專利名稱：新的肽衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對胰蛋白酶類絲氨酸蛋白酶，特別是凝血酶和例如激肽釋放酶等激肽原酶具有抑制作用的新型競爭性抑制劑、它們的合成、含這些化合物作為活性組份的藥物制劑和這些化合物分別作為凝血酶抑制劑與抗凝血劑和作為消炎型抑制劑的應用。本發(fā)明還涉及化合物在合成一種絲氨酸蛋白酶抑制劑的過程中作為起始物質(zhì)的新用途。本發(fā)明還涉及在絲氨酸蛋白酶抑制劑中的一種新結(jié)構(gòu)片段。
背景技術(shù)：
血液凝固是止血(即阻止血液從受傷的血管中流失)和血栓形成(即血管被血塊病理性閉塞)中的關(guān)鍵過程。血液凝固是一復雜系列酶反應的結(jié)果，其中最后步驟之一是酶原凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚悦改浮?br> 在血液凝固過程中凝血酶起著重要作用。它激活血小板，將血纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為可自發(fā)聚合成絲的血纖維蛋白單體，并且激活因子VIII，而因子VIII將聚合物交聯(lián)至不溶性血纖維蛋白上。凝血酶在一正反饋反應(Positive feedback reaction)中還激活因子V和因子VIII。凝血酶抑制劑因此可望通過抑制血小板、形成血纖維蛋白和穩(wěn)定血纖維蛋白而成為有效的抗凝劑。通過抑制正反饋機理，它們可望在導致血液凝固和凝血作用的過程鏈中的早期起抑制作用。
激肽原酶是作用于激肽原以產(chǎn)生激肽(血管舒緩激肽、胰激肽和蛋氨酸-賴氨酸-舒緩激肽)的絲氨酸蛋白酶。血漿激肽釋放酶，組織激肽釋放酶和肥大細胞類胰蛋白酶代表著重要的激肽原酶。
激肽(血管舒緩激肽、胰激肽)一般與炎癥有關(guān)。例如，實際炎癥過程與血管滲透性增大有關(guān)，導致血漿滲出進入組織中。隨后的血漿滲出液含有循環(huán)血液的全部蛋白物系，只要實際血漿滲出過程一直進行，則血漿衍生的激肽原就不可避免地與不同的激肽釋放酶相互作用，不斷形成激肽。血漿滲出的發(fā)生并不取決于與炎癥有關(guān)的機理，不管炎癥機理是過敏反應、感染還是其他因素(Persson等，Ediforial，Thorax，1992，47993-1000)。因此血漿滲出為許多疾病的特征之一，這些疾病包括哮喘、鼻炎、感冒和腸炎疾病。特別在過敏癥中，肥大細胞類胰蛋白酶將被釋放出來，有助于激肽形成和哮喘，鼻炎及腸道疾病中的其他致病(Salomonsson等，Am.Rev.Respir.Dis.，1992，1461535-1542)。
激肽是具有平滑肌效應，分泌效應、神經(jīng)原效應和延長炎癥過程的作用，包括激活磷脂酶A2、增加血管滲透性等的生物高活性物質(zhì)。后一種作用可引起激肽為更多激肽的生成創(chuàng)造條件這樣一種惡性循環(huán)。
組織激肽釋放酶主要是分解低分子量激肽原使之生成胰激肽，而血漿激肽釋放酶優(yōu)選從高分子量激肽原釋放出血管舒緩激肽。
現(xiàn)有技術(shù)Blombck等在J.Clin，Lab.Invest.24，suppl 107，59(1969)中首先報導了以圍繞血纖維蛋白原Aa鏈斷裂位置的氨基酸序列為基礎(chǔ)的凝血酶抑制劑，文章認為序列Phe-Val-Arg(P9-P2-P1，在本發(fā)明中稱作P3-P2-P1序列)是最好的抑制劑。
在US 4,346,078中，S.Bajusz等描述了凝血酶抑制劑H-DPhe-Pro-Agm，這種抑制劑是一種在P1位有一氨基烷基胍的二肽基衍生物。
EP-A2-0,468,231公開了以肽衍生物為基礎(chǔ)的凝血酶抑制劑，這種肽衍生物在P1-位帶一如3-氨甲基-1-脒基哌啶的環(huán)狀氨基烷基胍。
在EP-A2-0,185,390中S.Bajusz等公開了用精氨酸醛代替胍基丁胺得到一種具有更高效力的凝血酶抑制劑。
有更早的報道關(guān)于以圍繞Arg-Ser斷裂位置的氨基酸序列為基礎(chǔ)的激肽釋放酶抑制劑。
在Biochemistry 1978，174778-4784和Meth.Enzym.1981，80826-842中Kettner和Shaw報道了用作血漿激肽釋放酶抑制劑的精氨酸氯甲基酮類H-DPro-Phe-Arg-CH2Cl和H-DPhe-Phe-Arg-CH2Cl。
同樣，F(xiàn)areed等在Ann.N.Y.Acad.Sci.1981，370765-784中報導了作為血漿激肽釋放酶抑制劑的含H-DPro-Phe-Arg序列酯類和酰胺類。
在下列專利文獻中描述了以在P1-位上的親電性酮類而不是醛類為基礎(chǔ)的絲氨酸蛋白酶抑制劑EP-A2-0,195,212描述了肽基α-酮基酯類和酰胺類，EP-A1-0,362,002描述了氟代烷基酰胺酮類，EP-A2-0,264,244描述了具有不同肽酶抑制性能的α，β，δ-三酮基化合物。
在EP-A2-0,293,881中公開了類似胰蛋白酶的絲氨酸蛋白酶(如凝血酶和激肽釋放酶)的抑制劑，此抑制劑的基礎(chǔ)是精氨酸C-端基硼酸衍生物及其異硫脲類似物。
WO 92/04371描述了激肽原酶抑制劑，例如基于精氨酸衍生物的激肽釋放酶抑制劑。
EP-A1-0,530,167描述了用作凝血酶抑制劑的精氨酸α-烷氧基酮衍生物。
發(fā)明的公開本發(fā)明的一個目的是提供新型有效的類胰蛋白酶絲氨酸蛋白酶抑制劑，特別是對它們的酶類具有競爭性抑制活性，即引起可逆抑制作用的抗凝血和消炎化合物。更準確地說是涉及預防和治療血栓栓塞疾病的抗凝血劑以及治療炎癥的激肽原酶抑制作用，血栓栓塞疾病例如靜脈血栓形成、肺栓塞、動脈血脈形成，特別是心肌梗塞形成和腦血栓形成，如血管成形術(shù)和冠狀動脈分流術(shù)的術(shù)后全身凝固性過高狀態(tài)和局部凝固性過高狀態(tài)以及其他被認為是凝血酶起作用的疾病，如阿爾茨海默癥；所述炎癥例如哮喘、鼻炎、蕁麻癥、腸炎和關(guān)節(jié)炎。本發(fā)明的另一目的是獲得經(jīng)口服也有生物利用性并且對凝血酶的抑制要強于對其他絲氨酸蛋白酶的抑制的選擇性凝血酶抑制劑。本發(fā)明的還一目的是獲得可經(jīng)口、直腸、表面如皮膚或經(jīng)吸入等方式給藥的激肽原酶抑制劑。
化合物根據(jù)本發(fā)明，已發(fā)現(xiàn)包括立體異構(gòu)體在內(nèi)的通式I化合物本身或其生理上可接受的鹽類是絲氨酸蛋白酶，特別是凝血酶和如激肽釋放酶等激肽原酶的有效抑制劑，A1——A2——NH—(CH2)n—B式I
其中A1代表式IIa、IIb、IIc、IId或IIe的結(jié)構(gòu)片段 其中k為整數(shù)0、1、2、3或4；m為整數(shù)1、2、3或4；q為整數(shù)0、1、2或3R1代表H、含1至4個碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2；而R17為甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12為H或含1至4個碳原子的烷基；并且R11為H或含1至6個碳原子的烷基或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上或
R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2；或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各種情況下各自為H、甲基或乙基；R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R21為H或含1至4個碳原子的烷基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶—個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31為H或含1至4個碳原子的烷基，且k為0、1，或R3代表1一萘基或2-萘基，且k為0、1；或
R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它們可能被也可能不被-OR31取代，其中R31的定義與前面相同，并且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表H、含1至4個碳原子的烷基、環(huán)己基或苯基；A2代表式IIIa、IIIb或IIIc的結(jié)構(gòu)片段； 其中p為整數(shù)0、1或2；m為整數(shù)1、2、3或4Y代表亞甲基；或Y代表1，2-亞乙基并且產(chǎn)生的五員環(huán)在4位上可帶也可不帶一或兩個氟原子、一個羥基或一個氧代基，或者可以是也可以不是不飽和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有雜原子官能團；或Y代表1，3-亞丙基，并且產(chǎn)生的六員環(huán)在5位上可帶也可不帶一個氟原子、一個羥基或一個氧代基，在4或5位其中之一上可帶也可不帶二個氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不飽和的，或在4位上可以帶也可以不帶一個含1至4個碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3的定義與前相同；R5代表H或含1至4個碳原子的烷基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p為0、1或2，R51為H或含1至4個碳原子的烷基；或n為整數(shù)0、1、2、3或4；B代表一個如式IVa、IVb、IVc或IVd的結(jié)構(gòu)片段 其中r為整數(shù)0或1；X1代表CH2、NH或不存在；X2代表CH2、NH或C＝NHX3代表NH、C＝NH、N-C(NH)-NH2、CH-C(NH)-NH2、CH-NH-C(NH)-NH2或CH-CH2-C(NH)-NH2；X4代表CH2或NH；優(yōu)選的X1、X2、X3、X4和r組合是X1、X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，而r為0、1或X1、X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，而r為0、1；或X1和X3為NH，X2為C＝NH，X4為CH2，而r為0、1；或X1和X4代表CH2，X2為C＝NH，X3為NH，而r為0、1；或X1為CH2，X2和X4為NH，X3為C＝NH，而r為1；或X1、X2和X4為CH2，X3為CH-NH-C(NH)-NH2，r為0、1；或X1不存在，X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，r為0；或X1不存在，X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為0；特別優(yōu)選的X1、X2、X3、X4和r組合是X1、X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，r為1；X1、X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為0或1；X1不存在，X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為0；X1和X3為NH，X2為C＝NH，X4為CH2，r為1；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2；
R6代表H或含1～4個碳原子的烷基；X6代表CH或N；其中在A2氨基酸上具有S-構(gòu)型的式I化合物是優(yōu)選的化合物，在這些化合物中，還在A1氨基酸上具有R-構(gòu)型的是特別優(yōu)選的化合物。
在本發(fā)明中，如無另外說明，則術(shù)語“含1至4個碳原子的烷基”可以是直鏈或支鏈的。含1至4個碳原子烷基可以是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
本發(fā)明中，如無另外說明，則術(shù)語“含1至6個碳原子的烷基”可以是直鏈或支鏈的。含1至6個碳原子烷基可以是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、叔戊基、新戊基、正己基或異己基。說到不飽和時，其意為一個碳-碳雙鍵。
式IIa、IIb、IIc、IId、IIe、IIIa、IIIb、IIIc中羰基碳原子上的波浪線、式IIIa、IIIb、IIIc中氮原子上的波浪線和式IVa、IVb、IVd中環(huán)系碳原子上的波浪線都用來表示這些片段的鍵合位置。
文中所用略語的含意在說明書的最后列出。
根據(jù)本發(fā)明，已發(fā)現(xiàn)包括在立體異構(gòu)體在內(nèi)的通式Ia的化合物本身或其生理可接受鹽類是凝血酶的有效抑制劑A1—A2—NH—(CH2)n—BIa其中，A1代表式IIa、IIb、IIc或IId的結(jié)構(gòu)片段，優(yōu)選IIa或IIb，
其中k為整數(shù)0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1；q為整數(shù)0、1、2或3，優(yōu)選1；R1代表H、含1至4個碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2而R17為甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12為H或含1至4個碳原子的烷基；并且R11為H或含1至6個碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含有1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2；或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各種情況下各自為H、甲基或乙基
優(yōu)選R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，并且R11為H；R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R21為H或含1至4個碳原子的烷基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶—個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代；或R3代表1一萘基或2-萘基，且k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表含1至4個碳原子的烷基，環(huán)己基或苯基，其中優(yōu)選環(huán)己基或苯基；A2代表式IIIa、IIIb或IIIc，并優(yōu)選IIIa的結(jié)構(gòu)片段；其中p為整數(shù)0、1或2；m1為整數(shù)1、2、3或4，優(yōu)選2、3。
Y代表亞甲基；或Y代表1，2-亞乙基并且產(chǎn)生的五員環(huán)在4位上可帶也可不帶一或兩個氟原子、一個羥基或一個氧代基，或者可以是也可以不是不飽和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有雜原子官能團；或Y代表1，3-亞丙基，并且產(chǎn)生的六員環(huán)在5位上可帶也可不帶一個氟原子、一個羥基或一個氧代基，在4或5位其中之一上可帶也可不帶二個氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不飽和的，或在4位上可以帶也可以不帶一個含1至4個碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-R3代表含1-4個碳原子的烷基，或R3代表Si(Me)3基團；R5代表H或含1至4個碳原子的烷基，其中優(yōu)選H或甲基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p為0、1或2，R51為H或含1至4個碳原子的烷基，優(yōu)選p等于0而R51為H；n為整數(shù)0、1、2、3或4，優(yōu)選1、2、3；B代表式IVa、IVb、IVc或IVd，并優(yōu)選IVa或IVb的結(jié)構(gòu)片段；其中X1、X2、X3、X4、X5和X6的定義與前面相同；r為整數(shù)0或1R6代表H或含1-4個碳原子的烷基，優(yōu)選H；優(yōu)選的X1、X2、X3、X4和r組合是X1、X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，而r為0、1；或X1、X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，而r為0、1；或X1和X3為NH，X2為C＝NH，X4為CH2，而r為0、1；或X1和X4代表CH2，X2為C＝NH，X3為NH，而r為0、1；或X1為CH2，X2和X4為NH，X3為C＝NH，而r為1；或
X1、X2和X4為CH2，X3為CH-NH-C(NH)-NH2，r為0、1；或X1不存在，X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，r為0；或X1不存在，X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為0；特別優(yōu)選的X1、X2、X3、X4和r組合是X1、X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，r為1；X1、X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為0或1；X1不存在，X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH3，r為0；X1和X3為NH，X2為C＝NH，X4為CH2，r為1；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2，優(yōu)選C(NH)-NH2；X6代表CH或N；根據(jù)一個優(yōu)選實施方案，本發(fā)明涉及式Ia的化合物，其中A1代表式IIa的結(jié)構(gòu)片段，其中k為0或1R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，特別是亞甲基或1，2-亞乙基，R11為HR2代表HR3代表環(huán)己基；A2代表式IIIa的結(jié)構(gòu)片段，其中Y代表亞甲基、1，2-亞乙基，或者1，3-亞丙基并且產(chǎn)生的六員環(huán)在4位上可帶也可不帶一個含1至4個碳原子的烷基，優(yōu)選Y代表亞甲基、1，2-亞乙基；R5代表HB代表式IVa的結(jié)構(gòu)片段，其中X1不存在、X2和X4為CH2、X3為N-C(NH)-NH2、r為0，n為1或2X1和X3為NH、X2為C＝NH、X4為CH2、r為1，n為2，或者X1、X2和X4為CH2、X3為CH-C(NH)-NH2、r為1，n為1，或者X1、X2和X4為CH2、X3為N-C(NH)-NH2、r為0或1，n為1或2；或更特別優(yōu)選的化合物為其中B代表式IVb的結(jié)構(gòu)片段，其中X5代表C(NH)-NH2、R6為H，n＝1。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物為HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-PabH-(R)Cgl-Pic-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-PabH-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-PabH-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/bHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-PabEtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabPh(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-PabH-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CO-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab-Me-OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-PabH2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-PabBOC-(R)Cha-Pic-PabAc-(R)Cha-Pic-PabMe-SO2-(R)Cha-Pic-PabH-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Val-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-PabH-(R)HOC-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)HOC-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)HOc-Pro-PabHOOC-CH2-(R)HOc-Pic-Pab(HOOC-CH2)2-(R)HOc-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigH-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PacH-(R)Cha-Pro-PacH-(R)Cgl-Ile-PabH-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-PabMeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabH-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig-HOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)ItpH-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpH-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigH-(R)Cha-Pro-(R，S)HigH-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ItpH-(R)Cha-Pro-(R，S)NigH-(R)Cha-Pro-MigH-(R)Cha-Pro-DigH-(R)Cha-Aze-Dig現(xiàn)在特別優(yōu)選的式Ia化合物有HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pie-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig在上表的化合物中，字母/a和/b表示在注有“Rors”的碳原子處的基本純的立體異構(gòu)體。各化合物的立體異構(gòu)體可參考本文的實驗部分確定。“R、S”表示立體異構(gòu)體的混合物。
根據(jù)本發(fā)明，已發(fā)現(xiàn)包括立體異構(gòu)體在內(nèi)的通式Ib化合物本身或其生理上可接受的鹽類是激肽原酶的有效抑制劑A1—A2—NH—(CH2)n—BIb其中，A1代表式IIa、IIb或IIe，優(yōu)選IIa或IIb的結(jié)構(gòu)片段
其中k為整數(shù)0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1；q為整數(shù)0、1、2或3，優(yōu)選1R1代表H、含1至4個碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2；而R17為甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12為H或含1至4個碳原子的烷基；并且R11為H或含1至6個碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各種情況下各自為H、甲基或乙基；
R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R21為H或含1至4個碳原子的烷基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶—個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31為H或含1至4個碳原子的烷基，且k為0、1；或R3代表1一萘基或1-萘基，且k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它們可能被也可以不被-OR31取代，其中R31的定義與前面相同，并且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或HC(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表H、含1至4個碳原子的烷基、環(huán)己基或苯基；優(yōu)選H；A2代表式IIIb或IIIc的結(jié)構(gòu)片段，其中優(yōu)選式IIIb的結(jié)構(gòu)片段，其中p為整數(shù)0、1或2；m為整數(shù)1、2、3或4，優(yōu)選2、3；R3的定義與前面相同；n為整數(shù)0、1、2、3或4，優(yōu)選1、2、3B代表式IVa、IVb、IVc或IVd的結(jié)構(gòu)片段，其中優(yōu)選式IVa或IVb的結(jié)構(gòu)片段；其中X1、X2、X3和X4的定義與前面相同；
R6代表H或含1～4個碳原子的烷基，優(yōu)選H或甲基；r為整數(shù)0或1；優(yōu)選的X1、X2、X3和X4組合是X1、X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，而r為0、1；或X1、X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，而r為0、1；或X1和X3為NH，X2為C＝NH，X4為CH2，而r為0、1；或X1和X4代表CH2，X2為C＝NH，X3為NH，而r為0、1；或X1為CH2，X2和X4為NH，X3為C＝NH，而r為1；或X1、X2和X4為CH2，X3為CH-NH-C(NH)-NH2，r為0、1；或X1不存在，X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，r為0；或X1不存在，X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為0特別優(yōu)選的X1、X2、X3和X4組合是X1、X2和X4為CH2，X3為CH-C(NH)-NH2，r為1；或X1、X2和X4為CH2，X3為N-C(NH)-NH2，r為1；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2，優(yōu)選C(NH)-NH2；X6代表CH或N。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物有
H-(R)Pro-Phe-PabHOOC-CH2z-(R)Pro-Phe-PabH-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CO-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Phe-Phe-PabH-(R)Cha-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pne-PabH-(R)Phe-Cha-PabHOOC-CH2-(R)Phe-Cha-PabH-(R)Cha-Cha-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Cha-Pab此外，已發(fā)現(xiàn)經(jīng)口服或腸道外用藥后，包括立體異構(gòu)體在內(nèi)的通式V化合物本身或其生理可接受的鹽類是絲氨酸蛋白酶，特別是凝血酶和如激肽釋放酶等激肽原酶的有效抑制劑A1—A2—NH—(CH2)n—B—D式V其中，A1代表式IIa、IIb、IIc、IId或IIe的結(jié)構(gòu)片段 其中k為整數(shù)0、1、2、3或4；m為整數(shù)1、2、3或4；q為整數(shù)0、1、2或3；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2，R17為COOR12、CONHR12，其中R12代表H或含1至4個碳原子的烷基或芐基；并且R11代表H或含1至6個碳原子的烷基或芐基或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含有1至4個碳原子的烷基或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2；或R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R21為H或含1至4個碳原子的烷基或芐基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶—個或多個氟原子或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31為H或含1至4個碳原子的烷基，且k為0、1；或R3代表1一萘基或2-萘基，且k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它們可能被也可以不被-OR31取代，其中R31的定義與前面相同，并且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表H、含1至4個碳原子的烷基、環(huán)己基或苯基；A2、B和n的定義與前面描述式I時的相同；D代表Z或(Z)2，其中Z代表一個芐氧基羰基。
芐氧基羰基(Z或(Z)2)與B中脒基或胍基的氮結(jié)合。
優(yōu)選和特別優(yōu)選的組合與前面式I中的描述相同。
此外，已發(fā)現(xiàn)，經(jīng)口服或腸道外用藥用，包括立體異構(gòu)體在內(nèi)的通式Va化合物本身或其生理可接受的鹽類是凝血酶的有效抑制劑A1—A2—NH—(CH2)n—B—D式Va其中，A1代表IIa、IIb、IIc或IId的結(jié)構(gòu)片段，其中優(yōu)選IIa或IIb的結(jié)構(gòu)片段；其中k為整數(shù)0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1；q為整數(shù)0、1、2或3，優(yōu)選1；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2，R17為COOR12、CONHR12，其中R12代表H或含1至4個碳原子的烷基或芐基；并且R11代表H或含1至6個碳原子的烷基或芐基或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可以被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或
R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2；或優(yōu)選R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R11的定義與前面相同。
R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且R21為H或含1至4個碳原子烷基或芐基；R3代表含1～4個碳原子的烷基，所述烷基可有也可沒有一個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基，環(huán)己基或苯基，它們可被也可不被一個含1～4個碳原子的烷基取代；或R3代表1-萘基或2-萘基，k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表含1至4個碳原子的烷基，環(huán)己基或苯基，其中優(yōu)選環(huán)己基或苯基；A2、B和n的定義與前面式Ia描述的相同；D為Z或(Z)2；Z代表芐氧基羰基。
優(yōu)選的整數(shù)、基團或組合以及特別優(yōu)選的組合與前面式Ia中的描述相同，但是R4代表H、含1～6個碳原子烷基或芐基。
優(yōu)選的式Va化合物為BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/aBnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/bBnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)Ph(4-COOE)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOE-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(z)(BnOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(z)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
特別優(yōu)選的化合物為BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pah(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)此外，已發(fā)現(xiàn)經(jīng)口服或腸道外用藥后，包括立體異構(gòu)體在內(nèi)的通式Vb化合物本身或其生理可接受的鹽類是激肽釋放酶的有效抑制劑A1-A2-NH-(CH2)n-B-D式Vb其中A1代表一個式IIa、IIb或IIe的結(jié)構(gòu)片段，其中優(yōu)選式IIa或IIb的結(jié)構(gòu)片段其中k為整數(shù)0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1；q為整數(shù)0、1、2或3，優(yōu)選1；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2，R17為COOR12或CONHR12，其中R11代表H或含1至4個碳原子的烷基，R11代表H或含1至6個碳原子烷基或芐基R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2或R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且R21為H或含1至4個碳原子烷基或芐基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶一個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31為H或含1至4個碳原子的烷基，且k為0、1；或R3代表1一萘基或1-萘基，且k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它們可能被也可能不被-OR31取代，其中R31的定義與前面相同，并且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表H、含1至4個碳原子烷基、環(huán)己基或苯基，優(yōu)選H；A2、B和n的定義與前面式Ib中的描述相同。
D為Z或(Z)2。
優(yōu)選的整數(shù)、基團或組合以及特別優(yōu)選的組合與前面式Ib中的描述相同，但R11代表H、含1～6個碳原子的烷基或芐基。
優(yōu)選的式Vb化合物為Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式所示化合物在肽類絲氨酸蛋白酶抑制劑的合成，特別在肽類凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑的合成中作為起始物的新用途。它可直接使用，或其脒基在N原子上用例如芐氧基羰基等保護基團單保護或雙保護。脒基衍生物的由脒基化合物保護技術(shù)中已知方法實現(xiàn)。本發(fā)明中這一化合物命名為“1-脒基-4-氨甲基苯”或“H-Pab”。這一化合物特別在Biochem，Pharm.Vol 23，p.2247-2256中已公開。 然而下式所示結(jié)構(gòu)片段作為藥物活性化合物，特別是肽類化合物中的結(jié)構(gòu)單元以前卻沒有公開過。此片段使得絲氨酸蛋白酶抑制劑，尤其是凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑有價值。 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式所示化合物在凝血酶抑制劑合成中作為起始物的新用途。此化合物的脒基在N上可用例如芐氧基羰基等保護基團單保護或雙保護。脒基衍生物的保護由脒基化臺物保護技術(shù)中的已知方法實現(xiàn)。在本發(fā)明中這一化合物命名為“1-脒基-4-氫甲基環(huán)己烷”或“H-Pac”。此化合物在DE 2748295中早已公開。 然而，下式所示結(jié)構(gòu)片段作為凝血酶抑制劑中的有價值的結(jié)構(gòu)單元以前卻沒有公開過。 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式所示的新化合物及其作為起始物在絲氨酸蛋白酶抑制劑的合成，特別是在凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑的合成中的應用。此化合物的脒基可在N上用例如芐氧基羰基等保護基單保護或雙保護。脒基衍生物的保護由脒基化合物保護技術(shù)中的已知方法實現(xiàn)。在本發(fā)明中這一化合物命名為“4-氨乙基-1-脒基哌啶”或“H-Rig”。 下式所示結(jié)構(gòu)片段作為藥物活性化合物，特別是肽類化合物中的結(jié)構(gòu)單元以前卻沒有公開過。此結(jié)構(gòu)片段使得絲氨酸蛋白酶抑制劑，尤其是凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑有價值。 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式所示的新化合物及其作為起始物在絲氨酸蛋白酶抑制劑的合成，特別是在凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑的合成中的應用。此化合物的脒基可在N上用例如芐氧基羰基等保護基單保護或雙保護。脒基衍生物的保護由脒基化合物保護技術(shù)中的已知方法實現(xiàn)。在本發(fā)明這一化合物命名為“1，3-二氮雜-2-亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷”或“H-Itp”。
下式所示結(jié)構(gòu)片段作為藥物活性化合物，特別是肽類化合物中的結(jié)構(gòu)單元以前卻沒有公開過。此結(jié)構(gòu)片段使得絲氨酸蛋白酶抑制劑，尤其是凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑有價值。 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及下式所示的新化合物及其作為起始物在絲氨酸蛋白酶抑制劑的合成，特別是在凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑的合成中的應用。此化合物的脒基可在N上用例如芐氧基羰基等保護基單保護或雙保護。脒基衍生物的保護由脒基化合物保護技術(shù)中的已知方法實現(xiàn)。 其中n為12，s為01。這些化合物的名稱為當n＝1，s＝1時，1-脒基-3-氨甲基吡咯烷或“H-Nig”，當n＝2，s＝1時，1-脒基-3-氨乙基吡咯烷或“H-Hig”，
當n＝1，s＝0時，3-氨甲基-1-脒基氮雜環(huán)丁烷或“H-Mig”，當n＝2，s＝0時，3-氨乙基-1-脒基氮雜環(huán)丁烷或“H-Dig”。
下式所示結(jié)構(gòu)片段作為藥物活性化合物，特別是肽類化合物中的結(jié)構(gòu)單元以前卻沒有公開過。此結(jié)構(gòu)片段使得絲氨酸蛋白酶抑制劑，尤其是凝血酶抑制劑或激肽原酶抑制劑有價值。 本發(fā)明的另一個實施方案是脒基在N上用例如芐氧基羰基等保護基單保護或雙保護的新化合物，這些化合物的實例有4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)苯(H-Pab(Z))，4-氨甲基-1-(N，N′-二(芐氧基羰基)脒基)苯(H-Pab(Z)2)，4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)環(huán)己烷(H-Pac(Z))，4-氨甲基-1-(N，N′-二(芐氧基羰基)脒基)環(huán)己烷(H-Pac(Z)2)，4-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)哌啶(H-Rig(Z))，4-氨乙基-1-N，N′-二(芐氧基羰基)脒基哌啶(H-Rig(Z)2)，(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-Nig(Z))，(3RS)-1-(N，N′-二(芐氧基羰基)脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-Nig(Z)2)，(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-Hig(Z))，(3RS)-1-(N，N′-二(芐氧基羰基)脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-Hig(Z)2)，3-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Mig(Z))，3-氨甲基-1-(N，N′-二(芐氧基羰基)脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Mig(Z)2)，3-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Dig(Z))，3-氨乙基-1-(N，N′-二(芐氧基羰基)脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Dig(Z)2)。
所述化合物用作制備式I、Ia、Ib、V、Va和Vb的要求專利保護的肽衍生物過程的起始物。
醫(yī)用和藥用本發(fā)明還提供治療人和動物的其中需要抑制凝血酶的疾病和特別是炎癥等生理障礙的組合物和方法。
本發(fā)明的凝血酶抑制化合物可望用于包括人在內(nèi)的動物的血液或組織中的血栓形成和凝固性過高的治療或預防。而且還可望用于阿爾茨海默癥和胰腺炎等其中無凝固性過高跡象而凝血酶過多的疾病?？捎米鞅景l(fā)明化合物治療和/或預防的癥狀包括靜脈血栓形成和肺栓塞、動脈血栓形成，例如心肌梗塞形成、不穩(wěn)定心絞痛和基于血栓形成的中風，以及經(jīng)常在動脈纖維性顫動過程中來自心房或在穿壁性心肌梗塞形成后來自左心室的末梢動脈血栓形成和全身性栓塞。此外，這些化合物可望用于預防例如冠狀動脈、大腦動脈和末梢動脈的動脈粥樣硬化疾病。此外，當這些化合物與具有不同作用機理的任何抗血栓形成制劑(如抗血小板制劑乙酰水楊酸)結(jié)合使用時可產(chǎn)生協(xié)同抗血栓作用。此外，這些化合物可望與血栓溶解劑結(jié)合用于血栓形成疾病，尤其是心肌梗塞。此外，這些化合物可望用于預防血栓溶解、經(jīng)皮穿腔血管成形術(shù)(PTCA)和冠狀動脈分流術(shù)之后的血管再次閉塞。此外，這些化合物可望用于防止顯微外科手術(shù)和普通血管外科手術(shù)之后的血栓重新形成。此外，這些化合物可望用于治療和防止由細菌、多重創(chuàng)傷、中毒或其他各種機制引起的播散性血管內(nèi)凝固。此外，當血液與體內(nèi)異質(zhì)表面(例如血管移植物、血管Stemts、血管導管、機械和生物修復裝置或其他各種醫(yī)用裝置)接觸時，這些化合物可望用于抗血凝固治療。此外，當血液與體外醫(yī)療器械(例如心血管外科手術(shù)用物或心肺機)接觸時或在驗血診斷中，這些化合物可望用于抗血凝固治療。
本發(fā)明的抗血凝固化合物還可望用于清洗病人體內(nèi)使用的導管和機械裝置，以及作為體外存放血液、血漿或其他血液制品的抗血凝固劑。
本發(fā)明的消炎抑制化合物可望用于治療或預防包括人在內(nèi)的動物的炎癥，例如哮喘、鼻炎、胰腺炎、蕁麻癥、腸炎和關(guān)節(jié)炎。可以單獨使用加有或不加可藥用載體或稀釋劑的有效劑量激肽原酶抑制化合物，也可與其他治療劑結(jié)合使用。
該化合物抑制激肽釋放酶的活性，這種活性根據(jù)已知方法用生色酶作用物進行評價。本發(fā)明化合物的消炎作用可通過例如在氣道粘膜或內(nèi)臟粘膜中化合物對過敏誘發(fā)滲出性炎癥過程的抑制作用進行研究。
藥物制劑本發(fā)明的化合物一般以藥物制劑形式經(jīng)口、直腸、皮膚、鼻道、氣管、支氣管、非腸道或吸入等給藥，藥物制劑在可藥用劑型中含有游離堿或可藥用無毒有機或無機酸加成鹽形式的活性成分，所述鹽例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、乳酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、三氟乙酸鹽等。根據(jù)所治療的疾病和病人以及給藥途徑的不同，組合物可以不同劑量給藥。
劑型可以是由本身已知的技術(shù)制成的固體、半固體或液體制劑。通常情況下，活性物質(zhì)構(gòu)成制劑重量的0.1％至99％，更具體地說，對于非腸道給藥的制劑為0.1～50％；而對于口服給藥的制劑為0.2～75％。
對人進行治療時，本發(fā)明化合物適宜的口服日劑量為大約0.001-100mg/kg體重，而非腸道給藥日劑量為0.001-50mg/kg體重。
制備本發(fā)明的進一步目的是化合物的制備方式。式I和V的化合物的制備過程包括用標準方法將N-端保護的二肽或氨基酸與下式所示化合物本身，或者其胍基或脒基氮原子用氨基保護基單保護或雙保護的該化合物偶聯(lián)，當所用氨基酸為N-端氨基酸時，隨后加第二種氨基酸H2N——(CH2)n——X
其中，n為整數(shù)0、1、2、3或4；X代表B或B-D，其中B與式I中的定義相同而D與式V中的定義相同，所述胺保護基例如芐氧羰基、叔丁氧羰基或?qū)妆交酋；?；或X代表可轉(zhuǎn)移到B的基團；然后去除保護基團或?qū)-端氮脫保護，之后使N-端氮烷基化；如果需要則再用已知方法脫保護，并且如果需要，形成一種生理可接受鹽類；對于反應生成立體異構(gòu)體混合物的情況，可任選標準色譜或重結(jié)晶技術(shù)將它們分離，如果需要，還可分離出單一立體異構(gòu)體。
更具體地說，式I或V的化臺物可用下列方法之一制備方法Ia用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的二肽與下式化合物偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V的A1和A2并通過標準肽偶聯(lián)方法制得， 偶聯(lián)過程如下所示
其中n與式I中的定義相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和芐氧基羰基等N-端氨基保護基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等胺保護基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基團通過本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法隨后轉(zhuǎn)移至脒基(例如給出Q1＝-C(NH)-NH2)；或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定義同上，其中當Q1為-NH-W2(W2在這種情況下必須與W1正交)時，W2-基脫保護后，氨基通過本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法隨后轉(zhuǎn)移至胍基(給出Q1＝-NH-C(NH)NH2)。
最終化合物可根據(jù)Q1-基團的性質(zhì)由下列途徑之一制得去除保護基(當Q1＝-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2)；或?qū)1-基選擇性脫保護(例如Q1＝-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2(W2在這種情況下必須與W1正交)，然后用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法使N-端氮烷基化，并根據(jù)需要用已知方法脫保護。
方法Ib用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸與下式化合物偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，并通過標準方法制得 偶聯(lián)過程如下 其中n、W1和Q1的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，形成方法Ia所述的保護的肽。最終產(chǎn)物肽的合成按方法Ia繼續(xù)進行。
方法IIa用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護二肽與下式化合物偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V中的A1和A2并通過標準肽偶聯(lián)方法制得
偶聯(lián)過程如下所示 其中n與式I中的定義相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和芐氧基羰基等N-端氨基保護基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等胺保護基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基團通過本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法隨后轉(zhuǎn)移至脒基(例如給出Q1＝-C(NH)-NH2)；或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定義同上，其中當Q1為-NH-W2(W2在這種情況下必須與W1正交)時，W2-基脫保護后，氨基通過本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法隨后轉(zhuǎn)移至胍基(給出Q1＝-NH-C(NH)NH2)。
最終化合物可根據(jù)Q1-基團的性質(zhì)由下列途徑之-制得去除保護基(當Q1＝-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2)；或?qū)1-基選擇性脫保護(例如Q1＝-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2(W2在這種情況下必須與W1正交))，然后用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法使N-端氮烷基化，并根據(jù)需要用已知方法脫保護。
方法IIb用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸與下式化合物偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，并通過標準方法制得； 偶聯(lián)過程如下 其中n、W1和Q1的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，形成方法IIa所述的保護的肽。最終產(chǎn)物肽的合成按方法IIa繼續(xù)進行。
方法IIIa用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的二肽與下式化合物偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V中的A1和A2并用標準肽偶聯(lián)方法制得， 偶聯(lián)反應如下所示 其中n與式I中的定義相同；當X1、X2和X4代表CH2時，r為0、1，而當X2和X4代表CH2，X1不存在時，r為0W1代表如同叔丁氧基羰基和芐氧基羰基等N-端氨基保護基；Q2代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2，其中W2代表如同叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等胺保護基；或者Q2與W2相同，其中在W2基團脫保護后(W2在這種情況下必須與W1正交)，氨基用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法用未保護、N-保護或N，N′-雙保護的胍化試劑轉(zhuǎn)移至胍基(給出Q2＝-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2)。
最終化合物可根據(jù)所用Q2-基的性質(zhì)由下列途徑之一制得去除保護基(當Q2＝-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2)，或?qū)1-基團選擇性脫保護(例如當Q2＝-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2，W2在這種情況下必須與W1正交)，然后用本技術(shù)領(lǐng)域已知方法使N-端氮烷基化并根據(jù)需要用已知方法脫保護。
方法IIIb用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸與下式化合物偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2并通過標準方法制得； 偶聯(lián)反應如下所示 其中n、r、X1、X2和X4，W1和Q2的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，形成方法IIIa所述的保護的肽。最終產(chǎn)物肽的合成按方法IIIa繼續(xù)進行。
方法IVa用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的二肽與下式化合物偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V的A1和A2并通過標準肽偶聯(lián)方法制得， 偶聯(lián)過程如下所示 其中n值與式I中的定義相同；W1代表如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等N-端氨基保護基；W3代表H或如同芳基磺?；⑵S氧基羰基或叔丁氧基羰基等氨基保護基。
最終化合物可由下列途徑之一制得脫除保護基或?qū)1-基選擇性脫保護(W1必須與W2正交)，然后使N-端氮烷基化并根據(jù)需要脫保護。
方法IVb用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸與下式化合物偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，并通過標準方法制得； 偶聯(lián)過程如下 其中n、W1和W3的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護(W1必須與W3正交)，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，生成如方法IVa中所述的被保護肽。根據(jù)方法IVa繼續(xù)合成目標肽。
發(fā)明的詳細說明如下描述說明本發(fā)明各方面。
實驗部分一般實驗方法質(zhì)譜記錄在裝有電子流接口(electrospray interface)的Finnigan Mat TSQ 700三級四極質(zhì)譜儀上完成。
1H NMR和13C NMR的測定由BRUKER AC-P 300和BRUKERAM500光譜儀完成，前者在1H頻率為500.14MHz、13C頻率為125.76MHz下操作，后者在1H和13C頻率分別為300.13MHz和75.46MHz下操作。
取大約10～50mg的試樣溶于0.6ml溶劑中，溶劑選自CDCl3(同位素純度＞99.8％)、CD3OD(同位素純度＞99.95％)、D2O(同位素純度＞99.98％)或DMSO-d6(同位素純度＞99.8％)中的一種。所有溶劑購自Dr.Glaser AG，Basel。
在CDCl3和CDOD中1H和13C化學位移值為相對于四甲基硅烷外標的值。在D2O中，1H化學位移以3-(三甲基甲硅烷基)-d4-丙酸鈉鹽為基準，而13C化學位移以1，4-二噁烷(67.3ppm)為基準，二者都為外標物。用外標物校正在某些情況下與內(nèi)標物校正相比可能存在小的位移差別，不過這種差別在1H化學位移中小于0.02ppm而在13C中則小于0.1ppm。
含一個脯氨酸或一個“脯氨酸類”殘基的肽系列其1H NMR譜經(jīng)常表現(xiàn)為二組共振，這對應于對圍繞脯氨酸為N-部分的酰氨鍵旋轉(zhuǎn)而言存在著二種有貢獻的異構(gòu)體。這二種異構(gòu)體稱為順式和反應。本發(fā)明化合物中序列(R)Cha-Aze、(R)Cha-Pro-和(R)Cha-Pic經(jīng)常會出現(xiàn)其中一種異構(gòu)體作為主要異構(gòu)體(＞90％)的順一反平衡。在這種情況下本發(fā)明只給出主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的1H化學位移數(shù)據(jù)，只有在次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的信號可被清楚地分辨的情況下，NMR-數(shù)據(jù)表才記錄這些信號。對于CDCl3中NH-言號的判別也采用這種方式，只有在信號可被清楚分辨情況下，NMR-數(shù)據(jù)中才記錄旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的二組化學位移值。這意味著對有些中間體來說，NMR-數(shù)據(jù)表所給出的質(zhì)子數(shù)目將少于由化學式算得的質(zhì)子數(shù)目。
薄層色譜在商用Merck Silicagel 60F254涂層玻璃或鋁板上完成，目測方法采用UV-光照射、隨后用混合溶液(由372ml EtOH(95％)、13.8ml濃硫酸、4.2ml濃醋酸和10.2ml對-甲氧基苯甲醛或磷鉬酸試劑(5-10重量％的乙醇(95％)溶液)配制而成)噴顯，再加熱三者的結(jié)合。
閃色譜在大氣壓力下用Merek Silica gel 60(40～63mm，234～400目)上進行。
反相高效液相色譜(實施例中稱作RPLC)在Waters M-590液相色譜儀上進行，儀器裝有三根不同直徑的反相Kromasil 100，C8柱(EKa-Nobel)分別用于分析(4.6mm×250mm)、半制備(1″×250mm)和制備(2″×500mm)，檢測波長為226nm。
冷凍干燥在一個Lyovac GT 2型Leybold-Heraeus裝置上完成。
起始物的制備Boc-(R)-Pgl-OH與由H-(R)Pgl-OH制備Boc-(R)Cha-OH中所述方法相同(參看下文)。
Boc-(R)Cha-OH在21.55g(125.8mmol)H-(R)Cha-OH的130ml lM NaOH和65ml THF溶液中加入30g(137.5mmol)(Boc)2O，在室溫下將混合物攪拌4.5hr(小時)。蒸去THF并補充加入150ml水。所得堿性水溶液相用EtOAc洗滌二次，然后用2M KHSO4酸化并用3×150mlEtOAc萃取。所得混合有機相用水、鹽水洗滌后干燥(Na2SO4)。蒸發(fā)溶劑后得到30.9g(90.5％)標題化合物白色固體。
Boc-(R)Hop-OHH-(R)Hop-OH為起始物，制備過程與所述Boc-(R)Cha-OH的制備過程相同。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.00(m，1H)，2.22(m，1H)，2.75(bt，2H)，4.36(bs，1H)，5.05(bs，1H)，7.15-7.33(m，5H).
