專(zhuān)利名稱(chēng)：作為抗雄激素劑的17α,21-二羥基孕烯酯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及17α，21-二羥基孕烯酯，其制備方法和其作為抗雄激素劑的用途。
現(xiàn)有技術(shù)許多皮質(zhì)類(lèi)固醇已經(jīng)用作抗炎劑、抗風(fēng)濕劑、抗過(guò)敏劑和抗休克劑。
特別地，11-脫氧-皮質(zhì)醇酯及其衍生物已經(jīng)廣泛用作抗炎劑。
沒(méi)有17α，21-二羥基孕烯混合酯是已知的，而已經(jīng)描述了具有相同脂族鏈的17和21酰基衍生物，該脂族鏈含有不多于四個(gè)碳原子。
含有不多于六個(gè)碳原子的羧酸17或21單酯也是已知的。
例如，17α，21-二乙酰氧基孕-4-烯-3，20-二酮的制備公開(kāi)于US3,530,038，該文獻(xiàn)也提及丙?；苌锖鸵幌盗泻兄炼嗔鶄€(gè)碳原子鏈的脂族?；苌锏挠猛尽?br> US3,152,154公開(kāi)了21-羥基孕-4，9-二烯-3，20-二酮-17α-丁酸酯的制備，該化合物用作3，21-二酰氧基-17α-丁酰氧基孕-3，5，9-三烯-20-酮制備的中間體，其中3和21?；嗤牟⑶沂且阴；?、丙?；⒍□；彤惗□；?。在這些文獻(xiàn)中引用的所有實(shí)施例涉及其中17α和21位由相同的?；セ幕衔铩?br> 作為混合酯的唯一實(shí)施例，21-乙酰氧基孕-4-烯-3，20-二酮-17α-二甲基丙酸酯的制備描述于Liebigs Ann.Chem.1983，705-711作者說(shuō)明僅當(dāng)21位中的取代基是乙?；鶗r(shí)，混合酯的制備是可能的。
US3,530,038公開(kāi)了11β-17α-21-三羥基類(lèi)固醇的制備方法，該方法包括將11-脫氧-17α-OR-21-OR’類(lèi)固醇，其中R是1-18個(gè)碳原子的羧酸殘基和R’是氫或1-18個(gè)碳原子的?；?，用彎孢屬的微生物進(jìn)行氧化，用于獲得相應(yīng)的11β-羥基類(lèi)固醇。
根據(jù)相同的專(zhuān)利，孕烷、雄烷或雌烷系列化合物提及為可能的起始類(lèi)固醇，但沒(méi)有提及其中R是1-18個(gè)碳原子的?；蚏’是氫的11-脫氧-17α-OR-21-OR’類(lèi)固醇的任何轉(zhuǎn)化。
這些產(chǎn)物的制備由R.B.Turner參考孕-4-烯-3，20-二酮-17α，21-二乙酸酯的制備描述(J.Am.Chem.Soc.75(1953)3489)并由R.Gardi等人描述(Gazz.Chim.It.93(1963)431-450)。
最后，US3,780,177公開(kāi)了借助原丁酸酯的21-羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮-17α-丁酸酯的制備及其作為6α，9α-二氟強(qiáng)的松龍-17-丁酸酯-21酯衍生物的制備中間體的用途。
發(fā)明概述現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些17α，21-二羥基孕-4，9-二烯-3，20-二酮和17α，21-二羥基孕-4-烯-3，20-二酮17和/或21酯具有顯著的抗雄激素活性。
因此，根據(jù)第一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明涉及一種通式(I)的化合物 其中R1和R2，它們可以相同或不同，是氫或C3-C18?；瑮l件是-R1和R2的至少一個(gè)不為氫；-當(dāng)R1是氫時(shí)，R2不為丁?；?。
根據(jù)第二個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明涉及一種作為抗雄激素藥物的通式(II)的化合物
其中R1和R2，它們可以相同或不同，是氫或C3-C18?；?，條件是-R1和R2的至少一個(gè)不為氫。
