本發(fā)明涉及一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑的制備方法及其應(yīng)用，屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
改革開放以來，我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)取得了突飛猛進(jìn)的發(fā)展，成為世界上唯一養(yǎng)殖產(chǎn)量超過捕撈產(chǎn)量的漁業(yè)大國。我國現(xiàn)有的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)大多秉承了以“密、混、輪”為技術(shù)特征的傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式，即以多品種、高密度、大量施肥投餌而獲得高產(chǎn)量的養(yǎng)殖模式。為了提高單位水體的養(yǎng)殖產(chǎn)量，往往過分地增加水體營養(yǎng)，過度投餌、施肥和加大放養(yǎng)密度，致使水中氮、磷猛增，透明度下降，水質(zhì)惡化，水體中的餌料和養(yǎng)殖品種的代謝物大量積聚于池塘底部，底質(zhì)污染嚴(yán)重。水體和底質(zhì)中過量的有機(jī)質(zhì)分解不僅可消耗水體中的溶解氧，使水體環(huán)境處于缺氧狀態(tài)，同時(shí)可釋放出許多有害物質(zhì)，如氨氮、亞硝酸鹽和硫化氫等，直接危害水體中的養(yǎng)殖生物，或引起養(yǎng)殖生物的應(yīng)激反應(yīng)。對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物，產(chǎn)生應(yīng)激的起因主要是環(huán)境因素造成的。低溶氧、低pH值、高水溫、高密度、感染寄生蟲以及分子氨、硫化氫等有毒物質(zhì)都會(huì)造成養(yǎng)殖對(duì)象產(chǎn)生程度不同的應(yīng)激反應(yīng)。動(dòng)物應(yīng)激的生理學(xué)表現(xiàn)的主要指標(biāo)是體內(nèi)腎上腺素和皮質(zhì)醇大量產(chǎn)生或長期處于較高水平，使其合成代謝降低，分解代謝升高，抑制生長和繁殖活動(dòng)。應(yīng)激反應(yīng)也會(huì)抑制動(dòng)物的免疫功能，導(dǎo)致病害。生產(chǎn)中很多難以治愈的頑固性的魚病往往是長期處于應(yīng)激反應(yīng)的結(jié)果。據(jù)調(diào)查，除了寄生蟲病之外，所有的“細(xì)菌性”、“病毒性”病癥幾乎都與慢性、長期應(yīng)激有關(guān)聯(lián)。在天然水體中，各種有益菌和致病微生物是共存的，處于一種平衡狀態(tài)。而當(dāng)水體環(huán)境因子產(chǎn)生異常時(shí)，這種平衡狀態(tài)將被打破，導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物處于一種應(yīng)激狀態(tài)，生理功能紊亂，逐漸感染疾病。因此從生態(tài)學(xué)角度來看，盡管養(yǎng)殖水體是一個(gè)極為復(fù)雜的水生生態(tài)系統(tǒng)，但不論其多復(fù)雜，主要是水生生物—病原—環(huán)境三者之間的平衡關(guān)系。養(yǎng)殖水體生態(tài)環(huán)境的控制已成為發(fā)展我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的關(guān)鍵問題。目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境控制上，微生物制劑受到極大的關(guān)注。其安全性高、使用方便、成本低、控制效果好，但當(dāng)水體中病原生物大量繁殖時(shí)因受生物競爭的影響而效果不佳。而在病原控制上，當(dāng)前的主要措施仍是消毒劑和抗生素，雖然具有一定的效果，但存在風(fēng)險(xiǎn)隱患。中草藥因具有天然、高效、毒副作用少、資源豐富等優(yōu)點(diǎn)，在水產(chǎn)動(dòng)物病害防治和抗應(yīng)激上日益受到重視。但中草藥成分復(fù)雜、藥理性不明確、提取困難、水溶性不佳等又影響了其在水產(chǎn)養(yǎng)殖水體環(huán)境和病害控制上的應(yīng)用。因此構(gòu)建一種使用方便、安全無害、兼具微生物制劑凈水和中草藥抑菌抗應(yīng)激功能于一體、能在短時(shí)間內(nèi)快速凈化水質(zhì)、恢復(fù)水產(chǎn)動(dòng)物生理機(jī)能、提高免疫的微生物發(fā)酵中草藥產(chǎn)品顯得十分重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑及制備方法及其應(yīng)用，利用兩種特異性微生物菌種經(jīng)合理組配，形成混合菌種，在以糖蜜等為基礎(chǔ)的培養(yǎng)液中發(fā)酵具抑菌和提高免疫力的中草藥，生成含微生物活菌的發(fā)酵型中草藥制劑。