專利名稱：一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高熊果酚苷的制備方法，尤其是一種從植物中提取高熊果酚苷的制備方法。
背景技術(shù)：
高熊果酚苷(Homoarbutin)，分子式=C13H18O7'分子量:286.281，CAS 登錄號(hào)25712-94-1，主要存在于鹿蹄草科多種植物中，其中鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calIiantha H. Andres中含量豐富。其分子式如下?，F(xiàn)代研究表明，高熊果酚苷具有抗腫瘤作用，同時(shí)其也作為合成其它活性衍生物的原料。鹿蹄草科植物鹿蹄草Pyrola calIiantha H. Andres的全草被作為中藥鹿銜草使用，能補(bǔ)腎強(qiáng)骨，祛風(fēng)除濕，止咳，止血?，F(xiàn)有技術(shù)中，尚沒(méi)有適用于高純度高熊果酚苷工業(yè)化大生產(chǎn)的制備工藝報(bào)道。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種利于大生產(chǎn)操作、產(chǎn)品純度高的高熊果酚苷的制備方法。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案。取鹿蹄草全草，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力20-40MPa，溫度50_60°C，CO2流量l_3ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附樹(shù)脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脫， 收集3-8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過(guò)強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂吸附，以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過(guò)，通過(guò)強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，收集流出液，濾過(guò)，濃縮，加入甲醇結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。CO2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%。CO2超臨界萃取壓力30MPa，溫度55°C，CO2流量2ml/g生藥· min
發(fā)明內(nèi)容
CO2超臨界萃取時(shí)間lOOmin。大孔吸附樹(shù)脂選自DlOl型、D102型、AB_8型大孔吸附樹(shù)脂中的一種。大孔吸附樹(shù)脂洗脫用乙醇的濃度為70%。大孔吸附樹(shù)脂洗脫用乙醇的收集量為5柱體積。強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂選自201 X 7型、201 X 4型、D201型強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂中的一種。強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂選自001X7型、001X4型、DOOl型強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂中的一種。制備所得高熊果酚苷可采用下列方法檢測(cè)。試驗(yàn)例1 HPLC法測(cè)定高熊果酚苷純度色譜條件
色譜柱十八烷基硅烷鍵合膠硅膠為填充劑；流動(dòng)相甲醇-水(90 10)；流速lmL/ min ；檢測(cè)波長(zhǎng):224nm ；柱溫:30°C。測(cè)定方法
精密稱取高熊果酚苷ang，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超聲振蕩使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10 μ L，注入高效液相色譜儀，采用歸一化法測(cè)定樣品純度。采用本發(fā)明制備高熊果酚苷，利于大生產(chǎn)操作，能耗小，污染小。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力20MPa，溫度50°C，CO2流量lml/g生藥·π η，萃取時(shí)間80min，得萃取物，加入到DlOl型大孔吸附樹(shù)脂柱上吸附，60%乙醇洗脫，收集3倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過(guò)201X7型強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂吸附，以 0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過(guò)，通過(guò)001 X 7型強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，收集流出液，濾過(guò)，濃縮，加入甲醇結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得高熊果酚苷2. 5g，經(jīng) HPLC檢測(cè)，純度為95. 5%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實(shí)施例2
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為6%，萃取壓力40MPa，溫度60°C，CO2流量3ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間120min，得萃取物，加入到D102型大孔吸附樹(shù)脂柱上吸附，80%乙醇洗脫，收集8倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過(guò)201X4型強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過(guò)，通過(guò)001 X 4型強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，收集流出液，濾過(guò)，濃縮，加入甲醇結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得高熊果酚苷3. 2g， 經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度為94. 4%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。
實(shí)施例3
取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力30MPa，溫度55°C，CO2流量2ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間lOOmin，得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱上吸附，70%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過(guò)D201型型強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過(guò)，通過(guò)DOOl型強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，收集流出液，濾過(guò)，濃縮，加入甲醇結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得高熊果酚苷2. 9g，經(jīng) HPLC檢測(cè)，純度為97. 6%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。
權(quán)利要求
1.一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成 取鹿蹄草全草，粉碎，加入到(X)2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力20-40MPa，溫度50-60°C，CO2流量l_3ml/g生藥· min， 萃取時(shí)間80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附樹(shù)脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脫，收集3_8 倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，通過(guò)強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂吸附，以 0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過(guò)，通過(guò)強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，收集流出液，濾過(guò)，濃縮，加入甲醇結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO2 超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述(X)2 超臨界萃取壓力30MPa，溫度55°C，CO2流量2ml/g生藥· min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO2 超臨界萃取時(shí)間lOOmin。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹(shù)脂選自DlOl型、D102型、AB-8型大孔吸附樹(shù)脂中的一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹(shù)脂洗脫用乙醇的濃度為70%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附樹(shù)脂洗脫用乙醇的收集量為5柱體積。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂選自201 X 7型、201 X 4型、D201型強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂中的一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂選自001 X 7型、001 X 4型、DOOl型強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂中的一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡(jiǎn)便、污染小、能耗少的從鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，工藝步驟為取鹿蹄草全草，加入到CO2超臨界萃取器中，得萃取物，加入到大孔吸附樹(shù)脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脫，通過(guò)強(qiáng)堿性苯乙烯型陰離子交換樹(shù)脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過(guò)，通過(guò)強(qiáng)酸性苯乙烯型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，收集流出液，濾過(guò)，濃縮，加入甲醇結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。采用本發(fā)明制備高熊果酚苷，產(chǎn)品純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號(hào)C07H15/203GK102250163SQ20111015060
公開(kāi)日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年6月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月7日
發(fā)明者張發(fā)成, 王峰, 王琳 申請(qǐng)人:蘇州派騰生物醫(yī)藥科技有限公司