4-(叔丁氧基羰基氨甲基)吡啶在10.81g(100mmol)4-氨甲基吡啶的100ml THF溶液中加入溶于70ml THF的24g(110mmol)Boc2O，加入溫度10℃、時間20分鐘。使所得溶液達到室溫并攪拌4小時(反應過程中有沉淀生成，漿液變成紅色)。除去溶劑并將殘余物溶于EtOAc后用硅膠過濾。蒸去溶劑后得到紅色油狀標題化合物，靜置結(jié)晶。粗產(chǎn)物無須進一步純化即直接使用。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，4.32(d，2H)，5.05(bs，1H(NH))，7.2(d，2H)，8.55(d，2H).
4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)-苯(H-Pab(Z))(i)4-氰基芐基疊氮化物在室溫下將20.23g(0.31mol)疊氮化鈉的50ml水溶液加入溶于200ml DMF的49.15g(251mmol)4-氰基芐基溴中，發(fā)生放熱反應，反應1.5hr后反應混合物用200ml甲苯和500ml水稀釋(注意為避免分離有可能爆炸的疊氮化物，建議向混合物中加入水之前先加入甲苯)。所得水相再用2×50ml甲苯萃取，合并的有機萃取物用2×50ml水和鹽水洗滌后干燥(MgSO4)并過濾。在下步反應中直接使用此溶液。1H-NMR(300MHz，CDCl3)；δ4.4(s，2H)，7.4(d，2H)，7.7(d，2H).
(ii)4-脒基芐基疊氮化物250ml無水乙醇和上述(i)步所得溶液(約200ml)的混合物在-5℃下通入HCl氣體直至飽和，將溫度升至8℃存放24hr后蒸去大部分溶劑，然后加入無水乙醚沉淀，過濾分離后得到白色晶體并將其溶于1.8升酒精氨中。48hr后大部分溶劑被除去，此時加入200ml 3.75M NaOH溶液使4-脒基芐基疊氮化物沉淀為無色晶體，用過濾方法將此結(jié)晶分離出來，以此計算的4-脒基芐基疊氮化物的產(chǎn)率為22.5g(總計51％)。乙基咪唑并苯甲基疊氮化物鹽酸鹽1H-NMR(500MHz，CD3OD)；δ1.6(t，3H)，4.5(s，2H)，4.65(q，2H)，4.8(brs，2H)，7.6(d，2H)，8.1(d，2H)4-脒基芐基疊氮化物1H-NMR(500MHz，CDCl3)；δ4.3(s，2H)，5.7(brs，3H)，7.3(d，2H)，7.6(d，2H).13C-NNR(125MHz，CDCl3)脒碳δ165.5。
(iii)4-(芐氧基羰基脒基)芐基疊氮化物上步(ii)所得結(jié)晶溶于500ml二氯甲烷并將所成溶液干燥(K2CO3)，過濾后加入27ml(194mmol)三乙胺。在反應混合物用冰浴冷卻、攪拌條件下將25ml氯甲酸芐酯慢慢加到上述溶液中，反應30min(分鐘)后補加入2ml氯甲酸芐酯并繼續(xù)攪拌30min。然后加入水并用2M HCl將水溶液pH值調(diào)至7。干燥(MgSO4)有機相并在真空下除去溶劑，最后用乙醚/二氯甲烷/己烷分離出4-(芐氧基羰基脒基)芐基疊氮化物無色結(jié)晶。1H-NMR(500MHz，CDCl3)；δ4.4(s，2H)，5.3(s，2H)，6.3-7.0(brs，1H)，7.3-7.4(m，5H)，7.5(d，2H)，7.9(d，2H)，9.3-9.6(brs，1H).13C-NMR(125MHz，CDCl3)脒碳δ167.5。
(iv)4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)-苯(H-Pab(Z))將上步(iii)所得4-(芐氧基羰基脒基)芐基疊氮化物溶于160ml THF中，在室溫下加入26.3g(100mmol)三苯基膦。16hr后補加6.6g(25mmol)三苯基膦，溶液靜置4h后真空下除去溶劑。殘余物溶于二氯甲烷并用2M HCl萃取。所得水溶液相用二氯甲烷和乙醚洗滌后用3.75M NaOH溶液堿化。用二氯甲烷萃取、干燥(K2CO3)并在真空下除去溶劑制得20g黃色油狀物(以氰基芐基溴計算的總收率為28％)，靜置固化。1H-NMR(500MHz，CDCl3)；δ1.2-2.2(brs，2H)，3.8(s，2H)，5.2(s，2H)，7.2-7.35(m，5H)，7.4(d，2H)，7.8(d，2H)，9.1-9.6(brs，1H).13C-NMR(125MHz，CDCl3)脒和羰基碳δ164.6和168.17。
H-Pig(Z)2(i)4-(叔丁氧基羰基-氨甲基)哌啶向17.7g 4-叔丁氧基羰基氨甲基哌啶的125ml MeOH溶液中加入2g 5％Rh/Al2O3，在0.34MPa壓力下氫化過夜。1H-NMR數(shù)據(jù)表明加氫化并未完全，因此將混合物中的催化劑濾去并在真空下除去溶劑，然后將殘余物溶于100ml乙酸，加入2g 5％Ph/Al2O3，在0.34MPa壓力下繼續(xù)氫化混合物4天。濾去催化劑并在真空下除去大部分乙酸。向殘余物補加50ml水，用5M NaOH堿化，水相用1×200＋1×100ml CH2Cl2萃取，合并有機相，用25ml水洗滌并干燥(MgSO4)。除去溶劑，得到17.2g棕色油狀物，將它溶于50ml二乙醚，加入200ml戊烷形成沉淀，過濾后得到7.7g棕色粉末，母液經(jīng)蒸發(fā)后得到7g白色油狀物。棕色粉末溶于100ml EtOAc，有機相用1×50ml＋1×25ml 1M KHSO4洗滌。合并酸性相，用2M NaOH堿化，并用1×200＋1×75ml EtOAc萃取。合并有機相，干燥、蒸發(fā)，提到5.2g標題化合物，為白色粉末。
用同樣方法處理由母液所得的白色油狀物得到另外3.4g產(chǎn)物?？偸章?0％。1H-NMR(500MHz，CDCl3，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，3∶1)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ1.11(dq，2H)，1.44(s，9H)，1.49-1.60(m，1H)，1.63-1.70(m，2H)，2.58(dt，2H)，2.93-3.03(m，2H)，3.07(m，2H)，4.75(bs，1H(NH)).由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號出現(xiàn)在δ1.21(dq)和1.91(dt)。
(ii)Boc-Pig(Z)2向2g(9.33mmol)4-(叔丁氧基羰基氨甲基)哌啶的60mlCH3CN溶液中加入3.34g(9.33mmol)N，N′-(二芐氧基羰基)甲基異硫脲，混合物在60℃攪拌22小時。蒸去溶劑并將殘余物溶于EtOAc中，有機相用2×20ml 1M KHSO4、1×20ml水、1×20ml鹽水洗滌并干燥(MgSO4)，蒸去溶劑后用石油醚/EtOAc(1/1)作為洗脫劑進行閃色譜處理得到2.438(50％)所需產(chǎn)物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)由于分子內(nèi)的交換過程使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。特別是哌啶環(huán)中的2-和6-CH2基更為明顯，它們表現(xiàn)為3.7-4.5ppm范圍的寬峰。δ1.19-1.31(m，2H)，1.43(s，9H)，1.63-1.80(m，3H)，2.66-3.05(m，4H)，3.7-4.5(bs，2H)，4.65(bt，1H(NH))5.13(s，4H)，7.2-7.4(m，10H)，10.5(bs，1H(NH)).
(iii)H-Pig(Z)2163mg(0.31mmol)Boc-Pig(Z)2的5ml EtOAc溶液用HCl(氣)飽和后在環(huán)境溫度下攪拌3小時20分鐘。蒸去溶劑并將殘余物溶于30ml CH2Cl2中。有機相用5ml 2M NaOH、1×50ml水、1×5ml鹽水洗滌后干燥(MgSO4)，蒸去溶劑得到100mg(76％)標題化合物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)由于分子內(nèi)的交換過程使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。特別是哌啶環(huán)中的2-和6-CH2基更為明顯，它們表現(xiàn)為3.7-4.5ppm范圍的寬峰。δ1.18-1.37(m，2H)，1.46-1.63(m，1H)，1.68-1.83(m，2H)，2.57(d，2H)，2.86-3.03(m，2H)，3.7-4.5(bs，2H)，5.13(s，4H)，7.2-7.4(m，10H).
4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)-環(huán)己烷(H-Pac(Z)×2HCl)。
(i)N-[N-4-(芐氧基羰基)脒基芐基]叔丁基氨基甲酸酯向1.81g(6.4mmol)4-(芐氧基羰基)脒基芐基胺和1ml(7.1mmol)三乙胺于25ml二氯甲烷的溶液中在冰冷攪拌下加入1.466g(6.7mmol)(Boc)2O。20min后加入更多的二氯甲烷并用5％乙酸和10％Na2CO3溶液洗滌混合物。干燥(硫酸鎂)并在真空下除去溶劑，殘余物用CH2Cl2/己烷結(jié)晶得到產(chǎn)物1.66g(68％)。
(ii)N-[N-4-脒基芐基]叔丁基氨基甲酸酯1.60g(4.2mmol)N-[4-(芐氧基羰基)脒基芐基]叔丁基氨基甲酸酯、5ml乙酸和160mg 10％炭載鈀于50ml乙醇的混合物在氫氣氛下攪拌2hr。用硅藻土濾去催化劑后真空除去溶劑，制得定量收率的標題化合物。
(iii)N-[4-脒基環(huán)己基甲基]叔丁基氨基甲酸酯17mmol N-[4-脒基芐基]叔丁基氨基甲酸酯的乙酸化物在100ml甲醇中在863mg 5％Rh/Al2O3催化劑存在下在3.4MPa壓力下加氫20hr。濾去催化劑并真空除去溶劑。殘余物溶于水后用氫氧化鈉堿化。隨后經(jīng)過二氯甲烷萃取，合并有機相，干燥(碳酸鉀)、真空除去溶劑，制得3.8g(87％)標題化合物。
(iv)N-[N-4-(芐氧基羰基)脒基環(huán)己基甲基]叔丁基氨基甲酸酯攪拌2.04g(8mmol)N-[4-脒基環(huán)己基]叔丁基氨基甲酸酯、1.23ml(8.8mmol)三乙胺和197mg DMAP于40ml二氯甲烷的溶液，在0C下加入1.25ml(8.8mmopl)芐基氯甲酸酯，10min后反應混合物用二氯甲烷稀釋并用水、稀乙酸和碳酸氫鈉溶液萃取。有機相加到硅膠柱上，隨后用乙酸乙酯含量不斷增加的二氯甲烷淋洗得到2.49g(80％)標題化合物。
(v)4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)-環(huán)己烷(H-Pac(Z)×2HCl)2g(5.1mmol)N-[4-芐氧基羰基)脒基環(huán)己基甲基]叔丁基氨基甲酸酯的40ml乙酸乙酯溶液中通入氯化氫，10min后加入甲醇并在真空下除去部分溶劑使目標化合物的二鹽酸鹽結(jié)晶出來。
4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)哌啶(H-Pig(Z)×HCl)(i)4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-芐氧基羰基脒基)哌啶(Boc-pig(Z))在25ml乙醇中混合7.8g(36.4mmol)4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)哌啶和8.98g(40mmol)N-芐氧基羰基-S-甲基異硫脲?；旌衔镌?0～70℃加熱6小時并在室溫下放置二天。蒸去溶劑并將殘余物溶于CH2Cl2。有機層用0.3M KHSO4洗滌二次，用鹽水洗滌一次。合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到的粗產(chǎn)物閃色譜上用CH2Cl2/MeOH的梯度洗脫液(100/0、97/3、95/5、90/10)沖洗提純得到5.22g(37％)標題化合物。
(ii)H-Pig(Z)×HCl(4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)哌啶5.22g(13.5mmol)Boc-Pig(Z)溶于100ml用HCl(氣)飽和的乙酸乙酯。使混合物靜置1小時后蒸發(fā)。殘余物溶于水并用二乙醚和乙酸乙酯的混合物洗滌。水層經(jīng)冷凍干燥得到4.0g(91％)標題化合物。1H-NMR(D2O，300MHz)δ1.40-1.60(m，2H)，2.05(bd，2H)，2.19(m，1H)，3.07(d，2H)，3.34(bt，2H)，4.08(bd，2H)，5.40(s，2H)，7.5-7.63(m，5H)MSm/z 291(M+＋1)4-氨乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z))(i)1-芐氧基羰基脒基-4-羥乙基哌啶溶于50ml乙腈的6.2g(0.028mol)4-羥乙基哌啶和3.6g(0.028mol)N-芐氧基羰基-S-甲基異硫脲的混合物回流過夜。經(jīng)蒸發(fā)和用乙酸乙酯進行硅膠閃色譜處理制得3.5g(41％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.1-1.85(m，7H)，2.83(bt，2H)，4.70(bt，2H)，4.18(bd，2H)，5.12(s，2H)，6.9-7.2(m，2H)，7.2-7.5(m，5H).
(ii)1-芐氧基羰基脒基-4-甲磺酰氧基乙基哌啶溶于40ml二氯甲烷和10ml四氫呋喃的3.50g(0.0115mol)1-芐氧基羰基脒基-4-羥乙基哌啶和1.15g(0.0115mol)三乙胺的冰冷溶液中滴加入1.30g(0.115mol)甲磺酰氯。使反應混合物攪拌1hr。混合物倒入水中并保留有機層，水層用二氯甲烷萃取。合并有機層，經(jīng)水洗、干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)產(chǎn)物無須進一步精制即可用于下一步。收率4.4g(100％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)d 1.15-1.3(m，2H)，1.65-1.8(m，5H)，2.84(bt，2H)，3.01(s，3H)，4.20(bd，2H)，4.27(t，2H)，5.12(s，2H)，7.1-7.5(m，7H).
(iii)4-疊氮基乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶4.4g(0.0115mol)粗品1-芐氧基羰基脒基-4-甲磺酰氧基乙基哌啶溶于100ml二甲基甲酰胺中并加入4.5g(0.069mol)疊氮化鈉?；旌衔镌?00℃加熱2.5hr，然后將其倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，水洗、干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)。殘余物用以乙酸乙酯/庚烷(1/1)為沖洗劑進行硅膠閃色譜處理。得率3.0g(79％)。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.20(dq，2H)，1.5-1.8(m，5H)，2.85(dt，2H)，3.35(t，2H)，4.22(ba，2H)，5.13(s，2H)，6.9-7.2(b，2H)，7.2-7.45(m，5H).
(iv)4-氨乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z))向30ml水中加入0.40g 10％Pd/C。1.0g(0.031mol)硼氫化鈉溶于30ml水后將其小心加到攪拌且冰冷卻的Pd/C和水的漿液中。2.9g(8.8mmol)4-疊氮基乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶溶于80ml四氫呋喃的溶液滴加到前述的冰冷水性漿液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?hr后再次用冰冷卻并加入30ml 2M HCl。用硅藻土過濾混合物后再用另外的水沖洗硅藻土。蒸去四氫呋喃后，水相用乙酸乙酯洗滌。水相用2M NaOH堿化，再用二氯甲烷萃取三次。合并有機相經(jīng)水洗、干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)，產(chǎn)物無須進一步精制即可用于下步反應。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.1-1.5(m，6H)，1.55-1.65(m，1H)，1.73(bd，2H)，2.72(b，2H)，2.81(dt，2H)，4.20(bd，2H)，5.12(s，2H)，6.9-7.2(b，2H)，7.2-7.5(m，5H).
(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-(R，S)Nig(Z))(i)(3RS)-3-羥甲基吡咯烷16.4g(0.0857mmol)(3 RS)-1-芐基-3-羥甲基吡咯烷(參看H-(R，S)Hig(Z)(i)，見后)與1.6g Pd/C(10％)、5ml水和150ml乙醇的混合物在0.26MPa壓力下氫化過夜。hyflo過濾并蒸去溶劑后，1H-NMR數(shù)據(jù)表明反應并未完全。在0.26MPa壓力下在1.6gPd/C(10％)存在下于5ml水/150ml乙醇中繼續(xù)氫化3天，使還原反應進行完全。經(jīng)Hyflo過濾并蒸去溶劑得到定量收率的產(chǎn)物。
(ii)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-羥甲基吡咯烷將1.01g(0.01mol)(3RS)-3-羥甲基吡咯烷和2.29g(0.011mol)N-芐氧基羰基-O-甲基異脲溶于(胺不是很好溶)甲苯，加熱至60℃保持3小時，隨后在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，1H-NMR數(shù)據(jù)表明反應并未完全，于是將混合物溶于15ml乙腈并加熱至60℃保持3小時，隨后在室溫下攪拌過夜。蒸去溶劑后的混合物溶于CH2Cl2，用水洗滌一次后干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)物在閃色譜上用CH2Cl2/MeOH(95/5)淋洗提純得到0.70g(25％)產(chǎn)物。
MSm/z 278(M+＋1)(iii)(3RS)-1-N-芐氧基羰基脒基)-3-甲磺酰氧基甲基吡咯烷將0.7g(2.53mmol)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-羥甲基吡咯烷和0.70ml(5.05mmol)三乙胺溶于15ml二乙醚/CH2Cl2(1/1)，混合物冷至0℃。將0.25ml(3.29mmol)甲磺酰氯溶于3ml二乙醚后緩慢加到上述混合物中并在0℃下攪拌3小時。蒸去溶劑并將殘余物溶于乙酸乙酯，用0.3M KHSO4溶液萃取。水層用CH2Cl2洗滌一次后用10M NaOH溶液將其調(diào)至中性，然后再用CH2Cl2萃取二次。合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)制得0.450g(50％)標題化合物。
(iv)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-疊氮基甲基吡咯烷將0.450g(1.27mmol)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-甲磺酰氧基甲基吡咯烷和0.124g(1.9mmopl)疊氮化鈉溶于10ml二甲基甲酰胺，加熱至60℃保持4小時，然后在室溫下攪拌過夜。加水并用甲苯/乙酸乙酯(2/1)萃取所得混合物二次，合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，所得粗產(chǎn)物用洗脫劑CH2Cl2/MeOH(95/5)進行閃色譜純化得到0.262g(68％)產(chǎn)物。
MSm/z 303(M+＋1)(v)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-(R，S)Nig(Z))
將32mgPd/C(10％)和2.6ml水混合并通入平緩的氮氣氣流，加入溶于2.6ml水的98mg NaBH4，然后再緩慢加入溶于7ml MeOH的262mg(0.87mmol)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-甲磺酰氧基吡咯烷。使混合物靜置1小時。加入5ml 1M HCl并用hyflo過濾。在減壓下蒸去有機溶劑，所剩水層用乙酸乙酯洗滌一次，用NaOH溶液堿化，再用CH2Cl2萃取若干次。合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，制得130mg(54％)產(chǎn)物。
MSm/z 277(M+＋1)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-(R，S)Hig(Z))(i)(3RS)-1-芐基-3-羥甲基吡咯烷在氬氣氛下將25.2g(0.1063mol)(3RS)-芐基-2-氧代-4-甲氧基羰基吡咯烷緩慢加到6.22g氫化鋁鋰的160ml乙醚漿液中。混合物攪拌過夜然后加熱回流1小時。將反應混合物冷至室溫并加入0.2g Na2SO4×10H2O，然后依次緩慢加入6ml水、18ml 3.75MNaOH溶液和6ml水。漿液用Na2SO4/硅藻土干燥除去過量的水，過濾和蒸發(fā)后得到產(chǎn)物(20.3g)。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ1.64-1.77(m，1H)，1.93-2.07(m，1H)，2.27-2.40(m，2H)，2.51(dd，1H)，2.62(dd，1H)，2.82(m，1H)，3.52(dd，1H)，3.59(s，2H)，3.67(dd，1H)，7.15-7.40(m，5H)(ii)(3RS)-1-芐基-3-氯甲基吡咯烷在15.3g(0.08mol)(3RS)-1-芐基-3-羥甲基吡咯烷的220ml CHCl3回流溶液中緩慢加入330ml亞硫酰氯的60ml CHCl3溶液，繼續(xù)回流1小時。蒸發(fā)混合物并將殘余物溶于水。水層用乙酸乙酯洗滌，再用0.2M NaOH溶液堿化。水層用乙酸乙酯萃取三次，合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到定量收率(16.8g)的產(chǎn)物。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ1.55(m，1H)，2.05(m，1H)，2.38(dd，1H)，2.48-2.64(m，3H；其中2.58(t，2H)))，2.73(dd，1H)，3.51(d，2H)，3.60(s，2H)，7.2-7.4(m，5H)(iii)(3RS)-1-芐基-3-氰甲基吡咯烷將16.8g(0.08mol)(3RS)-1-芐基-3-氯甲基吡咯烷和5.88g(0.12mol)氰化鈉溶于250ml二甲基亞砜?；旌衔镌?0℃下攪拌二天并在室溫下攪拌一星期。加入水并將混合物用乙酸乙酯萃取三次。合并有機層，用鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到14.7g(92％)產(chǎn)物。1H-NMR(CDCl3，500MHz)1.55(m，1H)，2.13(m，1H)，2.35(dd，1H)，2.42(t，2H)，2.44-2.59(m，2H)，2.65(m，1H)，2.73(dd，1H)，3.61(s，2H)，7.2-7.4(m，5H)(iv)(3RS)-1-芐基-3-氨乙基吡咯烷14.7g(0.0734mol)(3RS)-1-芐基-3-氰甲基吡咯烷溶于220ml乙醚，在氬氣氛下緩慢加入到2.94g氫化鋁鋰的74ml乙醚漿液中?；旌衔飻嚢柽^夜，加入6ml水，18ml 3.75M NaOH溶液和6ml水。漿液用Na2SO4/硅藻土干燥除去過量的水、抽濾和蒸發(fā)，得到14.84g(99％)產(chǎn)物。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ1.41(m，1H)，1.51(q，2H)，1.90-2.10(m，2H；其中2.05(dd，1H)))，2.18(m，1H)，2.43(m，1H)，2.55-2.73(m，3H)，2.80(明顯t，1H)，3.58(明顯d，2H)，7.15-7.4(m，5H)(v)(3RS)-1-芐基-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷向14.84g(0.0726mol)(3RS)-1-芐基-3-氨乙基吡咯烷、72.6ml 1M NaOH溶液，76ml水和145ml THF的混合物中加入17.44g(0.08mol)二叔丁基二碳酸酯，混合物攪拌過夜。濃縮溶液并用乙酸乙酯萃取三次，合并有機層，用鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)物用閃色譜以CH2Cl2/MeOH梯度沖洗(95/5，90/10)分離純化得到14.69g(80％)產(chǎn)物。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ1.25-1.65(m，12H；其中1.40(s，9H))，1.90-2.25(m，3H)，2.46(m，1H)，2.67(m，1H)，2.80(明顯t，1H)，3.09(m，2H)，3.59(s，2H)，4.60(bs，NH)，7.15-7.35(m.5H)(vi)(3RS)-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷于40ml乙醇(95％)中的0.6g Pearlman催化劑(Pd(OH)2)存在下，在0.28MPa壓力下使3.1g(0.01mol)(3RS)-1-芐基-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷氫化過夜。用硅藻土濾去催化劑，蒸去溶劑，1H-NMR數(shù)據(jù)表明反應沒有完全。因此再加入于40ml乙醇(95％)中的0.6g Pearlman催化劑，在0.28MPa氫氣氛下對混合物繼續(xù)處理過夜。用硅藻土過濾，蒸去溶劑得到定量收率(2.18g)的產(chǎn)物。
MSm/z 214(M+)(vii)(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-(R，S)Hig(Z))將2.18g(0.0102mmol)(3RS)-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷和2.81g(0.0125mol)N-芐氧基羰基-S-甲基異硫脲溶于30ml甲苯，加熱至60～70℃保持8小時，然后在室溫下攪拌-天。加入0.3M KHSO4溶液，水層用甲苯和乙酸乙酯混合物洗滌并靜置2天，其間除去Boc基團。堿化后的酸性水相用CH2Cl2萃取四次，合并有機層，干燥(Na2SO4)，過濾和蒸發(fā)，制得2.0g(51％)標題化合物。1H-NMR(CDCl3，330K，300MHz)δ1.45-1.7(m，3H)，2.07(m，1H)，2.26(m，1H)，2.74(t，2H)，3.00(明顯t，1H)，3.23(明顯q，1H)，3.45-3.80(m，2H)，5.12(s，2H)，6.72(bs，2NH)，7.15-7.45(m，5H)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷(H-(R，S)Itp(Ts))(i)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-羧基環(huán)己烷用Journal of Org.Chem.，P.46，1917所述方法制備。
(ii)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氮基-4-羥甲基環(huán)己烷向9.9g(33mmol)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-羧基環(huán)己烷于330ml無水THF的冷卻漿液中(冰浴溫度)中小心加入12.9g(345mmol)LiAlH4，在室溫下攪拌反應過夜。根據(jù)Fieser & Fieser方法，例如以向混合物中依次加入12.9g水、38.7g3.75M NaOH、12.9g水、Na2SO4、CH2Cl2和硅藻土，然后進行過濾的方法對反應混合物進行后處理，蒸發(fā)溶劑后得到7.0g(75％)所需產(chǎn)物。
MSm/z 284(M+＋1)
(iii)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-甲磺酰氧基甲基環(huán)己烷7.0g(24.7mmol)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-羥甲基環(huán)己烷于6.9ml(49.4mmol)三乙胺和125ml CH2Cl2的冷(冰浴溫度)漿液中小心加入2.9ml MSCl(37.1mmol)。1小時15分鐘后加入水，并將有機相分離出來，經(jīng)干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)得到定量收率的標題化合物。
MSm/z 362(M+＋1)(iv)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氰甲基環(huán)己烷將8.9g(24.7mmol)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-甲磺酰氧基甲基環(huán)己烷和1.3g(27.2mmol)NaCN溶于75mlDMSO。在40℃攪拌60hr后再加入0.31g(6mmol)NaCN，再在65℃攪拌反應3小時。加入150ml水使結(jié)晶從溶液中沉淀出來，過濾分出結(jié)晶并干燥制得5.4g(75％)所需產(chǎn)物。
MSm/z 293(M+＋1)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷(H-(R，S)Itp(Ts))2.4g(8.2mmol)(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氰甲基環(huán)己烷于90ml THF的冷卻(冰浴溫度)漿液中小心加入935mg LiAlH4。攪拌2小時后依次加入1g水、3g 3.75MNaOH、1g水、Na2SO4、硅藻土和CH2Cl2。混合物經(jīng)過濾和真空除去溶劑，得到2.2g(90％)所需化合物。1H NMR(500MHz，MeOD)；δ1.52-1.71(m，3H)，1.88-1.96(m，1H)，2.37(s，3H)，2.64-2.73(m，2H)，3.2-3.4(m，2H，與溶劑信號部分重疊)，3.44-3.53(m，1H)，7.28(d，2H)，7.71(d，2H)。
(4S)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷(H-(S)Itp(Ts))由旋光純2，4-二氨基丁酸出發(fā)，用與H-(R，S)Itp(Ts)所用相同的方式制備。1H NMR(300.13MHz，CDCl3)；δ0.97-1.15(s寬，1H)，1.48-1.69(m，3H)，1.84-1.95(m，1H)，2.37(s，3H)，2.68-2.82(m，1H)，2.86-2.98(m，1H)，3.22-3.44(m，2H)，3.45-3.58(m，1H)，7.19(d，2H)，7.72(d，2H)13C-NMR(300.13MHz，CDCl3)；δ胍碳154.05。
H-Aze-OEt×HCl由H-Aze-OH(參看下文)開始，用與H-Pic-OEt×HCl所用相同的方式制備。
H-Aze-OMe×HCl根據(jù)Seebach D.等在Liebigs Ann.Chme.，p.687，1990中所描述的步驟制備。
H-Pab(Z)×HCl將溶于異丙醇的1mol當量的5M HCl加到粗H-Pab(Z)的EtOH溶液(大約1g/10ml)中，隨即H-Pab(Z)×HCl就從溶液中沉淀出來。過濾得到的沉淀用冷EtOH洗滌二次，干燥得到幾乎為定量收率的標題化合物。
H-Pic-OEt×HCl向4.0g(0.031mol)L-2-哌啶酸于100ml無水乙醇中的漿液小心地鼓泡通入HCl(氣)直至得到透明溶液。溶液置于冰浴中冷卻并在15分內(nèi)滴入17ml亞硫酰氯。移去冰浴并將混合物回流2.5hr。蒸去溶劑后制得定量收率的鹽酸鹽形式產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.33(t，3H)，1.8-2.1(m，5H)，2.3-2.5(m，1H)，3.1-3.3(m，1H)，3.5-3.7(m，1H)，4.14(dd，1H)，4.44(q，2H).