根據(jù)進(jìn)一步的實(shí)施方案，本發(fā)明涉及一種通式(I)或(II)化合物的制備方法，其中R1和R2兩者是?；摲椒òㄔ诙栊匀軇┲泻驮?5℃到反應(yīng)混合物沸騰溫度的溫度下，使其中R1和R2是氫的相應(yīng)的化合物與羧酸酸酐或活性酯反應(yīng)。
本發(fā)明的更進(jìn)一步的目的涉及一種通式(I)或(II)化合物的制備方法，其中R1和R2的一個(gè)是氫和另一個(gè)是?；摲椒ò╝.在惰性溶劑中和在-5℃到沸騰溫度的溫度下，使其中R1和R2是氫的相應(yīng)化合物與C3-C18羧酸酸酐或活性酯或與烯丙氧基碳酰氯或異丁烯進(jìn)行反應(yīng)，獲得相應(yīng)的化合物，其中R1是異丁基、烯丙氧基羰基或C3-C18?；籦.在惰性溶劑中和在-5℃到反應(yīng)混合物沸騰溫度的溫度下，來(lái)自步驟a)的化合物與C3-C18羧酸酸酐或活性酯的非必要反應(yīng)；c.21-烯丙氧基羰基或21-異丁氧基的非必要溶解(lysis)。
最后，本發(fā)明涉及具有抗雄激素活性的藥物組合物，該組合物包含作為活性成分的通式(I)或(II)化合物。
發(fā)明詳述通式(I)的優(yōu)選化合物是-17α，21-二丁酰基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮；
-17α-羥基-21-丁?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮；-17α-羥基-21-丁酰基-孕-49-二-烯-3，20-二酮；-17α-羥基-21-十八?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮；-17α-十八?；?21-丁酰基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮。
已經(jīng)在動(dòng)物中根據(jù)由W.Voigt和S.L.Hsia描述的局部抗雄激素活性的常規(guī)測(cè)試(Endocrinology 1973，921216-1222)，評(píng)價(jià)了通式(I)和(II)化合物的抗雄激素活性。
對(duì)6-8周大和重65-90克的性未成熟雌倉(cāng)鼠進(jìn)行測(cè)試。
在測(cè)試開(kāi)始時(shí)，將每個(gè)動(dòng)物的背部剃毛以?xún)蓚?cè)證實(shí)各自的脅腹器官。然后將動(dòng)物細(xì)分成均勻的組和每天治療連續(xù)21天。在包含4微克丙酸睪酮(TP)或四微克二氫睪酮(DHT)的50微升丙酮溶液中，將測(cè)試的類(lèi)固醇以100-400微克的濃度溶解。將50微升溶液施加到右脅腹器官上，同時(shí)遵循相同的程序，用作單個(gè)對(duì)照物的對(duì)側(cè)器官僅接受丙酮溶液(50微升)。對(duì)照組接受單獨(dú)的TP或DHT。
在測(cè)試結(jié)束時(shí)，在醚麻醉下殺死動(dòng)物并取下整個(gè)背部皮膚。分別采用透明法(transillumination)測(cè)量?jī)蓚€(gè)脅腹器官的面積。對(duì)于每個(gè)組計(jì)算由測(cè)試類(lèi)固醇處理的面積和僅由載體處理的那些之間的平均差值，將該平均差值作為抑制百分比與在采用TP或DHT處理的對(duì)照組中面積之間的平均差值比較。
通過(guò)例子，在局部抗雄激素活性測(cè)試中，17α-丙酰基-21-羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮以及相應(yīng)的17α，21-二丁酸酯和17α-丁酸酯抑制大于80％的丙酸睪酮(TP)的作用和50-80％的它的活性衍生物二氫睪酮(DHT)的作用。
在10-4000微克的劑量下，證明本發(fā)明化合物是活性的。
本發(fā)明的化合物可用作合適的藥物組合物，該組合物通過(guò)口服、皮膚或粘膜途徑用于如下病情的局部和/或全身治療痤瘡、脂溢性皮炎、多毛癥、禿發(fā)癥、乳房痛、前列腺增生和癌、女性的男性化綜合征、早期青春期(early puberty)、男性的性進(jìn)攻性抑制、男性避孕。
