專利名稱：p38抑制劑及它們的使用方法
相關(guān)申請的交叉引用本申請要求2003年10月15日提交的美國專利申請10/688,849和2003年3月3日提交的美國專利申請10/378,164的優(yōu)先權(quán)，這兩篇專利申請以其全部內(nèi)容引入本文作為參考。
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及新的p38 MAP激酶及相關(guān)激酶抑制劑，含有該抑制劑的藥物組合物，以及制備這些抑制劑的方法。它們用于治療炎癥、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、克隆氏病、炎癥性腸病、癌癥、自身免疫性疾病，以及用于治療其它的細胞因子介導(dǎo)的疾病。
現(xiàn)有技術(shù)狀況的描述許多慢性和急性炎癥性病癥與前炎癥細胞因子的過度產(chǎn)生有關(guān)。這些細胞因子包括但不限于腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素1β(IL-1β)、白細胞介素8(IL-8)和白細胞介素6(IL-6)。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種慢性疾病，其中TNF-α和IL-1β參與了該疾病的發(fā)生以及隨此消耗性病癥(debilitating condition)可見的骨和關(guān)節(jié)破壞的進展。近來被批準的對RA的治療包括可溶性TNF-α受體(依他西特)和IL-1受體拮抗劑(阿那白滯素)。這些治療通過阻斷它們各自的細胞因子與它們的天然受體結(jié)合的能力而起作用。治療細胞因子介導(dǎo)的疾病的其它方法目前仍在研究中。一種這樣的方法包括抑制調(diào)節(jié)前炎癥細胞因子如p38的合成和產(chǎn)生的信號途徑。
p38(也稱作CSBP或RK)是一種絲氨酸/蘇氨酸促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)，已表明其調(diào)節(jié)前炎癥細胞因子。p38首先被確定為一種在脂多糖(LPS)處理后于小鼠單核細胞中變?yōu)槔野彼崃姿峄募っ?。Saklatvala J.等人，Cell，781039-1049(1994)首次確定了p38和細胞對細胞因子的應(yīng)答之間的聯(lián)系，證明了IL-1激活蛋白激酶級聯(lián)，其導(dǎo)致小熱休克蛋白Hsp27的磷酸化，這可能是通過促分裂原活化蛋白激活的蛋白激酶2(MAPKAP激酶-2)來實現(xiàn)的。Han，J.等人，Science，265808-811(1994)對由純化的激酶得到的肽序列的分析表明其與小鼠單核細胞中的LPS激活的p38 MAPK有關(guān)。同時Rouse，J.等人，Cell，781027-1037(1994)證明p38 MAPK本身在應(yīng)答多種細胞應(yīng)激，包括接觸紫外線輻射和滲透壓休克中被上游激酶所活化，并證實確定的直接磷酸化Hsp27的激酶是MAPKAP激酶-2。隨后，SmithKlineBeecham的工作者Lee，J.等人，Nature，372739-746證明p38 MAPK是一系列吡啶基咪唑化合物的分子靶，所述吡啶基咪唑化合物抑制LPS激發(fā)的人單核細胞的TNF的產(chǎn)生。這是一個關(guān)鍵性的發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致很多p38 MAPK選擇性抑制劑的開發(fā)，并且闡明了p38 MAPK在細胞因子信號中的作用。
現(xiàn)在已知p38 MAPK的多種形式(α、β、γ、δ)，每種由單獨的基因編碼，形成與細胞對多種刺激的應(yīng)答有關(guān)的激酶級聯(lián)的一部分，所述刺激包括滲透性應(yīng)激、紫外線和細胞因子介導(dǎo)的事件。認為p38的這四種同種型調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號的不同方面。它的活化是導(dǎo)致前炎癥細胞因子如TNF-α的合成和產(chǎn)生的信號事件級聯(lián)的一部分。p38通過磷酸化包括其它激酶和轉(zhuǎn)錄因子的下游底物發(fā)揮作用。Adams，J.L.等人，Progress in Medicinal Chemistry，381-60(2001)已證明抑制p38激酶的活性劑在體外和體內(nèi)模型中阻斷細胞因子的產(chǎn)生，所述細胞因子包括但不限于TNF-α、IL-6、IL-8和IL-1β。
已表明，當(dāng)在體外用脂多糖(LPS)刺激外周血單核細胞(PBMC)時外周血單核細胞表達和分泌前炎癥細胞因子。當(dāng)LPS刺激PBMC之前使用這些化合物對PBMC進行預(yù)處理時，p38抑制劑有效地阻斷這種作用。Lee，J.C.等人，Int.J.Immunopharmacol.，10835-843(1988)。p38抑制劑在炎癥性疾病動物模型中的功效促進了對能夠解釋這些抑制劑作用的根本機理的研究。已使用吡啶基咪唑抑制劑研究了在多種與炎癥反應(yīng)相關(guān)的細胞系統(tǒng)中p38在細胞對IL-1和TNF的應(yīng)答中的作用內(nèi)皮細胞和IL-8，Hashimoto，S.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，293370-375(2001)；成纖維細胞和IL-6/GM-CSF/PGE2，Beyaert，R.等人，EMBO J.，151914-1923(1996)；嗜中性粒細胞和IL-8，Albanyan，E.A.等人，Infect Immun.，682053-2060(2000)；巨噬細胞和IL-1，Caivano，M.和Cohen，P.，J.Immunol.，1643018-3025(2000)；以及平滑肌細胞和RANTES Maruoka，S.等人，Am.J.Respir.Crit Care Med.，161659-668(1999)。許多疾病狀態(tài)的破壞性作用是由前炎癥細胞因子的過度產(chǎn)生引起的。p38抑制劑調(diào)節(jié)這一過度產(chǎn)生的能力使它們成為疾病調(diào)節(jié)活性劑的極好候選者。
p38抑制劑在多種公認的疾病模型中均有活性，并且在多種標準的炎癥動物模型中顯示出積極的效果，所述模型包括大鼠膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，Jackson，J.R.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，284687-692(1998)；大鼠佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，Badger，A.M.等人，Arthritis Rheum.，43175-183(2000)；Badger，A.M.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther，2791453-1461(1996)；和角叉菜膠誘導(dǎo)的小鼠足腫脹，Nishikori，T.等人，Eur.J.Pharm.，451327-333(2002)。在這些動物模型中已表明阻斷p38功能的分子有效地抑制骨吸收、炎癥和其它的免疫和炎癥為基礎(chǔ)的病變。因此，安全而有效的p38抑制劑將會提供一種治療消耗性疾病的方法，所述疾病能夠被p38信號調(diào)節(jié)，如但不限于RA。
p38抑制劑對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是公知的。對早期的抑制劑的綜述有助于建立構(gòu)效關(guān)系，其對于增強的體外和體內(nèi)活性是重要的。參見Salituro，E.G.等人，Current Medicinal Chemistry，6807-823(1999)和Foster，M.L.等人，Drug News Perspect.，13488-497(2000)。更多的現(xiàn)代綜述注重于新研究的抑制劑如p38抑制劑的結(jié)構(gòu)多樣性，Boehm，J.D.和Adams，J.L.，Exp.Opin.Ther.Patents，1025-37(2000)。本發(fā)明公開了一系列新的取代的2-氮雜-[4.3.0]-二環(huán)芳香雜環(huán)化合物，它們作為p38抑制劑，用于治療炎癥、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥、自身免疫性疾病以及用于治療其它的細胞因子介導(dǎo)的疾病。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了抑制p38α及相關(guān)的p38介導(dǎo)的事件例如抑制細胞因子的產(chǎn)生的化合物，制備這些化合物的方法以及包含它們的藥物組合物。這些化合物通稱為2-氮雜-[4.3.0]-二環(huán)芳香雜環(huán)化合物，其用作可以通過抑制p38信號途徑而治療的疾病的治療活性劑。一般而言，本發(fā)明涉及通式I的p38抑制劑， 其中Y是C、N；W是C、N、S或O，條件是當(dāng)Y是C時W是N、S或O，而當(dāng)Y是N時W是C或N；U是CH或N；V是C-E或N；X是O、S、SO、SO2、NR7、C＝O、CHR7、-C＝NOR1、-C＝CHR1或CHOR1；R1是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；R7是H或取代或未取代的甲基；Ar1是取代或未取代的芳基或雜芳基；A是H、OH、胺保護基、Zn-NR2R3、Zn-NR2(C＝O)R2、Zn-SO2R2、Zn-SOR2、Zn-SR2、Zn-OR2、Zn-(C＝O)R2、Zn-(C＝O)OR2、Zn-O-(C＝O)R2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R2和R3獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者R2與R3和N一起形成具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；B是H、NH2或取代或未取代的甲基；E是H、Zn-NR2R3、Zn-(C＝O)R4、Zn-(C＝O)R5、Zn-NR5(C＝O)R5、Zn-O(C＝O)R5、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5、Zn-SR5、Zn-NH(C＝O)NHR5或R5；R4是取代或未取代的天然或非天然氨基酸、保護的天然或非天然氨基酸、NH(CHR6)(CH2)mOR5，其中m是1-4的整數(shù)或NR2R3；R5是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R6是天然氨基酸側(cè)鏈、Zn-NR2R3、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5或Zn-SR5；且n是0或1，條件是當(dāng)B是H并且A是CH＝CH-R8，其中R8是取代或未取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基時，那么X-Ar1是取代基，該取代基中當(dāng)X是O、S、C＝O、S＝O、C＝CH2、CO2、NH或N(C1-C8-烷基)時Ar1不是取代或未取代的芳基、雜芳基、NH-烷基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、NH-烷氧基或NH-二烷基酰胺。
本發(fā)明還涉及式I的化合物的藥學(xué)可接受的前藥、藥學(xué)活性代謝物以及藥學(xué)可接受的鹽。本發(fā)明還公開了式I的化合物的制備方法。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式II的化合物，
其中A、B、X和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式III的化合物， 其中A、B、X、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式IV的化合物， 其中A、B、X、E和Ar1如上文所定義，條件是當(dāng)B是H并且A是CH＝CH-R8，其中R8是取代或未取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基時，那么X-Ar1是取代基，該取代基中當(dāng)X是O、S、C＝O、S＝O、C＝CH2、CO2、NH或N(C1-C8-烷基)時，Ar1不是取代或未取代的芳基、雜芳基、NH-烷基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、NH-烷氧基或NH-二烷基酰胺。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式V的化合物，
其中A、X、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式VI的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式VII的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式VIII的化合物，
其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式IX的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式X的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XI的化合物，
其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XII的化合物， 其中A、B、E、R1和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XIII的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XIV的化合物，
其中A、B、X、Ar1、R2和R3如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XV的化合物， 其中A、B、X和Ar1如上文所定義，并且R12和R13獨立地是烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基可以是取代或未取代的。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XVI的化合物，
其中A、B、X、R2、R3和Ar1如上文所定義。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XVII的化合物， 其中Y是CR1、O、S或NR2；W是CR3、N、NR4、S或O，條件是當(dāng)Y是CR1時W是NR4、S或O，當(dāng)Y是NR2時W是CR3或N；R3是H、NH2、F、Cl、甲基或取代的甲基；R4是H或甲基或取代的甲基；R1和R2獨立地是H、OH、胺保護基、Zn-NRaRb、Zn-NRa(C＝O)Rb、Zn-SO2Ra、Zn-SORa、Zn-SRa、Zn-ORa、Zn-(C＝O)Ra、Zn-(C＝O)ORa、Zn-O-(C＝O)Ra、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；Ra和Rb獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者Ra和Rb與它們共同連接的原子一起形成在環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和的雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或者具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；n是0或1；U是CRc或N；V是CRc或N；Rc是H、F、Cl、甲基或取代的甲基；X是O、S、SO、SO2、NR5、C＝O、CH2、CH2Zn-OH或C＝NORd；R5是H、甲基或取代的甲基；Rd是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；G、H、J和T獨立地是N或CRz，條件是當(dāng)所述G、H、J和T中的任意一個是N時，G、H、J或T為N的總數(shù)不超過2；Rz是H、F、Cl、Br、CF3、OR6、SR6、低級烷基(C1-C4)、CN或NR6R7；R6和R7獨立地是H、CF3、低級烷基(C1-C4)或低級雜烷基(C1-C4)；Q是-NR8CONH-、-NHCO-、-NR8SO2NH-、-NHSO2-、-CONR11-；R8是H或低級(C1-C4)烷基；R11是H或低級(C1-C4)烷基；Rx是-(CR9R10)m-、-O(CR9R10)m-、NH(CR9R10)m-或-S(CR9R10)m-，條件是當(dāng)Rx是-O(CR9R10)m-、-NH(CR9R10)m-或-S(CR9R10)m-時，Q是-CONR11-；R9和R10獨立地是H或低級烷基，或者R9和R10與它們共同連接的原子一起形成可以是飽和或部分不飽和的環(huán)烷基環(huán)；m是1-3；Ry是H、PO3H、胺保護基、氧保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar2，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-Ar2和Zn-雜環(huán)烷基可以是取代或未取代的；Ar2是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的，其中所述取代可以是1-3個取代基，所述取代基獨立地選自F、Cl、Br、CF3、CN、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、-OR12、-SR12、-SO2R12、-SO2NR13R12、NR13SO2R12、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R12和R13獨立地是H、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；其中當(dāng)Ar2被-SO2NR13R12取代時，R12和R13可以形成可以是取代或未取代的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)，其中所述取代可以是選自如下的取代基烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、-COR12、-SO2R12、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；其中當(dāng)Q是-CONR11時，Ry與R11結(jié)合為另外的可以被選自以下基團取代或未取代的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基、Zn-Ar1、-COR14或-SO2R14，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基、Zn-Ar1、-COR14和-SO2R14可以是取代或未取代的；且R14是烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的。
另一個方面，本發(fā)明提供了抑制細胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8產(chǎn)生的化合物，所述化合物包括式I-XVII的化合物。
另一個方面，本發(fā)明提供了治療細胞因子介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，其包括給予溫血動物有效量的式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥。
另一個方面，本發(fā)明提供了抑制細胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8產(chǎn)生的方法，其包括給予溫血動物有效量的式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥。
另一個方面，本發(fā)明的提供了一種提供p38激酶抑制作用的方法，其包括給予溫血動物有效量的式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥。
另一個方面，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防p38介導(dǎo)的疾病的方法，其包括給予有此需要的人或動物有效治療或預(yù)防所述p38介導(dǎo)的疾病的量的化合物或包含所述化合物的藥物組合物，其中所述化合物是式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥。根據(jù)本發(fā)明的方法能治療的p38介導(dǎo)的疾病包括炎癥性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增生性疾病、傳染病、病毒性疾病或神經(jīng)變性性疾病。
本發(fā)明的化合物還用于防止細胞死亡和增生的方法中，并因此可用于治療或預(yù)防中風(fēng)、心臟病發(fā)作和器官缺氧中的再灌注/缺血。本發(fā)明的化合物還用于預(yù)防凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集的方法中。
本發(fā)明的化合物可有利地與其它已知的治療活性劑聯(lián)合應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及包含有效量的活性劑的藥物組合物，所述活性劑選自式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的前藥、藥學(xué)活性代謝物或藥學(xué)可接受的鹽。
在下面的說明書中將對本發(fā)明的其它優(yōu)點和新的特征進行部分闡述，通過對下文說明書的查閱，本發(fā)明的其它優(yōu)點和新的特征對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言在某種程度上將是清楚的，或者可以通過實踐本發(fā)明而對其有所了解。通過特別是所附的權(quán)利要求中指出的方案、組合、組合物和方法可以實現(xiàn)和獲得本發(fā)明的優(yōu)點。
附圖簡述附圖引入本文并作為說明書的一部分，其說明本發(fā)明的非限制性實施方案，并和說明書一起用于解釋本發(fā)明的原理。在附圖中，

圖1顯示具有通式結(jié)構(gòu)7a的化合物的合成反應(yīng)路線；圖2顯示化合物14a的合成反應(yīng)路線；圖3顯示化合物15a的合成反應(yīng)路線；圖4顯示化合物16a的合成反應(yīng)路線；圖5顯示化合物17a的合成反應(yīng)路線；圖6顯示化合物18a的合成反應(yīng)路線；圖7顯示具有通式結(jié)構(gòu)7b的化合物的合成反應(yīng)路線；圖8顯示化合物8b的合成反應(yīng)路線；圖9A-9B顯示化合物10c的合成反應(yīng)路線；圖10顯示化合物14c的合成反應(yīng)路線；圖11顯示化合物17c的合成反應(yīng)路線；圖12顯示具有通式結(jié)構(gòu)18c的化合物的合成反應(yīng)路線；圖13顯示化合物26c的合成反應(yīng)路線；圖14A-14B顯示化合物34c的合成反應(yīng)路線；圖15顯示化合物38c-1的合成反應(yīng)路線；
圖16顯示化合物39c的合成反應(yīng)路線；圖17顯示化合物40c的合成反應(yīng)路線；圖18顯示化合物4d的合成反應(yīng)路線；圖19顯示具有通式結(jié)構(gòu)5d的化合物的合成反應(yīng)路線；圖20顯示化合物8d的合成反應(yīng)路線；圖21顯示化合物10d-1的合成反應(yīng)路線；圖22顯示化合物11d-1的合成反應(yīng)路線；圖23顯示化合物13d的合成反應(yīng)路線；圖24A-24B顯示化合物8e-1的合成反應(yīng)路線；圖25顯示化合物9e的合成反應(yīng)路線；圖26顯示化合物10e-1的合成反應(yīng)路線；圖27顯示具有通式結(jié)構(gòu)7f的化合物的合成反應(yīng)路線；圖28顯示具有通式結(jié)構(gòu)7f的化合物的另一合成反應(yīng)路線；圖29顯示在化合物7f-5和7f-d合成中使用的中間體酰胺酸的合成反應(yīng)圖示；圖30A-30C顯示具有通式結(jié)構(gòu)1g的化合物的合成反應(yīng)路線；圖31顯示具有通式結(jié)構(gòu)4f的化合物的合成反應(yīng)路線；圖32顯示具有通式結(jié)構(gòu)5f的化合物的合成反應(yīng)路線；圖33顯示具有通式結(jié)構(gòu)5f的化合物的另一合成反應(yīng)路線；圖34顯示具有通式結(jié)構(gòu)2h的化合物的合成反應(yīng)路線；圖35顯示具有通式結(jié)構(gòu)1j的化合物的合成反應(yīng)路線；圖36顯示具有通式結(jié)構(gòu)1k的化合物的合成反應(yīng)路線；圖37顯示具有通式結(jié)構(gòu)1m的化合物的合成反應(yīng)路線；圖38顯示化合物6n的合成反應(yīng)路線；圖39顯示化合物13p的合成反應(yīng)路線；圖40顯示化合物16p的合成反應(yīng)路線；圖41A-B顯示化合物9q-1和9q-2的合成反應(yīng)路線；
圖42顯示化合物6r-2的合成反應(yīng)路線；圖43A-B顯示化合物8s-2的合成反應(yīng)路線；圖44顯示化合物7t-2的合成反應(yīng)路線；圖45顯示化合物26t的合成反應(yīng)路線；圖46顯示化合物28t的合成反應(yīng)路線；圖47顯示化合物32t的合成反應(yīng)路線；圖48顯示化合物4u的合成反應(yīng)路線；圖49顯示化合物7v和8v的合成反應(yīng)路線；和圖50顯示化合物10v的合成反應(yīng)路線；圖51顯示化合物17d的合成反應(yīng)路線；圖52顯示化合物20d的合成反應(yīng)路線；圖53顯示化合物26d的合成反應(yīng)路線；圖54顯示化合物47d的合成反應(yīng)路線。
具體實施例方式
本發(fā)明式I-XVII的化合物用于抑制p38α及相關(guān)的p38介導(dǎo)的事件例如細胞因子的產(chǎn)生。這些化合物用作能通過抑制p38信號途徑來治療的疾病的治療活性劑。一般而言，本發(fā)明涉及通式I的化合物， 其中Y是C、N；W是C、N、S或O，條件是當(dāng)Y是C時W是N、S或O，而當(dāng)Y是N時W是C或N；
U是CH或N；V是C-E或N；X是O、S、SO、SO2、NR7、C＝O、CHR7、-C＝NOR1、-C＝CHR1或CHOR1；R1是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；R7是H或取代或未取代的甲基；Ar1是取代或未取代的芳基或雜芳基；A是H、OH、胺保護基、Zn-NR2R3、Zn-NR2(C＝O)R2、Zn-SO2R2、Zn-SOR2、Zn-SR2、Zn-OR2、Zn-(C＝O)R2、Zn-(C＝O)OR2、Zn-O-(C＝O)R2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R2和R3獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者R2、R3和N一起形成具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和的雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；B是H、NH2或取代或未取代的甲基；E是H、Zn-NR2R3、Zn-(C＝O)R4、Zn-(C＝O)R5、Zn-NR5(C＝O)R5、Zn-O(C＝O)R5、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5、Zn-SR5、Zn-NH(C＝O)NHR5或R5；R4是取代或未取代的天然或非天然氨基酸、保護的天然或非天然氨基酸、NH(CHR6)(CH2)mOR5，其中m是1-4的整數(shù)或NR2R3；R5是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R6是天然氨基酸側(cè)鏈、Zn-NR2R3、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5或Zn-SR5；且n是0或1，條件是當(dāng)B是H并且A是CH＝CH-R8，其中R8是取代或未取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基時，那么X-Ar1是取代基，該取代基中當(dāng)X是O、S、C＝O、S＝O、C＝CH2、CO2、NH或N(C1-C8-烷基)時，Ar1不是取代或未取代的芳基、雜芳基、NH-烷基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、NH-烷氧基或NH-二烷基酰胺。
如本文所用，術(shù)語“烷基”是指1-12個碳原子的飽和直鏈或支鏈一價烴基，其中烷基可以任選獨立地被一個或多個下述取代基取代。烷基的實例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、叔戊基、己基、異己基等。
“亞烷基”是指1-12個碳原子的直鏈或支鏈飽和二價烴基，例如亞甲基、亞乙基、亞丙基、2-甲基亞丙基、亞戊基等。
術(shù)語“鏈烯基”是指2-12個碳原子的直鏈或支鏈一價烴基，其含有至少一個雙鍵，例如乙烯基、丙烯基等，其中鏈烯基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代，且包括具有“順式”和“反式”取向或者“E”和“Z”取向的基團。
術(shù)語“亞鏈烯基”是指含有至少一個雙鍵的2-12個碳原子的直鏈或支鏈二價烴基，其中亞鏈烯基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。實例包括但不限于亞乙烯基、亞丙烯基等。
術(shù)語“炔基”是指含有至少一個三鍵的2-12個碳原子的直鏈或支鏈一價烴基。實例包括但不限于乙炔基、丙炔基等，其中炔基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。
術(shù)語“亞炔基”是指含有至少一個三鍵的2-12個碳原子的直鏈或支鏈二價烴基，其中亞炔基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。
術(shù)語“烯丙基”是指具有式RC＝CHCHR的基團，其中R是烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或本文定義的任何取代基，其中烯丙基可以任選獨立地被本文所述的一個或多個取代基取代。
術(shù)語“環(huán)烷基”是指具有3-12個碳原子的飽和或部分不飽和的環(huán)烴基，其中環(huán)烷基可以任選獨立地被本文所述的一個或多個取代基取代。術(shù)語“環(huán)烷基”還包括二環(huán)和三環(huán)環(huán)烷基結(jié)構(gòu)，其中二環(huán)和三環(huán)結(jié)構(gòu)可包括與飽和或部分不飽和的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)或芳基環(huán)或雜芳基環(huán)稠合的飽和或部分不飽和的環(huán)烷基。環(huán)烷基基團的實例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。
術(shù)語“雜烷基”是指1-12個碳原子的飽和直鏈或支鏈一價烴基，其中至少一個碳原子被選自N、O或S的雜原子替代，并且其中基團可以是碳基或雜原子基(即，雜原子可以在基團的中間位置或者在基團的末端)。雜烷基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。術(shù)語“雜烷基”包括烷氧基和雜烷氧基。
術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指3-8個環(huán)原子的飽和或部分不飽和的環(huán)基，其中至少一個環(huán)原子是選自N、O和S的雜原子，其余的環(huán)原子是C，其中一個或多個環(huán)原子可以任選獨立地被一個或多個下文所述的取代基取代，并且其中雜環(huán)烷基環(huán)可以是飽和或部分不飽和的?；鶊F可以是碳基或雜原子基?！半s環(huán)烷基”還包括其中雜環(huán)基團與芳環(huán)或雜芳環(huán)稠合的基團。雜環(huán)烷基環(huán)的實例包括但不限于吡咯烷、哌啶、哌嗪、四氫吡喃、嗎啉、硫代嗎啉、高哌嗪、鄰苯二甲酰亞胺及它們的衍生物。
術(shù)語“雜烯基”是指2-12個碳原子的直鏈或支鏈一價烴基，其含有至少一個雙鍵，例如乙烯基、丙烯基等，其中至少一個碳原子被選自N、O和S的雜原子替代，并且其中基團可以是碳基或雜原子基(即，雜原子可以在基團的中間位置或者在基團的末端)。雜烯基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代，并且包括“順式”和“反式”取向，或者“E”和“Z”取向。
術(shù)語“雜炔基”是指含有至少一個三鍵的2-12個碳原子的直鏈或支鏈一價烴基。實例包括但不限于乙炔基、丙炔基等，其中至少一個碳原子被選自N、O或S的雜原子替代，并且其中基團可以是碳基或雜原子基(即，雜原子可以在基團的中間位置或者在基團的末端)。雜炔基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。
術(shù)語“雜烯丙基”是指具有式RC＝CHCHR的基團，其中R是烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或本文所定義的任意取代基，其中至少一個碳原子被選自N、O或S的雜原子替代，并且其中基團可以是碳基或雜原子基(即，雜原子可以在基團的中間位置或者在基團的末端)。雜烯丙基可以任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。
“芳基”是指6-10個環(huán)原子的一價芳烴單環(huán)基或者多環(huán)芳烴，其任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。更具體地，術(shù)語芳基包括但不限于苯基、1-萘基、2-萘基及它們的衍生物。
“雜芳基”是指5-10個環(huán)原子的一價單環(huán)芳基或者多環(huán)芳基，其含有一個或多個選自N、O或S的雜原子，其余的環(huán)原子為C。芳基任選獨立地被一個或多個本文所述的取代基取代。實例包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、吡唑基、嘧啶基、咪唑基、吡嗪基、吲哚基、噻吩-2-基、喹啉基、苯并吡喃基、噻唑基及它們的衍生物。
術(shù)語“鹵素”代表氟、氯、溴或碘。
“胺保護基”是指在合成過程中用于保護氮原子避免不期望的反應(yīng)的那些有機基團，包括但不限于芐基、芐氧羰基(CBZ)、叔丁氧羰基(Boc)、三氟乙?；取?br> “醇保護基”是指在合成過程中用于保護醇基團或取代基避免不期望的反應(yīng)的那些有機基團，包括但不限于(三甲基甲硅烷基)乙氧甲基(SEM)、叔丁基、甲氧甲基(MOM)等。
“硫保護基”是指在合成過程中用于保護硫基團或取代基避免不期望的反應(yīng)的那些有機基團，包括但不限于芐基、(三甲基甲硅烷基)乙氧甲基(SEM)、叔丁基、三苯甲基等。
“酸保護基”是指在合成過程中用于保護酸基團或取代基避免不期望的反應(yīng)的那些有機基團，包括但不限于芐基、(三甲基甲硅烷基)乙氧甲基(SEM)、甲基乙基和叔丁基酯等。
一般地，式I-XVII的化合物的各種基團或官能團可以任選被一個或多個取代基取代。適于本發(fā)明目的的取代基實例包括但不限于鹵素、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基、Zn-OR、Zn-NO2、Zn-CN、Zn-CO2R、Zn-(C＝O)R、Zn-O(C＝O)R、Zn-O-烷基、Zn-OAr、Zn-SH、Zn-SR、Zn-SOR、Zn-SOsR、Zn-S-Ar、Zn-SOAr、Zn-SO2Ar、芳基、雜芳基、Zn-Ar、Zn-(C＝O)NR2R3、Zn-NR2R3、Zn-NR(C＝O)R、Zn-SO2NR2R3、PO3H2、SO3H2、胺保護基、醇保護基、硫保護基或酸保護基，其中Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；n是0或1；R1、R2和R3是烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基或Zn-雜環(huán)烷基，且Ar是芳基或雜芳基，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基、Ar、R1、R2和R3可以是進一步取代或未取代的。
本發(fā)明的化合物可以具有一個或多個不對稱中心；因此這些化合物可以被制備成單個的(R)-或(S)-立體異構(gòu)體或者它們的混合物。除非另外指明，說明書和權(quán)利要求中所描述或命名的特定化合物意指包括單個對映體以及它們的混合物、外消旋體等。因此，本發(fā)明還包括式I-XVII的化合物的外消旋體以及拆分的對映體和非對映體。立體異構(gòu)體的立體化學(xué)測定和分離的方法在本領(lǐng)域是公知的(參見“Advanced Organic Chemistry”，第四版，J.March，John Wiley andSons，New York，1992第四章的討論)。
除了式I-XVII的化合物，本發(fā)明還包括這些化合物的溶劑合物、藥學(xué)可接受的前藥、藥學(xué)活性代謝物和藥學(xué)可接受的鹽。
術(shù)語“溶劑合物”是指一個分子和一個或多個溶劑分子的聚集體。
“藥學(xué)可接受的前藥”是在生理條件下或者通過溶劑分解可以轉(zhuǎn)化成特定的化合物或者該化合物的藥學(xué)可接受的鹽的化合物。
“藥學(xué)活性代謝物”是在體內(nèi)的特定化合物或其鹽通過代謝而產(chǎn)生的藥學(xué)活性產(chǎn)物?？梢允褂帽绢I(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)鑒定化合物的代謝物，并且可使用例如本文所述的試驗測定它們的活性。
化合物的前藥和活性代謝物可使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)進行鑒定。前藥的各種形式在本領(lǐng)域是已知的。例如，這些前藥衍生物的實例參見，例如a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard編輯，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology Vol.42，p.309-396，K.Widder等編輯(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design andDevelopment，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard編輯，H.Bundgaard的第五章“Design and Application of Prodrugs”，p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38(1992)；d)H.Bundgaard等，Journal of Pharmaceutical Sciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等，Chem.Pharm.Bull.，32692(1984)，上述各文獻均特別引入本文作為參考。
“藥學(xué)可接受的鹽”是保留特定化合物的游離酸和游離堿的生物效應(yīng)的鹽，并且該鹽不是生物學(xué)或其它方面不期望的。本發(fā)明的化合物可具有足夠的酸性官能團、足夠的堿性官能團或這兩種官能團，并因此可以與許多無機或有機堿和無機或有機酸反應(yīng)以形成藥學(xué)可接受的鹽。藥學(xué)可接受的鹽的實例包括通過本發(fā)明的化合物與無機或有機酸或者無機堿反應(yīng)制備的那些鹽，這些鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、反丁烯二酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基-苯甲酸鹽(dinitro-menzoate)、羥苯酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽和扁桃酸鹽。
如果本發(fā)明的化合物是堿，可根據(jù)本領(lǐng)域可獲得的任何適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽淦谕乃帉W(xué)可接受的鹽，例如用無機酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有機酸如乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、吡喃糖苷酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羥基酸如檸檬酸或酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或谷氨酸、芳香酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如對甲苯磺酸或乙磺酸等處理游離堿。
如果本發(fā)明的化合物是酸，可通過任何適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽淦谕乃帉W(xué)可接受的鹽，例如用無機堿或有機堿如胺(伯胺、仲胺或叔胺)、堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物等處理游離酸。適當(dāng)?shù)柠}的示例性實例包括但不限于，衍生自氨基酸如甘氨酸和精氨酸、氨、伯胺、仲胺和叔胺、環(huán)胺如哌啶、嗎啉和哌嗪的有機鹽以及衍生自鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁和鋰的無機鹽。
本發(fā)明的化合物可使用下文所述的反應(yīng)途徑和合成路線，利用本領(lǐng)域可獲得的技術(shù)使用很容易獲得的原料進行制備。
除了通式I的化合物以外，本發(fā)明還包括通式II的化合物， 其中A、B、X和Ar1如上文所定義。
圖1-6顯示具有通式II的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式II的吡唑化合物。使用芳基或雜芳基苯酚或苯硫酚和堿例如在適當(dāng)?shù)臒o水溶劑中的NaH處理2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶。經(jīng)過適當(dāng)?shù)臅r間后，反應(yīng)混合物在有機溶劑和水之間分配，并從有機層中分離出2-O-芳基或S-芳基取代-4-甲基-5-硝基吡啶中間體化合物。然后還原NO2取代基，所述還原例如通過在乙酸中使用鐵粉處理并加熱一段時間，之后用適合的堿例如NaOH處理來進行。使用有機溶劑萃取反應(yīng)混合物來分離得到的苯胺中間體。然后將中間體苯胺化合物與四氟硼酸銨混合，之后加入堿例如KOAc和相轉(zhuǎn)移催化劑(例如18-冠-6)以形成式II的雙環(huán)吡唑化合物，其中A是氫。為制備式II中A不是氫的1-N-取代的吡唑化合物，將吡唑化合物與適當(dāng)?shù)膲A和式RX的化合物反應(yīng)，在RX的化合物中X是鹵素且R是如上文所定義的烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、烯丙基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芐基或CH2-雜芳基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式III的化合物， 其中A、B、X、E和Ar1如上文所定義。
圖7-8顯示具有通式III的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式III的化合物。將芳基苯硫酚或芳基苯酚加入無水溶劑中的強堿中，然后與5-氯-3-甲基-2-硝基吡啶反應(yīng)得到6-S-芳基-或6-O-芳基-取代2-甲基-3-硝基吡啶中間體化合物。還原NO2取代基，所述還原如通過在乙酸中使用鐵粉處理并加熱一段時間，然后使用適當(dāng)?shù)膲A如NaOH處理而進行。使用有機溶劑萃取反應(yīng)混合物來分離得到的苯胺中間體。用四氟硼酸銨處理中間體苯胺化合物，之后加入堿如KOAc和相轉(zhuǎn)移催化劑(例如18-冠-6)以形成式III的二環(huán)氮雜吲唑化合物，其中A是氫。為了制備式III中A不是氫的1-N-取代氮雜吲唑化合物，將氮雜吲唑化合物與適當(dāng)?shù)膲A和式RX的化合物反應(yīng)，在RX的化合物中X是鹵素且R是如上文所述的烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芐基或CH2-雜芳基。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式IV的化合物， 其中A、B、X、E和Ar1如上文所定義，條件是當(dāng)B是H并且A是CH＝CH-R8，其中R8是取代或未取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基時，那么X-Ar1是取代基，該取代基中當(dāng)X是O、S、C＝O、S＝O、C＝CH2、CO2、NH或N(C1-C8-烷基)時Ar不是取代或未取代的芳基、雜芳基、NH-烷基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、NH-烷氧基或NH-二烷基酰胺。
圖9-13顯示具有通式IV的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式IV的化合物。使用堿和碘處理6-硝基吲哚，并使用堿和胺保護基試劑如三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯(SEM-Cl)處理得到的3-碘-6-硝基吲哚。用反式-2-苯乙烯基硼酸和適當(dāng)?shù)拇呋瘎┤鏟d(PPh3)4處理保護的6-硝基吲哚化合物，得到1-N-苯乙烯基-6-硝基吲哚中間體化合物。使用還原劑如肼和適當(dāng)?shù)拇呋瘎?如炭載鈀)還原6-NO2取代基，得到1-N-取代-6-氨基吲哚衍生物。使用亞硝酸鈉處理該衍生物，然后加入碘化鈉和碘，得到1-N-保護-3-苯乙烯基-6-碘吲唑衍生物。使用氧化劑如四氧化鋨或高碘酸鈉處理該衍生物，得到1-N-保護-3-甲醛-6-碘吲唑衍生物。然后該衍生物還可用于許多合成方法，以得到本發(fā)明的各種吲唑化合物，如實施例中所述的化合物。
在另一合成方法中，按如下所述制備式IV的6-OAr-取代化合物。使用適當(dāng)?shù)姆颖Ｗo基試劑處理2-氟-4-羥基苯乙酮，然后加入肼并加熱使得環(huán)化，得到吲唑化合物。使用適當(dāng)?shù)陌繁Ｗo基試劑使該吲唑化合物在1-N位保護。除去酚保護基并用芳基硼酸處理，之后除去胺保護基，得到式IV的6-OAr-取代化合物。
在另一合成方法中，按如下所述制備式IV的6-SAr-取代化合物。使用強堿如叔丁醇鉀處理4-氟苯硫酚，并將2，4-二氟苯基乙基酮加入得到的酚鹽中。將肼加入得到的中間體中，之后加熱以使得環(huán)化，得到式IV的6-SAr-取代化合物。
在另一合成方法中，按如下所述制備式IV的5-OAr-和5-SAr-取代化合物。酯化5-氟-2-硝基苯甲酸，然后用ArOH或ArSH與強堿的混合物處理得到的酯，得到5-XAr-取代2-硝基苯甲酸甲酯，其中X是O或S。將該酯進行皂化，然后加入氫氧化銨，得到2-硝基-苯甲酰胺中間體。用草酰氯處理2-硝基苯甲酰胺使其轉(zhuǎn)變?yōu)?-硝基-芐腈中間體。還原硝基取代基，然后加入亞硝酸鈉，得到式IV的3-氨基-5-XAr-取代吲唑化合物，其中X是O或S。
在另一合成方法中，按如下所述制備式IV的6-OAr-取代化合物。將2-氟-4-羥基芐腈與芳基硼酸、乙酸銅和堿混合得到2-氟-4-芳氧基芐腈中間體。將該衍生物與肼的攪拌溶液回流，得到3-氨基-6-芳氧基-吲唑化合物。該化合物可以用作合成3-酰胺吲唑衍生物的原料，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)酰胺合成化學(xué)方法進行。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式V的化合物，
其中A、X、E和Ar1如上文所定義。
圖24-26顯示具有通式V的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式V的化合物。酯化4-氟-2-羥基苯甲酸，并用適當(dāng)?shù)拇急Ｗo基保護2-羥基基團。通過用堿和ArOH或ArSH處理使得O-Ar或S-Ar基團取代氟基團，其中Ar是如上文所定義的芳基或雜芳基。除去醇保護基，并將酯皂化，然后用羰基二咪唑處理以使得環(huán)化，得到6-OAr-或6-SAr-3-羥基苯并異噁唑化合物。通過用POCl3和堿處理使得3-羥基苯并異噁唑化合物轉(zhuǎn)變?yōu)?-氯苯并異噁唑衍生物。然后將該產(chǎn)物用于制備本發(fā)明的3-O-Ar-或3-NH-Ar-取代苯并異噁唑化合物。例如，可將6-取代-3-氯苯并異噁唑化合物加入ArOH和強堿(如NaH)的混合物中，得到6-取代-3-O-Ar-苯并異噁唑衍生物。在另一合成方法中，將6-取代-3-氯苯并異噁唑化合物加入ArNH2和強堿的混合物中，得到6-取代-3-NHAr-苯并異噁唑衍生物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式VI和VII的化合物，
其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
圖14-15顯示具有通式VI的具體化合物的合成實施例，而圖18、19和23顯示具有通式VII的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式VI和VII的化合物。通過用NaNO2的水溶液處理5-氨基-1H-吲唑，之后加入KI來制備5-碘-1H-吲唑。用有機溶劑萃取反應(yīng)混合物來分離產(chǎn)物，之后可將該產(chǎn)物進一步用于各種合成方法以得到本發(fā)明的吲唑化合物。在一個方法中，用適當(dāng)?shù)陌繁Ｗo基保護5-碘-1H-吲唑的1-氨基基團，并用堿、銅粉和芳基苯酚或芳基苯硫酚處理被保護的5-碘吲唑，得到5-O-芳基取代吲唑(式VI)或5-S-芳基取代吲唑(式VII)。除去胺保護基，得到本發(fā)明的式VI或VII的化合物。
在另一個途徑中，使用堿和RX或Ar1CH2X處理5-碘-1H-吲唑，在RX和Ar1CH2X中R是如上文所定義的烷基或烯丙基，Ar1是如上文所定義的芳基或雜芳基，且X是鹵素或其它適當(dāng)?shù)碾x去基團。然后使用堿、銅粉和芳基苯硫酚或芳基苯酚處理1-N-取代5-碘吲唑，得到本發(fā)明的5-O-芳基取代吲唑(式VI)或5-S-芳基1-N-取代吲唑(式VII)化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式VIII的化合物，
其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
圖22顯示具有通式VIII的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，通過使用可將芳基硫化物氧化成相應(yīng)的芳基亞硫?；苌锏难趸瘎┭趸絍II的化合物來制備式VIII的化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式IX的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
圖21顯示具有通式IX的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，通過使用可將芳基硫化物氧化為相應(yīng)的芳基磺?；苌锏难趸瘎┭趸絍II的化合物來制備式IX的化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式X的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
圖31顯示具有通式X的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式X的化合物。將4-溴-2-甲基苯胺加入四氟硼酸銨和乙酸的混合物中。一段時間后，在混合物中加入亞硝酸鈉，然后加入堿如乙酸鉀和相轉(zhuǎn)移催化劑如18-冠-6，得到5-溴吲唑。在堿存在下，用RBr處理該溴吲唑，得到1-N-取代5-溴吲唑衍生物，其中R是如上文對式X所定義中除了H以外的″A″。在強堿如丁基鋰存在下，用其中Ar1如上文所定義的Ar1CHO處理1-N-取代衍生物，得到式X的醇化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XI的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
圖32顯示具有通式XI的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式XI的化合物。將4-溴-2-甲基苯胺加入四氟硼酸銨和乙酸的混合物中。一段時間后，在混合物中加入亞硝酸鈉，然后加入堿如乙酸鉀和相轉(zhuǎn)移催化劑如18-冠-6，得到5-溴吲唑。在堿存在下，用RBr處理該溴吲唑，得到1-N-取代5-溴吲唑中間體，其中R是如上文對式XI所定義中除了H以外的″A″。在強堿如丁基鋰存在下，用其中Ar1如上文所定義的Ar1CHO處理1-N-取代衍生物，然后用適當(dāng)?shù)难趸瘎┨幚?，得到式XI的1-N-取代化合物。圖33顯示了另一合成式XI的化合物的方法。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XII的化合物，
