燥，濃縮。產(chǎn)物先在Sephadex LH上進行層析處理(1/1v/v二氯甲烷/甲醇)，再用硅膠柱層析處理，得到124mg的化合物141，其α/β之比為8/2。
TLC∶Rf=0.60，硅膠，1/1v/v甲苯/丙酮。制備例127O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-O-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3-O-乙酰基-2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(142)按照制備化合物140相同的過程，將化合物141轉(zhuǎn)化成化合物142。
化合物142是以8/2α/β混合物分離出來的。TLC∶Rf=0.45，硅膠，1/1v/v甲苯/丙酮。
反應(yīng)路線32-三糖147的合成
制備例128O-(2,3,4,6-四-O-乙?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-乙?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1,2,3,6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖(144)在155℃下，將麥芽三糖(7g,13.9mmol)(商品)分批加至乙酸鈉(7g,85mmol)的乙酸酐(70ml)懸浮液中。15分鐘后，將澄清的溶液冷卻，再用冰-水(700ml)使反應(yīng)停止。用乙酸乙酯萃取后，有機相用水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，得到13.1g的化合物144。
TLC∶Rf=0.53，硅膠，7/3v/v二氯甲烷/乙酸乙酯。制備例129O-(2,3,4,6-四-O-乙?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-乙酰基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3,6-三-O-乙?；?1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(145)將化合物144(13g,13.5mmol)溶解于甲苯(80ml)中。在氮氣氛下，加入乙硫醇(1.97ml,26.9mmol)和三氟化硼乙醚合物(13.7ml,1M甲苯溶液)。攪拌60小時后，將混合物用水和二氯甲烷稀釋。萃取后，有機相用10％碳酸氫鈉溶液和水洗滌，過濾，濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠層析柱進行純化，得到8.6g的化合物145。
TLC∶Rf=0.60，硅膠，7/3v/v二氯甲烷/乙酸乙酯。制備例130O-(α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(146)按照制備化合物95相同的過程，將化合物145轉(zhuǎn)化成化合物145。
TLC∶Rf=0.80，硅膠，13/7/1.6/4v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。制備例131O-(2,3,4,6-四-O-苯甲酰基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-2,3,6-三-O-苯甲酰基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖乙苷(147)按照制備化合物92相同的過程，將化合物146轉(zhuǎn)化成化合物147。
TLC∶Rf=0.50，硅膠，9/1v/v甲苯/乙酸乙酯。
反應(yīng)路線33-多糖150的合成
制備例132O-(2,3,4,6-四-O-苯甲?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-O-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸芐酯)-(1→4)-O-(3-O-乙?；?2-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-(1→4)-2,3-二-O-芐基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(148)按照對化合物109所述的過程，使硫代糖苷147(105mg,0.066mmol)與受體142(55mg,0.017mmol)(α/β8/2)進行偶聯(lián)反應(yīng)。產(chǎn)物先在Sephadex LH上進行層析純化(1/1二氯甲烷/甲醇)，再用硅膠柱層析處理(9/0.5/0.5v/v/v乙醚/乙酸乙酯/乙醇)，得到49mg的化合物148。
