專利名稱：立體選擇性糖基化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備2′-脫氧氟代核苷的立體選擇性糖基化方法及該方法的中間體。
對合成2′-脫氧氟代核苷及其同系物的持續(xù)的興趣是基于它們成功地用作治療病毒性疾病和癌癥的治療劑。特別有興趣的化合物是gemcitabine;參見歐洲專利說明書211354和美國專利4526988，由于這些化合物是β核苷，因而需要以高產(chǎn)率提供這類化合物。
合成2′-脫氧氟代核苷的關(guān)鍵步驟是縮合或核堿與糖類的糖基化形成N-糖苷鍵。然而，合成2′-脫氧核苷的方法通常是非立體選擇性的，形成α和β核苷的混合物。例如，美國專利4526988沒有立體選擇地制備2-脫氧-2，2-二氟-β-核苷而制備的是α與β異頭物之比為4∶1的2-脫氧-2，2-二氟核苷。即使完善保護基也不能增加α對β的比例超過1∶1;參見美國專利4965374，其中利用苯甲?；Ｗo糖上的基團。
根據(jù)本發(fā)明提供了一種制備下式的β異頭物富集的核苷的立體選擇性糖基化的方法。
其中T選自氫或氟而R為選自如下基團的核堿
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素;R2選自羥基，鹵素，疊氮基，伯胺基和仲胺基;R3選自氫，烷基，和鹵素;R4，R5和R6獨立地選自氫，-OH，-NH2，N(烷基)，鹵素，烷氧基和硫代烷基;R7選自氫，鹵素，氰基，烷基，烷氧基，烷氧羰基，硫代烷基，硫代甲酰氨基和甲酰氨基;Q選自CH，CR8和N;其中R8選自鹵素，甲酰氨基，硫代甲酰胺基，烷氧羰基和氰基，該方法包括用至少一摩爾當(dāng)量的選自如下的核堿(R″)
其中R1至R7和Q如前定義;Z為羥基保護基;W為氨基保護基;M+為陽離子;進行SN2親核取代下式α異頭物富集的糖的磺酰氧基(Y)，并去保護形成式(Ⅰ)化合物。
其中X獨立地選自羥基保護基而T如前定義。
整個文件中，所有溫度都是攝氏度，所有比例，百分?jǐn)?shù)等是重量單位而所有混合物都是體積單位，除非另有說明。異頭物混合物以重屬或堿土金屬碘化物和/或溴化物。
作為游離基聚合引發(fā)劑有可能使用除有機過氧化物以外的堿或銨的過硫酸鹽、過磷酸鹽、過硼酸鹽和過碳酸酸鹽，還是選擇性地與還原劑一起使用，如堿或銨的亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、連二亞硫酸鹽、亞磷酸鹽、次磷酸鹽，或含亞鐵、亞銅、銀鹽或其它易氧化金屬的鹽。
下列實例可用來說明本發(fā)明。
制備由全氟聚氧化烯和水組成的微乳狀液在裝有攪拌器的玻璃容器中，在輕度攪拌條件下，使14.5ml化學(xué)式如下的化合物與14.5ml 30%(按體積計)的NH4OH混合，所述化學(xué)式為
式中n/m＝10，其平均分子量＝600。然后加入29ml的軟化水。
往所得到的溶液中加8.9ml的產(chǎn)物，該產(chǎn)物的化學(xué)式為
式中n/m＝20，其平均分子量等于450。
或結(jié)合地表示在呋喃核糖基衍生物的C-1位差向異構(gòu)化。
根據(jù)本發(fā)明的糖基化方法，式(Ⅰ)的β-異頭物富集的2′-脫氧-2′，2′-二氟核苷和2′-脫氧-2′-氟核苷通過式(Ⅱ)的α異頭物富集的糖與至少一摩爾當(dāng)量的核堿(R″)反應(yīng)并將所得核苷去保護而制備，如下所式
其中Y，X，T，R″和R如前定義。據(jù)信糖基化反應(yīng)通過SN2取代而進行。因而，本發(fā)明β異頭物富集的核苷產(chǎn)物從核堿與α異頭物富集的糖的反應(yīng)立體選擇性地得到。
適用于制備用于本糖基化方法中的式(Ⅱ)α異頭物富集的糖的乳醇原料在本領(lǐng)域是已知的，并可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員常用的常規(guī)方法容易地合成。例如，此處列為參考的美國專利4526988指示了下式2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖中間體的合成
其中X為羥基保護基。另外，Reichman等，Carbohydr.Res.，42，233(1975)指示了下式2-脫氧-2-氟-D-呋喃核糖中間體的合成。
其中X為羥基保護基。在本發(fā)明方法優(yōu)選的方案中，使用α異頭物富集的2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖-3，5-二苯甲酸酯式(Ⅲ)中間體。
本發(fā)明的關(guān)鍵特征在于發(fā)現(xiàn)新的式(Ⅲ)或(Ⅳ)的α異頭物富集的糖中間體可在利于翻轉(zhuǎn)的親核取代(即SN2)條件下反應(yīng)得到式(Ⅰ)的β異頭物富集的核苷。
為使核堿與式(Ⅱ)α異頭物富集的糖高效地反應(yīng)，應(yīng)有一適當(dāng)?shù)碾x去基(y)立體選擇性地在乳醇上以活化乳醇并生成式(Ⅱ)的α異頭物富集集的糖。然而，離去基根據(jù)所選核堿及所選糖基化反應(yīng)條件而選擇。
式(Ⅱ)α異頭物富集的糖中間體優(yōu)選地通過兩份未決的美國專利申請USSN07/902301和USSN07/902305所述的制備。
USSN07/902301給出制備其中T為氟的α異頭物富集的式(Ⅱ)中間體的立體選擇性方法，即通過式(Ⅲ)的乳醇與pKa8至20的胺堿在低冰點惰性溶劑中反應(yīng)，調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的溫度在-40℃至約-120℃;并加入磺?；噭?br> 胺堿最好選自三乙胺，三丁胺，二丁胺，二乙基甲胺，二甲基乙胺，芐基甲胺，N-甲基嗎啉，三丙胺，二丙基乙胺，N，N-二甲基芐胺，二異丙基乙胺，二乙胺，1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4 0]十一碳烯-7-烯和1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯。所用堿量范圍優(yōu)選地約1摩爾當(dāng)量至約2摩爾當(dāng)量，而更優(yōu)選地約1.2摩爾當(dāng)量至約1.5摩爾當(dāng)量。
反應(yīng)在冰點溫度最好低于-78℃和惰性溶劑中進行。優(yōu)選的溶劑選自二氯甲烷，1，2-二氯乙烷，二氯氟甲烷，丙酮。甲苯，苯甲醚，氯苯，和其混合物。
溶劑混合物的溫度最好低于約-78℃。例如，其中X為苯甲?；氖舰蠡衔镌谑覝丶尤攵燃淄楹腿野分袣v時30分鐘，接著降低溫度。在不同溫度作19F NMR，顯示出溫度降低時離子化的乳糖醇的α與β異頭物的比例增加溫度 α/β比例19℃ 2.0∶1-3℃ 2.3∶1-23℃ 2.5∶1-43℃ 3.0∶1-63℃ 3.6∶1-83℃ 4.4∶1
其中y為磺酸酯基，各個X獨立地選自羥基保護基，用磺酸的共軛陰離子源在升溫時，于惰性溶劑中處理而制備其中T為氟的式(Ⅱ)α異頭物富集的中間體的第二種立體選擇性方法。
磺酸共軛陰離子可從許多本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的來源得到。包括(a)用堿金屬堿如氫氧化鈉，氫化鈉，氫氧化鉀，叔丁醇鉀，甲醇鈉等中和烷基或芳基磺酸如1-甲磺酸，對甲苯磺酸，乙磺酸，對甲苯磺酸，苯磺酸，對溴苯磺酸和樟腦磺酸;
(b)將上述烷基或芳基磺酸用胺堿如三乙胺，三甲胺，N，N-二甲基芐胺或N-甲基嗎啉或用芳香含氮堿如吡啶中和。用此法制備的磺酸共軛陰離子的例子包括甲磺酸三乙銨，甲磺酸三甲銨，甲磺酸N，N-二甲基芐銨，甲磺酸吡啶鎓，對溴苯磺酸三乙銨，對溴苯磺酸四乙銨，對甲苯磺酸四乙銨，對甲苯磺酸吡啶鎓和3-硝基苯磺酸吡啶鎓;更優(yōu)選的是甲磺酸三乙銨;和最后(c)，磺酸共軛陰離子通過2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖與磺酸酐如苯磺酸酐，對溴苯磺酸酐或甲磺酸酐在堿如三乙胺中反應(yīng)就地產(chǎn)生。反應(yīng)產(chǎn)物例如2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲?；?1-甲磺酸酯和甲磺酸三乙銨。
β-異頭物呋喃核糖基磺酸酯和磺酸共軛陰離子在約50℃至約130℃更優(yōu)選地在溶劑混合物的回流溫度下加熱。
適于正位異構(gòu)化方法的溶劑必須是對反應(yīng)條件惰性的;優(yōu)選的有乙腈，1，2-二氯乙烷，1，1，2-三氯乙烷，氯苯，溴苯，二氯溴甲烷，苯甲醚，甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚，甲基叔丁基醚，四氫呋喃，二惡烷，乙酸乙酯，甲苯，二甲苯，吡啶，N-甲基吡咯烷酮，N，N-二甲基甲酰胺，1，3-二甲基-2-咪唑烷酮，N，N-二甲基乙酰胺和其混合物;最優(yōu)選的為苯甲醚，甲苯，甘醇二甲醚，乙腈和其混合物。
選自冠醚或相轉(zhuǎn)移催化劑的催化劑被加入以增加用作磺酸共軛陰離子源的金屬鹽的溶解性和親核性;優(yōu)選的催化劑選自18-冠-6，15-冠-5，12-冠-4和三[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]胺。
本方法在大氣條件下進行，優(yōu)選無水條件，反應(yīng)在約15分鐘至24小時基本完成。所得α-異頭物富集的式(Ⅱ)糖被以約2.3∶1至3.0∶1的α對β的異頭物比制備。
其中T為氫的α異頭物富集的式(Ⅱ)中間體可用相似的方法制備，只是式(Ⅳ)的乳醇被用作原料。