其中A、B、E、R1和Ar1如上文所定義。
圖27顯示具有通式XII的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式XII的化合物。將4-溴-2-甲基苯胺加入四氟硼酸銨和乙酸的混合物中。一段時間后，在混合物中加入亞硝酸鈉，然后加入堿如乙酸鉀和相轉(zhuǎn)移催化劑如18-冠-6，得到5-溴吲唑。在堿存在下，用RBr處理該溴吲哚，得到1-N-取代5-溴吲唑衍生物，其中R是上文所定義的烷基、烯丙基、ArCH2或雜芳基-CH2。在強堿如丁基鋰存在下，用其中Ar1如上文所定義的Ar1CHO處理1-N-取代衍生物，然后用適當(dāng)?shù)难趸瘎┨幚?，得?-N-取代5-C＝OR衍生物。向于吡啶中的該衍生物中加入NH2OR1，其中R6如上文所述，得到式XII的肟化合物。圖28顯示了另一合成式XII的化合物的方法。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XIII的化合物， 其中A、B、E和Ar1如上文所定義。
圖34顯示具有通式XIII的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式XIII的化合物。將4-溴-2-甲基苯胺加入四氟硼酸銨和乙酸的混合物中。一段時間后，在混合物中加入亞硝酸鈉，然后加入堿如乙酸鉀和相轉(zhuǎn)移催化劑如18-冠-6，得到5-溴吲唑。在堿存在下，用RBr處理該溴吲哚，得到1-N-取代5-溴吲唑中間體，其中R是如上文對式XI所定義中除了H以外的″A″。用強堿如丁基鋰處理1-N-取代中間體，然后加入三甲基硼酸鹽，得到5-硼酸吲唑中間體。加入銅(II)催化劑，然后加入取代或未取代的苯胺，得到式XIII的化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XIV的化合物， 其中A、B、X、Ar1、R2和R3如上文所定義。
圖30A-30C顯示具有通式XIV的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式XIV的化合物。將1-氟-3-甲基-苯進行加成反應(yīng)形成2-氟-4-甲基苯甲酸，然后進行硝化，得到2-氟-4-甲基-5-硝基苯甲酸。對酸基團進行酯化，然后用ArOH和強堿處理使ArO-替代氟基團。還原硝基基團，然后進行重氮化和環(huán)化，得到5-OAr-6-CO2Me吲唑衍生物，然后在堿存在下用RBr處理5-OAr-6-CO2Me吲唑衍生物，得到1-N取代衍生物。對酯基團進行水解，然后酰胺化，得到具有式XIV的6-酰胺吲唑衍生物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XV的化合物，
其中A、B、X和Ar1如上文所定義，R12和R13獨立地是烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基可以是取代或未取代的。
圖34顯示具有通式XV的具體化合物的合成實施例。在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式XV的化合物。如上所述根據(jù)式XIV的合成制備5-OAr-6-CO2Me吲唑衍生物，然后在堿存在下用RBr處理，得到1-N取代衍生物。對酯基團進行水解，然后用羰基二咪唑和氨基酸處理，得到式XV的6-取代吲唑衍生物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XVI的化合物， 其中A、B、X、R2、R3和Ar1如上文所定義。
在一個通常的合成方法中，按如下所述制備式XVI的化合物。如上所述根據(jù)式XIV的合成制備5-OAr-6-CO2Me吲唑衍生物，然后還原，所述還原例如通過用于THF中的BH3處理來進行。純化，得到式XVI的化合物。
在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及通式XVII的化合物，
其中Y是CR1、O、S或NR2；W是CR3、N、NR4、S或O，條件是當(dāng)Y是CR1時W是NR4、S或O，而當(dāng)Y是NR2時W是CR3或N；R3是H、NH2、F、Cl、甲基或取代的甲基；R4是H、甲基或取代的甲基；R1和R2獨立地是H、OH、胺保護基、Zn-NRaRb、Zn-NRa(C＝O)Rb、Zn-SO2Ra、Zn-SORa、Zn-SRa、Zn-ORa、Zn-(C＝O)Ra、Zn-(C＝O)ORa、Zn-O-(C＝O)Ra、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；Ra和Rb獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者Ra和Rb與它們共同連接的原子一起形成在環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和的雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或者具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；n是0或1；U是CRc或N；V是CRc或N；Rc是H、F、Cl、甲基或取代的甲基；X是O、S、SO、SO2、NR5、C＝O、CH2、CH2Zn-OH或C＝NORd；R5是H、甲基或取代的甲基；Rd是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；G、H、J和T獨立地是N或CRz，條件是當(dāng)所述G、H、J和T中的任意一個是N時，G、H、J或T為N的總數(shù)不超過2；Rz是H、F、Cl、Br、CF3、OR6、SR6、低級烷基(C1-C4)、CN或NR6R7；R6和R7獨立地是H、CF3、低級烷基(C1-C4)或低級雜烷基(C1-C4)；Q是-NR8CONH-、-NHCO-、-NR8SO2NH-、-NHSO2-、-CONR11-；R8是H或低級(C1-C4)烷基；
R11是H或低級(C1-C4)烷基；Rx是-(CR9R10)m-、-O(CR9R10)m-、NH(CR9R10)m-或-S(CR9R10)m-，條件是當(dāng)Rx是-O(CR9R10)m-、-NH(CR9R10)m-或-S(CR9R10)m時，Q是-CONR11-；R9和R10獨立地是H或低級烷基，或者R9和R10與它們共同連接的原子一起形成可以是飽和或部分不飽和的環(huán)烷基環(huán)；m是1-3；Ry是H、PO3H、胺保護基、氧保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar2，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-Ar2和Zn-雜環(huán)烷基可以是取代或未取代的；Ar2是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的，其中所述取代可以是1-3個取代基，所述取代基獨立地選自F、Cl、Br、CF3、CN、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、-OR12、-SR12、-SO2R12、-SO2NR13R12、NR13SO2R12、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R12和R13獨立地是H、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；
其中當(dāng)Ar2被-SO2NR13R12取代時，R12和R13可以形成可以是取代或未取代的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)，其中所述取代可以是選自以下的取代基烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、-COR12、-SO2R12、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；其中當(dāng)Q是-CONR11時，Ry與R11結(jié)合為另外的可以被選自以下基團取代或未取代的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基、Zn-Ar1、-COR14或-SO2R14，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基、Zn-Ar1、-COR14和-SO2R14可以是取代或未取代的；且R14是烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的。
圖38-50顯示具有通式XVII的具體化合物的合成實施例。
治療有效量的本發(fā)明的化合物可用于治療由蛋白激酶的調(diào)制或調(diào)節(jié)所介導(dǎo)的疾病。“有效量”意指當(dāng)將化合物給予需要這種治療的哺乳動物時足以實現(xiàn)對疾病治療的量，所述疾病由一種或多種蛋白激酶如p38α的活性及相關(guān)的p38介導(dǎo)的事件如細胞因子的產(chǎn)生所介導(dǎo)。因此，例如，選自式I-XVII的化合物或其鹽、活性代謝物或前藥的治療有效量是足以調(diào)制、調(diào)節(jié)或抑制一種或多種蛋白激酶的活性以減輕或緩解由該活性所介導(dǎo)的病癥的量。
與這樣的量相應(yīng)的給定活性劑的量取決于很多因素，如特定的化合物、病癥及其嚴重程度、需要治療的哺乳動物特征(如體重)，盡管如此但是其仍可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)地確定?！爸委煛币庵覆溉閯游锶缛说牟“Y的至少減輕，所述病癥至少部分地是由一種或多種蛋白激酶如p38的活性所影響，且治療包括但不限于預(yù)防哺乳動物病癥的發(fā)生，特別是當(dāng)發(fā)現(xiàn)哺乳動物有患該病癥的傾向但還沒有診斷出患有該疾病時；調(diào)制和/或抑制病癥；和/或緩解病癥。
為了使用式I-XVII的化合物、其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥用于包括人在內(nèi)的哺乳動物的治療(包括預(yù)防性治療)，通常根據(jù)標準的藥學(xué)實踐將其配制成藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的這一方面，本發(fā)明提供了一種包含如上文所定義的式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的前藥以及藥學(xué)可接受的稀釋劑或載體的藥物組合物。
本發(fā)明的組合物可以是適于口服的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠囊劑、水或油混懸劑、乳劑、可分散性散劑或顆粒劑、糖漿劑或酏劑)、適于局部應(yīng)用的形式(例如乳膏、軟膏、凝膠劑或水或油溶液劑或混懸劑)、適于吸入給藥的形式(例如微細散劑或液態(tài)氣霧劑)、適于吹入給藥的形式(例如微細散劑)或者適于胃腸外給藥的形式(例如用于靜脈、皮下或肌內(nèi)給藥的無菌水或油溶液或用于直腸給藥的栓劑)。例如，用于口服使用的組合物可以包含例如一種或多種著色劑、甜味劑、調(diào)味劑和/或防腐劑。
適當(dāng)?shù)挠糜谄瑒┑乃帉W(xué)可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；成粒劑和崩解劑如玉米淀粉或藻酸(algenic acid)；粘合劑如淀粉；潤滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯和抗氧化劑如抗壞血酸。片劑可以是未包衣的，或者是包衣的以改變它們在胃腸道內(nèi)的崩解和隨后的活性成分的吸收或者改善它們的穩(wěn)定性和/或外觀，不論那種情況，均可使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)包衣劑和方法進行。
用于口服使用的組合物可以是其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合的硬膠囊的形式，或者是其中活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合的軟膠囊的形式。
水混懸劑通常包含細粉末形式的活性成分和一種或多種助懸劑如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤濕劑如卵磷脂或環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合物(如聚氧乙烯硬脂酸酯)或環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合物，如十七烷乙烯氧基十六醇、環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合物，如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合物如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水混懸劑還可以包含一種或多種防腐劑(如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(如抗壞血酸)、著色劑、調(diào)味劑和/或甜味劑(如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
可將活性成分懸浮在植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如液體石蠟)中制備油混懸劑。油混懸劑還可以包含增稠劑如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇。還可以加入甜味劑，如上文所述的那些以及調(diào)味劑以得到一種可口的口服制劑。還可以通過加入抗氧化劑如抗壞血酸以保護這些組合物。
適于通過加入水而制備水懸浮液的可分散性散劑和顆粒劑通常包含活性成分和分散劑或潤濕劑、助懸劑和一種或多種防腐劑。適當(dāng)?shù)姆稚┗驖櫇駝┮约爸鷳覄┑膶嵗缟衔乃峒暗哪切?。還可以有其它賦形劑如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以是水包油型乳劑的形式。油相可以是植物油如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟，或它們的任意混合物。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┛梢允抢缣烊荒z如阿拉伯樹膠或黃蓍樹膠、天然磷脂如大豆、卵磷脂、衍生于脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(如脫水山梨糖醇單油酸酯)和所述偏酯和環(huán)氧乙烷的縮合物如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳劑還可以包含甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。
可以用甜味劑如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖配制糖漿劑和酏劑，并且糖漿劑和酏劑還可包含緩和劑(demulcent)、防腐劑、調(diào)味劑和/或著色劑。
藥物組合物還可以是無菌可注射用水或油混懸劑的形式，其可以根據(jù)已知方法用一種或多種合適的如上所述的分散劑或潤濕劑以及助懸劑進行配制。無菌可注射用制劑還可以是在無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射用溶液或懸浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液。
栓劑可通過將活性成分和適當(dāng)?shù)姆谴碳ば再x形劑混合來制備，所述非刺激性賦形劑在常溫下是固體但在直腸溫度下為液體，因此可以在直腸中融化釋放出藥物。適當(dāng)?shù)馁x形劑包括例如，可可脂和聚乙二醇。
局部用制劑如乳膏、軟膏、凝膠劑和水或油溶液劑或混懸劑通常可以通過使用本領(lǐng)域已知的常規(guī)方法用活性成分和常規(guī)的局部可接受的載體或稀釋劑配制而獲得。
通過吹入給予的組合物可以是含有平均直徑為例如30μm或更小的顆粒的微細散劑形式，該散劑本身或者僅包含活性成分或者包含用一種或多種生理學(xué)可接受的載體如乳糖稀釋的活性成分。然后將用于吹入的散劑方便地保存在膠囊中，該膠囊包含例如1-50mg活性成分，通過渦輪吸入裝置如用于吹入已知藥物色甘酸鈉的裝置使用。
通過吸入給藥的組合物可以是常規(guī)的加壓的用于將活性成分分散成包含微細固體粒子或液滴的氣溶膠的氣霧劑形式?？梢允褂贸Ｒ?guī)的氣霧劑推進劑如揮發(fā)性氟代烴或烴，并且氣霧劑裝置方便地用于分配計量量的活性成分。
關(guān)于制劑的更多信息，參見Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.2章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990，特別將該文獻引入本文作為參考。
與一種或多種賦形劑組合生產(chǎn)單個劑型的本發(fā)明的化合物的量必須根據(jù)治療的對象和具體的給藥途徑而變化。例如，用于口服給予人的制劑可包含與適當(dāng)而方便量的賦形劑混合的例如0.5mg至2g的活性劑化合物，賦形劑的量為以組合物的總重量計約5至約98％。單位劑量形式通常包含約1mg至約500mg的活性成分。有關(guān)給藥途徑和用藥法的更多信息，參見Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.3章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，PergamonPress 1990，特別將該文獻引入本文作為參考。
式I-XVII的化合物用于治療或預(yù)防目的的劑量大小通常根據(jù)眾所周知的用藥原則，根據(jù)病癥的性質(zhì)和嚴重程度、動物或患者的年齡和性別以及給藥途徑而變化。
本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或前藥可以配制成用于給予動物或人以治療或預(yù)防p38介導(dǎo)的疾病的藥物組合物。如本文所用，術(shù)語“p38介導(dǎo)的疾病”指已知p38在其中發(fā)揮作用的任何疾病或其它有害狀況。這包括已知的由IL-1、TNF、IL-6或IL-8的過度產(chǎn)生所導(dǎo)致的病癥。這些病癥包括但不限于炎癥性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增生性疾病、傳染病、病毒性疾病和神經(jīng)變性性疾病。
可治療或預(yù)防的炎癥性疾病包括但不限于急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、變態(tài)反應(yīng)和成人呼吸窘迫綜合征。
可治療或預(yù)防的自身免疫性疾病包括但不限于腎小球腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、格雷夫斯病、自身免疫性胃炎、胰島素依賴型糖尿病(I型)、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性中性粒細胞減少癥、血小板減少癥、特應(yīng)性皮炎、慢性活動性肝炎、重癥肌無力、多發(fā)性硬化癥、炎癥性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、克隆氏病、銀屑病或移植物抗宿主性疾病。
可治療或預(yù)防的破壞性骨疾病包括但不限于骨質(zhì)疏松癥、骨關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性骨髓瘤相關(guān)性骨疾病。
可治療或預(yù)防的增生性疾病包括但不限于急性髓性白血病、慢性髓性白血病、轉(zhuǎn)移性黑色素瘤、卡波西氏肉瘤和多發(fā)性骨髓瘤。
可治療或預(yù)防的傳染病包括但不限于敗血癥、感染性休克和志賀氏菌病。
可治療或預(yù)防的病毒性疾病包括但不限于急性肝炎、感染(包括甲型肝炎；乙型肝炎和丙型肝炎)、HIV感染和CMV視網(wǎng)膜炎。
可用本發(fā)明的化合物治療或預(yù)防的變性性病癥或疾病包括但不限于阿爾茨海默病、帕金森氏病、腦缺血及其它神經(jīng)變性性疾病。
“p38介導(dǎo)的疾病”還包括中風(fēng)中的缺血/再灌注、心臟病發(fā)作、心肌缺血、器官缺氧、血管增生、心臟肥大和凝血酶誘導(dǎo)性血小板聚集。
另外，本發(fā)明的p38抑制劑還能夠抑制可誘導(dǎo)的前炎癥蛋白如前列腺素內(nèi)過氧化物合酶-2(PGHS-2)，也稱作環(huán)氧合酶-2(COX-2)的表達。因此，其它的“p38介導(dǎo)的疾病”為水腫、痛覺缺失、發(fā)燒和疼痛如神經(jīng)肌肉疼痛、頭痛、癌痛、牙痛和關(guān)節(jié)痛。
可根據(jù)被認為是疾病原因的細胞因子(如IL-1、TNF、IL-6、IL-8)方便地將可以用本發(fā)明p38抑制劑治療或預(yù)防的病況或疾病分類。
因此，IL-1介導(dǎo)的疾病或病癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、中風(fēng)、內(nèi)毒素血癥和/或中毒性休克綜合征、內(nèi)毒素誘導(dǎo)性炎癥反應(yīng)、炎癥性腸病、結(jié)核病、動脈粥樣硬化、肌肉變性、惡病質(zhì)、銀屑病關(guān)節(jié)炎、賴特氏綜合征、痛風(fēng)、創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎、急性滑膜炎、糖尿病、胰腺β-細胞病和阿爾茨海默病。
TNF介導(dǎo)的疾病或病癥包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎及其它關(guān)節(jié)炎病癥、敗血癥、感染性休克、內(nèi)毒素性休克、革蘭氏陰性敗血癥、中毒性休克綜合征、成人呼吸窘迫綜合征、腦型瘧、慢性肺部炎癥性疾病、矽肺病、肺結(jié)節(jié)病、骨吸收疾病、再灌注損傷、移植物抗宿主反應(yīng)、同種異體移植物排斥、感染引起的發(fā)燒和肌痛、感染繼發(fā)的惡病質(zhì)、AIDS、ARC或惡性腫瘤、形成瘢痕疙瘩、形成瘢痕組織、克隆氏病、潰瘍性結(jié)腸炎或熱病。TNF介導(dǎo)的疾病還包括病毒感染如HIV、CMV、流行性感冒和皰疹；以及獸醫(yī)性病毒感染如慢病毒屬感染，包括但不限于馬傳染性貧血病毒、羊關(guān)節(jié)炎病毒、綿羊髓鞘脫落病毒或呼吸困難病毒；或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染，包括貓免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒或狗免疫缺陷病毒。
IL-8介導(dǎo)的疾病或病癥包括以大量中性白細胞浸潤為特征的疾病，如銀屑病、炎癥性腸病、哮喘、心臟和腎臟再灌注損傷、成人呼吸窘迫綜合征、血栓形成和腎小球腎炎。
另外，可以局部應(yīng)用本發(fā)明的化合物治療或預(yù)防由IL-1或TNF引起或加重的病癥。這些疾病包括關(guān)節(jié)炎(inflamed joints)、濕疹、銀屑病、炎癥性皮膚病如曬斑、炎性眼疾病如結(jié)膜炎、熱病、疼痛和其它與炎癥相關(guān)的病癥。
本發(fā)明的化合物可以與其它用于治療通過抑制細胞因子特別是IL-1、TNF、IL-6或IL-8將好轉(zhuǎn)的疾病的藥物和治療組合使用。
例如，因為它們具有抑制細胞因子的能力，式I-XVII的化合物在治療某些目前用環(huán)氧合酶抑制性非甾體抗炎藥(NSAID)如吲哚美辛酮咯酸、乙酰水楊酸、布洛芬、舒林酸、托美汀和吡羅昔康進行治療的炎癥性或非炎癥性疾病是有價值的。式I-XVII的化合物和NSAID聯(lián)合給藥可以減少NSAID產(chǎn)生治療效果時所需的用量，因此也降低了NSAID副作用如胃腸反應(yīng)的可能性。因此本發(fā)明的另一個特征是提供一種這樣的藥物組合物，其包含與環(huán)氧合酶抑制性非甾體抗炎藥結(jié)合或混合的式I-XVII的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或在體內(nèi)可裂解的酯和藥學(xué)可接受的稀釋劑或載體。
式I-XVII的化合物還可以與抗風(fēng)濕藥聯(lián)合治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等病癥，所述抗風(fēng)濕藥例如是金、甲氨喋呤、甾族化合物和青霉胺，并還可以和甾族化合物聯(lián)合用于治療骨關(guān)節(jié)炎等病癥。
本發(fā)明的化合物還可和軟骨保護、抗降解和/或修復(fù)劑聯(lián)合用于治療降解性疾病如骨關(guān)節(jié)炎，所述軟骨保護、抗降解和/或修復(fù)劑例如是Diacerhein、透明質(zhì)酸制劑如Hyalan、Rumalon、粘多糖聚硫酸酯(Arteparon)和葡糖胺鹽如Antril。
式I-XVII的化合物還可以和止喘藥聯(lián)合治療哮喘，所述止喘藥例如是支氣管擴張劑和白三烯拮抗劑。
雖然式I-XVII的化合物主要是作為用于溫血動物(包括人)的治療活性劑有價值，但是在需要抑制細胞因子作用的任何時候其均是有用的。因此，它們作為用于開發(fā)新的生物學(xué)試驗和用于研究新的藥物制劑的藥理學(xué)標準物是有用的。
可以在體外、體內(nèi)或細胞系中測定本發(fā)明的化合物對p38抑制的活性。體外測定包括測定對激活的p38的激酶活性或ATP酶活性的抑制的測定。另一體外測定是定量分析抑制劑與p38結(jié)合的能力，其可以通過下述方法進行測定在結(jié)合前對抑制劑進行放射性標記，分離抑制劑/p38復(fù)合物并測定結(jié)合的放射性標記的量，或者進行競爭性試驗，其中將新的抑制劑和與已知的放射性配體結(jié)合的p38溫育。在體外和細胞培養(yǎng)測定中使用的這些和其它方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的。
本發(fā)明化合物的抑制作用的細胞培養(yǎng)試驗可用于確定全血或其細胞部分產(chǎn)生的TNF-α、IL-1、IL-6或IL-8的量，并且將使用抑制劑處理的細胞與使用陰性對照處理的細胞相比較。通過使用可商購獲得的ELISA或如下文生物學(xué)實施例部分所述測定這些細胞因子的水平。
生物學(xué)實施例通過以下體外試驗證明本發(fā)明的化合物的生物學(xué)活性。
p38生物化學(xué)試驗室溫下，在100μL含有5nM激活的p38α酶和作為底物的于25mM HEPS(pH 7.4)中的1μM ATF-2(轉(zhuǎn)錄激活因子2融合蛋白)、100μM釩酸鹽、1mM DTT、10mM MgCl2和10μM[□-33P]-ATP(～0.1μCi P33/反應(yīng)液)的反應(yīng)中測定p38活性。30-40分鐘后加入25％TCA終止反應(yīng)，放置5分鐘，然后直接轉(zhuǎn)移至GF-B膜濾板上。使用TomtecMach III自動收集器用0.5％磷酸30秒洗滌該過濾器兩次。洗滌后，抽真空30秒以干燥過濾器。向濾板的每孔中加入大約30μL的閃爍劑。
PBMC試驗使用人外周血單核細胞(“PBMC”)評價本發(fā)明的化合物抑制TNF-α產(chǎn)生的能力，該外周血單核細胞當(dāng)用脂多糖刺激時能夠合成和分泌TNF-α。
用DMSO進行5倍系列稀釋制備化合物試驗溶液，然后使用MEM、2％熱滅活胎牛血清(“FBS”)、20mM HEPES、2mM L-谷氨酰胺和1％青霉素/鏈霉素將上述稀釋液稀釋為5×儲備液。
如下所述從人血中分離出PBMC。將從人志愿者收集的全血樣品放于Becton Dickinson的VacutainerTMCPT中。將試管混合并在室溫(18-25℃)下在水平轉(zhuǎn)頭中以1500-1800RCF(相對離心力)將試管離心最少15分鐘。對于每一個供體，將血沉棕黃層(buffy coat layer)收集到一個試管中，用磷酸鹽緩沖鹽水(“PBS”)洗滌兩次。將細胞沉淀物重新懸浮于MEM、2％熱滅活胎牛血清(“FBS”)、20mM HEPES、2mM L-谷氨酰胺和1％青霉素/鏈霉素中。使用血細胞計數(shù)器測定細胞總數(shù)，并將細胞懸液調(diào)整至2×106細胞/mL。
將0.1mL細胞懸液加入96-孔細胞培養(yǎng)板的每一孔中。加入30μL化合物試驗溶液，并將細胞在37℃/5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1小時。然后向每一孔中加入20μL 7.5ng/mL脂多糖(LPS E.Coli K-235)，并將細胞放回37℃/5％ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16-20小時。以1100 RCF將細胞離心15分鐘。將大約0.12mL的上清液轉(zhuǎn)移至一個干凈的96孔聚丙烯板中。立即對樣品進行測定或者貯存在-80℃下直至用于測定。如下文所述使用人TNF-αELISA測定法測定每個樣品的TNF-α水平。
使用下述測定法測定TNF-α水平。TNF-α抗體包被的培養(yǎng)板通過下述方法制備將150μL于Carbonate-Bicarbonate緩沖液(BupHTMCarbonate-Bicarbonate Buffer Pack)中的2μg/mL抗TNF-α純化小鼠單克隆IgG加入96-孔Immulon 4板(Immulon 4 ELISA Flat Bottom Plate；Dynex，目錄號011-010-3855)中，并于2-8℃下溫育過夜。除去包被液，并加入200μL“封閉緩沖液”(20mM HEPES pH 7.4、150mMNaCl、2％ BSA)，將培養(yǎng)板于2-8℃下貯存直至使用。用“樣品稀釋劑”(20mM HEPES、pH 7.4、150mM NaCl、2mM MgCl2、1％ BSA)進行1∶2系列稀釋制備有十點的重組人TNF-α標準曲線，最高濃度為6000pg/mL。
通過用300μL“洗滌緩沖液”(20mM HEPES、pH 7.4、150mMNaCl、2mM MgCl2、0.02％吐溫20)洗滌TNF-αELISA板5次以將封閉液除去。將50μL“樣品稀釋劑”加入所有的孔中，然后將50μLTNF-α標準曲線液或試驗化合物上清液加入所有孔中。室溫下將該板振搖(300rpm)溫育1小時。使用300μL“洗滌緩沖液”將該板洗滌5次。每孔中加入100μL于“抗體稀釋劑”(20mM HEPES、pH 7.4，150mM NaCl、2mM MgCl2、1％ BSA、0.02％吐溫20)中的0.2μg/mL生物素化山羊抗人TNF-α，室溫下將該板振搖(300rpm)溫育1小時。每孔使用300μL“洗滌緩沖液”將該板洗滌5次。向每孔中加入100μL于“抗體稀釋劑”中的0.02μg/mL鏈霉抗生物素堿性磷酸酶，室溫下將該板振搖(300rpm)溫育1小時。每孔使用300μL“洗滌緩沖液”將該板洗滌5次。向每孔中加入200μL于有0.5mM MgCl2的二乙醇胺緩沖液中的1mg/mL pNPP(磷酸對硝基苯酯)，并將該板在室溫下振搖(300rpm)溫育30-45分鐘。通過測定光密度監(jiān)測反應(yīng)進程當(dāng)最高標準達到OD為2.0至3.0時，向每孔中加入50μL 2N NaOH。在30分鐘內(nèi)使用微量滴定板讀數(shù)器在405nm處測定每孔的光密度。使用4-參數(shù)曲線擬合法在XL擬合中分析數(shù)據(jù)。
下述試劑用于如上所述的測定中。不含鈣或鎂的Dulbecco氏磷酸鹽緩沖鹽水(Gibco目錄號14190)；極限必需培養(yǎng)基Eagle(MEM；Gibco目錄號11090)；青霉素-鏈霉素(Gibco目錄號15140)；L-谷氨酰氨，200mM(Gibco目錄號25030)；HEPES，1M(Gibco目錄號15630)；胎牛血清(″FBS″；HyClone目錄號SH30070.03)；來自大腸桿菌(Escherichia coli)K-235的脂多糖(″LPS″；Sigma目錄號L2018)；抗-TNF-α，純化小鼠單克隆IgG(R&D Systems目錄號MAB210)；BupHTMCarbonate-Bicarbonate Buffer Pack(Pierce目錄號28382)；HEPES(FW 238.3；Sigma目錄號H3575)；NaCl(Sigma目錄號S7653)；牛血清白蛋白(″BSA″；Jackson Immuno Reseach目錄號001-000-162)；聚氧乙烯20脫水山梨糖醇單月桂酸酯(Sigma目錄號P2287)；氯化鎂六水合物(Sigma目錄號M2670)、重組人TNF-α(R&D Systems目錄號210TA010)；生物素化TNF-α親和純化山羊IgG(R&D Systems目錄號BAF210)；鏈霉抗生物素堿性磷酸酶(Jackson ImmunoResearch目錄號016-050-084)；二乙醇胺底物緩沖液(Pierce目錄號34064)、；磷酸對硝基苯酯(Sigma目錄號N2765)。
表3顯示對p38的抑制和對由LPS-誘導(dǎo)的人外周血單核細胞(″PBMC″)的TNF-α分泌的抑制的結(jié)果。IC50值低于500nM的化合物被定義為“活性”化合物。
表3


小鼠試驗LPS-誘導(dǎo)TNF-α產(chǎn)生的小鼠模型在雄性DBA-2J小鼠(來自Jackson實驗室)中通過尾部靜脈注射2mg/kg脂多糖(來自Sigma，St.Louis)誘導(dǎo)TNF-α。90分鐘后用異氟烷麻醉的小鼠通過心臟刺穿取血。然后在4℃下使血樣凝固2小時并離心。分離血清，裝入微量離心管供以后的TNF-α分析用。使用ELISA試劑盒(Quantikine，MN)進行TNF-α分析并根據(jù)所附的說明書進行。
10％的DMSO加上90％的20％ 2-羥基-β-環(huán)糊精(HPCD)制備化合物AR-00112190?；衔顰R-00112190是化合物14g(參見圖3)的衍生物，其中A是異丁基。然后用載體(10％ DMSO，90％ 20％ HPCD)系列稀釋化合物以制備更低劑量水平所需的濃度。在化合物中加入DMSO形成溶液，然后再加入20％ HPCD析出化合物。因此，化合物以懸浮液的形式給藥。在LPS注射前30分鐘，對7組雄性DBA-2J小鼠(每組7只)口服給予AR-00112190(10、30和100mg/kg)。
使用化合物AR-00112190(10、30和100mg/kg)治療還顯著地降低了TNF-α水平。用100mg/kg劑量時AR-00112190顯示出相似的抑制(42％)(表4)。
該研究結(jié)果表明10、30和100mg/kg的AR-00112190具有顯著性有益效果(29％、44％和42％)。
表4

制備實施例為例示本發(fā)明，給出了下述實施例。然而，應(yīng)理解這些實施例并不是限制本發(fā)明，其只是提出實施本發(fā)明的一種方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認識到所描述的化學(xué)反應(yīng)可以很容易地適用于制備很多本發(fā)明的其它p38抑制劑，而且制備本發(fā)明化合物的其它方法也被認為是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。例如，通過對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言清楚的修飾，如通過適宜地保護干擾基團，通過使用其它本領(lǐng)域已知的非本文所描述的適當(dāng)試劑，和/或通過對反應(yīng)條件進行常規(guī)地修改，可以成功地進行合成根據(jù)本發(fā)明沒有舉例的化合物。或者，本文公開的或本領(lǐng)域已知的其它反應(yīng)也被認為對制備本發(fā)明的其它化合物有應(yīng)用性。
實施例在下述的實施例中，除非另外指出，所示的所有溫度均為攝氏溫度。除非另有指出，試劑購自商品供應(yīng)商處如Aldrich ChemicalCompany、Lancaster、TCl或Maybridge，并且使用時沒有進一步純化。四氫呋喃(THF)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷(DCM)、甲苯、二噁烷和1，2-二氟乙烷以全密封瓶(Sure seal bottle)購自Aldrich，并按原樣使用。
下述反應(yīng)通常在氮氣或氬氣正壓下或使用干燥管(除非另有說明)在無水溶劑中進行，反應(yīng)瓶通常安裝有橡膠隔膜以通過注射器加入底物和試劑。玻璃儀器進行烘干和/或加熱干燥。
在帶有硅膠柱的Biotage系統(tǒng)(制造商Dyax Corporation)上或在硅膠SepPak cartridge(Waters)上進行柱色譜。
使用Bruker儀在300MHz或者使用Varian儀在400MHz記錄1H-NMR譜。使用氯仿作為參照標準(7.25ppm)，以CDCl3溶液獲得1H-NMR譜(以ppm報告)。其它的NMR溶劑根據(jù)需要使用。當(dāng)報告多個峰時，使用下列縮寫s(單峰)，d(雙峰)，t(三峰)，m(多重峰)，br(寬峰)，dd(兩個雙峰)，dt(兩個三重峰)。當(dāng)給出偶合常數(shù)，其以赫茲(Hz)報告。
實施例15-(4-氟苯基硫烷基)-1-(4-甲氧基芐基)-1H-吡唑[3，4-c]吡啶(7a)的制備圖1顯示具有通式II的化合物7a的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中R是4-甲氧基芐基且X是硫的化合物7a的合成。
步驟A在干燥氮氣下，將1.285g 2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶(化合物1a)和1.023g 4-氟苯硫醇溶于15mL無水THF中。向該溶液中緩慢加入207mg氫化鈉(95％，在油中)。然后將反應(yīng)混合物在EtOAc和0.1N NaOH水溶液間分配(以去除任何未反應(yīng)的硫醇)，然后使用鹽水洗滌有機層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。得到的殘余物在Biotage柱上用1∶1己烷/CH2Cl2至100％CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到1.90g化合物2a。
步驟B在干燥氮氣氛下將大約1.90g化合物2a和1.88g鐵粉加入20mL乙酸中。然后將反應(yīng)混合物加熱至90℃，持續(xù)約45分鐘，生成中間產(chǎn)物3a。在干燥氮氣氛下將大約1.90g中間產(chǎn)物3a和1.160g NaOH溶于20mL甲醇中約3.5小時，然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并在室溫下攪拌12小時。真空濃縮反應(yīng)混合物，然后在CH2Cl2和水之間分配。然后用鹽水洗滌CH2Cl2層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物4a。
步驟C不經(jīng)過進一步的純化，用10mL 1∶1的丙酮和水溶液吸收1.54g化合物4a和896mg四氟硼酸銨。然后將反應(yīng)混合物放在冰浴(0℃)中，向其中加入600μL濃HCl，之后加入514mg亞硝酸鈉。然后攪拌反應(yīng)混合物約45分鐘，之后生成中間體化合物5a的沉淀物。收集沉淀物，風(fēng)干，然后通過乙醇和甲苯共沸進行進一步干燥，得到大約800mg化合物5a。在干燥氮氣氛下不經(jīng)過進一步純化，將大約800mg化合物5a、312mg乙酸鉀和190mg 18-冠-6溶于/懸浮于5mL氯仿中。然后將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和水之間分配。用水和鹽水洗滌CH2Cl2層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到388mg化合物6a。
步驟D在干燥氮氣氛下將173.3mg化合物6a、195mg碳酸鉀、110μL 4-甲氧基芐基氯和10.5mg碘化鈉溶于/懸浮于1mL無水DMF中。將反應(yīng)混合物加熱至85℃，持續(xù)大約1.5小時，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和水之間分配，并用水和鹽水洗滌CH2Cl2層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到大約100mg化合物7a。
實施例21-烯丙基-5-(4-氟苯氧基)-1H-吡唑[3，4-c]吡啶(14a)的制備圖2顯示具有通式II的化合物14a的合成反應(yīng)路線。
步驟A在圓底燒瓶中，用25mL無水THF稀釋4-氟苯酚(化合物8a；1.3mL，2.0mmol)，并在冰浴中冷卻反應(yīng)混合物，同時緩慢加入叔丁醇鉀(12.0mL，12.0mmol)。接著，加入2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶(化合物1a；2.23g，12.5mmol)，將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌12小時。濃縮反應(yīng)混合物，使用CH2Cl2稀釋殘余物。使用1N NaOH溶液和鹽水洗滌有機層，Na2SO4干燥，并過濾。將濾液濃縮至深色殘余物，在Biotage 40M硅膠柱上用50∶50 CH2Cl2/己烷洗脫進行純化，得到2.84g化合物10a，為白色固體。
步驟B在圓底燒瓶中，使用40mL EtOH稀釋化合物10a(2.6g，11mmol)，然后加入Pd(OH)2(230mg，2mmol)，隨后加入甲酸銨(3.3g，53mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至80℃，直至原料10a由HPLC測定消失。使用玻璃紙過濾反應(yīng)混合物并濃縮濾液。用CH2Cl2稀釋殘余物，使用飽和NaHCO3和鹽水洗滌有機層，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到1.92g化合物11a，為白色固體。
步驟C根據(jù)實施例1步驟C所述方法，將化合物11a轉(zhuǎn)變?yōu)榛衔?3a。用1∶1的丙酮和水溶液吸收化合物11a和四氟硼酸銨。然后將反應(yīng)混合物放在冰浴(0℃)中，向其中加入濃HCl，然后加入亞硝酸鈉，形成沉淀物。收集沉淀物，風(fēng)干，然后通過乙醇和甲苯的共沸進行進一步干燥，得到中間體化合物12a。在干燥氮氣氛下將化合物12a、乙酸鉀和18-冠-6溶于/懸浮在氯仿中。然后將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和水之間分配。使用水和鹽水洗滌CH2Cl2層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到化合物13a。
步驟D在圓底燒瓶中，用4mL DMF稀釋化合物13a，然后加入22mg NaH并開始鼓泡。在沉降時，加入0.8mL烯丙基溴，在室溫和氮氣下攪拌該混合物。用水終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，然后濃縮。使用CH2Cl2稀釋殘余物，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌有機層，濃縮為膜狀物，干燥。殘余物在具有12M硅膠柱的Biotage柱上用4％EtOAcCH2Cl2洗脫進行純化，得到化合物14a。
實施例33-[5-(4-氟苯氧基)-吡唑[3，4-c]吡啶-1-基]-丙烷-1，2-二醇(15a)的制備圖3顯示具有通式II的化合物15a的合成反應(yīng)路線。在圓底燒瓶中，用2mL無水CH2Cl2稀釋79mg(0.3mmol)根據(jù)實施例2制備的化合物14a。在氮氣氛下加入三甲胺-N-氧化物(27mg，0.35mmol)。所有的固體均溶解后，加入OsO4(11mg，0.04mmol)，并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物。然后將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和水之間分配。通過Na2SO4干燥有機層，過濾，然后濃縮為膜狀物。該膜狀物在Biotage 12M硅膠柱上用EtOAc洗脫進行純化，得到化合物15a。
實施例4[5-(4-氟苯氧基)-吡唑[3，4-c]吡啶-1-基]-乙醛(16a)的制備圖4顯示化合物16a的合成反應(yīng)路線。將0.3M NaIO4(2mL)溶液和1g硅膠混合形成漿狀物。用3mL CH2Cl2稀釋該漿狀物并將82mg(0.3mmol)根據(jù)實施例3制備的化合物15a加入具有1mL CH2Cl2的漿狀物中，攪拌漿狀物2小時。3小時后，過濾反應(yīng)混合物，并用CH2Cl2洗滌濾墊(pad)。濃縮濾液，得到35mg化合物16a，為褐色膜狀物。
實施例55-(4-氟苯氧基)-1-噁唑-5-基甲基-1H-吡唑[3，4-c]吡啶(7a)的制備圖5顯示具有通式II的化合物17a的合成反應(yīng)路線。在圓底燒瓶中將根據(jù)實施例4制備的化合物16a(32mg，0.11mmol)與MeOH(2mL)和K2CO3(32mg，0.2mmol)混合，然后加入甲苯磺?；谆惽?25mg，0.13mmol)，并將反應(yīng)混合物加熱回流。然后將反應(yīng)混合物濃縮并用CH2Cl2稀釋殘余物。用水和1N HCl洗滌CH2Cl2，分離并濃縮。得到的殘余物在硅膠柱上用80％ EtOAc/CH2Cl2洗脫進行純化，得到化合物17a。
實施例61-烯丙基-5-(4-氟-苯基硫烷基)-1H-吡唑[3，4-c]吡啶(18a)的制備圖6顯示具有通式II的化合物18a的合成反應(yīng)路線。在帶有氮氣入口的圓底燒瓶中，使用4mL DMF稀釋根據(jù)實施例1制備的化合物6a，然后加入22mg NaH，并開始鼓泡。當(dāng)沉降時，加入烯丙基溴(0.8mL)，然后在室溫和氮氣下攪拌反應(yīng)物。用水終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，然后濃縮。用CH2Cl2吸收殘余物，并用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，然后干燥至橙色膜狀物。該膜狀物在具有12M硅膠柱的Biotage柱上用4％ EtOAc/CH2Cl2洗脫進行純化，得到化合物18a。
實施例7
1-N-取代4-氮雜吲唑(7b)的制備圖7顯示具有通式III的化合物7b的合成反應(yīng)路線。
步驟A在圓底燒瓶中，用無水THF稀釋4-氟苯硫醇。用冰浴將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后向反應(yīng)混合物中緩慢加入于THF中的1.0M叔丁醇鉀。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10分鐘，然后加入5-氯-3-甲基-2-硝基吡啶(化合物1b)，并將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10分鐘，然后暖至室溫。濃縮反應(yīng)混合物，加入CH2Cl2稀釋殘余物。使用1N NaOH溶液和鹽水洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾，濃縮濾液為黃色油狀物。得到的殘余物在Biotage 40M柱上用50∶50己烷/CH2Cl2洗脫進行純化，得到化合物3b。
步驟B如實施例1步驟B所述，使用鐵粉和乙酸還原化合物3b，得到化合物4b。
步驟C然后如實施例1步驟C所述，使用四氟硼酸銨處理化合物4b，之后使用濃HCl和亞硝酸鈉處理，得到中間體5b。不經(jīng)過進一步純化，如實施例1步驟C所述，將化合物5b與乙酸鉀和18-冠-6混合，得到化合物6b。
步驟D如圖7所示，從化合物6b分別制備化合物7b-1、7b-2和7b-3。如實施例6所述，用NaH和烯丙基溴處理化合物6b制備化合物7b-1。
實施例83-[5-(4-氟苯基硫烷基)-吡唑[4，3，-b]吡啶-1-基]-丙胺(8b)的制備圖8顯示具有通式III的化合物8b的合成反應(yīng)路線。在圓底燒瓶中，使用CH2Cl2和三氟乙酸稀釋根據(jù)實施例7制備的化合物7b-3。攪拌反應(yīng)混合物直至用TLC測定原料消失，然后進行濃縮，得到的殘余物用CH2Cl2稀釋。以1N NaOH和鹽水洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并濃縮。得到的殘余物在Biotage 12M硅膠柱上用10％MeOH/CH2Cl2/NH4OH洗脫進行純化，得到化合物8b。
實施例96-(4-氟苯基硫烷基)-3-(4-甲氧基芐基)-1H)吲唑(10c)的制備圖9顯示具有通式IV的化合物10c的合成反應(yīng)路線。
步驟A在圓底燒瓶中，將6-硝基吲哚(化合物1c；15.5g，95mmol)溶于1，4-二噁烷(400mL)中。加入NaOH(3.8g，95mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘。然后向反應(yīng)混合物中加入266mL 2N NaOH，之后加入碘晶體(54.4g分兩次加入，總量是214mmol)，攪拌反應(yīng)混合物12小時。用10％檸檬酸終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，并用EtOAc稀釋，使用10％ NaHSO3、NaHCO3和鹽水洗滌有機層，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到27.5mg化合物2c，為橙色固體。
步驟B在干燥氮氣氛下將化合物2c(5.18g)溶于50mL無水THF中。向該溶液中加入18.8mL于THF中的1.0M叔丁醇鉀。攪拌反應(yīng)混合物約15分鐘，然后加入3.20mL三甲基氯硅烷。然后將反應(yīng)混合物在EtOAc和飽和NaHCO3水溶液之間分配。通過Na2SO4干燥有機層，過濾并真空濃縮。得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到3.85g化合物3c，為黃色固體。
步驟C在干燥氮氣氛下將化合物3c(3.85g)、766g反式-2-苯基乙烯基硼酸、531mg Pd(PPh3)4和14.20mL 2.0M Na2CO3溶于/懸浮在50mL二噁烷中。將反應(yīng)混合物加熱回流過夜，然后冷卻至室溫，并真空濃縮。將殘余物在CH2Cl2和水之間分配。通過Na2SO4干燥CH2Cl2層，過濾并真空濃縮。得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到化合物4c。
步驟D在干燥氮氣氛下將化合物4c(573mg)和103mg 10％Pd/C溶于/懸浮在10mL 3∶1的EtOH/THF溶液中。向該溶液中加入500μL肼，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時。然后將反應(yīng)混合物通過硅藻土(Celite)過濾，用EtOH和CH2Cl2洗滌硅藻土，真空濃縮濾液。將殘余物在CH2Cl2和水之間分配。用水和鹽水洗滌CH2Cl2層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物5c。
步驟E在干燥氮氣氛下將化合物5c(2.51g)溶于30mL乙酸和6mL水的溶液中。向反應(yīng)混合物中加入3.2mL濃HCl。然后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并加入535mg亞硝酸鈉。然后攪拌反應(yīng)混合物約30分鐘，之后向反應(yīng)混合物中加入4.0mL的1.23mg碘化鈉和885mg碘的溶液。4小時后，用飽和NaHCO3水溶液(緩慢加入)終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，然后在CH2Cl2和水之間分配。CH2Cl2層用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到1.90g化合物6c。
步驟F在干燥氮氣氛下將化合物6c(1.90g)和509mg三甲胺-N-氧化物二水合物溶于30mL CH2Cl2中。向該反應(yīng)混合物中加入51mg四氧化鋨。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時。加入溶于約30mL水中的高碘酸鈉(1.71g)，攪拌反應(yīng)混合物1小時。然后將反應(yīng)混合物在EtOAc和水之間分配。使用鹽水洗滌EtOAc層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物在Biotage柱上純化，得到889mg化合物7c。
步驟G在干燥氮氣氛下將化合物7c(460mg)加入10mL無水THF中。將混合物冷卻至-78℃，然后加入于THF(0.5M)中的2.80mL4-甲氧基苯基溴化鎂。將反應(yīng)混合物緩慢暖至室溫，用水終止反應(yīng)物反應(yīng)，并在EtOAc和飽和NaHCO3水溶液之間分配。通過Na2SO4干燥有機層，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到320mg中間產(chǎn)物。在干燥氮氣氛下將中間產(chǎn)物(151mg)溶于1mL CH2Cl2和60μL三乙基硅烷中。向該反應(yīng)混合物中加入1mL三氟乙酸。然后真空濃縮反應(yīng)混合物，并將殘余物在CH2Cl2和飽和NaHCO3水溶液之間分配。通過Na2SO4干燥CH2Cl2層，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上用10∶1己烷/CH2Cl2至100％CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到76.6mg化合物8c。
步驟H將化合物8c(151mg)、80μL 4-氟苯基硫醇、12.0mg銅粉和300μL 5.0M NaOH水溶液加入于密封管中的1mL無水DMF中，然后加熱至90℃，持續(xù)16小時。將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和1.0MNaOH水溶液之間分配。使用1.0M NaOH水溶液、3.0N NH4OH水溶液和鹽水洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物在Biotage柱上純化，得到76.6mg化合物9c。