H-(R，S)betaPic-OMe×HCl2.0g(15.5mmol)3-哌啶甲酸于8ml甲醇中的混合物置于冰浴中冷卻，加入2.76g(23.2mmol)亞硫酰氯。混合物在室溫下攪拌20小時，蒸去溶劑并將殘余物溶于少量的甲醇，加入乙醚使H-(R，S)betaPic-OMe×HCl呈白色結(jié)晶沉淀，過濾得到晶體2.57g(92％)。
Boc-(R)Cgl-OH32.6g(0.13mol)Boc-(R)Pgl-OH溶于300ml甲醇并加入5g Rh/Al2O3。溶液在5.2至2.8MPa壓力下氫化3天，過濾并蒸去溶劑后，NMR數(shù)據(jù)表明還有約25％標題化合物的甲酯存在。將粗產(chǎn)物溶于500ml THF和300ml水并加入20g LiOH，混合物攪拌過夜并蒸去THF，剩余的水相用KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取三次，合并有機層，水洗、干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)，得到28.3g(83％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.9-1.7(m，20H)，4.0-4.2(m，1H)，5.2(d，1H).
Boc-(R)Cgl-OSu向溶于25ml CH3CN的2.01g(7.81mmol)Boc-(R)Cgl-OH和1.83g(15.6mmol)HOSu和冰冷溶液中加入1.69g(8.2mmol)DCC，使反應自行升至室溫，攪拌3天，濾去DCU沉淀并蒸去溶劑，殘余物溶于EtOAc，有機相用H2O、KHSO4、NaHCO3、鹽水洗滌并干燥(Na2SO4)，蒸去溶劑后得到定量收率的標題化合物。
Boc-(R)Cha-OSu將Boc-(R)Cha-OH(1當量)、HOSu(1.1當量)和DCC或CME-CDI(1.1當量)溶于乙腈(大約2.5ml/mmol酸)并在室溫下攪拌過夜。濾去反應過程中形成的沉淀，蒸去溶劑并在真空下干燥產(chǎn)物。(反應如使用CME-CDI，則將蒸去CH3CN后的殘余物溶于EtOAc，用水洗滌有機相，干燥)。蒸去溶劑后得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，CDCl3，2種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體比例大約為1∶1)0.85-1.1(m，2H)，1.1-1.48(m，4H)，1.5-1.98(m，16H；其中1.55(bs，9H)，2.82(bs，4H)，4.72(bs，1H，主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，4.85(bs，1H，次要)。
Boc-(R)Hoc-OH3.2g(11.46mmol)Boc-(R)Hop-OH(見上)溶于甲醇(75ml)并加入0.5g活性氧化鋁載銠(Rh/Al2O3)，混合物在0.41MPa氫氣氛下攪拌18hr。用hyflo濾去催化劑并將溶劑蒸去后得到近于定量收率的產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.90(m，2H)，1.08-1.33(m，6H)，1.43(s，9H)，1.60-1.74(m，6H)，1.88(bs，1H)，4.27(bs，1H).
Boc-(R)Hoc-OSu由Boc-(R)-Hoc-OH開始，制備過程與Boc-(R)Cha-OSu的制備過程相同。
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH按照J.Y.L Chung等在Journal of Organic Chemistry，No.1，p.270-275，1990中所描述的方法制備。
Boc-(R)Cgl-Aze-OH(i)Boc-(R)Cgl-Aze-ONe向5℃、3.86g(15mmol)Boc-(R)Cgl-OH、2.27g(15mmol)H-Aze-OMe×HCl和2.75g(22.5mmol)DMAP于40ml CH3CN攪拌的混合物中加入3.16g(16.5mmol)EDC。反應混合物在室溫下攪拌48hr。蒸去溶劑并將殘余物溶于150ml EtOAc和20ml H2O中，分離出的有機層用2×20ml 0.5M KHSO4、2×10ml NaHCO3(飽和)、1×10ml H2O、1×10ml鹽水洗滌并干燥(MgSO4)。蒸去溶劑后得到4.91g(92％)標題化合物，不再精制即用于下步。1H NMR(500MHz，CDCl30.1g/ml)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，0.83-1.35(m，5H)，1.38(s，9H)，1.47-1.84(m，6H)，2.18-2.27(m，1H)，2.50-2.62(m，1H)，3.72(s，3H)，3.94-4.06(m，1H)，4.07-4.15(m，1H)，4.39-4.47(m，1H)，4.68(dd，J＝9.1，J＝5.1，1H)，5.09(d，J＝9.2，1H).由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨峰。2.27-2.35(m，1H)，3.77(s，3H)，3.80-3.87(m，1H)，3.88-3.95(m，1H)，4.92(d，J＝9.2，1H)，5.21(dd，J＝9.1，J-5，1H).
(ii)Boc-(R)Cgl-Aze-OH采用所述用于Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法(參見下文)對Boc-(R)Cgl-Aze-OMe進行水解。用EtOH/丙酮/水(1/1/3.95)結(jié)晶產(chǎn)物。收率為80％。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.85-1.3(m，5H)，1.40(s，9H)，1.5-1.9(m，6H)，1.95-2.2(m，2H)，3.92(m，1H)，4.09(m，1H)，4.35(m，1H)，4.95(m，1H)，5.16(bd，1H).
Boc-(R)Cgl-Pic-OH(i)Boc-(R)Cgl-Pic-OMe向溶于甲苯(25ml)和DMF(5ml)的Boc-(R)Cgl-OH(2.086g，8.1mmol)和三乙胺(1.13ml，8.1mmol)溶液中加入新戊酰氯(1.0ml，8.1mmol)，然后在冰浴溫度下再加入于DMF(20ml)中的H-Pic-OMe×HCl(1.46g，8.1mmol)和三乙胺(1.13ml，8.1mmol)混合物。反應混合物自行緩慢升至室溫，24hr后用水稀釋并用甲苯萃取。用0.3M KHSO4、10％NaCO3和鹽水洗滌后，真空除去溶劑制得2.52g(81％)無色油狀產(chǎn)物，不再精制即使用。1H-NMR(500MHz，CDCl3，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體比例為5∶1)δ0.8-1.8(m，25H)，2.25(d，1H)，2.75(t，1H，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，3.3(t，1H)，3.7(s，3H)，3.85(d，1H)，4.3(t，1H，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，4.5-4.6(m，1H)，5.25(d，1H)，5.30(d，1H)。
(ii)Boc-(R)Cgl-Pic-OH用水解Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法(見下文)用上述(i)的產(chǎn)物進行制備。用異丙醚和己烷結(jié)晶得到產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CDCl3，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體比例為5∶1)δ0.8-1.8(m，25H)，2.3(d，1H)，2.8(t，1H，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，3.3(t，1H)，3.9(d，1H)，4.4(t，1H，次要)，4.5-4.6(m，1H)，5.1(s，1H，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，5.3(d，1H)，5.40(d，1H)。
Boc-(R)Cgl-Pro-OH3.59g(31.24mmol)L-脯氨酸與20ml水和1.18g(29.7mmol)氫氧化鈉混合。向其中加入于10ml DMF中的2.8g(7.8mmol)Boc-(R)Cgl-OSu?？紤]到溶解能力，因而再加入30ml DMF并將反應混合物攪拌3天。蒸去溶劑并加入水，水相用乙酸乙酯洗滌、用0.3M KHSO4溶液酸化，用乙酸乙酯萃取三次。有機相用水和鹽水各洗滌一次，干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)得到2.3g(83％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.89-2.17(m，23H)，2.37(m，1H)，3.55(q，1H)，3.90(bs，1H)，4.28(t，1H)，4.52(bs，1H)，5.22(bs，1H(NH)).
Boc-(R)Cha-Aze-OH由Boc-(R)Cha-OH和H-Aze-OEt×HCl出發(fā)，用所述用于Boc-(R)-Cha-Pic-OH的方法(見下)制備。
Boc-(R)-Cha-Pro-OH將H-(S)-Pro-OH(680mmol)溶于0.87M NaOH(750ml)。在20min內(nèi)滴加Boc(R)-Cha-OSu(170mmol)的DMF(375ml)溶液，反應混合物在室溫下攪拌20hr?；旌衔锼峄?2M KHSO4)并用乙酸乙酯萃取三次。有機層合并后用水洗滌三次，用鹽水洗滌-次。用硫酸鈉干燥，并蒸去溶劑，將得到的糖漿狀油溶于乙醚，蒸發(fā)溶劑，真空干燥，得到近于定量收率的Boc-(R)Cha-Pro-OH白色粉末。1H-NMR(500MHz，CDCl3，二個旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物9∶1)δ0.8-1.05(m，2H)，1.05-1-55(m，15H；其中1.5(bs，9H))，1.55-1.8(m，5H)，1.8-2.15(m，3H)，2.47(m，1H)，3.48(m，1H)，3.89(m，1H)，4.55(m，2H)，5.06(m，1H)；由次要異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號出現(xiàn)在2.27(m)，3.58(m)，4.33(m)，5.0(m)。
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu
(i)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH由Boc-(Me)(R)Cha-OSu和H-Pro-OH出發(fā)，用前述用于Boc-(R)Cha-Pro-OH的方法進行制備。
(ii)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu由Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH出發(fā)，用所述用于Boc-(R)Cha-OSu的方法進行制備。
Boc-(R)Cha-Pic-OH(ia)Boc-(R)Cha-Pic-OEt將6.3g(0.023mol)Boc-(R)Cha-OH溶于150ml CH2Cl2。該溶液在冰浴中冷卻，加入6.3g(0.047mol)W-羥基苯并三唑和11.2g(0.0265mol)CME-CDI。15min后移去冰浴并將反應混合物在室溫下攪拌4hr。蒸發(fā)溶劑并將殘余物溶于150ml DMF，在冰浴中冷卻。加入4.1g(O.021mol)H-Pic-OEt×HCl并用N-甲基嗎啉調(diào)pH值至約9。15min后移去冰浴并將反應混合物攪拌三天。蒸發(fā)溶劑并將殘余物溶于乙酸乙酯，用稀KHSO4(水溶液)、NaHCO3(水溶液)和水洗滌。有機層經(jīng)干燥(Na2SO4)和蒸發(fā)，得到7.7g(89％)Boc-(R)Cha-Pic-OEt，不再提純即使用。1H-NMR(500MHz，CDCl3，2個旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，3∶1比例)d0.7-1.0(m，2H)，1.1-1.9(m，29H；其中1.28(t，3H))，1.45(bs，9H)，2.01(bd，1H，主要異構(gòu)體)，2.31(bd，1H)，2.88(bt，1H，次要)，3.30(bt，1H，主要)，3.80(bd，1H，主要)，4.15-4.3(m，2H)，4.5-4.7(m，2H，次要)，4.77(bq，1H，主要)，4.90(bd，1H，次要)，5.28(bd，1H，主要)，5.33(bd，1H，主要)。
(ib).Boc-(R)Cha-Pic-OMe
10ml甲基和2ml DMF中加入875mg(3.22mmol)Boc-(R)Cha-OH和450μl(3.23mmol)三乙胺的混合物，攪拌之并向其中加入400μl(3.23mmol)新戊酰氯。45min后在所得到的漿液中加入于5ml DMF中的596mg(3.32mmol)(S)-哌啶酸甲酯鹽酸化物和463μl(3.32mmol)三乙胺混合物。2hr后再加入100μl(0.72mmol)三乙胺并繼續(xù)攪拌18hr。反應混合物中加入水和甲苯，有機相用0.3M KHSO4、10％Na2CO3和鹽水洗滌。干燥(MgSO4)，在真空下除去溶劑，得到1.16g標題化合物。
(ii)Boc-(R)Cha-Pic-OH將5.6g(0.014mol)Boc-(R)Cha-Pic-OEt與100ml THF、100ml水和7g LiOH混合，在室溫下將混合物攪拌過夜。蒸去THF，水溶液用KHSO4(水溶液)酸化，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)，得到4.9g(94％)Boc-(R)Cha-Pic-OH，不再提純即使用。此化合物可用異丙醚/己烷結(jié)晶。
前面步驟(ib)中生成的甲酯可用(ii)中所述用于乙酯的方法進行水解。1H-NMR(500MHz，CDCl3，2個旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，比例3.5∶1)δ0.8-1.1(m，2H)，1.1-2.1(m，27H；其中1.43(s，9H，主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，1.46(s，9H，次要))，2.33(bd，1H)，2.80(bt，1H，次要)，3.33(bt，1H，主要)，3.85(bd，1H，主要)，4.57(bd，1H，次要)，4.68(m，1H，次要)，4.77(bq，1H，主要)，5.03(bs，1H，次要)，5.33(bd，1H，主要)，5.56(m，1H，主要)。
BoC-(R)Cha-(R，S)betaPic-OH(i)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OMe
向2.0g(7.3mmol)Boc-(R)Cha-OH和0.81ml(7.3mmol)4-N-甲基嗎啉的20ml乙腈溶液中加入0.9ml(7.3mmol)新戊酰氯，攪拌1hr 30min后再加入1.3g(7.3mmol)H-(R，S)betaPic-OMe×HCl和1.62ml(14.6mmol)4-N-甲基嗎啉，反應混合物攪拌24hr。蒸發(fā)溶劑并將殘余物溶于甲基和-些乙醚中，用0.3MKHSO4和KHCO3溶液洗滌，用Na2SO4干燥，真空除去溶劑。用沖洗劑庚烷/乙酸乙酯(7/3)進行閃色譜處理得到2.4g(83％)所需產(chǎn)物。
(ii)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPiC-OH室溫下將2.35g(5.9mmol)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OMe溶于35ml THF中，加入于35ml水中的2.1g LiOH。攪拌5hr后真空除去THF。水相用2M KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取，用Na2SO4干燥并蒸發(fā)，得到2.0g(89％)。
Boc-(R)Cha-Val-OH(i)Boc-(R)Cha-Val-OMe攪拌于50ml DMF中的6.75g(25mmol)Boc-(R)Cha-OH和3.5ml(25mmol)三乙胺混合物，在環(huán)境溫度下向其中加入3.1ml(25mmol)新戊酰氯。3小時后加入于50ml DMF和3.5ml三乙胺中的4.16g(25mmol)鹽酸纈氨酸甲酯，攪拌過夜后加入一些DMAP的結(jié)晶并將反應混合物加熱至50℃保持5分鐘。真空除去溶劑，殘余物中加入乙醚和甲苯。用0.3M KHSO4和10％Na2CO3洗滌，干燥(MgSO4)，真空除去溶劑得到殘余物，用沖洗劑甲基/乙酸乙酯進行閃色譜處理，最后得到6.99g(73％)標題化合物。
(ii)Boc-(R)Cha-Val-OH將于75ml THF和75ml水中的8.73g(23mmol)Boc-(R)Cha-Val-OMe與5.6g(230mmol)氫氧化鋰的混合物攪拌4小時。真空除去THF，殘余溶液用水稀釋，用乙醚萃取，用2M KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取，再干燥(MgSO4)和真空去除溶劑，得到8.15g(96％)標題化合物。
Boc-(R)Hoc-Aze-OH(i)Boc-(R)Hoc-Aze-OEt室溫下，將1.0g(3.5mmol)Boc-(R)Hoc-OH和0.95g(7.0mmol)HOBt溶于15ml CH2Cl2。溶液在冰浴中冷卻，加入0.77g(4.Ommol)EDC。移去冰浴并使反應混合物在室溫下攪拌3hr。蒸去溶劑并將殘余物溶于20ml DMF，加入0.58g(3.5mmol)H-(R)Aze-OH，用N-甲基嗎啉調(diào)pH值至約9，反應混合物攪拌一天。反應混合物在水和甲苯間進行分配，分離有機相，0.3M KHSO4、稀KHCO3和鹽水洗滌、用Na2SO4干燥，蒸發(fā)。用閃色譜(溶于CH2Cl2和庚烷的1％EtOHEtOAc)處理得到0.35g(25％)所需產(chǎn)物。
(ii)Boc-(R)Hoc-Aze-OH室溫下將0.65g(1.6mmol)Boc-(R)Hoc-Aze-OEt溶于10mlTHF，加入于10ml水中的0.59g LiOH。攪拌24小時后加入2M KHSO4并在真空下除去THF。水相用2M KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取，用Na2SO4干燥，蒸發(fā)。得到0.5g(85％)標題化合物。
Boc-(R)Hoc-Pro-OH從Boc-(R)Hoc-OSu開始，用所述用于Boc-(R)Cha-Pro-OH的方法進行制備。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.80-0.94(m，2H)，1.05-1.36(m，7H)，1.36-1.48(bs，9H)，1.48-1.78(m，7H)，1.98-2.14(m，2H)，2.34(m，1H)，3.48(m，1H)，3.85(m，1H)，4.43(m，1H)，4.52(bd，1H)，5.26(bd，1H).次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體信號δ1.92，2.25，3.58，4.20和4.93。
Boc-(R)Hoc-Pic-OH(i)Boc-(R)Hoc-Pic-OMe以Boc-(R)Hoc-OH和H-Pic-OMe×HCl作為起始物，用所述用于Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法(見上)進行制備。
(ii)Boc-(R)Hoc-Pic-OH以Boc-(R)Hoc-Pic-OMe作為起始物，用所述用于Boc-(R)Cha-Pic-OH的方法(見上)進行制備。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.82-0.97(m，2H)，1.10-1.36(m，7H)，1.36-1.50(bs，9H)，1.50-1.82(m，11H)，2.35(bd，1H)3.28(bt.1H)，3.85(bd，1H)4，63(m，1H)，5.33(bs，1H)，5.44(bd，1H)，5.33(bs，1H)，5.44(bd，1H)，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體信號δ1.88，2.80，4.25，4.55和4.97。
Boc-(R)Pro-Phe-OH(i)Boc-(R)Pro-Phe-OMe向2.0g(9.29mmol)Boc-(R)Pro-OH和0.94g(9.29mmol)三乙胺的70ml甲苯/DRF(5/2)溶液中加入1.12g(9.29mmol)新戊酰氯，在室溫下攪拌反應30min。反應物冷至0℃并加入于40mlDMF中的2.0g(9.29mmol)H-Phe-OMe和0.94g三乙胺混合物，在室溫下攪拌過夜。反應混合物用甲苯稀釋，有機相用3×50ml 0.3MKHSO4和1×50ml水洗滌，干燥(Na2SO4)。蒸除溶劑，得到定量收率的標題化合物，此化合物不再精制即用于下一步。
(ii)Boc-(R)Pro-Phe-OH將4.0g(10.6mmol)Boc-(R)Pro-Phe-OMe和8.93g(21.3mmol)LiOH×H2O的混合物溶于140ml水/THF(1/1)，在室溫下劇烈攪拌過夜。蒸去THF，水相用1M KHSO4酸化并用3×75ml EtOAc萃取。合并有機相，經(jīng)水洗、干燥(Na2SO4)、過濾和蒸除溶劑，得到殘余物，用異丙醚結(jié)晶純化制得2.329g(60％)標題化合物的白色晶狀固體。
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH(i)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn將1.61g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH、1.65gH-Pro-OBn×HCl和0.75g HOBt的混合物溶于11ml DMF，在室溫下向其中加入0.84ml NMM和2.92g CNE-CDI，反應混合物攪拌3天。蒸去溶劑并將殘余物溶于300ml EtOAc。有機相用2×100ml水、2×100ml1M KHSO4、3×100ml 1M NaOH和3×100ml水洗滌并干燥，蒸去溶劑，得到2.53g油狀物，用沖洗劑CH2Cl2/MeOH(97/3)進行閃色譜純化，得到2.11g(88％)標題化合物。
(ii)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH將0.94g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn溶于70mlEtOH、加入0.42g 5％Pd/C催化劑氫化3.5小時。濾去催化劑并蒸除溶劑，制得定量收率的標題化合物白色結(jié)晶。
Boc-(R)Tic-Pro-OH根據(jù)P.D.Gesellchen和R.T.Shuman在EP-0,479,489-A2中所述方法進行制備。
BnOOC-CH2-NH-O-CH2-Br向P-TsOH×H-Gly-OBn(5mmol)和三乙胺(5mmol)的10mlCH2Cl2溶液中加入溶于10ml CH2Cl2中的2-溴乙酸(5mmol)和二環(huán)己基碳化二亞胺(5mmol)，混合物在室溫下攪拌過夜并過濾。有機相用0.2M KHSO4、0.2M NaOH和鹽水洗滌二次，干燥。經(jīng)蒸發(fā)和閃色譜(CH2Cl2/MeOH，95/5)處理得到定量收率的所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ3.89(s，2H)，4.05-4.11(d，2H)，5.19(s，2H)，7.06(bs，1H)，7.3-7.4(m，5H).
Boc-(R)Cgl-Ile-OH用所述用于Boc-(R)Cgl-Pro-OH的方法進行制備，其中的H-Pro-OH用H-Ile-OH代替。收率為91％。
Boc-(R)Phe-Phe-OH(i)Boc-(R)Phe-Phe-OMe將Boc-(R)Phe-OH(18.8mmol購自Bachem FeinchemicalienAG)、Phe-OMe(20.7mmol)和4-二甲基氨基吡啶(37.7mmol)溶于30ml乙腈。溶液冷至冰水溫度并加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(24.5mmol)鹽酸化物。移去冷卻浴，攪拌反應混合物再過夜。減壓下除去溶劑，并將殘余物溶于50ml乙酸乙酯。有機相用50ml 0.5M硫酸氫鉀的季銨氯化物、1M碳酸氫鈉和水依次萃取，蒸去溶劑得到7.5g Boc-(R)Phe-Phe-OMe(94％)，此化合物不再純化即用于下一步。
(ii)Boc-(R)Phe-Phe-OH將Boc-(R)Phe-Phe-OMe(16.4mmol)溶于40ml四氫呋喃并快速加入溶于20ml水的氫氧化鋰(32.8mmol)，反應混合物攪拌3.5hr后減壓除去溶劑。將殘余物溶于50ml乙酸乙酯并用50ml0.5M硫酸鉀和50ml水依次萃取。減壓除去溶劑后得到8.0gBoc-(R)Phe-Phe-OH(定量的)無定形固體。
1H NMR(200 MHz，d-CHCl3)；δ7.4-6.7(m，10H)，5.7-4.2(m，6H)，1.34(s，9H)。
HO-CH2-COOBn根據(jù)Lattes A.等在Bull.Soc.Chim.Franca.，Noll，pp.4018-23，1971中所述的方法制備。
芐基-2-(鄰-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯(2-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn將1.66g(10mmol)芐基甘醇酸酯溶于25ml CH2Cl2和25ml乙醚，混合物冷至0℃并加入2.8ml(10mmol)三乙胺，溫度保持0℃情況下，將2.44g(11mmol)鄰-硝基苯磺酰氯在15min內(nèi)分小批加入。所得漿液在0℃下攪拌50min，加入20ml水和30ml CH2Cl2。二相分離，有機相用20ml 1M HCl和20mlH2O洗滌、干燥(Na2SO4)、過濾和真空蒸發(fā)后得到3.34g殘余物，殘余物用沖洗劑庚烷∶EtOAc(2∶1)進行閃色譜處理，得到1.18g(34％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ4.92(s，2H)，5.17(s，2H)，7.83(m，5H)，7.76(m，3H)，8.16(dd，1H).
芐基-2-(對-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯(4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn根據(jù)上述用于芐基-2-(鄰-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯的方法進行制備。蒸發(fā)溶劑后所得的最后產(chǎn)物呈結(jié)晶狀，純度已足以供使用，無須再純化。(64％產(chǎn)率)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ4.79(s，2H)，5.13(s，2H)，7.2-7.4(m，5H)，8.10(d，2H)，8.30(d，2H).
Tfo-CH2COONe向4.05ml(50mmol)甲基甘醇酸酯和4.04ml(50mmol)吡啶于CH2Cl2的混合物(總計62.5ml)在0℃下，滴入溶于CH2Cl2的10.09ml(60mmol)三氟甲基磺酸酐，滴加時間在25分鐘以內(nèi)，然后在0℃下攪拌1hr。用0.3M KHSO4和飽和Na2CO3洗滌、干燥(Na2SO4)、過濾和真空蒸發(fā)溶劑后得到9.94g(90％)標題化合物。
TfO-CH2COOEt以乙基甘醇酸酯作為起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制備。
TfO-CH2COOnBu以丁基甘醇酸酯作為起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制備。
TfO-CH2COOBn以HO-CH2COOBn作為起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制備。
TfO-CH2COOnHex(i)HO-CH2COOnHex向于12.8ml CH3CN中的215mg(2.82mmol)甘醇酸中加入719mg(3.39mmol)1-碘己烷和429mg(2.82mmol)DBU。攪拌過夜和回流4hr后蒸去溶劑并加入乙酸乙酯和1M KHSO4，二相分離，有機層用鹽水洗滌、干燥(MgSO4)、過濾和真空蒸發(fā)，得到333mg(74％)產(chǎn)物。
(ii)TfO-CH2COOnHex以HO-CH2COOnHex作為起始物，按所述用于TfO-CH2COONe的方法制備。
H-Mig(Z)(3-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(i)3-氨甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷按文獻制備，參看A.G.Anderson，Jr.和R.Lok，J.Org.Chem.，37，3953，1972。
(ii)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷向溶于45ml THF的3.50g(13.9mmol)3-氨甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷中加入0.56g(13.9mmol)NaOH的45ml水溶液。將反應混合物冷至0℃，加入3.03g(13.9mmol)二叔丁基二碳酸酯。幾分鐘后移去冷卻浴并將混合物在室溫下攪拌過夜，蒸去THF，殘余物用3×45ml乙醚萃取，合并有機層，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥、過濾。蒸發(fā)溶劑，得到4.6g(94％)標題化合物。
(iii)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)氮雜環(huán)丁烷將3.4g(9.6mmol)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷溶于170ml MeOH，加入0.30g Pd(OH)2后在5MPa壓力下氫化過夜。濾去催化劑并蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物用閃色譜純化，沖洗劑依次為MeOH/CH2Cl2(1/9)和MeOH(氨氣飽和)/CH2Cl2(1/9)，得到1.2g(67％)標題化合物。
(iv)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(Boc-Mig(Z))將0.9g(4.8mmol)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)氮雜環(huán)丁烷和1.3g(6.3mmol)N-芐氧基羰基-O-甲基異脲在6.5ml甲苯中混合后加熱至70℃反應72hr，然后在室溫下放置72hr。反應產(chǎn)物經(jīng)蒸發(fā)后用閃色譜處理，沖洗劑依次為EtOAc和MeOH(氨氣飽和)/CH2Cl2(1/9)，得到0.67g(38％)標題化合物，為白色粉末。
(v)3-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Mig(Z))將0.67g(1.85mmol)Boc-Mig(Z)溶于10ml用HCl(g)飽和的EtOAc，并在室溫下攪拌10分鐘。滴加入10ml KOH的飽和水溶液。二相分離，水相用3×8ml EtOAc萃取，合并有機層、用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，蒸發(fā)，得到0.43g(89％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ2.55-2.65(m，1H)，2.84(d，2H)，3.66(dd，2H)4.03(dd，2H)5.07(s，2H)，7.2-7.4(m，5H).
MSm/z 263(M+＋1)3-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Dig(Z))(i)3-羧酸-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷按文獻制備，參見A.G.Anderson，Jr.和R.Lok，J.Org.Chem.，37，3953，1972。
(ii)3-羥甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷將8.7g(32.5mmol)3-羧酸-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷的80ml無水THF溶液在室溫下緩慢加入到4.9g(130.2mmol)LiAlH4在30mlTHF的懸浮液中，反應混合物回流3.5hr。在冷卻下，小心地加入NH2Cl水溶液，使過量氫化物試劑水解，將膠凝狀混合物過濾，用THF洗滌濾餅多次。蒸發(fā)溶劑，得到7.1g(86％)標題化合物為淡黃色晶體。
(iii)3-甲磺酰甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷向6.62g(26.1mmol)3-羥基甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷于50ml無水吡啶中的溶液在0℃下加入4.5g(39.2mmol)甲基磺酰氯。反應混合物攪拌1hr后在冰箱中靜置過夜。將反應混合物倒入冰和水的混合物中。收集沉淀物，用水洗滌，真空干燥，得到7.75g(89.5％)標題化合物。
(iv)3-氰基甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷向7.75g(23.4mmol)3-甲基磺酰甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷的50ml DMF溶液中加入3.44g(70.0mmol)NaCN的10ml水溶液?；旌衔锛訜嶂?5℃反應20hr后，冷卻，并倒入冰水混合物中。收集沉淀物，用水洗滌，真空干燥，得到5.7g(93％)標題化合物。
(v)3-氨乙基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷在室溫下將5.7g(21.7mmol)3-氰基甲基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷慢慢加到2.9g(76.0mmol)LiAlH4在80ml無水THF中的懸浮液中。反應混合物回流4hr。在冷卻下小心加入NH4Cl水溶液，使過量氫化物試劑水解。過濾膠凝狀混合物并將濾餅用THF洗滌多次。蒸去溶劑，將殘余物溶于乙醚，用鹽水洗滌、用Na2SO4干燥。蒸發(fā)溶劑，得到5.0g(87％)標題化合物。
(vi)3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷按用于3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷的方法，由3-氨乙基-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷制得標題化合物，產(chǎn)率為6.5g(95％)。
(vii)3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)氮雜環(huán)丁烷按用于3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)氮雜環(huán)丁烷的方法，由3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-二苯甲基氮雜環(huán)丁烷制得標題化合物，產(chǎn)率為1.2g(70％)。
(viii)3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(Boc-Dig(Z))
按用于3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷的方法，由3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)氮雜環(huán)丁烷制得標題化合物，產(chǎn)率為0.090g(34％)。
(ix)3-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷(H-Dig(Z))將0.589g(1.56mmol)Boc-Dig(Z)溶于10ml用HCl(氣)飽和的EtOAc中，并在室溫下攪拌10min。滴加入10ml KOH的飽和水溶液。二相分離，水相用3×8ml EtOAc萃取，合并有機層，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，蒸發(fā)，得到0.415g(96％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.60(dt，2H)，2.52-2.54(m，3H)，3.53(bs，2H)，4.0(bt，2H)，5.00(s，2H)，7.17-7.31(m，5H).
工作實施例實施例1HOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)向攪拌的3.40g(10mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-OH(見起始物的制備)和5.13g DMAP(42mol)于120ml CH3CN中的混合物中加入3.18g H-Pab(Z)×HCl(見起始物的制備)。在室溫下攪拌2小時后混合物冷卻至-8℃并加入2.01g(10.5mmol)EDC。令反應溫度自行升至室溫，繼續(xù)攪拌47小時。蒸發(fā)溶劑并將殘余物溶于200ml EtOAc，有機相用1×50ml水、1×50＋2×25ml 0.5MKHSO4，2×25ml NaHCO3(飽和)和1×50ml水洗滌并干燥。蒸發(fā)溶劑得到5.21g(86％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-1.9(m，20H；其中1.30(s，9H))，2.35-2.6(m，2H)，3.74(bt，1H)，4.10(m，1H)，4.25-4.4(m，2H)，4.45-4.6(m，1H，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，4.75-5.0(m，1H，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，5.08(bd，2H)，5.15(s，2H)，7.15-7.35(m，5H)，7.41(d，2H)，7.77(d，2H)，8.21(m，1H).
(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)向冷卻的于195ml EtOAc中的18.8g HCl(氣)溶液(冰浴溫度)中同時加入4.69g(7.743mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)和40ml EtOAc。使反應混合物自行升至室溫并攪拌30min。向所得透明溶液中加入140ml Et2O，隨即產(chǎn)生沉淀物。反應體系在室溫下靜置1小時40分鐘。過濾出沉淀物，用150ml Et2O快速沖洗、真空干燥。將沉淀物溶于50ml水，并用15ml 2MNaOH堿化，堿性水相用1×100＋1×50ml CH2Cl2萃取。合并有機相，用1×20ml水和1×20ml鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑，得到3.44g(88％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-2.0(m，11H)，2.51(m，1H)，2.67(m，1H)，3.07(d，1H)，4.11(m，1H)，4.18(m，1H)，4.43(dd，1H)，4.53(dd，1H)，4.91(m，1R)，5.22(s，2H)，7.2-7.4(m，7H)，7.45(d，2H)，8.51(d，2H).
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)混合1.13g(2.2mmol)H-(R)-Cgl-Aze-Pab(Z)、0.9g(2.6mmol)芐基-2-(鄰-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯((2-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn)(見起始物的制備)、0.99g(5.6mmol)K2CO3和113ml CH3CN并在60℃油浴中加熱3hr。真空蒸發(fā)溶劑。加入EtOAc并用水洗滌混合物，有機相用1MKHSO4萃取，水相用EtOAc洗滌。用1N NaOH堿化酸性水相至pH＞8，再用EtOAc萃取。有機相用水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并真空蒸發(fā)，得到1.17g殘余物，殘余物用閃色譜處理二次，沖洗劑先為CH2Cl2/MeOH(NH3飽和)95/5，后為乙醚/MeOH(NH3飽和)9/1，得到0.525g(36％)標題化合物。
烷基化也用芐基-2-(對-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯((4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn)(見起始物的制備)采用上述方法進行，標題化合物的產(chǎn)率為52％。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.85-2.15(m，11H)，2.48(m，1H)，2.63(m，1H)，2.88(d，1H)，3.24(d，1H)，3.27(d，1H)，3.95(m，1H)，4.05(m，1H)，4.44(m，1H)，4.55(m，1H)，4.91(m，1H)，5.07(s，2H)，5.22(s，2H)，7.2-7.4(m，10H)，7.45(d，2H)，7.79(d，2H)，8.42(m，1H).
(iva)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl將20mg(0.031mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)溶于5ml甲醇中，加入幾滴氯仿和5％Pd/C。反應混合物在常壓下加氫1hr。過濾，蒸發(fā)后產(chǎn)物冷凍脫水得到11mg(72％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.0-2.0(m，11H)，2.10(m，1H)，2.44(m，1H)，2.82(m，1H)，3.90(s，2H)，4.09(d，1H)，4.4-4.55(m，2H)，4.66(s，2H)，5.08(m，1H)，7.65(d，2H)，7.89(d，2H).13C-NMR(75.5MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.3，167.9，169.9和172.4。
(ivb)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
將BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)溶于EtOH(99％)，加入5％Pd/C后在常壓下加氫5小時。用硅藻土濾去催化劑，蒸發(fā)溶劑，以97％產(chǎn)率得到標題化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD，二個旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)主要異構(gòu)體δ1.00-1.12(m，1H)，1.13-1.34(m，4H)，1.55-1.70(m，3H)，1.73-1.85(m，2H)，1.94-2.02(bd，1H)，2.32-2.42(m，1H)，2.54-2.64(m，1H)，2.95-3.10(AB-系加d，3H)，4.18-4.25(bq，1H)，4.28-4.32(bq，1H)，4.43-4.60(AB-系，2H)，4.80-4.85(dd，1H)，7.48-7.54(d，2H)，7.66-7.71(d，2H).次要異構(gòu)體可分辨信號δ0.95(m)，1.43(m)，2.24(m)，2.84(d)，3.96(m)，4.03(m)，7.57(bd)，7.78(bd)。13C-NMR(125MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.0，173.0，176.3和179.0。
實施例2HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(i)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)按實施例1(ii)中所述方法進行制備，所生成的鹽酸鹽用堿處理得到游離堿。
(ii)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)將0.19g(0.38mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)和70mg(0.43mmol)芐基丙烯酸酯溶于2ml異丙醇?；旌衔锓胖?天。用沖洗劑CH2Cl2/THF＝8/2進行閃色譜處理得到0.12g(48％)標題化合物。1H NMR(500MHz，CDC13)δ0.8-1.9(m，10H)，1.95(bd，1H)，2.4-2.6(m，4H)，2.7-2.8(m，3H；其中2.79(d，1H))，4.13(m，1H)，4.37(dd，1H)，4.60(dd，1H)，4.97(dd，1H)，5.09(dd，2H)，5.22(s，2H)，7.25-7.4(m，10H)，7.47(d，2H)，7.83(d，2H)，8.61(bt，1H).