將制劑直接投入養(yǎng)殖水體，可有效地去除或轉(zhuǎn)化養(yǎng)殖水體中的氨氮和亞硝酸氮，抑制和拮抗弧菌等病原生物，減少養(yǎng)殖中后期有害物質(zhì)的積累，提高養(yǎng)殖生物機(jī)體的免疫力，達(dá)到生物凈水防病的目的，減輕病害所造成的經(jīng)濟(jì)損失，保證養(yǎng)殖產(chǎn)量和質(zhì)量。按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑的制備方法，所述發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑為液體制劑，由枯草芽孢桿菌CGMCC1.1413和植物乳桿菌CGMCC1.557組成混合菌在一定培養(yǎng)基和發(fā)酵溫度下與中草藥一同發(fā)酵，完成后加工成液體制劑；按重量份計(jì)具體步驟如下：（1）枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)枯草芽孢桿菌CGMCC1.1413菌苔，接種到50~100mL滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于30~35℃、100~120r·min-1搖床上培養(yǎng)24~30h；然后將其接入5~8L經(jīng)滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于30~35℃、100~120r·min-1搖床上培養(yǎng)24~30h，制成菌種種子液備用；（2）植物乳桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)植物乳桿菌CGMCC1.557菌苔，接種到50~100mL滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于32~37℃靜置培養(yǎng)30~40h；然后將其接入5~8L經(jīng)滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于32~37℃靜置培養(yǎng)28~32h，制成菌種種子液備用；（3）混合菌的組合：取步驟（1）培養(yǎng)至活菌濃度≥108CFU·mL-1的枯草芽孢桿菌和步驟（2）中培養(yǎng)至活菌濃度≥108CFU·mL-1的植物乳桿菌各5~8L，放入經(jīng)滅菌的25L桶中混合，得到菌種混合種子液備用；（4）中草藥的微生物發(fā)酵：在1.0噸不銹鋼發(fā)酵罐中加入總體積600~700L的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用；將步驟（3）所得菌種混合種子液10~16L接入發(fā)酵罐，在32~37℃、轉(zhuǎn)速40~80r·min-1的條件下培養(yǎng)28~35h，待菌液濃度≥108CFU·mL-1時(shí)，調(diào)pH值為3.2~3.8，用5L塑料桶分裝，最后包裝入庫，得到產(chǎn)品水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑。步驟（1）中所述的肉湯液體培養(yǎng)基為：蛋白胨10g·L-1，牛肉膏5g·L-1，NaCl5g·L-1，調(diào)節(jié)pH值6.8~7.2，經(jīng)121℃滅菌20min后冷卻備用；步驟（2）中所述的MRS液體培養(yǎng)基為，牛肉膏10g·L-1，蛋白胨10g·L-1，酵母膏5g·L-1，葡萄糖5g·L-1，檸檬酸二胺2g·L-1，吐溫801g·L-1，乙酸鈉5g·L-1，磷酸氫二鉀2g·L-1，硫酸鎂0.2g·L-1、硫酸錳0.05g·L-1，碳酸鈣20g·L-1，調(diào)節(jié)pH值6.4~6.6，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用；步驟（4）中所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：糖蜜12~18份，大豆粉3~7份，酵母膏3~7份，乙酸鈉1~3份，硫酸鎂0.1~0.5份，磷酸氫二鉀1~2份，中草藥12~20份，水50~60份，于室溫下在發(fā)酵罐中溶解混合，調(diào)節(jié)溶液pH值至6.4~6.6，121℃滅菌15min，冷卻后備用。步驟（1）中所得菌種種子液的OD600值為0.9~1.2，活菌數(shù)≥108CFU·mL-1；步驟（2）中所得菌種種子液活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述糖蜜中糖分含量≥55%。所述中草藥為100目以上的粉狀混合物，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：魚腥草35~45份，金銀花12~18份，黃芪10~20份，黃芩10~15份，甘草10~15份。采用乳酸和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值。