步驟I在干燥氮氣氛下將化合物9c(76.6mg)和100μL乙二胺溶于在THF中的1.6mL 1.0M四丁基氟化銨溶液中。將反應(yīng)混合物加熱回流約12小時，然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并在CH2Cl2和水之間分配。使用10％檸檬酸水溶液和飽和NaHCO3水溶液洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物在Biotage柱上用5∶1己烷/CH2Cl2至100％ CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到25mg化合物10c。
實施例10[6-(4-氟苯基硫烷基)-1H-吲唑-3-基]甲醇(14c)的制備圖10顯示具有通式IV的化合物14c的合成反應(yīng)路線。
步驟A在干燥氮氣氛下將根據(jù)實施例9制備的化合物7c(520mg)溶于5mL甲醇中。向該溶液中加入98.3mg硼氫化鈉。大約30分鐘后，真空濃縮反應(yīng)混合物，然后在CH2Cl2和水之間分配。通過Na2SO4干燥CH2Cl2層，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到化合物12c。
步驟B將化合物12c(151mg)、甲醇、100μL 4-氟苯基硫醇、6.0mg銅粉和250μL 5.0M NaOH水溶液加入于密封管中的1mL無水DMF中，然后加熱至90℃，持續(xù)約30小時，之后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并在CH2Cl2和1.0M NaOH水溶液之間分配。用1.0MNaOH水溶液、3.0N NH4OH水溶液和鹽水洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上用5∶1CH2Cl2/EtOAc洗脫進行純化，得到67.9mg化合物13c。
步驟C在干燥氮氣氛下將化合物13c(67.9mg)和100μL乙二胺溶于在THF中的1.5mL 1.0M四丁基氟化銨中。將反應(yīng)混合物加熱回流大約12小時，然后冷卻至室溫，并在CH2Cl2和水之間分配。使用10％檸檬酸水溶液和飽和NaHCO3水溶液洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到18mg化合物14c。
實施例116-(4-氟-苯基硫烷基)-3-甲氧基甲基-1H-吲唑(17c)的制備圖11顯示具有通式IV的化合物17c的合成反應(yīng)路線。
步驟A在干燥氮氣氛下將根據(jù)實施例10步驟A制備的化合物12c(186mg)溶于5mL無水THF中。向該溶液中加入36.8mg氫化鈉(60％，在油中)，攪拌反應(yīng)混合物約15分鐘，然后向反應(yīng)混合物中加入60μL甲基碘。約1小時后，用水終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，并將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和飽和NaHCO3水溶液之間分配。通過Na2SO4干燥CH2Cl2層，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上用100∶1 CH2Cl2/EtOAc洗脫進行純化，得到76.1mg化合物15c。
步驟B用與實施例10步驟B相同的方法，在DMF中使化合物15c與4-氟苯硫酚、銅粉和NaOH水溶液反應(yīng)，得到化合物16c，收率為22％。
步驟C用與實施例10步驟C相同的方法，在THF中使化合物16c與四丁基氟化銨和乙二胺反應(yīng)，得到化合物17c，收率為53％。
實施例12
6-(4-氟苯氧基)-3-甲基-1H-吲唑(18c-2)的制備圖12顯示具有通式IV的通式結(jié)構(gòu)18c的化合物的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中A是4-氟苯基的化合物18c-2的合成。
步驟A在干燥氮氣氛下將2-氟-4-羥基苯乙酮(化合物19c；1.42g)和1.40g碳酸鉀溶于/懸浮于30mL無水DMF中。向該反應(yīng)混合物中加入1.20mL芐基溴。大約90分鐘后，將反應(yīng)混合物加熱至65℃，持續(xù)約45分鐘，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并將殘余物在CH2Cl2和水之間分配。使用水和鹽水洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物20c。
步驟B在干燥氮氣氛下將化合物20c(1.87g)加入20mL乙二醇中。向該反應(yīng)混合物中加入250μL無水肼。將混合物在室溫下攪拌1小時，然后加熱至160℃，持續(xù)約7小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用水終止反應(yīng)物反應(yīng)。收集沉淀的鹽，風(fēng)干，然后通過與乙醇和甲苯共沸去除水而進一步干燥。沉淀的鹽用無水乙腈稀釋，然后加入500mg二甲氨基吡啶和311mg二碳酸二叔丁酯(di-tert-butyldicarbonate，BOC酐)。所有的固體溶解后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到7.10mg化合物21c。
步驟C在干燥氮氣氛下將化合物21c(710mg)、662mg甲酸銨和223mg Pearlman催化劑(Pd(OH)2/C)溶于/懸浮在20mL乙醇中。將反應(yīng)物加熱至85℃，持續(xù)約30分鐘，然后通過硅藻土過濾。使用EtOH洗滌硅藻土，并將混合的濾液真空濃縮。將得到的殘余物在CH2Cl2和飽和NaHCO3水溶液之間分配，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物22c。
步驟D將化合物22c(103mg)、174mg 4-氟苯基硼酸、75mg乙酸銅(II)和300μL三乙胺溶于/懸浮在2mL無水CH2Cl2中，并向該溶液中加入4_分子篩。將反應(yīng)物接觸空氣約5小時，然后過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上用CH2Cl2洗脫進行純化，得到85mg化合物23c。
步驟E在干燥氮氣氛下將化合物23c(85mg)溶于2mL 1∶1的CH2Cl2/TFA溶液中。攪拌反應(yīng)混合物約30分鐘，然后真空濃縮。將得到的殘余物在CH2Cl2和飽和NaHCO3水溶液之間分配。Na2SO4干燥CH2Cl2層，過濾并真空濃縮，得到18c-2。
為制備其它具有通式結(jié)構(gòu)18c的化合物，將化合物22c如步驟D所述與苯基硼酸鹽或適當(dāng)?shù)娜〈交鹚猁}反應(yīng)，然后如步驟E所述進行處理。
實施例133-乙基-6-(4-氟苯基硫烷基)-1H-吲唑(26c)的制備圖13顯示具有通式IV的化合物26c的合成反應(yīng)路線。
步驟A在干燥氮氣氛下將4-氟苯硫酚(化合物24c；900μL)溶于40mL無水THF中。向該溶液中加入8.40mL于THF中的叔丁醇鉀(0.1M)，然后加入10mL無水DMF。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌10分鐘，然后加入1.43g 2，4-二氟苯基乙基酮，并使混合物在室溫下反應(yīng)約12小時。然后使反應(yīng)混合物在EtOH和水之間分配。用飽和NaHCO3水溶液洗滌EtOH層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到化合物25c。
步驟B在干燥氮氣氛下將化合物25c(2.34g)和260μL無水肼懸浮在/溶于乙二醇中。然后將反應(yīng)混合物加熱至約70℃持續(xù)約1小時，然后加熱至約160℃持續(xù)約12小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用約100mL水終止反應(yīng)物反應(yīng)，并將反應(yīng)混合物在CH2Cl2和水之間分配。使用水和飽和NaHCO3水溶液洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到770mg化合物26c。
實施例145-(4-氟苯氧基)-1H-吲唑-3-基-胺(34c)的制備圖14顯示具有通式VI的化合物34c的合成反應(yīng)路線。
步驟A在圓底燒瓶中，將50mL MeOH和200mL甲苯加入5-氟-2-硝基苯甲酸(化合物27c；10.0g，54.0mmol)中。攪拌下緩慢加入41mL三甲基甲硅烷基重氮甲烷(2.0M)。鼓泡停止后，用1mL乙酸終止反應(yīng)物反應(yīng)。真空濃縮反應(yīng)混合物，得到化合物28c。
步驟B在圓底燒瓶中，使用100mL無水THF稀釋4-氟苯酚(4.0g，35mmol)。用冰浴冷卻反應(yīng)物至0℃，然后緩慢加入于THF中的1.0M叔丁醇鉀(35mL，35mmol)。攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，然后加入于50mL THF中的化合物28c(7.4g，37mmol)。在0℃下攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，然后暖至室溫，攪拌約12小時。將反應(yīng)混合物濃縮，并用CH2Cl2稀釋殘余物。用1N NaOH和鹽水洗滌CH2Cl2，Na2SO4干燥，過濾，并濃縮為油狀物。將油狀物在Biotage 40M柱上用50∶50己烷/CH2Cl2洗脫進行純化，得到化合物29c，為油狀物。
步驟C在圓底燒瓶中，將化合物29c(40g，13mmol)加入60mLMeOH中，然后加入6N NaOH(4.3mL，26mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時，然后濃縮，將得到的殘余物用50mL水稀釋。加入大約5mL 2N HCl(pH＝2.0)，從溶液中沉降出固體。將固體溶于CH2Cl2中，使用鹽水洗滌有機層，Na2SO4干燥，過濾，然后濃縮在甲苯中，得到化合物30c，為白色固體。
步驟D在圓底燒瓶中，將化合物30c溶于40mL亞硫酰氯中，加熱至90℃，持續(xù)2小時。冷卻反應(yīng)混合物，然后濃縮至淡黃色固體。將固體溶于20mL丙酮中，冰浴冷卻至0℃，然后緩慢加入10mLNH4OH。用水終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，然后濃縮。得到的殘余物用CH2Cl2萃取，然后用Na2SO4干燥CH2Cl2，并濃縮，得到化合物31c。
步驟E在圓底燒瓶中，將化合物31c(3.4g，12.3mmol)溶于100ml二氯乙烷中，然后加入草酰氯(5.4mL，62mmol)，并將反應(yīng)混合物加熱至55℃，持續(xù)2小時。將反應(yīng)混合物濃縮，將得到的油狀物在水(50mL)中攪拌，然后在冰浴中冷卻至大約0℃，同時緩慢加入NH4OH消除過量的草酰氯。使用CH2Cl2萃取反應(yīng)混合物，Na2SO4干燥有機層，過濾并濃縮，得到化合物32c，為黑色油狀物。
步驟F在圓底燒瓶中，使用100mL EtOH稀釋化合物32c(2.21g，8.5mmol)，然后加入Pd(OH)2(300mg)，之后加入甲酸銨(2.7g，43mmol)。將反應(yīng)混合物加熱回流18小時，通過玻璃紙過濾以去除Pd，然后用EtOH洗滌玻璃紙。濃縮濾液，并用CH2Cl2吸收得到的殘余物，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到化合物33c，為黃色固體。
步驟G將化合物33c(280mg，1.3mmol)放入于冰浴中的圓底燒瓶中，并加入5mL HOAc和2.5mL H2O。將反應(yīng)混合物保持在0℃下，加入HCl(0.35mL，6mmol)，5分鐘后加入NaNO2(93mg，1.3mmol)。大約1小時后，加入氯化錫(II)二水合物(554mg，2.5mmol)，攪拌反應(yīng)物30分鐘。然后將反應(yīng)混合物暖至室溫，濃縮，并用CH2Cl2吸收殘余物。用水和鹽水洗滌有機層，過濾，Na2SO4干燥，過濾，并濃縮為膜狀物。用CH2Cl2研磨膜狀物，收集固體。然后在壓力管中將固體在1-丁醇中加熱(120℃)12小時，使得環(huán)化，然后冷卻反應(yīng)混合物，過濾收集固體，得到化合物34c。
實施例15N-[6-(4-氟苯氧基)-1H-吲唑-3-基]-乙酰胺(38c-1)的制備圖15顯示具有通式VI的化合物38c的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中X是O的化合物38c-1的合成。
步驟A將2-氟-4-羥基芐腈(化合物35c-1；1.40g)、2.86g 4-氟苯基硼酸、1.86g乙酸銅(II)和7.20mL三乙胺溶于/懸浮在100mL無水CH2Cl2中，向該反應(yīng)混合物中加入4_分子篩。通過干燥管使反應(yīng)混合物接觸空氣，室溫下攪拌16小時。將反應(yīng)混合物過濾，使用10％NaHSO4水溶液、1N NaOH水溶液和鹽水洗滌濾液，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到530mg化合物36c-1。
步驟B將化合物36c-1(208mg)和150μL無水肼溶于5mL丁醇中。在干燥氮氣氛下將反應(yīng)混合物加熱回流15小時，然后冷卻至室溫，真空濃縮，并用乙醚研磨。通過過濾收集得到的粉紅色固體化合物37c-1，使用乙醚洗滌，然后風(fēng)干。
步驟C在干燥氮氣氛下將化合物37c-1(97mg)和40μL乙酸酐懸浮/溶于二氯乙烷中。將反應(yīng)混合物加熱至60℃，持續(xù)1小時，然后冷卻至室溫，攪拌12小時。通過抽濾收集白色沉淀化合物38c-1，然后風(fēng)干。
實施例162-[6-(4-氟苯氫基)-1H-吲唑-3-基]-異吲哚-1，3-二酮(39c)的制備圖16顯示具有通式VI的化合物39c的合成反應(yīng)路線。
步驟A在干燥氮氣氛下將根據(jù)實施例15制備的化合物37c-1溶于1mL于THF中的硼烷(1.0M)中。將溶液加熱至60℃，持續(xù)約2小時，然后冷卻至室溫，并通過緩慢加入甲醇(3mL)終止反應(yīng)物反應(yīng)。將反應(yīng)混合物真空濃縮，將得到的殘余物在Biotage柱上用3∶1CH2Cl2/EtOAc洗脫進行純化，得到化合物37c-1。
步驟B在干燥氮氣氛和室溫下將化合物37c-1(660mg)和654mg N-乙氧羰基鄰苯二甲酰亞胺(N-carboethoxyphthalimide)懸浮在/溶于15mL二氯乙烷中約13小時。大約20分鐘后，將反應(yīng)混合物加熱至65℃，持續(xù)約5.5小時，然后冷卻至室溫，并過濾。使用二氯乙烷洗滌白色沉淀物化合物39c，然后風(fēng)干。
實施例173-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-6-(4-氟苯氧基)-1H-吲唑(40c)的制備圖17顯示具有通式VI的化合物40c的合成反應(yīng)路線。在干燥氮氣氛下將根據(jù)實施例16制備的化合物39c(25mg)懸浮在1mL無水THF中。向該溶液中加入于THF中的1.0mL 1.0M BH3溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約1小時，然后加熱回流2小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并小心地加入2.0mL甲醇。攪拌混合物約10分鐘，然后真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上純化，得到5mg化合物40c。
實施例185-(4-氟苯基硫烷基)-1-H-吲唑(4d)的制備圖18顯示具有通式VII的化合物4d的合成反應(yīng)路線。
步驟A將于CH3CN(11mL)中的6-碘-1H-吲唑(化合物1d)的混合物用三乙胺及二甲氨基吡啶處理。冷卻至0℃后，滴加于CH3CN(10mL)中的二碳酸二叔丁酯(BOC酐)溶液。室溫下攪拌3小時后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并將得到的殘余物在H2O和乙醚層。使用1N HCl將pH調(diào)至2，分離有機相，干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮，得到化合物2d，為油狀物。
步驟B將于DMF(25mL)中的化合物2d的混合物用5N KOH、銅粉和ArSH處理。在這一實施例中，ArSH是4-氟苯硫酚。將反應(yīng)混合物加熱至110℃，持續(xù)48小時，然后冷卻至室溫，真空濃縮，用1N HCl酸化，并萃取入CH2Cl2中。通過1PS紙過濾有機層，真空濃縮，并將殘余物在Biotage柱上用100％ CH2Cl2、5％ Et2O/CH2Cl2，然后用10％ Et2O/CH2Cl2洗脫進行純化，得到化合物4d。
實施例19
5-(4-氟苯基硫烷基)-1-異丙基-1H-吲唑(5d-1)的制備圖19顯示具有通式VII的通式結(jié)構(gòu)5d的化合物的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中R是異丙基的化合物Sd-1的合成。
將于THF(1mL)中的根據(jù)實施例18制備的化合物4d溶液用粉末狀KOH處理，之后加入18-冠-6和RI。在這一實施例中，RI是異丙基碘。在干燥氮氣氛和室溫下攪拌反應(yīng)混合物18小時。然后用CH2Cl2稀釋反應(yīng)混合物，過濾，真空濃縮濾液，并用CH2Cl2稀釋殘余物。用飽和NaHCO3水溶液洗滌有機層，通過1PS紙過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上用4∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物5d-1，為黃色油狀物。
實施例205-碘-1-(4-甲氧基芐基)-1H-吲唑(8d-1)的制備圖20顯示化合物8d的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中Ar1是4-甲氧基苯基的化合物8d-1的合成。
步驟A將于6M HCl(150mL)中的5-氨基吲唑(化合物6d)懸浮液冷卻至0℃，并滴加于水(15mL)中的NaNO2溶液處理。0℃下攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物加入于水(105mL)中的冷的KI溶液中。將混合物暖至室溫，并在室溫下持續(xù)攪拌18小時。用10％ Na2S2O3終止混合物反應(yīng)，并用Et2O進行萃取。過濾雙相混合物，用水洗滌不溶性固體，并真空干燥過夜。分離有機相，用飽和NaHCO3水溶液、水進一步洗滌，通過1PS紙過濾，真空蒸發(fā)，得到粉紅色殘余物。
步驟B在干燥氮氣氛和室溫下用K2CO3處理于DMF中的化合物1d溶液，然后加入取代或未取代的芐基鹵。在這一實施例中，芐基鹵是芐基氯。在氮氣氛下，將混合物加熱至100℃，持續(xù)48小時。用0.2當(dāng)量的NaI(123mg)處理混合物，然后繼續(xù)加熱18小時。真空蒸發(fā)溶劑，并用CH2Cl2和1N HCl吸收殘余物。分離有機層，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，并濃縮為油狀物。將油狀物在Biotage柱上用3∶1己烷/Et2O至3∶2己烷/Et2O梯度洗脫進行純化，得到化合物8d-1。
實施例215-(4-氟苯磺?；?-1-(4-甲氧基芐基)-1H-吲唑(10d-1)的制備圖21顯示具有通式IX的化合物10d的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中Ar1是4-甲氧基苯基且Ar2是4-氟苯基的化合物10d-1的合成。
步驟A將于水和DMF溶液中的化合物8d、5N KOH、銅粉和Ar2SH的混合物加熱回流約18小時。在這一實施例中，Ar2SH是4-氟苯硫酚。然后將混合物冷卻至室溫，用1N HCl酸化，并用CH2Cl2萃取。通過1PS紙過濾有機層，真空濃縮，并將得到的殘余物在硅膠SepPak cartridge上用4∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物9d。
步驟B用于水(0.2mL)中的NaIO4和KMnO4溶液處理于丙酮(0.2mL)中的含有MgSO4的化合物9d溶液，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。然后用亞硫酸氫鈉水溶液處理反應(yīng)混合物，并用CH2Cl2萃取。通過1PS紙過濾有機層，真空濃縮，得到2.1mg化合物10d，為黃色油狀物。
實施例225-(4-氟苯亞硫?；?-1-(4-甲氧基芐基)-1H)-吲唑(11d-1)的制備圖22顯示具有通式VIII的化合物11d-1的合成反應(yīng)路線。用NaIO4處理于1∶1水/乙腈中的根據(jù)實施例21制備的化合物9d-1溶液，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時。然后過濾反應(yīng)混合物，并真空濃縮濾液。將得到的殘余物在水和CH2Cl2之間分配。分離有機層，通過1PS紙過濾并真空濃縮，并在硅膠SepPak cartridge上用4∶1、2∶1和1∶1的己烷/Et2O梯度洗脫進行純化，得到化合物11d-1。
實施例231-苯磺?；?5-(4-氟苯基硫烷基)-1H-吲唑(13d)的制備圖23顯示具有通式VII的化合物13d的合成反應(yīng)路線。
步驟A在干燥氮氣氛和室溫下將于吡啶中的5-碘吲唑(化合物1d)溶液用苯磺酰氯處理18小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并用CH2Cl2和1N HCl吸收殘余物。分離有機層，通過1PS濾紙過濾并真空濃縮。將得到的殘余物在Biotage柱上用5∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物12d。
步驟B將于水和DMF溶液中的化合物12d、5N KOH、銅粉和4-氟苯硫酚的混合物加熱回流約18小時。然后將混合物冷卻至室溫，用1N HCl酸化，并并用CH2Cl2萃取。使用1PS紙過濾有機層，真空濃縮，并將得到的殘余物在硅膠SepPak cartridge上用4∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物13d。
實施例243-氯-6-苯氧基苯并[d]異噁唑(8e-1)的制備圖24顯示具有通式V的化合物8e的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中Ar2是苯基的化合物8e-1的合成。
步驟A在于MeOH中的4-氟-2-羥基苯甲酸(化合物1e)溶液中緩慢加入濃H2SO4處理，然后加熱回流12天。然后將反應(yīng)混合物真空濃縮得到黃色油狀物，并用CH2Cl2吸收油狀物。使用飽和NaHCO3水溶液、鹽水和水洗滌有機層，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到12.7g化合物2e，為琥珀色油狀物。
步驟B將于DMF(200mL)中的化合物2e、K2CO3和芐基氯溶液加熱至95℃，持續(xù)18小時。過濾混合物，并真空濃縮濾液，得到黃色油狀物。將油狀物在Biotage柱上用7∶2己烷/EtOAc洗脫進行純化，得到19.4g化合物3e，為澄清油狀物。
步驟C在干燥氮氣氛和室溫下用K2CO3處理于DMSO(2mL)中的化合物3e溶液，然后加入Ar2OH。在這一實施例中，Ar2OH是苯酚。在氮氣氛下將混合物加熱至90℃，持續(xù)三天。緩慢加入水(1mL)，并用EtOAc萃取產(chǎn)物。分離水層并用EtOAc萃取。使用鹽水洗滌合并的有機萃取液，Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，得到黑色油狀物。油狀物在Biotage柱上用6∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物4e-1，為澄清油狀物。
步驟D用氮氣凈化于MeOH(30mL)中的1.0M化合物4e-1溶液，并用20％ Pd(OH)2/C(15wt.％＝297mg)處理。用另外的氮氣凈化反應(yīng)混合物，然后在氫氣和室溫下攪拌2天。濾除催化劑，并用MeOH洗滌。真空蒸發(fā)濾液，得到澄清油狀物，將油狀物在Biotage柱上用5％ Et2O/己烷洗脫進行純化，得到化合物5e-1，為澄清油狀物。
步驟E向于水(14mL)中的NH2OH-HCl溶液中加入3M NaOH(9mL)，然后加入于二噁烷(10mL)中的化合物5e-1溶液。在氮氣氛和室溫下攪拌混濁混合物18小時。將得到的澄清混合物冰浴冷卻，用2M HCl酸化，并用EtOAc萃取。將混合的有機層用鹽水洗滌，通過1PS紙過濾，并真空蒸發(fā)，得到235mg米黃色固體。加入4∶1己烷/EtOAc研磨該固體，并通過過濾收集得到的白色固體化合物6e-1。
步驟F將于THF中的羰基二咪唑溶液加入于THF的化合物6e-1的回流溶液中，并繼續(xù)回流18小時。然后真空濃縮混合物，用水稀釋，用1N HCl酸化，并用CH2Cl2萃取。通過1PS紙過濾有機層，真空蒸發(fā)，得到化合物7e-1，為淺黃色固體或泡沫狀物。
步驟G室溫下用三乙胺處理于POCl3中的化合物7e-1懸浮液，并將混合物加熱至110℃，持續(xù)6小時。將混合物冷卻至室溫，并倒入含有冰水的燒杯中。用CH2Cl2萃取產(chǎn)物，通過1PS紙過濾，并真空蒸發(fā)，得到10mg化合物8e-1，為琥珀色油狀物。
實施例253，6-二苯氧基-苯并[d]異噁唑(9e-1)的制備圖25顯示具有通式V的化合物9e的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中Ar1是苯基且Ar2是苯基的化合物9e-1的合成。將于DMF(1mL)中的根據(jù)實施例24制備的化合物8e-1溶液加入于DMF中的NaH和苯酚(1mL)混合物中。將反應(yīng)混合物加熱至110℃，持續(xù)18小時。真空蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在1N HCl和CH2Cl2之間分配。分離有機層，并通過1PS紙過濾。蒸發(fā)溶劑得到棕色油狀物，將該油狀物在硅膠SepPak cartridge上用4∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物9e-1，為澄清油狀物，其固化為白色長針狀體。
實施例26(4-甲氧基-苯基)-(6-苯氧基-苯并[d]異噁唑-3-基)-胺(10e-1)的制備圖26顯示具有通式V的化合物10e的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中Ar1是4-甲氧基苯基且Ar2是苯基的化合物10e-1的合成。在氮氣氛下將于THF中的Ar1NH2溶液冷卻至-78℃，并用正丁基鋰處理。在這一實施例中，Ar1NH2是苯胺。在-78℃下攪拌20分鐘后，在氮氣下加入于THF中的根據(jù)實施例25制備的化合物8e-1溶液。將混合物緩慢暖至室溫，然后用飽和NH4Cl終止反應(yīng)物反應(yīng)，并用CH2Cl2萃取。用1N HCl和水洗滌有機層，通過1PS紙過濾，真空濃縮，并在SepPak cartridge上用4∶1己烷/Et2O洗脫進行純化，得到化合物10e-1，為黃色油狀物。
實施例27(2，4-二氟苯基)-1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲酮肟(7f-1)的制備圖27顯示具有通式XII的化合物7f的合成反應(yīng)路線。在這一實施例中，描述了其中R1是異丁基，R2是H且Ar是2，4-二氟苯基的化合物7f-1的合成。
步驟A將四氟硼酸銨(20.97g，200mmol)溶于乙酸水溶液(500mL AcOH/250mL水)中，并冷卻至0℃。依次加入4-溴-2-甲基苯胺(化合物1f，18.61g，100mmol)和42mL濃HCl溶液(36％w/w，12N，500mmol)。在0℃下攪拌混合物20分鐘，然后加入NaNO2(7.59g，110mmol)。在0℃下攪拌反應(yīng)物1小時，并暖至室溫。室溫下16小時后，減壓下濃縮混合物，將殘余物與甲苯共沸，并高真空下干燥。將固體懸浮在500mL CHCl3中，并加入KOAc(12.76g，130mmol)和18-冠-6(7.93g，30mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物1.5小時。用水洗滌混合物，無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，得到30g 5-溴-1H-吲唑(2f)，為褐色固體。粗品沒有進一步純化而使用。
步驟B將粗制品2f(100mmol)溶于250mL DMF中，并加入K2CO3(20.7g，150mmol)和1-溴-2-甲基丙烷(16.3mL，150mmol)。在氮氣氛下將混合物加熱至120℃，持續(xù)16小時。將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將水(200mL)和CH2Cl2(200mL)加入殘余物中，并劇烈攪拌30分鐘。分層并用CH2Cl2萃取水層。將合并的萃取液通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到約30g粗品。通過色譜法(1∶9-1∶4乙醚/己烷)純化粗品，得到12.87g化合物3f-1，為暗紅色油狀物，步驟A和B的收率為50.8％。測得MS ESI(+)m/z 253和255(M+1)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.87(m，1H)，7.43(m，1H)，7.29(m，1H)，7.29(m，1H)，4.15(m，2H)，2.33(m，1H)，0.92(m，6H)。
步驟C將化合物3f-1(121.0mg，0.478mmol)溶于2mL乙醚中，并冷卻至-78℃。向溶液中加入t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.59mL，1.004mmol)。-78℃下攪拌反應(yīng)物另外一小時。在-78℃下加入2，6-二氟苯甲醛(58μL，0.526mmol)，移去冷水浴，將反應(yīng)物緩慢暖至室溫。用10mL水終止反應(yīng)物反應(yīng)。分層并用CH2Cl2萃取水層數(shù)次。將合并的萃取液通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，用1∶1乙醚/己烷使用色譜法進行純化，得到化合物4f-1，為淡黃色晶體固體(104.5mg，收率69.1％)。測得MS ESI(+)m/z 317(M+1)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.73(s，1H)，7.56(m，1H)，7.40-7.35(m，2H)，6.91(m，2H)，6.78(m，1H)，6.22(m，1H)，4.15(m，2H)，2.39-2.26(m，2H，與-OH重疊)，0.92(m，6H)。
步驟D室溫下攪拌化合物4f-1(316.3mg，1.00mmol)、三乙酰氧基過碘烷(triacetoxyperiodinane)(445.3mg，1.05mmol)和10mLCH2Cl22小時。使用10mL飽和K2CO3溶液終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，并分層。使用CH2Cl2萃取水層，將合并的萃取液通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。粗品用1∶2乙醚/己烷通過色譜法進行純化，得到237.6mg化合物5f-1，為粘稠淺棕色油狀物(收率75.6％)。測定點為MS ESI(+)m/z 315(M+1)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(s，1H)，8.11(s，1H)，7.99(m，1H)，7.60(m，1H)，7.47(m，1H)，7.03(m，1H)，6.94(m，1H)，4.21(m，2H)，2.37(m，1H)，0.95(m，6H)。
步驟E室溫下攪拌化合物5f-1(96.7mg，0.308mmol)、鹽酸羥胺(化合物6f-1；213.8mg，3.076mmol)和5mL吡啶的混合物65小時。減壓下除去過量的吡啶。將殘余物溶于20mL CH2Cl2中。形成白色固體沉淀，將混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，并用1N HCl洗滌。通過無水MgSO4干燥有機層，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，用1∶2乙醚/己烷通過色譜法純化，得到66.5mg化合物7f-1，為淺黃色泡沫狀固體(收率65.5％)，其是1∶4的異構(gòu)體混合物。測得MS ESI(+)m/z330(M+1)。
實施例28
(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-乙基-肟(7f-3)的制備在這一實施例中，描述了具有如圖27所示其中R1是異丁基，R2是乙基且Ar是2，4-二氟苯基的通式XII的化合物7f-3的合成。根據(jù)實施例27步驟A-D制備其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氟苯基的化合物5f。室溫下攪拌化合物5f(43.3mg，0.138mmol)、O-乙基-羥胺鹽酸鹽(53.8mg，0.551mmol)和2mL干燥吡啶的混合物。室溫下攪拌混合物90分鐘。減壓下除去過量的吡啶。向殘余物中加入2mL水和2mL CH2Cl2。分層并用CH2Cl2萃取水層。將合并的萃取液用1N HCl(20mL)洗滌，MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到21.2mg化合物7f-3，為油狀物(收率43.1％)，其是1∶9的異構(gòu)體混合物。
實施例29{2-[(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-亞甲氨基氧基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(7f-5)的制備在這一實施例中，描述了具有如圖27所示其中R1是異丁基，R2是CH2CH2NHBoc且Ar是2，4-二氟苯基的通式XII的化合物7f-5的合成。根據(jù)實施例27步驟A-D制備其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氟苯基的化合物5f。在室溫下攪拌化合物5f(50mg，0.159mmol)、如實施例30制備的(2-氨基氧乙基)-氨基甲酸叔丁酯(112mg，0.636mmol)、吡啶(1.5mL)和一滴6N HCl-MeOH(濃HCl和MeOH 1∶1的混合物，體積比)的混合物64小時。減壓下除去過量的吡啶并用1∶2乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到化合物7f-5，收率為63.9％。
實施例30(2-氨基氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯的制備圖28顯示(2-氨基氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯的合成反應(yīng)路線。
步驟A室溫下攪拌(2-溴-乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.77g，12.39mmol)、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺(2.02g，12.39mmol)、TEA(5.18mL，37.16mmol)和25mL DMF的混合物64小時。用100mL水稀釋該混合物。形成白色固體沉淀，并過濾收集。將固體溶于CH2Cl2(50mL)中并用1N HCl(20mL)、飽和NaHCO3(20mL)、水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌該溶液。通過無水MgSO4干燥溶液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到0.842g白色固體(收率22％)。
步驟B室溫下將[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫異吲哚-2-氧基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(0.842g，2.749mmol)溶于20mL CH2Cl2中，并加入甲基肼(150μL，2.776mmol)。一加入甲基肼，就產(chǎn)生白色沉淀物。室溫下攪拌反應(yīng)混合物72小時。將反應(yīng)混合物過濾，將濾液減壓下濃縮，得到0.469粘稠油狀物(收率102％)。粗品沒有進一步純化而使用。
實施例31(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮肟(7f-2)的制備在這一實施例中，描述了具有如圖27所示其中R1是異丁基，R2是H且Ar是4-氟苯基的通式XII的化合物7f-2的合成。
步驟A和B如實施例27步驟A和B所述制備化合物3f。
步驟C將化合物3f-2(616.3mg，2.436mmol)溶于20mL乙醚中并冷卻至-78℃。向溶液中滴加t-BuLi(1.70M，在戊烷中，2.94mL)。在加入t-BuLi后，在-78℃下將混合物攪拌30分鐘。在-78℃下滴加4-氟苯甲醛(290μL，2.678mmol)。將混合物緩慢暖至室溫。用CH2Cl2終止反應(yīng)物反應(yīng)，并用鹽水(20mL)洗滌合并的萃取液，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并濃縮，得到750mg化合物4f-2，為褐色固體。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化該固體，得到554mg化合物4f-2，為淺棕色固體(收率76.3％)。
步驟D將化合物4f-2(100.6mg，0.337mmol)溶于10mL CH2Cl2中，并向溶液中加入“Dess Martin periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；150.2mg，0.354mmol)。在室溫下25分鐘后，混合物變渾濁。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌另外30分鐘，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。用30mLCH2Cl2稀釋混合物，并用飽和NaHCO3洗滌。在有機層和水層之間形成黃色不溶性固體并除去。通過無水MgSO4干燥有機層，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到化合物5f-2，為油狀物，收率85.4％。
步驟E室溫下將于1mL吡啶中的化合物5f-2(41.6mg，0.140mmol)和鹽酸羥胺(20.0mg，0.281mmol)的混合物攪拌過夜。一天后，HPLC痕量分析顯示大約50％的轉(zhuǎn)化率。加入另外5當(dāng)量的NH2OH-HCl并攪拌反應(yīng)物72小時。減壓下除去過量的吡啶，并用1∶2乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到31.4mg化合物7f-2，為1∶2異構(gòu)體混合物。測得MS ESI(+)m/z 312(M+1)。
實施例32(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-乙基-肟(7f-4)的制備在這一實施例中，描述了具有如圖27所示其中R1是異丁基，R2是乙基且Ar是4-氟苯基的通式XII的化合物7f-4的合成。
步驟A-D如實施例31步驟A-D所述制備化合物5f-2。
步驟E室溫下攪拌化合物5f-2(51.2mg，0.173mmol)、O-乙基-羥胺鹽酸鹽(67.4mg，0.691mmol)和2mL干燥吡啶的混合物。室溫下攪拌混合物90小時。減壓下除去過量的吡啶。向殘余物中加入2mL水和2mL CH2Cl2。分層，并用CH2Cl2萃取水層。用1N HCl(20mL)洗滌合并的萃取液，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到47.1mg化合物7f-4，為油狀物(收率80.3％)，為1∶2的異構(gòu)體的混合物。測得MS ESI(+)m/z 340(M+1)。
實施例33{2-[(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-亞甲氨基氧基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(7f-6)的制備在這一實施例中，描述了具有如圖27所示其中R1是異丁基，R2是CH2CH2NHBoc且Ar是4-氟苯基的通式XII的化合物7f-6的合成。
步驟A-D如實施例31步驟A-D所述制備化合物5f-2。
步驟E室溫下將化合物5f-2、如實施例30所述制備的(2-氨基乙氧基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.675mmol)、吡啶(1.5mL)和一滴6N HCl/MeOH(濃HCl和MeOH 1∶1的混合物，體積比)的混合物攪拌39小時。減壓下除去過量的吡啶。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到65.6mg(收率85.5％)化合物7f-6，為淺黃色油狀物。1H-NMR表明化合物7f-6為1∶1.8比例的異構(gòu)體。
實施例34(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-芐基-肟(7f-7)的制備具有通式XII的化合物7f-7的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例27所述制備化合物5f。
步驟B將化合物5f(76.9mg，0.244mmol)溶于2mL吡啶中，并加入O-芐基羥胺鹽酸鹽(0.195g，1.22mmol)。將混合物在室溫下攪拌2天，并減壓下濃縮。將殘余物懸浮于CH2Cl2中，通過棉塞過濾懸浮液，并用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化，得到0.069g化合物7f-7，為1∶4的E和Z異構(gòu)體的混合物(收率67.2％)。測得MS(ESI+)m/z 420(M+H)。
實施例35(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-(2-氨基乙基)-肟(7f-8)的制備具有通式XII的化合物7f-8的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例29所述制備化合物7f-5。
步驟B將化合物7f-5(32.3mg，0.0656mmol)溶于2mL 1∶1的CH2Cl2∶TFA混合物中，并室溫下攪拌混合物0.5小時。將全部混合物在減壓下濃縮，并在高真空下干燥過夜。將殘余物溶于5mL CH2Cl2中，并用飽和K2CO3洗滌。通過MgSO4干燥有機層，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到18.6mg化合物7f-8，為油狀物(收率76.1％)。測得MS(ESI+)m/z 373(M+H)。
實施例36(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-甲基-肟(7f-9)的制備具有通式XII的化合物7f-9的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例31所述制備化合物5f-2。
步驟B將化合物5f-2溶于乙基-氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.675mmol)、吡啶(1.5mL)和一滴2mL吡啶中，并加入MeONH2-HCl。室溫下攪拌混合物2天，并減壓下濃縮。將殘余物懸浮于CH2Cl2中，通過棉塞過濾懸浮液，并用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化，得到33.5mg部分1，1.0mg部分2，17.7mg混合部分，總共52.2mg化合物7f-9(收率58％)。測得MS(ESI+)m/z 344(M+H)。
實施例37(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-(2-氨基乙基)-肟(7f-10)的制備具有通式XII的化合物7f-10的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例33所述制備化合物7f-6。
步驟B將化合物7f-6(50.5mg，0.107mmol)溶于4mL CH2Cl2中，并向溶液中加入三氟乙酸(4mL)。室溫下0.5小時后，將混合物在減壓下濃縮，并在高真空下干燥過夜。將油狀物溶于10mL CH2Cl2中，并用飽和K2CO3溶液洗滌。通過無水MgSO4干燥有機層，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到34.9mg化合物7f-10，為油狀物，其包含1∶2的異構(gòu)體的混合物(收率88.6％)。測得MS(ESI+)m/z 355(M+H)。
實施例38(2，4-二氟苯基)-(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-甲酮O-甲基-肟(7f-11)的制備具有通式XII的化合物7f-11的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例74所述制備化合物9f-1。
步驟B將化合物9f-1(622mg，2.409mmol)、K2CO3(499mg，1.50當(dāng)量)和DMF(10mL)放于Schlenk試管中。加入碘代甲烷(225μL，1.50當(dāng)量)，并將試管密封。將試管加熱至100℃。在100℃下23小時后，將混合物冷卻至室溫，并啟封。將混合物轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，并減壓下濃縮。用水和CH2Cl2終止殘余物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層。通過MgSO4干燥合并的有機萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到176mg化合物5f-13，為黃色固體(收率26.9％)。測得MS(ESI+)m/z273(M+H)。
步驟C將化合物5f-13(0.040g，0.147mmol)和甲氧胺鹽酸鹽(0.123g，1.47mmol)放于5mL反應(yīng)小瓶中，加入1mL吡啶。將反應(yīng)小瓶密封，并加熱至50℃。18小時后，減壓下除去過量的吡啶，并向殘余物中加入水。用CH2Cl2萃取含水混合物。用1N HCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到0.033g化合物7f-11(收率74.6％)，為粘稠油狀物，其包含1∶9的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 302(M+H)。
實施例39(2，4-二氟苯基)-[1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吲唑-5-基]-甲酮肟(7f-12)的制備具有通式XII的化合物7f-12的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例74所述制備化合物5f-11。
步驟B將化合物5f-11、鹽酸羥胺(0.051g，0.735mmol)和1mL吡啶放于小瓶中，并將混合物加熱至50℃。14.5小時后，減壓下除去吡啶，用CH2Cl2和水稀釋殘余物。分層，并用CH2Cl2萃取水層。用1N HCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到22.9mg(收率87.7％)化合物7f-12，為白色泡沫狀物，其包含1∶4的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 356(M+H)。
實施例40(2，4-二氟苯基)-[1-(2，2，2-三氟-乙基)-1H-吲唑-5-基]-甲酮O-甲基肟(7f-13)的制備具有通式XII的化合物7f-13的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例74所述制備化合物5f-11。
步驟B將化合物5f-11(0.023g，0.067mmol)、鹽酸羥胺(0.056g，0.676mmol)和1mL吡啶放于小瓶中，并將混合物加熱至50℃。14.5小時后，減壓下除去吡啶，并用CH2Cl2和水稀釋殘余物。分層，并用CH2Cl2萃取水層。用1N HCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到19.6mg化合物7f-13(收率78.5％)，為白色泡沫狀物，其包含1∶4的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 370(M+H)。
實施例41(2，4-二氟苯基)-(1-甲磺酰基-1H-吲唑-5-基)-甲酮肟(7f-14)的制備具有通式XII的化合物7f-14的合成顯示在圖27中。
步驟A如實施例13所述制備化合物9f-1。
步驟B將化合物9f-1(258mg，1.00mmol)溶于5mL吡啶中，并加入甲基磺酰氯(81μL，1.05mmol)。15小時后減壓下除去過量的吡啶，并向殘余物中加入水。用CH2Cl2萃取含水混合物。用1N HCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到238.1mg化合物5f-14，為白色固體(總收率70.8％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.38(s，1H)，8.23(s，1H)，8.18(d，1H)，8.07(d，1H)，7.66(q，1H)，7.06(t，1H)，6.95(t，1H)，3.36(s，3H)。
步驟C將化合物5f-14(0.060g，0.177mmol)、鹽酸羥胺(0.123g，1.77mmol)和1mL吡啶放于5mL小瓶中，并將混合物加熱至50℃。26小時后，減壓下除去過量的吡啶，并用CH2Cl2和水稀釋殘余物。分層，并用CH2Cl2萃取水層。用1N HCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用2∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物。將化合物溶于MeOH-CH2Cl2中，并裝填到柱子上，得到37.4mg(收率60.0％)化合物7f-14，為白色粉末，其包含1∶2的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 352(M+H)。
實施例42(2，4-二氟苯基)-(1-甲磺?；?1H-吲唑-5-基)-甲酮O-甲基肟(7f-15)的制備圖27顯示具有通式XII的化合物7f-15的合成。
步驟A如實施例41所述制備化合物5f-14。
步驟B將化合物5f-14(0.060g，0.250mmol)、鹽酸甲氧胺(0.209g，2.50mmol)和1mL吡啶放于小瓶中，并將混合物加熱至50℃。26.5小時后，減壓下除去過量的吡啶，并用CH2Cl2和水稀釋殘余物。分層，并用CH2Cl2萃取水層。用1N HCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到44.8mg化合物7f-15，為白色固體，其包含1∶4的異構(gòu)體的混合物(收率49％)。測得MS(ESI+)m/z 366(M+H)。
實施例43(2，4-二氟苯基)-(1H-吲唑-5-基)-甲酮O-甲基肟(7f-16)的制備圖27顯示具有通式XII的化合物7f-16的合成。
步驟A如實施例13所述制備化合物9f-1。
步驟B將化合物9f-1和甲氧胺鹽酸鹽放于5mL反應(yīng)小瓶中，并加入1mL吡啶。將反應(yīng)小瓶密封，并加熱至50℃。18小時后，減壓下除去過量的吡啶，并向殘余物中加入水(10mL)。用CH2Cl2萃取含水混合物。用1N HCl(20mL)和飽和NaHCO3(20mL)洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到33.0mg(收率74.6％)化合物7f-16，為粘稠油狀物，其包含1∶4的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 288(M+H)。
實施例44(1-烯丙基-1H-吲唑-5-基)-(2，4-二氟苯基)-甲酮肟(7f-17)的制備圖27顯示具有通式XII的化合物7f-17的合成。
步驟A如實施例13所述制備化合物9f-1。
步驟B將化合物9f-1(0.516g，2.00mmol)、K2CO3(0.0415g，3.00mmol)、DMF(10mL)和烯丙基溴(0.363g，3.00mmol)加入Schlenk型試管中。將試管密封，并加熱至100℃。19小時后，傾出上清液，并用DMF(5mL×3)洗滌鹽。將合并的上清液減壓下濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2中，并用水洗滌。用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到142.1mg(收率23.8％)化合物5f-12。測得MS(ESI+)m/z 299(M+H)。
步驟C將化合物5f-12(0.027g，0.090mmol)、鹽酸甲氧胺(0.063g，0.90mmol)和吡啶(1mL)放于反應(yīng)小瓶中，并將混合物加熱至50℃。21.5小時后，將反應(yīng)物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，并加水(10mL)。用CH2Cl2萃取混合物。用1N HCl(20mL)和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到23.1mg(收率81.6％)化合物7f-17，為泡沫狀物狀固體，其包含1∶3的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 356(M+H)。
