專利名稱：一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，具體涉及一種采用超臨界(X)2萃取和硅膠柱層析技術(shù)從茜草中提取純化大葉茜草素的方法。
背景技術(shù)：
大葉茜草素，為萘醌類。分子式=C17H15O4,分子量J83. 30, mp. U8_132°C。為黃色片狀結(jié)晶，熔點(diǎn)1 132°C，具有升華性，不溶于水，溶于乙醚、乙醇，易溶于氯仿、乙酸乙酯。茜草Rubia cordifolia L.始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有涼血、祛瘀、止血、通經(jīng)的功效，用于吐血、衄血、崩漏、外傷出血、淤阻經(jīng)閉、關(guān)節(jié)痹痛、跌撲腫痛。茜草主產(chǎn)于陜西、河南等地。根中含有蒽醌衍生物、萘醌衍生物、萘氫醌衍生物、三萜化合物等。茜草有顯著的止血、抑菌、消炎作用，大葉茜草素是其主要有效成分之一，體外實(shí)驗(yàn)表明，茜草素對(duì)金黃色葡萄球菌、變形桿菌、大腸埃希氏菌、綠膿桿菌、沙門(mén)氏菌和克雷伯氏菌等均有顯著的抑制作用。索菲規(guī)等研究不同采收期茜草中大葉茜草素含量的動(dòng)態(tài)，發(fā)現(xiàn)夏季最高，即6-8 月份，平均含量高于1.2%。目前國(guó)內(nèi)對(duì)大葉茜草素提取純化工藝研究方面文獻(xiàn)較少，譚朝陽(yáng)、劉倩、彭亮等均采用乙醇回流提取，該方法僅得到茜草粗提物，無(wú)法得到高含量的大葉茜草素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是針對(duì)茜草中有效成分的提取純化問(wèn)題，提供一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法。本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的將茜草粉末用乙醇溶液對(duì)其進(jìn)行浸潤(rùn)，放入萃取釜中，以超臨界的CO2為萃取劑， 乙醇為夾帶劑進(jìn)行萃取，然后再解壓進(jìn)行分離，出料，再采用柱層析對(duì)萃取物進(jìn)行純化分離、洗脫劑進(jìn)行洗脫；其中萃取壓力25-45MPa、溫度為30_60°C、萃取時(shí)間為1_5小時(shí)、解析壓力為4-8MPa ；層析柱填料為硅膠，洗脫劑為石油醚-乙酸乙酯混合溶劑、乙醇或甲醇。本發(fā)明浸潤(rùn)所用乙醇溶液為體積百分比70-95%的乙醇溶液，料液比為1 3-8， 浸潤(rùn)1-3小時(shí)。本發(fā)明超臨界流體萃取步驟中，CO2流量為0. 25-0. 5L/min。本發(fā)明超臨界流體萃取步驟中，夾帶劑乙醇的流速為1-lOml/min，用量為茜草體積的 20-35%。本發(fā)明超臨界流體萃取步驟中，石油醚-乙酸乙酯體積比為50 1-20 1。本發(fā)明硅膠柱層析步驟中，洗脫方法為先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫雜質(zhì)，再改以乙醇或甲醇洗脫，收集乙醇或甲醇洗脫部分。
本發(fā)明的有益效果采用超臨界(X)2提取大葉茜草素的重現(xiàn)性良好，萃取溫度低、 無(wú)溶劑殘留，大葉茜草素的含量高；本方法工藝簡(jiǎn)單、操作時(shí)間短。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述。實(shí)施例1 取Ikg茜草粉碎至50目后用90%乙醇4L密閉浸潤(rùn)1小時(shí)，放入5L規(guī)格的超臨界萃取釜中，以(X)2為萃取溶劑，萃取壓力為^MPa、溫度為37°C、萃取時(shí)間為3h，CO2流量為0. 3L/min，在整個(gè)萃取過(guò)程中，夾帶劑乙醇以2ml/min的流速通入200ml ；分離釜在壓力
條件下解析分離，得到萃取物81g。將萃取物溶于石油醚中，上硅膠層析柱，先以石油醚-乙酸乙酯50 1洗脫，再以90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇，濃縮成浸膏、低溫干燥即獲得6. 05g大葉茜草素，含量為92%。實(shí)施例2:取Ikg茜草粉碎至20目后用70%乙醇6L密閉浸潤(rùn)2小時(shí)，放入5L規(guī)格的超臨界萃取釜中，以(X)2為萃取溶劑，萃取壓力為^MPa、溫度為36°C、萃取時(shí)間為2h，CO2流量為0. 4L/min，在整個(gè)萃取過(guò)程中，夾帶劑乙醇以3ml/min的流速通入^Oml ；分離釜在壓力
條件下解析分離，得到萃取物78g。將萃取物溶在石油醚中，上硅膠層析柱，先以石油醚-乙酸乙酯34 1洗脫，再以95%甲醇洗脫，收集甲醇洗脫部分，減壓回收甲醇，濃縮成浸膏、低溫干燥即獲得6. 43g大葉茜草素，含量為92%。實(shí)施例3 取Ikg茜草粉碎至40目后用80%乙醇8L密閉浸潤(rùn)3小時(shí)，放入5L規(guī)格的超臨界萃取釜中，以(X)2為萃取溶劑，萃取壓力為32MPa、溫度為39°C、萃取時(shí)間為4h，CO2流量為0. 25L/min，在整個(gè)萃取過(guò)程中，夾帶劑乙醇以5ml/min的流速通入330ml ；分離釜在壓力