所述水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑的應(yīng)用，將水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑投放于水質(zhì)待改善的養(yǎng)殖池塘中，用量為0.5~1kg/畝·米水深，連用3~5天。本發(fā)明中各組分的作用原理如下：（1）枯草芽孢桿菌：枯草芽孢桿菌（Basillussubtilis）是芽孢桿菌屬的一種，單個(gè)菌體0.7～0.8μm×2～3μm，著色均勻。無莢膜，周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽性菌，芽孢大小為0.6～0.9μm×1.0～1.5μm，橢圓至柱狀，位于菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色?？莶菅挎邨U菌菌液是枯草芽孢桿菌的發(fā)酵生產(chǎn)的，在菌體生長過程中能產(chǎn)生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì)，對(duì)水環(huán)境中的病原微生物有明顯的抑制作用；枯草芽孢桿菌可刺激水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物生長發(fā)育，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫功能，提高群體免疫力；枯草芽孢桿菌菌體自身合成α-淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，可使中草藥的藥用成份釋放，在消化道中與動(dòng)物體內(nèi)的消化酶類一同發(fā)揮作用；枯草芽孢桿菌在生長過程中可吸收利用水中的COD、氨氮、亞硝酸鹽等，具有較好的凈水效果。本發(fā)明利用其發(fā)酵中草藥，釋放中草藥有效藥用成份，并通過抑菌、凈水等多種功能來修復(fù)水體環(huán)境。（2）植物乳桿菌：植物乳桿菌（Lactobacillusplantarμm）是乳酸菌的一種，菌種為直或彎的圓端直桿菌，通常為0.9~1.2μm×3.0~8.0μm，單個(gè)、成對(duì)或短鏈狀。通常缺乏鞭毛，但能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽性，不生芽孢。兼性厭氧，表面菌落直徑約3mm，凸起，呈圓形，表面光滑，細(xì)密，色白，偶爾呈淺黃或深黃色。屬化能異養(yǎng)菌，生長需要營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基，需要泛酸鈣和煙酸，但不需要硫胺素、吡哆醛或吡哆胺、葉酸、維生素B12。能發(fā)酵戊糖或葡萄糖酸鹽，終產(chǎn)物中85%以上是乳酸。通常不還原硝酸鹽，不液化明膠，接觸酶和氧化酶皆陰性。能產(chǎn)生DL-乳酸，有1,6-二磷酸果糖醛縮酶和單磷酸己糖途徑的活性，能在葡萄酸鹽中生長，并產(chǎn)CO2。發(fā)酵1分子的核糖或其他的戊糖生成1分子的乳酸和1分子的乙酸。15℃能生長，通常最適生長溫度為30～35℃。此菌與其他乳酸菌的區(qū)別在于此菌的活菌數(shù)比較高，能大量的產(chǎn)酸，使水中的pH值穩(wěn)定不升高，而且其產(chǎn)出的酸性物質(zhì)能降解重金屬；由于此菌是兼性好氧，在繁殖過程中能產(chǎn)出特有的乳酸桿菌素，乳酸桿菌素是一種生物型的防腐劑。在養(yǎng)殖中后期，由于動(dòng)物的糞便和殘餌料增加，會(huì)下沉到池塘的底部，并且腐爛，滋生很多病菌，生成大量的氨氮和亞硝酸鹽，使底部偷死現(xiàn)象嚴(yán)重。如果長期使用植物乳酸桿菌，就能很好的抑制底部糞便和殘餌料的腐爛，也就降低了氨氮和亞硝酸鹽的增加，大量減少了化工降解素的用量，使養(yǎng)殖成本降低。此外，植物乳桿菌具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用；對(duì)致病菌有抑制作用；可降低血清膽固醇含量和預(yù)防心血管疾??；維持腸道內(nèi)菌群平衡；促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收；緩解乳糖不耐癥；抑制腫瘤細(xì)胞的形成等。本發(fā)明利用其發(fā)酵中草藥，釋放中草藥有效藥用成份，并通過其分泌乳酸和乳酸桿菌素來抑菌、轉(zhuǎn)化去除水體中的亞硝酸鹽等。（3）魚腥草：精細(xì)棕黃色粉末，為魚腥草全草的干燥品粉碎物，具有清熱解毒，消癰排濃，利尿通淋功能。用于防治肺癰吐膿，痰熱喘咳，熱痢，熱淋，癰腫瘡毒。本發(fā)明應(yīng)用魚腥草作為抗菌抑菌、清熱解毒的藥物，防止弧菌、氣單胞菌等侵染水產(chǎn)生物機(jī)體。（4）金銀花：金銀花又名忍冬，自古被譽(yù)為清熱解毒的良藥。它性甘寒氣芳香，甘寒清熱而不傷胃，芳香透達(dá)又可祛邪。金銀花既能宣散風(fēng)熱，還善清解血毒，用于各種熱性病，如身熱、發(fā)疹、發(fā)斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等癥，均效果顯著。