一種基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，包括：采用具有至少兩個(gè)相同C^N二齒配體以及兩個(gè)溶劑分子配位絡(luò)合的環(huán)金屬銥配位化合物與多肽肽鏈中的選定的兩個(gè)以上組氨酸發(fā)生配位反應(yīng)，進(jìn)而形成穩(wěn)釘肽。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單、快速，反應(yīng)條件溫和，反應(yīng)產(chǎn)物具有低毒性，高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，生物活性顯著提高，且本發(fā)明在完成多肽二級(jí)結(jié)構(gòu)的鎖定而優(yōu)化多肽的性能的同時(shí)，還可形成可被激發(fā)的熒光基團(tuán)，得以標(biāo)記多肽分子，并用于分析檢測(cè)及熒光成像。本發(fā)明在生命科學(xué)與醫(yī)藥領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種新穎的通過(guò)形成穩(wěn)釘肽而穩(wěn)定多肽的二級(jí)a -螺旋結(jié)構(gòu)的方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]近年來(lái)，多肽和各種小分子蛋白由于具有優(yōu)越的生物相容性和可塑性，被廣泛的應(yīng)用于多種疾病的治療，日益成為當(dāng)代醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)研究領(lǐng)域的重要工具之一。作為生物活性藥物設(shè)計(jì)的原材料，多肽比蛋白質(zhì)或核酸類(lèi)藥物更加更有吸引力。多肽更小，更容易被人工設(shè)計(jì)與合成，功能更精準(zhǔn)，更高效。
[0003]a-螺旋是蛋白質(zhì)的主要生物活性結(jié)構(gòu)之一，在蛋白-蛋白的接觸界面上介導(dǎo)著多種生物分子間的生物學(xué)識(shí)別與相互作用。螺旋肽，如Bcl-2家族蛋白的BH3，可以調(diào)節(jié)信號(hào)通路的開(kāi)閉，由此調(diào)控生命活動(dòng)(如細(xì)胞凋亡)的進(jìn)程。然而當(dāng)一段多肽序列被從全長(zhǎng)的蛋白質(zhì)中獨(dú)立到溶液或細(xì)胞環(huán)境中的時(shí)候，例如Bim，Bid等，極易失去其固有生物學(xué)活性的螺旋結(jié)構(gòu)。這種二級(jí)螺旋結(jié)構(gòu)的損失，往往使其喪失了其在體內(nèi)的生物學(xué)活性和反應(yīng)效力，抗水解能力和細(xì)胞滲透力都明顯下降。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其能簡(jiǎn)單、快速的實(shí)現(xiàn)具有低毒性，高穩(wěn)定性等特點(diǎn)的多肽二級(jí)結(jié)構(gòu)的鎖定，并在優(yōu)化多肽的性能的同時(shí)形成可被激發(fā)的熒光基團(tuán) ，得以標(biāo)記多肽分子，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)中的不足。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案:
一種基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，包括:采用具有至少兩個(gè)相同C~N 二齒配體以及兩個(gè)溶劑分子配位絡(luò)合的環(huán)金屬銥配位化合物與多肽肽鏈中的選定的兩個(gè)以上組氨酸發(fā)生配位反應(yīng)，進(jìn)而形成穩(wěn)釘肽。
[0006]進(jìn)一步的,所述環(huán)金屬銥配位化合物的分子式為(Lc^)2Ir (Lsalv)2 [OTf],其結(jié)構(gòu)式如下:
【權(quán)利要求】
1.一種基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，包括:采用具有至少兩個(gè)相同C~N 二齒配體以及兩個(gè)溶劑分子配位絡(luò)合的環(huán)金屬銥配位化合物與多肽肽鏈中的選定的兩個(gè)以上組氨酸發(fā)生配位反應(yīng)，進(jìn)而形成穩(wěn)釘肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，所述環(huán)金屬銥配位化合物的分子式為(L。J2Ir(Lstjlv) 2 [OTf]，其結(jié)構(gòu)式如下:
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，所述C~N二齒配體Vn包括2-苯基吡啶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，所述溶劑分子包括水。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，所述環(huán)金屬銥配位化合物是與多肽肽鏈中的兩個(gè)組氨酸發(fā)生配位反應(yīng)的，該兩個(gè)組氨酸分別分布于所述多肽肽鏈中的不同位置，兩個(gè)組氨酸之間間隔1-5個(gè)氨基酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，所述配位反應(yīng)是在緩沖液體系中進(jìn)行的。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的基于銥配合物的形成穩(wěn)釘肽的方法，其特征在于，所述緩沖液體系包括磷酸緩沖液、Tris緩沖液、Bis-Tris緩沖液、MES緩沖液或HEPES緩沖液。
【文檔編號(hào)】C07K1/13GK103665096SQ201310138129
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年4月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月19日
【發(fā)明者】費(fèi)浩, 馬曉川, 曹睿, 王小波, 賈俊麗 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院蘇州納米技術(shù)與納米仿生研究所