馬兜鈴抗腫瘤提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維吾爾藥馬兜鈴抗腫瘤提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法以及它在制備預(yù)防及治療乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、腦膠質(zhì)瘤、肝癌等惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述的提取物通過如下方法獲得：維吾爾藥馬兜鈴經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用體積比為100：0二氯-甲醇混合溶劑洗脫，繼用體積比為100：1的二氯-甲醇混合溶劑洗脫，用體積比為100：1的二氯-甲醇混合溶劑洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥即得該提取物。
【專利說明】
馬兜鈴抗腫瘤提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維吾爾藥馬兜鈴抗腫瘤提取物及其組合物 的制備方法以及它在制備預(yù)防及治療肝癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、宮頸癌、腦 膠質(zhì)瘤等惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 馬兜鈴(學名：Aristolochia debilis Sieb. et Zucc)，別名水馬香果、蛇參果、三 角草、秋木香罐，中文名因其成熟果實如掛于馬頸下的響鈴而得。馬兜鈴為多年生的纏繞性 草本植物。生于海拔200-1500米的山谷、溝邊、路旁陰濕處及山坡灌叢中。喜光，稍耐陰， 喜砂質(zhì)黃壤，耐寒。適應(yīng)性強。其根、莖、果實都稱馬兜鈴。
[0003] 馬兜鈴有清肺降氣、止咳平喘、清腸消痔的功效，其莖稱天仙藤有理氣、祛濕、活血 止痛的功效，其根稱青木香有行氣止痛、解毒消腫的功效。
[0004] 本發(fā)明在深入地研究馬兜鈴的抗癌活性時意外地發(fā)現(xiàn)，馬兜鈴除了具有誘導(dǎo)白血 病細胞凋亡的功效外，亦具有很好的乳腺癌、宮頸癌、肝癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、腦 膠質(zhì)瘤等惡性腫瘤的預(yù)防及治療作用，該活性提取物及其組合物有望應(yīng)用到多種癌癥的預(yù) 防和治療上。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種馬兜鈴提取物。
[0006] 本發(fā)明還提供了以馬兜鈴提取物為主要活性成分的組合物。
[0007] 本發(fā)明同時提供了馬兜鈴提取物及其組合物的制備和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng) 用。
[0008] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的： 維吾爾藥馬兜鈴經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠（Si02)柱分離，上樣后的硅膠 柱，用二氯：甲醇混合溶劑梯度洗脫(二氯：甲醇，比例見表1)，各二氯：甲醇比例混合溶劑 洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外抗腫瘤活性篩選體系測試其抗腫瘤活性，意外地發(fā)現(xiàn)先用 二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積比）洗脫，繼用二氯：甲醇混合溶劑（二氯：甲 醇，100:1，體積比）洗脫，洗脫得到的二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫 液經(jīng)回收有機溶劑，干燥，即為抗腫瘤活性提取物，而其他比例的洗脫組分，不具有抗腫瘤 活性。最優(yōu)為先用100:0的二氯：甲醇混合溶劑洗脫10倍柱體積，繼用100:1的二氯：甲醇 混合溶劑洗脫15倍柱體積，100 :1的洗脫液干燥后即為本發(fā)明抗腫瘤活性的提取物，可以 通過以上方法得到富集，從而與其他雜質(zhì)類成分分離開。該抗腫瘤活性提取物從未見文獻 報道，其薄層譜色譜（TLC)分析表征如圖1，TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：二氯： 乙酸乙酯：甲醇（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0009] 具體，發(fā)現(xiàn)過程如下： 1、馬兜鈴經(jīng)水超聲提取物的制備 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 ml經(jīng)水超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0308B留樣0. 9724g，二氯-甲醇系統(tǒng)洗脫。
[0010] 2、二氯：甲醇混合溶劑梯度洗脫方法和結(jié)果 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 ml超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物SN0308B 留樣0.9724g。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 ml。上硅膠柱色譜，拌樣硅膠1.5g，空白硅膠5 g，玻璃柱內(nèi)徑1.6 cm，二氯：甲醇系統(tǒng)梯度洗脫(條件見表1)，柱體積11 ml，每個梯度洗脫 100 ml，得到，各個濃度提取洗脫液的洗脫物，回收溶劑，即得，二氯：甲醇梯度洗脫提取物， 扎(：分析結(jié)果見圖2，11(：分析條件 ：6?254硅膠板，展開系統(tǒng)：二氯：乙酸乙酯：甲醇（3 :1:1) 顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0011] 表 1
3、抗腫瘤活性篩選方法和結(jié)果 1)實驗條件 a)細胞株信息 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞株C6購于中國典型培養(yǎng)物保藏中心細胞庫。
[0012] b)藥品及試劑 樣品無菌條件下，DMS0溶解配置成母液濃度為100mg/mL，使用時用RPMI-1640培養(yǎng) 液稀釋至所需濃度（DMS0彡1 %〇)。