金銀花含有綠原酸、木犀草素苷等藥理活性成分，對(duì)溶血性鏈球菌、金黃葡萄球菌等多種致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有較強(qiáng)的抑制力，另外還可增強(qiáng)免疫力、抗早孕、護(hù)肝、抗腫瘤、消炎、解熱、止血（凝血）、抑制腸道吸收膽固醇等，其臨床用途非常廣泛，可與其它藥物配伍用于治療呼吸道感染、菌痢、急性泌尿系統(tǒng)感染、高血壓等40余種病癥。本發(fā)明應(yīng)用金銀花抗菌抗病毒，提高水產(chǎn)生物機(jī)體的免疫力。（5）黃芪：黃芪又名綿芪，主產(chǎn)于內(nèi)蒙古、山西、甘肅、黑龍江等地。黃芪性甘溫，歸肺經(jīng)，有補(bǔ)氣升陽、益衛(wèi)固表之功能。經(jīng)常用黃芪配伍瓊珍靈芝煎湯或泡水代茶飲，具有良好的防病保健作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，黃芪有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。黃芪不僅能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，改善心肌供血，提高免疫功能，而且能夠延緩細(xì)胞衰老的進(jìn)程。本發(fā)明應(yīng)用黃芪抗應(yīng)激，提高水產(chǎn)生物機(jī)體的免疫力。（6）黃芩：黃芩別名山茶根、土金茶根，是唇形科黃芩屬多年生草本植物；肉質(zhì)根莖肥厚，葉堅(jiān)紙質(zhì)，生于向陽草坡地、休荒地上，海拔60～1300（1700～2000）米，產(chǎn)于黑龍江，遼寧，內(nèi)蒙古，河北，河南，甘肅，陜西，山西，山東，四川等地，中國北方多數(shù)省區(qū)都可種植。俄羅斯東西伯利亞，蒙古，朝鮮，日本均有分布。黃芩的根入藥，味苦、性寒，有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。主治溫?zé)岵?、上呼吸道感染、肺熱咳嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎動(dòng)不安、高血壓、癰腫癤瘡等癥。黃芩的臨床抗菌性比黃連好，而且不產(chǎn)生抗藥性。本發(fā)明應(yīng)用黃芩作為抗菌抑菌、清熱解毒的藥物，防止弧菌、氣單胞菌等侵染水產(chǎn)生物機(jī)體。（7）甘草：甘草別名國老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子，豆科、甘草屬多年生草本，根與根狀莖粗壯，是一種補(bǔ)益中草藥。藥用部位是根及根莖，藥材性狀根呈圓柱形，長25～100厘米，直徑0.6～3.5厘米。外皮松緊不一，表面紅棕色或灰棕色。根莖呈圓柱形，表面有芽痕，斷面中部有髓。氣微，味甜而特殊。甘草多生長在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠邊緣和黃土丘陵地帶。根和根狀莖供藥用。功能主治清熱解毒、祛痰止咳、脘腹等。可調(diào)和某些藥物的烈性，如可緩和大黃、芒硝的瀉下作用及其對(duì)胃腸道的刺激。甘草還有抗炎，抗過敏作用，能保護(hù)發(fā)炎的咽喉和氣管粘膜。甘草浸膏和甘草酸對(duì)某些毒物有類似葡萄糖醛酸的解毒作用。本發(fā)明應(yīng)用甘草作為調(diào)和、解毒的藥物，提高中草藥抗菌抗病毒功效，減少毒性影響。生物材料樣品保藏：枯草芽孢桿菌Basillussubtilis，CGMCC1.1413，公開于中國普通微生物菌種保藏管理中心，網(wǎng)址http://www.bnbio.com/p_28/p_45328.html；植物乳桿菌Lactobacillusplantarum，CGMCC1.557，公開于中國普通微生物菌種保藏管理中心，網(wǎng)址http://www.bnbio.com/p_66/p_50866.html。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明利用枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌兩株具不同性狀和生態(tài)活性的微生物菌株，混合發(fā)酵具抑菌和提高免疫力的魚腥草、黃芪等中草藥，生成含微生物活菌的發(fā)酵型中草藥制劑，集凈化水質(zhì)、抑制病原、修復(fù)腸道、保肝護(hù)肝、促進(jìn)消化、防病促長等多功能于一體，可直接潑灑，使用方便，使用量小，每畝水面每米水深的最小用量僅為0.5公斤，不受環(huán)境條件的影響，特別是提高了中草藥的水溶性和生物可利用性，將微生物與中草藥有機(jī)地結(jié)合在一起；使用后可有效地去除或轉(zhuǎn)化養(yǎng)殖水體中的氨氮和亞硝酸氮，抑制和拮抗弧菌等病原生物，減少養(yǎng)殖中后期有害物質(zhì)的積累，提高養(yǎng)殖生物機(jī)體的免疫力，達(dá)到生物凈水防病的目的，減輕病害所造成的經(jīng)濟(jì)損失，保證養(yǎng)殖產(chǎn)量和質(zhì)量。