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西瓜果皮花斑性狀的KASP分子標(biāo)記及其用途

文檔序號:39716143發(fā)布日期:2024-10-22 13:02閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種西瓜果皮花斑性狀的kasp分子標(biāo)記,其特征在于,所述kasp分子標(biāo)記包括clm10和clm16;clm10位于西瓜基因組2號染色體的32351665bp處,前后50bp的序列如seq?idno.1或seq?id?no.2所示;clm16位于西瓜基因組2號染色體的32250756bp處,前后50bp的序列如seq?id?no.3或seq?id?no.4所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的kasp分子標(biāo)記,其特征在于,所述kasp分子標(biāo)記clm10基因型為a或c,c基因型前后50bp的序列如seq?id?no.1所示,對應(yīng)的表型為果皮有條紋,a基因型前后50bp的序列如seq?id?no.2所示,對應(yīng)的表型為果皮有花斑;clm16基因型為c或t,c基因型前后50bp的序列如seq?id?no.3所示,對應(yīng)的表型為果皮有條紋,t基因型前后50bp的序列如seq?id?no.4所示,對應(yīng)的表型為果皮有花斑。

3.一種權(quán)利要求1或2所述的kasp分子標(biāo)記在鑒定西瓜果皮花斑性狀中的用途。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途,其特征在于,分子標(biāo)記引物選自下列引物對,其中的核苷酸序列為5’-3’:

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途,其特征在于,包括以下步驟:

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途,其特征在于,所述步驟(2)中,pcr擴增使用的pcr反應(yīng)體系為:20~50ng/μl西瓜基因組dna?5.0μl,kasp?master?mix5.0μl,kasp?assay?mix?0.14μl,共10.14μl;所述kasp?assay?mix包括正向引物f-hex、正向引物f-fam和反向引物r,其摩爾濃度比為2:2:5;pcr反應(yīng)程序為:30℃,讀取熒光信號1分鐘;94℃,預(yù)變性15分鐘;94℃,變性20秒;61℃,退火60秒,10個循環(huán);94℃,變性20秒;55℃,退火60秒,31個循環(huán);30℃,讀取熒光信號1分鐘。

7.一種權(quán)利要求1或2所述的kasp分子標(biāo)記在西瓜果皮花斑株系或其后代分子輔助選擇育種方面的用途。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途,其特征在于,將果皮花紋基因供體zju129西瓜作為父本,果皮條紋西瓜zju132作為母本,進行雜交獲得f1代,然后回交、自交,結(jié)合標(biāo)記輔助選擇,選擇分離群體中與zju129基因型一致的單株用于育種改良,定向選擇和改良西瓜外表皮的性狀。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種西瓜果皮花斑性狀的KASP分子標(biāo)記及其用途。本發(fā)明獲得的分子標(biāo)記ClRP為西瓜耐低溫響應(yīng)控制葉面積變化基因的KASP標(biāo)記,能用于鑒定西瓜果皮花斑性狀的輔助育種,將果皮花斑材料ZJU129和果皮條紋材料ZJU132進行雜交,然后通過結(jié)合標(biāo)記輔助選擇。本發(fā)明可以在苗期預(yù)測果皮外觀表型,減少田間栽培工作量,極大提高了篩選的準(zhǔn)確性與效率。

技術(shù)研發(fā)人員:胡仲遠(yuǎn),王于,張明方,楊景華,呂小龍
受保護的技術(shù)使用者:浙江大學(xué)海南研究院
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2024/10/21
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