TLC∶Rf=0.30，硅膠，85/7.5/7.5v/v/v乙醚/乙酸乙酯/乙醇。制備例133O-(2,3,4,6-四-O-苯甲?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲?；?α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(6-O-苯甲?；?2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(6-O-乙?；?2,3-二-O-甲基-O-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(3-O-乙酰基-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(149)在氮氣氛下，在10％鈀/炭(相對于化合物148,90％w/w)存在下，攪拌化合物148(47mg,0.01mmol)的乙酸乙酯(10ml)溶液3小時，過濾。將濾液濃縮，得到42mg的化合物149。
TLC∶Rf=0.35，硅膠，20/7/1.6/4v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。制備例134O-(α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(2,3-二-O-甲基-O-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-6-O-甲基-α-D-吡喃葡糖甲苷(150)將甲醇(0.022ml)與0.66N氫氧化鈉溶液(0.66ml)的混合物加至化合物149(41mg,0.01mmol)中，在室溫下攪拌20小時。混合物用水稀釋，再用0.5N的鹽酸溶液酸化，以使pH值為6.5。濃縮后，純產(chǎn)物采用9/1v/v水/乙腈在Sephadex G-25柱上進行脫鹽。將十六糖餾分合并，冷凍干燥，得到26mg的化合物150，為無定形白色粉末。
TLC∶Rf=0.35，硅膠，8/7/1.6/4v/v/v/v乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水。制備例1356-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-1,2-O-異亞丙基-3-O-甲基-α-D-呋喃葡萄糖(152)將二醇151(10g,42.7mmol)溶入無水二氯甲烷(100ml)中，加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(7.1g,47.3mmol)和咪唑(5.8g,85.3mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌。2小時后，混合物用二氯甲烷稀釋，用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物用硅膠層析柱純化(1/9v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到所需產(chǎn)物152(11.9g,80％)，為糖漿形式。D-34°(c1.9,CHCl3)制備例1366-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-1,2-O-異亞丙基-3-O-甲基-5-C-乙烯基-α-D-呋喃葡萄糖(154)在-78℃下，向無水二氯甲烷(40ml)中加入草酰氯(3.2ml,36.8mmol)和二甲亞砜(5.2ml,73.4mmol)，將混合物攪拌30分鐘。再加入化合物152(6.4g,18.4mmol)，攪拌1小時。再加入三乙胺(15.3ml,110.0mmol),30分鐘后，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，經(jīng)標準處理后，得到5-酮糖化合物(153)，其可直接用于下一步反應(yīng)。將粗產(chǎn)物酮153溶入無水四氫呋喃(100ml)中，并在0℃下加入1M乙烯基溴化鎂的四氫呋喃溶液(28ml,27.6mmol)。1小時后，將反應(yīng)混合物用氯化銨稀釋，用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，將殘余物用硅膠層析柱純化(1/9v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到所需化合物154(70％,4.8g)，為糖漿形式。D-40°(c1.3,CHCl3)元素分析計算值C,57.72；H,9.15實測值C,57.77；H,9.23。制備例1371,2,4,6-四-O-乙?；?3-O-甲基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃葡萄糖(156)將化合物154(3.5g,9.4mmol)溶入水(50ml)中；向其中加入IR-120樹脂(1g)，將混合物在80℃下加熱6小時。濾出樹脂，將濾液濃縮。粗產(chǎn)物155用乙酸酐(12ml)和吡啶(13ml)進行乙?；?。過量的乙酸酐用甲醇破壞，將溶液濃縮。殘余物用水和二氯甲烷萃取，有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，再用硅膠層析柱純化(3/2v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到四乙酸酯化合物156，為固體形式(75％,2.7g),m.p.50℃。D-84°(c1.6,CHCl3)元素分析計算值C,52.47；H,6.19實測值C,52.51；H,6.19。