糖基化反應(yīng)通常需要在使用前保護乳醇的羥基以防止其羥基與核堿反應(yīng)，或以某些方式被分解，適用于本發(fā)明以糖基化方法的羥基保護基(X)獨立地選自有機合成化學(xué)中常用的已知保護基。所選擇的每個羥基保護基優(yōu)選地能有效地置于乳醇并且一旦糖基化反應(yīng)完成很容易除去。本專業(yè)已知的羥基保護基描述在Protective Groups inOrganic Chemistry，McOmie Ed.，Plenum Press，New York(1973)，第3章，和Protective Groups in Organic Synthesis，Green，John，J.Wiley & sons，New York(1981)第2章中;優(yōu)選地為成酯基如甲酰基，乙酰基，取代的乙?；；?，丁酰基，新戊酰胺基，2-氯乙?；郊柞；?，取代的苯甲酰基，苯氧羰基，甲氧基乙?；?碳酸衍生物如苯氧羰基，乙氧羰基，叔丁氧羰基，乙烯氧羰基;2，2，2-三氯乙氧羰基和芐氧羰基;成醚烷基如芐基，二苯甲基，三苯甲基，叔丁基，甲氧甲基，四氫呋喃基，烯丙基，四氫噻吩基，2-甲氧乙氧甲基;和成醚甲硅烷基如三烷基甲硅烷基，三甲基甲硅烷基，異丙基二烷基甲硅烷基，烷基二異丙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基，叔丁基二烷基甲硅烷基和1，1，3，3-四異丙基甲硅醚基;氨基甲酰基如N-苯基氨基甲?；蚇-咪唑基氨基甲?；?而更優(yōu)選的為苯甲?；?，一取代的苯甲?；投〈谋郊柞；?，乙?；?，新戊酰基，三苯甲基醚，和成醚硅甲基，尤其是叔丁基二甲基甲硅烷基;最優(yōu)選的為苯甲?；?。
在連接羥基保護基到乳醇上時，使用通常的反應(yīng)條件，并依賴于所選羥基保護基的性質(zhì)。典型的反應(yīng)條件描述于美國專利4526988中。
在本發(fā)明的方法中，相對于所用糖的量，用至少等摩爾量的核堿(R″)。然而，更優(yōu)選地用過量核堿其范圍為1摩爾當(dāng)量至30摩爾當(dāng)量;更優(yōu)選在為約10摩爾當(dāng)量至20摩爾當(dāng)量;最優(yōu)選地約15摩爾當(dāng)量至約20摩爾當(dāng)量。
這里所用核堿(R″)對有機化學(xué)家是公知的，沒有必要討論其合成。然而，為了有用于本糖基化方法、帶有氨基或羥基的核堿或其互變異構(gòu)等同物根據(jù)核堿的性質(zhì)優(yōu)選地含有保護基如伯胺保護基(W)和/或羥基保護基(Z)。保護基防止羥基或氨基在α-異頭物富集的糖上發(fā)生競爭反應(yīng)。保護基在與式Ⅱα-異頭物富集的糖反應(yīng)之前連于核堿(R″)上并隨后除去。連接保護基于核堿上的方法描述于美國專利4526988。
優(yōu)選的嘧啶核堿的氨基保護基(W)選自成醚甲硅烷基如三烷基甲硅烷基，叔丁基二烷基甲硅烷基和叔丁基二芳基甲硅烷基;氨基甲?；缡宥⊙豸驶?，芐氧羰基，4-甲氧基芐氧羰基，和4-硝基芐氧羰基;甲?；?，乙?；郊柞；托挛祯０坊?成醚基如甲氧甲基，叔丁基，芐基，烯丙基和四氫吡喃基;更優(yōu)選地為三甲基甲硅烷基。嘌呤核堿優(yōu)選的氨基保護基(W)選自烷基甲酰氨基，鹵代烷基甲酰氨基和芳基甲酰氨基如 2-三烷基甲硅烷基乙氧基甲基，4-甲氧芐基，3，4-二甲氧芐基，叔丁基，鄰苯二甲酰氨基，四氫吡喃基，四氫呋喃基，甲氧基甲基醚，甲氧基硫代甲基，三苯甲基，新戊酰胺基，叔丁基二甲基甲硅烷基，叔己基二甲基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基，三氯乙氧羰基，三氟乙?；?，萘甲?；柞；?，乙酰基;磺酰胺基如烷基磺酰胺基和芳基磺酰胺基，更優(yōu)選地為新戊酰胺基。除了作為氨基保護基，新戊酰胺基保護還增加典型不溶嘌呤核堿衍生物的溶解性并導(dǎo)引嘌呤堿在9區(qū)域異構(gòu)體相對7區(qū)域異構(gòu)的N-糖苷偶合。
優(yōu)選的嘧啶核堿羥基保護基(Z)選自成醚甲硅烷基如三烷基甲硅烷基;氨基甲?；缡宥⊙豸驶S氧羰基，4-甲氧基芐氧羰基和4-硝基芐氧羰基;碳環(huán)酯如甲酰基，乙?；托挛祯０坊?優(yōu)選的為三甲基甲硅烷基。嘌呤核堿的優(yōu)選羥基保護基(Z)選自成醚基如芐基，叔丁基，三苯甲基，四氫吡喃基，四氫呋喃基，甲氧甲基，三苯甲基;酯基如甲?；阴１；?，新戊酰胺基，苯甲?；?，取代的苯甲酰基;碳酸基如芐氧羰基，叔丁氧羰基，乙氧羰基，乙烯氧羰基;氨基甲?；?，如N，N-二烷基氨基甲?；?三烷基甲硅烷基醚如叔丁基三甲基甲硅烷基，叔己基二甲基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基;更優(yōu)選的為新戊酰胺基。
在對本方法的核堿提供保護基時，保護基本身也被保護。例如，N-乙?；奏た捎萌谆坠柰榛Ｗo得到雙三甲基甲硅烷基-N-乙酰基胞嘧啶。
另外，將核堿上的任何酮氧原子轉(zhuǎn)化成烯醇式通常是可取的。這使得核堿更具芳香性并促進核堿與α異頭物富集的式(Ⅱ)糖的反應(yīng)。最便利的是烯醇化酮氧原子并給它們提供甲硅烷保護基。
盡管并不重要，α異頭物富集的式(Ⅱ)糖與核堿間的反應(yīng)在干燥氣氛，如干燥空氣，氮氣或氬氣中反應(yīng)還是可取的，這是因為某些核堿衍生物如甲硅烷基化的核堿衍生物對濕氣敏感。
任何制備核堿的溶劑都應(yīng)在糖基化反應(yīng)前除去或與反應(yīng)溶劑混合，條件是混合物對糖基化反應(yīng)惰性。
在糖基化反應(yīng)在反應(yīng)溶劑中進行的情況下，溶劑必須是對糖基化反應(yīng)是惰性的。然而，如前面提到的，所用特定反應(yīng)溶劑取決于糖基化反應(yīng)條件(例如反應(yīng)溫度，溶劑)，所用離去基和核堿。
糖基化反應(yīng)可在約170℃至約-120℃的溫度范圍，在大氣條件下進行，并通常在約5分鐘至約20小時基本完成。
本方法的進程可按照本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的方法測定如高壓液相色譜(HPLC)或薄層色譜(TLC)，它們可用于檢測核苷產(chǎn)物的形成。
當(dāng)反應(yīng)在溶液中進行時，優(yōu)選地使用高沸點惰性溶劑和糖濃度至少20%糖的溶液，優(yōu)選糖濃度約20%至約70%，更優(yōu)選約30%至約70%;約30%至約50%最優(yōu)選。合適的反應(yīng)溫度范圍為約70℃至170℃。
高沸點溶劑優(yōu)選地具有高于約70℃的沸點并選自非親核性，芳香性，鹵代烷基，烷氧基和鹵原子取代的芳香性溶劑，和它們的混合物。優(yōu)選的溶劑有1，2-二氯乙烷，1，1，2-三氯乙烷，甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚，甲苯，二甲苯，苯甲醚，二氯溴代甲烷，氯苯，二溴氯代甲烷，三溴甲烷，二溴甲烷，乙腈，丙腈，二噁烷，和其混合物;更優(yōu)選的為苯甲醚。
與高沸點溶劑一起使用的式(Ⅱ)α異頭物富集的糖含有磺酰氧基選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，取代的烷基磺酰氧基和取代的芳基磺酰氧基，如甲磺酰氧基，2-氯-1-乙磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，對硝基苯磺酰氧基和對溴苯磺酰氧基。
優(yōu)選的與高沸點溶劑一起使用的核堿(R″)選自
其中R1，R3，Z和W如前定義。
當(dāng)式(Ⅱ)的α異頭物富集的糖含氟代磺酰氧基時，在高于室溫的溫度下不穩(wěn)定。因而，應(yīng)用這些磺酰氧基的糖基化反應(yīng)必須在室溫或低于室溫的溫度下進行。當(dāng)糖基化反應(yīng)在這些條件下進行時，溶劑必須是低冰點的。優(yōu)選的反應(yīng)溫度范圍為約25℃至約-120℃。在這種情況下，優(yōu)選的溶劑選自二氯甲烷，1，2-二氯乙烷，二氯氟代甲烷，丙酮，甲苯，苯甲醚，氯苯，和其混合物;更優(yōu)選的為二氯甲烷。然而，用于低溫的最適糖基化反應(yīng)溫度取決于離去基(Y)。例如，當(dāng)離去基為三氟甲磺酰氧基時，優(yōu)選的反應(yīng)溫度范圍約-50℃至約25℃;而約-20℃至25℃是更優(yōu)選的。但當(dāng)離去基為1，1，1-三氟乙磺酰氧基，八氟丁磺酰氧基或九氟丁磺酰氧基時，優(yōu)選的反應(yīng)溫度范圍約-20℃至約25℃;而約0℃至25℃是更優(yōu)選的。
優(yōu)選用于低溫條件的核堿(R″)選自
其中R1R2，R3，Z和W定義如前。
核堿(R″)可任意地轉(zhuǎn)化為金屬陽離子鹽以促進其與式(Ⅱ)的α異頭物富集的糖(即陰離子糖基化)的親核反應(yīng)活性。這些核堿陽離子通過在溶劑中經(jīng)核堿加堿而制備。堿選自叔丁醇鈉，氫化鈉，甲醇鈉，乙醇鈉，氫化鋰，氫化鉀，氫氧化鉀，甲醇鉀，乙醇鉀和叔丁醇鉀。另外，堿可選自三烷基胺或四烷基銨。該反應(yīng)合適的惰性溶劑選自乙腈，二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，1，3-二甲基-2-咪唑烷酮，四氫呋喃，四氫噻吩砜，N-甲基吡咯烷酮，二甲亞砜，和其混合物。溶劑在糖基化反應(yīng)之前除去或與糖基化反應(yīng)溶劑混合，條件是混合物對糖基化反應(yīng)基本惰性。合適的反應(yīng)溫度范圍約23℃至約130℃。
核堿(R″)優(yōu)選地選自
其中R1至R7，Q，Z，W和M+如前定義。
在這些條件下式(Ⅱ)的α異頭物富集的糖含有磺酰氧基選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，取代的烷基磺酰氧基，取代的芳基磺酰氧基，氟代烷基磺酰氧基和氟代芳基磺酰氧基如，三氟甲磺酰氧基，1，1，1-三氟乙磺酰氧基，八氟丁磺酰氧基，九氟丁磺酰氧基，甲磺酰氧基，2-氯-1-乙磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，對硝基苯磺酰氧基和對溴苯磺酰氧基。
如前提到的，式(Ⅱ)的氟代磺酰氧基在較高溫度不穩(wěn)定，因而上面金屬陽離子鹽核堿與這些基團的反應(yīng)應(yīng)在低冰點惰性溶劑進行。該反應(yīng)的優(yōu)選溫度范圍約25℃至約-120℃。