實施例45(1-烯丙基-1H-吲唑-5-基)-(2，4-二氟苯基)-甲酮O-甲基肟(7f-18)的制備圖27顯示具有通式XII的化合物7f-18的合成。
步驟A如實施例44所述制備化合物5f-12。
步驟C將化合物5f-12(0.027g，0.090mmol)、鹽酸甲氧胺(0.063g，0.90mmol)和吡啶(1mL)放于反應(yīng)小瓶中，并將混合物加熱至50℃。21.5小時后，將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，并加水(10mL)。用CH2Cl2萃取混合物。用1NHCl和飽和NaHCO3洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到24.7mg(收率83.1％)化合物7f-18，為油狀物，其包含1∶3的異構(gòu)體的混合物。測得MS(ESI+)m/z 328(M+H)。
實施例46-61描述了具有通式XIII的本發(fā)明的酰胺化合物的合成。圖29顯示具有通式結(jié)構(gòu)1g的化合物的合成反應(yīng)路線。
實施例465-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸酰胺(1g-1)的制備步驟A將1-氟-3-甲基-苯(化合物1g；18.7g，170mmol)加入500mL三頸燒瓶中，并冷卻至-78℃。接著，用注射器緩慢加入于THF中的叔丁醇鉀(11.0g，170mmol)溶液。10分鐘后，在氮氣下通過空心針(cannula)緩慢向反應(yīng)混合物中加入于戊烷中的t-BuLi(19.0g，170mmol)。攪拌2.5小時后，用大量的新的碎干冰終止反應(yīng)物反應(yīng)，去除-78℃浴，并用金屬刮勺手動攪拌至暗褐色物料變成更淺黃色漿狀物。手工混合20分鐘后，加入約500mL水，并攪拌反應(yīng)混合物。然后用Et2O洗滌反應(yīng)混合物，之后用6N鹽酸酸化至pH小于3，并用Et2O萃取。用鹽水洗滌有機層，通過MgSO4干燥，并濃縮，得到10gm(收率45％)化合物2g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(t，1H)，7.04(d，1H)，6.97(d，1H)，2.39(s，3H)。
步驟B將化合物2g(8.0g，52mmol)加入500mL燒瓶中，并冷卻至鹽水冰浴的溫度。加入H2SO4(150mL)，并攪拌混合物。接著，將新鮮制備的H2SO4(6.11g，62.3mmol)和HNO3(5.2g，83mmol)的混合物在10分鐘內(nèi)滴入反應(yīng)混合物中。0℃下3小時后，反應(yīng)完成，將反應(yīng)物加入1500mL冰/冰水中，并攪拌1小時。將反應(yīng)物過濾，用冷水漂洗幾次，并在高真空下干燥，得到8g(收率80％)化合物3g。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.74(d，1H)，7.20(d，1H)，2.69(s，3H)。
步驟C將化合物3g(8.0g，40.0mmol)溶于MeOH中，并緩慢加入H2SO4(20.0g，201mmol)。將反應(yīng)物加熱至65℃，持續(xù)20小時。將反應(yīng)物濃縮，用冰和水稀釋，超聲，過濾，用冷水漂洗幾次，并通過高真空干燥2天。粗品化合物4g直接用于下一步驟中。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.66(d，1H)，7.01(d，1H)，3.95(s，3H)，2.68(s，3H)。
步驟D將化合物4g(5.4g，41mmol)加入THF中，并冷卻至0℃。向其中加入4-氟苯酚(5.1g，45mmol)。接著，分幾部分加入NaH(60％，在油中)(1.8g，45mmol)。1小時后，將反應(yīng)物暖至室溫，并再攪拌2個小時。將反應(yīng)物濃縮，并通過過量的0.5N Na2CO3使pH至7.0而終止反應(yīng)物反應(yīng)。將反應(yīng)物超聲30分鐘，過濾，并用另外的緩沖液和水漂洗。在高真空下將反應(yīng)物干燥1小時，然后加入THF中，MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到大約8g(收率75％)化合物5g。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.66(d，1H)，7.01(d，1H)，3.95(s，3H)，2.68(s，3H)。
步驟E將化合物5g(10.0g，33.0mmol)和鋅(11.0g，164mmol)加入甲醇中，并攪拌。緩慢加入乙酸(4.0g，66mmol)。將反應(yīng)物攪拌過夜，超聲，并通過硅藻土過濾。將溶液濃縮，得到大約14g化合物6g和鋅副產(chǎn)物。該粗品用于下一步驟。
步驟F將化合物6g(9.0g，33.0mmol)、四氟硼酸銨(6.0g，65mmol)和HCl(17.0g，163mmol)加入200mL AcOH/H2O(2∶1)中，并超聲。從圓底的邊緣將物料刮掉，并加入NaNO2(2.7g，3mmol)。將反應(yīng)物超聲10分鐘，變成暗褐色，同時出現(xiàn)新形成的沉淀物(產(chǎn)生鹽)。攪拌反應(yīng)物4小時。在65℃和高速真空(speed vacuum)下濃縮反應(yīng)物，然后用甲苯吸收，并蒸發(fā)至干。粗品化合物7g沒有任何處理(workup)直接用于下一步驟。
步驟G將化合物7g(11.0g，31mmol)、乙酸鉀(5.2g，53mmol)和18-冠-6(0.1當(dāng)量)加入氯仿中，并超聲10分鐘。室溫下反應(yīng)過夜。將柱子裝到1000mL吸濾瓶中，柱子由約2英寸硅膠、放于硅膠上的2英寸硅藻土、硅藻土上的一張濾紙和濾紙上的1.5英寸沙組成。用CHCl3洗滌柱子。將于CHCl3中的粗品直接裝填到柱子上，用CHCl3洗脫柱子直到洗脫出大量黃色物料。接著，用乙酸乙酯從柱子上洗脫產(chǎn)物，將乙酸乙酯收集物集中并濃縮，得到大約7g(收率95％)化合物8g。測得MS(ESI+)m/z 287(M+H)。
步驟H將化合物8g(0.250g，0.87mmol)加入干燥DMF中，并向其中加入異丁基溴(0.15mL，1.2mmol)和K2CO3(0.5g，3.6mmol)。然后將該反應(yīng)混合物放于有隔膜覆蓋的小瓶中，并在95℃下攪拌過夜。用1∶1乙醚/己烷通過柱色譜法純化該物料，得到0.1g(收率33％)化合物9g-1。測得MS(ESI+)m/z 343(M+H)。
步驟I將化合物9g-1(0.100g，0.292mmol)放于1∶1的1NLiOH/THF混合物中，并在55℃下攪拌。4小時后，將THF蒸發(fā)，并加入1N HCl。將反應(yīng)混合物超聲，并過濾，分離得到約0.075g(收率78％)化合物10g，為純品。測得MS(ESI+)m/z 329(M+H)。
步驟J在氮氣氛和室溫下，用CDI(1.2當(dāng)量)處理于THF(1mL)中的化合物10g(20mg，0.061mmol)溶液。攪拌18小時后，用于二噁烷中的0.5M NH4(0.11mL，0.67mmol)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將混合物在SepPak cartridge中用CH2Cl2-5％MeOH/CH2Cl2洗脫進行純化，得到2.2mg化合物11g-1，為油狀物，收率12％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.01(s，1H)，7.99(s，1H)，7.33(s，1H)，7.57(s，1H)，7.26(s，1H)，7.20(m，2H)，7.05(m，2H)，4.27(d，2H)，2.24(m，1H)，0.86(d，6H)。
實施例47[5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-嗎啉-4-基-甲酮(11g-2)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用嗎啉(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-2，為油狀物，收率93％。
實施例48[5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮(11g-3)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用1-甲基-哌嗪(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-3，為油狀物，收率95％。
實施例495-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(1-芐基哌啶-4-基)-酰胺(11g-4)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用1-芐基-哌啶-4-基-胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-4，為油狀物，收率97％。
實施例50
5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(2-芐氨基乙基)-酰胺(11g-5)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用N1-芐基-乙烷-1，2-二胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-5，為油狀物，收率100％。
實施例515-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(2-哌啶-基-乙基)-酰胺(11g-6)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用2-哌啶-1-基-乙胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-6，為油狀物，收率100％。
實施例525-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(11g-7)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用2-吡咯烷-1-基-乙胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-7，為油狀物，收率63％。
實施例535-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(3-嗎啉-4-基-丙基)-酰胺(11g-8)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用3-嗎啉-4-基-丙胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-8，為油狀物，收率70％。
實施例545-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(3-二甲氨基(11g-9)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用N-1-二甲基-丙烷-1，3-二胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-9，為油狀物，收率44％。
實施例555-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(2-二甲氨基乙基)-酰胺(11g-10)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用N-1-二甲基-乙烷-1，2-二胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-10，為油狀物，收率58％。
實施例565-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸甲基-(1-甲基哌啶-4-基)-酰胺(11g-11)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用甲基-(1-甲基哌啶4-基)-胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPak cartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-11，為油狀物，收率3％。
實施例575-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸[3-(甲基苯基氨基)-丙基]-酰胺(11g-12)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用N1-甲基-N1-苯基-丙烷-1，3-二胺(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPakcartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-12，為油狀物，收率78％。
實施例583-{[5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(11g-13)的制備在氮氣氛和室溫下用羰基二咪唑(1.2當(dāng)量)處理于THF中的5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(化合物10g，如實施例46所述制備)溶液。攪拌18小時后，用3-氨基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1當(dāng)量)處理反應(yīng)物。另外18小時后，緩慢蒸發(fā)溶劑，并將殘余物在SepPakcartridge中用100％ CH2Cl2至5％ MeOH/CH2Cl2梯度洗脫進行純化，得到化合物11g-13，為油狀物，收率94％。
實施例595-(4-氟苯氧基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-羧酸(2-二甲氨基乙基)酰胺(11g-14)的制備步驟A如實施例46所述制備化合物8g。
步驟B將化合物8g、2-溴-1，1，1-三氟-乙烷、K2CO3和DMF混合，并在75℃下將反應(yīng)混合物攪拌過夜。加入另外兩當(dāng)量的2-溴-1，1，1-三氟乙烷，在90℃下攪拌反應(yīng)混合物。加入另外若干當(dāng)量的2-溴-1，1，1-三氟乙烷，并在50℃下攪拌反應(yīng)物72小時。將反應(yīng)物濃縮，用甲苯吸收，并通過柱色譜法(用己烷/Et2O洗脫)純化，得到80mg(收率24％)化合物9g-2。測得MS(ESI+)m/z 369(M+H)。
步驟C將化合物9g-2(0.075g，0.20mmol)放于1∶1的1NLiOH/THF混合物中，并室溫下攪拌18小時。將THF蒸發(fā)，并向反應(yīng)混合物中加入1N HCl，然后將反應(yīng)混合物超聲并過濾，分離得到約0.070g(收率97％)化合物10g-2，為純品。測得MS(ESI+)m/z 355(M+H)。
步驟D將化合物10g-2(0.03g，0.847mmol)、苯并三唑-1，3-二醇(0.022g，0.25mmol)和(3-二甲氨基丙基)-乙基碳二亞胺(0.011g，0.10mmol)加入二氯乙烷中，并攪拌5分鐘。接著，加入N1-二甲基-乙烷-1，2-二胺(0.019g，0.10mmol)，并攪拌反應(yīng)物3小時。將反應(yīng)混合物濃縮，用二氯甲烷吸收，高真空下干燥，并根據(jù)方法C(參見下文)用反相HPLC純化，得到25mg(收率56％)化合物11g-14，為TFA的鹽。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45(s，1H)，8.10(s，1H)，7.90(s，1H)，7.12(m，4H)，5.02(q，2H)，3.93(br，2H)，3.34(br，6H)，2.72(s，6H)。
實施例605-(4-氟苯氧基)-1-甲基-1H-吲唑-6-羧酸(2-二甲氨基乙基)酰胺(11g-15)的制備步驟A如實施例46所述制備化合物8g。
步驟B將化合物8g、碘代甲烷和K2CO3加入DMF中，并加熱至約75℃。48小時后，將反應(yīng)物過濾除去K2CO3，濃縮，用甲苯吸收，并通過柱色譜法(用1∶1 Et2O/己烷洗脫)純化，得到70mg(收率36.7％)化合物9g-3。測得MS(ESI+)m/z 301(M+H)。
步驟C將化合物9g-3(0.075g，0.25mmol)放于1∶1的1NLiOH/THF混合物中，并室溫下攪拌18小時。將THF蒸發(fā)，將1NHCl加入反應(yīng)混合物中，然后將反應(yīng)混合物超聲，并過濾，得到約0.060g(收率84％)化合物10g-3，為純品。測得MS(ESI+)m/z 287(M+H)。
步驟D將化合物10g-3(0.030g，0.105mmol)、苯并三唑-1，3-二醇(0.028g，0.31mmol)和(3-二甲氨基丙基)-乙基碳二亞胺(0.019g，0.13mmol)加入二氯乙烷中，并攪拌5分鐘。接著，加入N1-二甲基-乙烷-1，2-二胺(0.024g，0.13mmol)，并攪拌反應(yīng)物3小時。然后將反應(yīng)混合物濃縮，用二氯乙烷吸收，高真空下干燥，并根據(jù)實施例86方法C用反相HPLC純化，得到25mg(收率52％)化合物11g-15，為TFA的鹽。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.44(br，1H)，8.21(s，IH)，7.85(s，1H)，7.05(m，4H)，4.15(s，3H)，3.90(br，2H)，3.30(br，2H)，2.92(s，6H)。
實施例61
5-(4-氟苯氧基)-1H-吲唑-6-羧酸(2-二甲氨基乙基)酰胺(11g-16)的制備步驟A如實施例46所述制備化合物8g。
步驟B在THF中攪拌化合物8g，加入1體積當(dāng)量的1N LiOH，并在60℃下攪拌反應(yīng)混合物6小時。將反應(yīng)物濃縮，用1N HCl終止反應(yīng)，冷卻，超聲，過濾并干燥，得到0.40g化合物10g-4(84％，純品)。測得MS(ESI+)m/z 287(M+H)。
步驟C將化合物10g-4(0.030g，0.110mmol)、苯并三唑-1，3-二醇(0.029g，0.33mmol)和(3-二甲氨基丙基)-乙基碳二亞胺(0.020g，0.13mmol)加入二氯乙烷中，并攪拌5分鐘。接著，加入N1-二甲基乙烷-1，2-二胺(0.025g，0.13mmol)，并攪拌反應(yīng)物3小時。將反應(yīng)物蒸發(fā)，用二氯甲烷吸收，高真空下干燥，并根據(jù)實施例86方法B用反相HPLC純化，得到25mg(收率51％)化合物11g-16，為TFA的鹽。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45(br，1H)，8.22(s，1H)，7.91(s，1H)，7.09(s，1H)，7.06(m，3H)，3.85(br，2H)，3.20(br，2H)，2.90(s，6H)。
實施例62-67描述了具有通式IX的醇化合物的合成。圖30顯示通式化合物4f合成的合成反應(yīng)路線。
實施例62(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲醇(4f-1)的制備在這一實施例中，描述了如圖30所示其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氟苯基的化合物4f-1的合成。
步驟A將四氟硼酸銨(20.97g，200mmol)溶于乙酸水溶液(500mL AcOH/250mL水)中，并冷卻至0℃。依次加入2-甲基-4-溴苯胺(化合物1f；18.61g，100mmol)和42mL濃HCl水溶液(36％w/w，12N，500mmol)。0℃下攪拌混合物20分鐘，并加入NaNO2(7.59g，110mmol)。0℃下攪拌反應(yīng)物1小時，并暖至室溫。室溫下16小時后，將混合物減壓下濃縮，使殘余物和甲苯共沸，并高真空下干燥。將該固體懸浮于500mL CHCl3中，并加入KOAc(12.76g，130mmol)和18-冠-6(7.93g，30mmol)。室溫下將反應(yīng)物攪拌1.5小時。用水洗滌混合物，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到30g 5-溴-1H-吲唑(化合物2f)，為褐色固體。粗品沒有進一步純化而使用。
步驟B將粗制5-溴-1H-吲唑(化合物2f；100mmol)溶于250mLDMF中。加入K2CO3(20.7g，150mmol)和1-溴-甲基丙烷(16.3mL，150mmol)。在氮氣氛下將混合物加熱至120℃，持續(xù)16小時。將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將水(200mL)和CH2Cl2(200mL)加入殘余物中，并劇烈攪拌30分鐘。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到約30g粗品。用色譜法(1∶9至1∶4乙醚/己烷)純化粗品，得到12.870g化合物3f，為暗紅色油狀物，步驟A和B的收率為50.8％。測得MS ESI(+)m/z 253和255(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.87(m，1H)，7.43(m，1H)，7.29(m，1H)，7.29(m，1H)，4.15(m，2H)，2.33(m，1H)，0.92(m，6H)。
步驟C將化合物3f(121.0mg，0.478mmol)溶于2mL乙醚中，并冷卻至-78℃。向溶液中加入t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.59mL，1.004mmol)。在-78℃下將反應(yīng)物攪拌另外1小時。在-78℃下加入2，6-二氟苯甲醛(58μL，0.526mmol)，去除冷水浴，并將反應(yīng)物緩慢暖至室溫。用10mL水終止反應(yīng)物反應(yīng)。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，并用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化，得到104.5mg(收率69.1％)化合物4f-1，為淺黃色晶體固體。測得MS ESI(+)m/z 317(M+1)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.73(s，1H)，7.56(m，1H)，7.40～7.35(m，2H)，6.91(m，2H)，6.78(m，1H)，6.22(m，1H)，4.15(m，2H)，2.39～2.26(m，2H，與-OH重疊)，0.92(m，6H)。
實施例63(4-氯-2-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲醇(4f-7)的制備在這一實施例中，描述了如圖30所示其中R1是異丁基且Ar是4-氯-2-氟苯基的化合物4f-7的合成。
步驟A-B如實施例1步驟A-B所述制備5-溴-1-異丁基-1H-吲唑(化合物3f)。
步驟C將于1mL乙醚中的化合物3f(132mg，0.521mmol)冷卻至-78℃。向溶液中加入t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.64mL，1.10mmol)。-78℃下1小時后，將于1mL乙醚中的4-氯-2-氟苯甲醛(86.8mg，0.548mmol)溶液加入，并將混合物緩慢暖至室溫。用水(5mL)終止混合物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層，通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶2乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到43.7mg化合物4f-7，為淡黃色固體(收率25.2％)。測得MS ESI(+)m/z 333和335(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.72(s，1H)，7.56(m，1H)，7.39～7.35(m，2H)，7.18(m，1H)，7.05(m，1H)，6.21(m，1H)，4.15(m，2H)，2.37～2.27(m，2H，與-OH重疊)，0.91(m，6H)。
實施例64(2-氯-4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲醇(4f-8)的制備在這一實施例中，描述了如圖30所示其中R1是異丁基且Ar是2-氯-4-氟苯基的化合物4f-8的合成。
步驟A-B如實施例1步驟A-B所述制備5-溴-1-異丁基-1H-吲唑(化合物3f)。
步驟C將于1mL乙醚中的化合物3f(116.2mg，0.459mmol)冷卻至-78℃。將t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.57mL)加入-78℃的溶液中。-78℃下1小時后，將于1mL乙醚中的2-氯-4-氟苯甲醛(76.4mg，0.482mmol)溶液加入，并將混合物緩慢暖至室溫。用水(5mL)終止混合物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層，通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶2乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到47.6mg化合物4f-8，為淡黃色固體(收率31.2％)。測得MS ESI(+)m/z 333和335(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.72～7.66(m，2H)，7.39～7.34m，2H)，7.13～7.03(m，2H)，6.29(m，1H)，4.15(m，2H)，2.38～2.27(m，2H，與-OH重疊)，0.92(m，6H)。
實施例65(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲醇(4f-2)的制備在這一實施例中，描述了如圖30所示其中R1是異丁基且Ar是4-氟苯基的化合物4f-2的合成。
步驟A-B如實施例1步驟A-B所述制備5-溴-1-異丁基-1H-吲唑(化合物3f)。
步驟C將化合物3f(1.49mg，5.89mmol)溶于50mL乙醚中，并將溶液冷卻至-78℃。向溶液中加入t-BuLi(1.70M，在戊烷中，7.01mL，12.07mmol)。當(dāng)加入t-BuLi時，形成褐色固體，混合物變成漿狀。在加入t-BuLi完成后，在-78℃下將混合物攪拌另外30分鐘。在-78℃下滴加4-氟苯甲醛(700μL，6.475mmol)，之后去除冷水浴，將反應(yīng)混合物緩慢暖至室溫。用20mL終止混合物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層，用鹽水(20mL)洗滌合并的萃取液，MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到1.7g褐色固體。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化該固體，得到1.233g化合物4f-2，為淺棕色固體(收率70.2％)。測得MS ESI(+)m/z 299(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.97(s，1H)，7.72(s，1H)，7.40～7.31(m，4H)，7.07～7.00(m，2H)，5.96(m，1H)，4.15(m，2H)，2.38～2.27(m，2H，與-OH重疊)，0.92(m，6H)。
實施例66(2，4-二氯苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲醇(4f-9)的制備在這一實施例中，描述了如圖30所述其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氯苯基的化合物4f-9的合成。
步驟A-B如實施例1步驟A-B所述制備5-溴-1-異丁基-1H-吲唑(化合物3f)。
步驟C將化合物3f(106.8mg，0.422mmol)溶于2mL乙醚中。將溶液冷卻至-78℃，并攪拌15分鐘。將t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.52mL，0.886mmol)緩慢加入混合物中?；旌衔镒?yōu)榧t色漿狀物，在-78℃下攪拌另外1小時。將2，4-二氯苯甲醛(81.2mg，0.464mmol)溶于1mL乙醚中，并通過雙面注射針(double ended needle)將溶液轉(zhuǎn)移至漿狀物中。去除冷水浴，使反應(yīng)物緩慢暖至室溫。用10mL水終止反應(yīng)物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，并用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化，得到化合物4f-9，為黃色泡沫狀物(99.6mg，收率67.6％)。測得MS ESI(+)m/z 349和351(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.70(s，1H)，7.68(m，1H)，7.38～7.36(m，3H)，7.33(m，1H)，6.27(m，1H)，4.15(m，2H)，2.39(m，1H，-OH)，2.37～2.26(m，1H)，0.92(m，6H)。
實施例67(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-O-甲苯基甲醇(4f-10)的制備在這一實施例中，描述了如圖30所述其中R1是異丁基且Ar是2-甲基苯基的化合物4f-10的合成。
步驟A-B如實施例1步驟A-B所述制備5-溴-1-異丁基-1H-吲唑(化合物3f)。
步驟C將化合物3f(123.3mg，0.487mmol)溶于2mL乙醚中。將溶液冷卻至-78℃，并攪拌15分鐘。將t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.62mL，1.023mmol)緩慢加入混合物中?；旌衔镒?yōu)榧t色漿狀物，并在-78℃下攪拌另外1小時。在-78℃下加入O-甲苯甲醛(62μL，0.536mmol)。去除冷水浴，使反應(yīng)物緩慢暖至室溫。用10mL水終止反應(yīng)物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，并用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化，得到化合物4f-10，為非常粘稠的淺黃色油狀物(96.4mg，收率67.2％)。測得MS ESI(+)m/z 295(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.94(s，1H)，7.64～7.61(m，2H)，7.38～7.33(m，2H)，7.29(m，1H)，7.23(m，1H)，7.17～7.13(m，1H)，6.13(m，1H)，4.15(m，2H)，2.32(m，1H)，2.24(s，3H)，2.18(m，1H，-OH)，0.91(m，6H)。
實施例68-75描述了通式X的化合物的合成。圖31顯示合成具有通式結(jié)構(gòu)5f的化合物的合成反應(yīng)路線。
實施例68(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮(5f-1)的制備在這一實施例中，描述了如圖31所示其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氟苯基的化合物5f-1的合成。
步驟A將四氟硼酸銨(20.97g，200mmol)溶于乙酸水溶液(500mL AcOH/250mL水)中，并冷卻至0℃。依次加入2-甲基-4-溴苯胺(18.61g，100mmol)和42mL濃HCl水溶液(36％w/w，12N，500mmol)。0℃下攪拌混合物20分鐘，并加入NaNO2(7.59g，110mmol)。在0℃下攪拌反應(yīng)物1小時，并暖至室溫。室溫下16小時后，將混合物減壓下濃縮，使殘余物和甲苯共沸，并高真空下干燥。將該固體懸浮于500mL CHCl3中，并加入KOAc(12.76g，130mmol)和18-冠-6(7.93g，30mmol)。室溫下將反應(yīng)物攪拌1.5小時。用水洗滌混合物，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到30g 5-溴-1H-吲唑(化合物2f)，為褐色固體。粗品沒有進一步純化而使用。
步驟B將粗制5-溴-1H-吲唑(化合物2f；100mmol)溶于250mLDMF中。加入K2CO3(20.7g，150mmol)和1-溴-甲基丙烷(16.3mL，150mmol)。在氮氣氛下將混合物加熱至120℃，持續(xù)16小時。將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將水(200mL)和CH2Cl2(200mL)加入殘余物中，并劇烈攪拌30分鐘。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到約30g粗品。通過色譜法(1∶9至1∶4乙醚/己烷)純化粗品，得到12.870g化合物3f，為暗紅色油狀物，步驟A和B的收率為50.8％。測得MS ESI(+)m/z 253和255(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.87(m，1H)，7.43(m，1H)，7.29(m，1H)，7.29(m，1H)，4.15(m，2H)，2.33(m，1H)，0.92(m，6H)。
步驟C將化合物3f(121.0mg，0.478mmol)溶于2mL乙醚中，并冷卻至-78℃。向溶液中加入t-BuLi(1.70M，在戊烷中，0.59mL，1.004mmol)。在-78℃下將反應(yīng)物攪拌另外1小時。在-78℃下加入2，6-二氟苯甲醛(58μL，0.526mmol)，去除冷水浴，并將反應(yīng)物緩慢暖至室溫。用10mL終止反應(yīng)物反應(yīng)。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，并用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化，得到化合物4f-1，為淺黃晶體固體(104.5mg，收率69.1％)。測得MS(ESI+)m/z 317(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.96(s，1H)，7.73(s，1H)，7.56(m，1H)，7.40～7.35(m，2H)，6.91(m，2H)，6.78(m，1H)，6.22(m，1H)，4.15(m，2H)，2.39～2.26(m，2H，與-OH重疊)，0.92(m，6H)。
步驟D室溫下將化合物4f-1(316.3mg，1.00mmol)、“DessMartin Periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；445.3mg，1.05mmol)和10mL CH2Cl2攪拌2小時。用10mL飽和K2CO3溶液終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，并分層。用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶2乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到237.6mg化合物5f-1，為粘稠淺棕色油狀物(收率75.6％)。測得MS ESI(+)m/z 315(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(s，1H)，8.11(s，1H)，7.99(m，1H)，7.60(m，1H)，7.47(m，1H)，7.03(m，1H)，6.94(m，1H)，4.21(m，2H)，2.37(m，1H)，0.95(m，6H)。
實施例69(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮(5f-2)的制備在這一實施例中，描述了如圖31所示其中R1是異丁基且Ar是4-氟苯基的化合物5f-2的合成。
步驟A-C如實施例27步驟A-C所述制備(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲醇(化合物4f-2)，除了使用4-氟苯甲醛代替2，4-二氟苯甲醛。
步驟D室溫下將(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲醇(化合物4f-2；745.9mg，2.50mmol)、“Dess Martin Periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；1.166g，2.75mmol)和50mL CH2Cl2的混合物攪拌2小時。用20mL飽和K2CO3溶液終止反應(yīng)物反應(yīng)。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到599mg化合物5f-2，為淺棕色固體(收率80.9％)。測得MS ESI(+)m/z 297(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，8.11(s，1H)，7.94(m，1H)，7.87(m，1H)，7.85(m，1H)，7.49(m，1H)，7.22～7.16(m，2H)，4.23(m，2H)，2.38(m，1H)，0.96(m，6H)。
實施例70(2，4-二氯苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮(5f-9)的制備在這一實施例中，描述了如圖31所示其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氯苯基的化合物5f-9的合成。
步驟A-C如實施例27步驟A-C所述制備(2，4-二氯苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲醇(化合物4f-9)，除了使用2，4-二氯苯甲醛代替2，4-二氟苯甲醛。
步驟D室溫下將化合物4f-9、“Dess Martin Periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；20mg，0.046mmol)和1mL CH2Cl2的混合物攪拌2小時。將混合物裝填到Biotage系統(tǒng)上，并用1∶2乙醚/己烷洗脫，得到12.9mg化合物5f-9(收率85％)。測得MS ESI(+)m/z 347和349(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.09(s，1H)，8.06(s，1H)，7.53(m，1H)，7.47(m，1H)，7.41～7.34(m，2H)，4.21(m，2H)，2.36(m，1H)，0.95(m，6H)。
實施例71(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-O-甲苯基-甲酮(5f-10)的制備在這一實施例中，描述了如圖31所示其中R1是異丁基且Ar是2-甲基苯基的化合物5f-10的合成。
步驟A-C如實施例27步驟A-C所述制備(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-O-甲苯基甲醇(化合物4f-10)，除了使用O-甲苯甲醛代替2，4-二氟苯甲醛。
步驟D室溫下將化合物4f-10(21mg，0.070mmol)、“DessMartin Periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；31mg，0.0735mmol)和1mLCH2Cl2攪拌2小時。將混合物裝填到Biotage系統(tǒng)上，并用1∶2乙醚/己烷洗脫，得到18.7mg化合物5f-10(收率91.4％)。測得MS ESI(+)m/z 293(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.07(s，1H)，8.06(s，1H)，8.04(m，1H)，7.46(m，1H)，7.41(m，1H)，7.35～7.30(m，2H)，7.30～7.25(m，1H)，4.21(m，2H)，2.36(m，1H)，2.33(s，3H)，0.95(m，6H)。
實施例72(2-氯-4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮(5f-8)的制備在這一實施例中，描述了如圖31所示其中R1是異丁基且Ar是2-氯-4-氟苯基的化合物5f-8的合成。
步驟A-C如實施例27步驟A-C所述制備(2-氯-4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲醇(化合物4f-8)，除了使用2-氯-4-氟苯甲醛代替2，4-二氟苯甲醛。
步驟D室溫下將(2-氯-4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲醇(化合物4f-8；16.2mg，0.0487mmol)、“Dess Martin Periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；21.7mg，0.0511mmol)和1mL CH2Cl2攪拌2小時。將反應(yīng)物裝填到Biotage系統(tǒng)上，并用1∶2乙醚/己烷洗脫，得到13.0mg化合物5f-8，為油狀物(收率80.7％)。MS(ESI+)m/z。
實施例73(4-氯-2-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-甲酮(5f-7)的制備在這一實施例中，描述了如圖31所示其中R1是異丁基且Ar是4-氯-2-氟苯基的化合物5f-7的合成。
步驟A-C如實施例27步驟A-C所述制備(4-氯-2-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲醇(化合物4f-7)，除了使用4-氯-2-氟苯甲醛代替2，4-二氟苯甲醛。
步驟D室溫下將(4-氯-2-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)甲醇(化合物4f-7；20.4mg，0.0613mmol)、“Dess Martin Periodinane”(三乙酰氧基過碘烷；27.3mg，0.0644mmol)和1mL CH2Cl2攪拌2小時。將反應(yīng)物裝填到Biotage系統(tǒng)上。用1∶2乙醚/己烷洗脫，得到12.0mg化合物5f-7，為固體(收率59.2％)。MS ESI(+)m/z。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.11(s，1H)，7.99(m，1H)，7.53(m，1H)，7.47(m，1H)，7.30(m，1H)，7.24(m，1H)，4.21(m，1H)，2.37(m，1H)，0.95(m，6H)。
實施例74(2，4-二氟苯基)-[1-(2，2，2-三氟-乙基)-1H-吲唑-5-基]-甲酮(5f-11)的制備步驟A將5-溴吲唑(化合物2f；9.852g，50.0mmol)溶于150mL乙醚中，并將溶液冷卻至-78℃。在-78℃下緩慢加入t-BuLi(1.70M，在戊烷中，88.2mL，150mmol)。-78℃下0.5小時后，用2，4-二氟苯甲醛(10.9mL，100.0mmol)終止反應(yīng)物反應(yīng)，并緩慢暖至室溫。在氮氣氛和室溫下攪拌混合物72小時，并用100mL水終止反應(yīng)。分層，并用CH2Cl2(6×50mL)萃取水層。用飽和NaCl溶液(100mL)洗滌合并的有機萃取液，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到黃色固體。將反應(yīng)物使用于CH2Cl2中的5％ MeOH洗脫通過色譜法進行純化。在處理用于色譜的樣品時，發(fā)現(xiàn)所需的部分在CH2Cl2中難溶。將混合部分合并，并減壓下濃縮。用CH2Cl2(大約50mL)處理得到的油狀物，并形成固體。通過過濾收集該固體。閃蒸(flashed)產(chǎn)物和過濾產(chǎn)物的1H NMR相同。由于樣品在CHCl3中難溶，因此向1H NMR樣品中加入幾滴DMSO-d6，得到6.034g 8f-1，為淺黃色固體(收率46.4％)。測得MS(ESI+)m/z 261(M+H)。
步驟B室溫下將化合物8f-1(4.954g，19.04mmol)懸浮于150mLCH2Cl2中，并將Dess Martin Periodinane(9.156g，1.10當(dāng)量)分批加入。室溫下3小時后，將混合物減壓下濃縮，裝填到Samplet中，并用于CH2Cl2中的2％ MeOH洗脫，得到固體。將該固體懸浮于300mLCH2Cl2和100mL飽和K2CO3中，并劇烈攪拌2小時。將混合物過濾，并將濾液用CH2Cl2(3×100mL)萃取。將飽和NaCl溶液加入水層中，并用CH2Cl2(3×100mL)萃取該層。將合并的萃取液通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到9f-1，為淺棕色固體(3.407g，收率69.3％)。測得MS(ESI+)m/z 259(M+H)。
步驟C將化合物9f-1(0.258g，1.0mmol)、K2CO3(0.207，1.5mmol)和DMF(5mL)放于小的Schlenk型可再封(resealable)試管中。將空氣從試管中排出，并將試管在干冰浴(不含丙酮)中預(yù)冷。將注射器和三氟乙基溴(0.244g，1.5mmol)在干冰浴中預(yù)冷。當(dāng)整個體系變冷時打開試管并將三氟乙基溴注入。將試管密封，并加熱至100℃。18小時后，減壓下除去過量的DMF。用水(20mL)和CH2Cl2(20mL)處理殘余物。分層，并用CH2Cl2(4×10mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到64.7mg(收率19％)化合物5f-11。測得MS(ESI+)m/z 341(M+H)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.20(s，2H)，8.05(d，2H)，7.62(q，1H)，7.52(d，1H)，7.04(t，1H)，6.95(t，1H)，5.00(q，2H)。
實施例75(1-烯丙基-1H-吲唑-5-基)-(2，4-二氟苯基)-甲酮(5f-12)的制備步驟A如實施例74所述制備化合物9f-1。
步驟B將化合物9f-1(0.516g，1.0mmol)、K2CO3(0.415g，1.5mmol)、DMF(10mL)和烯丙基溴(0.363g，1.5mmol)放入Schlenk型試管中。將試管密封，并加熱至100℃。19小時后，傾出上清液，用DMF(5mL×3)洗滌鹽。將合并的上清液減壓下濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2(20mL)中，并用水洗滌。用CH2Cl2(10mL×2)萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化殘余物，得到142.1mg(收率23.8％)化合物5f-12。測得MS(ESI+)m/z 299(M+H)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，8.12(s，1H)，7.98(d，1H)，7.60(m，1H)，7.48(d，1H)，7.04(td，1H)，6.95(td，1H)，6.05(m，1H)，5.28(d，1H)，5.17(d，1H)，5.06(dt，2H)。
實施例76-79描述了通式XI的苯胺化合物的合成。圖32顯示合成具有通式結(jié)構(gòu)1j的化合物的合成反應(yīng)路線。
實施例76(2，4-二氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-胺(2h-1)的制備在這一實施例中，描述了如圖所示32其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氟苯基的化合物2h-1的合成。
步驟A將四氟硼酸銨(20.97g，200mmol)溶于乙酸水溶液(500mL AcOH/250mL水)中，并冷卻至0℃。依次將2-甲基-4-溴苯胺(18.61g，100mmol)和42mL濃HCl水溶液(36％ w/w，12N，500mmol)加入。0℃C下攪拌混合物20分鐘，并加入NaNO2(7.59g，110mmol)。0℃下攪拌反應(yīng)物1小時，并暖至室溫。室溫下16小時后，將混合物減壓下濃縮，使殘余物和甲苯共沸，并高真空下干燥。將該固體懸浮于500mL CHCl3中，并將KOAc(12.76g，130mmol)和18-冠-6(7.93g，30mmol)加入。室溫下將反應(yīng)物攪拌1.5小時。用水洗滌混合物，通過無水MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到30g 5-溴-1H-吲唑(化合物2f)，為褐色固體。粗品沒有進一步純化而使用。
步驟B將粗制5-溴-1H-吲唑(化合物2f；100mmol)溶于250mLDMF中。將K2CO3(20.7g，150mmol)和1-溴-甲基丙烷(16.3mL，150mmol)加入。在氮氣氛下將混合物加熱至120℃，持續(xù)16小時。將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將水(200mL)和CH2Cl2(200mL)加入殘余物中，并劇烈攪拌30分鐘。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到約30g粗品。通過色譜法(1∶9至1∶4乙醚/己烷)純化粗品，得到12.870g化合物3f，為暗紅色油狀物，步驟A和B的收率為50.8％。測得MS ESI(+)m/z 253和255(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.87(m，1H)，7.43(m，1H)，7.29(m，1H)，7.29(m，1H)，4.15(m，2H)，2.33(m，1H)，0.91(m，6H)。
步驟C將化合物3f(2.53g，10.0mmol)溶于50mL乙醚中，并將溶液冷卻至-78℃。將12.4mL t-BuLi(1.7M，21.0mmol)逐滴加入，并在-78℃下攪拌混合物另外30分鐘。用B(OMe)3(2.4mL，21.0mmol)終止反應(yīng)物反應(yīng)，并緩慢暖至室溫。15分鐘后，用6N HCl(10mL，60mmol)終止反應(yīng)物反應(yīng)。將反應(yīng)物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，并加入水(100mL)和CH2Cl2(100mL)。分層，并用CH2Cl2萃取水層。通過無水MgSO4干燥合并的萃取液，通過硅藻土過濾，減壓下濃縮，并使用2∶1乙醚/己烷至于CH2Cl2中的5％ MeOH通過色譜法純化，得到化合物1h，為淺黃色固體(1.41g，收率64.7％)。測得MS ESI(+)m/z219(M+1)。
步驟D將化合物1h(109mg，0.50mmol)、乙酸銅(II)(50.3mg，0.10mmol)、肉豆蔻酸(46mg，0.20mmol)和2mL干燥甲苯放于燒瓶中。加入2，6-二甲基吡啶(58μL，0.50mmol)，并將混合物攪拌幾分鐘。將2，4-二氟苯胺(0.75mmol，76μL)加入，并在空氣氛下劇烈攪拌混合物90小時。用10mL乙醚稀釋混合物，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到粘稠的暗綠色油狀物。用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到59mg化合物2h-1，為褐色油狀物(收率39％)。測得MS ESI(+)m/z 302(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(s，1H)，7.39(m，1H)，7.36(m，1H)，7.16(m，1H)，7.07(m，1H)，6.89(m，1H)，6.75(m，1H)，5.59(br s，1H，NH)，4.16(m，2H)，2.35(m，1H)，0.95(m，6H)。
實施例77(4-氟苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-胺(2h-2)的制備在這一實施例中，描述了如圖32所示其中R1是異丁基且Ar是4-氟苯基的化合物2h-2的合成。
步驟A-C如實施例1步驟A-C所述制備化合物1h。
步驟D將化合物1h(109mg，0.50mmol)、乙酸銅(II)(25.2mg，0.05mmol)、肉豆蔻酸(23mg，0.10mmol)和2mL干燥甲苯放于燒瓶中。將2，6-二甲基吡啶(58μL，0.50mmol，1.0當(dāng)量)加入混合物中，并攪拌幾分鐘。加入4-氟苯胺(71μL，0.75mmol，1.5當(dāng)量)，并將混合物在空氣(對于銅催化劑的空氣氧化條件)下劇烈攪拌21小時。用10mL乙醚稀釋混合物，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到非常粘稠的暗綠色油狀物。用1∶1乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到41mg(收率28.9％)化合物2h-2，為褐色油狀物。測得MS(ESI+)m/z284(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.87(s，1H)，7.34(s，1H)，7.33(m，1H)，7.13(m，1H)，6.89～6.91(m，4H)，4.15(m，2H)，2.35(m，1H)，0.94(6H)。