Cl-MS:406(M+NH4),389(M+1)。制備例1382,3,6-三-O-芐基-4-O-(2,4,6-三-O-乙?；?3-O-甲基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃葡糖基)-α-D-吡喃葡糖甲苷(158)將化合物156(1.6g,4.1mmol)和化合物157(2.1g,4.5mmol)(P.J.Garegg和H.Hultberg，糖研究(Carbohydr.Res.)1981,93,C10)溶解于無水二氯甲烷(50ml)中，加入分子篩(4.0g)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時，然后，在-78℃下加入TMSOTf(0.95ml,5.2mmol)。讓反應(yīng)混合物緩慢升溫至室溫。2小時后，將反應(yīng)混合物用三乙胺中和，通過硅藻土過濾；濾液用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物用硅膠層析柱純化(4/1v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到所需化合物158(2.77g,85％)，為固體。m.p.47℃。D-36°(c0.6,CHCl3)元素分析計算值C,65.14；H,6.61實測值C,65.09；H,6.70。制備例1392,3,6-O-三-O-芐基-4-O-(4,6-O-異亞丙基-3-O-甲基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃葡糖基)-α-D-吡喃葡糖甲苷(160)將化合物158(2.7g,3.4mmol)溶解于甲醇(40ml)中。在0℃下，加入鈉(催化量)，將混合物在室溫下攪拌3小時。濃縮溶液，將殘余物159溶入無水丙酮(40ml)中，加入2,2-二甲氧基丙烷(2ml)和對甲苯磺酸(催化量)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。蒸出溶劑，再將殘余物回收入氯仿中，用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，再將殘余物用硅膠層析柱純化(1/1v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到4’,6’-異亞丙基-O-衍生物160(1.7g,70％)，為固體。m.p.55℃。D+13°(c0.8,CHCl3)元素分析計算值C,67.97；H,7.13實測值C,67.87；H,7.16。
Cl-MS:707(M+1),724(M+NH4)。制備例1402,3,6-三-O-芐基-4-O-(4,6-O-異亞丙基-3-O-甲基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃甘露糖基)-α-D-吡喃葡糖甲苷(162)在-78℃下，將無水二氯甲烷(10ml)中的草酰氯(0.35ml,4.0mmol)和無水DMSO(0.57ml,8.0mmol)攪拌30分鐘。將無水二氯甲烷(10ml)中的化合物160(1.4g,2.0mmol)加至溶液中，將混合物攪拌45分鐘。加入無水三乙胺(1.7ml,12.0mmol)將反應(yīng)混合物中和，再用二氯甲烷稀釋。用水洗滌后，有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物161可直接用于下一步反應(yīng)而無需純化。將酮161回收入無水四氫呋喃(15ml)中，并在-78℃下加入1N三甲基硼氫化鋰的四氫呋喃溶液(4ml,4.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時，加入5％氫氧化鈉(2ml)和過氧化氫(1ml)。將溶劑蒸出，殘余物回收入乙酸乙酯中，用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物用層析法純化(2/1v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到化合物162(1.0g,70％)。D-11°(c0.5,CHCl3)Cl-MS:724(M+18),707(M+1)。制備例1412,3,6-三-O-芐基-4-O-(2-O-乙?；?3-O-甲基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃甘露糖基)-α-D-吡喃葡糖甲苷(164)將化合物162(940mg,1.3mmol)溶解于吡啶(3ml)，加入乙酸酐(0.3ml)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時。蒸出過量的吡啶和乙酸酐，殘余物163可直接用于進行異亞丙基的脫保護，所述脫保護過程采用80％乙酸(5ml)，60℃下進行2小時。蒸出過量的乙酸，將殘余物用硅膠層析柱純化(4/lv/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到化合物164(660mg,70％)，為固體。