糖基化反應(yīng)也可無溶劑進行(即熔融糖基化)。明顯地，所用溫度必須足以將式(Ⅱ)的α異頭物富集的糖中間體和核堿變?yōu)槿刍?。?yōu)選的反應(yīng)溫度范圍為約100℃至約160℃;更優(yōu)選的為約110℃至約150℃;而最優(yōu)選的為約130℃至150℃。
在熔融條件下式(Ⅱ)的α異頭物富集的糖含有磺酰氧基選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，取代的烷基磺酰氧基和取代的芳基磺酰氧基如甲磺酰氧基，2-氯-1-乙磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，對硝基苯磺酰氧基和對溴苯磺酰氧基。
適用于熔融條件的核堿(R″)優(yōu)選地選自
其中R1，R3，Z和W定義如前。
本方法也被催化劑促進。當(dāng)用催化劑時，它顯著地降低所需核堿的量，增加立體選擇性，降低成本，增加產(chǎn)率，簡化產(chǎn)品的分離，并降低反應(yīng)所需溫度，允許使用低熱穩(wěn)定性的糖。因而，本方法最適用于含有非親核性陰離子的鹽催化劑。優(yōu)選的有ⅠA族，ⅡA族或季銨鹽。催化劑應(yīng)溶于反應(yīng)溶劑并高度離子化。優(yōu)選的鹽催化劑選自三氟甲磺酸，九氟丁磺酸，硫酸，高氯酸，硝酸，和三氟乙酸的鉀，鋇，銫和三烷基銨鹽;更優(yōu)選的為三氟甲磺酸的鉀或銫鹽。合適的反應(yīng)溫度范圍為約50℃至約100℃。
溶劑優(yōu)選地選自極性，非親核性溶劑如甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚，苯甲醚，乙腈，丙腈，二噁烷，和它們的混合物;而更優(yōu)選的為乙腈。
在催化條件下式(Ⅱ)α異頭物富集的糖優(yōu)選地含有磺酰氧基選自烷基磺酰氧基和芳基磺酰氧基如，甲磺酰氧基，2-氯-1-乙磺酰氧基，甲苯磺酰氧基，對硝基苯磺酰氧基和對溴苯磺酰氧基。
在催化條件下所用的核堿(R″)優(yōu)選地選自
其中R1，R2，R3，Z和W定義如前。
反應(yīng)程序的最后階段是從式(Ⅰ)被保護的核苷中除去保護基X，Z和/或W(即去保護)。經(jīng)除去保護基得到相同異頭物比的核苷。
大部分甲硅烷基和甲硅烷基-氨基保護基很容易通過用質(zhì)子性溶劑如水或醇裂解。?；Ｗo基，如苯甲?；王；?氨基保護基通過用強堿在0℃至約100℃的溫度水解除去。適用于此反應(yīng)的強或中強堿為pKa(于25℃)約8.5至約20.0堿。這類堿包括堿金屬氫氧化物如氫氧化鈉或鉀;堿金屬醇鹽如甲醇鈉或叔丁醇鉀;堿金屬氨化物;胺如二乙胺，羥胺，氨等;和其它普通堿如肼等。對每個保護基需要至少一當(dāng)量堿。
酰基保護基也可用酸催化劑，如甲磺酸，鹽酸，氫溴酸，硫酸，或用酸性離子交換樹脂除去。在相對高溫如混合物回流溫度進行這類水解是優(yōu)選的，但用特別強酸時可用低如室溫的溫度。
醚保護基的除去通過已知方法，例如，用乙硫醇和氯化鋁進行。
叔丁基二甲基甲硅烷基保護基的除去需要酸性條件，如與氣體鹵化氫接觸。
保護基的除去通常在醇溶劑，尤其是含水烷醇如甲醇中進行。但去保護反應(yīng)也在普通溶劑，如多醇包括乙二醇，醚如四氫呋喃，酮如丙酮和甲乙酮，或二甲亞砜中進行。
在優(yōu)選的方案中，去保護反應(yīng)用氨在約10℃的溫度下除去苯甲?；u基-保護基。然而在此反應(yīng)中用過量的堿是優(yōu)選的，盡管所用過量堿的數(shù)量并非關(guān)鍵性的。
根據(jù)本方法，β異頭物富集的核苷被以α對β異頭物比大于1∶1至約1∶9制備。
所得的式(Ⅰ)β異頭物富集的核苷可如美國專利4965374(在此列為參考)所述從反應(yīng)混合物提取和/或分離。
下面實施例舉例說明本發(fā)明特定的方面，但并不在任何方面限制其范圍，且不能這樣解釋。
實施例1用10當(dāng)量雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶通過將2.44g胞嘧啶、5.15ml六甲基二硅氮烷和580mg硫酸銨與5ml二甲苯混合并將溶液在120℃回流1小時而制備。加入另外5ml六甲基二硅氮烷形成均相溶液，將其回流30分鐘。除去二甲苯和過量六甲基二硅氮烷形成膠狀雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶。5.6g雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶解在20ml二甲苯中，除去二甲苯而雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶再溶解在20ml二甲苯中。將雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶蒸發(fā)至干并再溶解在5ml二甲苯中。1g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液在127℃反應(yīng)3.5小時，HPLC分析證實反應(yīng)完成。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷至60℃，用100ml乙酸乙酯稀釋并用200ml 1N鹽酸洗滌，出現(xiàn)乳狀液，并將形成的兩層分開。有機層依次用100ml5%碳酸氫鈉，和100ml飽和氯化鈉溶液洗滌，然后用硫酸鎂干燥。乙酸乙酯層的定量HPLC分析表明保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為50%。保護的核苷的β與α異頭物比為2.2∶1。
實施例2用5當(dāng)量雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向2.8g雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶中加入3ml二甲苯、將溶液加熱至120℃直至雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶解。1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯溶于2ml二甲苯中，加熱并與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液在130℃反應(yīng)16小時。HPLC分析表明反應(yīng)完成。保護的核苷β與α異頭物比為1.1∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物用150ml乙酸乙酯稀釋并用150ml 1N鹽酸洗滌。出現(xiàn)乳狀液并將形成的兩層分開。有機層依次用100ml水，和100ml5%碳酸氫鈉洗滌，然后用硫酸鎂干燥。為了更精確的HPLC分析，將1ml有機層蒸發(fā)至干并溶于1ml乙腈中。定量HPLC分析乙腈中的有機層表明保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為36%。
實施例3用15當(dāng)量雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮鹽酸鹽雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶通過將18.33g胞嘧啶和10ml苯甲醚與64.3ml N-甲基-N-(三甲基甲硅烷基)-三氟乙酰胺混合并將溶液在80℃加熱30分鐘而制備。5.0g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯溶于10ml苯甲醚與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液在105℃反應(yīng)5小時。HPLC分析表明反應(yīng)完成。保護的核苷的β與α異頭物比為5.4∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷至60℃，用75ml乙酸乙酯稀釋，并用200ml 1N鹽酸洗滌。形成含有固體微粒的半清亮溶液。將溶液溫?zé)嶂?0℃-70℃15分鐘，過濾，分離固體并隨后用20ml乙酸乙酯洗滌，然后在真空爐于40℃干燥16小時。產(chǎn)生的核苷產(chǎn)物重4.0g，m.p.252-256。定量HPLC分析表明產(chǎn)物為保護的β-異頭物核苷的鹽酸鹽，產(chǎn)率為75%。
實施例4用10當(dāng)量雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶通過實施例1中所述方法制備，只是用20g胞嘧啶，380ml六甲基二硅氮烷，1.18g硫酸銨和48ml二甲苯。雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶于24ml二甲苯中。9.6g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-甲苯磺酸酯(70∶30的α與β比，)溶于24ml二甲苯并與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)1小時。HPLC分析表明反應(yīng)完成。
為了提取核苷產(chǎn)物，反應(yīng)混合物冷至65℃并加入100ml乙酸乙酯。溶液保持在65℃并用200ml 1N鹽酸洗滌。出現(xiàn)乳狀液并將形成的兩層分開。有機層用200ml5%碳酸氫鈉洗滌然后用無水硫酸鎂干燥。保護的核苷β與α異頭物比為1.1∶1。定量HPLC分析表明保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為27%。