實施例78(2，4-二氯苯基)-(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-胺(2h-9)的制備在這一實施例中，描述了如圖32所示其中R1是異丁基且Ar是2，4-二氯苯基的化合物2h-9的合成。
步驟A-C如實施例1步驟A-C所述制備化合物1h。
步驟D將化合物1h(109mg，0.50mmol)、乙酸銅(II)(50.3mg，0.10mmol)、肉豆蔻酸(46mg，0.20mmol)和2mL干燥甲苯放于燒瓶中。將2，6-二甲基吡啶(58μL，0.50mmol，1.0當(dāng)量)加入混合物中，并攪拌幾分鐘。加入2，4-二氯苯胺(122mg，0.75mmol，1.5當(dāng)量)，并將混合物在空氣(對于銅催化劑的空氣氧化條件)下劇烈攪拌90小時。用10mL乙醚稀釋混合物，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到非常粘稠的暗綠色油狀物。用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到59mg化合物2h-9，為褐色油狀物(收率35％)。測得MS(ESI+)m/z334和336(M+1)。
實施例79(1-異丁基-1H-吲唑-5-基)-O-甲苯基-胺(2g-10)的制備在這一實施例中，描述了如圖32所示其中R1是異丁基且Ar是2-甲基苯基的化合物2h-10的合成。
步驟A-C如實施例1步驟A-C所述制備化合物1h。
步驟D將化合物1h(109mg，0.50mmol)、乙酸銅(II)(50.3mg，0.10mmol)、肉豆蔻酸(46mg，0.20mmol)和2mL干燥甲苯放于燒瓶中。將2，6-二甲基吡啶(58μL，0.50mmol，1.0當(dāng)量)加入混合物中，并攪拌幾分鐘。加入80μL O-甲苯胺(0.75mmol，1.5當(dāng)量)，并將混合物在空氣(對于銅催化劑的空氣氧化條件)下劇烈攪拌90小時。用10mL乙醚稀釋混合物，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到非常粘稠的暗綠色油狀物。用1∶4乙醚/己烷通過色譜法純化粗品，得到77mg化合物2h-10，為褐色油狀物(收率55％)。測得MS(ESI+)m/z280(M+1)。
實施例80-82描述了通式XV的氨基酸化合物的合成。圖33顯示合成具有通式結(jié)構(gòu)2h的化合物的合成反應(yīng)路線。
實施例80
4-氨基-2-{[5-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}丁酸甲酯(1j-2)的制備步驟A如實施例46所述制備化合物10g-1。
步驟B在氮氣氛和室溫下用CDI(1.1當(dāng)量)處理于THF(0.5mL)中的化合物10g-1(50mg，0.15mmol)溶液。攪拌18小時后，加入2-氨基-4-叔丁氧羰基氨基丁酸甲酯(36mg，0.165mmol)，之后加入N，N-二異丙基乙胺(29mg，0.225mmol)。攪拌18小時后，將反應(yīng)物濃縮，用CH2Cl2吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，并在SepPak cartridge中用10∶1的CH2Cl2/Et2O洗脫進行純化。將所需的部分濃縮，得到72mg化合物1j-1，為米黃色泡沫狀物(收率99％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.65(br，1H)，8.10(s，1H)，7.9(s，1H)，7.28(1H，s)，4.21(d，2H)，4.42(m，1H)，3.6(s，3H)，2.95(m，2H)。
步驟C室溫下用TFA(0.1mL)處理于CH2Cl2(0.2mL)中的化合物1j-1(72mg，0.13mmol)溶液。18小時后，將溶劑濃縮并從乙醚共蒸發(fā)，得到70mg(收率98％)化合物1j-2，為琥珀色油狀物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.85(br，1H)，8.01(s，1H)，7.98(s，1H)，7.70(br，2H)，4.60(m，1H)，4.22(d，2H)，3.80(s，3H)，2.85(m，2H)。
實施例814-氨基-2-{[5-(4-氟苯氧基)-1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}丁酸甲酯(1j-4)的制備步驟A如實施例59所述制備化合物10g-2。
步驟B將化合物10g-2(0.026g，0.073mmol)、苯并三唑-1，3-二醇(0.013g，0.088mmol)和(3-二甲氨基丙基)-乙基碳二亞胺(0.017g，0.088mmol)加入二氯乙烷中，并混合10分鐘。接著，將于二氯乙烷中的2-氨基-4-叔丁氧羰基氨基丁酸甲酯鹽酸鹽(0.039g，0.147mmol)和三乙胺(0.030，0.29mmol)非均質(zhì)混合物加入。攪拌反應(yīng)混合物3小時，濃縮，并根據(jù)實施例86方法A通過反相HPLC純化，得到約30mg純化合物1j-3(收率71.9％)。測得MS(ESI+)m/z 569(M+H)。
步驟C將化合物1j-3(0.0012g，0.024mmol)加入1∶1的CH2Cl2TFA中1.5小時，然后濃縮，得到2.3mg(收率100％)化合物1j-4。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.21(br，1H)，8.40(br，1H)，8.04(br，1H)，7.44(br，1H)，7.18(s，1H)，7.03(m，3H)，5.05(m，2H)，4.80(br，1H)，3.75(s，3H)，3.36(br，1H)，2.97(br，1H)，2.51(br，1H)，1.92(br，1H)。
實施例824-氨基-2-{[5-(4-氟苯氧基)-1-甲基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}丁酸甲酯(1j-6)的制備步驟A如實施例60所述制備化合物10g-3。
步驟B將化合物10g-3(0.026g，0.090mmol)、苯并三唑-1，3-二醇(0.017g，0.11mmol)和(3-二甲氨基丙基)-乙基碳二亞胺(0.021g，0.017mmol)加入二氯乙烷中，并混合10分鐘。接著，將于二氯乙烷中的2-氨基-4-叔丁氧羰基氨基丁酸甲酯鹽酸鹽(0.05g，0.20mmol)和三乙胺(0.037，0.36mmol)非均質(zhì)混合物加入。攪拌反應(yīng)混合物3小時，然后根據(jù)實施例86方法A通過反相HPLC純化，得到30mg(收率66％)化合物1j-5，為純品。測得MS(ESI+)m/z 501(M+H)。
步驟C將化合物1j-5(0.0012g，0.024mmol)加入1∶1的CH2Cl2TFA中1.5小時，然后濃縮，得到1.2mg(收率100％)化合物1j-6。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.10(br，1H)，8.32(br，1H)，8.05(br，1H)，7.90(s，1H)，7.05(s，1H)，7.05(m，3H)，4.75(br，1H)，4.14(s，3H)，3.65(s，3H)，3.30(br，1H)，2.92(br，1H)，2.51(br，1H)，1.82(br，1H)。
實施例83-85描述了如圖34所示式XVI的化合物的合成。
實施例835-(4-氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(2-二甲氨基乙基)-胺(lk-1)的制備用6當(dāng)量的于THF中的BH3(1M溶液)處理如實施例59所述制備的化合物11g-10(0.05g，0.12mmol)，并在65℃下攪拌6小時，然后室溫下攪拌14小時。蒸發(fā)除去溶劑，并通過制備TLC使用1∶1己烷/乙酸乙脂和5％三乙胺純化殘余物，得到0.014g(收率30％)產(chǎn)物。MH+實測值385。
實施例84化合物1k-2的制備室溫下用過量的于THF中的乙酐和三乙胺處理如實施例83所述制備的化合物1k-14小時，然后濃縮，得到0.010g 1k-2。MH+實測值427。
實施例85化合物1k-3的制備室溫下用過量的于THF中的甲磺酰氯和三乙胺處理如實施例83所述制備化合物1k-14小時。將反應(yīng)混合物濃縮，并通過制備TLC使用1∶1己烷/乙酸乙脂和5％三乙胺純化殘余物，得到0.005g(收率50％)。MH+實測值463。
實施例86制備RP-HPLC條件方法A
柱YMC ODS-AQ，260×20mm i.d.，s-10/20μm，12nm。溶劑A含有0.1％ TFA的水。溶劑B含有0.05％ TFA的乙腈。由質(zhì)譜儀觸發(fā)(triggered)收集。

方法B柱YMC ODS-AQ，250×20mm i.d.，s-10/20μm，12nm。溶劑A含有0.1％ TFA的水。溶劑B含有0.05％ TFA的乙腈。由質(zhì)譜儀觸發(fā)收集。

方法C柱YMC ODS-AQ，250×20mm i.d.，s-10/20μm，12nm。溶劑A含有0.1％ TFA的水。溶劑B含有0.05％ TFA的乙腈。由質(zhì)譜儀觸發(fā)收集。


實施例87化合物1m-1的制備化合物1m-1的合成顯示在圖37中。
步驟A用于1∶1 MeOH/THF中的硼氫化鈉(10當(dāng)量，0.049g，1.3mmol)處理與對化合物1j-3所述相似的方式制備的化合物1j-7(0.07g，0.13mmol)，并加熱至60℃，持續(xù)3小時。將反應(yīng)混合物濃縮，然后與MeOH共蒸發(fā)，得到化合物11-1。
步驟B將化合物11-1放于于二噁烷中的1∶1的MeOH/4M HCl混合物中1.5小時，然后將反應(yīng)混合物濃縮。用氯仿吸收殘余物，用0.6M Na2CO3溶液(pH 7.0)和飽和NaCl水溶液洗滌，并通過MgSO4干燥。過濾后，蒸發(fā)濾液，得到化合物1m-1(99％純)，為游離堿。H-NMR(400MHz)，CDCl3；8.39(d，1H)，8.34(s，1H)，7.90(s，1H)，7.24(s，1H)，6.98(M，4H)，4.27(m，1H)，4.20(d，2H)，3.64(m，2H)，2.65(m，1H)，2.39(m，1H)，2.37(m，1H)，2.18(m，1H)，1.59(m，1H)，0.93(d，6H)。
實施例88-109描述了通式XVII的苯胺化合物的合成。
實施例881-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-吡啶-3-基甲基]-脲(6n)的制備化合物6n的合成反應(yīng)路線顯示在圖38中。
步驟A2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-煙酸腈(3n)將1-甲基-1H-吲唑-5-醇(1n)(如實施例94所述合成)(0.10g，0.68mmol)和2-氯-煙酸腈(2n)(0.11g，0.81mmol)懸浮于DMSO(2mL)中。將反應(yīng)混合物加熱至100℃，持續(xù)18小時。將反應(yīng)混合物用水稀釋，并萃取入EtoAC中。將合并的有機層用Na2SO4干燥，并減壓下濃縮，得到粗制品。通過閃蒸柱色譜法(20-100％ EtOAc/己烷)純化，得到所需產(chǎn)物(3n)(0.152g，收率90％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.27-8.25(m，1H)，8.23-8.20(m，1H)，8.01(s，1H)，7.62(d，J＝8.6Hz，1H)，7.57(d，J＝2.3Hz，1H)，7.28-7.26(m，1H)，7.23-7.20(m，1H)，4.10(s，3H)；測得MS(ESI+)m/z 251(M+H)。
步驟BC-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-吡啶-3-基]-甲胺(4n)將2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-煙酸腈(3n)(0.132g，0.528mmol)懸浮于MeOH(6mL)中。在氮氣氛下加入Pd(OH)2(0.060mg，0.427mmol)，之后加入濃HCl水溶液(0.6mL)。用氫氣凈化體系，并在氫氣氛和室溫下攪拌反應(yīng)物3小時。通過硅藻土濾墊過濾反應(yīng)混合物，并用MeOH洗滌。減壓下將有機部分濃縮得到粗制品，通過閃蒸柱色譜法(MeOH/Et3N/EtoAc)純化，得到所需產(chǎn)物(4n)(0.047g，收率35％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.96(s，1H)，7.90(d，J＝4.7Hz，1H)，7.82(d，J＝7.0Hz，1H)，7.56(d，J＝9.4Hz，1H)，7.46(d，J＝2.3Hz，1H)，7.23-7.21(m，1H)，7.09-7.06(m，1H)，4.07(s，3H)，3.95(s，2H)。
步驟C1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-吡啶-3-基甲基]-脲(6n)將C-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-吡啶-3-基]-甲胺(4n)(0.017g，0.067mmol)和(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(5n)(0.035g，0.087mmol)放于10mL反應(yīng)小瓶中，并溶于DMF(5mL)中。將DIEA(0.058mL，0.334mmol)加入反應(yīng)混合物中，并將體系加熱至80℃，持續(xù)18小時。減壓下將反應(yīng)混合物濃縮，得到粗制品。用Sep-pak 10g(35cc)硅膠柱(50％ EtOAc/己烷)通過閃蒸柱色譜法純化粗品，得到所需產(chǎn)物(6n)(0.034g，收率100％)。1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.32(s，1H)，8.00(s，1H)，7.94(d，J＝4.7Hz，1H)，7.65(d，J＝8.6Hz，1H)，7.60(d，J＝7.8Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.36(d，J＝7.8Hz，2H)，7.29(d，J＝7.8Hz，2H)，7.19-7.16(m，1H)，7.07-7.03(m，2H)，6.26(s，1H)，4.37(d，J＝6.3Hz，2H)，4.06(s，3H)，2.36(s，3H)，1.25(s，9H)；測得MS(ESI+)m/z 510(M+H)。
實施例892-(4-{2-[2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-氧基)-5-氟苯基]-乙?；鶀-哌嗪-1-基)-N-異丙基乙酰胺(13p)的制備化合物13p的合成反應(yīng)路線顯示在圖39中。
步驟A1-烯丙氧基-4-氟苯(3p)向于丙酮(250mL)中的4-氟苯酚(1p)(30g，268.0mmol)溶液中加入無水K2CO3(65g，468.3mmol)，之后加入3-溴-丙烯(2p)(28mL，321.1mmol)。將得到的混合物回流16小時，冷卻至室溫，然后傾倒入冰水(500mL)上。用乙醚(3×250mL)萃取水層，并用2M NaOH(2×150mL)洗滌合并的有機層，通過無水K2CO3和Na2SO4的混合物干燥。真空下除去溶劑，得到所需的產(chǎn)物(3p)(40.4g，99％)，為淺黃色油狀物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.01-6.92(m，2H)，6.89-6.82(m，2H)，6.10-6.82(m，1H)，5.44-5.41(m，1H)，5.39-5.37(m，1H)，4.51-4.448(m，2H)。
步驟B2-烯丙基-4-氟苯酚(4p)將中間體(3p)(14.7g，96.6mmol)加熱至210℃，持續(xù)7小時，冷卻至室溫，并放置過夜。通過薄層色譜法檢查反應(yīng)物。在TLC上觀察到一個新斑點(Rf～0.65，在7∶3的己烷/乙酸乙酯中)。粗制混合物的HPLC顯示在保留時間為2.07分鐘處有一主峰，在保留時間為2.36分鐘處有一次峰。證實主產(chǎn)物，粗品(4p)為所需的產(chǎn)物，沒有進行純化而直接用于下一步驟。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.88-6.78(m，2H)，6.78-6.72(m，1H)，6.05-5.93(m，1H)，5.21-5.13(m，2H)，4.8(br s，OH)，3.38(d，J＝6.26Hz，2H)。
步驟C2-烯丙基-4-氟苯基乙酸酯(5p)向粗品(4p)中加入乙酸酐(36.5mL，386.4mmol)和吡啶(37.5mL，463.7mmol)。室溫下將得到的混合物攪拌18小時，第二天通過HPLC檢查(顯示反應(yīng)基本上完全)。然后將混合物傾倒入冷H2O/Et2O上，用Et2O(2×)萃取水層，依次用10％ HCl(3×)、飽和NaHCO3(2×)、H2O(2×)和鹽水洗滌組合的有機層，然后通過無水Na2SO4干燥。濃縮后，通過薄層色譜法(己烷/乙酸乙脂，7∶3)和HPLC檢查粗制品的純度。沒有觀察到質(zhì)量離子(mass ion)。將粗制品(5p)沒有進一步純化而直接用于下一步驟。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.04-6.91(m，3H)，6.09-5.65(m，1H)，5.19-5.06(m，2H)，3.27(d，J＝6.26Hz，2H)，2.30(s，CH3)。
步驟D(2-乙酰氧基-5-氟苯基)-乙酸(6p-2)向于100mL CCl4/乙腈(1∶1)中的(5p)(10g，51.5mmol)溶液中加入于500mL水中的偏高碘酸鈉(NaIO4，33.6g，154.5mmol)溶液。攪拌幾分鐘后，加入三氯化釕水合物(0.93g，4.12mmol)。室溫下攪拌暗色混合物2小時，并加入DCM(600mL)。分層，并用DCM(3×)萃取水層，用H2O洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。通過硅藻土545過濾，并蒸發(fā)，得到醛(6p-1)和酸(6p-2)的混合物(9.1g，83％)，為棕色油狀物，沒有進行純化而直接用于下一步驟。
步驟E(2-乙酰氧基-5-氟-苯基)-乙酸(7p)0℃下將于225mL水中的亞氯酸鈉(52.16g，576.7mmol)和磷酸二氫鈉(44.5g，371mmol)溶液加入于100mL i-PrOH中的酸(6p-2)和醛(6p-1)溶液中。將得到的溶液在0℃下攪拌3小時，用乙醚稀釋，然后分層。用H2O、10％硫代硫酸鈉(2×)、H2O和鹽水洗滌有機層，并通過Na2SO4干燥。蒸發(fā)至少量體積后，加入幾滴己烷。晶體逐漸形成，通過過濾收集，并用冷乙醚/己烷洗滌，得到所需的產(chǎn)物(7p)(3.95g，單獨的收率36％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.12-6.98(m，3H)，3.57(s，2H)，2.29(s，CH3)；測得MS(APCl-)m/z 422.7(2M-H)。
步驟F(5-氟-2-羥基苯基)-乙酸(8p)將化合物(7p)(3.5g，16.5mmol)溶于65mL MeOH中，并加入7mL氫氧化銨(49.5mmol)。室溫下攪拌混合物過夜，然后通過TLC(DCM/MeOH/AcOH(9∶1∶0.15)、HPLC和MS檢查。沒有觀察到原料。將物料濃縮至干，得到所需的產(chǎn)物(8p)，其直接用于下一步驟。測得MS(APCl-)m/z 168.9(M-H)，338.7(2M-H)。
步驟G[2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-氧基)-5-氟苯基]-乙酸(10p)將碳酸銫(24.2g，74.24mmol)加入于6mL NMP中的(8p)(2.8g，16.5mmol)溶液中，并將反應(yīng)混合物固化。加入另外12mL NMP和碳酸銫(6.29g，19.3mmol)，并用氮氣凈化反應(yīng)混合物。劇烈攪拌后，加入化合物(9p)(5.25g，19.8mmol)和2，2，6，6-四甲基庚烷-3，5-二酮(90.86mL，4.12mmol)。將反應(yīng)混合物脫氣，并用氮氣凈化。加入氯化銅(I)(0.82g，8.24mmol)，將反應(yīng)混合物脫氣，用氮氣凈化，并加熱至140℃。攪拌18小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫(約23℃)，用Et2O稀釋，并過濾。用乙醚將收集的固體洗滌幾次，溶于H2O中，用6N HCl酸化，并用DCM(4×)萃取。用H2O和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。濃縮后，用己烷/EtOAc/AcOH(9∶1∶0.15)通過正相色譜法純化殘余物，得到所需的產(chǎn)物(10p)(1.01g，單獨的收率17％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.84(s，1H)，7.36(d，J＝8.62Hz，1H)，7.14(d，J＝2.35Hz，1H)，7.11(dd，J＝8.61，2.35Hz，1H)，7.05(dd，J＝8.61，3.13Hz，1H)，6.92(ddd，J＝8.61，8.61，3.13Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.61，4.70Hz，1H)，4.35(d，J＝7.04Hz，2H)，3.73(s，2H)，2.93-2.82(m，1H)，2.06-1.97(m，2H)，1.94-1.76(m，4H)；測得MS(ESI+)m/z 355(M+H)。
步驟H2-(4-{2-[2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-氧基)-5-氟苯基]-乙?；鶀-哌嗪-1-基)-N-異丙基乙酰胺(12p)將化合物(10p)(0.087g，0.247mmol)溶于CHCl3(1.6mL)中，與EDCl(0.072g，0.372mmol)混合，并室溫下攪拌30分鐘。加入N-異丙基-2-哌嗪-1-基-乙酰胺(12p)(0.069g，0.372mmol)，之后加入另外0.8mL CHCl3。室溫下攪拌得到的溶液18小時。加入PS-異氰酸酯(0.850g，1.6mmol/g)，并將反應(yīng)混合物振搖1小時。過濾后，用H2O(2×)洗滌濾液，通過Na2SO4干燥，并濃縮。通過色譜法(Sep-Pak，10g)(DCM，EtOAc)純化殘余物，得到所需的產(chǎn)物(12p)(0.1g，77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.87(s，1H)，7.40(d，J＝8.61Hz，1H)，7.13-7.06(m，3H)，6.91(ddd，J＝8.61，8.61，3.13Hz，1H)，6.83-6.72(m，2H)，4.38(d，J＝7.04Hz，2H)，4.15-4.02(m，1H)，3.74(s，2H)，3.67-3.60(m，2H)，3.55-3.49(m，2H)，2.99-2.87(m，1H)，2.91(s，2H)，2.44-2.33(m，4H)，2.10-2.00(m，2H)，1.97-1.79(m，4H)，1.16(s，CH3)，1.15(s，CH3)；測得MS(APCI+)m/z 522.2(M+H)。
實施例902-[2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-苯基]-N-(4-嗎啉-4-基-苯基)-乙酰胺(16p)的制備化合物16p的合成反應(yīng)路線顯示在圖40中。
步驟A5-溴-1-異丁基-1H-吲唑(14p)將K2CO3加入于DMF中的5-溴吲唑和溶液中。將混合物加熱至105℃。5-溴吲唑消失后，將反應(yīng)混合物傾倒入DCM/鹽水上。將兩層分離，用DCM(2×)萃取水層，并通過TCL檢查。用H2O(2×)和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。過濾后，將濾液濃縮，并用9.5∶0.5己烷/EtOAc通過色譜法純化所得的殘余物，得到所需的產(chǎn)物(14p)。
步驟B[2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-苯基]-乙酸(15p)向脫氣的于NMP(13mL)中的2-羥基苯甲酸(2.4g，15.8mmol)和Cs2CO3(7.72g，23.7mmol)懸浮液中加入2，2，6，6-四甲基-庚烷-3，5-二酮(0.41mL，1.97mmol)和化合物14p(2.0g，7.90mmol)，之后用少量NMP漂洗。再用氮氣將得到的混合物脫氣，然后加入CuCl(0.39g，3.95mmol)，并將反應(yīng)物再次脫氣。將混合物加熱至140-150℃?；旌?2小時后，將反應(yīng)混合物傾倒入乙醚/H2O中。將兩層分離，并用乙醚洗滌水層(pH～11)。將水層酸化至pH7，并用乙醚(4×)萃取，并將合并的有機層通過無水Na2SO4干燥。減壓下除去溶劑。在少量體積的乙醚/己烷/DCM混合溶劑中逐漸形成沉淀物，并通過過濾收集，得到所需的化合物(15p)(0.93g，單獨的收率36％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.87(br s，1H)，7.38-7.28(m，2H)，7.25-7.17(m，2H)，7.13(d，J＝9.39Hz，1H)，7.10-7.03(m，H)，6.79(d，J＝8.61Hz，1H)，4.15(br s，2H)，3.79(s，2H)，2.40-2.27(m，1H)，0.93(s，3H)，0.92(s，3H)；測得MS(APCI+)m/z 325(M+H)、MS(APCI-)m/z 322.8(M-H)和646.8(2M-H)。
步驟C2-[2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-苯基]-N-(4-嗎啉-4-基-苯基)-乙酰胺(16p)向于CHCl3(2mL)中的(15p)(0.04g，0.123mmol)、PyBOP(0.135g，0.26mmol)和DIEA(0.02mL，0.12mmol)溶液中加入4-嗎啉-4-基-苯胺(0.044g，0.247mmol)。室溫下將混合物攪拌16小時，用AP-三羥甲基氨基甲烷(AP-trisamine)樹脂(0.25g，2.49mmol/g)處理，最后從樹脂過濾后在減壓下除去溶劑。用乙醚通過色譜法(Sep-Pak，10g)純化所得的殘余物，得到所需的產(chǎn)物(16p)(0.024g，40％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(s，1H)，7.50(br s，1H)，7.45(dd，J＝7.83，1.57Hz，1H)，7.39(d，J＝9.39Hz，2H)，7.31-7.26(m，3H)，7.23(dd，J＝7.83，1.57Hz，1H)，7.15-7.09(m，2H)，6.86-6.79(m，3H)，4.17(d；J＝7.04Hz，2H)，3.86-3.82(m，4H)，3.80(s，2H)，3.11-3.06(m，4H)，2.41-2.29(m，1H)，0.95(s，CH3)，0.94(s，CH3)；測得MS(APCI+)m/z 485.2(M+H)。
實施例911-[5-環(huán)丙基-2-(4-三氟甲基苯基)-2H-吡唑-3-基]-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-芐基]-脲(9q-1)和1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-氟芐基]-脲(9q-2)的制備化合物9q-1和9q-2的合成反應(yīng)路線顯示在圖41A和B中。
步驟A2-疊氮基-5-氟芐腈(1q)將在DMA(60mL)中的NaN3(1.17g，1.8mmol)和二氟芐腈(0.5g，3.6mmol)混合物在100℃下加熱30分鐘。接著，用水(300mL)和乙醚(300mL)稀釋混合物。用水和鹽水洗滌有機層三次。將有機層干燥(MgSO4)并濃縮。使用乙醚∶己烷(1∶5)做洗脫液通過閃蒸柱色譜法純化粗制品，得到所需的產(chǎn)物(1q)，為白色晶體(0.3g，單獨的收率53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-7.31(m，2H)，7.27-7.18(m，1H)。
步驟B2-氨基-5-氟芐腈(2q)室溫下向于乙醇(3mL)中的CoBr2(15mg，0.068mmol)溶液中加入2，2′-聯(lián)吡啶(10mg，0.068mmol)，之后加入NaBH4(40mg，1.02mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至-10℃，然后在10分鐘內(nèi)將于乙醇(1mL)中的中間體(2q)(0.22g，1.36mmol)逐滴加入。將反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后用-10℃的乙酸和甲醇終止混合物反應(yīng)。然后將殘余物溶于乙酸乙酯中，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓下除去溶劑。使用乙醚∶己烷(1∶2)作為洗脫液通過閃蒸柱色譜法純化粗制品，得到化合物(2q)，為白色晶體(0.16g，單獨的收率87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.12-7.08(m，2H)，6.7(dd，J＝10.4，4.8Hz，1H)，4.3(br s，2H)。
步驟C(2-氰基-4-氟苯基)-二(氨基甲酸叔丁酯)(3q)室溫下向于THF(3mL)中的(2q)(33mg，0.24mmol)溶液中加入Boc2O(200mg，0.72mmol)和DMAP(5.9mg，0.048mmol)。將反應(yīng)混合物回流2.5小時，然后冷卻至室溫，并減壓下蒸發(fā)溶劑。使用乙醚∶己烷(1∶3)作為洗脫液通過閃蒸柱色譜法純化粗制品，得到產(chǎn)物(3q)，為白色晶體(0.08g，單獨的收率98％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.4-7.26(m，3H)，1.45(s，18H)。
步驟D(2-氨甲基-4-氟苯基)-二(氨基甲酸叔丁酯)(4q)室溫下向于乙醇(30mL)中的(3q)(1g，2.97mmol)溶液中加入CoBr2(27mg，0.12mmol)和2，2′-聯(lián)吡啶(57mg，0.36mmol)，之后加入NaBH4(350mg，9.2mmol)。室溫下將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，并用0℃的乙酸和甲醇終止反應(yīng)。然后將殘余物溶于乙酸乙酯中，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓下除去溶劑。粗制品(4q)直接用于下一步驟(1g，單獨的粗制品收率100％)。
步驟E2-氨甲基-4-氟苯胺鹽酸鹽(5q)將粗制中間體(4q)(0.95g，2.8mmol)溶于MeOH/DCM(15mL)中。接著，加入于二噁烷中的4NHCl(10.5mL，42.0mmol)，并室溫下攪拌1小時。減壓下除去溶劑，將殘余物(5q)沒有進一步純化或表征而用于下一步驟。
步驟F(2-氨基-5-氟芐基)-氨基甲酸叔丁酯(6q)將于二噁烷(5mL)中的Boc酐(0.49g，2.5mmol)溶液逐滴加入冰浴冷卻的于5.7mL1M NaHCO3(5.63mmol)和二噁烷(11.2mL)(1∶2)中的(5q)(2.8mmol，1當(dāng)量)溶液中。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并在室溫下繼續(xù)攪拌18小時。第二天，用Et2O稀釋混合物，并用鹽水洗滌。分層。用Et2O(3×)萃取水層(鹽水)，用10％ KHSO4(3×)萃取合并的有機層，用H2O和鹽水洗滌，并通過Na2SO4干燥。濃縮后，用己烷、己烷/EtOAc(9∶1)通過色譜法(Sep-Pak)純化獲得的粗制品，得到產(chǎn)物(6q)(0.34g，單獨的收率50％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ6.85-6.75(m，2H)，6.6(dd，J＝7.8，4.7Hz，1H)，4.82(br s，NH)，4.21(d，J＝6.2Hz，2H)，4.06(br s，NH2)，1.45(s，9H)。測得LC-MS(ESI+)m/z 241(M+H)。
步驟G[5-氟-2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-芐基]-氨基甲酸叔丁酯(7q-2)向含有于DCM中的硼酸(0.175g，0.76mmol)、胺(6q)(0.22g，0.915mmol)、Cu(OAc)2(0.135g，0.76mmol)和4_篩(0.2g)的燒瓶中緩慢加入Et3N(0.52mL，3.7mmol)。室溫下攪拌混合物3天。將DCM加入反應(yīng)混合物中，并過濾。用H2O(2×)和鹽水洗滌濾液，并通過Na2SO4干燥。濃縮后，使用己烷/Et2O(3∶1)通過色譜法(Cartridge-Pak；10g)純化殘余物。將含有產(chǎn)物的部分合并，得到(7q-2)(0.12g，收率37％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.82(s，1H)，7.34(d，J＝8.6Hz，1H)，7.24(br s，1H)，7.13(d，J＝8.6Hz，1H)，6.94-6.84(m，3H)，5.02(br s，NH)，4.35(d，J＝7.8Hz，2H)，4.29(d，J＝6.2Hz，2H)，2.98-2.85(m，1H)，2.10-1.98(m，2H)，1.95-1.79(m，4H)，1.44(s，9H)；測得MS(APCI+)m/z 425(M+H)。
步驟H(2-氨甲基-4-氟-苯基)-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-基)-胺(8q-2)將中間體(7q-2)(0.076g，0.18mmol)溶于DCM/i-PrOH(5mL，1∶1)中，加入于二噁烷中的0.5mL HCl(1.97mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌3天。將溶劑蒸發(fā)得到產(chǎn)物(8q-2)，其用于下一步驟中。測得LC-MS(ESI+)m/z 308(M-NH2)。使用類似物7q-2和8q-2的方案將(7q-1)和(8q-1)用于最終步驟。
步驟I1-[5-環(huán)丙基-2-(4-三氟甲基苯基)-2H-吡唑-3-基]-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-芐基]-脲(9q-1)室溫下用氨基甲酸酯10q(0.26g，0.6mmol)處理于DMF(4.5mL)中的(8q-1)(0.15g，0.54mmol)溶液，之后用DIEA(0.35mL，2.0mmol)處理。將混合物在80℃下加熱18小時，然后減壓下蒸發(fā)溶劑。用DCM吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，并蒸發(fā)至干。然后通過HPLC純化粗制品，得到產(chǎn)物(9q-1)(0.027g，單獨的收率9％)。1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.88(s，1H)，7.59(d，J＝7.96Hz，2H)，7.54(d，J＝7.43Hz，2H)，7.57(br s，NH)，7.37(d，J＝8.49Hz，1H)，7.22-7.16(m，2H)，7.15(s，1H)，6.99-6.91(m，2H)，6.21(s，1H)，4.34(s，2H)，4.07(s，3H)，2.01-1.93(m，1H)，1.14-0.98(m，2H)，0.90-0.83(m，2H)；測得MS(APCI+)m/z 564(M+H)。
步驟J1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-氟芐基]-脲(9q-2)將化合物(8q-2)(0.18mmol)溶于DMF(2.5mL)中，加入氨基甲酸酯10q(0.08g，0.20mmol)，之后加入DIEA(0.1mL，0.57mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至80℃，持續(xù)18小時。減壓下蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，并減壓下蒸發(fā)至油狀物。然后通過HPLC純化粗制品，得到產(chǎn)物(9q-2)(0.045g，單獨的收率44％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.7(br s，NH)，7.32(d，J＝9.39Hz，1H)，7.18-7.06(m，7H)，6.94-6.85(m，2H)，6.50(s，1H)，4.37-4.30(m，6H)，2.96-2.81(m，1H)，2.27(s，3H)，2.09-1.96(m，2H)，1.94-1.76(m，4H)，1.34(s，9H)；測得MS(APCI+)m/z 580(M+H)。
實施例921-(5-叔丁基-2-對氯苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基硫烷基)-5-氟芐基]-脲(6r-2)的制備化合物6r-2的合成反應(yīng)路線顯示在圖42中。
步驟A5-溴-1H-吲唑(1r)將4-溴-2-甲基苯胺(20g，107mmol)、四氟硼酸銨(23g，215mmol)和濃HCl(45mL，537mmol)加入AcOH/H2O(350mL，2∶1)中，并超聲處理。接著，緩慢加入NaNO2(8.9g，129mmol)，并將反應(yīng)混合物超聲另外10分鐘(反應(yīng)物變?yōu)樽厣⒘⒓葱纬沙恋砦?。將反應(yīng)物攪拌過夜。第二天沒有觀察到原料。在65℃和高速真空下濃縮混合物，然后與甲苯共沸至干。該物料沒有進一步純化而直接用于下一步。將上述粗品、乙酸鉀(42g，428mmol)和18-冠-6(2.8g，11mmol)加入氯仿中，并超聲10分鐘。室溫下將反應(yīng)物攪拌過夜。將該物料通過具有硅膠/硅藻土/沙的過濾漏斗，反復(fù)用CHCl3洗滌(不收集物料)。接著，用EtOAc沖柱，得到橙色物料，收集、集中并蒸發(fā)，得到約16g物料。然后用硅膠使用DCM∶MeOH(5％)作為洗脫液對粗制品進行閃蒸色譜，并高真空干燥過夜，得到所需產(chǎn)物(1r)(8g，收率50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.9(brs，1H)，8.05(s，1H)，7.9(s，1H)，7.46(d，J＝8.8Hz，1H)，7.39(d，J＝8.8Hz，1H)；MS(ESI)m/z 197.1(M+H)+。
步驟B5-溴-1-甲基-1H-吲唑(2r)在氮氣下將于THF中的5-溴-1H-吲唑(1r)(10g，51mmol)緩慢加入冷卻的于THF中的NaH(2.2g，60wt％的油溶液，56mmol)溶液中。15分鐘后，將碘代甲烷(10.8g，76mmol)加入0℃的深色溶液中。2小時后，將混合物傾倒入1N HCl(30mL)中，用EtOAc(2×50mL)萃取，用鹽水(50mL)洗滌合并的萃取液，Na2SO4干燥，過濾，并濃縮。柱色譜法(硅膠)己烷∶EtOAc(10-40％)，得到8.2g最終產(chǎn)物(2r)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.9(s，1H)，7.84(s，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，1H)，7.24(d，J＝8.8Hz，1H)，4.04(s，3H)；MS(ESI)m/z 213(M+H)+。
步驟C5-(三異丙基甲硅烷基硫烷基)-1-甲基-1H-吲唑(3r)在5℃下將KH(1.3g，30wt％，9.8mmol)用THF洗滌，然后懸浮于THF(10mL)中。在15分鐘內(nèi)加入三異丙基甲硅烷基硫醇(1.8g，9.3mmol)，伴有氫氣的劇烈放出。在5℃下將混合物攪拌1小時，然后在25℃下攪拌1小時。將該溶液加入于THF(15mL)中的1-甲基-5-溴吲唑(2r)(2g，9.5mmol)和(Ph3P)4Pd(1.1g，0.93mmol)溶液中。70℃下攪拌黃色懸浮液1小時。冷卻后，加入乙醚，用鹽水洗滌溶液，干燥(Na2SO4)，并濃縮。將殘余物進行色譜分析(硅膠，在己烷中的3％ EtOAc)，得到5-(三異丙基硫烷基)-1-甲基-1H-吲唑(3r)(1.8g，59％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(s，1H)，7.86(s，1H)，7.48(d，J＝8.8Hz，1H)，7.25(d，J＝8.4Hz，1H)，4.05(s，3H)，1.28-1.19(m，3H)，1.08(d，J＝7.6Hz，18H)。
步驟D2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基硫烷基)-5-氟芐腈(4r)將化合物(3r)(0.65g，2mmol)、碳酸鉀(0.34g，2.4mmol)、CsF(0.46g，3mmol)、2，5-二氟芐腈(0.56g，4.1mmol)和DMF(5mL)放于60mL反應(yīng)小瓶中，并將小瓶密封。將混合物加熱至100℃，持續(xù)16小時。減壓下除去過量的DMF。用DCM(50mL)吸收該物料，并用水(20mL)洗滌。用DCM(3×)萃取水層。用鹽水(2×)洗滌合并的有機層，通過MgSO4干燥，通過硅藻土/硅膠填料過濾，并減壓下濃縮。用己烷/EtOAc(20％)通過硅膠色譜法純化殘余物，得到最終產(chǎn)物(4r)，為粘稠液體(0.43g，單獨的收率75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.97(s，1H)，7.46(dd，J＝16.8，8.8Hz，2H)，7.35-7.32(m，1H)，7.14-7.07(m，1H)，7.05-7.01(m，1H)，4.1(s，3H)；MS(ESI)m/z 284.2(M+H)+。
步驟E2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基硫烷基)-5-氟芐胺(5r)將于MeOH(30mL)中的化合物(4r)(0.43g，1.5mmol)溶液用氮氣凈化，并用Pd(OH)2/C催化劑(15wt％，280mg，0.3mmol)處理，之后用濃HCl(0.38mL，4.6mmol)處理。再用氮氣凈化后，將充滿氫氣的氣球置于燒瓶頂部。室溫下攪拌18小時后，LC顯示不再有原料。接著加入K2CO3(0.5g)。通過硅膠/硅藻土/沙填料過濾除去催化劑，用CHCl3/Et3N洗滌，并減壓下除去溶劑。將得到的淺黃色泡沫狀物(5r)(0.43g，單獨的收率87％)在氮氣氛下貯存。MS(ESI)m/z 287.9(M+H)+。
步驟F1-(5-環(huán)丙基-2-對氯苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基硫烷基)-5-氟芐基]-脲(6r-1)將于DMF(1mL)中的化合物(5r)(70mg，0.21mmol)溶液用相應(yīng)的氨基甲酸酯(97mg，0.24mmol)處理，之后用DIEA(70μL，0.54mmol)處理。在氮氣氛下，將混合物加熱至80℃，持續(xù)18小時。使用己烷/EtOAc(1∶1)作為洗脫液(Rf＝0.6)通過制備薄層色譜法將粗制品純化，得到最終產(chǎn)物(6r-1)(80mg，單獨的收率68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(s，1H)，7.57(s，1H)，7.34-7.26(m，5H)，7.2-7.14(m，2H)，6.97(dd，J＝9.2，2.8Hz，1H)，6.92-6.84(m，2H)，5.99(s，1H)，5.7(t，J＝6.0Hz，1H)，4.4(d，J＝5.6Hz，2H)，1.89(m，1H)，0.95-0.9(m，2H)，0.75-0.71(m，2H)；MS(ESI)m/z 547.1(M+H)+。
步驟G1-(5-叔丁基-2-對氯苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[2-(1-甲基-1H-吲唑-5-基硫烷基)-5-氟芐基]-脲(6r-2)將于DMF(1mL)中的胺(5r)(70mg，0.21mmol)溶液用相應(yīng)的氨基甲酸酯(100mg，0.24mmol)處理，之后用DIEA(70μL，0.54mmol)處理。在氮氣氛下，將混合物加熱至80℃，持續(xù)18小時。用己烷/EtOAc(1∶1)作為洗脫液(Rf＝0.6)通過制備薄層色譜法將粗制品純化，得到最終產(chǎn)物(6r-2)(80mg，單獨的收率66％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.86(s，1H)，7.58(s，1H)，7.39-7.26(m，5H)7.21-7.14(m，2H)，6.98(dd，J＝9.2，2.4Hz，1H)，6.88(d(t)，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.68(s，1H)，6.24(s，1H)，5.64(t，J＝6.0Hz，1H)，4.42(d，J＝6.4Hz，2H)，4.02(s，3H)，1.3(s，9H)；MS(ESI)m/z 563.1(M+H)+。
實施例931-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-{2-[1-(3-異丙氨基-丙基)-1H-吲唑-5-基氨基]-芐基}-脲(8s-2)的制備化合物8s-2的合成反應(yīng)路線顯示在圖43A-B中。
步驟A1-烯丙基-5-溴-1H-吲唑(1s)在100℃下將于DMF(25mL)中的5-溴吲唑(Bioorg.Med.Chem.Lett.，111153-1156(2001))(3.94g，20.0mmol)、烯丙基溴(2.6mL，30mmol)和碳酸鉀(4.15g，30.0mmol)加熱18小時。冷卻反應(yīng)物，通過硅藻土過濾，并用EtOAc洗滌固體。將溶液濃縮至近干，然后在EtOAc和水之間分配。用NaHCO3洗滌有機相，干燥(MgSO4)，濃縮，并通過柱色譜法(硅膠，7％ EtOAc/己烷)純化，得到N1異構(gòu)體(更快速洗脫)1-烯丙基-5-溴-1H-吲唑(1s)(1.7g，收率36％)。測得1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.88(d，J＝2.3Hz，1H)，7.44(dd，J＝8.6，1.6Hz，1H)，7.29(d，J＝8.6Hz，1H)，6.06-5.97(m，1H)，5.24(dd，J＝10.2，1.6Hz，1H)，5.12(d，J＝16.4Hz，1H)，5.01-5.00(m，2H)；MS(ESI+)m/z 237，239(M+H，Br模式)；HPLC(5至95％)2.98分鐘。
步驟B3-(5-溴吲唑-1-基)-丙烷-1-醇(2s)將1-烯丙基-5-溴-1H-吲唑(1s)(0.50g，2.1mmol)溶于2mL THF中，并冷卻至0℃C。然后在氮氣和攪拌下用注射器將于THF中的9-BBN(0.5M溶液，8.9mL，4.4mmol)溶液緩慢加入。在6.5小時內(nèi)將反應(yīng)物暖至室溫。然后，將于1N NaOH(14mL，14mmol)中的含水H2O2(30wt％溶液；1.4mL)溶液緩慢加入該溶液中。室溫下將反應(yīng)物攪拌過夜，形成白色沉淀物。用H2O和Et2O稀釋反應(yīng)物。分層，并用鹽水洗滌有機相。用Et2O萃取水相一次。合并有機相，干燥(MgSO4)，過濾，并真空濃縮。粗制品(2s)沒有表征而用于下一步驟。
步驟C5-溴-1-[3-(叔丁基-二苯基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑(3s)將粗制3-(5-溴吲唑-1-基)-丙烷-1-醇(2s)(2.1mmol)和咪唑(0.22g，3.2mmol)溶于10mL CH2Cl2中。將叔丁基二苯基甲硅烷基氯(0.58g，2.1mmol)加入溶液中，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌4小時。加入另外量的咪唑(0.07g，1.0mmol)和叔丁基二苯基甲硅烷基氯(0.16g，0.63mmol)，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜。用Et2O稀釋混合物，并依次用3％HCl水溶液和鹽水洗滌。用Et2O萃取水相一次。合并有機相，干燥(MgSO4)，過濾，并真空濃縮。粗制品在硅膠柱上用1∶6 Et2O/己烷純化，得到(3s)(1.0g，兩步總收率96％)，為無色油狀物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(s，1H)，7.86(s，1H)，7.61(d，J＝7.8Hz，4H)，7.44-7.42(m，3H)，7.36-7.33(m，5H)，4.53(t，J＝10.2Hz，2H)，3.63(t，J＝9.0Hz，2H)，2.16-10(m，2H)，1.08(s，9H)；HPLC(5至95％)4.72分鐘。
步驟D1-[3-(叔丁基-二苯基硅烷氧基)-丙基-1H-吲唑-5-硼酸(4s)將5-溴-1-[3-(叔丁基-二苯基硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑(3s)(200mg，0.41mmol)溶于4.0mL THF中，并冷卻至-78℃。緩慢加入于己烷中的正丁基鋰(2.5M，0.17mL)溶液。將黃色溶液攪拌30分鐘。加入硼酸三甲酯(130mg，1.2mmol)，將反應(yīng)物暖至室溫，并攪拌30分鐘。用10mL 0.3％ HCl水溶液終止反應(yīng)物反應(yīng)，并將得到的混合物攪拌30分鐘。用Et2O稀釋反應(yīng)物，并分層。用鹽水洗滌有機相。用Et2O萃取水相一次。合并有機相，干燥(MgSO4)，過濾，并真空濃縮。在硅膠柱上用3％ MeOH/CH2Cl2部分純化粗制品，得到(4s)(97mg，52％)。MS(ESI+)m/z 459(M+H)+。HPLC(5至95％)3.74分鐘。該混合物沒有進一步純化而用于下一步驟。
步驟E1-(2-氨基芐基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-脲(5s)將5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基胺(10s)(4.8g，31mmol)和羰基二咪唑(4.6g，32mmol)部分溶解在DCE(100mL)中，并加熱至70℃，持續(xù)2小時。冷卻反應(yīng)物，加入2-氨甲基-苯胺(9s)(4.2g，34mmol)，并將反應(yīng)物攪拌14小時。將反應(yīng)物濃縮除去溶劑，然后在EtOAc和0.5N HCl(60mL)之間分配。用NH4Cl和水洗滌有機相，并干燥(MgSO4)。濃縮溶液，并從EtOAc(200mL)中重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物(5s)(4.6g，收率49％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.31(s，1H)，6.98(d，J＝1.6Hz，1H)，6.96(dt，J＝7.8，1.6Hz，1H)，6.63(t，J＝6.3Hz，1H)，6.59(d，J＝7.0Hz，1H)，6.48(t，J＝6.3Hz，1H)，5.93(s，1H)，5.07(s，2H)，4.12(d，J＝6.3Hz，2H)，3.51(s，3H)，1.16(s，9H)。
步驟F1-(2-{1-[3-(叔丁基二苯基硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-5-基氨基}-芐基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-脲(6s)將硼酸4(240mg，0.52mmol)、1-(2-氨基-芐基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-脲(5s)(170mg，0.58mmol)、乙酸銅(II)(90mg，0.52mmol)和240mg的4埃分子篩懸浮于10mL CH2Cl2中。加入三乙胺(0.36mL，2.6mmol)，并將混合物在接觸空氣和室溫下攪拌過夜。加入另外3mLCH2Cl2，將混合物通過硅藻土過濾，并真空除去揮發(fā)物。在硅膠柱上用2-4％ MeOH/CH2Cl2純化粗制品，得到(6s)(170mg，收率45％)，為棕色焦油狀物。MS(ESI+)m/z 714(M+H)+；HPLC(5至95％)4.32分鐘。
步驟G1-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-{2-[1-(3-羥基-丙基)-1H-吲唑-5-基氨基]-芐基}-脲(7s)將1-(2-{1-[3-(叔丁基二苯基-硅烷氧基)-丙基]-1H-吲唑-5-基氨基}-芐基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-脲(6s)(40mg，0.056mmol)溶于0.5mL THF中，并用TBAF(1.0M溶液，在THF中，0.11mL，0.11mmol)處理。將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時。加入另外的TBAF(0.3mL，0.3mmol)，并將反應(yīng)物攪拌另外2小時。用CH2Cl2稀釋反應(yīng)物，并用H2O洗滌。用CH2Cl2萃取水相一次。合并有機相，干燥(MgSO4)，過濾，并真空濃縮。在硅膠柱上用5％ MeOH/CH2Cl2純化產(chǎn)物，得到所需化合物(7s)(8mg，通過1H NMR and HPLC測定為30％～90％純)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.36-7.31(m，2H)，7.21-7.12(m，4H)，6.85(s，1H)，6.81(t，J＝10.6Hz，1H)，5.93(s，1H)，5.41-5.38(m，1H)，4.49(t，J＝9.0Hz，2H)，4.43(d，J＝6.3Hz，2H)，3.57(t，J＝8.2Hz，3H)，3.52(s，3H)，2.13-2.07(m，2H)，1.25(s，9H)；MS(APCI)m/z476(M+H)+；HPLC(5至95％)2.79分鐘。