(iii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl將0.10g(0.15mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)溶于10ml乙醇，加入5％Pd/C后在常壓下加氫1hr。溶液經(jīng)過濾、蒸發(fā)，粗產(chǎn)物在RPLC上用CH3CN/0.1M NH4oAc(1/4)純化，所得產(chǎn)物經(jīng)冷凍干燥、過量濃HCl處理，并再次冷凍干燥，得到31mg二鹽酸鹽。1H NMR(300MHz，D2O)δ0.8-2.1(m，11H)，2.38(m，1H)，2.7-2.9(m，3H)，3.2-3.4(m，2H)，3.98(d，1H)，4.35-4.55(m，2H)，4.60(s，2H)，5.04(dd，1H)，7.59(d，2H)，7.83(d，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，167.8，172.3和175.5。
實施例3HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)將2.3g(6.49mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(見起始物的制備)、2.38g(19.47mmol)DMAP和1.84g(6.49mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)在30ml乙腈中混合，混合物冷至-15℃并加入1.31g(6.81mmol)EDC。使混合物的自行升至室溫并攪拌過夜。蒸發(fā)后，將殘余物溶于乙酸乙酯和用0.3M KHSO4溶液中，酸性水相用乙酸乙酯萃取三次。有機相0.3M KHSO4溶液洗滌二次、用NaHCO3溶液洗滌二次，用鹽水洗滌一次，干燥(Na2SO4)、過濾蒸發(fā)粗產(chǎn)物，用洗脫劑乙酸乙酯進行硅膠閃色譜純化得到1.77g(44％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.9-1.49(m，14H)，1.5-2.1(m，9H)，2.37(bs，1H)，3.53(q，1H)，3.94(bs，1H)，4.02(m，1H)，4.43(bs，2H)，4.65(d，1H)，5.09(bs，1H)，5.20(s，2H)，7.18-7.4(m，5H)，7.45(d，2H)，7.62(bs，1H)，7.81(m，2H)，(ii)H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)將1.45g(2.34mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)溶于75ml鹽酸飽和的乙酸乙酯中，混合物在室溫下靜置10mim。蒸去溶劑，得到1.3g產(chǎn)物的二鹽酸鹽。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.0-1.45(m，5H)，1.58-2.2(m，9H)，2.3-2.5(m，1H)，3.75-3.90(m，2H)，4.25(d，2H)，4.5-4.66(m，3H)，5.49(s，2H)，7.45-7.7(m，7H)，7.87(d，2H)將二鹽酸鹽溶于0.1M NaOH溶液中并用乙酸乙酯萃取水相三次，以此得到胺。有機相用鹽水洗滌一次，干燥(Na2SO4)，過濾并蒸發(fā)，得到1.19g(97％)標題化合物。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)將0.340g(0.65mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)與0.215g(0.65mmol)BnOOC-CH2-OTf(見起始物的制備)、0.299g(2.17mmol)K2CO3在4ml二氯甲烷中混合并回流半小時，然后將反應混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物用CH2Cl2稀釋，有機層用水和鹽水各洗滌一次、干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度洗脫劑CH2Cl2/MeOH(97/3，然后95/5)純化得到299mg二種產(chǎn)物的混合物(根據(jù)TLC判斷。因此在閃色譜上用梯度洗脫劑乙酸乙酯/甲苯(9/1，93/7，95/5，100/0)進一步純化所得混合物，得到首先從柱中流出的46mg(9％)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)和隨后流出的133mg(31％)所需產(chǎn)物BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)δ0.9-1.3(m，5H)，1.4-2.1(m，9H)，2.3-2.4(m，1H)，3.05(d，1H)，3.20-3.37(AB-系中心位于δ3.29，2H)，3.5-3.6(m，2H)，4.29-4.57(ABX-系中心位于d4.43，2H)，4.62(d，1H)，4.91(明顯單峰，2H)，5.19(s，2H)，6.75(bs，NH)，7.1-7.5(m，12H)，8.7-8.8(m，2H＋NH)，9.45(bs，NH)1H-NMR(300MHz，CDCl3)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)δ0.68-0.9(m，2H)，1.0-1.3(m，3H)，1.43(bd，1H)，1.55-2.0(m，7H)，2.05(bd，1H)，2.3-2.4(m，1H)，3.15(d，1H)，3.25-3.48(m，2H)，3.55-3.79(AB-系中心位于d3.67，4H)，4.38-4.58(ABX-系中心位于d4.48，2H)，4.68(d，1H)，4.82-4.98(AB-系中心位于d4.91，4H)，5.19(s，2H)，6.66(bs，NH)，7.1-7.5(m，17H)，7.75(d，2H)，7.80(t，NH)，9.37(bs，NH)13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.7，168.1，171.5，172.3和172.6。
(iv)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl將0.133g(0.2mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)與0.06g 5％Pd/C、1ml 1N HCl溶液和10ml乙醇混合。在氫氣氛下處理1小時。經(jīng)hyflo過濾、蒸發(fā)溶液并二次冷凍脫水得到93mg(產(chǎn)率為90％)的產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.0-1.45(m，5H)，1.5-2.1(m.9H)，2.2-2.4(m，1H)，3.55-3.85(m，4H；其中3.79(s，2H))，4.23(d，1H)，4.33-4.57(m，3H)，7.44(d，2H)，7.69(d，2H)13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.9，167.2，169.1，174.5。
實施例4HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl(i)BnooC-CH2-CH2(R)Cgl-Pro-Pab(Z)將0.406g(0.782mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)(見實施例3)溶于3ml乙醇并加入132μl(0.816mmol)芐基丙烯酸酯。將反應混合物在室溫下攪拌3天，蒸發(fā)，所得粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度洗脫劑CH2Cl2MeOH 95/5和90/10純化得到0.399g(75％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(m，1H)，1.0-1.3(m，4H)，1.35-2.2(m，9H)，2.3-2.6(m，4H)，2.65-2.78(m，1H)，3.05(d，1H)，3.4-3.6(m，2H)，4.25-4.52(ABx-系中心位于d4.40，2H)，4.64(dd，1H)，5.05(s，2H)，5.20(s，2H)，7.2-7.38(m，10H)，7.43(d，2H)，7.78(d，2H)13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.7，167.9，171.3，172.7和175.4。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl將0.261g(0.383mmol)BnooC-CH2-CH2(R)Cgl-Pro-Pab(Z)與0.075g 5％Pd/C、1ml 1M HCl溶液和10ml乙醇混合，在常壓下加氫2小時。經(jīng)hyflo過濾、蒸發(fā)溶劑和二次冷凍脫水后得到0.196g(96％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.17-1.40(m，5H)，1.60-1.92(m，5H)，1.92-2.2(m，4H)，2.32-2.48(m，1H)，2.81(t，2H)，3.11-3.36(ABX2-系中心位于δ3.24，2H)，3.63-3.90(m，2H)，4.25(d，1H)，4.42-4.63(m，3H)，7.54(d，2H)，7.78(d，2H)13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.0，167.30，174.6和174.7。
實施例5(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl將46mg(0.056mmol)(BnOOC-CH2)-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)(見實施例3)與25mg 5％Pd/C，0.7ml 1M HCl溶液和7ml乙醇混合，在常壓下加氫1小時，經(jīng)hyflo過濾催化劑、蒸發(fā)溶劑和二次冷凍脫水干燥后得到25mg(77％)最終產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.0-1.4(m，5H)，1.45-2.2(m，9H)，2.25-2.45(m，1R)，3.53-3.84(m，2H)，3.84-4.22(AB-系中心位于δ4.03，4H)，4.26(d，1H)，4.35-4.6(m，3H)，7.53(d，2H)，7.77(d，2H)。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.1，167.3，170.6和174.5。
實施例6H-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)攪拌0.875g(2.37mmol)Boc-(R)Cgl-Pic-OH(見起始物的制備)、1.22g(9.97mmol)DMAP和0.706g(2.49mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)于30ml乙腈和1ml DMF混合物的溶液，在-18℃下加入0.478g(2.49mmol)EDC。使反應混合物在數(shù)小時內(nèi)達到室溫并繼續(xù)攪拌48hr。真空除去溶劑并將殘余物溶于50ml乙酸乙酯。溶液用15ml水、3×15ml 0.3M KHSO4、2×15ml Na2CO3溶液和水洗滌。除去溶劑，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯/庚烷(9∶1)進行閃色譜處理得到0.96g(64％)產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)將氯化氫氣體鼓泡通入0.56g(0.88mmol)Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)的25ml乙酸乙酯溶液中，數(shù)分鐘后溶液析出結(jié)晶。真空除去溶劑并加入50ml乙酸乙酯，用Z×15ml 2M氫氧化鈉溶液洗滌，用25ml乙酸乙酯萃取水相，合并萃取物，干燥(硫酸鈉)，真空除去溶劑，得到0.448g(95％)所需產(chǎn)物。
(iii)H-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl于5ml 95％乙醇和1ml水的98mg(0.18mmol)H-Cgl-Pic-Pab(Z)溶液在5％Pd/C存在下，于氫氣氛中攪拌4小時。過濾混臺物，加入0.3ml 1M鹽酸，真空除去乙醇并將殘余物冷凍干燥，得到70mg(81％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ1.00-1.56(m，7H)，1.56-1.94(m，9H)，2.32(bd，1H)，3.32-3.45(m，1H)，3.90(bd，1H)，4.35(d，1H)，4.50(s，2H)，5.10-5.20(m，1H)，7.55(d，2H)，7.76(d，2H)。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，170.5和173.4。
實施例7HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)于2.5ml乙醇中的350mg(0.66mmol)H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)(見實施例6)和233mg馬來酸二芐酯的混合物在室溫下保存4天，真空除去乙醇，將殘余物用洗脫劑乙酸乙酯/庚烷(9∶1)進行閃色譜處理得到0.108mg產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl將105mg(0.13mmol)BnOOC-CH-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)溶于5ml 95％乙醇和1ml水，在5％Pd/C存在下加氫5小時。加入0.3ml 1M鹽酸并將混合物過濾，真空除去溶劑。將殘余物溶于水并冷凍干燥，得到54mg(73％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CD3OD，兩非對映體5/4混合物)δ1.10-1.60(m，7H)，1.60-2.04(m，9H)，2.23-2.42(m，1H)，2.93-3.15(m 2H)，3.30-3.42(m，1H，被MeOD峰部分掩蓋)，3.71-3.95(m，1H)，3.98-4.10(m，1H)，4.40-4.60(m，3H)，5.10-5.20(m，1H)，7.49-7.60(m，2H)，7.70-7.81(m，2H)13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.1，168.95，169.6和173.1。
MSm/z 516(M+＋1)實施例8H-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z)攪拌0.72g(2.03mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)。1.04g(8.53mmol)DMAP和604mg(2.13mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)于20ml乙腈的混合物，在-18℃下向其中加入409mg(2.13mmol)EDC。反應混合物達到室溫過夜后在真空下除去溶劑。將殘余物溶于40ml乙酸乙酯并用10ml水、3×10ml 0.3MKHSO4、2×10ml Na2CO3-NaCl(水溶液)和10ml鹽水依次洗滌有機相。干燥(Na2SO4)、真空除去溶劑，殘余物用沖洗劑乙酸乙酯/甲醇(9∶1)進行閃色譜處理，得到645mg(51％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)于25ml乙酸乙酯中的640mg(1.03mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶液中鼓泡通入氯化氫氣體。數(shù)分鐘后經(jīng)TLC分析表明反應已完全。用真空除去過量氯化氫，然后用乙酸乙酯將混合物稀釋至50ml。用2×15ml Na2CO3(水溶液)洗滌混合物，水相用15ml乙酸乙酯萃取，合并有機萃取物，水洗滌、干燥(Na2SO4)，真空除去溶劑，得到513mg(96％)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)。
(iii)H-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl將76mg(0.15mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于5ml95％乙醇和1ml水中，加入5％Pd/C后在常壓下加氫4小時。反應混合物經(jīng)過濾去除催化劑，加入0.4ml 1M鹽酸，真空蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于2ml水。冷凍干燥得到57mg(85％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，D2O，2個旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，3∶1混合物)δ1.02-1.20(m，2H)，1.22-1.92(m，11H)，2.40-2.50(m，1H)，2.80-2.90(m，1H)，4.25(bt，1H)，4.40(dq，1H)，4.53(dq，1H)，4.65(s，2H)，5.05-5.10(m，1H)，7.65(d，2H)，7.88(d，2H).次要異構(gòu)體可分辨信號的化學位移δ0.57(m)，0.85(m)，2.95(m)，4.06(dq)，4.17(dq)，4.63(s)，5.33(m)，7.70(d)，7.93(d).13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，170.4和172.8。
實施例9HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)向0.27g(0.52mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(見實施例8)和0.158g(1.14mmol)K2CO3于5.2ml乙腈的混合物中加入0.119g(0.52mmol)溴乙酸芐酯，油浴加熱至60℃反應1hr。去除溶劑，加入乙酸乙酯和水。分相，有機相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)和真空蒸發(fā)后得到0.344g殘余物，殘余物在閃色譜上用乙酸乙酯洗脫液處理，再用洗脫劑乙酸乙酯∶四氫呋喃∶NH3-飽和甲醇(60∶5∶2)處理得到0.163所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)；δ0.7-1.0(m，2H).1.05-2.05(m，11H)，2.35-2.55(m，1H)，2.55-2.75(m，1H)，3.15-3.32(m，3H)，3.95-4.05(t，2H)，4.4 and 4.5(ABX-系，2H)，4.8-4.95(m，1H)，5.05(s，2H)，5.2(s，2H)，7.2-7.5(m，12H)，7.7-7.85(d，2H)，8.3-8.45(t，1H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，167.8，170.7，171.9和175.9。
(ii)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl將0.163g(0.243mmo1)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于5.5ml乙醇(99.5％)和0.7ml鹽酸(1N)，在0.17g 5％Pd/C存在下加氫4hr。過濾去除催化劑、蒸發(fā)溶劑，溶于水中，并冷凍干燥制得107mg(85％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)主要異構(gòu)體δ0.95-1.95(m，13H)，2.3-2.4(m，1H)，2.6-2.75(m，1H)，3.5-3.75(m，2H)，4.05-4.15(m，1H)，4.15-4.23(m，1H)，4.36-4.43(m，1H)，4.43-4.5(m，1H)，4.58-4.65(m，1H)，4.83-4.88(m，1H)，7.5-7.6(m，2H)，7.73-7.82(m，2H).次要異構(gòu)體可分辨信號位于δ2.2-2.3(m)，3.95-4.05(m)，5.1-5.17(m)，7.6-7.67(m)。13C-NMR(75MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.2，169.8，168.9和172.3。
實施例10HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)230mg(0.443mmol)H-(R)-Cha-Aze-Pab(Z)(見實施例8)和144mg(0.487mmol)馬來酸二芐酯于1.5ml 95％乙醇的混合物在環(huán)境溫度下攪拌5天。真空去除乙醇后，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯/甲醇(95/5)進行閃色譜處理，得到54mg(15％)產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab將49mg(0.06mmol)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于5ml 95％乙醇和1ml水，在5％Pd/C存在下加氫4.5hr。濾去催化劑，蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于2ml水和0.2ml 1M鹽酸，冷凍干燥得到32mg(93％)產(chǎn)物。
在D2O中標題化合物1H-NMR譜出現(xiàn)由二個非對映體產(chǎn)生的二組嚴重重疊信號，譜中還出現(xiàn)由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體引起的另外一些可分辨共振信號，這些信號合計約15％。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.03-2.00(m，13H)，2.32-2.53(m，1H)，2.72-2.96(m，1H)，3.06-3.28(m，2H)，4.10-4.55(m，4H)，4.62(bs，2H)，5.00-5.10(m，1H)，7.55-7.68(m，2H)，7.80-7.94 (m，2H)由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體所產(chǎn)生的可分辨信號位于δ0.65(m)，0.80(m)，4.00(m)，5.24(m)，5.35(m)。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，169.0，171.0，172.3和174.1。
實施例11HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-Cha-Aze-Pab/a×2HCl(i)BnOOC-CH2-(Rors)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a2.0g(3.8491mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(見實施例8)和1.37g馬來酸二芐酯于10ml 95％乙醇中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌4天。真空除去乙醇，將殘余物用洗脫液乙酸乙酯/甲醇(98/2)進行閃色譜處理得到1.024g(32％)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)。用洗脫液CH3CN/0.1M NH4OAc(65/35)進行RPLC分離二種非對映體。首先從柱中流出的是標題化合物非對映體組分。真空除去乙腈后，水相用乙酸乙酯萃取三次。有機相用水洗一次、干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到0.352g標題化合物的純立體異構(gòu)體。
(ii)HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/a×2HCl將350mg(0.43mmol)BnOOC-CH2-(Rors)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a(前面(i)的非對映體)溶于15ml95％乙醇和3ml水，在5％Pd/C存在下加氫4.5hr。濾去催化劑，真空蒸去溶劑，將殘余物溶于5ml水和1.0ml 1M鹽酸，冷凍干燥得到214mg(87％)純立體異構(gòu)體產(chǎn)物。1H-MR(300MHz，MeOD，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ0.85-1.93(m，13H)，2.25-2.38(m，1H)，2.60-2.75(m，1H)，2.88(dd，2H)，3.92(t，1H)，4.15-4.25(m，2H)，4.30-4.43(m，1H)，4.56(AB-系，2H)，4.76-4.86(m，1H，被溶劑信號部分掩蓋)，7.59(d，2H)，7.78(d，2H)。由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ0.70，2.95，3.82，4.00，5.08和7.83。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.9，168.8，171.7，172.3和173.8。
實施例12HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b×2HCl(i)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b按上述實施例11用于BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)的方法得到標題化合物。此非對映體在第-組分之后流出柱子，收率為0.537g。
(ii)HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b×2HCl將530mg(0.65mmol)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b溶于15ml 95％乙醇和3ml水，在5％Pd/C存在下加氫5hr。過濾除去催化劑，在真空下蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于6ml水和1.0ml 1M鹽酸，冷凍干燥后得到290mg(78％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，MeOD，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ0.86-1.90(m，13H)，2.30-2.42(m，1H)，2.60-2.75(m，1H)，2.75-2.85(m，1H)，2.95-3.05(m，1H)，3.65-3.71(m，1H)，4.00-4.10(m，1H)，4.14-4.24(m，1H)，4.36-4.62(m，3H)，4.78-4.86(m，1H被溶劑信號部分掩蓋)，7.57(d，2H)，7.75(d，2H)。由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ0.78，2.92，3.82，5.36和7.80。13C-NMR(75MHz D2O)脒碳和羰基碳δ166.8，169.0，172.0，172.4和175.2。
實施例13HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)182mg(0.35mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(見實施例8)和62.5mg(0.385mmol)丙烯酸芐酯于1.5ml 95％乙醇中的混合物在室溫下攪拌4天。真空去除溶劑，殘余物用洗脫液乙酸乙酯/甲醇(9∶1)進行閃色譜處理得到200mg(84％)標題化合物。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl將195mg(0.29mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于10ml 95％乙醇和2ml水，在5％Pd/C存在下加氫4hr。濾去催化劑，真空蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于2ml水和0.4ml 1M鹽酸，冷凍干燥得到130mg(86％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ0.98-1.27(m，2H)，1.30-1.90(m，11H)，2.27-2.35(m ，1H)，2.65-2.74(m，1H)，2.77(t，2H)，3.32(t，2H)，4.10(t，1H)，4.17-4.25(m，1H)，4.40-4.49(m，1H)，4.55(AB，2H)，4.83-4.90(m，1H)，7.58(d，2H)，7.77(d，2H).13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.0，168.9，172.4和174.6。
實施例14HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)將0.212g(0.408mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(見實施例8)、0.124g(0.89mmol)K2CO3和0.128g(0.449mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br(見起始物的制備)于6ml乙腈的混合物在50℃下攪拌2小時。蒸發(fā)溶劑后將殘余物溶于水和乙酸乙酯。水層用乙酸乙酯萃取二次，合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。產(chǎn)物在閃色譜上用梯度洗脫液乙酸乙酯/四氫呋喃(85/15、4/1、7/3)純化，得到0.190g(64％)標題化合物。1H-NMR(300MEz，CDCl3)δ0.75-2.1(m，13H)，2.43(m，1H)，2.56(d，1H)，2.79(m，1H)，3.0-3.15(m，2H；其中3.05(d，1H))，3.89-4.18(m，5H)，4.8-4.98(m，2H)，5.15(s，2H)，5.18(s，2H)，7.2-7.47(m，12H)，7.72(t，NH)，7.86(d，2H)，8.14(bs，NH)，8.31(dd，NH)，9.42(bs，NH)13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，168.7，169.22，169.83，171.7，175.5。
(ii)HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl0.19g(0.26mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)與0.075g 5％Pd/C、1.5ml 1N HCl溶液、3ml水和17ml乙醇混合后在常壓下加氫1小時。過濾催化劑、蒸發(fā)溶劑，冷凍脫水干燥、得到144mg(97％)標題化合物。1H-NMR(D2O，300MHz，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體4∶1)δ0.88-1.88(m，13H)，2.25-2.42(m，1H)，2.63-2.89(m，1H)，3.94(s，2H)，3.99(明顯雙峰，2H)，4.16(t，1H)，4.28(q，1H)，4.41(q，1H)，4.56(s，2H)，4.98(dd，1H)，7.53(d，2H)，7.77(d，2H)，由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ0.50(bq)，0.77(bq)，5.21(dd)，7.56(d)和7.81(d)。13C-NMR(D2O，75MHz)羰碳和脒碳δ166.8，166.9，168.6，172.3和173.4。由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ166.6，169.6和172.0.
實施例15H-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z)攪拌0.155ml(1.1mmol)三乙胺和405mg(1.1mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)于5ml DMF中的混合物并加入0.135ml(1.1mmol)新戊酰氯。3hr后再加入于5ml DMF中的340mg(1.1mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)并繼續(xù)攪拌過夜。用水稀釋反應混合物，用乙酸乙酯/甲苯(1∶1)萃取，有機相經(jīng)干燥(MgSO4)和真空去除溶劑，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜處理。得到309mg(49％)產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于20ml乙酸乙酯和1.246g(2mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶液中在室溫下鼓泡通入氯化氫氣體直至飽和，30分鐘后加入碳酸鈉溶液(10％)并將分離出的有機相干燥(K2CO3)。干燥劑用二氯甲烷洗滌，溶劑由合并的有機相中蒸出，得到1.11g(100％)標題化合物。
(iii)H-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl100mg(0.19mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于15ml乙醇，在38mg 10％Pd/C存在下加氫1.5hr。反應混合物經(jīng)蒸餾水稀釋、濾去催化劑、真空去除乙醇和冷凍干燥后制得標題化合物的無色粉末，無色粉末溶于鹽酸后冷凍干燥得到90mg(100％)標題化合物二鹽酸鹽，由此肽最終轉(zhuǎn)化為二鹽酸鹽。1H-NMR(300MHz，D2O)；δ1.0-2.0(m，13H)，2.0-2.3(m，3H)，2.3-2.5(m，1H)，3.6-3.7(m，1H)，3.8-3.9(m，1H)，4.3-4.5(t，1H)，4.5-4.6(m，3H)，7.4-7.6(m，3H)，7.6-7.9(m，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，170.0，174.9。
實施例16HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)268mg(0.5mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例15)、90μl(0.55mmol)溴乙酸芐酯和181mg(1.3mmol)K2CO3于2ml乙腈的混合物在40℃下聲波處理2.5hr?；旌衔镉胔yflo過濾，真空去除溶劑，得到殘余物，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯進行色譜處理得到194mg(57％)標題化合物。
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl194mg(0.28mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在77mg 10％Pd/C存在下氫化3hr。反應混合物用水稀釋并過濾除去催化劑，經(jīng)真空蒸發(fā)乙醇和冷凍干燥后得到白色殘余物，加入鹽酸并將生成溶液冷凍干燥得到115mg(68％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，D2O)；δ1.0-1.2(m，2H)，1.2-1.5(m，3H)，1.5-2.0(m，8H)，2.0-2.3(m，3H)，2.3-2.5(m，1H)，3.6-3.8(m，1H)，3.8-4.0(m，3H)，4.4-4.7(m，4H)，7.5-7.7(d，2H)，7.7-7.9(d，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.1，168.2，169.3，174.6。
實施例17HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(i)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)向0.8g(1.67mmol)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu(見起始物的制備)的3ml DMF溶液中加入0.562g(1.85mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)的3ml DMF溶液，用N-甲基嗎啉將生成溶液的pH值調(diào)節(jié)至8-9，然后使其在室溫下攪拌2天。溶液倒入水中，混合物用3×25ml乙酸乙酯萃取，有機溶液用1M KHSO4溶液、10％NaHCO3溶液、水和鹽水依次洗滌并干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)溶劑得到0.65g(60％)標題化合物的黃白色粉未。
(ii)Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于50ml EtOH的0.60g(0.92mmol)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶液在0℃下用HCl飽和，并將此溶液置于冰箱存放過夜。所得溶液蒸發(fā)至干，將殘余物溶于Na2CO3溶液，用3×25ml乙酸乙酯萃取。萃取物鹽水洗滌，蒸發(fā)得到0.4g(79％)化合物的白色膨松粉未。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.4(m，5H)，1.4-1.55(m，1H)，1.6-1.9(m，10H)，1.9-2.05(m，2H)，2.05-2.2(m，2H)，2，19(s，3H)，2.4-2.5(m，1H)，3.28(dd，1H)，3.41(q，1H)，3.62(m，1H)，4.42(m，2H)，4.61(d，1H)，5.2(s，2H)，7.2-7.45(m，7H)，7.72(t，1H)，7.79(d，2H).
(iii)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)0.40g(0.73mmol)Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)、0.17gBnOOC-CH2Br和0.20g(2當量)K2CO3(研細的)于15ml CH2CN的混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)所得混合物，加入乙酸乙酯，混合物用和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)蒸發(fā)粗產(chǎn)物(0.69g)，用閃色譜(CH2Cl2/MeOH 10/1)處理得到0.39g(77％)淺黃色高粘性油狀物。
HOOC-CH2(Me)(R)Cha-Pro-Pab向0.39g(0.56mmol)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)于30ml EtOH的溶液中加入0.1g Pd/C(10％)，在常壓下氫化。過濾和蒸發(fā)溶液，殘余糖漿狀物冷凍干燥得到0.25g(95％)白色結(jié)晶粉未狀化合物。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.85-1.1(m，2H)，1.1-1.4(m，6H)，1.5-1.85(m，9H)，1.9-2.05(m，3H)，2.05-2.15(m，1H)，2.15-2.3(m，1H)，2.57(s，3H)，3.32(d，1H)，3.55-3.75(m，2H)，3.95-4.1(m，2H)，4.35-4.5(m，3H)，7.55(d，2H)，7.72(d，2H).13C-NMR(75MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.4，171.5，174.7，175.1。
實施例18HOOC-CH2-CH2(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)149mg(0.28mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例15)和66mg(0.4mmol)丙烯酸芐酯于1.5ml乙醇的混合物在室溫下靜置36hr。真空去除溶劑并將殘余物用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜處理，制得124mg(64％)所需產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CH2-CH2(R)Cha-Pro-Pab×2HCl將124mg(0.18mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在55mg 10％Pd/C存在下氫化1hr。過濾除去催化劑，真空去除溶劑，將殘余物溶于鹽酸，冷凍干燥溶液得到87mg(79％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.0-2.0(m，13H)，2.0-2.2(m，3H)，2.2-2.4(m，1H)，2.7-2.8(t，2H)，3.2-3.3(m，1H)，3.3-3.4(m，1H)，3.5-3.7(m，1H)，3.7-3.9(m，1H)，4.3-4.6(m，4H)，7.4-7.6(m，2H)，7.7.6-7.8(m，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.0，168.3和174.6(二碳有重疊)。
實施例19HOOC-CH2-CH2(Me)(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)向274mg(0.5mmol)Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例17)于5ml EtOH(99％)的溶液中加入97.3mg(0.6mmol)丙烯酸芐酯，在室溫下攪拌反應72hr后再加入16.2mg(0.1mmol)丙烯酸芐酯并繼續(xù)攪拌24hr。蒸去溶劑，殘余物用閃色譜(CH2Cl2/MeOH(NH3飽和)，95/5)處理，得到198mg(56％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-2.0(若干m，16H)，2.14(s，3H)，2.24-2.33(m，2H)，2.38-2.46(m，1H)，2.67(t，2H)，3.32-3.40(m，2H)，3.71(m，1H)，4.35-4.44(m，2H)，4.58(m，1H)，5.03(近似s，2H)，5.20(s，2H)，7.25-7.37(m，10H)，7.43(d，2H)，7.64(t，1H(NH))，7.81(d，2H).13C-NMR(125MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.7，167.9，171.7，172.3和172.6(ii)HOOC-CH2-CH2(Me)(R)Cha-Pro-Pab×2HCl向198mg(0.27mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于10ml EtOH和1ml 1M HCl的溶液中加入60mg 5％Pd/C(含50％重量的水)并將將混合物在常壓下氫化4hr。濾去催化劑并蒸去溶劑。將殘余油狀物溶于水中，冷凍干燥得到定量收率的標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.08-1.2(m，2H)，1.2-1.42(m，4H)，1.68-1.91(m，5H)，1.93-2.08(m，2H)，2.09-2.26(m，3H)，2.49(m，1H)，2.95(m，2H)，3.03(s，3H)，3.60(近似bs，2H)，3.82(m，1H)，3.98(m，1H)，4.53(m，1H)，4.61(bs，2H)，4.64(m，1H)，7.63(d，2H)，7.97(d，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，167.8和174.5。二峰有可能重疊。
實施例20HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)0.50g(0.94mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例15)和0.28g(0.94mmol)馬來酸二芐酯于20ml EtOH的混合物在室溫下保存5天。蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑CH2Cl2/MeOH進行閃色譜處理，得到0.15g(19％)非對映體的混合物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ0.7-2.1(m，17H)，2.3-2.4(m，1H)，2.5-2.8(m，2H)，3.2-3.7(m，4H)，4.46(d，1H)，4.65(bd，1H)，4.81(d，1H)，4.9-5.1(m，3H)，5.20(s，2H)，7.1-7.4(m，15H)，7.4-7.5(m，2H)，7.6-7.8(m，3H).
(ii)HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a×2HCl溶于5ml乙醇的0.15g(0.18mmol)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)混合物在5％Pd/C和常存在下壓條件下氫化1hr制得HOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab。兩種非對映體用洗脫劑(CH3CN/0.1M NH4OAc15/85)進行RPLC處理分離，然后用HCl冷凍干燥。本非對映體首先從柱中洗出，收率為19mg(18％)。1H-NMR(500MHz，D2O，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)主要異構(gòu)體δ1.0-2.0(m，15H)，2.15(m，2H)，2.44(m，1H)，3.00(bd，1H)，3.05(bd，1H)，3.69(m，1H)，3.84(m，1H)，3.97(bs，1H)，4.5-4.7(m，3H)，7.62(d，2H)，7.87(d，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.2，168.3，173.8，174.6和178.2。
實施例21HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b×2HCl
按實施例20用于HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab的方法得到標題化合物。本非對映體在第一個非對映體之后流出，產(chǎn)率19mg(18％)。1H-NMR(500MHz，D2O，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)主要異構(gòu)體δ1.0-2.0(m，14H)，2.15-2.25(m，2H)，2.44(m，1H)，3.11(bd，1H)，3.19(bd，1H)，3.71(m，1H)，3.92(m，1H)，4.03(bs，1H)，4.5-4.7(m，3H)，7.58(d，2H)，7.84(d，2H).由次要異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ7.66(d)和7.91(d)。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.3，168.5和174.7。二碳有可能重疊。
實施例22HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)在6ml乙腈中混合0.246g(0.460mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例15)、0.140g(1.01mmol)K2CO3和0.145g(0.506mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br(見起始物的制備，混合物在50C下攪拌2hr 30分鐘。蒸發(fā)溶劑并將殘余物在水和乙酸乙酯間分配后。分離各相，水層再用乙酸乙酯萃取一次，合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到0.350g油狀物。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度洗脫劑CH2Cl2/MeOH 97/3，95/5，92.5/7.5純化得到0.227g(67％)標題化合物。13C-NMR(75MHz，CDCl3)δ25.0，26.0，26.2，26.4，26.7，32.4，34.2，34.4，40.8，40.9，42.9，46.7，50.5，58.4，60.2，67.0，67.2，127.5，127.8，128.2，128.3，128.4，128.5，128.6，128.6，134.1，135.2，137.0，142.6，164.7，168.9，169.3，170.4，172.2，175.0(ii)HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl0.089g(0.12mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)與30mg 5％Pd/C混合后溶于10ml乙酸。混合物在常壓下氫化1.5小時，經(jīng)hyflo過濾催化劑，用1ml 1N鹽酸冷凍干燥得到0.058g(82％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.9-2.2(m，16H)，2.25-2.47(m，1H)，3.55-3.7(m，1H)，3.7-4.1(m，5H)，4.42(t，1H)，4.48-4.6(m，3H)，7.51(d，2H)，7.77(d，2H)13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.8，167.1，168.2，173.6和174.6實施例23EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc(i)EtOOC-CH＝CH-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)在20℃條件下用K2CO3(141mg，1.02mmol)和BrCH2CH＝CHCOOEt(108mg，0.56mmol)的CH2CN(10ml)溶液對H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例15)(275mg，0.51mmol)處理20hr。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于EtOAc(5ml)/H2O(2ml)，分離有機層，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到397mg由狀物，油狀物用洗脫劑EtOAc/庚烷(1/4)進行閃色譜純化，得到252mg(77％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-1.05(m，2H)，1.1-1.45(m，3H)，1.3(t，3H)，1.5-1.9(m，8H)，1.95-2.05(m，1H)，2.1-2.15(m，1H)，2.45-2.55(m，zH)，3.0 and 3.15(two d，2H)，3.35-3.45(m，2H)，3.55-3.65(m，1H)，4.15(q，2H)，4.3(d，1H)，4.6-4.7 (m，2H)，5.2(s，2H)，5.85(d，1H)，6.75(dt，1H)，5.3-5.4(m，4H)，7.45(d，2H)，7.85(d，2H).13C-NMR(75.0MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ165.7，171.2和175.7(二峰有可能重疊)。
(ii)EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc將EtOOCCH＝CHCH2-(R)Cha-Por-Pab(Z)(250mg，0.38mmol)溶于乙醇并在5％PC/C存在下氫化約2hr。過濾除去催化劑、真空蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑(CH3CN/0.1M NH4OAc)進行RPLC純化，得到70mg(36％)所需產(chǎn)物。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ0.9-1.05(m，2H)，1.15-1.55(m，5H)，1.25(t，3H)，1.6-1.85(m，7H)，1.95-2.6(m，8H)，3.55-3.65(m，2H)，3.8(m，1H)，4.1(q，2H)，4.45(m and d，2H)，4.55(d，1H)，7.55和7.75(two d，4H).13C-NMR(75.0MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.3，173.2，174.6和174.9。
實施例24Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab×HCl(i)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)向156mg(0.29mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實旋例15)和59mg(0.58mmol)三乙胺于4ml二氯甲烷的溶液中在冰浴溫度加入64mg(0.32mmol)4-氯磺酰基-苯甲酸。使混合物慢慢升至室溫，24hr后用水洗滌并干燥(Na2SO4)，真空除去溶劑，殘余物在閃色譜上先用乙酸乙酯/甲醇(9∶1)后用二氯甲烷/甲醇(3∶1)作洗脫液純化，得到82mg(39％)產(chǎn)物。
(ii)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab×HCl
于EtOH中在5％Pd/C存在下將80mg(0.11mmol)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)氫化，濾去催化劑，蒸去溶劑。粗產(chǎn)物用洗脫劑(CH2CN/0.1M NH4OAc 1/4)進行RPLC純化，用HCl冷凍干燥將其轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，得到21mg(29％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CD3OD，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ0.45-1.82(m，13H)，1.90-2.30(m，4H)，2.95-4.16(若干m，總計3H)，4.35-4.68(m，3H)，7.54(d，2H)，7.74(d，1H)，7.80(d，1H)，7.90-8.00(m，2H)，8.05-8.22(m，2H)13C-NMR(75MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.4，173.4，173.9和174.2。MSm/z 584(M+＋1)實施例25H-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl(i)Boe-(R)Cha-Pic-Pab(Z)在200ml DMF中將7.11g(18.6mmol)Boc-(R)Cha-Pic-OH(見起始物的制備)、9.07g(74.2mmol)DMAP和5.26g(18.6mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)混合，在-15℃下向其中加入3.57g(18.6mmol)EDC，溫度升至20℃后過夜。在真空下除去溶劑并加入甲苯和水；有機相用水、1M KHSO4、10％Na2CO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)、真空除去溶劑，得到13.63g殘余物，殘余物在硅膠閃色譜上用乙酸乙酯/甲苯(2∶1)沖洗，得到9.5g(79％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.7-1.0(m，2H)，1.0-2.2(m，25H)，2.3-2.5(m，1H)，2.9-3.1(m，1H)，3.8(d，1H)，4.3(dd，1H)，4.4-4.6(m，2H)，5.1(s，2H)，5.1-5.3(m，2H)，7.2-7.3(m，5H)，7.35(d，2H)，7.4-7.5(m，1H)，7.75(d，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ156.8，164.6，168.2，170.0和173.4。
(ii)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)9.5g(14.7mmol)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)于100ml乙酸乙酯的溶液在室溫下鼓泡通入氯化氫氣體，直至飽和。10分鐘后加入Na2CO3溶液(10％)并分出有機相。有機相經(jīng)干燥(K2CO3)和真空去除溶劑，得到定量收率的標題化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ0.85-1.05(m，2H)，1.15-1.90(m，16H)，2.25-2.35(m，1H)，3.20-3.3 0(m，1H)，3.80-3.90(d，1H)，3.90-4.0(m，1H)，4.4-4.5(two d，2H)，4.7(brs，5H)5.15(s，2H)，5.20(m，1H)，7.25-7.45(m，7H)，7.85(d，2H).