[0013] RPMI Medium 1640培養(yǎng)基干粉購于美國GIBC0公司。胎牛血清購于北京元亨圣馬 生物技術(shù)研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴鹽（MTT)。
[0014] c)儀器 C〇2培養(yǎng)箱（SANYO,日本） 垂直層流潔凈工作臺（上海上凈凈化設(shè)備有限公司） 倒置生物顯微鏡(重慶光電儀器有限公司） 低/高速臺式離心機(上海安亭科學儀器廠） 電子天平(奧豪斯儀器有限公司） 酶標儀(伯樂生命醫(yī)學產(chǎn)品有限公司） 立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠） 鼓風干燥箱(上海躍進醫(yī)療器械廠） PH 計（SARTORIUS，德國） 2) 實驗方法和過程 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞株C6以4000/孔的密度鋪于96孔板，每孔lOOul，12h后使用。各 組分以DMS0溶解為100mg/mL儲存液，保存于-20°C待用。鋪板后12h，觀察細胞匯合率 約為40%，加藥，濃度均為100 μ g/mL，每個組分3個復(fù)孔。每板細胞設(shè)立二個對照組（培 養(yǎng)基+細胞；含〇. 1%DMS0培養(yǎng)基+細胞），3個空白孔（只有培養(yǎng)基）。加入藥物24小時 后，加入20 μ 1四甲基偶氮唑鹽化學名為3-(4, 5-二甲基噻唑）-2, 5-二苯基四氮唑溴鹽 (3- (4, 5-dimethyl_2thiazolyl) -2，5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)，繼續(xù)培養(yǎng) 4 小時。完全棄去上清液，加入100 μ 1 DMS0,混勻使MTT完全溶解，去氣泡。490nm測定0D 值。
3) 實驗結(jié)果 表2

結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 本發(fā)明最優(yōu)方案為：維吾爾藥馬兜鈴經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上 樣后的硅膠柱，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積比）洗脫，繼用二氯：甲醇 混合溶劑（二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體 積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，干燥，得到的高活性提取物，即為該抗腫瘤的提取物。 該抗腫瘤活性提取物從未見文獻報道，其TLC分析表征如圖1。
[0016] 4、抗腫瘤有效提取物的提取方法研究 1)提取溶劑的種類研究 分別用甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑、乙醇水混合溶劑等有機 溶劑提取，并測試提取物對C6細胞的抗腫瘤活性，結(jié)果如下： 表3
研究結(jié)果表明：提取用有機溶劑可以為甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混 合溶劑、乙醇水混合溶劑。
[0017] 2)提取溶劑的用量研究 分別用1、2、5、10、20、30、40、50倍(重量/體積比)有機溶劑提取，并測試提取物對MCF7 細胞的的抗腫瘤活性，結(jié)果如下： 表4

提取物提取用有機溶劑用量為藥材重量的2-50倍(重量/體積比)。
[0018] 3 )干燥方法的研究 分別用真空干燥法、冷凍干燥法、鼓風干燥、離心干燥、旋蒸干燥法等方法，對得到的抗 腫瘤活性提取物進行干燥，以含水量、TLC、活性測試為指標，發(fā)現(xiàn)真空干燥法、冷凍干燥法、 鼓風干燥、離心干燥、旋蒸干燥法適用于對MCF7細胞抗腫瘤活性提取物進行干燥，其中，最 優(yōu)為真空干燥法、冷凍干燥法。
[0019] 表 5
因此，馬兜鈴抗腫瘤提取物的制備方法為： 維吾爾藥馬兜鈴經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用 二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0，體積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合 溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫2-50倍柱體積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇， 100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，干燥，得到的高活性提取物，即為該抗腫瘤 的提取物。以上條件最優(yōu)為先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積比）洗脫10 倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫15倍柱體積。其中， 1)提取物提取用溶劑可以為甲醇、乙醇、丙酮、水、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑、乙 醇水混合溶劑，最優(yōu)條件為甲醇和95%乙醇。提取物提取用溶劑用量為藥材重量的2-50倍 (重量/體積比)。
[0020] 2)提取物干燥方法可以為真空干燥法、冷凍干燥法、鼓風干燥、離心干燥、旋蒸干 燥法等，最優(yōu)為真空干燥法、冷凍干燥法。
[0021] 5.馬兜鈴抗腫瘤有效提取物(二氯：甲醇=100 :1時洗脫液干燥后所得的提取物） 的抗腫瘤活性研究 利用各種腫瘤細胞，如乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、腦膠質(zhì)瘤、肝癌等 惡性腫瘤細胞株，分別測試馬兜鈴抗腫瘤提取物的抗腫瘤活性，IC5。結(jié)果如下： 表6

因此，我們發(fā)現(xiàn)，馬兜鈴抗腫瘤提取物具備抗腫瘤活性，可望用于各種腫瘤如乳腺癌、 肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、腦膠質(zhì)瘤、肝癌等惡性腫瘤細胞株的預(yù)防及治療。
[0022] 6、馬兜鈴抗腫瘤有效提取物的組合物及其制備方法研究 1)固體分散體 處方 馬兜鈴提取物 20g 聚乙烯吡咯烷酮 80g 固體分散l〇〇g 制備方法： 稱取馬兜鈴提取物和載體聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的質(zhì)量比分別 放入燒杯中，加入無水乙醇，磁力攪拌器攪拌至馬兜鈴提取物和載體完全溶解，轉(zhuǎn)入旋蒸儀 中除去溶劑，干燥，粉碎過80目篩，即得馬兜鈴提取物PVP包合物。