m.p.53℃。D-10°(c0.8,CHCl3)Cl-MS:709(M+1),726(M+18)。制備例1422,3,6-三-O-芐基-4-(2-O-乙?；?3-O-甲基-6-O-甲苯磺酰基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃甘露糖基)-α-D-吡喃葡糖甲苷(165)將化合物164(600mg,0.9mmol)溶解于吡啶(3ml)，加入甲苯磺酰氯(240mg,1.3mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時。蒸出溶劑，殘余物用氯仿稀釋，用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，將殘余物用硅膠層析柱純化(1/1v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到甲苯磺?；衔?65(297mg,80％)，為糖漿。D-26°(c0.8,CHCl3)。制備例1432,3,6-三-O-芐基-4-(2,6-脫水-3-O-甲基-5-C-乙烯基-β-D-吡喃甘露糖基)-α-D-吡喃葡糖甲苷(166)將化合物165(550mg,0.6mmol)溶在乙醇(3ml)中，加入0.1N氫氧化鈉的乙醇溶液(5ml)。將反應(yīng)混合物在70℃下攪拌3小時，然后用IR-120樹脂(H+型)中和，通過硅藻土過濾。濃縮后，將殘余物用硅膠層析柱純化(1/1v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到化合物166(292mg,70％)，為糖漿。D+13°(c0.5,CHCl3)。
Cl-MS:666(M+18)。制備例1442,3,6-三-O-芐基-4-(3-O-甲基-2-O-5-C-亞甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸芐酯)-α-D-吡喃葡糖甲苷(167)將化合物166(260mg,0.4mmol)溶解于二氯甲烷(20ml)中，將溶液在-78℃下攪拌，鼓泡通入臭氧30秒。溶液的顏色變成淺黃色。向溶液中加入二甲基硫醚，然后，反應(yīng)混合物用水洗滌。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，然后不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)中。將粗產(chǎn)物醛回收在叔丁醇(16ml)中，加入2-甲基-2-丁烯(5ml)和水(16ml)。再向混合物中依次加入NaH2PO4(700mg)和NaClO2(700mg)。在室溫下劇烈攪拌該懸浮液過夜，再用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。有機相用硫酸鎂干燥，濃縮，然后不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)中。將粗產(chǎn)物酸回收在二甲基甲酰胺(25ml)中，加入四丁基碘化銨(0.7g,2.0mmol)、碳酸氫鉀(0.25g,2.5mmol)和芐基溴(0.250ml,2.1mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時。再用水和乙醚對反應(yīng)混合物進行萃取。醚相用硫酸鎂干燥，濃縮，殘余物用硅膠層析柱純化(2/1v/v乙酸乙酯/環(huán)己烷)，得到衍生物167(236mg,80％)，為糖漿。
Cl-MS:774(M+18)。
反應(yīng)路線34可用于合成其中L-艾杜糖醛酸構(gòu)型鎖定的五糖Pe的合成子的制備1．制備供體單糖
75％，兩步反應(yīng)路線34(續(xù))2．二糖的制備和前幾步轉(zhuǎn)化
反應(yīng)路線34(續(xù))3．雙環(huán)體系的構(gòu)建
實施例1O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]6-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽(168)按照方法5處理化合物31，得到化合物168(80％，三步)。[α]D+41(c=0.8，水)；ESIMS，負模式單一同位素質(zhì)量=7133.26；化學(xué)質(zhì)量=7138.90；實測質(zhì)量=7137.26±0.0原子量單位。主要異頭質(zhì)子的1HNMR(D2O)δ:5.71；5.48；5.46；5.44；5.17；5.08；4.81；4.78；4.67ppm。
重復(fù)相同的過程得到化合物169和170。
表Ⅰ
<
實施例4O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]15-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽(171)按照方法5處理化合物51(55mg,10.5mmol)，在冷凍干燥后，得到硫酸化化合物187(50mg,77％，以三步計)。[α]D+107(c=0.52，水)；ESIMS,正模式單一同位素質(zhì)量=6194.16化學(xué)質(zhì)量=6198.83；實測質(zhì)量=6195.33±1.79原子量單位。主要異頭質(zhì)子的1H NMR(D2O)δ:5.71；5.67；5.48；5.43；5.17；5.10；4.68ppm。