(iii)H-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl55mg(0.1mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于5ml乙醇和0.45ml 1M鹽酸的混合物中，在33mg 10％Pd/C存在下氫化1.5hr。過濾除去催化劑并真空蒸去溶劑，殘余物用洗脫劑0.1MNH4OAC/CH3CN進行RPLC處理。將提純后的肽溶于鹽酸后冷凍干燥轉(zhuǎn)化為二鹽酸鹽形式。收率為17mg(35％)。1H-NMR(300MHz，D2O，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，3∶1混合物)δ1.0-2.0(m，18H)，2.33(d，1H)，3.4-3.5(m，1H)，3.8-3.9(m，1H)，4.4-4.8(m，3H)，5.15.5.25(m，1H)，7.5-7.7(m，2H)，7.8-8.0(m，2H).由次要異構(gòu)體產(chǎn)物的可分辨信號位于δ0.5-0.7(m)和3.0-3.1(M)。13C-NMR(75NHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.3，171.6和173.6。由次要異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ170.6和172.4。
實施例26HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)742mg(1.35mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)、230ml(1.45mmol)溴乙酸芐酯和558mg(4mmol)K2CO3于4ml乙腈的混合物在40℃下用聲波處理40分鐘。除去溶劑，殘余物用閃色譜處理得到720mg(77％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)；δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.9(m，16H)，2.1-2.4(br s，1 or 2H)，2.4(d，1H)，3.0(m，1H)，3.25(d，1H)，3.45(d，1H)，3.55-3.65(m，1H)，3.7(m，1H)，4.35(dd，1H)，4.55(dd，1H)，4.80(two d，2H)，5.2(s，2H)，5.3(m，1H)，7.2-7.4(m，12H)，7.8(d，2H).13C-NMR(125MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，167.9，170.5，173.4和175.5。
(ii)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl將509mg(0.73mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于25ml乙醇，在259mg 10％Pd/C存在下氫化4hr。過濾除去催化劑，真空蒸去溶劑，將所得殘余物溶于蒸餾水。加入鹽酸，冷凍干燥后得到281mg(79％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O，4∶1旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)主要異構(gòu)體δ1.0-2.0(m，18H)，2.25-2.40(m，1H)，3.4-3.5(m，1H)，3.8-3.95(m，3H)，4.55-4.65(two d，2H)，5.15(m，1H)，7.55-7.75(m，2H)，7.8-8.0(m.2H).13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.3，169.9，170.3和173.5.由次要異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ166.9，169.2和172.0。
實施例27HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)592mg(1.1mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)和332mg(1.1mmol)馬來酸二芐酯于1ml乙醇的混合物在室溫下保存1星期，真空除去溶劑并將所得的殘余物用洗脫劑甲醇/二氯甲烷進行色譜處理，得到275mg(30％)非對映的混合物。
(ii)HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a×2HCl將275mg BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于20ml 95％乙醇，在75mg 10％Pd/C存在下氫化18小時?；旌衔锝?jīng)hyflo過濾除去催化劑，真空蒸去溶劑。加入水，然后冷凍干燥得到166mg HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab。二種非對映體用洗脫劑(CH3CN/0.1M NH4OAc 1/4)進行RPLC分離，再由HCl冷凍干燥。標題非對映體在柱中首先洗出，收率為9mg。1H-NMR(300MHz，D2O，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ1.0-2.0(m，18H)，2.25-2.4(m，1H)，3.0-3.2(m，2H)，3.4(t，1H)，3.8(d，1H)，4.05(t，1H)，4.5-4.7(m，3H)，5.2(s，1H)，7.55(d，2H)，7.9(d，2H).由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ4.0(t)和7.7(d)。
實施例28HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/b×2HCl按實施例27所述用于HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab方法得到標題化合物。本非對映體在第一個非對映體之后流出。1H-NMR(500MHz，D2O，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ1.0-2.0(m，18H)，2.25-2.4(m，1H)，3.0-3.2(m，2H)，3.5(t，1H)，3.85(d，1H)，4.15(s，1H)，4.5-4.7(m，3H)，5.15(s，1H)，7.55(d，2H)，7.8(d，2H).由次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ4.35(s)，7.65(d)和7.9(d)。
實施例29HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)851mg(1.55mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)和269(1.71mmol)丙烯酸芐酯于5ml乙醇中的混合物在室溫下保存40hr。真空去除溶劑，將殘余物用洗脫劑二氯甲烷/甲醇進行閃色譜處理，得到812mg(74％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.9(m，16H)，2.3-2.5(m，3H)，2.6-2.8(m，2H)，3.0(m，1H)，3.5(m，1H)，3.6-3.7(m，1H)，4.3(dd，1H)，4.6(dd，1H)，4.95-5.05(two d，2H)，5.2(s，2H)，5.3(m，1H)，6.5-6.9(br s，1H)，7.0-7.1(m，1H)，7.2-7.5(m，12H)，7.75-7.85(d，2H)，9.3-9.7 (br s，1H).
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl將780mg(1.1mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于25ml乙醇，在306mg 15％Pd/C存在下氫化4hr。過濾除去催化劑，真空去除溶劑，將殘余物溶于鹽酸并將所得溶液冷凍干燥，得到481mg(78％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)δ0.95-1.1(m，2H)，1.15-1.9(m，16H)，2.2-2.3(m，1H)，2.7-2.8(t，2H)，3.2-3.3(m，3H)，3.4-3.5(m，1H)，3.75-3.85(m，1H)，4.4-4.6(m，3H)，5.15(m，1H)，7.5-7.6(m，2H)，7.8-7.9(m，2H)，8.6-8.7(m，1H).13C-NMR(125MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ170.6，175.9，179.5和183.5。
實施例30HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab×HOAc(i)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)向0.42g(0.77mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)和0.21g(1.5mmol)K2CO3于10ml CH3CN的混合物中在室溫下加入0.12g乙基草酰氯，2小時后再加入0.07g(0.5mmol)乙基草酰氯。反應混合物在室溫下攪拌過夜。真空除去溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2，并用水洗滌。以蒸發(fā)和閃色譜(先甲苯∶乙酸乙酯(1∶2)，后CH2Cl2∶甲醇)處理得到0.21g(42％)產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)將0.21g(0.32mmol)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于3ml THF并加入溶于3ml水的0.17g(4.2mmol)LiOH?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，然后倒入乙酸乙酯/水中。分離二相，有機相用KHCO3溶液萃取。水相用0.5M HCl(pH1)酸化并用CH2Cl2萃取，用Na2SO4干燥，蒸發(fā)，得到80mg產(chǎn)物。
(iii)HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab×HOAcHOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)在乙醇中在5％Pd/C存在下氫化。濾出催化劑，蒸發(fā)溶劑。殘余物用RPLC純化得到標題化合物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)；δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.75(m，15H)，1.86-1.94(m，1H)，2.13-2.2(m，1H)，3.75-3.81(m，1H)，4.32，4.44(AB，2H)，4.71-4.77(m，1H)，4.98-5.02(m，1H)，7.41(d，2H)，7.75(d，2H)，8.1-8.15(m，1H)，8.22-8.27(m，1H)，9.32(寬s)，9.90(寬s).一個質(zhì)子的信號(3.25)被溶劑信號部分掩蓋。MSm/z 486(M+＋1)實施例31HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(i)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)將0.39g(0.72mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)和0.9g(0.8mmol)丙二酸單甲酯溶于40ml CH2Cl2并加入0.16g(0.8mmol)DCC。溶液在室溫下攪拌過夜。過濾除去沉淀出的DCU，濾液用0.3M KHSO4和KHCO3溶液洗滌、干燥(Na2SO4)。蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑甲苯/乙酸乙酯(1/3)進行閃色譜處理，得到0.27g(58％)所需產(chǎn)物。
(ii)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab90mg(0.14mmol)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在5％Pd/C存在下氫化5小時。過濾除去催化劑，蒸發(fā)溶劑，得到50mg(70％)標題化合物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.85-1.1(m，2H)，1.1-1.9(m，16H)，2.35-2.45(m，1H)，3.2-3.4(m，3H)，3.7(s，3H)，3.95-4.05(m，1H)，4.4-4.55(m，3H)，5.15-5.25(m，1H)，7.4-7.55(m，2H)，7.7-7.85(m，2H).13C NMR(75MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.2，168.7，170.0，172.4和174.6。MSm/z 514(M+＋1)(iii)HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab向0.14g(0.27mmol)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab于5ml甲醇的溶液中，在室溫下加入2ml 0.5M NaOH，攪拌5小時后，加入水并在真空下去除甲醇。冷凍干燥水相。用無水乙醇將可溶性物質(zhì)從非溶性無機鹽中萃取出來，蒸去乙醇后殘余固體懸浮于水中，過濾分離得到70mg(52％)標題化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.8-1.0(m，2H)，1.0-1.9(m，16H)，2.15-2.30(m，1H)，2.58，2.86(AB，2H)，3.8-3.95(m，1H)，4.2-4.5(m，2H)，4.7-4.85(m，1H)，4.95-5.05(m，1H)，7.40(d，2H)，7.77(d，2H)，8.2-8.3(m，1H)，9.3-9.4(m，1H)，9.90(寬s，3H).一種質(zhì)子的信號(3.21)被溶劑信號部分掩蓋。13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)脒碳和羰基碳δ165.8，168.8，169.9，172.2和172.4。MSm/z 500(M+＋1)實施例32MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab見上述實施例31(ii)。
實施例33H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(i)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)455mg(0.83mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)與80mg(0.86mmol)氯乙酰胺于3ml乙腈中在395mg(2.86mmol)碳酸鉀存在下，在40℃下用聲波處理進行的烷基化反應非常緩慢。即使加入230mg(2.6mmol)溴化鋰也未見反應速度有所增加。然而此反應在加入碘化鋰并加熱/聲波處理條件下進行時經(jīng)TLC分析表明能生成少量產(chǎn)物。經(jīng)加入水、用乙酸乙酯/甲苯萃取、干燥有機相(MgSO4)、真空除去溶劑得到殘余物，用洗脫劑MeOH/CH2Cl2進行閃色譜處理，得到118mg(24％)所需產(chǎn)物。
(ii)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl118mg(0.2mmol)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于10ml 95％乙醇，在143mg 10％Pd/C存在下氫化2hr。混合物用蒸餾水和鹽酸稀釋并用hyflo過濾。冷凍干燥得到26mg(24％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.9-1.1(m，2H)，1.1-1.9(m，16H)，2.3(d，1H)，3.4(t，1H)，3.6(AB-系2M)，3.8(d，2H)，4.35(t，1H)，4.5(s，2H)，5.2(s，1H)，7.55(d，2H)，7.8(d，2H).
實施例34Boc-(R)Cha-Pic-Pab10mg(0.015mmol)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)溶于5ml乙醇，在38mg 10％Pd/C存在下氫化4hr。過濾除去催化劑，真空蒸去溶劑，然后將殘余物溶于水，冷凍干燥得到7.6mg(95％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.9-1.1(m，2H)，1.1-1.9(m，16H)，2.4(d，1H)，3.25(t，1H)，4.0(d，1H)，4.5(AB-system，2H)，4.5-4.6(m，1H)，5.25(s，1H)，7.45(d，2H)，7.75(d，2H).
實施例35Ac-(R)Cha-Pic-Pab×HCl(i)Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)向0.37g(0.68mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)和0.19g(1.35mmol)K2CO3于10ml CH3CN的混合物中在室溫下加入0.06g(0.8mmol)乙酰氯。反應混合物在室溫繼續(xù)攪拌30分鐘后真空去除溶劑。將殘余物溶于CH2Cl2，用水洗滌蒸發(fā)，并在閃色譜上用梯度沖洗液CH2Cl2/MeOH(99.9/0.1，99.8/0.2，99.6/0.4，99.2/0.8和98.4/1.6)處理得到0.24g(60％)產(chǎn)物。
(ii)Ac-(R)Cha-Pic-Pab×HCl常壓下將Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)在5％Pd/C上氫化，濾去催化劑并蒸去溶劑，粗產(chǎn)物在RPLC上用CH3CN/0.1M NH4oAc(35/65)沖洗劑處理純化。去除溶劑和地量NH4oAc，用1M HCl冷凍干燥，得到標題化合物。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.85-1.1(m，2H)，1.15-2.0(m，19H)，2.35-2.47(m，1H)，3.2-3.33(m，1H)，3.95-4.05(m，1H)，4.46，4.57(ABX，2H)，5.16-5.22(m，1H)，7.51(d，2H)，7.76(d，2H)，8.23(m，1H).一種質(zhì)子的信號被溶劑信號全部掩蓋。13C-NMR(75MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168.3，172.5，173.8，175.1。MSm/z 456(M+＋1)實施例36Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab×HCl(i)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)對209mg(0.382mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)和0.11ml(0.763mmol)三乙胺于5ml二氯甲烷的溶液進行攪拌，在0℃時加入于0.5ml二氯甲烷的48mg(0.42mmol)甲磺酰氯。反應混合物達到室溫過夜。經(jīng)水洗、干燥(Na2SO4)和真空蒸去溶劑，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯/甲醇(95/5)進行閃色譜處理，得到159mg(67％)產(chǎn)物。
(ii)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab×HCl將150mg(0.24mmol)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于5ml 95％乙醇和1ml水中，在5％Pd/C存在下氫化4hr。過濾除去催化劑，加入0.2ml 1M鹽酸，并真空蒸去溶劑，將殘余物溶于2ml水，冷凍干燥得到116mg(86％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ0.90-1.10(m，2H)，1.15-1.85(m，15H)，1.90(bd，1H)，2.30(bd，1H)，2.85(s，3H)，3.35(dt，1H)，3.90(bd，1H)，4.45(AB-系，2H)4.50-4.55(m，1H)，5.13(dd，1H)，7.50(d，2H)，7.75(d，2H).13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.8，173.0和174.6。
實施例37H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)攪拌1.0g(2.6mmol)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OH(見起始物的制備)、1.28g(10.5mmol)DMAP和0.74g(2.6mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)于35ml DMF中的溶液，在-18℃下加入EDC。反應混合物溫度達到室溫過夜，然后真空除去溶劑。將殘余物溶于CH2Cl2，有機相用0.3M KHSO4、KHCO3溶液和鹽水依次洗滌。經(jīng)干燥(Na2SO4)和除去溶劑，殘余物用洗脫劑庚烷/含4％甲醇的乙酸乙酯進行閃色譜處理，得到0.74g(44％)所需產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)將0.68g(1.05mmol)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)溶于用HCl(氣)飽和的乙酸乙酯。在室溫下攪拌溶液1hr。加入水并用K2CO3堿化混合物。水相用乙酸乙酯萃取。然后用水洗滌并干燥(Na2SO4)有機相，蒸發(fā)得到0.5g(87％)所需產(chǎn)物。
(iii)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl將65mg(0.19mmol)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)溶于7ml乙醇，并在5％Pd/C存在下氫化4小時。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑、用1M HCl和水冷凍干燥后得到41mg(71％)產(chǎn)物。1H NMR(300MHz，D2O，二個非對映體4/5，以及旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)；δ0.8-2.16(m，)，2.5-2.77(m，3H)，3.13-3.43(m，3H)，3.68-3.94(m，1H)，4.18-4.41(m，1H)，4.41-4.52(m，3H)，7.46-7.57(m，2H)，7.72-7.83(m，2H).
實施例38HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)將0.21g(0.38mmol)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)(見實施例37)溶于2ml乙醇，加入0.68g(0.42mmol)丙烯酸芐酯后使溶液攪拌5天。經(jīng)蒸發(fā)和用洗脫劑CH2Cl2/MeOH(95/5)進行閃色譜處理，得到0.19g(70％)所需產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl將170mg(0.24mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在5％Pd/C存在下氫化4小時。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑、用1M HCl和水冷凍干燥，得到103mg(77％)產(chǎn)物。1H NMR(300MHz，D2O，二個非對映體4/5和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)；δ0.92-2.03(m，H)，2.51-2.78(m，1H)，3.21-3.52(m，1H)，3.88-4.01(m，1H)，4.07-4.3(m，2H)，4.4-4.71(m，2H)，7.59(d，2H)，7.86(d，2H)13C-NMR(300.13MHz，D2O，二個非對映體4/5和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)脒碳和羰基碳δ167.0，168.0，168.1，175.9，176.0，176.3，176.4和178.2。
實施例39HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)在-12℃下將1.77g(9.2mmol)EDC加到3.41g(9.2mmol)Boc-(R)Cha-Val-OH(見起始物的制備)，2.61g(9.2mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)和4.5g(36.8mmol)DMAP于50ml DMF的混合物中。使反應混合物達到室溫過夜，用水稀釋，用甲苯、乙醚和乙酸乙酯萃取，合并有機萃取物，干燥(MgSO4)、真空去除溶劑，用洗脫劑CH2Cl2/MeOH進行閃色譜處理，得到2.77g(47％)所需產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Cha-Val-Pab(Z)2.77g(4.4mmol)Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)于75ml乙酸乙酯的溶液中鼓泡通入氯化氫氣體，15分鐘后加入碳酸鈉溶液至pH10，水相用乙酸乙酯萃取。干燥(碳酸鉀)，真空除去溶劑，得到1.8g(77％)H-(R)Cha-Val-Pab(Z)。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)在40℃下用聲波處理326mg(0.61mmol)H-(R)Cha-Val-Pab(Z)、105ml(0.67mmol)溴乙酸芐酯和252mg(1.83mmol)碳酸鉀于2ml乙腈中的混合物2.5hr。再加入乙腈使產(chǎn)物溶解，過濾混合物，真空除去溶劑。殘余物用洗脫劑甲醇/二氯甲烷進行閃色譜純化，產(chǎn)物最后用乙酸乙酯結(jié)晶得到124mg(30％)無色結(jié)晶。
(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2HCl將124mg(0.18mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)溶于20ml乙醇，在25mg 10％Pd/C存在下氫化2小時。再加入10mlTHF繼續(xù)氫化2小時(50℃下)。用hyflo過濾反應混合物，濾餅用稀鹽酸洗滌。合并濾液，除去有機溶劑，將剩余的溶液冷凍干燥，得到55mg(50％)所需化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ0.75-1.4(m，12H)，1.5-1.9(m，7H)，2.0-2.15(bs，1H)，3.45(AB-系，2H)，4.1(m，2H)，4.5(m，2H)，7.5(s，2H)，7.7(s，2H)，8.9(s，1H).
實施例40HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2HCl(i)H-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)以用于Boc-(R)Cha-Pic-OMe(見起始物的制備)的新戊酰偶聯(lián)將Boc-(R)Cha-Val-OH與H-Pab(Z)偶聯(lián)制備標題化合物。由纈氨酸的差向立體異構(gòu)作用而得到Boc-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)，然后以用于Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)(見實施例39)中的方法去除Boc保護基團制得標題化合物。
(ii)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)1.007g(1.9mmol)H-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)和308mg(1.9mmol)丙烯酸芐酯于3ml乙醇的溶液在40℃下放置過夜。真空除去溶劑，殘余物用洗脫劑甲醇/二氯甲烷(10/90)進行閃色譜純化，得到1.086g(82％)標題化合物。
(iii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2HCl1.086g(1.6mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)溶于25ml THF和14ml 0.5M鹽酸，在223mg 10％Pd/C存在下氫化2小時。用硅藻土過濾除去催化劑并在真空下除去THF，然后將剩余水溶液冷凍干燥得到殘余物，其中約300mg的殘余物用洗脫劑25％乙腈的0.1M NH4OAc緩沖劑進行HPLC處理，分離出二個主要餾分，其中第二個餾分中含有標題化合物。最后分離出67mg標題化合物，為二鹽酸鹽。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ1.0-1.15(m，12H)，1.2-1.4(m，7H)，1.65-1.9(m，7H)，2.15-2.25(m，1H)，2.85(t，2H)，3.15-3.2(m，1H)，3.3-3.35(m，1H)，4.15-4.2(m，1H)，4.25(d，1H)，4.55-4.65(AB-體系，2H)，7.65(d，2H)，7.85(d，2H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.0，169.8，173.96和174.04。
實施例41H-(R)Hoc-Aze-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)以用于Boc-(R)-Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)的方法進行制備，其中Boc-(R)Cha-Pic-OH用Boc-(R)Hoc-Aze-OH(見起始物的制備)代替。粗產(chǎn)物經(jīng)閃色譜(甲苯/EtOAc 1/6)處理得到0.32g(37％)所需產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)按實施例25用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)的方法對Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)進行處理，得到0.23g(88％)標題化合物。
(iii)H-(R)Hoc-Aze-Pab×2HCl將20mg(0.037mmol)H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)溶于3ml乙醇，在5％Pd/C存在下常壓氫化4hr。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑，1M HCl冷凍干燥得到11mg產(chǎn)物。1H NMR(300.13MHz，D2O，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體3∶1的混合物)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ0.9-2.1(m，15H)，2.4-2.6(m，1H)，2.7-3.0(m，1H)，4.1-4.3(m，1H)，4.35-4.56(m，1H)，4.65(s，2H)，5.0-5.11(m，1H)，7.62(d，2H)，7.9(d，2H)。一種質(zhì)子的信號被H-O-D-信號全部遮蔽。
實施例42HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab×2TFA(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)在室溫下將0.067g(0.41mmol)丙烯酸芐酯加到于2ml乙醇(95％)的0.2g(0.37mmol)H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)(見實施例41)溶液中，將反應在室溫下進行5天，真空除去溶劑，殘余物用閃色譜(CH2Cl2∶MeOH，96/4)純化得到0.16g(62％)所需產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab×2TFA將160mg(0.23mmol)BnO6C-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在5％Pd/C存在下常壓氫化3小時。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑，用水TFA冷凍干燥得到120mg(87％)產(chǎn)物。1H NMR(300.13MHz，D2O，二種旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體3∶1)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ0.9-1.9(m，13H)，1.94-2.16(m，2H)，2.38-2.55(m，1H)，2.7-2.97(m，3H)，3.2-3.44(m，2H)，4.16(m，1H)，4.35-4.58(m，2H)，4.65(s，2H)，5.0-5.12(m，1H)，7.63(d，2H)，7.87(d，2H)13C NMR(300.13MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.3，168.7，172.5和176.6。
實施例43HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)用實施例25用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)的方法由Boc-(R)Hoc-Pro-OH(見起始物的制備)制得。用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜純化，得到標題化合物0.886g(58％)。1H-NMR.(300MHz，CDCl3)；δ0.7-0.95(m，2H)，0.95-2.1(m，27H(其中1.2(s，9H))，2.1-2.4(m，1H)，3.3-3.5(m，1H)，3.65-3.95(m，1H)，4.0-4.2(m，1H)，4.2-4.45(m，2R)，4.45-4.6(d，1H)，5.15(近似bs，2H)，5.2-5.3(d，1H)，7.1-7.4(m，7H)，7.65(m，1H)，7.7-7.8(d，2H)，9.4(bs，1H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ156.3，164.6，168.1，171.4和172.4。
(ii)H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)在0℃下將用氯化氫飽和的40ml乙酸乙酯加到0.82g(1.266mmol)Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)中。令溫度自行升至室溫。1.5hr后反應沒有完全，因而在反應混合物中再鼓泡通入氯化氫5分鐘。蒸去溶劑，加入乙酸乙酯和飽和碳酸鈉溶液，分成二相。有機相用鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)并真空蒸發(fā)溶劑，得到幾乎定量收率的標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)；δ0.75-0.95(m，2H)，0.95-2.4(m，17H)，3.3-3.55(m，2H)，3.55-3.7(m，1H)，4.25-4.45(m，2H)，4.5-4.6(m，1H)，5.15(s，2H)，7.15-7.35(m，5H)，7.35-7.45(m，2H)，7.6-7.7(m，1H)，7.7-7.85(d，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，167.8，171.4和175.3。
(iii)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)向于1.5ml EtOH(99％)中的0.15g(0.5mmol)丙烯酸芐酯加入0.273g(0.498mmol)H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)，混合物在室溫下攪拌10天。真空除去溶劑，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜處理，得到0.103g(25％)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)；δ0.75-2.05(m，18H)，2.3-2.45(m，1H)，2.45-2.8(m，3H)，3.15-3.45(m，3H)，3.5-3.65(m，1H)，4.3-4.5(m，2H)，4.55-4.7(m，1H)，4.8(s，1H)，4.9-5.1(m，3H)，5.2(s，2H)，7.1-7.2(m，1H)，7.2-7.4(m，13H)，7.4-7.45(d，2H)，7.6-7.8(m，3H).
(iv)HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab×2HCl將103mg(0.122mmol)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)溶于4ml乙醇(99.5％)和0.3ml氯仿中，在111mg 5％Pd/C存在下氫化2hr。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑、然后溶于水，冷凍干燥，表明混合物氫化不完全。于是在乙醇、1NHCl和5％Pd/C存在下繼續(xù)氫化5小時。
過濾除去催化劑并蒸去溶劑，溶于水中，冷凍干燥，得到標題化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD，二個非對映體的混合物)；δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.4(m，6H)，1.6-1.8(m，5H)，1.9-2.15(m，5H)2.25-2.35(m，1H)，2.9-3.2(m，2H)，3.5-3.65(m，1H)，3.7-3.9(2m，總計1H)，4.15-4.4(2m，總計1H)，4.4-4.6(m，4H)，7.5-7.6(m，2H)，7.7-7.85(m，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ167.9，168.2，168.3，172.8，173.6，174.3和174.4。二個非對映體的信號有部分重疊。
實施例44HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)以Boc-(R)Hoc-Pic-OH(見起始物的制備)和H-Pab(Z)(見起始物的制備)為原料，按所述用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)的方法進行制備。用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜處理，得到1.3g(78％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.75-0.95(m，2H)，0.95-2.0(m，31H(其中1.3(s，9H))，2.4-2.5(m，1H)，3.0-3.1(m，1H)，3.8(m，1H)，4.2-4.45(m，2H)，4.45-4.55(m，2H)，5.15(近似bs，3H)，5.25-5.3(m，1H)，7.0(bs，1H)，7.15-7.5(m，7H)，7.7-7.85(d，2H)，9.45(bs，1H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ156.6，164.7，168.1，170.0和173.0。
(ii)H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)用氯化氫飽和的100ml乙酸乙酯在0℃下加到1.3g(1.96mmol)Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)中。使反應物溫度自行升至室溫。40分鐘后蒸去溶劑并加入乙酸乙酯和飽和碳酸鈉溶液，分成二相。有機相用鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)，真空蒸發(fā)溶劑，得到0.85g(77.5％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.75-0.95(m，2H)，1.05-2.3(m，25H)，3.0-3.15(m，1H)，3.6-3.75(m，2H)，4.25-4.4(m，2H)，5.15(近似bs，3H)，7.05-7.2(d，2H)，7.2-7.35(m，4H)，7.35-7.4(d，1H)，7.6-7.8(d，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，167.9，170.8和175.7。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)向0.4g(0.712mmol)H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)和0.217g(1.57mmol)K2CO3于7ml乙腈的混合物中加入0.171g(0.748mmol)溴乙酸芐酯。在油浴中加熱混合物至60℃反應1hr。去除溶劑并加入乙酸乙酯和水，二相分離。有機相用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)。真空蒸發(fā)得到0.626g殘余物，殘余物用乙酸乙酯洗脫劑進行閃色譜處理后得到2種產(chǎn)物。從柱中流出的第一種化合物是(BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)(0.28g)，第二種化合物是標題化合物(0.27g)。BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.7-0.95(m，2H)，1.0-1.75(m，18H)，2.3-2.5(m，1 or 2H)，2.9-3.05(m，1H)，3.2-3.3(m，1H)，3.35-3.5(m，2H)，3.6-3.7(m，1H)，4.35，4.55(ABX-體系，2H)，4.75(s，2H)，5.15(近似s，3H)，5.25-5.3(m，1H)，7.1-7.45(m，12H)，7.7-7.8(d，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.6，167.9，170.5，173.4和175.0。
(iv)HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl將259mg(0.365mmol)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)溶于7.8ml乙醇(99.5％)和1.2ml鹽酸(1N)，在280mg 5％Pd/C存在下氫化4hr。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑，溶于水中并冷凍干燥，得到170mg(83％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.4-1.85(m，20H)，1.85-2.2(m，1H)，2.9-3.2(m，1H)，3.4-3.9(m，3H)，4.05-4.3(m，2H)，4.3-5.05(m，2H)，7.1-7.4(m，-2H)，7.4-7.7(m，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ167.8，168.6，169.6和172.3。
實施例45(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl(i)(BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
標題化合物可從上面實施例44中所述H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)的烷基化過程中獲得。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.7-0.95(m，2H)，0.95-1.95(m，18H)，2.35-2.5(m，1H)，2.9-3.05(m，1H)，3.5-3.85(m，6H)，4.35-4.55(m，2H)，4.9(2s，4H)，5.2(s，2H)，5.25-5.35(m，1H)，7.1-7.45(m，16H)，7.5-7.65(m，1H)，7.7-7.85(d，2H).
13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.7，167.9，170.5，172.0和172.4。
(ii)(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl將153mg(0.178mmol)(BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)溶于4.5ml乙醇(99.5％)和0.5ml鹽酸(1N)，在150mg 5％Pd/C存在下氫化3.5hr。過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑，然后溶于水中，冷凍干燥，得到109mg(99％)(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab二鹽酸鹽。此粗產(chǎn)物(純度80％)在RPLC上用CH3CN/0.1M NH4OAc，1∶4洗脫劑純化。除去溶劑和過量NH4OAc，再用1M HCl中冷凍干燥，得到標題化合物。
1H-NMR(500MHz，D2O，二個旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)主要異構(gòu)體δ0.95-2.15(m，20H)，2.25-2.35(m，1H)，3.45-3.55(m，1H)，3.95-4.25(m，5H)，4.6-4.65(m，2H)，4.92-5.01(m，1H)5.15-5.20(m，1H)，7.58-7.63(d，2H)，7.84-7.89(d，2H).