實施例5用20當(dāng)量雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶通過在氮氣下將30g胞嘧啶、與175ml六甲基二硅氮烷和25mg硫酸銨混合并將溶液在120℃加熱2小時?；旌衔锢渲?0℃并用100ml乙酸乙酯稀釋。六甲基二硅氮烷和乙酸乙酯隨后在145℃常壓蒸餾。將此過程重復(fù)兩次然后將所得雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶加到15ml苯甲醚中并冷至110℃-115℃。5.75g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(溶于10ml苯甲醚中)在45℃攪拌直到形成均相溶液并與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液在115℃-120℃反應(yīng)7小時。HPLC分析表明反應(yīng)完成。保護的核苷β與α異頭物比為7.3∶1。
為分離核堿產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷至88℃，用34ml乙酸乙酯稀釋并用125ml4N鹽酸洗滌。形成含固體微粒的漿狀物并在80℃攪拌1.5小時并過濾。濾液用50ml4N鹽酸洗滌并在45℃于真空烘箱中干燥。所得核苷產(chǎn)物重4.6g。定量HPLC分析表明保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為79.5%。
實施例6用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮鹽酸鹽通過實施例5所述的方法制備雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶。將溶液冷至100℃。溶于10ml苯甲醚的5.75g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯在45℃攪拌直到形成均相溶液并與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液在110℃-115℃反應(yīng)16小時。HPLC分析表明只有3.9%未反應(yīng)的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯保留。保護的核苷β與α異頭物比為7.2∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻并用69ml乙酸乙酯在65℃稀釋。反應(yīng)混合物然后與185ml4N鹽酸混合?；旌衔镌?8℃回流1小時形成漿狀物。過濾漿狀物，固體用60ml4N鹽酸洗滌并在真空烘箱中于45℃干燥。核苷產(chǎn)物重3.62g，定量HPLC分析表明產(chǎn)物為保護的β-異頭物核苷鹽酸鹽，產(chǎn)率為64.2%。
實施例7用15當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基腺嘌呤制備β-異頭物富集的9-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-5-氨基嘌呤通過將7g腺嘌呤和109ml六甲基二硅氮烷與250mg硫酸銨混合并將混合物在110-115℃加熱8小時制備雙三甲基甲硅烷基腺嘌呤。溶液再回流30分鐘并隨后除去過量的六甲基二硅氮烷，14.5g雙-三甲基甲硅烷基腺嘌呤溶于3ml苯甲醚中。1.58g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯與雙-三甲基甲硅烷基腺嘌呤溶液在105℃-110℃反應(yīng)24小時。HPLC分析表明反應(yīng)完成。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷至30℃用50ml乙酸乙酯稀釋并用75ml4N鹽酸洗滌。出現(xiàn)乳狀液并將形成的兩層分開，有機層依次用75ml5%碳酸氫鈉和75ml飽和氯化鈉溶液洗滌，然后用硫酸鎂干燥。保護的核苷的β與α異頭物比為6∶1。
下表顯示了糖濃度和所選糖如何影響核苷產(chǎn)物的異頭物比表堿(R*) α/β溶劑糖 堿(R*) 當(dāng)量溫度糖濃度核苷比產(chǎn)率二甲苯 α-OMs 胞嘧啶 1.5 127℃ 20% 1.5:1 14%β二甲苯 α-OMs 胞嘧啶 1.5 127℃ 50% 1.5:1 15%β二甲苯 α-OMs 胞嘧啶 5 130℃ 20% 1:1.1 36%β二甲苯 α-OMs 胞嘧啶 10 127℃ 50% 1:2.2 50%β二甲苯 α-OMs 胞嘧啶 10 120℃ 20% 1:1.6 32%β二甲苯 50:50 胞嘧啶 1.5 125℃ 50% 3:1 12%βα/β-OMs苯甲醚 α-OMs 胞嘧啶 2 105℃ 20% 1.3:1 18%β苯甲醚 α-OMs 胞嘧啶 3 105℃ 50% 1:1.3 22%β苯甲醚 α-OMs 胞嘧啶 15 105℃ 50% 1:5.4 75%β(a)苯甲醚 α-OMs 5-F-胞嘧啶 10 115℃ 50% 1:6 N/D苯甲醚 α-OMs 5-F-尿嘧啶 5 130℃ 50% 1:6 N/D二甲苯 70:30 胞嘧啶 3 123℃ 20% 1.7:1 6%βα:β-OTs二甲苯 70:30 胞嘧啶 5 125℃ 20% 1.7:1 N/Dα:β-OTs二甲苯 70:30 胞嘧啶 10 125℃ 20% 1:1.1 27%βα:β-OTs二甲苯 70:30 胞嘧啶 10 125℃ 20% 1.3:1 23%βα:β-OTs二甲苯 85:15 N-乙?；? 5 110℃ 20% 1:1 N/Dα:β-OBs 胞嘧啶苯甲醚 α-OMs 胞嘧啶 20 115℃ 25% 1:7.3 79.5%β(a)苯甲醚 α-OMs 腺嘌呤 15 110℃ 50% 1:6 N/D苯甲醚 α-OMs 胞嘧啶 20 115℃ 25% 1:7.2 64%β
(N/D)表示未測定。糖(Carbo.)為被保護的羥基并包括α-或β-OMs，為α-或β-2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-甲磺酸酯;β-或α-OTs為β-或α-2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-甲基磺酸酯;α-或β-OBs為α-或β-2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-溴苯甲磺酸酯。通過用對甲苯磺酸鹽的正位異構(gòu)化β-OTs得到70∶30 α∶β-OTs糖。產(chǎn)率以糖的量為基礎(chǔ)并從定量反相HPLC分析計算、其中相應(yīng)的溶液產(chǎn)品峰與標(biāo)準(zhǔn)樣1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮對照，只有(a)是分離的產(chǎn)物產(chǎn)率。(＊)糖濃度(Carbo.Conc.)為百分?jǐn)?shù)單位，每單位體積溶劑(毫升)糖的重量(克)。每個實施例中的核堿保護基為三甲基甲硅烷基。
實施例8用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向5.78g胞嘧啶中加入112ml六甲基二硅氮烷和100mg硫酸銨。攪拌下將此溶液加熱至115℃-120℃1.5小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷。將混合物冷卻至60℃并在40ml1，2-二氯乙烷中溶解形成均相的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液。
向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.54ml三乙胺。將此溶液在23℃攪拌30分鐘冷卻至-78℃，與0.57ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯中間體溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯中間體在65℃的19F核磁共振(NMR)提供如下數(shù)據(jù)19F NMR(300MHz，CDCl3)，δ-77(s，3F，CF3SO2-)，-111(d，J＝257Hz，1F，α-異頭物)，-122(d，J＝242Hz，1F，β-異頭物)，-124(d，J＝257Hz，1F，α-異頭物)，-126ppm(d，J＝242Hz，1F，β-異頭物)。應(yīng)注意所有19F NMR位移都是相對于六氟苯，它被指定在-162.9ppm的頻率。19F NMR譜也指示氟-質(zhì)子偶合，但這些偶合的性質(zhì)沒有測定。
α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液在-65℃與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)，反應(yīng)溫度可升至23℃以形成標(biāo)題的被保護核苷，它被HPLC分析證實。被保護的核苷的β與α異頭物比為1.9∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入100ml二氯甲烷和200ml1N鹽酸。分出有機層并用200ml5%碳酸氫鈉洗滌。再分出有機層并用200ml飽和氯化鈉洗滌。從有機層中沉淀出標(biāo)題核苷產(chǎn)物。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷產(chǎn)率為42%。
1H NMR(DMSO)δ＝4.74(4′H)，4.79(5′H)，5.84(5H)，5.88(3′H)，6.44(1′H)，7.56(NH2)，7.68(6H).13C NMR(DMSO)δ＝63.46(5′C)，71.80(3′C)，75.71(4′C)，84.64(1′C)，95.12(5C)，121.86(2′C)，141.93(6C)，154.48(2C)，165.87(4C).