步驟H1-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-{2-[1-(3-二甲氨基-丙基)-1H-吲唑-5-基氨基]-芐基}-脲(8s-1)室溫下將甲磺酸酐(12mg，0.070mmol)加入乙醇(7s)(24mg，0.050mmol)和二異丙基乙胺(20mg，0.15mmol)溶液中。將溶液攪拌1小時。加入二甲胺(2.0M溶液，在THF中，0.25mL，0.50mmol)，并將反應(yīng)物攪拌過夜。加入另外的二甲胺(2.0M，在THF中，0.25mL，0.50mmol)，并將混合物攪拌另外2天。然后將混合物在CHCl3和水之間分配。用CHCl3萃取水相一次。合并有機相，干燥(MgSO4)，過濾，并真空濃縮。在硅膠柱上用含有1％ Et3N的5％ MeOH/CH2Cl2純化粗制品，得到所需產(chǎn)物(8s-1)(11mg，收率43％)，為深色泡沫狀物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.42(s，1H)，7.35-7.33(m，2H)，7.19-7.11(m，4H)，6.80-6.75(m，2H)，5.94(s，1H)，5.55(m，1H)，4.43(d，J＝6.6Hz，2H)，4.38(t，J＝10.5Hz，2H)，3.57(s，3H)，2.24(t，J＝10.5Hz，2H)，2.19(s，6H)，2.08-2.01(m，2H)，1.24(s，9H)；MS(ESI+)m/z503(M+H)+；HPLC(5至95％)2.59分鐘。
步驟I1-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-{2-[1-(3-異丙氨基丙基)-1H-吲唑-5-基氨基]-芐基}-脲(8s-2)將甲磺酸酐(18mg，0.11mmol)加入乙醇(7s)(36mg，0.076mmol)和二異丙基乙胺(29mg，0.23mmol)溶液中。將溶液攪拌1小時。加入異丙胺(0.13mL，1.50mmol)，并將反應(yīng)物室溫下攪拌60小時。真空除去揮發(fā)物。將粗制品在硅膠柱上用含有1％ Et3N的5％ MeOH/CH2Cl2純化，然后在C18硅膠柱上用CH3CN/H2O純化，得到所需產(chǎn)物(8s-2)(8mg，收率20％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.88(s，1H)，7.51(d，J＝8.6Hz，1H)，7.31-7.24(m，3H)，7.17-7.16(m，2H)，6.93-6.89(m，1H)，6.05(s，1H)，4.52(t，J＝10.2Hz，2H)，4.41(s，2H)，3.57(s，3H)，3.35-3.30(m，1H)，3.03(t，J＝11.7Hz，2H)，2.29-2.22(m，2H)，1.29(d，J＝6.3Hz，6H)，1.26(s，9H)；MS(ESI+)m/z 517(M+H)+；HPLC(5至95％)2.61分鐘。
實施例941-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-脲(7t-1)和1-(5-叔丁基-2-(4-氯-苯基)-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]脲(7t-2)的制備化合物7t-2的合成反應(yīng)路線顯示在圖44中。
步驟A5-甲氧基-1-甲基-1H-吲唑(2t)室溫下將于DMF(200mL)中的6-甲氧基吲唑(1t)(5g，33.75mmol；參見Tet Lett.，43(15)2695(2002))溶液用碳酸鉀(6.06g，43.87mmol)處理。攪拌15分鐘后，加入碘代甲烷(2.33mL，37.12mmol)。將得到的混合物在100℃下加熱18小時。LC顯示剩余很少的原料。加入另外的碘代甲烷(2.33mL)，并繼續(xù)攪拌另外18小時。LC顯示為2∶1的N1與N2烷基化異構(gòu)體的混合物。將溶劑真空蒸發(fā)，用DCM吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，真空蒸發(fā)，并在Biotage上用4∶3、3∶1己烷/Et2O洗脫進行純化。將所需合并部分(N1異構(gòu)體)真空蒸發(fā)，得到所需產(chǎn)物(2t)(2.57g；47％)，為黃色油狀物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.434.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z163(M+H)。
步驟B1-甲基-1H-吲唑-5-醇(3t)室溫下向于甲苯(30mL)中的(2t)(0.99g，6.1mmol)溶液中加入AlCl3(2.44g，18.3mmol)，形成紫色混合物。回流20分鐘后，形成橄欖色混合物?；旌衔锘亓?小時，冷卻至室溫，并倒入冰水浴中。過濾收集不溶性固體(398mg)。用DCM萃取濾液，通過1PS紙過濾，真空蒸發(fā)，并在Biotage上用(1∶9)，然后(3∶7)Et2O/DCM，最后(1∶1)DCM/Et2O洗脫進行純化。將產(chǎn)物部分真空蒸干，得到化合物(3t)，為棕色泡沫狀物(122mg)?？偤喜⑹章蕿?20mg(58％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.43-4.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z 149(M+H)。
步驟C5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(4t)將于DMF(50mL)中的(3t)(0.70g，4.74mmol)溶液冷卻至0℃，并用60重量％的氫化鈉(0.28g，7.11mmol)處理。在該溫度下攪拌20分鐘后，在0℃下加入芳基氟(0.79g，5.69mmol)。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌1小時。然后將混合物冷卻至0℃，用水(50mL)處理，用Et2O(3×150mL)萃取，將合并的有機層用水(2×20mL)和鹽水(2×20mL)洗滌，通過MgSO4干燥，并真空蒸發(fā)，得到油狀物。通過閃蒸柱色譜法(EtOAc/己烷＝2∶3，裝載在溫甲苯和DMF混合物中)純化該物料。所需部分真空蒸發(fā)，并與甲苯共沸，得到化合物(4t)1.09g(單獨的收率86％)，為白色晶體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.43-4.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z 268(M+H)。
步驟D5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-苯胺鹽酸鹽(5t)將于MeOH(20mL)中的(4t)(0.32g，1.22mmol)溶液用氮氣凈化，并用20％Pd(OH)2/C催化劑(15wt％，180mg)處理，之后用濃HCl(0.3mL，3.6mmol)處理。進一步用氮氣凈化后，將含有氫氣的氣球置于燒瓶頂部。室溫下攪拌18小時后，LC指示不再有原料存在。通過硅膠/硅藻土/沙填料過濾催化劑，并用MeOH洗滌。真空蒸發(fā)溶劑，并將殘余物從乙醚中共蒸發(fā)。將得到的淺黃色泡沫狀物(5t)在氮氣下貯存，0.34g(單獨的收率91％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.43-4.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z 272(M+H)。
步驟E1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]脲(7t-1)將于DMF(1mL)中的(5t)(70mg，0.23mmol)溶液用相應(yīng)的氨基甲酸酯(6t-1)(100mg，0.25mmol)處理，之后用DIEA(99μL，0.57mmol)處理。在氮氣凈化下將混合物加熱至80℃，持續(xù)18小時。真空蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，并真空蒸發(fā)為油狀物，將該油狀物在硅膠SepPak cartridge上用10∶1 DCM/Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到所需化合物(7t-1)，為淺黃色油狀物(80mg；單獨的收率67％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.43-4.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z 527(M+H)。
步驟F1-(5-叔丁基-2-(4-氯-苯基)-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]脲(7t-2)將于DMF(1mL)中的(5t)(74mg，0.57mmol)溶液用相應(yīng)的氨基甲酸酯(6t-2)(110mg，0.25mmol)處理，之后用DIEA(99mL，0.57mmol)處理。在氮氣凈化下將混合物在80℃下加熱18小時。真空蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，真空蒸發(fā)為油狀物，將該油狀物在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM/Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到所需化合物(7t-2)，為淺黃色油狀物(80mg；單獨的收率64％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.43-4.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z 547(M+H)。
以相似的方法合成下述化合物。
實施例95環(huán)丙烷羧酸2-(1-環(huán)丁基甲基-1H-吲唑)-5-氟芐基酰胺(9t)的制備
在室溫和氮氣凈化下將于DCM(0.5mL)中的(8t)(20mg，0.06mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)溶液用堿(13μL，0.09mmol)處理，之后用環(huán)丙烷碳酰氯(6μL，0.07mmol)處理。將混合物在室溫下攪拌18小時，然后在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(9t)，為淺黃色油狀物，10.2mg(單獨的收率42％)。測得MS(ESI+)m/z 394(M+H)。
實施例96N-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-3-三氟甲基苯甲酰胺(11t)的制備 在室溫和氮氣凈化下將于DCM(0.5mL)中的化合物(10t)(14mg，0.05mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)溶液用堿(11μL，0.06mmol)處理，之后用3-三氟甲基苯甲酰氯(12mg，0.075mmol)處理。將混合物室溫下攪拌18小時，然后在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(11t)，為黃色油狀物，16.6mg(單獨的收率53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.13(d，J＝1.6Hz，1H)，5.19-5.18(m，1H)，4.51-4.44(m，1H)，4.43-4.36(m，1H)，2.53-2.45(m，1H)，2.36-2.30(m，1H)；測得MS(ESI+)m/z 468(M+H)。
實施例97N-[2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-2-(3-三氟甲基苯基)-乙酰胺(14t)的制備 室溫下將于THF(0.5mL)中的(3-三氟甲基苯基)乙酸(12t)(10mg，0.051mmol)溶液用1，1-羰基二咪唑(CDI，9mg，0.055mmol)處理。在室溫和氮氣凈化下攪拌18小時后，在室溫下加入芐胺(13t)(17mg，0.05mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)。繼續(xù)攪拌另外18小時。真空蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收殘余物，并在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(14t)，為淺黃色油狀物(10mg；單獨的收率42％)。測得MS(ESI+)m/z482(M+H)。
實施例985-叔丁基-1-吡啶-2-基-1H-吡唑-4-羧酸5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基酰胺(16t)的制備
室溫下將于THF(0.5mL)中的5-叔丁基-1-吡啶-2-基-1H-吡唑-4-羧酸(15t)(12mg，0.05mmol)溶液用1，1-羰基二咪唑(CDI，9mg，0.05mmol)處理。在室溫和氮氣凈化下攪拌18小時后，在室溫下加入芐胺(13t)(15mg，0.05mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)。繼續(xù)攪拌另外18小時。真空蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收殘余物，并在硅膠SepPakcartridge上用于DCM中的2-10％ MeOH洗脫進行純化。所需部分真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(16t)，為黃色油狀物，5.2mg(單獨的收率23％)。測得MS(ESI+)m/z 541(M+H)。
實施例992-環(huán)丙基-N-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-乙酰胺(18t)的制備 室溫下將于DCM(0.5mL)中的化合物(13t)(15mg，0.05mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)溶液加入相應(yīng)的TFP酸(17t)(1mmol/g)中。將混合物振搖18小時。用DCM洗滌樹脂。將合并的濾液真空濃縮，并在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(18t)，為黃色油狀物(12.6mg；單獨的收率66％)。測得MS(ESI+)m/z 400(M+H)。
實施例1003-氯-N-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-苯甲酰胺(20t)制備 在室溫下將于DCM(0.5mL)中的(13t)(15mg，0.05mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)溶液加入相應(yīng)的TPF酸(19t)(1mmol/g)中?；旌衔镎駬u18小時。將樹脂用DCM洗滌。將合并的濾液真空下濃縮，在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫進行純化。將所需部分真空蒸發(fā)，得到產(chǎn)物(20t)，為黃色油狀物(14.4mg；單獨的收率66％)。測得MS(ESI+)m/z 452(M+H)。
實施例101N-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-4-三氟甲基苯磺酰胺(21t)的制備 在室溫和氮氣凈化下用4-三氟甲基苯磺酰氯(13mg，0.05mmol)處理于吡啶(0.5mL)中的化合物(13t)(15mg，0.04mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)溶液。將混合物在室溫下攪拌18小時。真空蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收殘余物，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，真空濃縮，并在硅膠SepPakcartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫進行純化。所需部分經(jīng)真空濃縮，得到產(chǎn)物(21t)，為黃色油狀物，15.6mg(單獨的收率70％)。測得MS(ESI+)m/z 522(M+H)。
實施例102N-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-甲磺酰胺(22t)的制備 在室溫和氮氣凈化下用甲磺酰氯(4μL，0.05mmol)處理于吡啶(0.5mL)中的化合物(13t)(15mg，0.043mmol；如實施例94步驟A-E所述制備)溶液。將混合物在室溫下攪拌18小時。真空蒸發(fā)溶劑，用DCM吸收，并用1N HCl洗滌。通過1PS紙過濾有機層，真空濃縮，并在硅膠SepPak cartridge上用(10∶1)DCM-Et2O洗脫。將所需部分真空濃縮，得到黃色油狀物(22t)，13.1mg(單獨的收率78％)。測得MS(ESI+)m/z 392(M+H)。
實施例1035-氟-2-(1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(26t)的制備化合物26t的合成反應(yīng)路線顯示在圖45中。
步驟A5-氟-2-羥基芐腈(23t)將2，5-二氟芐腈(14.9g，107mmol)和芐醇(11.1mL，11.6g，107mmol)溶于DMF(330mL)中，并冷卻至0℃。將氫化鈉(60％，在油中，6.40g，161mmol)加入0℃的溶液中，并將反應(yīng)混合物暖至室溫。室溫下攪拌1小時后，將反應(yīng)溶液冷卻至0℃，并將水(330mL)逐漸加入溶液中。將混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，并用500mL Et2O萃取三次。將合并的有機層用100mL水洗滌兩次，鹽水洗滌一次，然后通過MgSO4干燥。過濾后，減壓下濃縮溶液，得到粗制淺黃色固體。將粗制固體溶于MeOH(500mL)中。在氮氣氛下向溶液中加入活性碳載的10％鈀。用氫氣替換氮氣，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌(如果反應(yīng)在30分鐘內(nèi)沒有進行，濾出炭載鈀，并重新開始反應(yīng))。攪拌2小時后，濾出炭載鈀，并用MeOH洗滌。將溶液減壓下濃縮，得到淺黃色固體。通過向熱甲苯(100mL)中加入己烷(10mL)之后冷卻至0℃而重結(jié)晶固體。將得到的白色針狀物用1∶1的甲苯和己烷混合物洗滌(7.23g，收率49％)。濃縮母液，并在硅膠柱上用Et2O/己烷(2∶3-1∶1)洗脫進行純化，得到所需化合物(23t)(6.94g，收率47％)。兩步共14.2g(收率96％)。1H NMR(400Hz，d6-DMSO)δ11.09(s，1H)，7.58(dd，J＝8.4，3.2Hz，1H)，7.40(td，J＝8.6，3.2Hz，1H)，7.03(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)ppm。
步驟B5-氟-2-(3-甲基-4-硝基苯氧基)-芐腈(24t)將中間體(23t)(10.0g，72.9mmol)、4-氟-2-甲基-1-硝基苯(13.6g，87.5mmol)和碳酸鉀(11.1g，80.2mmol)溶于二甲基乙酰胺(DMA 400mL)中，然后在劇烈攪拌下將混合物加熱至100℃。攪拌16小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后將400mL水加入混合物中。用500mL Et2O萃取混合物三次。將合并的有機層用100mL水洗滌三次，并用鹽水洗滌一次。然后通過MgSO4干燥溶液，過濾，并減壓下濃縮。得到的橙色粗制固體用100mL溫的(約50℃)己烷洗滌，再用400mL己烷(非溫的)洗滌，得到淺黃色固體(16.4g)。濃縮橙色濾液，并在硅膠柱上用Et2O/己烷(1∶4-1∶3)洗脫殘余物進行純化，將其用Et2O和己烷(1∶3)(1.2g)混合物洗滌得到淡橙色固體。將兩批淺黃色固體合并，得到化合物(24t)(17.6g，收率89％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(d，J＝8.6Hz，1H)，7.43(dd，J＝7.6，3.1Hz，1H)，7.35(ddd，J＝9.7，3.1Hz，1H)，7.09(dd，J＝9.5，4.7Hz，1H)，6.95-6.87(m，2H)，2.62(s，3H)ppm。
步驟C2-(4-氨基-3-甲基苯氧基)-5-氟芐腈(25t)將中間體(24t)(14.3g，mmol)和鋅粉(17.2g，263mmol)懸浮于MeOH/THF(1∶1，125mL)混合溶劑中，并加入飽和NH4Cl溶液(125mL)。反應(yīng)混合物變熱。鋅粉懸浮液有明顯變化。10分鐘內(nèi)反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物通過硅膠短柱(plug)過濾并用EtOAc和飽和NaHCO3稀釋。將各層分離，通過MgSO4干燥合并的有機層，并減壓下濃縮。粗制殘余物(25t)足夠純，以用于NMR波譜分析。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.83(dd，J＝8.5，3.1Hz，1H)，7.47(td，J＝8.9，3.1Hz，1H)，6.83-6.77(m，2H)，6.74(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，6.66(d，J＝8.6Hz，1H)，4.88(s，1H)，2.06(s，3H)ppm。
步驟D5-氟-2-(1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(26t)將中間體(25t)(13.2g，54.5mmol)和NH4BF4溶于550mL AcOH和水(2∶1)混合溶劑中，并冷卻至0℃。將濃HCl(12N，23mL，272mmol)和NaNO2(4.14g，59.9mmol)加入0℃的溶液中，然后將混合物暖至室溫，并攪拌。攪拌3小時后，減壓下濃縮溶液，并與4倍的甲苯共沸至干，得到淺黃色粗制固體。將固體溶于600mLEtOAc中，并將KOAc加入溶液中，然后在室溫下攪拌混合物。在30分鐘內(nèi)，黃色溶液變?yōu)槌壬?，并繼續(xù)攪拌。攪拌過夜后，過濾橙色懸浮液，并用EtOAc洗滌數(shù)次至總?cè)莘e為1000mL。將橙色溶液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過濾，并蒸發(fā)。在硅膠柱上用EtOAc/己烷(1∶2-1∶1)對得到的粗制橙色固體進行純化，得到橙色固體(13.2g)，將其用甲苯洗滌。濃縮得到的橙色甲苯溶液，并再用甲苯洗滌。重復(fù)相同的甲苯洗滌，得到化合物(26t)，為淡橙色固體(11.7g，兩步總收率84％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ12.12(s，1H)，8.03(s，1H)，7.58(d，J＝9.4Hz，1H)，7.40(d，J＝2.3Hz，1H)，7.37(dd，J＝7.9，3.1Hz，1H)，7.18(ddd，J＝9.4，7.9，3.1Hz，1H)，7.13(dd，J＝8.5，2.3Hz，1H)，6.80(dd，J＝9.3，3.9Hz，1H)ppm。
實施例1043-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-1-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-1-甲基脲(28t)的制備化合物28t的合成反應(yīng)路線顯示在圖46中。
步驟A5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐胺鹽酸鹽(5t)中間體(4t)(1.13g，4.23mmol；如實施例94步驟A-C所述制備)溶于甲醇(50mL)中，并在氮氣氛下將活性碳載的20％氫氧化鈀(0.50g，0.71mmol)加入溶液中。加入濃HCl(12N，5.0mL，60mmol)后，將混合物在氫氣氛下攪拌過夜(18小時)。過濾混合物，并用MeOH洗滌氫氧化鈀。蒸發(fā)后，將粗制殘余物與甲苯和EtOH混合物共沸至干，得到化合物(5t)，為白色粉末(1.29g，收率99％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.72(br，3H)，8.01(s，1H)，7.73(d，J＝8.6Hz，1H)，7.57(dd，J＝9.4，2.3Hz，1H)，7.38(s，1H)，7.19(d，J＝3.1Hz，1H)，7.04(td，J＝74.8，3.1Hz，1H)，7.02(dd，J＝195.1，4.7Hz，1H)，4.07(s，3H)ppm。
步驟B[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-氨基甲酸叔丁酯(26t)將中間體(5t)(134mg，0.43mmol)溶于CH2Cl2(5mL)中，并將二異丙基乙胺(151μL，112mg，0.87mmol)和二碳酸二叔丁酯(94.7mg，0.43mmol)加入溶液中。攪拌過夜(12小時)，用乙酸乙酯(100mL)稀釋反應(yīng)混合物，用0.2N HCl(5mL)、飽和NaHCO3(5mL)和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮，得到黃色粗制油狀物，將其在硅膠柱上用EtOAc/己烷(1∶2)純化，得到無色油狀產(chǎn)物(26t)(150mg，收率93％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(s，1H)，7.35(d，J＝9.4Hz，1H)，7.15-7.08(m，3H)，6.87(t，J＝9.4Hz；1H)，6.75(dd，J＝8.7，4.7Hz，1H)，5.09(br，1H)，4.35(d，J＝6.3Hz，2H)，4.06(s，3H)，1.42(s，9H)ppm。
步驟C[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-甲基氨基甲酸叔丁酯(27t)將中間體(26t)(50mg，0.135mmol)溶于DMF(2mL)中，并冷卻至0℃。將氫化鈉(60％，8.1mg，0.20mmol)和碘代甲烷(42μL，95.5mg，0.67mmol)加入0℃的溶液中，并將混合物暖至室溫。攪拌1小時后，將混合物傾倒入飽和NH4Cl溶液中并用30mL乙醚萃取三次。用5mL水洗滌合并的有機層兩次并用鹽水洗滌一次，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將淺黃色殘余物在硅膠柱上用EtOAc/己烷(1∶2)進行純化，得到無色油狀化合物(27t)(52mg，定量)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.83(s，1H)，7.35(s，0.4H)，7.33(s，0.6H)，7.11(s，0.6H)，7.08(s，1.4H)，6.98(d，J＝8.6Hz，1H)，6.92-6.81(m，1)，6.81-6.73(m，1H)，4.49(s，0.8H)，4.45(s，1.2H)，4.04(s，3H)，2.89(s，1.8H)，2.85(s，1.2H)，1.45(s，3.6H)，1.41(s，5.4H)ppm。
步驟D3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-1-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-1-甲基-脲(28t)將中間體(27t)(52mg，0.135mmol)溶于CH2Cl2中，并在室溫下將TFA(1mL)加入溶液中。攪拌1小時后，減壓下蒸發(fā)反應(yīng)溶液。將殘余物用EtOAc(50mL)稀釋，用飽和NaHCO3中和，用鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下蒸發(fā)。將粗制淺黃色油狀物溶于DMA(2mL)中。將氨基甲酸酯(6t-1)和二異丙基乙胺加入溶液中，并在密閉試管中加熱至80℃。攪拌16小時后，將反應(yīng)混合物用Et2O(50mL)稀釋，用5mL水洗滌三次和鹽水洗滌一次，通過MgSO4干燥，并減壓下蒸發(fā)。將粗制油狀物通過閃蒸柱色譜法(乙酸乙酯/己烷1∶1)純化，得到化合物(28t)，為白色泡沫狀物(63.8mg，兩步總收率87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.83(s，1H)，7.32(d，J＝9.4Hz，1H)，7.22(d，J＝7.8Hz，2H)，7.13(d，J＝7.8Hz，2H)，7.02(s，1H)，6.98(d，J＝8.6Hz，1H)，6.89(t，J＝8.6Hz，1H)，6.72(dd，J＝7.7，4.7Hz，1H)，6.62(s，1H)，6.39(s，1H)，4.51(s，2H)，4.05(s，3H)，2.94(s，2H)，2.32(s，3H)，1.30(s，9H)ppm。
實施例1051-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-1-甲基脲(32t)的制備化合物32t的合成反應(yīng)路線顯示在圖47中。
步驟A[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-(4-甲氧基芐基)-胺(29t)將中間體(5t)(136mg，0.442mmol；如實施例106步驟A所述制備)溶于EtOAc(100mL)中，并用飽和NaHCO3中和，然后用鹽水洗滌，MgSO4干燥，并減壓下蒸發(fā)，得到游離胺。將游離胺溶于1，2-二氯乙烷(5mL)中，并在室溫下加入對茴香醛。攪拌2小時后，減壓下蒸發(fā)溶液。將殘余物溶于MeOH(5mL)中，并冷卻至0℃。將硼氫化鈉加入0℃的溶液中。在0℃下攪拌40分鐘后，用數(shù)滴0℃的乙酸終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，然后減壓下蒸發(fā)反應(yīng)混合物。將殘余物用EtOAc(50mL)稀釋，用飽和NaCO3中和，鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，濃縮得到粗制油狀物，將其在硅膠柱上用含1％ Et3N的EtOAc/己烷(1∶1)純化，得到無色油狀化合物(29t)(139mg，收率80％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(s，1H)，7.34(d，J＝9.4Hz，1H)，7.28(d，J＝7.0Hz，1H)，7.23-7.15(m，2H)，7.13-7.06(m，2H)，6.92-6.85(m，2H)，6.84-6.78(m，2H)，4.61(s，1H)，4.06(s，3H)，3.82(s，2H)，3.77(s，3H)，3.72(s，2H)ppm。
步驟B3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-1-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-1-(4-甲氧基芐基)-脲(30t)將中間體(29t)(135mg，0.354mmol)、三氯乙基氨基甲酸酯(6t-1)(154mg，0.379mmol)和二異丙胺(120μL，89mg，0.69mmol)溶于DMA(5mL)中，并加熱至80℃。80℃下攪拌12小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙醚(50mL)稀釋，用5mL水洗滌三次和鹽水一次，通過MgSO4干燥，過濾，并減壓下濃縮。將獲得的粗制油狀物在硅膠柱上用EtOAc/己烷(2∶3)純化，得到無色油狀化合物(30t)(180mg，收率83％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.82(s，1H)，7.07-6.95(m，8H)，6.94-6.89(m，1H)，6.89-6.84(m，1H)，7.29(d，J＝9.0Hz，1H)，6.75(d，J＝8.6Hz，2H)，6.69(dd，J＝8.9，4.7Hz，1H)，6.60(s，1H)，6.41(s，1H)，4.57(s，2H)，4.44(s，2H)，4.04(s，3H)，3.78(s，1H)，3.77(s，3H)，2.31(s，3H)，1.30(s，9H)ppm。
步驟C1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-3-(4-甲氧基芐基)-1-甲基-脲(31t)將中間體(30t)(150mg，0.23mmol)溶于DMF(2mL)中，并冷卻至0℃。將氫化鈉(60％，在油中，14mg，0.36mmol)和碘代甲烷(73.8μL，168mg，1.19mmol)加入0℃的溶液中，并將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時。通過加入5mL 0℃的水終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，然后用50mL Et2O萃取三次。用5mL水洗滌合并的有機層兩次并用鹽水洗滌一次，通過MgSO4干燥，過濾，并減壓下蒸發(fā)。將殘余物在硅膠柱上用EtOAc/己烷(1∶2)純化，得到淺黃色無定形化合物(31t)(134mg，收率87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.82(s，1H)，7.37(d，J＝8.6Hz，2H)，7.28(d，J＝9.4Hz，1H)，7.15-7.02(m，2H)，7.00-6.81(m，6H)，6.80-6.60(m，3H)，5.85(s，1H)，4.21(s，2H)，4.20(s，2H)，4.05(s，3H)，3.76(s，3H)，2.98(s，3H)，2.29(s，3H)，1.23(s，9H)ppm。
步驟D1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-1-甲基脲(32t)將中間體(31t)(85mg，0.131mmol)溶于5mL于三氟乙酸中的2％(v/v)茴香醚溶液中，并室溫下攪拌1.5小時。蒸發(fā)后，將粗制殘余物溶于EtOAc(80mL)，用飽和NaHCO3中和，鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，過濾，并減壓下蒸發(fā)。將獲得的粗制油狀物在硅膠柱上用EtOAc/己烷(2∶3)純化，得到白色無定形化合物(32t)(68.6mg，收率99％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.84(s，1H)，7.32(d，J＝9.4Hz，1H)，7.25(d，J＝7.8Hz，2H)，7.13(d，J＝7.8Hz，2H)，7.07(t，J＝10.2Hz，1H)，7.20-6.96(m，1H)，6.93(td，J＝8.6，3.1Hz，1H)，6.85(td，J＝8.6，3.1Hz，1H)，6.68(dd，J＝8.6，4.7Hz，1H)，6.11(s，1H)，5.31(t，J＝6.3Hz，0.8H)，5.17(t，J＝6.3Hz，0.2H)，4.48-4.26(m，2H)，4.05(s，3H)，3.00(s，3H)，2.33(s，2.4H)，2.32(s，0.6H)，1.36(s，1.8H)，1.29(s，7.2H)ppm。
實施例1061-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-5-氧基)-芐基]-脲(4u)的制備化合物4u的合成反應(yīng)路線顯示在圖48中。
步驟A5-氟-2-羥基芐腈(23t)將2，5-二氟芐腈(14.9g，107mmol)和芐醇(11.1mL，11.6g，107mmol)溶于DMF(330mL)中，并冷卻至0℃。將氫化鈉(60％，在油中，6.40g，161mmol)加入0℃的溶液中，并將反應(yīng)混合物暖至室溫。室溫下攪拌1小時后，將反應(yīng)溶液冷卻至0℃，并將水(330mL)逐漸加入溶液中。將混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用500mL Et2O萃取三次。用100mL水洗滌合并的有機層兩次，鹽水洗滌一次，然后通過MgSO4干燥。過濾后，減壓下濃縮溶液，得到粗制淺黃色固體。將粗制固體溶于MeOH(500mL)中。在氮氣氛下向溶液中加入活性碳載的10％鈀。用氫氣替換氮氣，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌(如果反應(yīng)在30分鐘沒有進行，濾出Pd/C，并重新開始反應(yīng))。攪拌2小時后，濾出炭載鈀，并用MeOH洗滌。將溶液減壓下濃縮，得到淺黃色固體。通過向熱甲苯(100mL)中加入己烷(10mL)之后冷卻至0℃而重結(jié)晶固體。將得到的白色針狀物用1∶1的甲苯和己烷混合物洗滌(7.23g，收率49％)。濃縮母液，并在硅膠柱上用Et2O/己烷(2∶3-1∶1)純化，得到所需化合物(23t)(6.94g，收率47％)。兩步總共14.2g(收率96％)。1H NMR(400Hz，d6-DMSO)δ11.09(s，1H)，7.58(dd，J＝8.4，3.2Hz，1H)，7.40(td，J＝8.6，3.2Hz，1H)，7.03(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)ppm。
步驟B5-氟-2-(4-甲基-5-硝基-吡啶-2-氧基)-芐腈(1u)將中間體(23t)(1.78g，13.0mmol)，2-氯-4-甲基-5硝基吡啶(2.31g，13.0mmol)和碳酸鉀(1.80g，13.0mmol)溶于DMF(120mL)中。當(dāng)混合物暖至60℃時，10分鐘內(nèi)無色溶液變?yōu)樗{色。60℃下攪拌16小時后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后用100mL Et2O稀釋。過濾除去無機沉淀物，并用Et2O洗滌。將合并的有機溶液(總共600mL)轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用60mL水洗滌三次，并用鹽水洗滌一次。將溶液通過MgSO4干燥，然后減壓下濃縮，得到粗制棕色固體。將粗制固體溶于MeOH(240mL)中。在氮氣氛下，向溶液中加入活性碳的10％鈀。用氫氣替換氮氣，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌(如果反應(yīng)在30分鐘內(nèi)沒有進行，濾出含Pd/C，并重新開始反應(yīng))。攪拌1.5小時后，濾出炭載鈀并用MeOH洗滌。減壓下濃縮溶液，得到淺黃色固體。將粗制化合物在硅膠柱上用Et2O/己烷(1/1-3/2)純化，得到白色固體化合物(1u)(2.21g，兩步總收率70％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.57(s，1H)，7.33(ddd；J＝7.8，3.1，1.6Hz，1H)，7.29-7.22(m，1H)，7.23(s，OH)，7.15(ddd，J＝9.3，4.7，1.6Hz，1H)，6.82(s，1H)，2.22(s，3H)ppm。
步驟C5-氟-2-(1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-5-氧基)-芐腈(2u)將中間體(1u)(0.25g，1.03mmol)和NH4BF4(0.22g，2.06mmol)溶于10mL AcOH/水(2∶1)混合溶劑中，冷卻至0℃，然后將濃HCl(0.43mL，5.16mmol)和NaNO2(0.078g，1.13mmol)加入0℃的溶液中。當(dāng)硝酸鈉加入時溶液顏色立即變?yōu)辄S色。然后將反應(yīng)混合物暖至室溫。攪拌2小時后，減壓下除去溶劑，并與甲苯共沸三次以除去水，得到淺黃色粗制固體。將固體溶于10mL EtOAc中，并將KOAc加入溶液中。30分鐘內(nèi)懸浮液顏色變?yōu)樯畛壬?，然后攪拌另?小時。過濾除去白色無機鹽，并用EtOAc洗滌。用EtOAc稀釋合并的濾液至總?cè)莘e100mL，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用飽和NaHCO3(10mL)和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，過濾，并蒸干，得到深橙色固體。將粗制固體在硅膠柱上用EtOAc/己烷(2∶3)純化，得到橙黃色固體(2u)(0.23g，兩步總收率為88％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，8.15(s，1H)，7.30-7.34(m，2H)，7.32-7.22(m，2H)，7.12(dd，J＝9.4，4.7Hz，1H)ppm。
步驟D5-氟-2-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-5-氧基)-芐腈(3u)將中間體(2u)(0.23g)溶于DMF(9mL)中，并冷卻至0℃。將氫化鈉(60％，在油中，0.054g，1.36mmol)和碘代甲烷(0.28mL，642mg，4.52mmol)加入0℃的溶液中，然后將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時。用10mL水終止混合物反應(yīng)，并用30mL乙醚萃取三次。用5mL水洗滌合并的有機層兩次，鹽水一次，通過MgSO4干燥，過濾，并減壓下濃縮。將粗制油狀殘余物在硅膠柱上用EtOAc/己烷(1∶1)純化，得到無色油狀物(3u)(0.124g，收率51％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.56(s，1H)，8.02(s，1H)，7.40-7.32(m，2H)，7.31-7.23(m，2H)，7.11-7.05(m，1H)，4.17(s，3H)ppm。
步驟E1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-甲基-1H-吡唑并[3，4-c]吡啶-5-氧基)-芐基]-脲(4u)將中間體(3u)溶于10mL MeOH中，并將濃HCl(12N，1.0mL，12mmol)和活性碳載的10％鈀加入溶液中。將混合物在氫氣氛下攪拌。攪拌24小時后，過濾除去活性炭載鈀，并減壓下濃縮濾液。將得到的殘余物與甲苯和乙醇混合物共沸幾次至干，得到粗制的胺鹽酸鹽。將粗制鹽溶于5mL DMF中。將二異丙基乙胺和三氯氨基甲酸乙酯加入溶液中，并加熱至80℃。攪拌16小時后，減壓下蒸發(fā)DMF，將殘余物用50mL EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，過濾，并減壓下蒸發(fā)。將獲得的粗制油狀物通過制備TLC用EtOAc/己烷(2∶1)然后100％ CH2Cl2純化，得到無色油狀物(4u)(9.0mg，收率4％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.23(s，1H)，7.90(s，1H)，7.24(s，1H)，7.20(d，J＝8.2Hz，2H)，7.08(d，J＝8.6Hz，2H)，7.06-7.00(m，2H)，6.91(td，J＝8.3，3.1Hz，1H)，6.82(dd，J＝8.9，4.7Hz，1H)，6.46(br，1H)，6.18(s，1H)，5.84(t，J＝8.6Hz，1H)，4.36(s，1H)，4.34(s，2H)，4.05(s，3H)，2.28(s，3H)，1.28(s，9H)ppm。
實施例1071-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-吡咯烷-1基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(7v)和1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-吡咯烷-1基甲基苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(8v)的制備化合物7v和8v的合成反應(yīng)路線顯示在圖49中。
步驟A5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐腈(3v)將3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-醇(1v)(合成參考，參見Indian J.Chem.Sect.B；19571-575(1980))(1.58g，10.6mmol)和2，5-二氟-芐腈(2v)(1.47g，10.6mmol)與碳酸鉀(1.46g，10.6mmol)在15mL干燥DMA中混合。將反應(yīng)物在100℃的水浴中加熱6小時。將反應(yīng)物冷卻，用EtOAc(200mL)稀釋，并用水、NH4Cl、NaHCO3和鹽水洗滌三次，將有機溶液通過MgSO4干燥，并濃縮。將粗制殘余物通過柱色譜法(硅膠，70-80％ CH2Cl2/己烷)純化，得到化合物(3v)(1.65g，收率58％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.63(d，J＝8.6Hz，1H)，7.44-7.41(m，1H)，7.33-7.26(m，1H)，7.10-7.06(m，2H)，7.03(dd，J＝8.2，4.7Hz，1H)，2.59(s，3H)；測得MS(ESI+)m/z 269(M+H)。
步驟B2-(3-溴甲基苯并[d]異噁唑-6-氧基)-5-氟芐腈(4v)將5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐腈(3v)(0.87g，3.2mmol)、N-溴丁二酰亞胺(0.82g，4.6mmol)、過氧化苯甲酰(0.12g，0.49mmol)和鄰二氯苯(6mL)在15mL壓力管中混合。攪拌混合物并在150℃浴中加熱。2.5小時后將反應(yīng)物冷卻，并將殘余物直接用柱色譜法(硅膠，70％ CH2Cl2/己烷)純化，得到化合物(4v)(0.29g，收率26％)和回收的原料(3v)(0.57g，65％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.84(d，J＝7.0Hz，1H)，7.45-7.43(m，1H)，7.35-7.31(m，1H)，7.16-7.13(m，2H)，7.08-7.05(m，1H)，4.72(s，2H)。
步驟C5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐腈(5v)將2-(3-溴甲基苯并[d]異噁唑-6-氧基)-5-氟芐腈(4v)(0.295g，0.850mmol)溶于二氯甲烷中，并逐滴加入吡咯烷(0.18g，2.5mmol)。2小時后，濃縮反應(yīng)混合物，并在NaHCO3(15mL)和EtOAc(30mL)之間分配。用EtOAc重萃取水層，合并有機部分，鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)，得到化合物(5v)(0.27g，94％)，其沒有進一步純化而使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.90(d，J＝8.6Hz，1H)，7.42(d，J＝6.3Hz，1H)，7.30-7.26(m，1H)，7.11(s，1H)，7.07-7.02(m，2H)，4.02(s，2H)，2.62(s，4H)，1.82(s，4H)；測得MS(ESI+)m/z 338。
步驟D5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐胺(6v)將5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐腈(5v)(0.20g，0.59mmol)溶于THF(4mL)中，并冷卻至0℃。將于THF中的氫化鋁鋰(1.0mL，1.0mmol)溶液緩慢加入，并將反應(yīng)物暖至室溫。1h后，將反應(yīng)物冷卻至0℃，并加入另外部分的于THF中的LAH(0.9mL，0.9mmol)。攪拌反應(yīng)物20分鐘。然后通過分批加入0℃的硫酸鈉十水合物終止反應(yīng)物反應(yīng)直至氣體停止放出。加入THF，將混合物通過硅藻土過濾，并用EtOAc洗脫。濃縮溶液得到5-氟-2-(3-吡咯烷-1-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐胺(6v)(0.15g)，將其沒有進一步純化而用于下一步驟。測得MS(APCI+)m/z 342(M+H)。
步驟E1-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(7v)將5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐胺(6v)(50mg，0.15mmol)、(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氟-乙酯(a)(68mg，0.21mmol)和二異丙基乙胺(0.038mL，0.22mmol)在DMF(1.5mL)中混合，并在85℃下加熱3小時。將反應(yīng)物冷卻，真空濃縮，并通過柱色譜法(硅膠，4％MeOH/CH2Cl2/0.5％ Et3N)純化，得到1-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(7v)(30mg，39％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.79(d，J＝8.6Hz，1H)，7.16(d，J＝8.6Hz，1H)，7.03-6.80(m，4H)，6.11(s，1H)，5.93(s，1H)，5.25(t，J＝8.6Hz，1H)，4.38(d，J＝6.3Hz，2H)，3.99(s，2H)，3.67(s，3H)，2.61(s，4H)，1.81(s，4H)，1.26(s，9H)；測得MS(APCl+)m/z 521(M+H)；HPLC(5 to 95％)2.61分鐘。
步驟F1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(8v)將5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐胺(6v)(50mg，0.15mmol)、(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氟-乙酯(b)(75mg，0.18mmol)和二異丙基乙胺(0.038mL，0.22mmol)在DMF(1.5mL)中混合，并在85℃下加熱3小時。將反應(yīng)物冷卻，真空濃縮，并通過柱色譜法(硅膠，40-60％EtOAc/己烷/0.25％ Et3N)純化得到1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-吡咯烷-1-基甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(8v)(30mg，收率34％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.78(d，J＝8.6Hz，1H)，7.31(d，J＝7.0Hz，2H)，7.20(d，J＝7.8Hz，2H)，7.02-6.88(m，5H)，6.17(s，1H)，6.02(s，1H)，5.30(t，J＝8.6Hz，1H)，4.36(d，J＝5.5Hz，2H)，3.98(s，2H)，2.60(s，4H)，2.36(s，3H)，1.80(s，4H)，1.32(s，9H)；測得MS(ESI+)m/z 597(M+H)；HPLC(5至95％)2.93分鐘。
實施例1081-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(10v)的制備化合物10v的合成反應(yīng)路線顯示在圖50中。
步驟A5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐胺(9v)將5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐腈(3v)(84mg，0.31mmol；如實施例108所述制備)溶于THF(3mL)中，并冷卻至0℃。將于THF中的氫化鋁鋰(0.35mL，0.35mmol)溶液緩慢加入，并將反應(yīng)暖至室溫。1小時后，通過分批加入0℃的硫酸鈉十水合物終止反應(yīng)物反應(yīng)直至氣體停止放出。加入THF，通過硅藻土過濾混合物，并用EtOAc洗脫。濃縮溶液得到粗制品(9v)(66mg)，將其沒有進一步純化而使用。
步驟B1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐基]-脲(10v)將5-氟-2-(3-甲基-苯并[d]異噁唑-6-氧基)-芐胺(9v)(60mg，0.22mmol)、(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氟乙酯(12v)(89mg，0.22mmol)和二異丙基乙胺(0.058mL，0.33mmol)在DMF(2mL)中混合，并在75℃下加熱3小時。冷卻反應(yīng)物，真空濃縮，并通過柱色譜法(硅膠，30-40％ EtOAc/己烷)純化，得到化合物(10v)(90mg，收率77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.51(d，J＝8.6Hz，1H)，7.30(d，J＝8.6Hz，2H)，7.20(d，J＝7.8Hz，2H)，7.02-6.88(m，5H)，6.15(s，1H)，5.99(s，1H)，5.28(t，J＝7.6Hz，1H)，4.36(d，J＝5.5Hz，2H)，2.53(s，3H)，2.36(s，3H)，1.31(s，9H)；測得MS(ESI+)m/z 528(M+H)；HPLC(5至95％)3.49分鐘。