由次要異構(gòu)體產(chǎn)生的可分辨信號位于δ0.7-0.85(m)，2.35-3.45(m)，3.05-3.15(m)，4.47-4.55(m)，4.55-4.6(m)，4.65-4.7(m)，7.63-7.67(d)，7.89-7.95(d).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ168.20，169.70，170.20和172.71。
實施例46HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)向570mg(1.5mmol)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH(見起始物的制備)、425mg(1.5mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)和733mg(6mmol)DMAP于25ml CH3CN/DMF(1.5/1)的溶液中加入310mg(1.62mmol)EDC，混合物在室溫下攪拌23hr。蒸去大部分溶劑，殘余物中加入50ml水。水相用1×75和2×50mlEtOAc萃取。合并有機相，用1×20＋1×10ml 1M KHSO4、1×15ml NaHCO3(水溶液)、3×15ml水、1×15ml鹽水依次洗滌。干燥(MgSO4)。過濾和蒸發(fā)溶劑，得到670mg油狀物，用洗脫劑EtOAc進行閃色譜精制，最后得到529mg(55％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.26(s，9H)，1.53-1.88(m，3H)，2.1-2.31(m，3H)，2.52(q，1H)，3.58-3.77(m，4H)，4.31(d，1H)，4.35 and 4.47(ABX-系，2H)，4.65(dd，1H)，5.19(s，2H)，7.1-7.37(m，10H)，7.42(d，2H)，7.81(d，2H)，8.0(t，1H(NH)).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ154.6，164.6，168.1，171.1和171.3。
(ii)H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)將529mg(0.81mmol)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)溶于15ml EtOAc/HCl(氣，飽和)，在室溫下攪拌3hr。蒸去溶劑，將殘余物溶于70ml CH2Cl2。有機相用1×10ml2M NaOH、1×10ml水和1×10ml鹽水依次洗滌，干燥(MgSO4)。過濾、蒸發(fā)溶劑，得到403mg(90％)標題化合物，為白色粉末。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.44-1.57(m，1H)，1.62-1.86(m，2H)，1.96-2.35(m，3H)，2.45(q，1H)，3.05-3.35(m，4H)，3.83(bd，1H)，4.25-4.45(m，2H)，4.53(m，1H)，5.19(s，2H)，7.16-7.37(m，10H)，7.42(d，2H)，7.66(t，1H，(NH))，7.77(d，2H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.4，167.9，171.1和173.0。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)200mg(0.36mmol)H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)、105mg(0.46mmol)Br-CH2-COOBn和125mg(0.90mmol)K2CO3于10ml CH3CN的混合物加熱至50℃反應1hr 30min。蒸去溶劑并將殘余物溶于70ml EtOAc。有機相用10ml水洗滌、干燥(MgSO4)。過濾和蒸發(fā)溶劑后得到260mg油狀物。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度沖洗液CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和)(95/5然后9/1)提純，得到182mg(72％)標題化合物，為白色固體。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.43-1.82(m，3H)，1.96-2.13(m，1H)，2.14-2.22(m，1H)，2.26-2.43(m，2H)，3.02-3.14(m，2H)，3.24-3.51(m，4H)，3.83(d，1H)，4.29-4.46(ABX-系中心位于4.37，2H)，4.58(dd，1H)，4.97-5.1(AB-系中心位于at 5.03，2H)，5.19(s，2H)，7.16-7.38(m，15H)，7.43(d，2H)，7.5-7.8(m，3H，-NH).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，167.9，171.15，171.2和172.7。
(iv)HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl0.18g(0.26mmol)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)與0.075g 5％Pd/C、1.0ml 1N HCl溶液、1ml水和10ml乙醇混合，在常壓下氫化1小時。用hyflo過濾催化劑、蒸去溶劑，用水冷凍干燥二次，得到129mg粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物在RPLC上用梯度洗脫液0.1M NH4OAc/CH3CN(先4/1后3/1)分離精制，蒸發(fā)，用水和1N HCl溶液冷凍干燥得到70mg(50％)純化合物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.42-1.60(m，1H)，1.65-1.83(m，1H)，，1.83-1.98(m，1H)，2.03-2.20(m，2H)，2.63(t，2H)，3.28-3.40(m，1H)，3.55-3.78(m，2H)，3.81-3.96(AB-體系中心在δ3.88，2H)，4.06-4.19(m，1H)，4.37-4.61(AB-體系中心在δ4.49，2H)，4.48(dd，1H)，4.70(d，1H)，7.35-7.58(m，7H)，7.74(d，2H)13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ167.02，167.2，169.3和174.4。
實施例47HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)向190mg(0.34mmol)H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)(見實施例46)于7ml EtOH(99％)的溶液中加入114mg(0.70mmol)丙烯酸芐酯，反應混合物在室溫下攪拌24hr。蒸發(fā)溶劑，在閃色譜上用CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和)梯度沖洗劑(先95/5后9/1)分離得到202mg(83％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.5-1.71(m，2H)，1.74-1.9(m，1H)，1.9-2.05(m，1H)，2.2-2.64(m，5H)，2.69-2.82(m，2H)，2.84-2.96(m，1H)，3.18-3.48(m，4H)，4.28-4.44(m，2H)，4.61(m，1H)，4.4B-5.08(AB-體系中心在5.03，2H)，5.19(s，2H)，7.15-7.37(m，15H)，7.44(d，2H)，7.75-7.85(m，3H，-NH).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.6，168.0，171.2，172.5和172.9。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl0.20g(0.28mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)與0.075g 5％Pd/C、1.0ml 1NHCl溶液、1ml水和10ml乙醇混合后在常壓下氫化1小時。反應產(chǎn)物經(jīng)hyflo濾去催化劑、蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥二次，得到125mg(79％)標題化合物。H-NMR(300MHz，D2O)δ1.44(m，1H)，1.65-1.9(m，2H)，2.0-2.2(m，2H)，2.62(q，2H)，2.83(t，2H)，3.27-3.4(m，1H)，3.4-3.8(m，4H)，4.0-4.15(m，1H)，4.35-4.6(m，3H)，4.68(d，1H)，7.35-7.6(m，7H)，7.77(d，2H)13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ166.2，167.1，174.1和174.2。
實施例48HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)用Boc-(R)Tic-Pro-OH(見起始物的制備)代替Boc-(R)Cha-Pic-OH，按所述用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(見實施例25)的方法制備，用洗脫劑庚烷/EtOAc(4/1)進行閃色譜處理，得到425mg(37％)標題化合物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.35(s，9H)，1.95-2.15(m，3H)，2.4(m，1H)，2.8(m，1H)，3.3(m，1H)，3.55(m，2H)，4.25-4.4(two m，2H)，4.55-4.7(二m，2H)，7.15-7.5(m，10H)，7.85(d，2H).13C-NMR(75.0MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.6，171.5和171.6(二峰有可能重疊)。
(ii)H-(R)Tic-Pro-Pab(Z)將Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)(379mg，0.59mmol)溶于用HCl(氣)飽和的EtOAc，在室溫下攪拌。蒸去溶劑，得到251mg(79％)標題化合物，為白色粉末。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.65-2.15(二m，7H)，2.45(m，1H)，2.75(m，1H)，2.9(m，1H)，3.0(m，1H)，3.25(m，1H)，3.55(m，1H)，3.85(m，1H)，4.35-4.55(m，2H)，4.75(d，1H)，4.9(s，1H)，5.25(s，2H)，6.8-7.45(幾個m，8H)，7.5 and 7.85(二d，4H).13C-NMR(75.0MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164.5，171.3和172.7(二峰有可能重疊)。
(iii)BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)在20℃于EtOH(1.3ml)中用丙烯酸芐酯(63mg，0.39mmol)處理H-(R)Tic-Pro-Pab(Z)(140mg，0.26mmol)48hr。蒸發(fā)溶劑，用沖洗劑(50％ EtOAc/庚烷及隨后的10％MeOH/EtOAc)進行閃色譜處理得到133mg(73％)所需產(chǎn)物，為白色固體物質(zhì)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.75-2.0(二m，4H)，2.25(m，1H)，1.4-1.65(m，3H)，2.7-2.95(二m，4H)，3.05-3.2(m，2H)，3.9(m，1H)，4.45(m，2H)，4.65(m，1H)，5.1(二d，2H)，5.25(s，2H)，6.85-7.45(幾個m，12H)，7.57.9(二d，4H).13C-NMR(75.0MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ171.5，171.9和172.1(二峰有可能重疊)。
(iv)HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab×2HCl用EtOH/HCl作溶劑，將BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)(125mg，0.17mmol)在5％Pd/C上氫化。濾去催化劑，冷凍干燥，得到73mg(77％)標題化合物，為白色粉末。1H NMR(500MHz，D2O)δ2.1-2.35(二m，3H)，2.6(m，1H)，2.95-3.1(m，2H)，3.25-3.5(二m，2H)，3.65(m，3H)，4.65(s，2H)，4.75(m，1H)，5.85(s，1H)，7.15-7.6(三m，4H)，7.6和d7.85(二d，4H).13C-NMR(75.0MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.9，167.1和174.3(二峰有可能重疊)。
實施例49HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2向0.623g(1.83mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-OH(見起始物的制備)、0.816g(1.92mmol)H-Pig(Z)2(見起始物的制備)和0.89g(7.3mmol)DMAP于10ml二氯甲烷的混合物中加入0.368g(1.92mmol)EDC并攪拌過夜。混合物用0.3N KHSO4稀釋和洗滌后用鹽水洗滌一次。有機層經(jīng)干燥(Na2SO4)，過濾和蒸發(fā)，得到1.4g粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物在閃色譜上用乙酸乙酯洗脫液分離純化，得到0.3g(22％)純產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)20.3g(0.4mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2與10ml二氯甲烷和2.5ml三氟乙酸混合后，攪拌1.5小時。蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于二氯甲烷并用0.2M NaOH溶液洗滌二次。合并水層，用二氯甲烷再萃取一次。合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到0.24g(93％)產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3，339K)δ0.9-1.9(m，15H)，1.94(bd，1H)，2.37-2.52(m，1H)，2.65-2.8(m，1H)，2.9-3.08(m，3H)，3.20(t，2H)，4.05-4.28(m，4H)，4.86(dd，1H)，5.16(s，4H)，7.2-7.42(m，10H)，7.98(bs，NH).
(iii)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)20.231g(0.36mmol)溶于2ml乙醇并加入61μl(0.40mmol)丙烯酸芐酯，反應混合物在室溫下攪拌5天。蒸發(fā)混合物，粗產(chǎn)物在閃色譜上用CH2Cl2/MeOH(95/5，90/10)梯度洗脫液分離精制，得到0.218g(75％)純產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3，335K)δ0.93(bq，1H)，1.02-1.85(m，14H)，1.94(bd，1H)，2.33-2.5(m，3H)，2.58-2.77(m，2H)，2.79-3.02(m，4H)，3.17(t，2H)，4.0-4.25(m，4H)，4.86(dd，1H)，5.11(s，2H)，5.12(s，4H)，7.2-7.4(m，15H)，8.03(bs，NH)，10.35(bs，NH)(iv)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig×2HCl0.218g(0.27mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2與0.10g 5％Pd/C、1ml 1M HCl溶液、1ml水和10ml乙醇混合，在常壓下氫化1小時。hyflo過濾除去催化劑、蒸發(fā)溶劑、用水冷凍干燥二次后得到134mg(95％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.0-1.4(m，7H)，1.55-2.05(m，9H)，2.22-2.34(m，1H)，2.61-2.76(m，1H)，2.88(t，2H)，3.08(bt，2H)，3.19(d，2H)，3.34(m，2H)，3.83(bd，2H)，3.95(d，1H)，4.29-4.49(m，2H)，4.90(dd，1H)13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ156.4，167.6，172.1和174.7。
實施例50HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2向1g(2.82mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(見起始物的制備)、1.197g(2.82mmol)H-Pig(Z)2(見起始物的制備)和1.38g(11.28mmol)DMAP在乙腈的混合物中在-15℃下加入0.568g(2.96mmol)EDC。反應混合物溫度升至室溫過夜。真空蒸去溶，加入二氯甲烷和1MKHSO4，二相分離，有機相用飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)溶劑，留下2.033g殘余物，用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜處理得到二種產(chǎn)物。首先流出柱子的是標題化合物720mg(34％)；隨后流出的是失去一個Z保護基形成的Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)775mg(44％)。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子內(nèi)的交換作用使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。哌啶環(huán)中的2-和6-CH2基所產(chǎn)生的3.5至4.5ppm范圍內(nèi)的特別明顯。δ0.85-2.1(m，19H)，2.3-2.45(m，1H)，2.8-3.2(m，4H)，3.45-3.55(m，1H)，3.55-3.65(m，次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，3.8-3.93(m，1H)，3.97-4.1(m，1H)，4.52-4.62(d，1H)，5.1(形似bs，5H)，7.12-7.41(m，10H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ155.2，156.3，171.0和172.1。
(ii)H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2將720mg(0.946mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2溶于35ml TFA/CH2Cl2，1/4并攪拌30分鐘。真空除去溶劑并加入乙酸乙酯和2M NaOH。有機層用水和鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)，真空蒸發(fā)溶劑，得到定量收率的標題化合物。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子內(nèi)的交換作用使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。哌啶環(huán)中的2-和6-CH2基所產(chǎn)生的3.5至4.5ppm范圍內(nèi)的特別明顯。δ0.8-2.15(m，19H)，2.22-2.4(m，1H)，2.75-2.98(m，2H)，2.98-3.18(m，2H)，3.18-3.35(m，1H)，3.35-3.5(重峰.，1H)，3.5-3.7(m，1H)，4.42-4.58(d，1H)，5.1(s，4H)，7.1-7.5(m，10H).13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ154.96，171.31，174.82。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2向0.64g(0.999mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2和0.513g(2.996mmol)K2CO3于6.4ml乙腈的混合物中加入0.298g(0.999mmol)BnOOC-CH2-OTf(見起始物的制備)，加熱回流。1hr 20mim后混合物用水洗滌，干燥(Na2SO4)并真空蒸發(fā)溶劑，得到729mg殘余物。殘余物用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜處理得到二種產(chǎn)物首先從柱中流出的120mg(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2和隨后的142mg(18％)標題化合物。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子內(nèi)的交換作用使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。哌啶環(huán)中的2-和6-CH2基所產(chǎn)生的3.5至4.6ppm范圍內(nèi)的特別明顯。δ0.94-2.27(m，19H)，2.28-2.43(m，1H)，2.8-2.98(m，2H)，2.98-3.06(m，1H)，3.06-3.15(d，1H)，3.15-3.25(m，1H)，3.3-3.5(m，4H)，4.5-4.61(d，1H)，5.1(s，6H)，7.1-7.6(m，15H)，10.52(bs，1H).
(iv)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl在0.88ml 1M鹽酸、10ml乙醇(99.5％)和180mg 5％Pd/C存在下將142mg(0.176mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2氫化2小時。在hyflo和微孔濾紙中過濾除去催化劑，真空蒸發(fā)溶劑，冷凍干燥，得到95mg HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl，此粗產(chǎn)物(79％純度)在RPLC上用CH3CN/0.1M NH4OAc 15/85沖洗精制，冷凍干燥除去溶劑和過量NH4OAc，然后將其溶于1M鹽酸轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，再冷凍干燥后得到標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ1.1-1.35(m，6H)，1.63-2.14(m，13H)，2.26-2.36(m，1H)，3.01-3.23(m，4H)，3.49-3.62(qvart.，2H)，3.62-3.77(m，2H)，3.77-3.88(形似d，2H)，4.18-4.32(d，1H)，4.37-4.5(m，1H).
實施例51H-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2向86mg(0.243mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)、100mg(0.236mmol)H-Pig(Z)2(見起始物的制備)和115mg(0.944mmol)DMAP于5ml CH3CN中充分攪拌的混合物中，加入50mg(0.260mmol)EDC，使反應在室溫下攪拌進行20hr。蒸去溶劑，并將殘余物溶于70ml EtOAc，有機相用3×5ml 1M KHSO4、1×5mlNaHCO3、3×5ml H2O和1×5ml鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。過濾并蒸發(fā)溶劑得到141mg油狀物。此粗產(chǎn)物在閃色譜(36gSiO2)上用CH2Cl2/MeOH(97/3，然后95/5)梯度洗脫液分離精制，得到43mg(24％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)243mg(0.0565mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2于10ml乙酸乙酯的混合物中鼓泡通入氯化氫氣體5分鐘。真空蒸去溶劑，加入乙酸乙酯和0.1M NaOH溶液。二相分離，有機相用水和鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)，蒸去溶液得38mg殘余物，殘余物用洗脫劑10％NH3-飽和甲醇的乙酸乙酯溶液進行閃色譜處理制得28mg所需產(chǎn)物。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子內(nèi)的交換作用使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。哌啶環(huán)中的2-和6-CH2基所產(chǎn)生的3.7至4.6ppm范圍內(nèi)的特別明顯。δ0.75-1.85(m，18H)，2.35-2.53(m，1H)，2.62-2.78(m，1H)，2.8-3.0(m，2H)，3.0-3.28(m，2H)，3.28-3.37(m，1H)，3.97-4.18(m，2H)，4.8-4.9(m，1H)，5.1(s，4H)，7.2-7.45(m，9H)，8.05-8.15(m，1H).
(iii)H-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl28mg(0.042mmol)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2溶于2ml乙醇(99.5％)和0.13ml鹽酸(1N)，在35mg 5％Pd/C存在下氫化4hr。過濾除去催化劑真空蒸發(fā)溶劑、溶于水中并冷凍干燥，得到12mg(60％)H-(R)Cha-Aze-Pig二鹽酸鹽。
1H-NMR(500MHz、300K，CD3OD)由于分子內(nèi)的交換作用使得有些信號，尤其是哌啶環(huán)內(nèi)的信號選擇性變寬。特別是哌啶環(huán)上的2-和6-CH2基在3.7-4.5ppm范圍表現(xiàn)出的寬峰更為明顯。δ0.75-2.1(m，18H)，2.2-2.35(m，1H)，2.62-2.75(m，1H)，3.0-3.12(t，2H)，3.12-3.23(d，2H)，3.85-3.95(d，2H)，3.95-4.0(dd，1H)，4.15-4.23(m，1H)，4.35-4.42(m，1H)，4.72-4.78(m，1H).13C-NMR(75MHz，CD3OD)胍δ157.6；羰基碳δ170.0和172.6。
實施例52HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)向0.47g(1.4mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-OH(見起始物的制備)、0.40g(1.4mmol)H-Pac(Z)(見起始物的制備)和0.67g(5.5mmol)DMAP于5ml乙腈的溶液中在0℃下加入0.27g EDC。反應混合物在室溫下攪拌過夜，再用乙酸乙酯稀釋。溶液用KHSO4(水溶液)和NaHCO3(水溶液)洗滌、干燥(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)。用洗脫劑乙酸乙酯/甲醇(98/2)進行閃色譜處理制得0.25g(30％)標題化合物，為就分子中的Pac部分而言為1，4-順-和1，4-反-產(chǎn)物的混合物。1H-(500MHz，CDCl3)δ0.8-2.0(m，29H；其中1.45(s，9H))，2.15和d2.34(m，1H，異構(gòu)體)，2.45-2.7(m，2H)，3.0-3.4(m，2H)，3.85(m，1H)，4.14(m，1H)，4.33(m，1H)，4.85(m，1H)，4.98(m，1H)，5.04(s，2H)，7.25-7.45(m，5H)，7.8-7.9(m，1H)，9.2-9.5(m.1H).
(ii)H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)×HCl將0.25g(0.41mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)溶于100ml乙酸乙酯，在冰浴中冷卻。鼓泡通入HCl(氣)5分鐘并蒸發(fā)溶劑。1H-NMR(300MHz，MeOD)δ0.8-2.0(m，22H)，2.05-2.35(m，1H)，2.4-2.55(m，1H)，2.6-2.75(M，1H)，3.00(d，1H)，3.05和3.37(多重峰，分別為0.6和0.4H，異構(gòu)體)3.15-3.3(m，1H)，4.05-4.2(m，2H)，4.88(dd，1H)，5.11(s，2H)，7.2-7.45(m，5H)，8.0-8.15(m，1H)。
(iii)BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)0.17g(0.33mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)×HCl、0.11g(0.37mmol)三氟甲磺酰氧乙酸芐酯和0.14g(1.0mmol)K2CO3于5ml乙腈的混合物在室溫下攪拌3天。粗產(chǎn)物用洗脫劑EtOAc/CH2Cl2/MeOH 95/20/5進行閃色譜處理，收率70mg(32％)。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.85-2.3(m，20H)，2.48(m，1H)，2.63(m，1H)，2.87(m，1H)，3.05-3.25(m，1H)，3.25-3.35(m，2H)，3.38(dd，1H)，3.95(m，1H)，4.08(m，1H)，4.88(m，1H)，5.1-5.2(m，4H)，5.9-6.3(m，1H)，7.25-7.5(m，10H)，8.00和8.08(寬三重峰，1H，異構(gòu)體)。
(iv)HO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac×2HCl將70mg(0.11mmol)BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)溶于5ml乙醇，加入5％Pd/C和0.1ml濃鹽酸?；旌衔镌诔合職浠?小時。過濾和蒸發(fā)后，產(chǎn)物在制備RPLC上用0.1M NH4OAc/CH3CN(4/1)洗脫精制，經(jīng)轉(zhuǎn)變?yōu)辂}酸鹽并冷凍干燥后得到標題化合物，標題化合物就分子中的Pac部分而言是1，4-順式和反式異構(gòu)體的45/55混合物，收率40mg(74％)。1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.1-2.1(m，20H)，2.32(m，1H)，2.52(m，1H)，2.63(m，1H)，2.72(m，1H)，3.1-3.3(m，1H)，3.40(m，1H)，3.8-3.95(m，2H)，4.04(d，1H)，4.39(m，1H)，4.93(m，1H).13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167.7，172.0，174.9和175.2。
實施例53H-(R)Cha-Pro-Pac×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)于℃下，向攪拌的0.4g(1.1mmol)H-Pac(Z)×2HCl(見起始物的制備)、0.4g(1.1mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)和0.55g DMAP于7ml乙腈的溶液中加入211mg(1.1mmol)EDC，反應混合物在0C下攪拌1hr后在室溫下攪拌2hr。真空除去溶劑并用乙酸乙酯和水稀釋殘余物。有機相用乙酸、水和碳酸氫鈉溶液洗滌并干燥(MgSO4)真空除去溶劑，殘余物用洗脫劑乙酸乙酯進行閃色譜分離精制，制得196mg(27％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)196mg Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)于25ml乙酸乙酯的溶液中鼓泡通入氯化氫，10分鐘后用二氯甲烷稀釋反應混合物并加入氫氧化鈉溶液，水相用二氯甲烷萃取幾次。合并有機相，經(jīng)干燥(K2CO3)，真空除去溶劑，得到86mg(52％)標題化合物。
(iii)H-(R)Cha-Pro-Pac×2HCl將H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)溶于乙醇，在10％Pd/C存在下氫化制得標題化合物。H-NMR(300MHz，D2O；分子的Pac部分是1，4-順式和1，4-反式異構(gòu)體的混合物，比約1∶1)；δ1.15-1.3(q)，1.6-1.85(m)，1.9-2.0(m)，2.0-2.1(d)，2.1-2.15(m)，2.15-2.2(m)，2.65-2.7(m)，2.7-2.8(m)，2.95-3.0(d)，3.15-3.2(d)，5.4(s)，7.45-7.55(m).
實施例54H-(R)Cgl-Ile-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)攪拌的1.33g(3.6mmol)Boc-(R)Cgl-Ile-OH(見起始物的制備)、1.12g(3.9mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)和1.76g(14.4mmol)DMAP于50ml CH3CN N/DMF(1/1)的混合物中在+5℃時加入0.75g(3.9mmol)EDC。使反應混合物溫度升至室溫并放置60hr。蒸發(fā)除去CH3CN將殘余物倒入100ml水中(出現(xiàn)黃色沉淀)?；旌衔镉?×50ml EtOAc萃取。合并有機相，用2×30mlNaHCO3(飽和)、2×50ml 0.2M HCl和1×50ml鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。蒸發(fā)后用CH2Cl2/THF(85/15)洗脫劑進行閃色譜處理，得到510mg(24％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)將530mg Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)溶于14mlCH2Cl2/TFA(2.5/1)并在室溫下攪拌2hr。蒸發(fā)溶劑，用CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和)(95/5)洗脫劑進行閃色譜處理得到標題化合物。
(iii)H-(R)Cgl-Ile-Pab×2HCl于含過量HCl(g)的5ml EtOH中加入75mg(0.14mmol)H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)，在10％Pd/C上常壓氫化6hr，得到二鹽酸鹽。加入2g活性炭和20ml EtOH，用硅藻土過濾、蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥，得到50mg(89％)標題化合物，為白色粉未。1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.90(t，3H)，0.94(d，3H)，1.1-2.0(m，14H)，3.83(bs，1H)，4.26(d，1H)，4.50(m，2H)，7.57(bd，2H)，7.78(bd，2H).
實施例55H-(R)Cgl-Aze-Pab257mg(5.08mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(見實施例1(ii))在于6ml EtOH/H2O中在5％Pd/C上常壓氫化6hr，然后濾去催化劑，蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥，制得200mg(89％)標題化合物。1H-NMR(500MMz，D2O)δ1.0-2.0(m，11H)，2.25(m，1H)，2.70(m，1H)，3.30(m，1H)，3.75(m，1H)，4.30(m，1H)，4.45(m，1H)，4.55(m，2H)，7.60(m，2H)，7.77(m，2H).MSm/z 372(M+＋1).
實施例56HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc(i)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于5mlCH2Cl2的0.250g(0.47mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(見實施例15)冷卻至-10℃并慢慢加入溶于3mlCH2Cl2的150mg(0.48mmol)TfOCH2COOBn(見起始物的制備)。再加入200mg(1.45mmol)碳酸鉀，將混合物在室溫下攪拌20hr。混合物用CH2Cl2稀釋、用水萃取、干燥(MgSO4)。蒸去溶劑，用洗脫劑CH2Cl2/HeOH(9/1)進行閃色譜處理，得到150mg(46％)標題化合物。
(ii)HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc150mg(0.2mmol)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于20ml乙醇中在50mg 5％Pd/C上常壓氫化4hr。濾去催化劑、蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑CH3CN/0.1M NH4OAc 1/4進行RPLC精制處理，得到35mg(37％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，MeOD)δ1.00(m，1H)，1.20-1.45(m，5H)，1.5(m，1H)，1.6-1.8(m，6H)，1.9-2.1(m，6H)，2.25(m，1H)，3.25(m，1H)，3.5(m，1H)，3.85(m，1H)，4.15(m，1H)，4.35-4.6(m，3H)，4.9(m，被HOD線部分掩蓋，6H)，7.55(d，2H)，7.75(d，2H)。
實施例57MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(i)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)向0.425g(0.814mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(見實施例1)、0.894g(5.04mmol)K2CO3于CH2Cl2(總計4.3ml)的混合物中于室溫下慢慢加入溶于CH2Cl2的0.186g(0.841mmol)Tfo-CH2-COOMe(見起始物的制備)并攪拌過夜。再加入CH2Cl2，混合物水和鹽水洗滌，干燥、過濾、真空蒸發(fā)溶劑，得到0.51g殘余物，殘余物在硅膠閃色譜上先用CH2Cl2/THF/MeOH(16/4/1)，再用CH2Cl2/THF(2％NH3)(8/2)最后用乙醚/MeOH(NH3-飽和)(95/5)洗脫三次，得到0.324g(67％)標題化臺物。
(ii)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl在1.14ml 1N HCl，6.5ml MeOH和300mg Pd/C存在下將220mg(0.38mmol)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)氫化2hr。用硅藻土和微孔濾紙上濾去催化劑，隨后真空蒸發(fā)溶劑，并冷凍干燥二次得到178mg(91％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ1.12-1.4(m，5H)，1.68-1.81(m，2H)，1.81-1.9(m，3H)，1.97-2.1(m，1H)，2.29-2.4(m，1H)，2.68-2.8(m，1H)，3.86(s，3H)，4.1(s，2H)，4.1-4.5(d，1H)，4.36-4.42(t，2H)，4.59(s，2H)，4.99-5.04(m，1H)，7.65-7.7(d，2H)，7.8-7.85(d，2H).13C-NMR(75MHz，MeOD)脒碳和羰基碳δ146.78，167.68，168.15，172.29。
實施例58EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(i)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)0.443g(0.876mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(見實施例1)和0.931g(5.26mmol)K2CO3的混合物溶于冰浴冷卻的CH2Cl2(總計4ml)，并向其中緩慢加入溶于CH2Cl2的0.208g(0.876mmol)Tfo-CH2-COOEt(見起始物的制備)。2hr后移去冰浴并在室溫下繼續(xù)攪拌2小時。再加入CH2Cl2，混合物用水和鹽水洗滌，干燥、過濾并真空蒸發(fā)溶劑，得到0.51g殘余物，殘余物用洗脫劑乙醚/MeOH(NH3-飽和)進行閃色譜處理，得到0.387g(75％)標題化合物。
(ii)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl在12ml EtOH(99.5％)和390mg Pd/C存在下將395mg(0.668mmol)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)氫化5hr。用硅藻土和微孔濾紙上濾去催化劑，隨后真空蒸發(fā)溶劑，并冷凍干燥二次，得到281mg(88％)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab，加入2當量1N HCl，冷凍干燥三次，得到288mg(81％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ1.05-1.48(m，8H)，1.6-2.05(m，6H)，2.15-2.33(m，1H)，2.58-2.79(m，1H)，3.89-4.0(m，3H)，4.2-4.33(m，3H)，4.33-4.44(m，1H)，4.44-4.66(m，2H)，4.91(m，1H(被H-O-D信號部分遮蔽))，7.54-7.63(d，2H)，7.72-7.84(d，2H)。
實施例59nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×HOAc(i)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)用Tfo-CH2-COOnBu作為烷基化試劑，按所述用于nHeXOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)的方法(見實施例60(i))進行制備。粗產(chǎn)物先用洗脫劑CH2Cl2/MeOH(95/1)后用CH2Cl2/異丙醇(90/7)進行閃色譜處理共二次，得到324mg(47％)標題化合物。
(ii)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×HOAc按實施例57(ii)中的所述方法進行脫保護，粗產(chǎn)物在RPLC上用溶于0.05M NH4OAc的CH3CN(30％)和0.05M HOAc作為洗脫液精制，得到100mg(53％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，MeOD)；δ0.85-2.1(m，18H)，2.15-2.37(m，1H)，2.58-2.8(m，1H)，3.7-5.0(m，10H)，4.88-5.0(被H-O-D信號部分掩蓋))，7.46-7.65(d，2H)，7.71-7.88(d，2H)。13C-NMR(75MHz，MeOD)脒碳和羰基碳δ146.8，168.12，168.2，172.2。
實施例60nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(i)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)0.695g(1.375mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(見實施例1)和1.463g(8.25mmol)K2CO3的混合物溶于CH2Cl2(總計4ml)中，在＜-10℃下慢慢加入溶于CH2Cl2的0.402g(1.375mmol)TfO-CH2-COOnHex(見起始物的制備)，1hr后移去CO2-冰浴并在室溫下繼續(xù)攪拌45分鐘。再加入CH2Cl2，混合物用水和鹽水洗滌，干燥、過濾，真空蒸發(fā)溶劑，得到0.828g殘余物，殘余物在閃色譜上先用乙醚/MeOH(NH3-飽和)(95/5)后用CH2Cl2/MeOH(NH3-飽和)(95/5)沖洗處理二次，得到0.42g(47％)標題化合物。
(ii)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl在12ml THF和400mg Pd/C存在下將400mg(0.617mmol)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)氫化1.5hr還不能使其完全脫保護。于是在1.7ml 1N HCl，12ml MeOH和340mg Pd/C存在下氫化4hr使反應完全。用硅藻土和微孔濾紙濾去催化劑，然后真空蒸發(fā)溶劑并冷凍干燥二次，得到287mg(79％)標題化合物。1H-NMR(300MHz，MeOD)；δ0.8-2.13(m，22H)，2.13-2.31(m，1H)，2.61-2.81(m，1H)，3.93-4.15(m，3H)，4.15-4.37(m，3H)，4.37-4.7(m，3H)，4.88-5.0(m，1H(被H-O-D-信號部分掩蓋))，7.52-7.69(d，2H)，7.75-7.9(d，2H)。13C-NMR(75MHz，MeOD)脒碳和羰基碳δ146.84，167.67，167.84，172.17。
實施例61H-(R)Cgl-Pro-Pac×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)向708g(1.95mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(見起始物的制備)，714mg(2.0mmol)H-Pac(Z)×2HCl(見起始物的制備)和1.078g(8.8mmol)DMAP于12.5ml乙腈的攪拌溶液中在0℃下加入377mg(1.97mmol)EDC。反應混合物自行升溫至室溫過夜。真空除去溶劑，殘余物用洗脫劑溶于二氯甲烷的10％甲醇進行閃色譜和RPLC處理。分離出二個餾份(51mg和150mg)，MSm/z＝626(M＋1)。
(ii)H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)向141mg(0.22mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)于50ml乙酸乙酯的溶液中鼓泡通入氯化氫氣體。15分鐘后加入10％NaCO3溶液，分出有機相并干燥(K2CO3)，蒸去溶劑得到71mg(61％)產(chǎn)物。
(iii)H-(R)Cgl-Pro-Pac×2HCl71mg(0.14mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)和一小勺10％Pd/C的混合物于10ml乙醇中，在室溫下和常壓下氫化2hr。過濾除去催化劑，真空除去溶劑，殘余物溶于50ml水和0.6g1M鹽酸中。冷凍干燥得到38mg(58％)標題化合物。
MSm/z 392(M＋1)實施例62HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac×HOAc(i)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)84mg(0.15mmol)H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)(見實施例53(ii))、一勺碳酸鉀和47mg TfOCH2-COOBn(見起始物的制備)的混合物于3ml二氯甲烷中在室溫下攪拌過夜。反應混合物經(jīng)過濾和真空除去溶劑得到殘余物，殘余物在閃色譜上用乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇95∶20∶5沖洗，分離出29mg所需產(chǎn)物。
(ii)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac×HOAc29mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)和37mg 10％Pd/C的混合物于5ml乙醇中，在室溫和常壓下攪拌4hr，濾去催化劑，隨后去除溶劑并用RPLC純化，得到所需產(chǎn)物。
MSm/z＝464(M＋1)實施例63HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)0.35g(0.64mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)(見實施例61(ii))、124mg(0.76mmol)丙烯酸芐酯和280μl(2mmol)三乙胺于1ml EtOH的溶液在室溫下保持3天。除去溶劑后用HPLC純化得到18mg(4％)標題化合物。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac18mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)和一小勺10％Pd/C的混合物在EtOH中于室溫和常壓下氫化2hr。過濾、真空除去溶劑、溶于水和冷凍干燥，得到7mg(78％)標題化合物。MSm/z＝464(M＋1)實施例64HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(i)Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)0.4g(1.38mmol)H-Pac(Z)(見起始物H-Pac(Z)×2HCl的制備)、0.5g(1.41mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)和0.67g(5.5mmol)DMAP于20ml乙腈的溶液在0℃下與溶于15ml乙腈的0.26g(1.4mmol)EDC溶液混合，反應混合物溫度保持室溫過夜，真空除去溶劑。殘余物在乙酸乙酯和水之間分配。水相用乙酸乙酯再萃取一次，合并有機相，用硫酸氫鈉溶液、碳酸鈉溶液和鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)，蒸發(fā)溶劑得到0.54g(63％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)0.54g(0.9mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)的乙酸乙酯溶液中鼓泡通入氯化氫氣體。將溶液在冰箱中保存過夜后真空除去溶劑。殘余物于溶乙酸乙酯。溶液經(jīng)碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)。除去溶劑得到0.35g(77％)產(chǎn)物。
(iii)BnOOC--CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)將180mg(0.33mmol)H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)和53mg(0.33mmol)丙烯酸芐酯的乙醇溶液在室溫下保持60hr。真空除去溶劑并將殘余物溶于乙酸乙酯。溶液用硫酸氫鉀溶液、碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。干燥(硫酸鈉)并真空去除溶劑后得到殘余物，殘余物在閃色譜上用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫純化，得到150mg(66％)標題化合物。
(iv)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac×2HCl115mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)與67mg10％Pd-C于10ml乙醇的混合物在室溫和常壓下氫化1.5hr。過濾，真空除去溶劑，將殘余物溶于水和1.5ml1M HCl制成溶液，冷凍干燥得到30mg(33％)標題化合物。
MSm/z 464(M＋1)實施例65HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)向0.473g(1.236mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)、0.404g(1.236mmol)H-Pig(Z)×HCl(見起始物的制備)和0.604g(4.94mmol)DMAP于13.5ml DMF的混合物中在＜-15℃時加入0.249g(1.298mmol)EDC，將溫度升至室溫過夜。真空蒸發(fā)溶劑并加入EtOAc和2M KHSO4。二相分離，有機相用飽和Na2CO3和鹽水洗滌。重復萃取過程一次后干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)溶劑，得到0.612g殘余物，殘余物用洗脫液EtOAc/MeOH 9/1進行閃色譜處理，得到407mg(53％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)0.4g(0.638mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)溶于24.4mlTFA/CH2Cl21/4，在冰浴中攪拌30分鐘后在室溫下攪拌30分鐘。真空除去溶劑并加入EtOAc和飽和Na2CO3。二相分離，有機層用水和鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)，過濾和真空蒸發(fā)溶劑，得到336mg(100％)標題化合物。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)0.296g(0.562mmol)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)和0.171g(1.236mmol)K2CO3于6mlCH3CN的混合物在油浴中加熱至60℃后緩慢加入89ml(0.562mmol)BnOOC-CH2-Br，1hr 45min后蒸去溶劑，并加入EtOAc。混合物用水洗滌、干燥(Na2SO4)、過濾和真空蒸發(fā)溶劑，得到346mg殘余物.殘余物用洗脫劑CH2Cl2/THF/MeOH(8/2/1)進行閃色譜處理，得到297mg(78％)標題化合物。
(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl在1.7ml 1N HCl、10ml EtOH(99.5％)和300mg Pd/C存在下將243mg(0.36mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)氫化2hr。用硅藻土和微孔濾紙濾去催化劑，真空蒸發(fā)溶劑，并冷凍干燥二次，得到166mg(88％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ0.6-1.9(m，18H)，2.1-2.27(m，1H)，2.52-2.76(m，1H)，2.82-3.2(m，4H)，3.46-
3.61(m，1H)，3.61-3.81(m，2H)，3.81-4.0(m，2H)，4.0-4.24(m，2H)，4.24-4.4(m，1H).