實施例9用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液通過將5.78g胞嘧啶懸浮于75ml二氯甲烷中并加入20.57ml N-甲基-N-三甲基甲硅烷基三氟乙酰胺制備，將所得溶液冷卻至-30℃。
向1g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.55ml三乙胺。將此溶液在23℃攪拌30分鐘，冷卻至-78℃，與0.57ml三氟甲磺酸酐的1.0ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在-30℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β-異頭物與α-異頭物之比為2.3∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入200ml1N鹽酸，分出有機層并用5%碳酸氫鈉洗滌。有機層的定量HPLC分析表明被保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為45%。
實施例10用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液通過實施例8所述方法制備并冷至-15℃。
向1g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.54ml三乙胺。將此溶液在23℃攪拌30分鐘，冷卻至-78℃，與0.57ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在-15℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β與α-異頭物之比為2.3∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，除去二氯甲烷，并將所得剩余物再溶于21ml苯甲醚和40ml水中，然后加熱至90℃。從溶液中除去生成的固體。分離有機層和水層，有機層隨后用另外10ml水洗滌。β-異頭物富集的核苷產(chǎn)物從有機層中沉淀出來。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷產(chǎn)率為58%。
實施例11用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液通過將5.78g胞嘧啶懸浮于20ml二氯甲烷中并加入20.57ml N-甲基-N-三甲基甲硅烷基三氟乙酰胺的10ml二氯甲烷溶液而制備，并將所得溶液冷至0℃。
向1g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.55ml三乙胺。將此溶液在23℃攪拌30分鐘，冷卻至-78℃，與0.57ml三氟甲磺酸酐的1.0ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在0℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.5∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入250ml1N鹽酸，分出有機層用200ml5%碳酸鈉洗滌，有機層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為49%。
實施例12用10當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基-N-乙酰基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-乙酰氨基嘧啶-2-酮往4g N-乙?；奏ぶ屑尤?6ml六甲基二硅氮烷和698mg硫酸銨。此溶液在攪拌下加熱至115℃-120℃4小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷。將混合物冷至50℃并溶于50ml1，2-二氯乙烷中，除去1，2-二氯乙烷。將固體殘余物溶于50ml 1，2-二氯乙烷中，再除去1，2-二氯乙烷，形成油狀殘余物，將油狀殘余物溶于2.5ml1，2-二氯乙烷形成均相的雙-三甲基甲硅烷基-N-乙?；奏と芤骸?br> 往1g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入2ml無水二氯甲烷。該溶液冷至-78℃并與0.55ml三乙胺和0.58三氟甲磺酸酐反應(yīng)形成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液在23℃與雙三甲基甲硅烷基-N-乙酰基胞嘧啶溶液反應(yīng)。反應(yīng)混合物在-60℃攪拌1.5小時形成標(biāo)題被保護的核苷，它被HPLC分析證實。被保護的核苷的β與α異頭物之比為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入50ml二氯甲烷。分出有機層并依次用50ml5%碳酸氫鈉然后50ml 1N鹽酸和50ml飽和氯化鈉洗滌。有機層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為15%。
實施例13用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮往5.78g胞嘧啶中加入112ml六甲基二硅氮烷和50mg硫酸銨，此混合物在攪拌下加熱至115℃-120℃3小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷，將溶液冷至27℃并將形成的固體殘渣再溶于35ml二氯甲烷中形成均相雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液。
往1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.54ml三乙胺。該溶液冷至-78℃并與0.57ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)形成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液，小心保持反應(yīng)混合物溫度低于-65℃。α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液在27℃與雙-三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)。形成標(biāo)題被保護的核苷，它被HPLC分析證實并表明11%的α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯保持未反應(yīng)。被保護的核苷β與α異頭物比為2.2∶1。定量HPLC分析表明保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為54%。
實施例14用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向5.78g胞嘧啶中加入112ml六甲基二硅氮烷和50mg硫酸銨。攪拌下將此溶液加熱至115℃-120℃2小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷。將所得的油狀物冷卻至23℃形成固體殘余物，此殘余物在35ml二氯甲烷中溶解形成均相的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液并冷卻至0℃。
向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入9ml二氯甲烷和0.54ml三乙胺，將此溶液冷卻至-78℃，與0.57ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液，小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在23℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，用150ml 1N鹽酸洗滌反應(yīng)混合物兩次，分離出有機層，用150ml5%碳酸氫鈉洗滌，再用150ml飽和的氯化鈉洗滌。有機層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為49%。
實施例15用30當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向5.9g胞嘧啶中加入112ml六甲基二硅氮烷和25mg硫酸銨。攪拌下將此溶液加熱至120℃-125℃3小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷。將所得的固體殘余物溶于35ml二氯甲烷中并冷卻至10℃形成均相的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液。
向655mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入0.55ml二氯甲烷和0.36ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌30分鐘，冷卻至-78℃，與0.35ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在10℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.7∶1，定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷和產(chǎn)率為60%。
實施例16用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向5.78g胞嘧啶中加入112ml六甲基二硅氮烷和50mg硫酸銨。攪拌下將此溶液加熱至115℃-120℃1.5小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷。在23℃下將所得的固體殘余物溶于40ml1，2-二氯甲烷中形成均相的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液。
向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和1.2ml三乙胺。將此溶液冷卻至-78℃。與0.57ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在23℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.8∶1。定量HPLC分析表明被保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為50%。
實施例17用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向5.78g胞嘧啶中加入112ml六甲基二硅氮烷和50mg硫酸銨。攪拌下將此混合物加熱至115℃-120℃1.5小時，接著除去過量的六甲基二硅氮烷。在23℃下將所得的固體殘余物溶于40ml二氯甲烷中形成均相的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液。
向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.54ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌30分鐘，冷卻至-78℃。與0.57ml三氟甲磺酸酐的0.50ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在23℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.5∶1，定量HPLC分析表明被保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率為68%。
實施例18用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向5.78g胞嘧啶中加入5ml二氯甲烷，20.6ml N-甲基-N-三甲基甲硅烷基三氟乙酰胺和5ml二氯甲烷生成均相的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液。
向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入3ml二氯甲烷和0.55ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌30分鐘，冷卻至-78℃。與0.57ml三氟甲磺酸酐的1ml二氯甲烷溶液反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。在23℃下使α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液反應(yīng)生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所證實。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.5∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入250ml 1N鹽酸。分離出有機層，用250ml5%碳酸鈉洗滌。有機層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為50%。
下表表示溶劑、嘧啶核苷衍生物的摩爾當(dāng)量對異頭物比值和核苷產(chǎn)物的產(chǎn)率的影響。
表(R*)(R*) 堿 α/β β溶劑 堿 當(dāng)量 溫度 核苷比 產(chǎn)率二氯甲烷 胞嘧啶 20 -25℃ 1:2.5 44%二氯甲烷 胞嘧啶 20 -30℃ 1:2.3 45%二氯甲烷 胞嘧啶 20 0℃ 1:2.5 49%二氯甲烷 胞嘧啶 20 23℃ 1:2.2 49%二氯甲烷 胞嘧啶 20 23℃ 1:1.8 31%&1,2-二氯乙烷二氯甲烷 胞嘧啶 20 23℃ 1:1.9 42%&1,2-二氯乙烷二氯甲烷 胞嘧啶 20 23℃ 1:2.8 50%&1,2-二氯乙烷二氯甲烷 胞嘧啶 20 23℃ 1:2.5 68%二氯甲烷 胞嘧啶 20 -15℃ 1:2.3 58%二氯甲烷 胞嘧啶 20 27℃ 1:2.2 54%二氯甲烷 胞嘧啶 20 23℃ 1:2.2 49%二氯甲烷 胞嘧啶 30 10℃ 1:2.7 60%二氯甲烷 胞嘧啶 1.5 23℃ 1:1 17%二氯甲烷 胞嘧啶 3 23℃ 1:1.3 6%&1,2-二氯乙烷二氯甲烷 尿嘧啶 2 -20℃ 1:1 N/D&1,2-二氯乙烷二氯甲烷 胞嘧啶 3.5 -78℃ 1.3:1 10%二氯甲烷 N-乙?；? 10 -60℃ 1:2 15%&1,2-二氯乙烷胞嘧啶1,2-二氯乙烷 胞嘧啶 10 -78℃ 1:3 28%二氯甲烷 胞嘧啶 10 0℃ 1:2.5 32%二氯甲烷 5-F- 15 23℃ 1:1 N/D尿嘧啶在表中用于制備被保護的核苷的糖類是α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯。(N/D)意指未測定。產(chǎn)率是基于糖類的量并由定量反相HPLC分析進行計算，其中相應(yīng)的溶液產(chǎn)物峰與標(biāo)準(zhǔn)樣進行對照。上述核苷堿的保護基是三甲基甲硅烷基。
實施例19β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮將胞嘧啶(12.0g)，六甲基二硅氮烷(60ml)和硫酸銨(10mg)在125℃下回流30分鐘形成均相溶液。蒸餾除去六甲基二硅氮烷形成雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶。在80℃、在九氟-1-丁烷磺酸鉀(0.5g)存在下，將2-脫氧-2′，2′-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯(1.15g)與雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq)的苯甲醚(2ml)和乙腈(3ml)溶液反應(yīng)16小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時的產(chǎn)率為33%，標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為3∶1。
實施例20用硫酸鉀制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在80℃下，在硫酸鉀(0.5g)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq.)的乙腈(2.0ml)溶液反應(yīng)72小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時的產(chǎn)率為65%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為4.7∶1。
實施例21用三氟甲磺酸四丁基銨制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在80℃下、在三氟甲磺酸四丁基銨(1.5mmol)(通過用三氟甲磺酸(0.13ml)處理四丁基氫氧化銨(1.5ml 1摩爾濃度甲醇溶液)，然后蒸餾除去甲醇，而現(xiàn)場制備)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯(0.29ml)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq.)的乙腈(3.0ml)溶液反應(yīng)4小時。HPLC分析表明當(dāng)時產(chǎn)率為45%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為7.1∶1。
實施例22用硫酸鋇制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在75℃下、在硫酸鋇(1.0g)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq.)的乙腈(3.0ml)溶液反應(yīng)20.5小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時的產(chǎn)率為36%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為11.2∶1。
實施例23用硫酸銫制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在75℃下、在硫酸銫(1.0g)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq.)的乙腈(3.0ml)溶液反應(yīng)21小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時的產(chǎn)率為24%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為14.9∶1。
實施例24用三氟甲磺酸銫制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在75℃下、在三氟甲磺酸銫(通過用過量的碳酸銫處理0.13ml三氟甲磺酸現(xiàn)場制備)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq.)的乙腈(3.0ml)溶液反應(yīng)20.5小時、HPLC分析表明反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時產(chǎn)率65%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為7.2∶1。
實施例25用三氟甲磺酸鋇制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在75℃下、在三氟甲磺酸鋇(通過用過量的碳酸鋇處理0.13ml三氟甲磺酸現(xiàn)場制備)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.89g，10eq.)的乙腈(3.0ml)溶液反應(yīng)20.5小時、HPLC分析表明當(dāng)時產(chǎn)率為25%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為14.4∶1。
實施例26用三氟甲磺酸鉀制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在75℃下、在三氟甲磺酸鉀(通過用碳酸鉀(1.0g)處理0.26ml三氟甲磺酸現(xiàn)場制備)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯(2.3g，12.6eq.)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(16.1g)的乙腈(8.0ml)溶液反應(yīng)45小時、HPLC分析表明當(dāng)時產(chǎn)率為69.8%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為7.2∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻在70℃至80℃之間，與40ml4N鹽酸合并。將沉淀出的產(chǎn)物過濾并干燥。定量HPLC分析表明分離產(chǎn)率為62.4%。