具體實(shí)施方式實(shí)施例1：一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑及制備方法，采用以下工藝步驟：（1）枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)枯草芽孢桿菌（Basillussubtilis，CGMCC1.1413，由由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供）菌苔，接種到50mL滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于30℃、120r·min-1搖床上培養(yǎng)24h。然后將其接入5L經(jīng)滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于30℃、120r·min-1搖床上培養(yǎng)24h，制成菌種種子液備用。此時(shí)菌液的OD600值約等于1.0，活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述的肉湯液體培養(yǎng)基，含蛋白胨10g·L-1，牛肉膏5g·L-1，NaCl5g·L-1，調(diào)節(jié)pH7.0，經(jīng)121℃滅菌20min后冷卻備用。（2）植物乳桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum，CGMCC1.557，由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供）菌苔，接種到50mL滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于35℃靜置培養(yǎng)36h。然后將其接入5L經(jīng)滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于35℃靜置培養(yǎng)30h，制成菌種種子液備用。此時(shí)菌液的活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述的MRS液體培養(yǎng)基為，牛肉膏10g·L-1，蛋白胨10g·L-1，酵母膏5g·L-1，葡萄糖5g·L-1，檸檬酸二胺2g·L-1，吐溫801g·L-1，乙酸鈉5g·L-1，磷酸氫二鉀2g·L-1，硫酸鎂0.2g·L-1、硫酸錳0.05g·L-1，碳酸鈣20g·L-1，調(diào)節(jié)pH6.5，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用。（3）混合菌的組合：取上述培養(yǎng)至活菌濃度≥108CFU·mL-1的枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌各5L，放入經(jīng)滅菌的25L桶中混合，備用。（4）中草藥的微生物發(fā)酵：在1.0噸不銹鋼發(fā)酵罐中加入總體積700L的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用。將上述菌種混合種子液10L接入發(fā)酵罐，在35℃、轉(zhuǎn)速60r·min-1的條件下培養(yǎng)30h，待菌液濃度≥108CFU·mL-1時(shí)，調(diào)pH為3.5，用5L塑料桶分裝，最后包裝入庫。所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：糖蜜（糖分含量≥55%）15份，大豆粉7份，酵母膏5份，乙酸鈉2份，硫酸鎂0.2份，磷酸氫二鉀1份，中草藥18份，水51.8份，于室溫下在發(fā)酵罐中溶解混合，調(diào)節(jié)溶液pH值至6.5，121℃滅菌15min，冷卻后備用。所述中草藥為100目以上的粉狀混合物，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：魚腥草40份，金銀花15份，黃芪15份，黃芩15份，甘草15份。所述的不銹鋼發(fā)酵罐為常規(guī)設(shè)備，在市場上購買，無任何特殊要求，采用通常的加工方法。實(shí)施例2：一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑及制備方法，采用以下工藝步驟：（1）枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)枯草芽孢桿菌（Basillussubtilis，CGMCC1.1413，由由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供）菌苔，接種到100mL滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于35℃、100r·min-1搖床上培養(yǎng)28h。然后將其接入8L經(jīng)滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于35℃、100r·min-1搖床上培養(yǎng)28h，制成菌種種子液備用。此時(shí)菌液的OD600值約等于1.0，活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述的肉湯液體培養(yǎng)基，含蛋白胨10g·L-1，牛肉膏5g·L-1，NaCl5g·L-1，調(diào)節(jié)pH7.2，經(jīng)121℃滅菌20min后冷卻備用。