實施例66HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)向0.3495g(0.95mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)、0.464g(3.8mmol)DMAP和0.310g(0.95mmol)H-Pig(Z)×HCl(見起始物的制備)于5ml CH2Cl2的混合物中加入0.192g(1mmol)EDC，混合物在室溫下攪拌過夜?；旌衔镎舭l(fā)后將殘余物溶于乙酸乙酯。有機相用0.3M KHSO4洗滌二次用鹽水洗滌一次，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度沖洗液CH2Cl2/MeOH(100/0、97/3、95/5、90/10)處理純化，得到307mg標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)將0.306g(0.48mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)溶于30mlHCl飽和的乙酸乙酯中。將混合物靜置半小時。蒸去溶劑，并將殘余物溶于CH2Cl2。有機層用0.2M NaOH洗滌二次。合并水層，用CH2Cl2萃取一次，合并有機層，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到257mg(99％)標題化合物。
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)0.256g(0.473mmol)H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)、0.144g(1.04mmol)K2CO3和82μl(0.521mmol)溴乙酸芐酯于6ml乙腈的混合物在攪拌下加熱至60℃反應2小時。蒸去溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2，用水和鹽水各洗滌一次、干燥(Na2SO4)，過濾和蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度沖洗液CH2Cl2/MeOH(97/3、95/5、90/10)分離純化得到0.2g產(chǎn)物(根據(jù)RPLC的純度為90％)。最后將產(chǎn)物置于2mm硅石板色譜管(Harrisonresearch model 7924T)中用CH2Cl2/MeOH 95/5沖洗，制得0.158g(48％)純產(chǎn)物。
(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl0.158g(0.227mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)與0.075gPd/C(5％)、1.0ml 1N HCl溶液和10ml乙醇混合，在常壓下氫化1小時。用硅藻土過濾、蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥二次，得到119mg(97％)產(chǎn)物。1H-NMR(D2O，300MHz)δ0.95-1.44(m，7H)，1.52(m，1H)，1.60-2.20(m，13H)，2.39(m，1H)，3.07-3.32(m，4H)，3.68(m，1H)，3.77-4.02(m，5H；其中3.98(s，2H)，4.44-4.58(m，2H)13C-NMR(D2O，75MHz)羰基碳和胍碳δ156.5，168.3，169.6，174.5。
實施例67HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)將0.297g(0.55mmol)H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(見實施例66(ii))溶于2ml乙醇并加入90μl(0.59mmol)丙烯酸芐酯。反應混合物在室溫下攪拌4天。蒸去溶劑，粗產(chǎn)物在2mm硅石板色譜管(Harrison research model 7924T)中用梯度洗脫液CH2Cl2/MeOH 95/5，90/10)處理，得到0.338g(87％)標題化合物。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl0.238g(0.227mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-pig(Z)與0.120g Pd/C(5％)、1.2ml 1N HCl溶液和15ml乙醇混合，在常壓下氫化1小時。用硅藻土過濾催化劑，蒸發(fā)溶劑，在水中冷凍干燥二次，得到178mg(95％)標題化合物。1H-NMR(D2O，300MHz)δ 0.82-1.45(m，8H)，1.45-2.15(m，13H)，2.29(m，1H)，2.83(t，2H)，2.9-3.4(m，6H)，3.57(bq，1H)，3.67-3.87(m，3H)，4.25-4.43(m，2H)13C-NMR(D2O，75MHz)羰基碳和胍碳δ156.3，168.2，174.3，174.6。MSm/z 479(M+＋1)實施例68(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl在0.75mg 1N HCl、7ml EtOH(99.5％)和150mg Pd/C存在下將120mg(0.126mmol)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2(見實施例50(iii))氫化4hr，用硅藻土和微孔濾紙濾去催化劑，真空蒸發(fā)溶劑，冷凍干燥得到66mg(90％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)；δ1.05-1.38(m，7H)，1.53-1.64(d，1H)，1.64-2.14(m，11H)，2.27-2.39(m，1H)，3.03-3.28(m，4H)，3.58-3.70(m，1H)，3.7-3.8(m，1H)，3.8-3.9(d，2H)，4.07-4.22(m，2H)，4.22-4.35(m，1H)，4.38-4.5(m，1H).13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ156.28，166.73，170.14，174.01。
實施例69HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl(i)BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)向100mg(0.14mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(見實施例67(i))和80mg(0.57mmol)碳酸鉀于4ml CH2Cl2的冷卻(冰浴溫度)混合物中小心地加入溶于1ml CH2Cl2的64ml(0.21mmol)TfO-CH2-COOBn溶液。反應混合物在0℃放置30分鐘，使其升至室溫放置2h，然后加熱回流30分鐘并在室溫下放置過夜。蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑CH2Cl2/MeOH(97/3)進行閃色譜處理，得到65mg(54％)標題化合物。
(ii)HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl將65mg(0.08mmol)BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)溶于10ml EtOH/1M HCl(9/1)，在10％Pd/C上常壓氫化3hr。過濾催化劑、蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥，得到40mg(97％)標題化合物，為白色粉末。13C-NMR(125MHz，MeOD)脒基和羰基碳δ157.5，167.2，169.1，173.7和174.1。
實施例70HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)將Boc-(R)Cgl-Aze-OH(見起始物的制備)(400mg，1.17mmol)、H-(R，S)Itp(Ts)(見起始物的制備)(356mg，1.23mmol)和DMAP(286mg，2.34mmol)溶于CH3CN(6ml)并冷至5℃。加入EDC(236mg，1.23mmol)，將所得混合物在室溫下攪拌過夜。除去CH3CN并將殘余物溶于MeOH/EtOAc/H2O。分離出的有機層用K2CO3(飽和)、2M KHSO4、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)。蒸去溶劑產(chǎn)出688mg(85％)白色固體。
MSm/z 620(M+＋1)(ii)H-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)將Boc-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(500mg，0.8mmol)溶于CH2Cl2(50ml)并鼓泡通入HCl(氣)約4min。45min后蒸發(fā)除去溶劑，所得產(chǎn)物溶于EtOAc/NeOH/H2O并用2M NaOH(aq)將酸性溶液pH值調(diào)至8-9，分出有機層并干燥(Na2SO4)。蒸去溶劑得到425mg(100％)標題化合物，為白色固體。
MSm/z520(M+＋1)(iii)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)將H-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(400mg，0.77mmol)、芐基-2-(對-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯(見起始物的制備)(325mg，0.92mmol)和K2CO3(235mg，1.7mmol)置于CH3CN(5ml)中，在45℃下攪拌反應幾小時后反應轉(zhuǎn)化率僅為25％，于是將溫度升高至60℃并再加入-定量的芐基-2-(對-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯使反應繼續(xù)攪拌進行48hr(起始物與產(chǎn)物的克數(shù)比達到25∶63)，然后進行后處理。蒸去溶劑，向殘余物中加入EtOAc/H2O。二相分離，水相用EtOAc洗滌二次，合并有機相，用K2CO3(飽和溶液)、2M KHSO4和水洗滌并干燥(Na2SO4)，經(jīng)酸性KHSO4反萃取后得到約340mg物料，用RPLC精制，得到34mg(7％)標題化合物。
MSm/z 668(M+＋1)
(iv)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp×2HCl將BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(34mg，0.05mmol)溶于THF(5ml)，并用干冰冷卻器將NH3(氣)(40ml)通入反應燒瓶中。加入Na(S)，出現(xiàn)深藍顏色。反應攪拌進行5分鐘后用HOAc(50μl)中止反應。移去干冰冷卻器使NH3(l)揮發(fā)。殘余物中加入H2O和HOAc使之pH＝7。冷凍干燥，在制備RPLC上處理得到幾個餾分，用FAB-MS分析。兩個餾分含有所需化合物，用2.2當量的1M HCl冷凍干燥，得到3mg(10％)。
MSm/z 424(M+＋1)實施例71HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp(i)Boc-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)(169mmg，0.5mmol)、H-(R，S)Itp(Ts)(見起始物的制備)(155mg，0.52mmol)和DMAP(122mg，1mmol)溶于CH3CN(2.5ml)并冷卻至5℃。加入EDC×HCl(115mg，0.6mmol)，所得混合物在室溫下攪拌過夜，此后再加入(0.5當量)H-(R，S)Itp(Ts)和EDC。并繼續(xù)攪拌一晚，按前述用于Boc-(R)Cgl-Aze-(R，S)Ite(Ts)(見實施例70)的方法對反應混合物進行處理，得到260mg粗產(chǎn)物，經(jīng)RPLC純化得到180mg(57％)標題化合物。
MSm/z 634(M+＋1)(ii)H-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)將Boc-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)(180mg，0.28mmol)溶于CH2Cl2(20ml)并鼓泡通入HCl(氣)約4min。45min后蒸發(fā)除去溶劑，將所得產(chǎn)物溶于CH2Cl2并用2M NaOH洗至pH＝8-9。分出有機相，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)得到163mg(約100％)產(chǎn)物。
MSm/z 534(M+＋1)(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp(Ts)在60℃下攪拌在CH3CN(1.5ml)中的H-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)(80mg，0.15mmol)、K2CO3(45mg，0.33mmol)和Br-CH2COOBn(39mg，0.17mmol)2.5hr。蒸去溶劑，殘余物溶于EtOAc/H2O。分成二想，有機相用10％檸檬酸洗滌，干燥(Na2SO4)、蒸去溶劑得到171mg粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物用RPLC純化產(chǎn)出53mg(52％)標題化合物。
MSm/z 681(M+＋1)(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp按所述用于BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(見實施例70(iv))的方法對BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp(Ts)(50mg，0.07mmol)進行處理，所得產(chǎn)物混合物經(jīng)RPLC精制得到12mg由標題化合物與在質(zhì)譜439(m/z)處出現(xiàn)的還原形態(tài)所組成的1∶1混合物。
MSm/z 438(M+＋1)實施例72H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Ts)在室溫下，將2.1g(5.5mmol)Boc-(R)Cha-Pic-OH(見起始物的制備)、1.0g(8.2mmol)DMAP和1.7g(5.8mmol)H-(R，S)Itp(Ts)(見起始物的制備)溶于40ml乙腈。攪拌幾分鐘后加入1.1g(5.8mmol)EDC并繼續(xù)攪拌60小時。真空蒸去溶劑，殘余物溶于CH2Cl2用水、0.3M KHSO4和KHCO3(水溶液)洗滌、干燥(Na2SO4)。蒸發(fā)溶劑，用硅膠過濾得到2.43g(62％)產(chǎn)物。
MSm/z 661(M+＋1)(ii)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp將2.4g(3.6mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Ts)溶于15ml THF并將NH3(氣)冷凝入燒瓶，隨后再加入Na。5min后用乙酸中止反應并蒸去NH3和THF。殘余物在水中冷凍干燥，用RPLC(CH3CN/0.1M NH4OAc，6/4)純化得到0.93g(51％)所需產(chǎn)物。
MSm/z 507(M+＋1)(iii)H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl在室溫下，將50mg(0.099mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp溶于用HCl(氣)飽和的乙酸乙酯。攪拌2hr后真空除去溶劑，殘余物用水冷凍干燥三次得到35mg(74％)所需產(chǎn)物。
MSm/z 407(M+＋1)實施例73HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)在室溫下，將0.84g(1.66mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(見實施例72)溶于10ml CH2Cl2和10ml 0.5M NaOH中。滴加入0.29ml(1.82mmol)Z-Cl。攪拌3 hr后，二相分離，有機相用水洗滌，用Na2SO4干燥。蒸發(fā)，用閃色譜(乙酸乙酯/庚烷9/1)處理得到0.5g(47％)所需產(chǎn)物。
MSm/z 641(M+＋1)(ii)H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)
在室溫下，將0.5g(0.78mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)溶于用HCl飽和的乙酸乙酯中。加入水并用K2CO3堿化混合物。二相分離。水相用CH2Cl2萃取而有機相用水洗滌。合并有機相，干燥(Na2SO4)。蒸去溶劑得到0.3g(71％)所需產(chǎn)物。
MSm/z 541(M+＋1)(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)0.29g(0.5mmol)H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)和0.15g(1mmol)K2CO3溶于25ml乙腈。加入154mg(0.6mmol)溴乙酸芐酯，在50℃下攪拌混合物4hr。蒸發(fā)，用RPLC(乙腈0.1MNH4OAc 70∶30)純化得到約200mg所需產(chǎn)物。
(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl將200mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)溶于乙醇中。加入1小勺10％Pd/C，混合物氫化4hr。經(jīng)hyflo過濾、蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥得到53mg所需產(chǎn)物。1H NMR(300.13MHz，D2O)δ1.0-2.35(重疊m，22H)，3.28-3.51(m，5H)，3.51-3.64(m，1H)，3.75-4.03(m，3H)，5.03-5.14(s寬峰，1H)。-個質(zhì)子的信號被H-O-D信號部分掩蓋。
MSm/z 465(M+＋1)實施例74H-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)向1.0g(2.95mmo1)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(見起始物的制備)、1.44g(11.8mmol)DMAP和1.12g(3.25mmol)H-(R，S)Hig(Z)(見起始物的制備)于15ml CH2Cl2中的混合物中加入0.62g(3.2mmol)EDC，在室溫下攪拌混合物過夜。蒸去溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯。有機層用0.3M KHSO4溶液洗滌二次時，油狀物從有機層中分離出來。將乙酸乙酯層干燥(Na2SO4)并過濾。而油和水層用CH2Cl2萃取。干燥有機層(Na2SO4)，過濾，與前面的乙酸乙酯相混合。經(jīng)蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物，粗產(chǎn)物在色譜管(Harrison research，model 7924T)上用2mm氧化硅板和梯度沖洗劑CH2Cl2/MeOH(97/3、95/5、90/10)純化得到1.1g(59％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig×2HCl將81mg(0.13mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)溶于50ml用HCl飽和的乙酸乙酯中。保持一小時后蒸發(fā)。將殘余物溶于10ml乙醇。加入40mg Pd/C(5％)、1ml水和0.5ml 1M HCl溶液，在常壓下氫化混合物過夜。硅藻土過濾催化劑，蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥3次后得到75％收率的標題化合物。1H-NMR(D2O，300MHz)δ0.95-1.35(m，5H)，1.50-2.45(m，15M)，3.02(bt，1H)，3.1-3.8(m，7H)，4.13(d，1H)，4.38(bd，1H)13C-NMR(D2O，75MHz)羰基碳和胍碳δ154.8，168.9，174.4。
MSm/z 393(M+＋1)實施例75HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig×2HCl(i)H-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)將1g(1.6mmol)Boc-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig(Z)(見實施例74(i))溶于100ml用HCl飽和的乙酸乙酯中，并保持1小時。混合物蒸發(fā)后將殘余物溶于CH2Cl2。有機層用0.2M NaOH溶液洗滌二次，干燥(Na2SO4)、過濾和蒸發(fā)，得到0.825g(98％)標題化合物。
(ii)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)在12ml THF中混合0.442g(0.839mmol)H-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig(Z)、0.256g(1.85mmol)K2CO3和145μl(0.512mmol)溴乙酸芐酯。混合物在40℃下攪拌1小時，再在室溫攪拌過夜。蒸去溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2并有水和鹽水各洗滌一次。干燥有機層(Na2SO4)、過濾并蒸發(fā)，粗產(chǎn)物在2mm硅石板色譜管(Harrisonresearch，model 7924T)上用梯度洗脫液CH2Cl2/MeOH(97/3、95/5、90/10)純化，得到0.165g(29％)標題化合物。
(iii)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R.S)Hig×2HCl混合0.165g(0.25mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig(Z)與0.050g Pd/C(5％)、0.7ml 1M HCl溶液和10ml乙醇。混合物在常壓下氫化4小時。用硅藻土過濾除去催化劑，蒸發(fā)溶劑，隨后用水冷凍干燥二次，得到0.1g(75％)產(chǎn)物。1H-NMR(D2O，300MHz)δ1.05-1.45(m，5H)，1.55-2.5(m，15H)，3.08(bt，1H)，3.2-4.05(m，9H)，4.30(d，1H)，4.44(m，1H)13C-NMR(D2O，75MHz)羰基碳和胍碳δ154.9，167.2，169.4，174.1 。
實施例76H-(R)Cha-Pro(R，S)Hig×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pro(R，S)Hig(Z)0.72g(1.95mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)、0.95g(7.8mmol)DMAP和0.74g(2.14mmol)84％純度H-(R，S)Hig(Z)(見起始物的制備)于10ml CH2Cl2中的混合物中加入0.486g(2.54mmol)EDC，于室溫下攪拌3天。反應混合物用CH2Cl2稀釋后用水洗滌一次，用0.3M KHSO4溶液洗滌二次，用鹽水洗滌一次。干燥有機層(Na2SO4)、過濾、蒸發(fā)，粗產(chǎn)物用CH2Cl2/MeOH 95/5洗脫劑進行閃色譜純化，得到0.450g(33％)產(chǎn)物。
(ii)H-(R)Cha-Pro(R，S)Hig×2HCl將50mg(0.078mmol)Boc-(R)Cha-Pro(R，S)Hig(Z)溶于20ml用HCl飽和的乙酸乙酯中，保持1小時。蒸發(fā)將殘余物溶于10ml乙醇。加入20mg Pd/C(5％)和0.3ml 1M HCl溶液，在常壓下氫化2小時。用硅藻土濾去催化劑，蒸發(fā)溶劑，用水冷凍干燥二次，得到28mg(76％)標題化合物。1H-NMR(D2O，300MHz)δ0.9-1.6(m，6H)，1.6-2.5(m，16H)，3.09(t，1H)，3.31(t，1H)，3.37-3.74(m，4H)，3.81(m，1H)，4.35-4.47(m，2H)13C-NMR(D2O，75MHz)羰基碳和胍碳δ154.9，169.8，174.5。
實施例77H-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl(i)Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)向0.50g(1.6mmol)H-Rig(Z)(見起始物的制備)、0.59g(1.6mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)和0.84g(6.9mmol)二甲基氨基吡啶于30ml乙腈和5ml二甲基甲酰胺中的溶液中加入0.33g(1.7mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。攪拌反應3天，然后蒸發(fā)并在硫酸氫鉀水溶液和二氯甲烷之間分配。二氯甲烷層用NaHCO3水溶液和水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。粗物質(zhì)用硅膠板以CH2Cl2/甲醇9/1抽濾，蒸發(fā)后得到0.78g(76％)所需產(chǎn)物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.8-1.9(m，27H)，2.4-2.6(m，2H)，2.78(bt，2H)，3.15-3.4(m，2H)，3.80(bt，1H)，4.0-4.4(m，4H)，4.75(bt，1H)，4.97(bd，1H)，5.08(s，2H)，7.1-7.4(m，7H)，7.74(b，1H).
(ii)H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)×2HCl盛有溶于50ml乙酸乙酯和0.76g(1.2mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)的燒瓶在冰浴中冷卻。鼓泡通入于HCl氣體5min，蒸去溶劑，得到0.74g(100％)二鹽酸鹽，為白色粉末。1H-NMR(300MHz，MeOD)δ1.1-2.0(m，18H)，2.23(m，1H)，2.68(m，1H)，3.15-3.45(m，4H)，3.72(bd，1H)，3.9-4.0(bd，2H)，4.27(m，1H)，4.39(m，1H)，4.78(m，1H)，5.30(s，2H)，7.3-7.5(m，5H).
(iii)H-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl將20mg H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)的溶液和少量5％Pd/C裝入燒瓶，在常壓下氫化1hr。用硅藻土過濾、蒸發(fā)。殘余物用幾滴濃鹽酸冷凍干燥得到產(chǎn)物，產(chǎn)率為8mg(52％)。1H-NMR(300MHz，D2O)δ1.1-2.0(m，18H)，2.37(m，1H)，2.75(m，1H)，3.08(bt，2H)，3.39(bt，2H)，3.8-4.0(m，3H)，4.35-4.5(m，2H)，4.90(m，1H).13C NMR(75.5MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ172.2，169.4，156.4。
實施例78HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)將0.20g(0.33mmol)H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)(見實施例77)、0.13g碳酸鉀、80mg碘化鈉、10ml四氫呋喃和10ml乙腈的混合物加熱至60℃反應10hr。蒸去溶劑，并將粗產(chǎn)物在硅膠閃色譜上用二氯甲烷/甲醇92/8沖洗提純。收率0.13g(58％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.9-2.1(m，18H)，2.45(m，1H)，2.61(m，1H)，2.81(m，2H)，2.88(d，1H)，3.2-3.5(m，4H)，3.94(m，1H)，4.0-4.25(m，3H)，4.85(m，1H)，5.12(s，2H)，5.14(s，2H)，6.9-7.2(b.2H)，7.2-7.5(m，10H)，7.95(m，1H).
(ii)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl0.12g(0.18mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)、5ml乙醇、3滴濃鹽酸和少量5％Pd/C的混合物在常壓下氫化1hr?；旌衔镉霉柙逋吝^濾并蒸發(fā)。殘余物用水冷凍干燥，得到91mg(98％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，D2O)δ1.1-1.9(m，17H)，2.00(m，1H)，2.29(m，1H)，2.70(m，1H)，3.10(m，2H)，3.34(t，2H)，3.83(bd，2H)，3.89(dd，2H)，4.00(d，1H)，4.35(m，2H)，4.87(m，1H).13C NMR(125.8MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ171.8，169.6，167.7，156.3。
實施例79HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig×2HCl
(i)Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)向0.25g(0.82mmol)4-氨乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z))(見起始物的制備)、0.32g(0.82mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)和0.4g(3.3mmol)二甲基氨基吡啶于10ml乙腈和2ml二甲基甲酰胺的溶液中加入0.165g(0.86mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。攪拌反應3天后蒸發(fā)，并在硫酸氫鉀水溶液和二氯甲烷間分配。二氯甲烷層用NaHCO3水溶液和水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物的NMR譜令人滿意，并且含有一些二甲基甲酰胺的產(chǎn)物可直接用于下一步而無須再純化。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-2.2(m，32H；其中1.41(s，9H))，2.34(m，1H)，2.77(bt，2H)，3.10(m，1H)，3.29(m，1H)，3.40(m，1H)，3.83(m，1H)，4.17(m，2H)，4.30(m，1H)，4.54(m，1H)，5.07(m，1H)，5.08(s，2H)，7.03(m，1H)，7.05-7.4(m，7H).
(ii)H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)的粗產(chǎn)物于100ml乙酸乙酯的溶液裝入燒瓶，并置于冰浴冷卻。鼓泡通入無水HCl氣體5分鐘。蒸發(fā)溶液除去過量HCl。將產(chǎn)物溶于水并用乙酸乙酯萃取二次除去上步帶入的二甲基甲酰胺。水相用NaHCO3水溶液堿化，用二氯甲烷萃取二次。合并有機相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。經(jīng)二步制備后的產(chǎn)率0.37g(81％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.8-2.4(m，24H)，2.82(bt，2H)，3.26(m，2H)，3.42(bq，1H)，3.70(m，2H)，4.19(m，2H)，4.49(bd，1H)，5.11(s，2H)，6.9-7.5(m，8H).
(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)將0.18g(0.32mmol)H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)、過量碳酸鉀和10ml乙腈的混合物加熱至60℃反應2hr。蒸去溶劑，粗產(chǎn)物在硅膠閃色譜上用CH2Cl2/甲醇95/5洗脫。收率為0.20g(88％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.8-2.1(m，23H)，2.37(m，1H)，3.1-3.5(m，7H)，4.0-4.2(m，2H)，4.54(m，1H)，5.1(m，4H)，6.9-7.5(m，13H).
(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig×2HCl0.15g(0.21mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)、10ml乙醇、4滴濃鹽酸鹽和少量5％Pd/C的混合物在常壓下氫化1hr，混合物用硅藻土過濾并蒸發(fā)。殘余物用水冷凍干燥得到95mg(64％)產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.85-2.1(m，23H)，2.30(m，1H)，3.10(m，2H)，3.25(m，1H)，3.35(m，1H)，3.54(m，1H)，3.85-4.0(m，3H)，4.03(d，1H)，4.41(m，1H)，4.50(m，1H).13C-NMR(125.8MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ 174.0，168.9，168.1，157.5。
實施例80HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z)向0.25g(0.82mmol)4-氨乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z)(見起始物的制備)、0.31g(0.86mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(見起始物的制備)和0.40g(3.3mmol)二甲基氨基吡啶于10ml乙腈和2ml二甲基甲酰胺的溶液中加入0.17g(0.86mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。攪拌反應3天后蒸發(fā)，并在硫酸氫鉀水溶液和二氯甲烷間分配。二氯甲烷層用NaHCO3水溶液和水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。含有一些二甲基甲酰胺的粗產(chǎn)物無須進一步精制即用于下一步。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ0.85(m，1H)，0.97(m，1H)，1.1-1.75(m，26H；其中1.41(s，9H))，1.82(bd，1H)，2.53(m，2H)，2.77(bt，2H)，3.25(m，2H)，4.03(q，1H)，4.08(m，1H)，4.18(m，2H)，4.29(m，1H)，4.78(m，1H)，4.97(m，1H)，5.09(s，2H)，7.1-7.4(m，7H)，7.65(m，1H)。
(ii)H-(R)Cha-Aze-Rig(Z)將Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z)的粗產(chǎn)物溶于100ml乙酸乙酯的溶液裝入燒瓶，并置于冰浴冷卻，鼓泡通入無水HCl氣體5分鐘。蒸發(fā)溶液除去過量的HCl。將產(chǎn)物溶于水并用乙酸乙酯萃取二次除去上步帶入的二甲基甲酰胺。水相加入NaHCO3(水溶液)堿化，用二氯甲烷萃取二次。合并有機相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)。經(jīng)二步制備后的產(chǎn)率為0.31g( 0％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ0.8-1.9(m，20H)，2.48(m，1H)，2.73(m，1H)，2.85(bt，2H)，3.25(m，1H)，3.35(m，2H)，4.05(q，1H)，4.1-4.25(m，3H)，4.86(m，1H)，5.12(s，2H)，6.9-7.2(m，2H)，7.2-7.45(m，5H)，7.93(m，1H)。
(iii)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)使0.31g(0.57mmol)H-(R)Cha-Aze-Rig(Z)和93mg(0.57mmol)丙烯酸芐酯于5ml乙醇的溶液在室溫下保持一星期。蒸發(fā)，在硅膠閃色譜上用洗脫劑二氧甲烷/甲醇94/6處理，產(chǎn)率0.20g(49％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(m，2H)，1.1-1.8(m，18H)，2.48(m，1H)，2.54(bt，2H)，2.68(m，2H)，2.81(bt，2H)，2.87(m，1H)，3.20(m，1H)，3.25(m，1H)，3.31(m，1H)，4.04(q，1H)，4.1-4.2(m，3H)，4.84(dd，1H)，5.05-5.15(m，4H)，7.0-7.5(m，12H)，8.03(m，1H)。
(iv)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig×2HCl按實施例80中所述之制備和精制方法，將0.20g(0.28mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)制成標題化合物，二鹽酸鹽的產(chǎn)率為30mg(19％)。1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ1.0-1.9(m，20H)，2.33(m，1H)，2.70(m，1H)，2.83(m，2H)，3.10(m，2H)，3.3-3.4(m，4H)，3.85(bd，2H)，3.92(m，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，4.14(t，1H)，4.17(m，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，4.31(m，1H)，4.46(m，1H)，4.89(m，1H)，5.18(m，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)。13C NMR(125.8MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ175.4，171.8，168.8，156.3。
實施例81HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp×2HCl(i)Boc-(R)Pha-Pro-(S)Itp(Ts)在室溫下，將0.87g(2.36mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)、0.78g(4.72mmol)DMAP和0.70g(2.36mmol)H-(S)Itp(Ts)(見起始物的制備)溶于12ml乙腈。攪拌20分鐘后加入0.59g(3.07mmol)EDC。18小時后在真空下除去溶劑，并將殘余物溶于CH2Cl2。用水、檸檬酸(10％)、KHCO3(水溶液)、水洗滌后用Na2SO4干燥。蒸發(fā)得到1.74g(＞100％)產(chǎn)率(純度約為60％)所需產(chǎn)物。此產(chǎn)物無須進一步精制即用于下一步。
FAB-MSm/z＝647(M+＋1)(ii)H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)按所述用于Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)(見實施例72(ii))的方法脫除Boc-保護基，得到0.75g(81％)標題化合物。
FAB-MSm/z＝547(M+＋1)(iii)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)0.75g(1.37mmol)H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)和0.38g(2.74mmol)K2CO3置于15ml乙腈中，加入0.39g(1.65mmol)溴乙酸芐酯并在50℃下攪拌2hr。蒸去溶劑后用洗脫劑乙酸乙酯/甲醇(95/5)進行閃色譜純化，得到530mg所需產(chǎn)物。
FAB-MSm/z＝695(M+＋1)(iv)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp×2HCl0.53g(0.76mmol)BnOOC-CH2-(R)Pha-Pro-(S)Itp(Ts)溶于15ml THF置于燒瓶中，將NH3(氣)冷凝入燒瓶并加Na(m)。30分鐘后用乙酸中止反應并蒸除NH3和THF，殘余物用水冷凍干燥，用RPLC(乙腈/0.1M HOAc 15/85)處理，所得物用HCl水溶液冷凍干燥得到0.25g(61％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(500.13MHz，D2O)；δ0.9-2.09(重疊m，20H)，2.22-2.35(m，1H)，3.2-2.36(m，4H)，3.44-3.62(重疊m，2H)，3.7-3.8(m，1H)，3.87-3.99(m，2H)，4.33-4.48(重疊m，2H)。13C NMR(500.13MHz，D2O)羰基碳和胍碳δ 154.3，168.1，169.0和174.2實施例82H-(R)-Cha-Pro-(R，S)Nig×2HCl(i)Boc-(R)Cha-Pro-(R，S)Nig(Z)在2ml CH2Cl2中混合174mg(0.471mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)、229mg(1.87mmol)DMAP和130mg(0.471mmol)H-(R，S)Nig(Z)(見起始物的制備)，加入117mg(0.61mmol)EDC，攪拌反應4天。混合物用CH2Cl2稀釋，用水洗滌、用0.3M KHSO4溶液洗滌二次，用鹽水洗滌一次。干燥(Na2SO4)有機層、過濾并蒸發(fā)，粗產(chǎn)物先用洗脫劑CH2Cl2/MeOH 95/5進行閃色譜純化，再用洗脫劑CH2Cl2/MeOH 97/3進行閃色譜純化，得到0.104g(35％)標題化合物。
MSm/z＝627(M+＋1)(ii)H-(R)Cha-Pro(R，S)Nig×2HCl將10mg(0.016mmol)Boc-(R)Cha-Pro-(R，S)Nig(Z)溶于15ml用HCl飽和的乙酸乙酯中?；旌衔锉３职胄r后進行蒸發(fā)。將殘余物溶于6ml乙醇并加入8mg5％Pd/C和0.1ml 1M HCl溶液。在常壓下氫化一個半小時，經(jīng)hyflo過濾和蒸發(fā)溶劑，得到4mg標題化合物。1H-NMR(300MHz，D2O)δ0.9-1.58(m，6H)，1.58-2.45(m，13H)，2.65(m，1H)，3.19(m，1H)，3.34(d，2H)，3.4-3.73(m，4H)，3.82(m，1H)，4.34-4.49(m，2H)。13C-NMR(75MHz，D2O)羰基碳和胍碳δ155.1，169.9和174.8。
實施例83H-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl(i)Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)向1.2g(3.31mmol)Boc-(R)Pro-Phe-OH(見起始物的制備)和1.70g(13.91mmol)DMAP于40ml CH3CN的混合物中在室溫下加入0.98g(3.35mmol)H-Pab(Z)(見起始物的制備)溶于1ml DMF的溶液。攪拌2hr后將混合物冷卻至-18℃并分批加入0.66g(3.48mmol)EDC，在室溫下反應過夜。蒸去溶劑并將殘余物溶于100ml EtOAc，用1×30ml水、3×30ml 0.3M KHSO4、1×30ml Na2CO3和1×30ml水洗滌，干燥。蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑CH2Cl2/MeOH(95/5)進行閃色譜處理，得到0.691g(38％)標題化合物。
(ii)H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)將0.673g Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)溶于30ml EtOAc中，溶液用HCl(氣)飽和幾分鐘(溶液出現(xiàn)白色固體沉淀)。蒸去溶劑和過量的HCl，殘余物中加入60ml EtOAc，并用2×20ml 2MNaOH洗滌有機相。洗滌水用1×25ml EtOAc萃取，萃取后的EtOAc與其他EtOAc相合并，合并有機相用水洗滌、干燥和蒸發(fā)，得到560mg(98％)所需產(chǎn)物。1H-NMR(500MHz，CDCl3)51.5-1.74(m，3H)，1.98-2.05(m，1H)，2.78-2.85(m，1H)，2.90-2.96(m，1H)，3.0-3.2(ABX-體系中心在3.1，2H)，3.62(dd，1H)，4.3-4.45(ABX-體系中心在4.37，2H)，4.58(q，1H)，5.22(s，2H)，6.96(bt，1H)，7.1-7.4(m，10H)，7.46(d，2H)，7.76(d，2H)，8.12(d，1H)。
(iii)H-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl將200mg H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)溶于10ml 95％EtOH和2ml水中，混合物在5％Pd/C上常壓氫化hr。濾去催化劑，加入1m1 1M HCl，經(jīng)蒸發(fā)和冷凍干燥脫水，得到88％產(chǎn)率的標題化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ1.51-1.59(m，1H)，1.69-1.80(m，1H)，1.87-1.97(m，1H)，2.19-2.29(m，1H)，2.90(dd，1H)，3.20-3.33(m，3H，被溶劑峰部分掩蓋)，4.27(m，1H)，4.43-4.54(AB-系中心位于4.48，2H)，4.75-4.81(m，1H)，4.87(s，2H)，7.2-7.3(m，5H)，7.45(d，2H)，7.75(d，2H)。13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.7，170.1和173.4。
實施例84HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl(i)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)向244mg(0.463mmol)H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)(見實施例83)和159.9g(1.157mmol)K2CO3于8ml DMF/CH3CN(5/3)的漿液中加入于2ml DMF中的127.2mg(0.555mmol)溴乙酸芐酯，混合物在60℃下攪拌1.5hr，在室溫攪拌過夜。蒸去溶劑，將殘余物溶于50ml EtOAc，用2×20ml水洗滌、干燥(Na2SO4)、蒸發(fā)溶劑，用洗脫劑CH2Cl2/MeOH(g/1)進行閃色譜處理，得到176mg(56％)標題化合物，為白色固體。1H-NMR(300MHz)，CDCl3)δ1.45-1.80(m，3H)，2.06(m，1H)，2.54(m，1H)，2.92-3.28(m，6H)，4.3-4.5(ABX-體系中心在atδ＝4.4，2H)，4.60(dd，1H)，5.10(s，2H)，5.2(形似s，2H)，7.1-7.4(m，15H)，7.43(d，2H)，7.75(d，2H)，7.932(d，1H)。
(ii)HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl將170mg(0.252mmol)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)溶于12ml EtOH/水(5/1)，在5％Pd/C上常壓氫化4.5hr。濾去催化劑，蒸去溶劑，用HCl(水溶液)冷凍干燥殘余物，得到標題化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ1.62(m，1H)，1.82(m，1H)，2.08(m，1H)，2.38(m，1H)，2.90(dd，1H)，3.25-3.35(m，2H)，被溶劑峰部分掩蓋)，3.80(m，1H)，4.08-4.19(AB-體系中心位于δ＝4.19，2H)，4.39(m，1H)，4.45-4.58(AB-體系中心位于δ＝4.50，2H)，4.80(m，1H)，7.20-7.35(m，5H)，7.45(d，2H)，7.75(D，2H)。13C-NMR(125MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166.8，169.1，169.5和173.2。
實施例85H-(R)Phe-Phe-Pab(i)Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)在50ml乙腈中溶入Boc-(R)Phe-Phe-OH(16.4mmol)(見起始物的制備)、Pab(Z)-HCl(18.0mmol)和4-二甲基氨基吡啶(24.6mmol)溶液冷至冰-水溫度并加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(21.3mmol)。撤去冷浴并將反應混合物攪拌過夜。減壓蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于50ml乙酸乙酯中，所得溶液用50ml水萃取。從二相混合物沉淀出的Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)經(jīng)過濾，用水洗滌，在45℃下真空干燥24hr，得到8.7g(78％)。1HNMR(200MHz，d-CHCl3and d4-CH3OH)；δ8.35-7.00(m，19H)，4.63(t.1H)，4.3-4.1(m，1H)，3.40-2.70(m，6H)，1.30(s，9H)。
(ii)H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)將Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(10.3mmol)漿化于70ml乙酸乙酯中，加入31ml 3.3M乙酸乙酯/HCl。攪拌漿液4hr后，將H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)的鹽酸鹽濾出，并用乙酸乙酯洗滌幾遍。用50ml二氯甲烷、50ml 1M碳酸鉀和約5ml乙醇的混合物溶解所得的鹽，收集有機層，減壓除去溶劑，得到5.0gH-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(84％)。1H NMR(200MHz，d6-DMSO)；δ9.1(s，2H)，8.59(m，1H)，8.1(m，1H)，7.90(d，2H)，7.4-7.0(m，17H)，5.09(s，2H)，4.58(m，1H)，4.31(m，2H)，3.1-2.7(m，4H)。
(iii)將H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0.42mmol)溶于10ml四氫呋喃和1ml水中。加入炭載鈀(42mg)后，將混合物置于Parr搖動裝置中于45psi氫壓下氫化2天。氫解反應完成后，用甲醇稀釋混合物并濾去催化劑，蒸發(fā)溶劑，得到H-(R)Phe-Phe-Pab粗品，在中性氧化鋁(70～230目)色譜上用二氯甲烷-甲醇-氫氧化銨(80∶20∶2)沖洗純化，得到76mg(41％)標題化合物。1HNMR(200MHz，d6-DMSO)；δ7.61(d，2H)，7.4-7.0(m，12H)，4.64(m，1H)，4.44(m，2H)，4.13(t，1H)，3.1-2.8(m，4H)。
實施例86HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(i)MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)將H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0.87mmol)(見實施例85(ii))溶于10ml四氫呋喃中。在冰水浴冷卻溶液并先后加入三乙胺(1.73mmol)和甲基草酰氯(0.95mmol)。移去冷卻浴，并將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌18hr。反應混合物用乙酸乙酯稀釋并用水萃取。收集有機相，減壓除去溶劑，得到無須精制即用于下一步的0.45gMeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(78％)。TSP-MS發(fā)現(xiàn)m/z 664(MH+(C37H38N5O7)計算值664)。
(ii)HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)將MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0.68mmol)溶于4ml四氫呋喃和2ml水。加入氫氧化鋰(2.6mmol)，在室溫下攪拌1.5hr。水解反應完成后用25ml水稀釋反應混合物，加入0.5ml乙酸酸化，過濾沉淀物，用水洗滌幾次，在45℃下真空干燥，得到0.40g粗品HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)。粗產(chǎn)物漿化于10ml乙醇和1ml水中。使溶液回流，將其中的不溶性標題化合物濾出，得到0.23gHOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(經(jīng)二步后的得率為41％)。
1H NMR(200MHz，d6-DMSO)；δ8.62(m，2H)，8.41(d，1H)，7.89(d，2H)，7.4-6.9(m，17H)，5.10(s，2H)，4.54(m，2H)，4，34(m，2H)，3.2-2.6(m，4H).