實施例1095-溴-1-環(huán)丙基甲基-1H-吲唑的制備 向于75mL DMF中的5-溴吲唑(15g，76.1mmol)和(溴甲基)環(huán)丙烷(8.12mL，83.7mmol)溶液中加入K2CO3(16g，114.0mmol)。將混合物加熱至105℃。24小時后，原料仍然可以觀察到。加入另外的(溴甲基)環(huán)丙烷(5.7mL，57.0mmol)，并將反應(yīng)物加熱至105℃，持續(xù)另外24小時。5-溴吲唑仍可以觀察到，因此加入另外的(溴甲基)環(huán)丙烷(4mL，38mmol)，并將反應(yīng)物在95℃加熱48小時。5-溴吲唑消失后，將反應(yīng)混合物倒入DCM/鹽水中。分為兩層，用DCM(2×)萃取水層，并用TLC檢測。在水層中沒有觀察到產(chǎn)物。用H2O(2×)和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。過濾后，濃縮濾液，并用9.5∶0.5己烷/EtOAc通過色譜法純化得到的殘余物，得到5-溴-1-環(huán)丙基甲基-1H-吲唑(8.74g，單獨的收率45％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.93(s，1H)，7.86(d，J＝1.57Hz，1H)，7.43(dd，J＝8.61，1.57Hz，1H)，7.31(d，J＝8.61Hz，1H)，4.24(d，J＝6.26Hz，2H)，1.37-1.26(m，1H)，0.62-0.55(m，2H)，0.43-0.37(m，2H)；測得MS(APCI+)m/z 251/253(M/M+2H，1∶1)。
實施例1105-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-腈(17d)的制備本實施例的化合物17d的合成反應(yīng)路線顯示在圖51中。
步驟A1，2-二溴-4-甲基-5-硝基苯在氮氣氛和機械攪拌下將3，4-二溴甲苯(108.11mL，800mmol)在4小時內(nèi)逐滴加入硝酸(90％，280mL，6000mmol)中，冷卻至0℃。在加入過程中混合物的內(nèi)部溫度保持在10℃以下，并在加入完成后在0℃下攪拌1小時。將水(840mL)逐滴加入內(nèi)部溫度保持在10℃以下的混合物中。過濾收集粗制品，并用水(5×500mL)洗滌除去過量的硝酸。將固體高真空下干燥，并通過從乙醇(800mL)中重結(jié)晶進行純化，得到180.9g所需產(chǎn)物(收率77％)，為固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.24(s，1H)，7.64(s，1H)，2.55(s，3H)。
步驟B1-溴-2-(2，4-二氟苯氧基)-4-甲基-5-硝基苯將1，2-二溴-4-甲基-5-硝基苯(84.3g，286mmol)和K2CO3(43.5g，315mmol)混合物加熱至100℃，持續(xù)45小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后在5℃的冰箱中儲存過夜。將反應(yīng)混合物全部一次倒入1200mL冰水中。收集得到的濕固體，部分碾碎，并在900mL水中攪拌45分鐘。過濾收集固體，用700mL水分次漂洗。將得到的固體高真空下干燥過夜，得到93.5g棕色固體(收率95％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.38(s，1H)，7.18(m，1H)，7.03(m，1H)，6.97(m，1H)，6.52(s，1H)，2.50(s，3H)。
步驟C5-溴-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲基苯胺將1-溴-2-(2，4-二氟苯氧基)-4-甲基-5-硝基苯(87.0g，253mmol)溶于THF(300mL)中，并用MeOH(900mL)稀釋。加入鋅粉(82.7g，1.26mol)，并緩慢地加入1L飽和NH4Cl使得反應(yīng)溫度不超過42℃。將反應(yīng)物劇烈機械攪拌16小時。用硅藻土過濾反應(yīng)物，并將濾餅用乙酸乙酯洗滌。然后濾液用1.2L飽和NH4OAc濃縮。當(dāng)去除THF/MeOH時，收集固體并用水洗滌。然后將固體在1L水中攪拌30分鐘，然后通過過濾收集，并用水(1L)分三份洗滌。將得到的固體高真空下干燥48小時，得到64g所需產(chǎn)物(收率81％)。測得MS(ESI+)m/z 314，316(M+1，Br模式)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.92(m，1H)，6.91(s，1H)，6.75(m，2H)，6.70(s，1H)，3.57(br s，2H)，2.08(s，3H)。
步驟D6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1H-吲唑(14d)5-溴-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲基重氮苯四氟硼酸鹽將5-溴-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲基苯胺(30.0g，96mmol)溶于2∶1AcOH/H2O(960mL)中。加入NH4BF4(20.0g，191mmol)，并將混合物冷卻至3℃(～30分鐘)。然后將濃HCl(40mL)全部一次加入，并將混合物暖至6℃。將混合物冷卻至2℃，然后加入NaNO2(7.25g，105mmol)。將反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌5分鐘，然后在室溫下攪拌1小時。減壓下濃縮混合物，并將殘余物與甲苯(3×400mL)共沸。粗制(5-溴-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲基重氮苯四氟硼酸鹽)沒有進一步純化而用于下一步驟。
6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1H-吲唑?qū)⒋种?-溴-4-(2，4-二氟苯氧基)-2-甲基重氮苯四氟硼酸鹽懸浮于乙酸乙酯(650mL)中，并用10當(dāng)量的KOAc處理。將混合物在室溫下劇烈攪拌1.5小時，然后過濾，并用乙酸乙酯稀釋至總體積為1L。將混合物用飽和NaHCO3/鹽水(800mL，1∶1)洗滌。用乙酸乙酯(400mL)萃取水相。合并有機層，干燥(MgSO4)，并濃縮，得到棕色固體(31g，收率99％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.55(br s，1H)，7.98(s，1H)，7.84(s，1H)，7.20(s，1H)，6.99(m，1H)，6.94(m，1H)，6.84(m，1H)。
步驟E6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(15d)將6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1H-吲唑(60.0g，185mmol)溶于DMF中，并用K2CO3(76.5g，554mmol)和異丁基溴(126.4g，923mmol)處理。攪拌混合物并加熱至80℃，持續(xù)16小時。加入另外15g K2CO3，并將混合物再劇烈攪拌24小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并過濾。減壓下濃縮濾液，并溶于乙醚(1L)中。將混合物用1∶5鹽水/水(2×600mL)洗滌。用乙醚(300mL)萃取水相，干燥(MgSO4)合并的有機物部分，并減壓下濃縮。將粗制品分兩次(每次大約35g)在Biotage Flash 75上用于己烷中的5％乙酸乙酯洗脫進行色譜分析。合并的純化產(chǎn)物獲得30.1g所需產(chǎn)物(收率43％)，為固體。測得MS(ESI+)m/z 381，383(M+1，Br模式)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.86(s，1H)，7.72(s，1H)，7.16(s，1H)，6.98(m，1H)，6.92(m，1H)，6.82(m，1H)，4.12(d，2H)，2.34(m，1H)，0.94(d，6H)。
步驟F5-(2，4二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-腈(16d)將6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(31.2g，82mmol)和Cu(I)CN(13.9g，156mmol)溶于DMA中，并真空下用氮氣脫氣。將反應(yīng)混合物加熱至150℃，持續(xù)16小時。將混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯稀釋，之后用7M NH4OH洗滌兩次。用鹽水洗滌有機層，用氮氣脫氣，之后通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將粗制品用于己烷中的10％乙酸乙酯洗脫進行色譜分析，得到25.1g產(chǎn)物(收率95％)。
步驟G5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(17d)將5-(2，4二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-腈(25.1g，77mmol)懸浮于乙醇(620mL)和KOH(2.5M，310mL)中，并加熱回流24小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮除去乙醇。用水稀釋得到的水溶液，并用乙醚洗滌。將有機層用濃HCl酸化至pH1，并用乙酸乙酯萃取數(shù)次。合并有機層，并減壓下濃縮，得到25.5g產(chǎn)物(收率96％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.37(s，1H)，7.91(s，1H)，7.20(m，1H)，7.07(s，1H)，7.04(m，1H)，6.95(m，1H)，4.24(d，2H)，2.36(m，1H)，0.94(d，6H)。
實施例111{3-[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-氧基]-丙基}-二甲胺(20d)的制備本實施例的化合物20d的合成反應(yīng)路線顯示在圖52中。
步驟A5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-醇(15d；根據(jù)實施例110步驟A-E制備)將6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(1.36g，3.6mmol)溶于干燥乙醚(17.5mL)中，并冷卻至-78℃。在10分鐘內(nèi)將正丁基鋰(2.5M，在1.7mL己烷中)逐滴加入，并將混合物攪拌30分鐘。在10分鐘內(nèi)將硼酸三甲酯(6mL，53.5mmol)逐滴加入，將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌18小時。將混合物冷卻至-10℃，加入2N NaOH(3.6mL)和水(3mL)，之后加入H2O2(3.6mL)和2N NaOH(3.6mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時，形成白色沉淀物。加入水(3mL)、4N NaOH(4mL)和H2O2(1mL)，并將混合物攪拌另外20分鐘。然后用乙醚稀釋混合物，并分層。將水層用乙醚洗滌，酸化，然后用乙醚(2×)萃取。用水和鹽水洗滌合并的乙醚萃取液，通過Na2SO4干燥，并減壓下濃縮，得到0.465g產(chǎn)物(收率41％)。
步驟B6-(3-氯丙氧基)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(19d)向于DMF(1mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-醇(0.015g，0.05mmol)溶液中加入Cs2CO3。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，之后加入1-溴-3-氯丙烷(0.01g，0.08mmol)，然后加熱至80℃，持續(xù)25小時。將反應(yīng)物冷卻至室溫后，用水和乙醚稀釋反應(yīng)混合物，并分層。用乙醚萃取水層，并用1N NaOH、水和鹽水洗滌合并的有機層。通過Na2SO4干燥粗制混合物，并減壓下濃縮，得到有少量雜質(zhì)的產(chǎn)物。將粗制混合物沒有進一步純化而用于下一步反應(yīng)。
步驟C{3-[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-氧基]-丙基}-二甲胺(20d)向于THF(1.4mL)中的2N二甲胺溶液中加入6-(3-氯丙氧基)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(0.019g，0.05mmol)。將混合物在室溫下攪拌62小時，之后加熱至45℃，持續(xù)3小時。減壓下除去溶劑，并將殘余物在二氯甲烷和0.1N NaOH之間分配。分層，并用二氯甲烷(3×)萃取水層。用水和鹽水洗滌合并的有機層，然后通過Na2SO4干燥。減壓下濃縮混合物，得到粗制混合物，將其用反相HPLC純化。將所需部分濃縮，得到TFA鹽(7mg，收率37％)。測得MS(ESI+)m/z 404(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.88(s，1H)，7.34(s，1H)，6.97(m，1H)，6.82(s，1H)，6.78(m，2H)，4.14(m，2H)，4.11(d，2H)，2.98(m，2H)，2.76(s，6H)，2.35(m，1H)，2.22(m，2H)，0.95(d，6H)。
實施例1125-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-6-(哌啶-4基甲氧基)-1H-吲唑(21d)的制備向于DMF(3mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-醇(0.06g，0.19mmol)和4-(甲苯-4-磺酰基氧基甲基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.08g，0.20mmol)溶液中加入NaI(0.014g，0.009mmol)和K2CO3(0.08g，0.56mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至70℃，持續(xù)20小時。用乙醚和水稀釋混合物，并分層。將水層用乙醚(2×)萃取，用水和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。減壓下濃縮粗制混合物，并通過反相HPLC純化。將所需部分濃縮為0.037g，然后用HCl(4N，在二噁烷中)處理7小時。減壓下除去溶劑，并將最終產(chǎn)物高真空下干燥，得到0.031g固體(收率37％)。測得MS(APCI+)m/z 416(M+1)。
實施例1135-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-6-(3-哌嗪-1-基-丙氧基)-1H-吲唑(22d)的制備向于DMA(0.5mL)和THF(5mL)中的6-(3-氯丙氧基)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(0.025g，0.063mmol)和NaI(0.019g，0.13mmol)溶液中加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.059g，0.32mmol)。將反應(yīng)混合物在密閉反應(yīng)容器中加熱至65℃，持續(xù)20小時。減壓下濃縮混合物，并將殘余物在水，鹽水和乙醚之間分配。分層，并用乙醚(2×)萃取水層。用水和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。減壓下濃縮粗制混合物，并用HCl(4N，在二噁烷中)處理3小時。濃縮得到的混合物，并通過反相HPLC純化，得到0.025g TFA鹽(收率51％)。測得MS(APCI+)m/z 445(M+1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.88(s，1H)，7.32(s，1H)，7.17(s，1H)，7.14(m，1H)，6.89(m，2H)，4.23(t，2H)，4.18(d，2H)，3.52(m，4H)，3.41(m，4H)，3.14(t，2H)，2.31(m，1H)，2.19(m，2H)，0.92(d，6H)。
實施例1145-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-6-(嗎啉-2基甲氧基)-1H-吲唑(23d)的制備步驟A2-羥甲基嗎啉-4-羧酸叔丁酯向于MeOH(20mL)中的(4-芐基嗎啉-2-基)-甲醇(0.66g，3.18mmol，Synth.Comm.1980，10，59-73)溶液中加入Boc酐(0.83g，3.82mmol)，之后加入Pd/C(0.66g，6.20mmol)。將混合物在氫氣氛下攪拌60小時。過濾除去催化劑，并減壓下濃縮濾液，得到無色油狀產(chǎn)物(0.69g，收率99％)。
步驟B2-溴甲基嗎啉-4-羧酸叔丁酯向冷卻的(0℃)于二氯甲烷(20mL)中的2-羥甲基嗎啉-4-羧酸叔丁酯(1.04g，4.79mmol，參見步驟1)溶液中加入CBr4(1.98g，5.98mmol)。攪拌混合物10分鐘后，分批加入三苯膦(2.20g，8.38mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌6小時，然后暖至室溫，并攪拌60小時。減壓下濃縮混合物，然后用乙醚稀釋。過濾粗制混合物，濃縮濾液，得到粗制品，將其在Biotage柱上用二氯甲烷洗脫進行色譜分析。將所需部分合并，并濃縮，得到0.50g產(chǎn)物(收率37％)。
步驟C5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-6-(嗎啉-2-基甲氧基)-1H-吲唑向于DMA(3.5mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-醇(0.035g，0.11mmol)溶液中加入Cs2CO3(0.11g，0.33mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，之后加入2-溴甲基嗎啉-4-羧酸叔丁酯(0.062g，0.22mmol)。將得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌14小時。用乙醚和水稀釋反應(yīng)混合物，并分層。用乙醚(3×)萃取水層，用水和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。減壓下濃縮粗制混合物，并通過反相HPLC純化，得到所需產(chǎn)物。測得MS(APCI+)m/z 418(M+1)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(s，1H)，7.38(s，1H)，7.21(s，1H)，7.11(m，1H)，6.84(m，2H)，4.22(m，2H)，4.18(d，2H)，4.05(m，2H)，3.31(m，3H)，3.03(m，2H)，2.31(m，1H)，0.92(d，6H)。
實施例1151-[5-(2-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-氧基]-3-吡咯烷-1-基-丙烷-2-醇(24d)的制備步驟A5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-6-環(huán)氧乙烷基(oxiranyl)甲氧基-1H-吲唑向于DMA(5mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-醇(0.15g，0.47mmol)溶液中加入Cs2CO3(0.46g，1.41mmol)。攪拌混合物3小時后，加入2-溴甲基環(huán)氧乙烷(0.13g，0.94mmol)，并將得到的混合物在室溫下攪拌16小時。用乙醚和水稀釋混合物，并分層。用乙醚(3×)萃取水層，用水和鹽水洗滌合并的有機層，并通過Na2SO4干燥。將粗制品減壓下濃縮并沒有進一步純化而用于下一步反應(yīng)(0.135g，收率77％)。
步驟B1-[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-氧基]-3-吡咯烷-1-基-丙烷-2-醇向于MeOH(3mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-6-環(huán)氧乙烷甲氧基-1H-吲唑(0.035g，0.093mmol，參見步驟1)溶液中加入吡咯烷(0.007g，0.093mmol)。將混合物在室溫下攪拌36小時，然后減壓下濃縮。將粗制品通過反相HPLC純化，得到最終的產(chǎn)物，為TFA鹽(0.037g，收率59％)。測得MS(APCI+)m/z 446(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(s，1H)，7.33(s，1H)，6.96(m，1H)，6.88(s，1H)，6.79(m，2H)，4.34(m，1H)，4.25(m，1H)，4.14(d，2H)，3.95(m，1H)，3.82(m，2H)，3.17(m，1H)，3.08(m，1H)，2.88(m，1H)，2.78(m，1H)，2.33(m，1H)，2.12(m，4H)，0.94(d，6H)。
實施例1165-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-磺酸(3-二甲氨基丙基)-酰胺(26d)的制備本實施例的化合物26d的合成反應(yīng)路線顯示在圖53中。
步驟A5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-磺酰氯(25d)在氮氣氛下向冷卻的(-78℃)于THF(50mL)中的6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(15d，如實施例110步驟A-E制備)(2.0g，5.2mmol)溶液逐滴加入正丁基鋰(1.5mL of2.5M)。反應(yīng)溶液在-78℃下攪拌5分鐘，然后通過空心管轉(zhuǎn)移至冷卻的(-78℃)于THF(5mL)中的SO2(0.34g，5.25mmol)懸浮液中。將混合物在-78℃下攪拌2小時，然后用乙醚(20mL)稀釋，并在室溫下攪拌1小時。減壓下濃縮懸浮液，并將殘余物在冰浴中與飽和NaHCO3(15mL)和NCS(0.77g，5.8mmol)攪拌45分鐘。用乙酸乙酯(3×)萃取反應(yīng)混合物，將合并的有機層用鹽水洗滌，并通過Na2SO4干燥。減壓下濃縮溶液，得到非常粘稠的液體，將其沒有進一步純化而用于下一步反應(yīng)。
步驟B5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-磺酸(3-二甲氨基丙基)-酰胺(26d)在氮氣氛下向冷卻的(0℃)5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-磺酰氯(0.20g，0.50mmol)溶液中滴加3-(二甲氨基)丙胺(0.05g，0.50mmol)和三乙胺(0.15g，1.5mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌4小時，然后用二氯甲烷(20mL)稀釋，用水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌，然后通過MgSO4干燥。減壓下濃縮混合物，并在制備TLC板上用二氯甲烷/MeOH/Et3N(95∶4∶1)洗脫進行色譜分析，得到93mg最終產(chǎn)物(收率40％)。測得MS(APCI-)m/z 466；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，7.91(s，1H)，7.20(m，1H)，7.09(s，1H)，7.00(m，1H)，6.90(m，1H)，4.22(d，2H)，3.12(t，2H)，2.35(m，3H)，2.13(s，6H)，1.70(m，2H)，0.94(d，6H)。
實施例117(S)-2-(5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-亞磺酰氨基)-4-(二甲氨基)丁酸甲酯(27d)的制備如實施例116步驟A和B所述制備，用2-氨基-4-二甲氨基丁酸甲酯二鹽酸鹽代替3-(二甲氨基)丙胺。將粗制品在制備TLC板上用己烷/乙酸乙酯/Et3N(50∶50∶5)洗脫進行色譜分析，得到最終產(chǎn)物(收率37％)。用MeOH/Et3N(95∶4∶1)洗脫得到93mg最終產(chǎn)物(收率40％)。測得MS(APCI-)m/z 523(M-1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(s，1H)，7.90(s，1H)，7.23(m，1H)，7.08(s，1H)，7.00(m，1H)，6.89(m，1H)，4.32(t，1H)，4.21(d，2H)，3.45(s，3H)，2.37(m，3H)，2.15(s，6H)，2.05(m，1H)，1.90(m；1H)，0.92(dd，6H)。
實施例1185-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-磺酸[2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-乙基]-酰胺(28d)的制備如實施例116步驟A和B所述制備，用2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-乙胺代替3-(二甲氨基)丙胺。將粗制品在制備TLC板上用己烷/乙酸乙酯/Et3N(1∶1∶0.1)洗脫進行色譜分析，得到最終產(chǎn)物(收率24％)。測得MS(APCI+)m/z 493(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.14(s，1H)，7.93(s，1H)，7.19(m，1H)，7.12(s，1H)，7.00(m，1H)，6.90(m，1H)，4.23(d，2H)，3.12(m，3H)，2.44(m，1H)，2.36(m，1H)，2.34(s，3H)，2.24(m，1H)，1.92(m，1H)，1.77(m，4H)，1.51(m，1H)，0.94(d，6H)。
實施例119
5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-磺酸(2-二甲氨基乙基)-酰胺(29d)的制備如實施例116步驟A和B所述制備，用2-二甲氨基乙胺代替3-(二甲氨基)丙胺。將粗制品在制備TLC板上用己烷/乙酸乙酯/Et3N(1∶1∶0.1)洗脫進行色譜分析，得到最終產(chǎn)物。測得MS(APCI+)m/z 453(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，7.92(s，1H)，7.18(m，1H)，7.12(s，1H)，7.00(m，1H)，6.89(m，1H)，4.23(d，2H)，3.07(t，2H)，2.41(t，2H)，2.36(m，1H)，2.15(s，6H)，0.94(d，6H)。
實施例120(S)-2-(5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰氨基)-4-(二甲氨基)丁酸甲酯(30d)制備 步驟A(S)-2-(叔丁氧羰基)-4-羥基丁酸在15分鐘內(nèi)，向于1N NaOH(460mL)和EtOH(400mL)中的L-高絲氨酸(49.9g，419mmol)溶液中加入于THF(400mL)中的Boc酐(100.6g，461mmol)溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時。然后將混合物用乙醚(3×500mL)洗滌，用1N HCl酸化至pH2，并用乙酸乙酯(6×250mL)萃取。用鹽水(2×250mL)洗滌合并的有機萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到72.6g白色固體(收率79％)。
步驟B(S)-2-(叔丁氧羰基-4-羥基丁酸-二環(huán)己胺復(fù)合物向于EtOH(500mL)中的(S)-2-(叔丁氧羰基)-4-羥基丁酸(72.6g，331mmol)溶液中滴加二環(huán)己胺(73mL，364mmol)。室溫下攪拌混合物2小時，然后減壓下濃縮。在高真空下干燥白色固體，然后用乙醚(1000mL)磨碎。通過過濾收集微細白色粉末，用乙醚洗滌，并高真空下干燥(125.6g，收率95％)。
步驟C(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-羥基丁酸甲酯向于DMF(900mL)中的(S)-2-(叔丁氧羰基)-4-羥基丁酸-二環(huán)己胺復(fù)合物(110g，275mmol)懸浮液中加入碘代甲烷(idodomethane)(20.5mL，330mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。將澄清溶液減壓下濃縮，并與甲苯(5×200mL)共沸。用水(500mL)和乙酸乙酯(500mL)稀釋殘余物，攪拌2小時，并分層。用乙酸乙酯(9×250mL)萃取水層。用鹽水(250mL)洗滌合并的有機層，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到黃色油狀物。將粗制油狀物在硅膠柱上用乙醚/己烷(3∶1)洗脫進行色譜分析，得到53g無色油狀物(收率83％)。
步驟D(S)-4-溴-2-叔丁氧羰基氨基丁酸甲酯向冷卻的(0℃)于二氯甲烷(500mL)中的(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-羥基丁酸甲酯(28.7g，123mmol)溶液中加入CBr4(51.0g，154mmol)。將混合物攪拌5分鐘，之后分批加入三苯膦(48.41g，185mmol)。將混合物繼續(xù)在0℃下攪拌1小時，然后暖至室溫。減壓下除去溶劑，然后用乙醚(500mL)稀釋，并攪拌30分鐘。過濾混合物，并將濾液減壓下濃縮。將殘余物用乙醚/己烷(1∶2)洗脫進行色譜分析，得到27.5g白色固體(收率76％)。
步驟E(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-二甲氨基丁酸甲酯向在壓力反應(yīng)容器中的于THF(100mL)中的(S)-4-溴-2-叔丁氧羰基氨基-丁酸甲酯(27.5g，93mmol)溶液中加入三乙胺(26mL)和二甲胺(2.0M，93mL，在THF中)。將反應(yīng)容器密閉，并加熱至60℃，持續(xù)16小時，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物減壓下濃縮，然后溶于二氯甲烷(500mL)中。用水(3×200mL)和鹽水(200mL)洗滌溶液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。高真空下干燥殘余物，得到23.4g黃色油狀物(收率97％)。
步驟F(S)-2-氨基-4-(二甲氨基)丁酸甲酯二鹽酸鹽向冷卻的(0℃)于二噁烷(100mL)中的(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-二甲氨基丁酸甲酯(23.4g，90mmol)溶液中滴加HCl(225mL，4M，在二噁烷中)。將混合物暖至室溫，并攪拌3小時。過濾固體，用乙醚(3×100mL)洗滌，并高真空下干燥，得到20.2g產(chǎn)物(收率96％)。
步驟G(S)-2-(5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰氨基)-4-(二甲氨基)丁酸甲酯(30d)將于二氯乙烷(2mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(17d；根據(jù)實施例110制備)(0.396g，1.14mmol)與HOBt(0.192g，1.26mmol)和EDCI(0.241g，1.26mmol)在室溫下攪拌10分鐘。然后將該混合物加入于二氯甲烷(6mL)中的(S)-2-氨基-4-(二甲氨基)丁酸甲酯二鹽酸鹽(0.280g，1.20mmol)和三乙胺(1mL，6.9mmol)懸浮液中。將反應(yīng)混合物攪拌3小時，然后減壓下濃縮。用氯仿(50mL)稀釋殘余物，用1N HCl(2×25mL)、飽和K2CO3(2×50mL)、水(25mL)和鹽水(25mL)洗滌，并通過MgSO4干燥。減壓下濃縮濾液，得到黃色油狀物。油狀物用于二氯甲烷中的5％MeOH洗脫進行色譜分析，得到粘稠無色油狀物，將其高真空下干燥固化(0.393g，收率71％)。測得MS(ESI+)m/z 489(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.91(d，1H)，8.36(s，1H)，7.86(，1H)，7.16(m，1H)，7.03(m，1H)，7.00(s，1H)，6.93(m，1H)，4.88(m，1H)，4.21(d，2H)，3.74(s，3H)，2.34(m，3H)，2.06(s，6H)，2.01(m，2H)，0.92(d，6H)。
實施例121(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-N-(4-(二甲氨基)-1-羥基丁烷-2-基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰胺(31d)的制備將于THF/EtOH(20mL，3∶2)中的(S)-2-(5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰氨基)-4-(二甲氨基)丁酸甲酯(30d；實施例120，步驟A-E)(0.370g，0.76mmol)和NaBH4(0.114g，3.04mmol)混合物加熱至60℃，持續(xù)7小時。將反應(yīng)混合物減壓下濃縮，并用二氯甲烷稀釋。將漿狀物在Biotage柱上用于二氯甲烷中的10％ MeOH和1％ 三乙胺洗脫進行色譜分析。獲得的產(chǎn)物為0.337g粘稠油狀物(收率97％)。測得MS(ESI+)m/z461(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.34(d，1H)，8.31(s，1H)，7.86(s，1H)，7.13(m，1H)，7.02(s，1H)，7.00(m，1H)，6.90(m，1H)，4.33(m，1H)，4.22(d，2H)，3.64(m，2H)，2.37(m，1H)，2.17(s，6H)，2.10(m，1H)，1.82(m，1H)，1.07(m，2H)，0.93(d，6H)。
實施例122(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(1-羥甲基-3-異丙氨基丙基)-酰胺的制備(32d)步驟A異丙基-4-甲氧基芐基-胺將于干燥二氯乙烷(20mL)中的4-甲氧基芐胺(1.37g，10mmol)和丙酮(0.81mL，11mmol)混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(3.18g，15mmol)，并將得到的混合物在室溫下攪拌17小時。用1N NaOH(50mL)終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，并分層。用二氯甲烷(2×20mL)萃取水層。用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌合并的萃取液，MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。將殘余物用于二氯甲烷中的10％ MeOH和1％ 三乙胺洗脫進行色譜分析，得到1.53g油狀物(收率85％)。
步驟B(S)-4-溴-2-(叔丁氧羰基)丁酸甲酯向冷卻的(0℃)于THF(20mL)中的(S)-2-氨基-4-溴丁酸甲酯(1.80g，6.5mmol)溶液中加入三乙胺(4.53g，32.5mmol)和Boc酐(1.49g，6.83mmol，在20mL THF中的溶液)。將混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后暖至室溫，并攪拌18小時。用1N HCl(50mL)終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，分層。用乙醚(2×20mL)萃取水層，用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌合并的有機萃取液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到淺黃色油狀物。將油狀物用乙醚∶己烷(1∶2)洗脫進行色譜分析，得到1.45g無色油狀物，將其高真空下固化(收率75％)。
步驟C(S)-4-((4-甲氧基芐基)(異丙基)氨基)-2-(叔丁氧羰基)丁酸甲酯鹽酸鹽將于THF(5mL)中的異丙基-(4-甲氧基芐基)-胺(0.111g，0.62mmol)、(S)-4-溴-2-(叔丁氧羰基)丁酸甲酯(0.150g，0.51mmol)和三乙胺(0.21mL，1.52mmol)的混合物加熱回流65小時。然后將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將殘余物用于二氯甲烷中的5％ MeOH洗脫進行色譜分析，得到0.026g無色油狀物(收率13％)。然后用HCl(1mL，4N，在二噁烷中)在室溫下處理化合物3小時。減壓下濃縮混合物，并高真空下干燥。
步驟D(S)-4-((4-甲氧基芐基)(異丙基)氨基)-2-(5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰氨基)丁酸甲酯將于二氯乙烷(1mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(17d；根據(jù)實施例110制備)(0.022g，0.064mmol)與HOBt(0.011g，0.070mmol)和EDCI(0.014g，0.070mmol)在室溫下攪拌10分鐘。然后將該混合物中加入于二氯甲烷(2mL)中的(S)-4-((4-甲氧基芐基)(異丙基)氨基)-2-(叔丁氧羰基)丁酸甲酯鹽酸鹽(0.025g，0.067mmol)和三乙胺(0.054mL，0.384mmol)懸浮液。將混合物在室溫下攪拌16小時。將溶液通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。將粗制油狀物用于二氯甲烷中的2％ MeOH和1％三乙胺洗脫進行色譜分析，得到0.035g粘稠淺黃色油狀物(收率89％)。
步驟E(S)-N-(4-((4-甲氧基芐基)(異丙基)氨基)-1-羥基丁烷-2-基)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰胺將(S)-4-((4-甲氧基芐基)(異丙基)氨基)-2-(5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰氨基)丁酸甲酯(0.035g，0.057mmol)和NaBH4(0.022g，0.57mmol)溶于THF/MeOH(5mL，3∶2)中，并加熱至50℃，持續(xù)3小時。將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將殘余物用于二氯甲烷中的5％ MeOH和1％三乙胺洗脫進行色譜分析，得到0.020g凝膠狀物(收率59％)。
步驟F(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(1-羥甲基-3-異丙氨基丙基)-酰胺(32d)向于MeOH(5mL)中的(S)-N-(4-((4-甲氧基芐基)(異丙基)氨基)-1-羥基丁烷-2-基)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-酰胺(0.020g，0.033mmol)溶液中加入濕的Pd/C(0.020g，10重量％)。將混合物用氫氣脫氣數(shù)次，然后在氫氣氛和室溫下攪拌5小時。過濾除去催化劑，并將濾液減壓下濃縮。將殘余物用于二氯甲烷中的10％MeOH和2％三乙胺洗脫進行色譜分析，得到9.4mg無色凝膠狀物(收率60％)。測得MS(ESI+)m/z 475(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.40(d，1H)，8.31(s，1H)，7.87(s，1H)，7.13(m，1H)，7.03(s，1H)，7.01(m，1H)，6.91(m，1H)，4.33(m，1H)，4.22(d，2H)，3.69(m，2H)，2.69(m，2H)，2.37(m，2H)，1.32(m，2H)，1.09(d，3H)，1.01(d，3H)，0.93(d，6H)。
實施例123(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-4-二甲氨基丁酸(33d)的制備步驟A5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸2，5-二氧代吡咯烷-1-基酯將5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(17d；根據(jù)實施例110制備)(25.0g，72.2mmol)、EDCI(18.0g，93.8mmol)和1-羥基吡咯烷-2，5-二酮(9.97g，86.6mmol)懸浮于二氯甲烷中，并室溫下攪拌2小時。用二氯甲烷(500mL)稀釋混合物，并用飽和NH4Cl(2×200mL)、飽和NaHCO3(2×200mL)和鹽水(200mL)洗滌。通過MgSO4干燥有機層，并減壓下濃縮，得到粗制品，為黃色泡沫狀物。
步驟B(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-4-二甲氨基丁酸甲酯向于二氯甲烷中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸2，5-二氧吡咯烷-1-基酯(32.0g，72.2mmol)和2-氨基-4-二甲氨基丁酸甲酯二鹽酸鹽(19.35g，83.0mmol)溶液中加入三乙胺(35mL，253mmol)，并將混合物在室溫下攪拌4小時。減壓下濃縮反應(yīng)混合物，并用二氯甲烷(400mL)稀釋。用飽和NH4Cl(2×200mL)、飽和NaHCO3(2×200mL)和鹽水(200mL)洗滌溶液。通過MgSO4干燥有機層，并減壓下濃縮，得到粗制品。
步驟C(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-4-二甲氨基丁酸(33d)將三甲基硅醇鉀(1.77g，13.8mmol)加入于THF(5mL)中的(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-4-二甲氨基丁酸甲酯(3.36g，6.88mmol)溶液中。將反應(yīng)混合物室溫下攪拌4小時。將HCl(17mL，4M，在二噁烷中)加入混合物中，之后減壓下濃縮。將殘余物懸浮于二氯甲烷中，并過濾。減壓下濃縮濾液，得到2.23g產(chǎn)物(收率68％)。測得MS(ESI-+)m./z 475(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.81(d，1H)，8.02(s，1H)，7.99(s，1H)，7.48(m，1H)，7.25(m，1H)，7.22(s，1H)，7.11(m，1H)，4.50(m，1H)，4.28(d，2H)，3.17(m，1H)，3.04(m，1H)，2.70(s，6H)，2.25(m，2H)，2.13(m，1H)，0.87(d，6H)。
實施例124(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(1-羥甲基-3-哌啶-1-基-丙基)-酰胺(34d)的制備步驟A(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯將(S)-4-溴-2-叔丁氧羰基氨基丁酸甲酯(0.10g，0.34mmol)(如實施例120，步驟A-D制備)和哌啶(1mL)加熱至50℃，持續(xù)16小時，然后冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將殘余物與甲苯(3×10mL)共沸，然后用MeOH/二氯甲烷(1∶9)洗脫進行色譜分析，得到93mg無色油狀物(收率97％)。
步驟B(S)-2-氨基-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯二鹽酸鹽將HCl(0.45mL，4M，在二噁烷中)加入(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯中，并將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應(yīng)混合物減壓下濃縮，并高真空下干燥16小時，得到產(chǎn)物(收率46％)。
步驟C(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]氨基}-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯向于二氯甲烷中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(0.050g，0.14mmol)、(S)-2氨基-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯二鹽酸鹽(0.043g，0.16mmol)、EDCI(0.033g，0.17mmol)和HOBt(0.023g，0.17mmol)溶液中滴加DIEA(0.093g，0.72mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌直至HPLC分析顯示原料消耗完，然后用二氯甲烷稀釋，并用飽和NaHCO3洗滌。將有機層通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物進行色譜分析，得到0.051g產(chǎn)物(收率67％)。
步驟D(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(1-羥甲基-3-哌啶-1-基-丙基)-酰胺(34d)將硼氫化鈉(0.012g，0.31mmol)分批加入熱的(50℃)于MeOH中的(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]氨基]-4-哌啶-1-基-丁酸甲酯(0.022g，0.042mmol)溶液中。將反應(yīng)混合物在50℃下攪拌直至HPLC分析顯示原料消耗完?；旌衔锢鋮s至室溫，并減壓下濃縮。用乙酸乙酯和1N HCl稀釋殘余物。將有機層用1N HCl萃取直至經(jīng)HPLC分析有機層不含產(chǎn)物。將水溶液用NaOH堿化至pH14，然后用二氯甲烷萃取數(shù)次。通過MgSO4干燥合并的有機層，并減壓下濃縮，得到9.1mg油狀物(收率44％)。測得MS(APCI+)m/z 501(M+1)。
實施例125(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(3-二甲氨基-1-二甲基氨基甲?；?-酰胺(35d)的制備向溶于二氯甲烷中的(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-4-二甲氨基丁酸(33d；實施例123)(0.100g，0.21mmol)、二甲胺(0.095g，2.11mmol)、EDCI(0.053g，0.27mmol)和HOBt(0.037g，0.27mmol)溶液中滴加DIEA(0.082g，0.63mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌直至通過HPLC分析觀察原料完全消耗。然后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用飽和NaHCO3洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物在Isolute SPE column flash Si(5g)上用TEA/二氯甲烷(100mL，0.3∶99.7)、TEA/MeOH/二氯甲烷(100mL，0.3∶0.5∶99.2)，TEA/MeOH/二氯甲烷(100mL，0.3∶2.5∶97.2)、TEA/MeOH/二氯甲烷(100mL，0.3∶5∶94.7)梯度洗脫進行色譜分析。獲得最終產(chǎn)物，收率為86％。測得MS(ESI+)m/z 502(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.63(d，1H)，8.01(s，1H)，7.96(s，1H)，7.48(m，1H)，7.23(m，1H)，7.20(s，1H)，7.09(m，1H)，4.98(m，1H)，4.26(d，2H)，3.07(s，3H)，2.84(s，3H)，2.23(m，2H)，2.13(m，1H)，2.03(s，6H)，1.80(m，1H)，1.65(m，1H)，0.86(d，6H)。
實施例126(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(3-二甲氨基-1-甲基氨基甲?；?-酰胺(36d)的制備根據(jù)實施例125的方法制備，用甲胺替代二甲胺。獲得產(chǎn)物，收率為78％。測得MS(ESI+)m/z 488(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.05(d，1H)，8.29(s，1H)，7.86(s，1H)，7.44(m，1H)，7.19(m，1H)，7.02(m，1H)，7.01(s，1H)，6.93(m，1H)，4.78(m，1H)，4.21(d，2H)，2.81(d，3H)，2.50(m，1H)，2.42(m，1H)，2.36(m，1H)，2.23(s，6H)，2.15(m，1H)，1.88(m，1H)，0.92(d，6H)。
實施例127(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(1-氨基甲?；?3-二甲氨基-丙基)-酰胺(37d)的制備根據(jù)實施例125的步方法制備，用氨水替代二甲胺。獲得產(chǎn)物，收率為70％。測得MS(APCI+)m/z 474(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.59(d，1H)，8.07(s，1H)，8.01(s，1H)，7.50(m，1H)，7.39(s，1H)，7.27(m，1H)，7.19(s，1H)，7.11(m，2H)，4.44(m，1H)，4.27(d，2H)，2.24(m，2H)，2.15(m，1H)，2.00(s，6H)，1.88(m，1H)，1.71(m，1H)，0.86(d，6H)。
實施例128(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸[1-(2-二甲氨基乙基)-2-羥基-2-甲基丙基]-酰胺(38d)制備向冷卻的(0℃)于THF(2mL)中的(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羰基]-氨基}-4-二甲氨基丁酸甲酯(參見實施例123，步驟A-B)(0.112g，0.229mmol)溶液中滴加甲基溴化鎂(2.00mL，1.4M的溶液)。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并在氮氣氛下攪拌16小時。將混合物在乙酸乙酯和飽和NH4Cl之間分配。分層，并用乙酸乙酯萃取水層兩次。通過Na2SO4干燥合并的有機層，過濾，并減壓下濃縮。將殘余物在Isolute SPEcolumn flash Si(5g)上用TEA/CH2Cl2(100mL，0.3∶99.7)、TEA/MeOH/CH2Cl2(100mL，0.3∶0.5∶99.2)、TEA/MeOH/CH2Cl2(100mL，0.3∶2.5∶97.2)、TEA/MeOH/CH2Cl2(100mL，0.3∶5∶94.7)梯度洗脫進行色譜分析。獲得最終產(chǎn)物，收率為41％。測得MS(APCI+)m/z 489(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.00(s，1H)，7.97(d，1H)，7.89(s，1H)，7.48(m，1H)，7.23(m，1H)，7.18(s，1H)，7.10(m，1H)，4.58(m，1H)，4.27(d，2H)，3.88(m，1H)，2.23(m，2H)，2.07(s，6H)，1.88(m，1H)，1.43(m，1H)，1.13(s，3H)，1.04(s，3H)，0.86(dd，6H)。
實施例129(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸{1-羥甲基-3-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丙基}-酰胺(39d)的制備步驟A(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-碘代丁酸甲酯將于丙酮(25mL)中的(S)-4-溴-2-叔丁氧羰基氨基丁酸甲酯(1.19g，4.0mmol)(實施例120，步驟A-D)和NaI(6.0g，40.0mmol)的混合物加熱至70℃，持續(xù)2小時。然后將混合物冷卻至室溫，減壓下濃縮，并在水(10mL)和乙醚(40mL)之間分配。分層，并用水(10mL)洗滌有機層，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到1.26g產(chǎn)物(收率92％)。
步驟B(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丁酸甲酯將于二噁烷(1mL)中的(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-碘代丁酸甲酯(0.200g，0.58mmol)、(2-甲氧基乙基)-甲胺(0.062g，0.70mmol)和三乙胺(0.41mL，2.9mmol)混合物在70℃下攪拌16小時。將混合物冷卻至室溫，減壓下濃縮，并溶于二氯甲烷(20mL)中。用水(3×10mL)和鹽水(10mL)洗滌溶液，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮。將褐色油狀物用乙醚洗脫進行色譜分析，得到0.87g淺黃色油狀物(收率49％)。