重復(fù)相同的過程得到化合物172和173。
表Ⅱ
實施例7O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽(174)按照方法5處理化合物75，得到化合物174(84％，以三步計)。[α]D+62(c=0.46，水)；ESIMS，正模式單一同位素質(zhì)量=4966.39；化學(xué)質(zhì)量=4970.04；實測質(zhì)量=4969.63±0.78原子量單位。主要異頭質(zhì)子的1H NMR(D2O)δ:5.69；5.63；5.57；5.46；5.44；5.41；5.15；5.06；4.79；4.66；4.62；4.41ppm。
按照實施例7所述過程并采用適宜的中間體，制備在以下表Ⅲ中所述的實施例8-12的化合物。
表Ⅲ
實施例13O-(2,3,4,6-四-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(6-O-甲基-2,3-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-6-O-甲基-2,3-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷(180)將全保護的十六糖150(26mg,0.0084mmol)溶解于二甲基甲酰胺(0.87ml)中。在氮氣氛下，加入三氧化硫/三乙胺復(fù)合物(125mg,0.67mmol,80當量)，將混合物在50℃下攪拌16小時。將混合物冷卻至0℃，加入碳酸氫鈉水溶液(227mg,2.6mmol)。將混合物濃縮至小體積，將其置于Sephadex G-25柱上，用9/1v/v水/乙腈洗脫。分離出適宜的餾分，濃縮至小體積，置于水中Dowex XW4 Na+離子交換柱上，將洗脫液冷凍干燥，得到37mg的化合物151，為白色粉末。[a]20D=+67.6(c=1，水)；MSESI，分子量為4370.6(H+型)，C128H222O113S16(理論分子量為4370.14)。
NMR；主要異頭質(zhì)子的位移(ppm)單元1:5.17；單元2:5.03；單元3:5.41；單元4:4.42；單元55.49；單元6:4.66；單元7、9和11:5.67；單元8、10和12:4.46；單元13:5.61；單元14:4.94；單元15:5.59；單元16:5.69。
反應(yīng)路線35-多糖180的結(jié)構(gòu)(實施例13)
權(quán)利要求
1．含抗凝血酶Ⅲ結(jié)合區(qū)的合成多糖及其鹽，特別是其可藥用鹽，所述結(jié)合區(qū)由共攜帶兩個羧酸功能基團和至少4個磺基的5個單糖的序列組成，該結(jié)合區(qū)在其非還原末端與凝血酶結(jié)合區(qū)直接連接，所述凝血酶結(jié)合區(qū)含有由選自己糖、戊糖或脫氧糖的10-25個單糖組成的序列，其中，所有羥基均各自獨立地被(C1-C6)烷基醚化或以磺基形式被酯化。
2．權(quán)利要求1的多糖，其為下式表示的多糖
其中波浪狀的線表示在吡喃糖環(huán)平面之下或之上的鍵，
表示含n個相同或不同單糖單元的多糖Po，所述多糖Po經(jīng)其異頭碳與Pe相連，
是選自己糖、戊糖和相應(yīng)脫氧糖的吡喃糖結(jié)構(gòu)單糖單元的圖示，所述單糖單元經(jīng)其異頭碳與另一單糖單元相連，并且所述單糖單元的羥基被相同或不同的基因-X取代，基團X選自(C1-C6)烷基和磺基，-n是10-25的整數(shù)，-Pe代表一個五糖結(jié)構(gòu)
其中-R1代表(C1-C6)烷基或磺基，-R1a代表R1，或與其所連接的氧原子以及同一環(huán)上帶有羧基的碳原子一起形成如下基團C-CH2-O-R代表(C1-C6)烷基，-W代表氧原子或亞甲基，或其一種鹽，特別是可藥用鹽。
3．權(quán)利要求2的多糖鹽，其中的陽離選自堿金屬陽離子，尤其是鈉和鉀。
4．權(quán)利要求2和3的多糖和其鹽，尤其是其可藥用鹽，其具有下式
其中
表示多糖Po的特定家族，所述多糖Po經(jīng)其異頭碳與(Ⅰ)所定義的Pe相連，
如(Ⅰ)下所定義，-OX如(Ⅰ)下所定義，對于相同的單糖，OX可以相同或不同，-[]m中所含的單糖形成重復(fù)m次的二糖，[]t中所含的單糖形成重復(fù)t次的二糖，-m是1-8,t是0-5,p是0-1，應(yīng)理解5≤m+t≤12。
5．權(quán)利要求2或3的多糖和其鹽，尤其是其可藥用鹽，其具有下式
其中
代表多糖Po的特定家族，所述多糖Po經(jīng)其異頭碳與(Ⅰ)所定義的Pe相連，
如(Ⅰ)所定義，-OX如(Ⅰ)下所定義，對于相同的單糖，OX可以相同或不同，-[]m’中所含的單糖重復(fù)m’次，[]t’中所含的單糖重復(fù)t’次，[]p’中所含的單糖重復(fù)p’次，-m’是1-5，t’是0-24,p’是0-24，應(yīng)理解10≤m’+t’≤25。
6．權(quán)利要求2或3的鹽以及它們對應(yīng)的酸，其陰離子對應(yīng)于下式