條件下解析分離，得到萃取物79g。將萃取物溶在石油醚中，上硅膠層析柱，先以石油醚-乙酸乙酯48 1洗脫，再以95%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇，濃縮成浸膏、低溫干燥即獲得5. 49g大葉茜草素，含量為95%。實(shí)施例4 取1.5kg茜草粉碎至40目后用75%乙醇9L密閉浸潤(rùn)2小時(shí)，放入5L規(guī)格的超臨界萃取釜中，以(X)2為萃取溶劑，萃取壓力為34MPa、溫度為31°C、萃取時(shí)間為池，0)2流量為0. 35L/min，在整個(gè)萃取過(guò)程中，夾帶劑乙醇以8ml/min的流速通入390ml ；分離釜在壓力
條件下解析分離，得到萃取物75g。將萃取物溶在石油醚中，上硅膠層析柱，先以石油醚-乙酸乙酯30 1洗脫，再以85%甲醇洗脫，收集甲醇洗脫部分，減壓回收甲醇，濃縮成浸膏、低溫干燥即獲得5. 97g大葉茜草素，含量為93%。實(shí)施例5 取1. 5kg茜草粉碎至50目后用95%乙醇12L密閉浸潤(rùn)3小時(shí)，放入5L規(guī)格的超臨界萃取釜中，以(X)2為萃取溶劑，萃取壓力為43MPa、溫度為48°C、萃取時(shí)間為處，0)2流量為0. 45L/min,在整個(gè)萃取過(guò)程中，夾帶劑乙醇以5ml/min的流速通入300ml ；分離釜在壓力
條件下解析分離，得到萃取物78g。將萃取物溶在石油醚中，上硅膠層析柱，先以石油醚-乙酸乙酯40 1洗脫，再以90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇，濃縮成浸膏、低溫干燥即獲得5. 73g大葉茜草素，含量為97%。實(shí)施例6 取1.5kg茜草粉碎至30目后用85%乙醇4. 5L密閉浸潤(rùn)1小時(shí)，放入5L規(guī)格的超臨界萃取釜中，以(X)2為萃取溶劑，萃取壓力為57MPa、溫度為55°C、萃取時(shí)間為讓，0)2流量為0. 3L/min，在整個(gè)萃取過(guò)程中，夾帶劑乙醇以7ml/min的流速通入330ml ；分離釜在壓力 SMI^a條件下解析分離，得到萃取物84g。將萃取物溶在石油醚中，上硅膠層析柱，先以石油醚-乙酸乙酯20 1洗脫，再以80%甲醇洗脫，收集甲醇洗脫部分，減壓回收甲醇，濃縮成浸膏、低溫干燥即獲得6. 45g大葉茜草素，含量為90%。
權(quán)利要求
1.一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，其特征在于將茜草粉末用乙醇溶液對(duì)其進(jìn)行浸潤(rùn)，放入萃取釜中，以超臨界的CO2為萃取劑，乙醇為夾帶劑進(jìn)行萃取，然后再解壓進(jìn)行分離，出料，再采用柱層析對(duì)萃取物進(jìn)行純化分離、洗脫劑進(jìn)行洗脫；其中萃取壓力 25-45MPa、溫度為30_60°C、萃取時(shí)間為1_5小時(shí)、解析壓力為4_8MPa ；層析柱填料為硅膠， 洗脫劑為石油醚-乙酸乙酯混合溶劑、乙醇或甲醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，其特征在于浸潤(rùn)所用乙醇溶液為體積百分比70-95%的乙醇溶液，料液比為1 3-8，浸潤(rùn)1-3小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，其特征在于(X)2流量為 0. 25-0. 5L/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，其特征在于夾帶劑乙醇的流速為1-lOml/min，用量為茜草體積的20-35%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，其特征在于石油醚-乙酸乙酯體積比為50 1-20 1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法，其特征在于洗脫方法為先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫雜質(zhì)，再改以乙醇或甲醇洗脫，收集乙醇或甲醇洗脫部分。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種超臨界流體萃取大葉茜草素的方法。在本發(fā)明中，茜草粉末用乙醇溶液對(duì)其進(jìn)行浸潤(rùn)，放入萃取釜中，以超臨界的CO2為萃取劑，乙醇為夾帶劑進(jìn)行萃取，然后再解壓進(jìn)行分離，出料，再采用柱層析對(duì)萃取物進(jìn)行純化分離、洗脫劑進(jìn)行洗脫；其中萃取壓力25-45MPa、溫度為30-60℃、萃取時(shí)間為1-5小時(shí)、解析壓力為4-8MPa；層析柱填料為硅膠，洗脫劑為石油醚-乙酸乙酯混合溶劑、乙醇或甲醇。本發(fā)明所得大葉茜草素通過(guò)超臨界CO2萃取，質(zhì)量好，純度高，整個(gè)方法操作時(shí)間短、工藝簡(jiǎn)單。
文檔編號(hào)C07D311/92GK102558131SQ20101060389
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月24日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請(qǐng)人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司