步驟C(S)-2-氨基-4-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丁酸甲酯二鹽酸鹽將(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丁酸甲酯(0.086g，0.28mmol)用HCl(1mL，4M，在二噁烷中)處理并超聲。濃縮混合物，并高真空下干燥得到產(chǎn)物。
步驟D(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6羰基]-氨基}-4-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丁酸甲酯向于二氯乙烷(2mL)中的5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(如實施例110步驟A-G制備)(0.094g，0.27mmol)、(S)-2-氨基-4-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丁酸甲酯二鹽酸鹽(0.079g，0.28mmol)、EDCI(0.057g，0.30mmol)和HOBt(0.045g，0.30mmol)溶液中滴加三乙胺(0.23mL，1.62mmol)。將混合物在室溫下攪拌2.5小時。減壓下濃縮混合物，并用乙酸乙酯洗脫進行色譜分析，得到0.100g產(chǎn)物(收率69％)步驟E(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸{1-羥甲基-3-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基]-丙基}-酰胺(39d)將(S)-2-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6羰基]-氨基}-4-[(2-甲氧基乙基)-甲氨基-丁酸甲酯(0.023g，0.043mmol)和NaBH4(0.016g，0.43mmol)溶于THF/MeOH(7mL，5∶2)，并在密閉小瓶中加熱至70℃，持續(xù)5小時。將混合物冷卻至室溫，減壓下濃縮，并用TEA/乙酸乙酯(1∶4)洗脫進行色譜分析，得到0.007g產(chǎn)物，為粘稠油狀物(收率31％)。測得MS(APCI+)m/z 505(M+1)。
實施例130(S)-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸[3-二甲氨基-1-(2-羥基乙基氨基甲?；?-丙基]-酰胺(40d)的制備根據(jù)實施例125的方法制備，用2-氨基乙醇替代二甲胺。獲得產(chǎn)物，收率為51％。測得MS(APCI+)m/z 518(M+1)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ9.00(d，1H)，8.29(s，1H)，7.86(s，1H)，7.81(t，1H)，7.18(m，1H)，7.02(m，1H)，7.00(s，1H)，6.92(m，1H)，4.82(m，1H)，4.21(d，2H)，3.42(m，2H)，2.86(m，1H)，2.49(m，2H)，2.35(m，1H)，2.23(s，6H)，2.17(m，2H)，1.94(m，1H)，0.92(d，6H)。
實施例131N’-[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-N，N-二甲基丙烷-1，3-二胺(41d)的制備
將于二噁烷中的6-溴-5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑(15d；實施例110，步驟A-E)(0.030g，0.079mmol)、3-(二甲氨基)丙胺(0.012g，0.118mmol)、BINAP(0.009g，0.016mmol)、Pd2dba3(0.007g，0.008mmol)和NaOtBu(0.008g，0.087mmol)混合物在燒瓶中混合，并用氮氣凈化三次。然后將反應(yīng)混合物加熱至100℃，持續(xù)16小時。將混合物冷卻至室溫，并在乙酸乙酯(20mL)和鹽水(20mL)中之間分配。用乙酸乙酯萃取水相，通過MgSO4干燥合并的有機層，并減壓下濃縮。將殘余物在硅膠柱上用含有0.2％三乙胺的丙酮/乙醚(1∶1.5)洗脫進行色譜分析。將產(chǎn)物再用于二氯甲烷中的5％ MeOH洗脫進行色譜分析，得到0.022g產(chǎn)物，為無色油狀物(收率69％)。測得MS(ESI+)m/z 403(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.70(s，1H)，6.95(m，3H)，6.80(m，1H)，6.40(s，1H)，5.48(br s，1H)，4.06(d，2H)，3.28(m，2H)，2.43(m，2H)，2.35(m，1H)，2.20(s，6H)，1.86(m，2H)，0.94(d，6H)。
實施例132[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-哌啶-4-基-胺的制備步驟A4-[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯如實施例131制備，用4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯代替3-(二甲氨基)丙胺。將粗制品在硅膠柱上用乙醚/己烷(1∶2)洗脫進行色譜分析，得到0.035g產(chǎn)物，為黃色油狀物(收率78％)。
步驟B[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-哌啶-4-基-胺(42d)向溶于MeOH(2mL)中的4-[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.035g，0.070mmol)溶液中加入HCl(2mL，4M，在二噁烷中)。將混合物在室溫下攪拌40分鐘，并減壓下濃縮。將殘余物與MeOH(2×)共沸，得到0.032g黃色固體，為二鹽酸鹽(收率97％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.06(s，1H)，7.26(m，1H)，7.20(m，1H)，7.04(m，1H)，6.93(s，1H)，6.89(s，1H)，4.27(d，2H)，3.95(m，1H)，3.52(m，2H)，3.28(m，2H)，2.34(m，3H)，1.83(m，2H)，0.95(d，6H)。
實施例133[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-哌啶-3-基甲胺(43d)的制備步驟A3-{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基氨基]-甲基}-哌啶-1-羧酸叔丁酯根據(jù)實施例131的方法制備，用3-氨甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯代替3-(二甲氨基)丙胺。將粗制品在硅膠柱上用乙醚/己烷(1∶2)洗脫進行色譜分析，得到0.051g產(chǎn)物，為黃色泡沫狀物(收率94％)。
步驟B[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基]-哌啶-3-基甲胺(43d)向冷卻的(0℃)溶于MeOH(3mL)中的{[5-(2，4-二氟苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-基氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.051g，0.099mmol)溶液中加入濃HCl(0.18mL)。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌16小時。加入另外的濃HCl(0.4mL)，并將混合物在室溫下攪拌24小時。減壓下濃縮混合物，并與MeOH(3×)共沸，得到0.037g乳白色固體(收率77％)。測得MS(ESI+)m/z 415(M+1)。
實施例1342-(5-{2-[3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-脲基甲基]-4-氟苯氧基}-吲唑-1-基)-N，N-二甲基乙酰胺(47d)的制備本發(fā)明的化合物47d的合成反應(yīng)路線顯示在圖54中。
步驟A2-[5-(2-氰基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-N，N-二甲基乙酰胺(45d)向于DMF(6mL)中的5-氟-2-(1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(44d)(0.200g，0.790mmol)溶液中加入2-氯-N，N二甲基乙酰胺(0.115g，0.948mmol)和四丁基碘化銨(0.088g，0.237mmol)，之后加入K2CO3(0.164g，1.19mmol)。在氮氣氛下將混合物加熱至110℃，持續(xù)8小時。將反應(yīng)混合物減壓下濃縮，并溶于二氯甲烷中。用1N HCl洗滌溶液，過濾，并在Biotage柱上用于二氯甲烷中的5％ MeOH洗脫進行色譜分析，得到0.032g產(chǎn)物(收率12％)。
步驟B2-[5-(2-氨甲基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-N，N-二甲基乙酰胺(46d)向于EtOH(0.5mL)中的2-[5-(2-氰基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-N，N-二甲基乙酰胺(45d)(0.090g，0.266mmol)溶液中加入CoBr2(27μL，0.005mmol)，之后加入[2，2′]聯(lián)吡啶(81μL，0.015mmol)。將NaBH4(0.030g，0.798mmol)加入混合物中，并將其在室溫下攪拌18小時。用另一份CoBr2、[2，2′]聯(lián)吡啶和NaBH4處理混合物，并攪拌另外18小時。用MeOH之后乙酸終止混合物反應(yīng)，然后減壓下濃縮。將白色殘余物在飽和NaHCO3和乙酸乙酯之間分配。過濾有機層，并減壓下濃縮，得到10mg白色固體(收率11％)。
步驟C5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基胺在氮氣氛下將溶于MeOH(65mL)中的對甲苯基-肼鹽酸鹽(15.86g，100mmol)和新戊酰乙腈(17.9g，143mmol)溶液加熱回流18小時。將混合物冷卻至室溫，并減壓下濃縮。將殘余物用乙醚磨碎，并過濾收集。將固體在高真空下干燥，得到26.6g白色固體(收率99％)。
步驟D(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯將冷卻的(0℃)于水(80mL)和乙酸乙酯(180mL)中的5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基胺(26.6g，100mmol)的兩相溶液用NaOH(10g，250mmol)處理，之后用氯甲酸三氯乙酯(29.7g，140mmol)處理。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌1小時。分層，用鹽水(100mL)洗滌有機層，通過MgSO4干燥，通過硅藻土過濾，并減壓下濃縮，得到40.3g淺黃色固體(收率99％)。
步驟E2-(5-{2-[3-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-脲基甲基]-4-氟苯氧基}-吲唑-1-基)-N，N-二甲基乙酰胺(47d)向于DMF(1mL)中的2-5-(2-氨甲基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-N，N-二甲基乙酰胺(46d)(0.010g，0.029mmol)和(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯(0.013g，0.032mmol)溶液中加入DIEA(0.01mL，0.058mmol)。在氮氣氛下將混合物加熱至80℃，持續(xù)18小時。將混合物減壓下濃縮，并溶于二氯甲烷中。用1N HCl洗滌溶液，過濾，并減壓下濃縮。將油狀物用二氯甲烷/乙醚(10∶1)，然后用于二氯甲烷中的5％ MeOH洗脫進行柱色譜分析，得到6.3mg淺黃色油狀物(收率36％)。測得MS(APCI+)m/z 598(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ829(s，1H)，7.97(s，1H)，7.58(d，1H)，7.36(d，2H)，7.28(d，2H)，7.19(d，1H)，7.12(d，1H)，7.07(m，2H)，6.99(m，1H)，6.84(m，1H)，6.24(s，1H)，5.40(s，2H)，4.28(d，2H)，3.10(s，3H)，2.84(s，3H)，2.35(s，3H)，1.25(s，9H)。
實施例1351-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-脲(48d)的制備步驟A1-異丁基-5-甲氧基-1H-吲唑?qū)⒂贒MF(100mL)中的5-甲氧基-1H-吲唑(5.00g，33.7mmol)溶液用K2CO3(5.83g，42.2mmol)處理，并在室溫下攪拌15分鐘。向該溶液中加入1-溴-2-甲基丙烷(5.09g，37.1mmol)，并將得到的混合物加熱至110℃，持續(xù)18小時。加入另一當(dāng)量的1-溴-2-甲基-丙烷，并將混合物再繼續(xù)加熱48小時。將混合物減壓下濃縮，并溶于二氯甲烷中。用1N HCl洗滌溶液，過濾，并減壓下濃縮。將殘余物在Biotage柱上用己烷/乙醚(5∶1)洗脫進行色譜分析，得到2.51g橙色油狀物(收率36％)。
步驟B1-異丁基-1H-吲唑-5-醇向冷卻的(-78℃)于二氯甲烷(100mL)中的1-異丁基-5-甲氧基-1H-吲唑(2.57g，12.6mmol)溶液中加入BBr3(25mL，1M溶液，在二氯甲烷中)。將混合物在-78℃下攪拌2小時，然后暖至室溫，并攪拌18小時。將反應(yīng)混合物傾倒入冰水中，并用二氯甲烷萃取。過濾有機萃取液，并減壓下濃縮，得到2.3g固體(收率96％)。
步驟C5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐腈向于DMF(75mL)中的1-異丁基-1H-吲唑-5-醇(2.33g，12.2mmol)和K2CO3(2.03g，14.7mmol)溶液中加入2，5-二氟芐腈(1.87g，13.5mmol)。在氮氣氛下，jiang混合物加熱至110℃，持續(xù)18小時。將反應(yīng)混合物減壓下濃縮，并將殘余物溶于二氯甲烷中。用1N HCl洗滌溶液，過濾，并減壓下濃縮。將殘余物在Biotage柱上用己烷/乙醚(5∶2)洗脫進行色譜分析，得到3.05g淺黃色油狀物(收率81％)。
步驟D5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐胺向用氮氣凈化的于MeOH(50mL)中的5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(3.05g，9.86mmol)溶液中加入濃HCl(1.6mL)和Pd(OH)2/C(15wt％，0.457g)。在氫氣氛下，將混合物在室溫下攪拌18小時。過濾除去催化劑，并減壓下濃縮溶液，得到3.32g淺黃色泡沫狀物(收率96％)。
步驟E1-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-3-[5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐基]-脲向冷卻的(0℃)于二氯甲烷(10mL)中的5-氟-2-(1-異丁基-1H-吲唑-5-氧基)-芐胺(0.364g，1.04mmol)和DIEA(0.5mL，2.08mmol)溶液中加入三光氣(0.131g，0.374mmol)。在氮氣氛下，將混合物在0℃下攪拌1小時，然后在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)混合物減壓下濃縮，并懸浮于二氯甲烷(10mL)中，制得0.123M的溶液。將0.4mL該溶液(0.015g，0.048mmol)用5-叔丁基-異噁唑-3-基胺(0.008g，0.053mmol)處理。獲得產(chǎn)物，收率為44％。測得MS(APCI+)m/z 480(M+1)。
實施例1361-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-3-{5-氟-2-[1-(2-哌嗪-1-基-乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐基}-脲(49d)的制備步驟A2-[1-(2，2-二甲氧基乙基-1H-吲唑-5-氧基)-5-氟芐腈向冷卻的(0℃)于DMF(4mL)中的5-氟-2-(1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(0.100g，0.395mmol)和2-溴-1，1-二甲氧基乙烷(0.114g，0.671mmol)溶液中加入NaH(0.024g 60％，0.59mmol)。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌1小時。將四丁基碘化銨(0.029g，0，079mmol)加入混合物中，并將其加熱至60℃，持續(xù)3小時。將混合物冷卻至室溫，并用水(4mL)稀釋，用乙醚(3×30mL)萃取。用水(2×5mL)和鹽水洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用乙酸乙酯/己烷(1∶2)洗脫進行色譜分析，得到0.066g產(chǎn)物(收率49％)。
步驟B5-氟-2-[1-(2-氧代乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐腈在3小時內(nèi)向于二氯甲烷(62mL)中的2-[1-(2，2-二甲氧基乙基-1H-吲唑-5-氧基)-5-氟芐腈(1.42g，4.16mmol)溶液中分批加入碘代三甲基硅烷(3.33g，16.64mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將NaHCO3水溶液(60mL)加入混合物中，并將其用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用Na2S2O4和鹽水洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。粗制品沒有進一步純化而用于下一步反應(yīng)。
步驟C4-{2-[5-(2-氰基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯向于二氯乙烷(10mL)中的5-氟-2-[1-(2-氧代乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐腈(0.307g，1.04mmol)和三乙酰氧基氫硼化物(0.66g，3.1mmol)溶液中加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.65g，3.49mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。用MeOH(2mL)終止反應(yīng)混合物反應(yīng)，并用乙酸乙酯(100mL)稀釋。用NaHCO3水溶液和鹽水洗滌溶液，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用乙酸乙酯/己烷(2∶3，含有1％三乙胺)洗脫進行色譜分析，得到0.29g產(chǎn)物(收率60％)。
步驟D4-{2-[5-(2-氨甲基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯向于EtOH(6mL)中的4-{2-[5-(2-氰基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.160g，0.344mmol)、CoBr2(0.008g，0.034mmol)和[2，2′]聯(lián)吡啶(0.016g，0.010mmol)溶液中加入NaBH4(0.039g，1.0mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時。用MeOH(3mL)和乙酸(10滴)終止反應(yīng)物反應(yīng)。減壓下濃縮溶液，并用乙酸乙酯稀釋。用NaHCO3水溶液和鹽水洗滌混合物，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將粗制油狀物用于乙酸乙酯中的1％三乙胺，MeOH/CH2Cl2/己烷(1∶15∶15，含1％三乙胺)，然后MeOH/CH2Cl2/己烷(1∶10∶10，1％三乙胺)洗脫進行色譜分析。獲得純產(chǎn)物，收率86％。
步驟E(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸4-硝基苯酯將于二氯甲烷中的3-叔丁基-異噁唑-5-基胺(2.50g，17.83mmol)溶液用吡啶(2mL，26.7mmol)處理，并用氯甲酸對硝基苯酯(3.77g，18.73mmol)處理。將混合物室溫下攪拌2小時。用1N HCl洗滌反應(yīng)混合物，干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用乙醚磨碎，并過濾收集，得到2.2g產(chǎn)物(收率41％)。
步驟F4-[2-(5-{2-[3-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)脲基甲基]-4-氟苯氧基}-吲唑-1-基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯將于二氯甲烷(2mL)中的4-{2-[5-(2-氨甲基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-乙基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.050g，0.107mmol)溶液用(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸4-硝基苯酯(0.081g，0.266mmol)處理，并在室溫下攪拌24小時。用乙酸乙酯(60mL)稀釋混合物，用1N NaOH(5mL)、水(2×10mL)和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用丙酮/己烷(2∶3，然后1∶1)洗脫進行色譜分析，得到0.056g產(chǎn)物(收率83％)。
步驟G1-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-3-{5-氟-2-[1-(2-哌嗪-1-基-乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐基}-脲將4-[2-(5-{2-[3-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)脲基甲基]-4-氟苯氧基}-吲唑-1-基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.056g，0.088mmol)用TFA/CH2Cl2(1∶1，2mL)處理，并室溫下攪拌1小時。減壓下濃縮混合物，并與甲苯共沸。用乙酸乙酯(40mL)稀釋殘余物，并用1N NaOH和鹽水洗滌。減壓下濃縮溶液，得到0.038g產(chǎn)物(收率80％)。測得MS(ESI+)m/z 536(M+1)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.35(d，1H)，7.15(dd，1H)，7.08(s，1H)，7.05(d，1H)，6.88(m，1H)，6.76(m，1H)，6.28(m，1H)，5.99(s，1H)，4.46(m，4H)，2.86(m，2H)，2.79(m，4H)，2.43(m，4H)，1.26(s，9H)。
實施例1371-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-3-{2-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-5-氟-芐基}-脲(50d)的制備步驟A2-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-5-氟苯腈將于二氯乙烷(3mL)中的5-氟-2-[1-(2-氧代乙基)-1H-吲唑-5-氧基]芐腈(0.110g，0.372mmol)(根據(jù)實施例136的步驟A-B制備)和三乙氧基硼氫化鈉(0.39g，1.9mmol)溶液用二甲胺(0.17g，3.7mmol)處理，并室溫下攪拌3小時。用MeOH(1mL)終止反應(yīng)物反應(yīng)，并用乙酸乙酯(30mL)稀釋。將溶液用NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用乙酸乙酯，然后用丙酮/己烷(2∶3，含1％三乙胺)洗脫進行色譜分析，得到0.115g產(chǎn)物(收率95％)。
步驟B{2-[5-(2-氨甲基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-乙基}-二甲胺向冷卻的(0℃)于THF(3mL)中的2-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-5-氟苯腈(0.115g，0.303mmol)溶液中加入LAH(0.61mL，1M，在THF中)。將混合物暖至室溫，并攪拌1.5小時。用水(23μL)、3N NaOH(23μL)和水(69μL)終止混合物反應(yīng)。過濾除去鹽，并減壓下濃縮濾液，得到0.113g產(chǎn)物(收率97％)。
步驟C1-(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-3-{2-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-吲唑-5-氧基]-5-氟-芐基}-脲將于DMF(1mL)中的{2-[5-(2-氨甲基-4-氟苯氧基)-吲唑-1-基]-乙基}-二甲胺(0.020g，0.061mmol)溶液用(3-叔丁基-異噁唑-5-基)-氨基甲酸4-硝基苯酯(0.020g，0.067mmol)(根據(jù)實施例136步驟E制備)處理。在氮氣氛和室溫下將混合物攪拌18小時。將反應(yīng)混合物用二氯甲烷/乙醚(10∶1)，然后用于二氯甲烷中的5％ MeOH洗脫進行色譜分析，得到5.3mg淺黃色油狀物(收率18％)。測得MS(APCl+)m/z 495(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ10.14(s，1H)，7.98(s，1H)，7.74(d，1H)，7.22(d，1H)，7.16(m，2H)，7.08(m，1H)，6.88(m，2H)，5.93(s，1H)，4.48(t，2H)，4.35(d，2H)，2.70(t，2H)，2.17(s，6H)，1.23(s，9H)。
實施例1381-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-{5-氟-2-[1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐基}-脲(51d)的制備步驟A5-氟-2-[1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吲唑-5-氧基-芐腈將于DMF(4mL)中的5-氟-2-(1H-吲唑-5-氧基)-芐腈(0.100g，0.395mmol)溶液用NaH(0.022g，60％，0.56mmol)處理，并攪拌5分鐘。加入2，2-二甲基環(huán)氧乙烷(0.035g，0.48mmol)，并將溶液在室溫下攪拌1小時。然后將反應(yīng)混合物加熱至80℃，持續(xù)1.5小時。將溶液冷卻至室溫，用乙醚(50mL)稀釋，用水(3×5mL)和鹽水洗滌，MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脫進行色譜分析，得到0.070g產(chǎn)物(收率47％)。
步驟B2-{1-[2-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-2-甲基-丙基]-1H-吲唑-5-氧基}-5-氟芐腈向冷卻的(0℃)于二氯甲烷(2mL)中的5-氟-2-[1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐腈(0.070g，0.215mmol)和2，6-二甲基吡啶(0.030g，0.284mmol)溶液中加入TBSOTf(0.063g，0.240mmol)。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌1小時。用乙醚(50mL)稀釋混合物，用0.2N HCl、NaHCO3和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物用乙醚/己烷(1∶3)洗脫進行色譜分析，得到0.071g淺黃色油狀物(收率94％)。
步驟C2-{1-[2-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-甲基丙基]-1H-吲唑-5-氧基}-5-氟芐胺向冷卻的(0℃)于THF(2mL)中的2-{1-[2-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-甲基-丙基]-1H-吲唑-5-氧基}-5-氟芐腈(0.071g，0.162mmol)溶液中加入LAH(0.32mL，1M，在THF中)。將溶液暖至室溫，并攪拌1小時。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并用水(12μL)、3N NaOH(12μL)和水(36μL)終止反應(yīng)。過濾除去鹽，并將濾液減壓下濃縮，沒有進一步純化而用于下一步反應(yīng)。
步驟D(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯5分鐘內(nèi)向冷卻的(10℃)于乙酸乙酯(45mL)中的5-叔丁基-2甲基-2H-吡唑-3-基胺(3.75g，24.5mmol)和NaOH(1.5g，在20mL水中)溶液中加入氯甲酸2，2，2-三氯乙酯(7.52g，35.5mmol)。將反應(yīng)混合物暖至室溫，并攪拌2小時。用乙酸乙酯稀釋混合物，并分層。用水和鹽水洗滌有機層，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。用乙酸乙酯/二氯甲烷稀釋殘余物，并用氨甲基二氧化硅(aminomethyl silica)(10g)處理1小時。過濾混合物，并將濾液減壓下濃縮，得到產(chǎn)物。
步驟E1-(2-{1-[2-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-甲基-丙基]-1H-吲唑-5-氧基}-5-氟芐基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-脲將于DMA(3mL)中的2-{1-[2-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-甲基-丙基]-1H-吲唑-5-氧基}-5-氟芐胺(0.072g，0.162mmol)、(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯(0.080g，0.24mmol)和DIEA(0.06mL，0.324mmol)混合物加熱至80℃，持續(xù)16小時。用乙醚(60mL)稀釋混合物，用水(3×5mL)和鹽水洗滌，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。殘余物在硅膠柱上用乙酸乙酯/己烷(3∶1)洗脫進行色譜分析，得到0.084g產(chǎn)物(收率83％)。
步驟F1-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-3-{5-氟-2-[1-(2-羥基-2-甲基丙基)-1H-吲唑-5-氧基]-芐基}-脲向于二氯甲烷(3mL)中的(2-{1-[2-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-甲基-丙基]-1H-吲唑-5-氧基}-5-氟芐基)-3-(5-叔丁基-2-甲基-2H-吡唑-3-基)-脲(0.084g，0.135mmol)溶液中加入TBAF(0.70mL，1M，在THF中)。將混合物在室溫下攪拌5天。將反應(yīng)混合傾物倒入NH4Cl中，并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用鹽水洗滌合并的萃取液，通過MgSO4干燥，并減壓下濃縮。將殘余物在硅膠柱上用丙酮/己烷(2∶1)洗脫進行色譜分析，得到0.060g產(chǎn)物(收率87％)。測得MS(ESI+)m/z 509(M+1)；1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.45(s，1H)，7.98(s，1H)，7.74(d，1H)，7.17(m，3H)，7.08(m，1H)，6.85(m，2H)，5.95(s，1H)，4.66(s，1H)，4.33(d，2H)，4.30(s，2H)，2.50(s，3H)，1.18(s，9H)，1.12(s，6H)。
在前的描述僅作為對本發(fā)明原理的例證。此外，由于很多的修改和變化對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是非常清楚的，因此無意于將本發(fā)明限制于上述具體結(jié)構(gòu)和方法。因此，所有適當(dāng)?shù)男薷暮偷葍r物將認為落入所附的權(quán)利要求所定義的本發(fā)明的范圍內(nèi)。
詞語“包含”，“包括”，“含有”當(dāng)在本發(fā)明的說明書和所附的權(quán)利要求書中使用時，用于明確所述的特征、整數(shù)、成分或步驟的存在，但是它們并不排除它們的一種或多種其它特征、整數(shù)、成分、步驟或基團的存在或添加。
權(quán)利要求
1.一種化合物，包括其拆分的對映體、非對映體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有下式結(jié)構(gòu) 其中Y是C、N；W是C、N、S或O，條件是當(dāng)Y是C時W是N、S或O，而當(dāng)Y是N時W是C或N；U是CH或N；V是C-E或N；X是O、S、SO、SO2、NR7、C＝O、CHR7、-C＝NOR1、-C＝CHR1或CHOR1；R1是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；R7是H或取代或未取代的甲基；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；A是H、OH、胺保護基、Zn-NR2R3、Zn-NR2(C＝O)R2、Zn-SO2R2、Zn-SOR2、Zn-SR2、Zn-OR2、Zn-(C＝O)R2、Zn-(C＝O)OR2、Zn-O-(C＝O)R2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R2和R3獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者R2與R3和N一起形成在所述環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；B是H、NH2或取代或未取代的甲基；E是H、Zn-NR2R3、Zn-(C＝O)R4、Zn-(C＝O)R5、Zn-NR5(C＝O)R5、Zn-O(C＝O)R5、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SO2R4、Zn-SOR5、Zn-SR5、Zn-NH(C＝O)NHR5或R5；R4是取代或未取代的天然或非天然氨基酸、保護的天然或非天然氨基酸、NH(CHR6)(CH2)mOR5，其中m是1-4的整數(shù)或NR2R3；R5是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R6是天然氨基酸側(cè)鏈、Zn-NR2R3、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5或Zn-SR5；且n是0或1，條件是當(dāng)B是H并且A是CH＝CH-R8，其中R8是取代或未取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基時，那么X-Ar1是取代基，該取代基中當(dāng)X是O、S、C＝O、S＝O、C＝CH2、CO2、NH或N(C1-C8-烷基)時Ar1不是取代或未取代的芳基、雜芳基、NH-烷基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、NH-烷氧基或NH-二烷基酰胺。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是苯基、噻吩基、呋喃基、萘基、異噁唑基、吲哚基、吡啶基、嘧啶基、2-哌啶酮、3-哌啶酮或4-哌啶酮。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中Ar1是4-氯苯基、4-氟苯基、3-甲基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-(MeS)-苯基硫化物、3-(MeSO2)-苯基或者3-甲基-4-氟苯基。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中NR2R3是NH2、哌啶基、吡咯烷基、 或
5.權(quán)利要求1的化合物，其中A是H、4-MeO-Ph-(CH2)、NH2、CH2CH＝CH2、CH2CH(OH)CH2OH、CH2C(＝O)H、CH2-異噁唑、(CH2)NH2、(CH2)NHBoc、CH＝CHPh、(C＝O)H、CH2OH、CH2OCH3、(C＝O)Me、(C＝O)Et、甲基、乙基、異丙基、CH2CF3、HN(C＝O)Me、SO2Me、SO2Ph、PhO、PhNH或4-MeO-PhNH。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是N，W是C，U是C且V是N。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是N，W是C，U是N且V是C。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是C，W是N，U是C且V是C。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是C，W是O，U是C且V是C。
10.一種化合物，包括其拆分的對映體、非對映體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有下式結(jié)構(gòu) 其中X是O、S、SO、SO2、NR7、C＝O、CHR7、-C＝CHR1、-C＝NOR1或CHOR1；R1是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；R7是H或取代或未取代的甲基；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；A是H、OH、胺保護基、Zn-NR2R3、Zn-NR2(C＝O)R2、Zn-SO2R2、Zn-SOR2、Zn-SR2、Zn-OR2、Zn-(C＝O)R2、Zn-(C＝O)OR2、Zn-O-(C＝O)R2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R2和R3獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者R2與R3和N一起形成在所述環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；B是H、NH2或取代或未取代的甲基；E是H、Zn-NR2R3、Zn-(C＝O)R5、Zn-O(C＝O)R5、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SO2R4、Zn-SOR5、Zn-SR5或R5；R5是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；且n是0或1。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中X是O。
12.權(quán)利要求10的化合物，其中X是S。
13.權(quán)利要求10的化合物，其中X是NR7。
14.權(quán)利要求10的化合物，其中X是C＝O。
15.權(quán)利要求10的化合物，其中X是CHR7。
16.權(quán)利要求10的化合物，其中X是C＝NOR1。
17.權(quán)利要求10的化合物，其中X是C＝CHR1。
18.權(quán)利要求10的化合物，其中X是CHOR1。
19.一種化合物，包括其拆分的對映體、非對映體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有下式結(jié)構(gòu) 其中X是O、S、SO、SO2、NR7、C＝O、CHR7、-C＝NOR1、-C＝CHR1或CHOR1；R1是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；R7是H或取代或未取代的甲基；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；A是H、OH、胺保護基、Zn-NR2R3、Zn-NR2(C＝O)R2、Zn-SO2R2、Zn-SOR2、Zn-SR2、Zn-OR2、Zn-(C＝O)R2、Zn-(C＝O)OR2、Zn-O-(C＝O)R2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R2和R3獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者R2與R3和N一起形成在所述環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；B是H、NH2或取代或未取代的甲基；E是Zn-(C＝O)R4、Zn-NR5(C＝O)R5、Zn-NH(C＝O)NHR5或Zn-SO2R4；R4是取代或未取代的天然或非天然氨基酸、保護的天然或非天然氨基酸、NH(CHR6)(CH2)mOR5，其中m是1-4的整數(shù)或NR2R3；R5是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R6是天然氨基酸側(cè)鏈、Zn-NR2R3、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5或Zn-SR5；且n是0或1
20.一種治療或預(yù)防p38介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包括對有此需要的人或動物給予有效治療或預(yù)防所述p38介導(dǎo)的疾病的量的化合物或包含所述化合物的藥物組合物，其中所述化合物具有下式結(jié)構(gòu) 其中Y是C或N；W是C、N、S或O，條件是當(dāng)Y是C時W是N、S或O，而當(dāng)Y是N時W是C或N；U是CH或N；V是C-E或N；X是O、S、SO、SO2、NR7、C＝O、CHR7、-C＝NOR1、-C＝CHR1或CHOR1；R1是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；R7是H或取代或未取代的甲基；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；A是H、OH、胺保護基、Zn-NR2R3、Zn-NR2(C＝O)R2、Zn-SO2R2、Zn-SOR2、Zn-SR2、Zn-OR2、Zn-(C＝O)R2、Zn-(C＝O)OR2、Zn-O-(C＝O)R2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R2和R3獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的，或者R2與R3和N一起形成在所述環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；B是H、NH2或取代或未取代的甲基；E是H、Zn-NR2R3、Zn-(C＝O)R4、Zn-(C＝O)R5、Zn-NR5(C＝O)R5、Zn-O(C＝O)R5、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5、Zn-SR5、Zn-NH(C＝O)NHR5或R5；R4是取代或未取代的天然或非天然氨基酸、保護的天然或非天然氨基酸、NH(CHR6)(CH2)mOR5，其中m是1-4的整數(shù)或NR2R3；R5是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R6是天然氨基酸側(cè)鏈、Zn-NR2R3、Zn-OR5、Zn-SO2R5、Zn-SOR5或Zn-SR5且n是0或1，條件是當(dāng)B是H并且A是CH＝CH-R8，其中R8是取代或未取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基時，那么X-Ar1是取代基，該取代基中當(dāng)X是O、S、C＝O、S＝O、C＝CH2、CO2、NH或N(C1-C8-烷基)時Ar1不是取代或未取代的芳基、雜芳基、NH-烷基、NH-環(huán)烷基、NH-雜環(huán)烷基、NH-芳基、NH-雜芳基、NH-烷氧基或NH-二烷基酰胺。
22.權(quán)利要求20的方法，其中Y是N，W是C，U是C且V是N。
23.權(quán)利要求20的方法，其中Y是N，W是C，U是N且V是C。
24.權(quán)利要求20的方法，其中Y是C，W是N，U是C且V是C。
25.權(quán)利要求20的方法，其中Y是C，W是O，U是C且V是C。
26.權(quán)利要求20的方法，其中所述p38介導(dǎo)的疾病是炎癥性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增生性疾病、傳染病、病毒性疾病或神經(jīng)變性性疾病。
27.一種化合物，包括其拆分的對映體、非對映體、溶劑合物和藥學(xué)可接受的鹽，所述化合物具有下式結(jié)構(gòu) 其中Y是CR1、O、S或NR2；W是CR3、N、NR4、S或O，條件是當(dāng)Y是CR1時W是NR4、S或O，而當(dāng)Y是NR2時W是CR3或N；R3是H、NH2、F、Cl、甲基或取代的甲基；R4是H、甲基或取代的甲基；R1和R2獨立地是H、OH、胺保護基、Zn-NRaRb、Zn-NRa(C＝O)Rb、Zn-SO2Ra、Zn-SORa、Zn-SRa、Zn-ORa、Zn-(C＝O)Ra、Zn-(C＝O)ORa、Zn-O-(C＝O)Ra、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或Zn-AR1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；Ar1是芳基或雜芳基，它們各自可以是取代或未取代的；Ra和Rb獨立地是H、OH、胺保護基、醇保護基、酸保護基、硫保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-AR1可以是取代或未取代的，或者Ra和Rb與它們共同連接的原子一起形成在環(huán)中具有1個或多個雜原子的飽和或部分不飽和的雜環(huán)，其中所述雜環(huán)可以是取代或未取代的，并且其中所述雜環(huán)可以和芳環(huán)稠合；Z是具有1-4個碳原子的亞烷基或者具有2-4個碳原子的亞鏈烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基可以是取代或未取代的；n是0或1；U是CRc或N；V是CRc或N；Rc是H、F、Cl、甲基或取代的甲基；X是O、S、SO、SO2、NR5、C＝O、CH2、CH2Zn-OH或C＝NORd；R5是H、甲基或取代的甲基；Rd是H、PO3H2、SO3H2、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；G、H、J和T獨立地是N或CRz，條件是當(dāng)所述G、H、J和T中的任意一個是N時，G、H、J或T為N的總數(shù)不超過2；Rz是H、F、Cl、Br、CF3、OR6、SR6、低級烷基(C1-C4)、CN或NR6R7；R6和R7獨立地是H、CF3、低級烷基(C1-C4)或低級雜烷基(C1-C4)；Q是-NR8CONH-、-NHCO-、-NR8SO2NH-、-NHSO2-、-CONR11-；R8是H或低級(C1-C4)烷基；R11是H或低級(C1-C4)烷基；Rx是-(CR9R10)m-、-O(CR9R10)m-、NH(CR9R10)m-或-S(CR9R10)m-，條件是當(dāng)Rx是-O(CR9R10)m-、-NH(CR9R10)m-或-S(CR9R10)m-時，Q是-CONR11-；R9和R10獨立地是H或低級烷基，或者R9和R10與它們共同連接的原子一起形成可以是飽和或部分不飽和的環(huán)烷基環(huán)；m是1-3；Ry是H、PO3H、胺保護基、氧保護基、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar2，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-Ar2和Zn-雜環(huán)烷基可以是取代或未取代的；Ar2是芳基或雜芳基、它們各自可以是取代或未取代的，其中所述取代可以是1-3個取代基，所述取代基獨立地選自F、Cl、Br、CF3、CN、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、-OR12、-SR12、-SO2R12、-SO2NR13R12、NR13SO2R12、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；R12和R13獨立地是H、烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或Zn-AR1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；其中當(dāng)Ar2被-SO2NR13R12取代時，R12和R13可以形成可以是取代或未取代的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)，其中所述取代可以是選自如下的取代基烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、-COR12、-SO2R12、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的；其中當(dāng)Q是-CONR11時，Ry與R11結(jié)合為另外的可以被選自以下基團取代或未取代的環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基、Zn-Ar1、-COR14或-SO2R14，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基、Zn-Ar1、-COR14和-SO2R14可以是取代或未取代的；且R14是烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、其中環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-環(huán)烷基、其中雜環(huán)烷基飽和或部分不飽和的Zn-雜環(huán)烷基或者Zn-Ar1，其中所述烷基、烯丙基、鏈烯基、炔基、雜烷基、雜烯丙基、雜烯基、雜炔基、烷氧基、雜烷氧基、Zn-環(huán)烷基、Zn-雜環(huán)烷基和Zn-Ar1可以是取代或未取代的。
28.權(quán)利要求27的化合物，其中W是CH2且Y是NR2。
29.權(quán)利要求27的化合物，其中G、J、K和T是CRz。
30.權(quán)利要求27的化合物，其中X是NH、S或O。
31.權(quán)利要求27的化合物，其中Rx是CH2且Q是-NHCO-。
32.權(quán)利要求31的化合物，其中Ry是異丙基或
33.權(quán)利要求27的化合物，其中Rx是CH2且Q是-NR8CONH-。
34.權(quán)利要求33的化合物，其中Ry是 或
35.一種包含權(quán)利要求27的化合物及藥學(xué)可接受載體的組合物。
36.一種治療或預(yù)防p38介導(dǎo)的人或動物疾病的方法，所述方法包括對所述人或動物給予有效治療或預(yù)防所述p38介導(dǎo)的疾病的量的權(quán)利要求27的化合物或包含所述化合物的藥物組合物。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述p38介導(dǎo)的疾病是炎癥性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增生性疾病、傳染病、病毒性疾病或神經(jīng)變性性疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及p38抑制劑，以及生產(chǎn)這些抑制劑的方法。本發(fā)明還提供包含本發(fā)明的抑制劑的藥物組合物，以及利用這些抑制劑和藥物組合物治療和預(yù)防p38介導(dǎo)的各種疾病的方法。
文檔編號C07D405/12GK1784396SQ200480011990
公開日2006年6月7日 申請日期2004年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月3日
發(fā)明者馬克·芒森, 戴維·A.·馬雷什卡, 金英夫, 羅伯特·格羅內(nèi)貝格, 詹姆斯·里茲, 馬莎·羅德里格斯, 金康赫, 蓋伊·瓦伊格斯, 饒暢, 德萬·巴拉查里, 達雷恩·哈維 申請人:陣列生物制藥公司