[0023] 2)環(huán)糊精包合物 處方： 馬兜鈴提取物 20g β -環(huán)糊精 80g 包合物100g 制備方法： 將β -環(huán)糊精與1-5倍水研勻，加馬兜鈴提取物（水難溶性的應(yīng)先溶于少量有機溶 劑中）充分研磨至成糊狀物，低溫干燥即得。
[0024] 3)分散片處方： 馬兜鈴提取物 1〇〇 十^烷基硫酸納 1 預(yù)膠化淀粉 10 可溶性淀粉 100 交聯(lián)聚維酮 10 微晶纖維素 10 微分硅膠 0. 3 滑石粉 1 100片 制備方法： 1. 馬兜鈴提取物淀粉分散體的制備，精密稱取馬兜鈴提取物，加入適量的十二烷基硫 酸鈉，用70%的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均勻后，在70°C的溫度下蒸干，粉 碎，過100目篩； 2. 稱取處方量，馬兜鈴提取物淀粉分散體，交聯(lián)聚維酮，預(yù)膠化淀粉，用70%乙醇做濕 潤劑，邊加入邊攪拌，制成濕顆粒過14目篩，室溫下放置15min后，60°C烘箱烘干45min， 16目篩整粒，加入滑石粉和微分硅膠，混合均勻后，壓片。
[0025] 7、馬兜鈴抗腫瘤有效提取物的檢測方法研究 我們發(fā)現(xiàn)，可以用薄層色譜的方法，很好地檢測和標示馬兜鈴抗腫瘤有效提取物的特 征。見圖1。 具體條件為：色譜條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：二氯：乙酸乙酯：甲醇=3:1:1，顯色方 法：香草醛濃硫酸顯色
【附圖說明】： 圖1馬兜鈴C6抑制活性提取物的TLC色譜圖； 圖2馬兜鈴得到的化學組分的TLC色譜圖。
【具體實施方式】
[0026] 以下實施例表示本發(fā)明的實用性，本發(fā)明不受此限制。
[0027] 實施例1 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 ml甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積 比)洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫15倍柱體 積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，真 空干燥，得到的高活性提取物，即為該抗腫瘤的提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=83. 0 μ g/mL〇
[0028] 實施例2 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL乙醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積 比)洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫15倍柱體 積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，冷 凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=87.0 yg/mL。
[0029] 實施例3 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL石油醚超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體 積比)洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫15倍柱 體積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑， 旋蒸干燥法，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=81.0 yg/mL。
[0030] 實施例4: 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL丙酮超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積 比)洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫15倍柱體 積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，鼓 風干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=80.0 yg/mL。
[0031] 實施例5: 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL氯仿超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體積 比)洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫15倍柱體 積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，離 心干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=73.0 yg/mL。
[0032] 實施例6 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL乙酸乙酯超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:0,體 積比)洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100: 1，體積比)洗脫15倍柱 體積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑， 冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為IC 5(]=72.0 yg/mL。
[0033] 實施例7 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL甲醇水混合溶劑（甲醇：水=1:1)超聲提取15 min， 提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合 溶劑(二氯：甲醇，1〇〇:〇,體積比）洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲 醇，100:1，體積比）洗脫15倍柱體積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比） 洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為 IC50=85.0 yg/mL〇