根據(jù)本發(fā)明的方法，通過(guò)17α，21-二羥基孕-4-烯-3，20-二酮或17α，21-二羥基孕-4，9-二烯-3，20-二酮羥基與包含所需酰基基團(tuán)的活性酯的酯化制備通式(I)或(II)的化合物，其中R1和R2兩者均是?；?。根據(jù)此簡(jiǎn)單過(guò)程，可以制備具有位阻的脂族鏈的?；苌铮缇哂懈邤?shù)目碳原子或支化的那些。用于此反應(yīng)的合適活性酯的例子是丁酸三氟乙酯或十八烷酸三氟乙酯，兩者借助于脂酶在惰性無(wú)水溶劑中、在20-50℃的溫度和20-100小時(shí)的反應(yīng)時(shí)間下均可獲得優(yōu)異的酯化收率。脂酶的例子是PPL(豬胰脂酶)或來(lái)自圓柱假絲酵母的那些。
通式(I)或(II)化合物的制備方法，其中R1和R2的一個(gè)是氫并且另一個(gè)是?；ㄈ缦虏襟E1.在二甲基甲酰胺或異丁烯中在-5～40℃的溫度下，將21羥基采用烯丙氧基羰基氯、芐氧基羰基氯、叔丁基羰基氯選擇性酯化。
2.然后在作為催化劑的4-二甲基氨基吡啶存在下，將生成的21單酯進(jìn)行與7個(gè)碳原子的羧酸的酸酐的酯化反應(yīng)。17中酯化的替代方案是在二環(huán)己基碳二亞胺的存在下使用羧酸?；钚怎ト缛一苌锘騈-?；彵蕉柞啺坊騈-酰基苯并三唑是進(jìn)一步的替代方案。
3.在二氯甲烷或四氫呋喃中采用例如四(三苯基膦)Pd和三苯基膦除去21中的保護(hù)，獲得17α-?；?21-羥基孕-4-烯-3，20-二酮或17α-?；?21-二羥基孕-4，9-二烯-3，20-二酮。
4.隨后可以采用7個(gè)碳原子的羧酸的酸酐或者在二環(huán)己基碳二亞胺存在下采用羧酸，或采用活性酯如三氟乙基衍生物或N-?；彵蕉柞啺坊騈-?；讲⑷蛟?1中酯化來(lái)自步驟3)的產(chǎn)物。
實(shí)施例117α，21-二丁?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮的制備在45℃下在5g的Candida cylindracea脂酶存在下，將1g(2.87mM)17α，21-二羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮和10ml丁酸三氟乙酯在50ml四氫呋喃中的混合物反應(yīng)8-10小時(shí)，在規(guī)則時(shí)間間隔下加入1g脂酶。在第一反應(yīng)步驟結(jié)束時(shí)，將脂酶濾出和將濾液在真空下濃縮，采用四氫呋喃吸收殘余物三次。向獲得的殘余物中進(jìn)一步加入10ml和丁酸三氟乙酯和50ml四氫呋喃，向獲得的溶液中加入0.8g枯草桿菌蛋白酶和將懸浮液在45℃下攪拌2天，在規(guī)則時(shí)間間隔下進(jìn)一步加入總計(jì)80mg的蛋白酶。將蛋白酶濾出，在真空下除去濾液和將殘余物在硅膠柱上采用二氯甲烷/甲醇99∶1混合物進(jìn)行色譜分析。蒸發(fā)較少極性的級(jí)分以獲得1g(2.06mM)17α，21-二丁?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮。
遵循相同的過(guò)程，從1g的17α，21-二羥基-孕-4-烯-3，20-二酮開(kāi)始，以獲得0.98g(2.01mM)17α，21-二丁?；?孕-4-烯-3，20-二酮。
實(shí)施例217α-羥基-21-丁?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮的制備在45℃下在5g的圓柱假絲酵母脂酶存在下，將1g 17α，21-二羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮和10ml丁酸三氟乙酯在100ml丙酮中的混合物反應(yīng)8-10小時(shí)，在規(guī)則時(shí)間間隔下加入1g脂酶。在反應(yīng)完成之后，將脂酶濾出，將濾液在真空下濃縮，采用丙酮吸收殘余物三次。將半固體殘余物在硅膠柱上采用二氯甲烷/甲醇99∶1混合物由色譜純化。除去較少級(jí)性的級(jí)分，獲得更富有的級(jí)分，蒸發(fā)該更富有的級(jí)分獲得0.95g(2.29mM)17α-羥基-21-丁酰基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮。