實施例27用三氟甲磺酸鉀制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在90℃下，在三氟甲磺酸鉀(通過用碳酸鉀(1.0g)處理0.26ml三氟甲磺酸現(xiàn)場制備)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(2.3g，)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(16.1g，12.6eq.)的丙腈(8.0ml)溶液反應(yīng)21小時、HPLC分析確證反應(yīng)已完成。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為6.7∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻在70℃至80℃之間，與40ml4N鹽酸合并。將沉淀出的產(chǎn)物過濾并干燥。定量HPLC分析表明分離產(chǎn)率為59.3%。
對比實施例28無催化劑下制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.09g，10eq.)的苯甲醚(4ml)溶液在110℃下反應(yīng)20小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時的產(chǎn)率為77%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為3.4∶1。
對比實施例29無催化劑下制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮在85℃下，在三氟甲磺酸銫(通過用過量的碳酸銫處理0.13ml三氟甲磺酸現(xiàn)場制備)存在下，將2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯(1.15g)與實施例19所述制備的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶(6.08g，10eq.)的丙腈(4ml)溶液反應(yīng)20小時、HPLC分析確證反應(yīng)已完成并表明當(dāng)時產(chǎn)率為70%。標(biāo)題化合物的β異頭物與α異頭物之比為6.7∶1。
實施例30用2當(dāng)量的2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤向100mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入1ml二氯甲烷和0.036ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.045ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備185mg2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤的1.5ml乙腈懸浮液并保持無水。將65mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽。將此鹽冷卻至0℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層。用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-和α-異頭物核苷的總產(chǎn)率為42%。
實施例31用2當(dāng)量的2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤在23℃下，向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入0.55ml三乙胺和8.33ml二氯甲烷。將混合物冷卻至-78℃，與在0.50ml二氯甲烷中的0.53ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)，生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯-1-三氟甲磺酸酯溶液。小心保持反應(yīng)混合物的溫度低于-65℃。
在氮氣氛下，制備1.85g，2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤的30ml乙腈懸浮液并保持無水。將651mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌15分鐘，生成2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽。將此鹽懸浮液加到20ml無水二氯甲烷中，冷卻至0℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至23℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入50ml乙酸乙酯和50ml 1N鹽酸。分出有機層，用50ml5%碳酸氫鈉洗滌。分出有機層，用50ml飽和的氯化鈉水溶液洗滌，用硫酸鎂干燥。
實施例32用2當(dāng)量的6-氯嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)]-6-氯嘌呤向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備155mg6-氯嘌呤的3ml乙腈懸浮液，并保護無水。將130mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘。生成6-氯嘌呤鉀鹽，將此鹽懸浮液冷卻至0℃，與2mlα-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題被保護的核苷，它被HPLC分析確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為27%。
實施例33用2當(dāng)量的2，6-二氯-3-脫氮雜嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二氯-3-脫氮雜嘌呤向1.4g2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備82mg2，6-二氯-3-脫氮雜嘌呤的1.5ml乙腈懸浮液并保持無水。將49mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成2，6-二氯-3-脫氮雜嘌呤鉀鹽。將此鹽冷卻至0℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至20℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.5∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的總產(chǎn)率為21%，mp127℃-129℃。
實施例34用2當(dāng)量的2，6-二氯嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二氯嘌呤向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備220mg2，6-二氯嘌呤的3ml乙腈的懸浮液并保持無水。將130mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成2，6-二氯嘌呤鉀鹽將此鹽冷卻至0℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.5∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為22%。
實施例35用2當(dāng)量的3-乙氧基羰基-1，2，4-三唑鉀鹽制備β-異頭物富集的1-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-3-乙氧羰基-1，2，4-三唑向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備164mg三唑酯的3ml乙腈懸浮液，并保持無水。將131mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成3-乙氧羰基-1，2，4-三唑鉀鹽將此鹽冷卻至0℃，與2ml α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌40分鐘并加熱至15℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2.5∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為14%。
實施例36用2當(dāng)量的2-氨基-6-氯嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2-氨基-6-氯嘌呤向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備197mg2-氨基-6-氯嘌呤的3ml乙腈懸浮液并保持無水。將130mg叔丁醇加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成2-氨基-6-氯嘌呤鉀鹽，將此鹽冷卻至0℃，與2ml α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入100ml乙酸乙酯。10ml水，形成沉淀，濾出沉淀，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為14%。
實施例37用2當(dāng)量的2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤向3.78g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入30ml二氯甲烷和1.39ml三乙胺。將此溶液在23℃攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與1.68ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備6.99g 2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤的100ml乙腈懸浮液并保持無水。將2.46mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，在40℃真空干燥至恒重，生成2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽，將此鹽懸浮液加到100ml二氯甲烷中，冷卻至0℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入500ml乙酸乙酯，20ml冰，20ml 1N鹽酸和35ml飽和的氯化鈉水溶液，分出有機層，用25ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、25ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。被保護的核苷的β與α異頭物之比為1.8∶1。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為28%，mp.
238℃-239℃。
實施例38用2當(dāng)量的6-新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)]-6-新戊酰氨基氨基嘌呤向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備255mg6-新戊酰氨基氨基嘌呤的3ml乙腈懸浮液，并保持無水。將131mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成6-新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽，將此鹽懸浮液冷卻至0℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-和α異頭物核苷的總產(chǎn)率為28%。
實施例39用2當(dāng)量的8-溴-7-氰基-7-脫氮雜-6-新戊酰氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-8-溴-7-氰基-7-脫氮雜-6-新戊酰氨基嘌呤向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備187mg8-溴-7-氰基-7-脫氮雜-6-新戊酰氨基嘌呤的3ml乙腈懸浮液并保持無水。將65mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，生成8-溴-7-氰基-7-脫氮雜-6-新戊酰氨基嘌呤鉀鹽，將此鹽懸浮液冷卻至0℃，與1ml α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至20℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之以為2∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β-和α異頭物核苷的總產(chǎn)率為24%。
實施例40在各種反應(yīng)溶劑中用2當(dāng)量的2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤向1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入10ml二氯甲烷和0.36ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.45ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備1.85g 2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤的30ml乙腈懸浮液并保持無水。將0.65mg叔丁醇鉀到懸浮液中，并將所得混合物在25℃下攪拌10分鐘，生成2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽，將鹽懸浮液在40℃下真空干燥形成恒重的白色固體。在氮氣氛，0℃下將207mg嘌呤鹽懸浮于1.5ml下表中編號A-F所示的溶劑中，與1ml α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液，攪拌1小時并加熱至0℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比列于下表中。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用2ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。定量HPLC分析表明被保護的β異頭物核苷的產(chǎn)率列于下表中β/α β編號 溶劑 核苷比 產(chǎn)率(%)A 四氫呋喃 1.3:1 45B 甲苯 1.8:1 49C 乙酸乙酯 1.6:1 47D 二氯乙烷 2.1:1 55E 叔丁醇 3.5:1 53F 乙腈 1.6:1 40
實施例41用2當(dāng)量的2-乙酰氨基-6-二苯基氨基甲酰氧基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2-乙酰氨基-6-二苯基氨基甲酰氧基嘌呤向1.4g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入14ml二氯甲烷和0.515ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-40℃，與0.621ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備2.56g 2-乙酰氨基-6-二苯基氨基甲酰氧基嘌呤的50ml熱的二甲基甲酰胺溶液并保持無水。將溶液冷卻至25℃。加入0.74g叔丁醇鉀。將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，蒸發(fā)至油狀物，將其用乙醚研制，收集在過濾器上，在40℃下真空干燥，得到2-乙酰氨基-6-二苯基氨基甲酰氧基嘌呤鉀鹽。將496mg嘌呤鹽懸浮于3ml二氯甲烷中，冷卻至5℃，與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1小時并加熱至25℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。被保護的核苷的β異頭物與α異頭物之比為1.8∶1。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml水，1ml 1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液、5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。被保護的β異頭物-核苷的產(chǎn)率為5.8%。
實施例42用7當(dāng)量的2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽制備β-異頭物富集的9-[1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)]-2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤向100mg 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯中加入3ml二氯甲烷和0.036ml三乙胺。將此溶液在23℃下攪拌15分鐘，冷卻至-78℃，與0.045ml三氟甲磺酸酐反應(yīng)生成α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-三氟甲磺酸酯溶液。
在氮氣氛下，制備1.85g 2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤的30ml乙腈懸浮液并保持無水。將0.65mg叔丁醇鉀加到懸浮液中，并將所得混合物在23℃下攪拌10分鐘，在40℃下真空干燥生成2，6-二新戊酰氨基氨基嘌呤鉀鹽將此鹽冷卻至-78℃，在23℃下將嘌呤鹽與α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-三氟甲磺酸酯溶液反應(yīng)，攪拌1.5小時并加熱至22℃，生成標(biāo)題的被保護的核苷，它被HPLC分析所確證。
為了從反應(yīng)混合物中提取核苷產(chǎn)物，加入25ml乙酸乙酯，1ml冰，1ml1N鹽酸和2ml飽和的氯化鈉水溶液。分出有機層，用5ml飽和的碳酸氫鈉水溶液，5ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。被保護的核苷的β-和α-異頭物之比為2.7∶1。
實施例43用3當(dāng)量雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮通過將292mg胞嘧啶與2ml六甲基二硅氮烷，11mg硫酸銨和5ml二甲苯混合，然后將該溶液回流1小時形成均相溶液，從而制得雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶。除去過量的二甲苯和六甲基二硅氮烷得到熔融殘余物雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶。將溶于2ml二甲苯中的400mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯加到熔融的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶中，除去二甲苯。將反應(yīng)混合物的溫度保持在160℃15分鐘。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，被保護的核苷產(chǎn)物的α異頭物與β異頭物之比為1∶1.3。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻，用50ml乙酸乙酯稀釋，用50ml 1N鹽酸洗滌。