（2）植物乳桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum，CGMCC1.557，由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供）菌苔，接種到100mL滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于37℃靜置培養(yǎng)30h。然后將其接入8L經(jīng)滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于37℃靜置培養(yǎng)28h，制成菌種種子液備用。此時(shí)菌液的活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述的MRS液體培養(yǎng)基為，牛肉膏10g·L-1，蛋白胨10g·L-1，酵母膏5g·L-1，葡萄糖5g·L-1，檸檬酸二胺2g·L-1，吐溫801g·L-1，乙酸鈉5g·L-1，磷酸氫二鉀2g·L-1，硫酸鎂0.2g·L-1、硫酸錳0.05g·L-1，碳酸鈣20g·L-1，調(diào)節(jié)pH6.6，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用。（3）混合菌的組合：取上述培養(yǎng)至活菌濃度≥108CFU·mL-1的枯草芽孢桿菌8L和植物乳桿菌5L，放入經(jīng)滅菌的25L桶中混合，備用。（4）中草藥的微生物發(fā)酵：在1.0噸不銹鋼發(fā)酵罐中加入總體積600L的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用。將上述菌種混合種子液10L接入發(fā)酵罐，在35℃、轉(zhuǎn)速60r·min-1的條件下培養(yǎng)30h，待菌液濃度≥108CFU·mL-1時(shí)，調(diào)pH為3.5，用5L塑料桶分裝，最后包裝入庫。所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：糖蜜（糖分含量≥55%）15份，大豆粉5份，酵母膏5份，乙酸鈉2份，硫酸鎂0.1份，磷酸氫二鉀1份，中草藥15份，水56.9份，于室溫下在發(fā)酵罐中溶解混合，調(diào)節(jié)溶液pH值至6.5，121℃滅菌15min，冷卻后備用。所述中草藥為100目以上的粉狀混合物，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：魚腥草38份，金銀花16份，黃芪16份，黃芩15份，甘草15份。所述的不銹鋼發(fā)酵罐為常規(guī)設(shè)備，在市場上購買，無任何特殊要求，采用通常的加工方法。實(shí)施例3：一種水產(chǎn)養(yǎng)殖用水產(chǎn)養(yǎng)殖用發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑及制備方法，采用以下工藝步驟：（1）枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)枯草芽孢桿菌（Basillussubtilis，CGMCC1.1413，由由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供）菌苔，接種到75mL滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于30℃、110r·min-1搖床上培養(yǎng)30h。然后將其接入5L經(jīng)滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，于30℃、110r·min-1搖床上培養(yǎng)30h，制成菌種種子液備用。此時(shí)菌液的OD600值約等于1.0，活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述的肉湯液體培養(yǎng)基，含蛋白胨10g·L-1，牛肉膏5g·L-1，NaCl5g·L-1，調(diào)節(jié)pH7.0，經(jīng)121℃滅菌20min后冷卻備用。（2）植物乳桿菌的培養(yǎng)：從試管斜面上取一環(huán)植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum，CGMCC1.557，由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供）菌苔，接種到50mL滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于32℃靜置培養(yǎng)40h。然后將其接入5L經(jīng)滅菌的MRS液體培養(yǎng)基中，于32℃靜置培養(yǎng)32h，制成菌種種子液備用。此時(shí)菌液的活菌數(shù)≥108CFU·mL-1。