實(shí)施例317α-羥基-21-丁?；?孕-4-烯-3，20-二酮的制備在45℃下在5g的圓柱假絲酵母脂酶存在下，將1g 17α，21-二羥基-孕-4-烯-3，20-二酮和10ml丁酸三氟乙酯在50ml甲乙酮中的混合物反應(yīng)8-10小時(shí)，在規(guī)則時(shí)間間隔下加入1g脂酶。在反應(yīng)完成之后，將脂酶濾出，將濾液在真空下濃縮，采用溶劑吸收殘余物三次。將半固體殘余物在硅膠柱上采用二氯甲烷/甲醇99∶1混合物由色譜純化。蒸發(fā)更富有的級(jí)分，獲得0.89g(2.14mM)17α-羥基-21-丁酰基-孕-4-烯-3，20-二酮。
實(shí)施例417α-丁?；?21-十八?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮的制備將4g(11.6mM)17α，21-二羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮與20mg三氟乙酸在20ml二噁烷和10ml原丁酸乙酯的溶液中在100℃下反應(yīng)5小時(shí)，蒸餾出低沸點(diǎn)頂餾分。將溶液冷卻，然后采用5ml酒石酸摩爾溶液處理并加熱到40-50℃下約5分鐘，獲得17α-丁?；?21-羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮。在真空下蒸發(fā)出溶劑和將殘余物采用二噁烷重復(fù)吸收。將獲得的殘余物溶于200ml丙酮和然后加入12g十八烷酸三氟乙酯(從十八烷酰氯和三氟乙醇制備)，20g的圓柱假絲酵母脂酶，將獲得的懸浮液在50℃下攪拌8-10小時(shí)，在規(guī)則時(shí)間間隔下加入2g的圓柱假絲酵母。將脂酶濾出，在真空下濃縮濾液和將殘余物在硅膠柱上采用二氯甲烷/甲醇98.5∶1.5混合物進(jìn)行色譜分析。蒸發(fā)凈級(jí)分，獲得4.9g(7.17mM)17α-丁酰基-21-十八?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮。
遵循相同的過(guò)程，從5g(14.5mM)17α，21-二羥基-孕-4-烯-3，20-二酮開(kāi)始，獲得5.9g(8.61mM)17α-丁?；?21-十八?；?孕-4-烯-3，20-二酮。
實(shí)施例517α-十八酰基-21-丁?；?孕-4，9-二烯-3，20-二酮的制備步驟a向2g NaOH在20ml水中的溶液中加入25ml四氫呋喃和5g(14.5mM)17α，21-二羥基-孕-4-烯-3，20-二酮。將混合物在0℃下攪拌，然后滴加2.4ml氯甲酸烯丙酯。在此溫度下攪拌約0.5小時(shí)之后，將混合物采用鹽酸仔細(xì)中和及采用二氯甲烷萃取。將有機(jī)萃取物在真空下濃縮并將殘余物進(jìn)行隨后步驟的反應(yīng)。
步驟b將粗17α-羥基-21-烯丙基羰氧基-孕-4-烯-3，20-二酮溶于15g十八烷酸三氟乙酯和150ml四氫呋喃，向獲得的溶液中加入4g枯草桿菌蛋白酶和將懸浮液在45℃下攪拌2天，在規(guī)則時(shí)間間隔下進(jìn)一步加入總計(jì)3g的蛋白酶。將蛋白酶濾出，在真空下除去濾液，將殘余物在硅膠柱上采用二氯甲烷/甲醇99∶1混合物進(jìn)行色譜分析。蒸發(fā)較少極性的級(jí)分，獲得17α-十八?；?21-烯丙基羰氧基-孕-4-烯-3，20-二酮的殘余物。
步驟c將來(lái)自先前步驟的殘余物溶于50ml二氯甲烷和向其中加入35mg三苯基膦和35mg三苯基膦鈀。將獲得的混合物在室溫下攪拌0.5小時(shí)。將溶液在真空下濃縮，將殘余物采用二氯甲烷吸收兩次，然后在硅膠柱上采用二氯甲烷/甲醇99∶1混合物進(jìn)行色譜分析。蒸發(fā)更富有的級(jí)分以獲得凈殘余物，該殘余物本身用于隨后的步驟。