實施例44用3當(dāng)量雙三甲基甲硅烷基尿嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-酮嘧啶-2-酮通過將295mg尿嘧啶與5ml六甲基二硅氮烷，11mg硫酸銨和10ml1，2-二氯乙烷混合，制備雙三甲基甲硅烷基尿嘧啶。將該溶液加熱至110℃1小時形成均相溶液。除去過量的二甲苯和六甲基二硅氮烷，形成熔融的雙三甲基甲硅烷基尿嘧啶。將200mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯加到熔融的雙三甲基甲硅烷基尿嘧啶。將反應(yīng)混合物的溫度保持在150℃2小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成。被保護的核苷產(chǎn)物的α異頭物與β異頭物之比為1∶1.8。為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻，用50ml乙酸乙酯稀釋，用50ml1N鹽酸洗滌。
實施例45用10當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮向1.12g熔融的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶中加入200mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯。將反應(yīng)混合物的溫度保持在130℃1小時。HPLC分析確證反應(yīng)已完成。被保護的核苷產(chǎn)物的β異頭物與α異頭物之比為1.7∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物用100ml乙酸乙酯稀釋，用100ml1N鹽酸洗滌。有機層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率是50%。
實施例46用3當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基-N-乙?；奏ぶ苽洇?異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-乙酰氨基嘧啶-2-酮向500mg雙三甲基甲硅烷基-N-乙?；奏ぶ屑尤?80mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯。將反應(yīng)混合物的溫度保持在108℃3小時。HPLC分析確證已反應(yīng)完成。被保護的核苷產(chǎn)物和β-異頭物與α異頭物之比為1.4∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻，用25ml乙酸乙酯稀釋，用25ml1N鹽酸洗滌。水層用30ml乙酸乙酯洗滌。乙酸乙酯層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率是34%。
實施例47用3當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基-N-乙?；奏ぶ苽洇?異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-乙酰氨基嘧啶-2-酮向393mg熔融的雙三甲基甲硅烷基-N-乙?；奏ぶ屑尤?00mg2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-甲磺酸酯。將反應(yīng)混合物的溫度保持在110℃1小時。被保護的核苷產(chǎn)物的β-異頭物與α異頭物之比為2.3∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物用40ml乙酸乙酯稀釋，用25ml1N鹽酸洗滌。有機層的定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率是27%。
實施例48用20當(dāng)量的雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮通過將4.9g胞嘧啶與90ml六甲基二硅氮烷，581mg硫酸銨和2ml二甲苯混合，然后將該溶液加熱2小時形成均相液，從而制得雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶。除去過量的六甲基二硅氮烷得到白色殘余物。將溶于5ml乙腈中的1g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-甲磺酸酯加到雙三甲基甲硅烷基胞嘧啶溶液中，除去乙腈，真空下將反應(yīng)混合物的溫度保持在130℃1小時，HPLC分析確證反應(yīng)已完成。被保護的核苷產(chǎn)物的β異頭物與α異頭物之比為3.9∶1。
為了提取核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物用100ml二氯甲烷稀釋，順次用100ml1N鹽酸、200ml5%碳酸氫鈉、200ml飽和的氯化鈉洗滌。有機層用硫酸鎂干燥、過濾并蒸發(fā)得到1.03g黃色固體。定量HPLC分析表明被保護的β-異頭物核苷的產(chǎn)率為43%。
下表表示選擇的糖類、反應(yīng)溫度和核堿的摩爾當(dāng)量對核苷產(chǎn)物的產(chǎn)率和異頭物之比的影響。
表堿糖類堿(R1) (R1) 溫度 α/β 產(chǎn)率當(dāng)量 核苷比1:1α:β-OMs 胞嘧啶 1.5 130℃ 3:1 N/Dα-OMs 胞嘧啶 3.0 160℃ 1:1.3 N/Dα-OMs 胞嘧啶 10.0 130℃ 1:1.7 50%βα-OMs 尿嘧啶 3.0 150℃ 1:1.8 N/Dα-OMs N-乙?；? 3.0 115℃ 1:1.4 34%β胞嘧啶α-OMs N-乙酰基- 3.0 110℃ 1:2.3 27%β胞嘧啶α-OMs -胞嘧啶 20.0 130℃ 1:4 43%β(N/D)意指未測定，糖類(carbo.)是被保護羥基的。α-或β-OMs是α-或β-2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-甲磺酸酯，β-或α-OTs是β-或α-2，2-二氟-2-脫氧-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-甲苯磺酸酯，產(chǎn)率是基于糖類的總量并由定量反相HPLC分析進行計算，其中相應(yīng)的溶液產(chǎn)物峰與標(biāo)準(zhǔn)樣即1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-4-氨基嘧啶-2-酮進行對照，在每個實施例中核苷堿保護基是三甲基甲硅烷基。
實施例49在乙腈中制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-4-新戊酰氨基嘧啶-2-酮將N-新戊酰氨基胞嘧啶(1.0g，5.5mmol)懸浮于乙腈(15.0ml)中，用叔丁醇鉀(0.062g，5.5mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成N-新戊?；奏も淃}。
將在乙腈(10.0ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-(對溴苯)磺酸酯(2.99g，5.0mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在65℃反應(yīng)5.5小時，生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為3.9∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物分散在乙酸乙酯和水中，有機層用碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥。柱層析(硅膠，甲苯/乙酸乙酯6∶4)得到0.700g標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為20%;;m.p.
191℃-193℃。
實施例50在乙腈中制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-4-(N-新戊酰氨基)氨基嘧啶-2-酮將N-新戊酰氨基胞嘧啶(0.098g，0.5mmol)懸浮于乙腈(1.5ml)中，用叔丁醇鉀(0.062g，0.55mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成N-新戊?；奏も淃}。
將在乙腈(1.5ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-碘(0.244g，0.5mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在60℃反應(yīng)24小時，生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為1.13∶1。
實施例51在乙腈中制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-1，2，4-三唑-3-腈將1，2，4-三唑-3-腈(0.101g，1.03mmol)懸浮于乙腈(10ml)中，用氫化鈉(0.0445g，1.12mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成相應(yīng)的三唑鈉鹽。將在乙腈(10ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-溴(0.451，1.02mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在82℃反應(yīng)78小時，生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為1.2∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，蒸發(fā)反應(yīng)混合物形成油狀固體，用乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮。殘余物由乙醇結(jié)晶得到30mg標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為6%;m.p.225℃-226℃。
MS(FD)M/Z455(M+1)，元素分析C22H16F2N4O5(理論值)C，58.15;H，3.55;N，12.33;
(實測值)C，58.36;H，3.79;N，12.10。
實施例52在乙腈中制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-1，2，4-三唑-3-腈將1，2，4-三唑-3-腈(0.272g，2.89mmol)懸浮于乙腈(20ml)中，用氫化鈉(0.094g，2.7mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成相應(yīng)的三唑鈉鹽。
將在乙腈(20ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-碘(0.941，1.9mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在82℃反應(yīng)48小時，生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為3.5∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，蒸發(fā)反應(yīng)混合物形成油狀固體，用乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮。殘余物由乙醇結(jié)晶得到0.421g標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為48%;m.p.225℃-226℃。MS(FD)M/Z455(M+1)，元素分析C22H16F2N4O5
(理論值)C，58.15;H，3.55;N，12.33;
(實測值)C，58.35;H，3.65;N，12.33。
實施例53在N，N-二甲基乙酰胺中制備(9)區(qū)域異構(gòu)體-β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-6-氰基嘌呤將6-氰基嘌呤(0.92g，6.35mmol)懸浮于N，N-二甲基乙酰胺(12ml)中，用氫化鈉(0.396g，8.25mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成6-氰基嘌呤鈉鹽。
將在N，N-二甲基乙酰胺(4ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-碘(3.09g，6.35mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在70℃反應(yīng)5小時，生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為1.2∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻，真空除去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯中，用0.2M氯化鋰溶液洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮。柱層析(硅膠，甲苯/乙酸乙酯9∶1)得到0.21g標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為6.5%。MS(FD)506(M+1)元素分析C25H17F2N5O5理論值C，59.41;H，3.39;N，13.86;
實測值C，59.85;H，3.49;N，13.48。
實施例54在N，N-二甲基乙酰胺中制備(9)區(qū)域異構(gòu)體-β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-2，6-(二新戊酰氨基)二氨基嘌呤將2，6-(二新戊酰氨基)二氨基嘌呤(0.159g，0.5mmol)懸浮于N，N-二甲基乙酰胺(1.0ml)中，用叔丁醇鉀(0.062g，0.55mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成2，6-(二新戊酰基)二氨基嘌呤鉀鹽。
將在N，N-二甲基乙酰胺(0.5ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-(對溴苯)磺酸酯(0.299g，0.5mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在60℃反應(yīng)6小時，生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為1.9∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物冷卻，真空除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯稀釋，用碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥，并濃縮得到油狀物。柱層析(硅膠，甲苯/乙酸乙酯1∶1)得到0.141g α和β核苷產(chǎn)物，產(chǎn)率為28%。MS(FD)679(M+1)實施例55在乙腈中制備(9)區(qū)域異構(gòu)體-β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-2，6-(二新戊酰氨基)二氨基嘌呤將2，6-(二新戊酰氨基)二氨基嘌呤(0.159g，0.5mmol)懸浮于乙腈(1.5ml)中，用叔丁醇鉀(0.062g，0.55mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成2，6-(二新戊酰氨基)二氨基嘌呤鉀鹽。
將在乙腈(1.5ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-碘(0.244g，0.5mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在60℃反應(yīng)16小時，生成被保護核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物α異頭物之比為2.2∶1。
為了分離核苷產(chǎn)物，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，有機層用碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥，分離并濃縮得到油狀物。柱層析(硅膠，甲苯/乙酸乙酯1∶1)，接著重結(jié)晶得到0.085g標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為25%，MS(FD)679(M+1)。
實施例56在N，N-二甲基乙酰胺中制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-D-呋喃核糖基)-4-(芐氨基)嘧啶-2-酮將N-芐基胞嘧啶(0.099g，0.493mmol)懸浮于N，N-二甲基乙酰胺(2.0ml)中用氫化鈉(0.0256g，0.534mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成N-芐基胞嘧啶鈉鹽。
將在N，N二甲基乙酰胺(1.5ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲?；?1-α-碘(0.201g，0.411mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在23℃反應(yīng)5小時)生成被保護核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為1.9∶1。
真空下除去反應(yīng)溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯中，用碳酸氫鈉洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮得到油狀物。柱層析(硅膠，甲苯/乙酸乙酯9∶1)得到0.015mg標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為6.5%。MS(FD)562(M+2)。
實施例57在N，N-二甲基乙酰胺中，制備β-異頭物富集的1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?D-呋喃核糖基)-1，2，4-三唑-3-羧酸乙酯將1，2，4-三唑-3-羧酸乙酯(0.723g，5.13mmol)懸浮于N，N-二甲基乙酰胺(2.5ml)中，用氫化鈉(0.123g，5.13mmol)處理，在氮氣氛、25℃下攪拌，生成三唑鈉鹽。
將在N，N-二甲基乙酰胺(2.5ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-α-碘(2.0g，4.11mmol)加到上述鹽中，將全部混合物在23℃反應(yīng)24小時生成被保護的核苷。HPLC分析確證反應(yīng)已完成，并表明β異頭物與α異頭物之比為3∶1。
通過在減壓下除去溶劑，使用柱層析(硅膠，甲苯/乙酸乙酯9∶1)來純化粗反應(yīng)混合物。被保護的核苷的α和β區(qū)域異構(gòu)體(以下的A和B)的總產(chǎn)率為67%(理論產(chǎn)率)。
A1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲?；?β-D-呋喃核糖基)-1，2，4-三唑-3-羧酸乙酯(436mg，產(chǎn)率21.2%)。
將“A”由乙酸乙酯-異辛烷中重結(jié)晶，得到267mg純β-異頭物，產(chǎn)率為13%。
B1-(2′-脫氧-2′，2′-二氟-3′，5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃核糖基)-1，2，4-三唑-5-羧酸乙酯(855mg，產(chǎn)率41.5%)。
實施例58在二甲基乙酰胺中制備β-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-1-β-(2-氨基-6-氯嘌呤)在0℃，氮氣氛下向2-氨基-6-氯嘌呤(82.6mmol，14.0g)的二甲基乙酰胺(900ml)懸浮液中，加入粉狀氫氧化鉀(99.12mmol，5.55g)。將混合物攪拌30分鐘形成溶液。加入在二甲基乙酰胺(450ml)中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰-1-α-碘(82.6mmol，40.31g)。使反應(yīng)加熱至室溫，在氮氣氛下攪拌過夜。
通過加入乙酸乙酯和鹽水提取產(chǎn)物，有機層依次用1N HCl，飽和的碳酸氫鈉溶液、H2O和鹽水洗滌。然后將有機層用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)。
用硅膠層析純化粗產(chǎn)物得到2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酰基-1-(2-氨基-6-氯嘌呤)的β異頭物與α異頭物之比為3∶1。1H NMR(300 MHZ，CD3OD)，δ4.68(m，2H，4′-H，5′a-H)，4.90(m，1H，5′b-H)，6.02(m，1H，3′-H)，6.29(m，1H，1′-H)，7.53(m，6H，Bz)，7.92(s，1H，8′-H)，8.05(m，4H，Bz).