其中t代表5、6或7，陽離子是可藥用單價陽離子。
7．權(quán)利要求2或3的鹽以及它們對應(yīng)的酸，其陰離子對應(yīng)于下式
其中t代表5、6或7，陽離子是可藥用單價陽離子。
8．權(quán)利要求2或3的鹽以及它們對應(yīng)的酸，其陰離子對應(yīng)于下式
其中m代表1、2或3并且t代表2、3、4或5，陽離子是可藥用單價陽離子。
9．選自下組的多糖·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]5-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]6-O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-O-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]11-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]13-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(2,3-二-O-甲基-4,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3-二-O-甲基-6-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]15-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]2-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]3-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]4-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽·O-(3-O-甲基-2,4,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(3-O-甲基-2,6-二-O-磺基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-[O-(2,3,6-三-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-甲基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→4)]5-O-(2,3-二-O-甲基-6-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-O-(2,3-二-O-甲基-β-D-吡喃葡糖醛酸)-(1→4)-O-(2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖基)-(1→4)-(2,3-二-O-甲基-α-L-吡喃艾杜糖醛酸)-(1→4)-2,3,6-三-O-磺基-α-D-吡喃葡糖甲苷，鈉鹽。
10．制備式(Ⅰ)化合物的方法，其中，在第一步中，合成所需多糖(Ⅰ)的完全保護的前體，所述前體含有Pe區(qū)的保護的前體，所述Pe區(qū)在其非還原末端連接著一個硫酸酯化的多糖Po的保護前體，在第二步中，引入和/或解蔽帶有負電荷的基團。
11．下式的化合物，
其中T1和Tn可以相同或不同，表示臨時的、半永久性的或永久性的取代基，Z是羥基功能基的保護基。
12．下式的化合物，
其中T1和Tn可以相同或不同，表示臨時的、半永久性的或永久性的取代基，Z是羥基功能基的保護基。
13．一種藥物組合物，其含有權(quán)利要求1-9任一項的多糖或鹽作為活性成分，所述活性成分可以是與可藥用堿形成的鹽形式的或者酸形式的，所述活性成分與惰性的非毒性可藥用賦形劑相結(jié)合或與它們形成混合物。
14．權(quán)利要求13的藥物組合物，其呈劑量單位形式，其中的活性成分與至少一種藥物賦形劑相混合。
15．權(quán)利要求14的組合物，其中每劑量單位含0.1-100mg的活性成分。
16．權(quán)利要求15的組合物，其中每劑量單位含0.5-50mg的活性成分。
17．權(quán)利要求1-9的多糖或鹽在制備可用于血凝障礙引起的疾病的藥物中的用途。
全文摘要
公開了一種含抗凝血酶Ⅲ結(jié)合區(qū)的合成多糖及其鹽,特別是其可藥用鹽,所述結(jié)合區(qū)由共攜帶兩個羧酸功能基團和至少4個磺基的5個單糖的序列組成,該結(jié)合區(qū)在其非還原末端與凝血酶結(jié)合區(qū)直接相連,所述凝血酶結(jié)合區(qū)含有由選自己糖、戊糖或脫氧糖的10—25個單糖組成的序列,其中,所有羥基均各自獨立地被(C
文檔編號C08B37/00GK1228785SQ9719761
公開日1999年9月15日 申請日期1997年7月18日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月19日
發(fā)明者P·A·德里古咨, P·杜查索, J-M·赫伯特, M·派帝托, C·范博克爾, P·格魯坦輝斯, J·巴斯坦, C·德里夫-特羅普 申請人:薩諾費公司, 阿克佐諾貝爾公司