步驟d在0.5g氯化三丁基甲基銨存在下，將殘余物(6.2g)17α-十八酰基-21-羥基-孕-4-烯-3，20-二酮溶于4ml丁酸酐。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后傾入冰中并將獲得的產(chǎn)物由萃取與水分離。將萃取物用水洗滌到中性并在真空下濃縮，將殘余物從甲醇結(jié)晶，獲得5.5g(8.05mM)17α-十八?；?21-丁酰基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮。此化合物用于適于皮膚給藥的乳膏形式的藥物制劑的制備。
遵循相同的過(guò)程，從5g(14.5mM)17α，21-二羥基-孕-4-烯-3，20-二酮開(kāi)始，獲得5.1g(7.44mM)17α-十八?；?21-丁酰基-孕-4-烯-3，20-二酮。
實(shí)施例1-5的化合物可以配制成合適的劑型，例如提供全身或局部作用的用于透粘膜給藥的脂質(zhì)體乳液或懸浮液，或乳膏、凝膠等。
典型的乳膏制劑將包含，例如，鯨蠟醇、單硬脂酸甘油酯、液體石蠟、丙二醇、單油-酰氨基磺基琥珀酸二鈉、檸檬酸一水合物、純化水。
使用與以上實(shí)施例中公開(kāi)的基本相同的方法，制備如下化合物-17α，21-二丁?；?孕-4-烯-3，20-二酮(mp 101℃，異丙醚)；-17α-丙?；?21-羥基-4-烯-3，20-二酮(mp 114℃，異丙醚)。
實(shí)施例617α-丙酰基-21-羥基-孕-4，9-二烯-3，20-二酮(化合物A)的局部抗雄激素活性
實(shí)施例7局部抗雄激素活性(實(shí)施例1的化合物)
實(shí)施例8局部抗雄激素活性(實(shí)施例2的化合物)
權(quán)利要求
1.一種通式(I)的化合物 其中R1和R2，它們可以相同或不同，是氫或C3-C18?；瑮l件是-R1和R2的至少一個(gè)不為氫；-當(dāng)R1是氫時(shí)，R2不為丁?；?。
2.一種作為抗雄激素藥物的通式(II)的化合物 其中R1和R2，它們可以相同或不同，是氫或C3-C18?；?，條件是-R1和R2的至少一個(gè)不為氫。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R1是氫和R2是丙?；?。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2是丁酰基。
5.一種通式(I)或(II)的化合物的制備方法，其中R1和R2兩者均是?；摲椒òㄔ诙栊匀軇┲泻驮?5℃到反應(yīng)混合物沸騰溫度的溫度下，使其中R1和R2是氫的相應(yīng)化合物與羧酸酸酐或活性酯反應(yīng)。
6.一種通式(I)或(II)的化合物的制備方法，其中R1和R2的一個(gè)是氫和另一個(gè)是?；?，該方法包括a)在惰性溶劑中和在-5℃到沸騰溫度的溫度下，使其中R1和R2是氫的相應(yīng)化合物與C3-C18羧酸酸酐或活性酯或與烯丙氧基羰基氯或異丁烯反應(yīng)，得到相應(yīng)的化合物，其中R1是異丁基、烯丙氧基羰基或C3-C18?；籦)在惰性溶劑中和在-5℃到反應(yīng)混合物沸騰溫度的溫度下，來(lái)自步驟a)的化合物與C3-C18羧酸酸酐或活性酯的非必要反應(yīng)；c)21-烯丙氧基羰基或21-異丁氧基的非必要溶解。
7.權(quán)利要求1-4的化合物用于制備具有抗雄激素活性的藥物的用途，該藥物特別用于痤瘡、脂溢性皮炎、多毛癥、禿發(fā)癥、乳房痛、前列腺增生和癌、女性的男性化綜合征、早期青春期、男性的性進(jìn)攻性抑制、男性避孕的局部或全身治療。
8.一種藥物組合物，包含作為活性成分的權(quán)利要求1-4的化合物以及可接受的載體。
全文摘要
具有顯著抗雄激素活性的17α，21－二羥基孕－4，9－二烯－3，20－二酮和17α，21－二羥基孕－4－烯－3，20－二酮17和/或21酯，及其制備方法。
文檔編號(hào)C07J5/00GK1541220SQ02815719
公開(kāi)日2004年10月27日 申請(qǐng)日期2002年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2001年8月10日
發(fā)明者M·阿雅尼, M 阿雅尼, L·莫羅 申請(qǐng)人:科斯默股份公司