在0℃通過將二苯甲?；虚g體(0.49mmol，260mg)懸浮于甲醇中，用無水氨飽和混合物，從而使二苯甲?；虚g體脫保護，將所得溶液加熱至室溫并攪拌過夜。然后將溶液用氮氣沖洗并蒸發(fā)。通過用非極性溶劑如二氯甲烷洗滌，除去苯甲酸酯副產(chǎn)物，從而純化標(biāo)題產(chǎn)物。通過反相HPLC分出β異頭物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)，
3.90(m，3H，4′-H，5′-H)，4.58(m，1H，3′-H)，6.27(dd，1H，1′-H)，8.31(s，1H，8-H).
制備1α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲酰基-1-甲磺酸酯向2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯(40mg)的CD2Cl2(0.5ml)溶液中加入三乙胺(0.025ml)。在室溫下攪拌30分鐘后將全部混合物冷卻至-78℃，然后加入甲磺酰氯(0.01ml)。將反應(yīng)溫度保持在-78℃和-80℃之間30分鐘，然后加熱至室溫。HPLC分析表明反應(yīng)已完成。通過19F NMR分析測定，標(biāo)題化合物的異頭物之比是4∶1(α與β之比)。
制備2α-異頭物2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲?；?1-甲磺酸酯向2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二苯甲酸酯(60g，95%純度)的二氯甲烷(600ml)中加入三乙胺(31.5ml，1.5eq)。在室溫攪拌30分鐘，將混合物冷卻至-78℃。5分鐘后，將在二氯甲烷(140ml)中的甲磺酰氯(14ml，1.2eq)加到混合物中，在氮氣氛下將反應(yīng)溫度保持在-78℃至-80℃之間1小時。HPLC分析表明反應(yīng)已完成。通過HPLC分析測定，標(biāo)題化合物的異頭物之比(α∶β)為3.53∶1。
為了分離標(biāo)題化合物，將反應(yīng)混合物用水，1N HCl溶液和5%碳酸氫鈉溶液(每次300ml)洗滌。分出有機層，用無水硫酸鎂干燥。得到標(biāo)題化合物(31.5g)，產(chǎn)率為46%，mp88-89℃;[α]D(C1.01，CHCl3)+84.2°;[α]365nm+302.0°元素分析C20H18O8SF2理論值C 52.63;H 3.98;F 8.33;
S 7.02(456.4)實測值C 52.92;H 3.82;F 8.33S 7.30。
1H NMR(CDCl3)δ＝3.17(CH3)，4.66和4.76(C-5H)，4.84(C-4H)，5.57(C-3H)，6.13(C-1H);13C NMR(CDCl3)δ＝40.22(CH3)，62.51(C-5H)，71.03(C-3H;Jc，F(xiàn)＝18.3，38.5Hz)，82.75(C-4H)，99.59(C-1H;Jc，F(xiàn)＝25.5，48.3Hz)，122.24′(C-2H;Jc，F(xiàn)＝259，286HZ)。
制備例3α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲?；?1-甲磺酸酯向2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲?；?1-甲磺酸酯(1.0g，97%β異頭物)的乙腈(10ml)的異頭物混合物中，加入N，N-二甲基芐銨甲磺酸鹽(100mg)。將混合物攪拌并加熱回流，用HPLC分析測定標(biāo)題產(chǎn)物的α與β之比如下時間(小時) α/β0 1∶3216 1.0∶1.424 2.3∶1.0制備4α-異頭物富集的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲?；?1-甲磺酸酯將在二氯甲烷和乙酸正丙酯中的2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲?；?1-甲磺酸酯(29.1g，50%β異頭物)的異頭物混合物加熱至90℃，除去二氯甲烷。將混合物冷卻至50℃-60℃，加入三乙胺(5.33ml，0.55eq.)和甲磺酸(2.04ml，0.55eq.)和乙酸正丙酯(2ml)混合物。將所得混合物加熱至95℃-97℃并攪拌。該混合物含有23.2g 2-脫氧-2，2-二氟-D-呋喃核糖基-3，5-二-O-苯甲酰基-1-甲磺酸酯。用HPLC分析測定標(biāo)題產(chǎn)物的α與β之比如下時間(小時) α/β4 3∶權(quán)利要求
1.制備下式β異頭物富集的核苷的方法
其中T選自氫或氟而R為選自如下基團的核堿
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素；R2選自羥基，鹵素，疊氮基，伯胺基和仲胺基；R3選自氫，烷基和鹵素；R4，R5和R6獨立地選自氫，-OH，-NH2，N(烷基)，鹵素，烷氧基和硫代烷基；R7選自氫，鹵素，氰基，烷基，烷氧基，烷氧羰基，硫代烷基，硫代甲酰氨基和甲酰氨基；Q選自CH，CR8和N；其中R8選自鹵素，甲酰胺基，硫代甲酰胺基，烷氧羰基和氰基，該方法包括用至少一摩爾當(dāng)量的選自如下的核堿(R″)
其中R1至R7和Q如前定義；Z為羥基保護基；W為氨基保護基；M+為陽離子；進行SN2親核取代下式α異頭物富集的糖的磺酰氧基(Y)，并去保護形成式(Ⅰ)化合物；
其中X獨立地選自羥基保護基而T如前定義。
2.權(quán)利要求1的方法，其中R″選自
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素;R3選自氫，烷基和鹵素;Z為羥基保護基;而W為氨基保護基;其中Y選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基、取代的烷基磺酰氧基和取代的芳基磺酰氧基;反應(yīng)在糖濃度高于20%的溶液中進行;其中溶劑為高沸點惰性溶劑。
3.權(quán)利要求1的方法，其中R″選自
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素;R2選自羥基，鹵素，疊氮基，伯氨基和仲氨基;R3選自氫，烷基，和鹵素;Z為羥基保護基而W為氨基保護基;其中Y選自三氟甲磺酰氧基，1，1，1-三氟乙磺酰氧基，八氟丁磺酰氧基和九氟丁磺酰氧基;其中反應(yīng)在-120℃至約25℃的溫度并在低冰點惰性溶劑中進行。
4.權(quán)利要求1的方法，其中R″選自
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素;R3選自氫，烷基，和鹵素，Z為羥基保護基而W為氨基保護基;反應(yīng)在催化劑存在下進行;其中Y選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，取代的烷基磺酰氧基和取代的芳基磺酰氧基。
5.權(quán)利要求4的方法，其中催化劑選自基本上溶于溶劑，含有非親核性陰離子和高度離子化鹽。
6.權(quán)利要求4或5的方法，其中溶劑選自極性、非親核性溶劑。
7.權(quán)利要求1的方法，其中R″選自
其中R2選自羥基，鹵素，疊氮基，伯氨基和仲氨基;R3選自氫，烷基和鹵素;R4，R5和R6獨立地選自氫，-OZ，-NHW，N(烷基)W，鹵素，烷氧基，和硫代烷基;R7選自氫，鹵素，氰基，烷基，烷氧基，烷氧羰基，硫代烷基，硫代甲酰氨基和甲酰氨基;Q選自CH，CR8，和N;其中R8選自鹵素，甲酰氨基，硫代甲酰氨基，烷氧羰基，和氰基，Z為羥基保護基;W為氨基保護基;而M+為陽離子;其中Y選自三氟甲磺酰氧基，1，1，1-三氟乙磺酰氧基，八氟丁磺酰氧基和九氟丁磺酰氧基;其中溶劑為低冰點惰性溶劑。
8.權(quán)利要求1的方法，在無溶劑存在下進行，其中R″選自
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素;R3選自氫，烷基，和鹵素;;Z為羥基保護基而W為氨基保護基;其中Y選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，取代的烷基磺酰氧基和取代的芳基磺酰氧基。
9.權(quán)利要求8的方法，其中反應(yīng)溫度為約100℃至約160℃。
10.權(quán)利要求1的方法，其中R″選自
其中R1選自氫，烷基，取代的烷基和鹵素;R2選自羥基，鹵素，疊氮基，伯氨基和仲氨基;R3選自氫，烷基，和鹵素;R4，R5和R6獨立地選自氫，-OZ，-NHW，N(烷基)W，鹵素，烷氧基，和硫代烷基;R7選自氫、鹵素，氰基，烷基，烷氧基，烷氧羰基，硫代烷基，硫代甲酰氨基和甲酰氨基;Q選自CH，CR8，和N;其中R8選自鹵素，甲酰氨基，硫代甲酰氨基，烷氧羰基，和氰基，Z為羥基保護基而W為氨基保護基;其中Y選自烷基磺酰氧基，芳基磺酰氧基，取代的烷基磺酰氧基和取代的芳基磺酰氧基。
11.根據(jù)前面任一權(quán)利要求的方法制備具有如下結(jié)構(gòu)的式(Ⅰ)化合物
12.根據(jù)前面任一權(quán)利要求的方法，其中式(Ⅱ)化合物的保護基(X)為苯甲?；?br> 13.根據(jù)前面任一權(quán)利要求的方法，其中式(Ⅱ)化合物的磺酰氧基(Y)為甲磺酰基。
全文摘要
經(jīng)α異頭物富集的氟代糖的異頭物磺酰氧基與核堿的SN
文檔編號C07H19/173GK1085560SQ9310904
公開日1994年4月20日 申請日期1993年6月21日 優(yōu)先權(quán)日1992年6月22日
發(fā)明者周大森, D·P·基耶爾, L·W·赫特爾, C·D·瓊斯, L·M·波蒂特, C·S·格羅斯曼, R·E·霍爾斯, T·E·馬布里 申請人:伊萊利利公司