所述的MRS液體培養(yǎng)基為，牛肉膏10g·L-1，蛋白胨10g·L-1，酵母膏5g·L-1，葡萄糖5g·L-1，檸檬酸二胺2g·L-1，吐溫801g·L-1，乙酸鈉5g·L-1，磷酸氫二鉀2g·L-1，硫酸鎂0.2g·L-1、硫酸錳0.05g·L-1，碳酸鈣20g·L-1，調(diào)節(jié)pH6.4，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用。（3）混合菌的組合：取上述培養(yǎng)至活菌濃度≥108CFU·mL-1的枯草芽孢桿菌6L和植物乳桿菌5L，放入經(jīng)滅菌的25L桶中混合，備用。（4）中草藥的微生物發(fā)酵：在1.0噸不銹鋼發(fā)酵罐中加入總體積700L的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)121℃滅菌15min后冷卻備用。將上述菌種混合種子液10L接入發(fā)酵罐，在32℃、轉(zhuǎn)速40r·min-1的條件下培養(yǎng)35h，待菌液濃度≥108CFU·mL-1時(shí)，調(diào)pH為3.5，用5L塑料桶分裝，最后包裝入庫。所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：糖蜜（糖分含量≥55%）18份，大豆粉3份，酵母膏3份，乙酸鈉1份，硫酸鎂0.1份，磷酸氫二鉀1份，中草藥20份，水53.9份，于室溫下在發(fā)酵罐中溶解混合，調(diào)節(jié)溶液pH值至6.5，121℃滅菌15min，冷卻后備用。所述中草藥為100目以上的粉狀混合物，其組份比例按重量份數(shù)計(jì)：魚腥草40份，金銀花12份，黃芪18份，黃芩15份，甘草15份。所述的不銹鋼發(fā)酵罐為常規(guī)設(shè)備，在市場上購買，無任何特殊要求，采用通常的加工方法。應(yīng)用實(shí)施例1應(yīng)用于浙江地區(qū)的鱖魚養(yǎng)殖浙江湖州地區(qū)的鱖魚養(yǎng)殖池塘，面積20畝，水深2.0米，因大量投飼冰鮮餌料魚，導(dǎo)致高溫季節(jié)池塘水質(zhì)過濃，水色不好，水質(zhì)中氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等分別達(dá)到1.78mg/L、0.65mg/L和0.40mg/L，超標(biāo)嚴(yán)重。底質(zhì)發(fā)黑發(fā)臭，影響鱖魚的生長，病害嚴(yán)重，水體中檢出嗜水性氣單胞菌。在一晴天上午10點(diǎn)左右將將按實(shí)例1配方的發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑應(yīng)用于養(yǎng)殖池塘中，用量為0.5kg/畝·米水深，連用3天。用后5天水色好轉(zhuǎn)，透明度增大至30cm，底質(zhì)臭味消失，水體中氨氮、亞硝酸鹽和硫化氫含量降至0.75mg/L、0.15mg/L和0.12mg/L，嗜水性氣單胞菌未檢出，魚類活動(dòng)恢復(fù)正常。應(yīng)用實(shí)施例2應(yīng)用于廣東地區(qū)的羅非魚養(yǎng)殖廣東茂名地區(qū)的羅非魚養(yǎng)殖塘，面積15畝，水深1.5米，夏季高溫時(shí)池塘水質(zhì)過濃，水色不好，水質(zhì)中氨氮、亞硝酸氮分別達(dá)到2.06mg/L、0.45mg/L，超標(biāo)嚴(yán)重，水體中無乳鏈球菌達(dá)5.2×105個(gè)/mL，影響羅非魚的生長。在一晴天上午10點(diǎn)左右將將按實(shí)例2配方的發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑應(yīng)用于養(yǎng)殖池塘中，用量為0.8kg/畝·米水深，連用3天。用后5天水色好轉(zhuǎn)，由濃綠色轉(zhuǎn)為淺黃綠色，透明度增大；水體中氨氮、亞硝酸氮含量降至0.52mg/L和0.15mg/L；無乳鏈球菌數(shù)量下降為7.8×103個(gè)/mL，羅非魚攝食正常。應(yīng)用實(shí)施例3應(yīng)用于江蘇地區(qū)的南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖江蘇蘇州地區(qū)的南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖塘，面積為25畝，水深1.2米以上。6月夏初時(shí)節(jié)發(fā)現(xiàn)有白便現(xiàn)象，此時(shí)水面藻類較多，藍(lán)藻占30%以上，水質(zhì)氨氮達(dá)1.25mg/L，亞硝酸鹽達(dá)0.38mg/L。對(duì)蝦肝臟發(fā)紅，腸道細(xì)長，空腸空胃，反應(yīng)遲鈍。將按實(shí)例3配方的發(fā)酵型中草藥水質(zhì)改良劑均勻潑灑于養(yǎng)殖池中，用量為1kg/畝·米水深，連續(xù)使用3天。停用二天后分析可見，與不用的對(duì)照池塘相比，使用的池塘水色明顯好轉(zhuǎn)，氨氮下降至0.56mg/L，亞硝酸鹽下降至0.11mg/L，南美白對(duì)蝦攝食增加，胃腸填充物增多，肝臟紅腫減退，白便減少70%，南美白對(duì)蝦的不健康狀況得到有效改善。