(iii)HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab將HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0.20mmol)漿化于20ml四氫呋喃和5ml水中。加入炭載鈀(52mg)，將混合物置于Parr搖動裝置中，在45psi氫壓下氫化2天。氫解完成后用甲醇40ml稀釋混合物并濾去催化劑。蒸發(fā)溶劑得到50mg標題化合物(49％)。1H NMR(200MHz，d6-DMSO)；δ9.2(s)，8.78(d)，8.60(m)，7.91(m)，7.79(d，2H)，7.3 5-6.8(m，12H)，4.6-4.0(m，4H)，3.0-2.6(m，4H)。
實施例87HOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(i)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)將H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0.87mmol)(見實施例85(ii))和碳酸鉀(2.6mmol)漿化于10ml乙腈中。加入碘代乙酸芐酯(0.95mmol)，反應溶液加熱至30℃并在此溫度下攪拌二天。烷基化結(jié)束后除去溶劑并將殘余物溶于10ml乙酸乙酯。溶液用10ml水快速萃取，標題化合物從合并的有機層中沉淀出來。經(jīng)過濾和45℃真空干燥24hr得到177mg BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(28％)1HNMR(200MHz，CDCl3)；δ7.79(d，2H)，7.5-7.1(m，22H)，6.55(t，1H)，5.21(s，2H)，5.03(s，2H)，4.64(m，1H)，4.41(m 2H)，3.3-2.6(m，7H)。
(ii)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)將BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0.32mmol)漿化于30ml四氫呋喃和3ml水中。加入炭載鈀(41mg)，將混合物置于Parr搖動裝置中，在45psi氫壓下氫化2天。氫解完成后用40ml水稀釋混合物并濾去催化劑，蒸發(fā)溶劑得到95mg標題化合物(59％)。TSP-MS發(fā)現(xiàn)m/z 502(MH+(C28H32N5O4)計算值502)。
實施例88H-(R)Cha-Pro-Mig(i)Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)向攪拌的0.344g(0.93mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)、0.245g(0.93mmol)H-Mig(Z)(見起始物的制備)和0.227g(1.86mmol)DMAP于10ml CH3CN的混合物中。在-10℃下加入0.232g(1.21mmol)EDC。將反應混合物升至室溫并保持5天。蒸去CH3CN并將殘余物溶于EtOAc，用H2O、NaHCO3(水溶液)和鹽水洗滌。有機層用Na2SO4干燥并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度沖洗劑EtOAc/MeOH(95/5至90/10)純化得到0.340g(60％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)將0.34g(0.55mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)溶于經(jīng)HCl(氣)飽和的8ml EtOAc中，在室溫下攪拌10min后滴入10ml飽和KOH水溶液。分層，水相用3×8ml EtOAc萃取。有機相合并后用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并蒸發(fā)制得0.286g(100％)標題化合物。
(iii)H-(R)Cha-Pro-Mig將0.050g(0.132mmol)H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)溶于3mlMeOH，在10％Pd/C上常壓氫化過夜。用硅藻土過濾溶液并蒸發(fā)溶劑，得到0.040g(80％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.92-1.02(m，2H)，1.18-1.47(m，6H)，1.66-1.73(m，4H)，1.85-2.04(m，4H)，2.17-2.22(m，1H)，2.95-2.98(m，1H)，3.12-3.16(m，1H)，3.47-3.55(m，2H)，3.62-3.66(m，1H)，3.75-3.78(m，1H)，3.85-3.89(m，1H)，4.05-4.12(m，3H)，4.34-4.37(m，1H)。次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號出現(xiàn)在δ3.4，3.7，4.13-4.16，4.3。MS m/z379(M+＋1)實施例89H-(R)Cha-Pro-Dig(i)Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)向攪拌的0.280g(0.76mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(見起始物的制備)、0.210g(0.76mmol)H-Dig(Z)(見起始物的制備)和0.186g(1.52mmol)DMAP于8ml CH3CN的混合物中在-10℃下加入0.189g(0.99mmol)EDC。將反應混合物升至室溫并保持4天。蒸去CH3CN，將殘余物溶于EtOAc，用H2O、NaHCO3(水溶液)和鹽水洗滌。有機層用Na2SO4干燥并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物在閃色譜上用梯度洗脫劑EtOAc/MeOH(95/5至90/10)沖洗純化，得到0.210g(44％)標題化合物。
(ii)H-(R)Cha-Pro-Dig(Z)將0.210g(0.33mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)溶于8ml用HCl(氣)飽和的EtOAc中，在室溫下攪拌10min。滴入8ml飽和KOH水溶液，分層水相用3×8ml EtOAc萃取。有機層合并后用鹽水洗滌、用Na2SO4干燥并蒸發(fā)，得到0.146g(83％)標題化合物。
(iii)H-(R)Cha-Pro-Dig將0.046g(0.087mmol)H-(R)Cha-Pro-Dig(Z)溶于3mlMeOH，在10％Pd/C上常壓氫化過夜。用硅藻土過濾溶液并蒸發(fā)溶劑，得到0.040g(100％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.90-1.04(m，2H)，1.10-1.47(m，6H)，1.66-1.74(m，4H)，1.78-2.05(m，4H)，2.13-2.21(m，1H)，2.74-2.83(m，1H)，2.94-2.99(m，1H)，3.15-3.29(m，1H)，3.44-3.57(m，2H)，3.65-3.87(m，3H)，4.07-4.25(m，3H)，4.35-4.39(m，2H)。次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體信號出現(xiàn)在δ 4.29-4.32。MS m/z 393(M+＋1)實施例90H-(R)Cha-Aze-Dig(i)Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z)
按照用于Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)的方法，由Boc-(R)Cha-Aze-OH和H-Dig(Z)(見起始物的制備)制得本標題化合物，產(chǎn)率為0.253g(54％)。
(ii)H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)按照用于Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)的方法，由Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z)制得標題化合物，產(chǎn)率0.210g(100％)。
(iii)H-(R)Cha-Aze-Dig將0.060g(0.117mmol)H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)溶于3mlMeOH，在10％Pd/C上常壓氫化過夜。用硅藻土過濾溶液并蒸發(fā)溶劑，得到0.042g(95％)標題化合物。1H-NMR(500MHz，MeOD)δ0.91-1.02(m，2H)，1.18-1.48(m，6H)，1.66-1.90(m，8H)，2.15-2.17(m，1H)，2.66-2.68(m，1H)，2.80-2.83(m，1H)，3.14-3.29(m，1H)，3.39-3.44(m，1H)，3.72-3.80(m，2H)，4.01-4.04(m，1H)，4.14-4.23(m，2H)，4.48-4.49(m，1H)，4.60-4.64(m，1H)。次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的信號出現(xiàn)在δ2.25，2.6，4.3，4.67。MS m/z 379(M+＋1)。
藥物制備實施例本發(fā)明的化合物可配制成口服固體劑型，例如普通藥片、加膜藥片或改進型緩釋藥片直腸給藥的液體或固體一半固體劑型；腸胃外給藥的親液物或液體，如液體劑或懸浮劑；皮膚表面給藥的液體固體或半固體劑型。
也可配制成用于口或鼻吸入的壓力氣霧劑或干粉吸入劑。
實施例P1口服藥片用下列成分配制成 1000片藥片活性化合物 100g乳糖 200g聚乙烯吡咯烷酮 30g微晶纖維素 30g硬脂酸鎂 6g將活性組份和乳糖與聚乙烯吡咯烷酮的水溶液混合。經(jīng)干燥和碾磨制成顆粒。然后依次摻入微晶纖維素和硬脂酸鎂。所得混合物在制片機上壓制，制得1000片藥片，其中每片含100mg活性成分。
實施例P2非腸道給藥溶液溶液可由下列組份配制而成活性化合物 5g注射用氯化鈉 6g將pH值調(diào)節(jié)至大約5-7的氫氧化鈉注射用水加至1000ml將活性成份和氯化鈉溶于水，用2M NaOH調(diào)節(jié)pH值至pH＝3-9，所得溶液注入無菌安瓿。
實施例P3口服藥片1.活性化合物 150g2.硅鋁酸鈉 20g3.石蠟 120g
4.微晶纖維素20g5.羥丙基纖維素 5g6.硬脂酰基富馬酸鈉 3g將1-4混合并加入5的水溶液。經(jīng)干燥和碾磨后摻入6。所得混合物再用制片機壓制。
實施例B6吸入劑粉末在噴霧式碾磨機中將活性化合物制成顆粒大小適合于吸入的微粒(大部分直徑＜4μm)。
將100mg微粒粉末填入粉劑多次劑量吸入器(multidoseinhaler)(Turbohaler)中，吸入器裝有施劑部件，它輸送1mg劑量。
生物學凝血酶凝結(jié)時間(TT)的測定將pH7.4，100μl人體凝血酶(T6769，Sigma Chem(O)的緩沖溶液和100μl抑制劑溶液培育1分鐘，然后加入100μl郁積的普通檸檬酸化的人體血漿并用自動裝置(KC10，Amelung)測定凝結(jié)時間。
以秒數(shù)計算的凝結(jié)時間對抑制劑濃度作圖，內(nèi)插得到IC50TT。
IC50TT表示使人體血漿凝血酶凝結(jié)時間延長一倍的抑制劑濃度。
激活的部分組織促凝血酶原激酶作用時間(APTT)的測定在郁結(jié)的普通人體檸檬酸化血漿中用Stago制造的試劑PTTAutomated5測定APTT。血漿中加入抑制劑(90μl血漿加入10μl抑制劑溶液)并根據(jù)試劑使用說明書用凝結(jié)作用分析儀(KC10(Amelung)測定APTT。以秒數(shù)計算的凝結(jié)時間對血漿中抑制劑濃度作圖，內(nèi)插得到IC50APTT。
IC50APTT定義為增加激活的部分組織促凝血酶原激酶時間一倍的血漿中抑制劑的濃度。
體外凝血酶作用時間的測定口服化合物后對凝血酶的抑制作用在清醒的鼠上進行，試驗前二天將用于血液取樣的導管插入鼠頸總動脈，試驗當天服用化合物之后定時抽取血樣裝入塑料管中；塑料管盛有1份檸檬酸鈉溶液(0.13mol每升)和9份血液，然后將塑料管離心處理得到血小板缺乏的血漿，用于下述的凝血酶作用時間測定。
100μl含檸檬酸鹽的鼠血漿用100μl 0.9％鹽水稀釋，加入溶于100μl，pH7.4緩沖溶液的人體凝血酶(T6769，Sigma Chem Co，USA)引發(fā)血漿凝固，凝固時間用自動裝置(KC10，Amelung，Germany)測定。
血漿激肽釋放酶抑制常數(shù)Ki的測定在Roche(Basel，瑞士)制造的Cobas Bio離心分析儀上用生色基質(zhì)(Chromogenic Substrate)方法測定Ki。將人體血漿激肽釋放酶和不同濃度的化合物培養(yǎng)后在三種不同基質(zhì)濃度條件下測量殘余酶活性。并在405nm和37℃下檢測吸光度變化。
于含5g/l牛白蛋白(編號810033，ICI Biochemicals Ltd，High，Wycombe，Bucks，GB)的緩沖劑(0.05mol/l Tris-HCl，用NaCl調(diào)節(jié)pH7.4，10.15)中的250μl 0.4nKat/ml人體血漿激肽釋放酶(E.C.3.4.21.34，Chromogenix AB，Mlndal，瑞典)與80μl試驗化合物于含10g/l白蛋白的0.15mol/l NaCl溶液一同培養(yǎng)300S。在這一步中加入10μl水。再加入40μl激肽釋放酶作用物(S-2302，Chromogenix AB，1.25、2.0或4.0mmol/l水溶液)和20μl水。檢測吸光度的變化。
Ki可從Dixon圖，即抑制劑濃度對1(ΔA/min)作圖所得曲線中估算出來，其中不同作用物濃度所得數(shù)據(jù)連成直線，其截距X＝-Ki。
縮略詞Ac＝乙酰基aq＝含水的Aze＝氮雜環(huán)丁烷-2-甲酸betaPiC＝哌啶-3-甲酸Boc＝叔丁氧基羧基Boc-Dig(Z)＝3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-(N-苯氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷Boc-Mig(Z)＝3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-芐氧基羧基脒基)氮雜環(huán)丁烷Boc-Pig(Z)＝4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-芐氧基羰基脒基)哌啶Boc-Pig(Z)2＝4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N，N′-二芐氧基羰基脒基)哌啶Brine＝飽和水/NaCl溶液Bn＝芐基Bu＝丁基Cgl＝環(huán)己基甘氨酸Cha＝β-環(huán)己基氨基丙酸CME-CDI＝1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對-甲苯磺酸鹽DBU＝1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯DCC＝二環(huán)己基碳化二亞胺DCU＝二環(huán)己基脲DMAP＝N，N-二甲基氨基吡啶DMF＝二甲基甲酰胺DMSO＝二甲亞砜EDC＝1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽Et＝乙基EtOAc＝乙酸乙酯EtOH＝乙醇Gly＝甘氨酸h＝小時HCl＝鹽酸Hex＝己基HOAc＝乙酸HOBt＝N-羥基苯并三唑Hoc＝高環(huán)己基氨基丙酸Hop＝高苯基氨基丙酸HOSu＝N-羥基琥珀酰亞胺H-Dig(Z)＝3-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷H-Dig＝3-氨乙基-1-脒基氮雜環(huán)丁烷H-(R，S)Hig(Z)＝(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷H-(R，S)Hig＝(3RS)-1-脒基-3-氨乙基吡咯烷H-Hig＝1-脒基-3-氨乙基吡咯烷H-(R，S)Itp(Ts)＝(4RS)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷H-(R，S)Itp＝(4RS)-1，3-二氮雜-2-亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷H-(S)Itp(Ts)＝(4S)-1，3-二氮雜-2-甲苯磺酰亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷H-(S)Itp＝(4S)-1，3-二氮雜-2-亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷H-Itp＝1，3-二氮雜-2-亞氨基-4-氨乙基環(huán)己烷H-Mig(Z)＝3-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷H-Mig＝3-氨甲基-1-脒基氮雜環(huán)丁烷H-(R，S)Nig(Z)＝(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷H-(R，S)Nig＝(3RS)-1-脒基-3-氨甲基吡咯烷H-Nig＝1-脒基-3-氨甲基吡咯烷H-Pab＝1-脒基-4-氨甲基苯H-Pab(Z)＝4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)苯H-Pac＝1-脒基-4-氨甲基環(huán)己烷H-Pac(Z)＝4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)環(huán)己烷H-Pig＝4-氨甲基-1-脒基哌啶H-Pig(Z)＝4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)-哌啶H-Pig(Z)2＝4-氨甲基-1-(N，N′-二芐氧基羰基脒基)-哌啶H-Rig(Z)＝4-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)-哌啶H-Rig＝4-氨乙基-1-N-脒基哌啶Me＝甲基MeOH＝甲醇Mpa＝兆帕Ms＝甲磺?；鵑MM＝N-甲基嗎啉Pd/C＝炭載鈀Pgl＝苯基甘氨酸Phe＝苯基氨基丙酸Pic＝哌啶酸Pro＝脯氨酸RPLC＝反相高效液相色譜Tf＝三氟甲磺?；鵗FA＝三氟乙酸THF＝四氫呋喃Tic＝1-羧基-1，2，3，4-四氫異喹啉Ts＝二甲苯磺?；鵙al＝纈氨酸Z＝芐氧基羰基詞頭n、i、s和t的意思與平常所用相同，分別為正、異、仲和叔。如無另外說明，則氨基酸的立體化學一般空缺。
縮略詞(接前面，下列結(jié)構(gòu)式中氮原子上的波浪線表示結(jié)構(gòu)片段的鍵合位置。)
權(quán)利要求
1.通式I的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體，或其生理上可接受的鹽類，A1——A2—NH—(CH2)n—B式I其中A1代表式IIa、IIb、IIc、IId或IIe的結(jié)構(gòu)片段 其中k為整數(shù)0、1、2、3或4；m為整數(shù)1、2、3或4；q為整數(shù)0、1、2或3R1代表H、含1至4個碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2；而R17為甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12為H或含1至4個碳原子的烷基；并且R11為H或含1至6個碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2或R1代表-CH2PO(OR15)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各種情況下各自為H、甲基或乙基；R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R21為H或含1至4個碳原子的烷基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶一個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31為H或含1至4個碳原子的烷基，且k為0、1，或；R3代表1-萘基或2-萘基，且k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它們可能被也可能不被-OR31取代，其中R31的定義與前面相同，并且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表H、含1至4個碳原子的烷基、環(huán)己基或苯基；A2代表式IIIa、IIIb或IIIc的結(jié)構(gòu)片段 其中p為整數(shù)0、1或2；m為整數(shù)1、2、3或4；Y代表亞甲基；或Y代表1，2-亞乙基并且產(chǎn)生的五員環(huán)在4位上可帶也可不帶—或兩個氟原子、一個羥基或一個氧代基，或者可以是也可以不是不飽和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有雜原子官能團；或Y代表1，3-亞丙基，并且產(chǎn)生的六員環(huán)在5位上可帶也可不帶一個氟原子、一個羥基或一個氧代基，在4或5位其中之一上可帶也可不帶二個氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不飽和的，或在4位上可以帶也可以不帶一個含1至4個碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3的定義與前相同；R5代表H或含1至4個碳原子的烷基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p為0、1或2，R51為H或含1至4個碳原子的烷基；或n為整數(shù)0、1、2、3或4；B代表一個如式IVa、IVb、IVc或IVd的結(jié)構(gòu)片段 其中r為整數(shù)0或1；X1代表CH2、NH或不存在；X2代表CH2、NH或C＝NH；X3代表NH、C＝NH、N-C(NH)-NH2、CH-C(NH)-NH2、CH-NH-C(NH)-NH2或CH-CH2-C(NH)-NH2；X4代表CH2或NH；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2；X6代表CH或N；R6代表H或含1～4個碳原子的烷基。
2.通式V的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理可接受的鹽類；A1—A2—NH—(CH2)n—B—D式V其中，A1代表式IIa、IIb、IIc、IId或IIe的結(jié)構(gòu)片段； 其中k為整數(shù)0、1、2、3或4；m為整數(shù)1、2、3或4；q為整數(shù)0、1、2或3；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基為R17-(CH2)p-，其中p為0、1或2，R17為COOR12、CONHR12，其中R12代表H或含1至4個碳原子的烷基或芐基；并且R11代表H或含1至6個碳原子的烷基或芐基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定義同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4個碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定義與前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4個碳原子的烷基取代，并且其中R12的定義與前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定義與前面相同，而R14代表含有1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15為含1至4個碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定義與前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定義與前面相同，而p為整數(shù)0、1或2；或R2代表H或含1至4個碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R21為H或含1至4個碳原子的烷基或芐基；R3代表含1至4個碳原子的烷基，所述烷基可能帶也可能不帶—個或多個氟原子；或R3代表環(huán)戊基、環(huán)己基或苯基，它們可能被也可能不被含1至4個碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31為H或含1至4個碳原子的烷基，且k為0、1，或；R3代表1一萘基或2-萘基，且k為0、1；或R3代表一個順式或反式萘烷基團，且k為0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它們可能被也可以不被-OR31取代，其中R31的定義與前面相同，并且k為0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32為環(huán)己基或苯基；R4代表H、含1至4個碳原子的烷基、環(huán)己基或苯基；A2代表式IIIa、IIIb或IIIc的結(jié)構(gòu)片段 其中p為整數(shù)0、1或2；m為整數(shù)1、2、3或4；Y代表亞甲基；或Y代表1，2-亞乙基并且產(chǎn)生的五員環(huán)在4位上可帶也可不帶一或兩個氟原子、一個羥基或一個氧代基，或者可以是也可以不是不飽和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有雜原子官能團；或Y代表1，3-亞丙基，并且產(chǎn)生的六員環(huán)在5位上可帶也可不帶一個氟原子、一個羥基或一個氧代基，在4或5位其中之一上可帶也可不帶二個氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不飽和的，或在4位上可以帶也可以不帶一個含1至4個碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3的定義與前相同；R5代表H或含1至4個碳原子的烷基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p為0、1或2，R51為H或含1至4個碳原子的烷基；或n為整數(shù)0、1、2、3或4；B代表一個如式IVa、IVb、IVc或IVd的結(jié)構(gòu)片段 其中r為整數(shù)0或1；X1代表CH2、NH或不存在；X2代表CH2、NH或C＝NH；X3代表NH、C＝NH、N-C(NH)-NH2、CH-C(NH)-NH2、CH-NH-C(NH)-NH2或CH-CH2-C(NH)-NH2；X4代表CH2或NH；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2；X6代表CH或N；R6代表H或含1～4個碳原子的烷基。D代表Z或(Z)2，Z代表芐氧基羰基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中A1代表式IIa或IIb的結(jié)構(gòu)片段。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中一項或多項的化合物，其中R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R11代表H。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中一項或多項的化合物，其中A2為式IIIa的結(jié)構(gòu)片段。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中一項或多項的化合物，其中A2代表式IIIb的結(jié)構(gòu)片段。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中一項或多項的化合物，其中B代表式IVa的結(jié)構(gòu)片段；其中X1、X2和X4代表CH2，X3代表CH-C(NH)-NH2，r等于1且n等于1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-6中一項或多項的化合物，其中B代表式IVa的結(jié)構(gòu)片段；其中X1、X2和X4代表CH2，X3代表CH-C(NH)-NH2，r等于0或1且n等于1或2。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-6中一項或多項的化合物，其中B代表式IVb的結(jié)構(gòu)片段；其中X5代表C(NH)-NH2，R6代表H，n等于1。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-6中一項或多項的化合物，其中B代表式IVa的結(jié)構(gòu)單元；其中X1和X3代表NH，X2代表C＝NH，X4代表CH2、r等于1，n等于2。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-6中一項或多項的化合物，其中B代表式IVa的結(jié)構(gòu)單元；其中X1不存在，X2和X4代表CH2，X3代表N-C(NH)-NH2，r等于0，n等于1或2。
12.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中n等于1或2；A1代表式IIa所示的結(jié)構(gòu)片段，其中k等于0或1，R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R2代表H，R3代表環(huán)己基；A2代表式IIIa的結(jié)構(gòu)片段，其中Y代表亞甲基、1，2-亞乙基或1，3-亞丙基，并且所產(chǎn)生的六員環(huán)在4位上可以帶也可以不帶含1至4個碳原子的烷基，R5代表HB代表式IVa的結(jié)構(gòu)片段，其中X1、X2和X4為CH2、X3為CH-C(NH)-NH2或N-C(NH)-NH2，r等于0或1，或者X1和X3為NH、X2為C＝NH、X4為CH2，r等于1，或者X1不存在、X2和X4為CH2、X3為N-C(NH)-NH2，r等于0。
13.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中n等于1；A1代表式IIa的結(jié)構(gòu)片段，其中k等于0或1，R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4個碳原子，R2代表H，R3代表環(huán)己基；A2代表式IIIa的結(jié)構(gòu)片段，其中Y代表亞甲基、1，2-亞乙基或1，3-亞丙基并且產(chǎn)生的六員環(huán)在4位上可以帶也可以不帶含1至4個碳原子的烷基，R5代表H；B代表式IVb的結(jié)構(gòu)片段，其中X5代表C(NH)-NH2，R6為H。
14.選自下列物質(zhì)的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理上可接受的鹽類HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-PabH-(R)Cgl-Pic-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-PabH-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-PabH-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/bHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-PabEtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabPh(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-PabH-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(ROrS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CO-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-PabMe-OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-PabH2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-PabBoc-(R)Cha-Pic-PabAc-(R)Cha-Pic-PabMe-SO2-(R)Cha-Pic-PabH-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Val-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-PabH-(R)HOc-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigH-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PacH-(R)Cha-Pro-PacH-(R)Cgl-Ile-PabH-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-PabMeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabH-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PaCHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-PigHOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)ItpH-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpH-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigH-(R)Cha-Pro-(R，S)HigH-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-RigHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ItpH-(R)Cha-Pro-(R，S)NigH-(R)Cha-Pro-MigH-(R)Cha-Pro-DigH-(R)Cha-Aze-Dig
15.選自下列物質(zhì)的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理上可接受的鹽類HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig
16.選自下列物質(zhì)的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理上可接受的鹽類BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/aBnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/bBnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(z)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(z)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Ac-(R)Cha-Pic-Pab(z)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)HOc-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
17.選自下列物質(zhì)的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理上可接受的鹽類BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
18.選自下列物質(zhì)的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理上可接受的鹽類H-(R)Pro-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Pro-Phe-PabH-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab
19.選自下列物質(zhì)的化合物，其自身或其立體異構(gòu)體或其生理上可接受的鹽類Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
20.根據(jù)權(quán)利要求1-19任何一項的化合物的制備方法，所述方法包括用標準方法將N-端保護的氨基酸或二肽或氨基酸與下式化合物本身或其胍基氮或脒基氮用胺保護基單保護或雙保護的形式偶聯(lián)，當采用N-端氨基酸時，隨后加入第二種氨基酸，H2N——(CH2)n——X其中，n為整數(shù)0、1、2、3或4；X代表B或B-D，其中B與式I中的定義相同而D與式V中的定義相同，所述胺保護基例如芐氧羰基、叔丁氧羰基或?qū)妆交酋；换騒代表可轉(zhuǎn)移到B的基團；然后去除保護基團或?qū)-端氮脫保護，之后使N-端氮烷基化；如果需要則用已知方法脫保護，并且如果需要，形成一種生理可接受鹽類；對于反應生成立體異構(gòu)體混合物的情況，可任選標準色譜或重結(jié)晶技術(shù)將它們分離，如果需要，還可分離出單一立體異構(gòu)體。
21.根據(jù)權(quán)利要求20用于制備權(quán)利要求1-19中任何一項的化合物的方法，所述方法包括a)(方法Ia)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的二肽偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V的A1和A2，如下所示 其中n與式I中的定義相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和芐氧基羰基等N-端氨基保護基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等胺保護基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基團隨后轉(zhuǎn)移至脒基或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定義同上，其中當Q1為-NH-W2(W2在這種情況下必須與W1正交)時，W2-基脫保護后，氨基通過本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法隨后轉(zhuǎn)移至胍基(給出Q1＝-NH-C(NH)NH2)；b)(方法Ib)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，偶聯(lián)過程如下 其中n、W1和Q1的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，形成方法Ia所述的保護的肽；c)(方法IIa)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護二肽偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V中的A1和A2，偶聯(lián)過程如下所示 其中n與式I中的定義相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和芐氧基羰基等N-端氨基保護基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等胺保護基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基團隨后轉(zhuǎn)移至脒基；或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定義同上，其中當Q1為-NH-W2(W2在這種情況下必須與W1正交)時，W2-基脫保護后，氨基通過本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法隨后轉(zhuǎn)移至胍基(給出Q1＝-NH-C(NH)NH2)；d)(方法IIb)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，偶聯(lián)過程如下 其中n、W1和Q1的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，形成方法IIa所述的保護的肽；e)(方法IIIa)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的二肽偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V中的A1和A2，偶聯(lián)反應如下所示 其中n與式I中的定義相同；當X1、X2和X4代表CH2時，r為0或1，而當X2和X4代表CH2，X1不存在時，r為0；W1代表如同叔丁氧基羰基和芐氧基羰基等N-端氨基保護基；Q2代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2，其中W2代表如同叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等胺保護基；或者Q2與W2相同，其中在W2基團脫保護后(W2在這種情況下必須與W1正交)，氨基用本技術(shù)領(lǐng)域已知的方法用未保護、N-保護或N，N′-雙保護的胍化試劑轉(zhuǎn)移至胍基；f)(方法IIIb)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，偶聯(lián)反應如下所示 其中n、r、X1、X2和X4，W1和Q2的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，形成方法IIIa所述的保護的肽；g)(方法IVa)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的二肽偶聯(lián)，其中二肽選自式I或V的A1和A2，偶聯(lián)過程如下所示 其中n值與式I中的定義相同；W1代表如叔丁氧基羰基或芐氧基羰基等N-端氨基保護基；W3代表H或如同芳基磺?；⑵S氧基羰基或叔丁氧基羰基等氨基保護基；h)(方法IVb)用標準肽偶聯(lián)方法使N-端保護的氨基酸偶聯(lián)，其中氨基酸選自式I或V中的A2，偶聯(lián)過程如下 其中n、W1和W3的定義與前面相同；隨后對W1-基團脫保護，并用保護形式的N-端氨基酸偶聯(lián)，生成如方法IVa中所述的被保護肽；最終化合物可根據(jù)所用Q1或Q2-基的性質(zhì)由下列途徑之一制得去除保護基(當Q1＝-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2)，或；對W1-基團選擇性脫保護(例如當Q1或Q2＝-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，(W2在這種情況下必須與W1正交)，然后使N-端氮烷基化并根據(jù)需要脫保護。
22.用于治療的根據(jù)權(quán)利要求1-19任何-項的化合物。
23.用作抗凝血劑或抗血栓形成劑的權(quán)利要求1-5或7-17任何一項的化合物。
24.用作消炎藥劑的根據(jù)權(quán)利要求1-4、6-10或18-19中任何一項的化合物。
25.藥物制劑，包括有效量的，與一種或多種藥物載體結(jié)合在一起的權(quán)利要求1-19中任何一項的化合物。
26.藥物制劑，包括有效量的，與一種或多種藥物載體結(jié)合在一起用作抗凝血劑或抗血栓形成劑的權(quán)利要求1-5或7-17中任何一項的化合物。
27.藥物制劑，包括有效量的，與一種或多種藥物載體結(jié)合在一起用作消炎藥劑的權(quán)利要求1-4、6-10或18-1g中任何一項的化合物。
28.權(quán)利要求1-5或7-17中任何一項的化合物作為生產(chǎn)藥物制劑的活性組分的應用，所述制劑用于抑制人或動物機體中的凝血酶。
29.權(quán)利要求1-4、6-10或18-19中任何一項的化合物作為生產(chǎn)藥物制劑的活性組分的應用，所述制劑用于抑制人或動物機體的激肽原酶。
30.一種使需要抑制凝血酶的人或動物機體獲得對凝血酶抑制作用的方法，包括給予所述機體有效抑制劑量的權(quán)利要求1-5或7-17中任何一項的化合物。
31.一種使需要抑制激肽原酶的人或動物機體獲得對激肽原酶的抑制作用的方法，包括給予所述機體有效抑制劑量的權(quán)利要求1-4、6-10或18-19中任何一項的化合物。
32.下式化合物以其自身或其中脒基在N上用保護基單保護或雙保護形式或其鹽類在合成肽類絲氨酸蛋白酶抑制劑，特別是在合成肽類凝血酶抑制劑或肽類激肽原酶抑制劑中作為起始物的應用。
33.下式的結(jié)構(gòu)片段，在藥物活性化合物，尤其是在肽化合物中用作結(jié)構(gòu)單元。
34.化合物4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)苯，其自身或其鹽形式或在其他氮上帶有芐氧基羰基的保護形式。
35.下式化合物以其自身或其脒基在氮上用保護基單保護或雙保護形式或其鹽形式在合成凝血酶抑制劑，特別是在合成肽類凝血酶抑制劑中作為起始物的應用。
36.下式結(jié)構(gòu)片段，在凝血酶抑制劑，尤其是在肽類凝血酶抑制劑中作為結(jié)構(gòu)單元。
37.化合物4-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)環(huán)己烷，其自身或其鹽形式或在其他氮上帶有芐氧基羰基的保護形式。
38.下式化合物，其自身或其脒基在氮上用保護基單保護或雙保護形式或其鹽形式。
39.權(quán)利要求38的化合物在合成絲氨酸蛋白酶抑制劑中作為起始物的應用。
40.下式結(jié)構(gòu)片段，在凝血酶抑制劑，尤其是在肽類凝血酶抑制劑中作為結(jié)構(gòu)單元。
41.下式化合物，其自身或其脒基在氮上用保護基單保護或雙保護形式或其鹽形式。
42.權(quán)利要求41的化合物在合成絲氨酸蛋白酶抑制劑中作為起始物的應用。
43.下式結(jié)構(gòu)片段，在凝血酶抑制劑，尤其是在肽類凝血酶抑制劑中作為結(jié)構(gòu)單元。
44.化合物4-氨乙基-1-芐氧基羰基脒基哌啶，其自身或其鹽形式或在其他氮上帶有芐氧基羰基的保護形式。
45.下式化合物，其自身或其脒基在氮上用保護基單保護或雙保護的形式或其鹽形式， 其中n等于1或2，s等于0或1。
46.權(quán)利要求45的化合物在合成絲氨酸蛋白酶抑制劑中作為起始物的應用。
47.下式的結(jié)構(gòu)片段，在凝血酶抑制劑，尤其是在肽類凝血酶抑制劑中作為結(jié)構(gòu)單元， 其中n等于1或2，s等于0或1。
48.化合物，為(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷、(3RS)-1-(N-芐氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷、3-氨甲基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷或3-氨乙基-1-(N-芐氧基羰基脒基)氮雜環(huán)丁烷，其自身或其鹽形式或在其他氮上帶有芐氧基羰基的保護形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及類胰蛋白酶絲氨酸蛋白酶的新型競爭性抑制劑、它們的合成、含這些化合物作為活性組分的藥物制劑，以及這些化合物作為凝血酶抑制劑，抗血凝劑和消炎性抑制劑在預防和治療相關(guān)疾病中的應用。此外本發(fā)明還描述了在化合物合成中涉及的新化合物、化合物的新用途，特別是新的結(jié)構(gòu)片段，根據(jù)式(I)A
文檔編號C07D239/00GK1127509SQ94192799
公開日1996年7月24日 申請日期1994年6月2日 優(yōu)先權(quán)日1993年6月3日
發(fā)明者K·T·安敦森, R·E·比隆, N·D·古斯塔夫森, N·O·尼爾森 申請人:阿斯特拉公司