[0034] 實施例8 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL乙醇水混合溶劑（乙醇：水=1:1)超聲提取15 min， 提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混合 溶劑(二氯：甲醇，1〇〇:〇,體積比）洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲 醇，100:1，體積比）洗脫15倍柱體積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比） 洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為 IC50=52.0 yg/mL〇
[0035] 實施例9 : 取維吾爾藥馬兜鈴20 g，經(jīng)100 mL乙醇-水混合溶劑（乙醇：水=90 :10)超聲提取15 min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（1.6 cm內(nèi)徑小柱)，先用二氯：甲醇混 合溶劑(二氯：甲醇，1〇〇:〇,體積比）洗脫10倍柱體積，繼用二氯：甲醇混合溶劑(二氯：甲 醇，100:1，體積比）洗脫15倍柱體積，用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比） 洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機溶劑，冷凍干燥，即為該活性提取物。經(jīng)測試，其抗腫瘤活性為 IC50=75.0 yg/mL〇
[0036] 實施例10:固體分散體 稱取馬兜鈴提取物和載體聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的質(zhì)量比分別 放入燒杯中，加入適量的無水乙醇和Vc，磁力攪拌器攪拌至馬兜鈴提取物和載體完全溶解， 充分混合均勻后轉(zhuǎn)入旋蒸儀中除去有機溶劑，干燥，粉碎過80目篩，即得馬兜鈴提取物PVP 包合物。
[0037] 實施例11 :環(huán)糊精包合物 將β -環(huán)糊精與1-5倍水研勻，加馬兜鈴提取物（水難溶性的應(yīng)先溶于少量有機溶 劑中）充分研磨至成糊狀物，低溫干燥即得。
[0038] 實施例12 :分散片 1.稱取干燥的馬兜鈴提取物，加入適量的十二烷基硫酸鈉，使用70%的乙醇充分溶解， 加入水溶性淀粉與馬兜鈴提取物（1:1)，攪拌混合均勻，在70°C下干燥，粉碎，過100目篩， 得馬兜鈴提取物分散體。
[0039] 2.精密稱取處方量，馬兜鈴提取物分散體，交聯(lián)聚維酮，可壓性淀粉，用70%乙醇 做濕潤劑，邊加入邊攪拌，14目篩制成濕顆粒，室溫下放置15min后，70°C烘箱烘干45min， 16目篩整粒，加入滑石粉和微分硅膠，混合均勻后，壓片。
【主權(quán)項】
1. 一種維吾爾藥馬兜鈴提取物，其特征為維吾爾藥馬兜鈴經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮 后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用體積比為100 :〇二氯-甲醇混合溶劑洗脫，繼用體 積比為100:1的二氯-甲醇混合溶劑洗脫，用體積比為100:1的二氯-甲醇混合溶劑洗脫 的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥即為該提取物。2. 如權(quán)利要求1所述維吾爾藥馬兜鈴提取物，其特征為，該提取物的提取用溶劑可以 為甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑，最優(yōu)為甲醇或 95%乙醇。3. 如權(quán)利要求1所述維吾爾藥馬兜鈴提取物，其特征為維吾爾藥馬兜鈴經(jīng)水超聲提 取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲 醇，100:0,體積比）洗脫，繼用二氯-甲醇混合溶劑(二氯：甲醇，100:1，體積比）洗脫，用二 氯-甲醇混合溶劑(二氯-甲醇，100:1，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥，即為該提 取物。4. 如權(quán)利要求1-3所述維的維吾爾藥馬兜鈴提取物，其特征為，洗脫液的用量為2-50 倍柱體積。5. 如權(quán)利要求1-3所述提取物的制備方法，其特征為：最優(yōu)為先用100:0的二氯：甲 醇混合溶劑洗脫10倍柱體積，繼用100:1的二氯：甲醇混合溶劑洗脫15倍柱體積。6. -種藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項所述的維吾爾藥馬兜鈴 提取物和藥學上可接受的載體。7. -種藥物制劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項所述的馬兜鈴提取物或權(quán) 利要求6所述的藥物組合物。8. 如權(quán)利要求7所述的藥物制劑，其特征在于，所述的制劑為固體分散體、環(huán)糊精包合 物、分散片。9. 如權(quán)利要求1-5任何一項所述提取物或權(quán)利要求6所述的組合物或權(quán)利要求7所述 的藥物制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。10. 如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤為腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃 癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌或肝癌。11. 如權(quán)利要求1-5任何一項所述的維吾爾藥馬兜鈴提取物，其特征在于，用TLC法檢 測，其色譜條件為：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：二氯：乙酸乙酯：甲醇=3:1:1顯色方法：香草 醛濃硫酸顯色。
【文檔編號】G01N30/90GK106031736SQ201510109414
【公開日】2016年10月19日
【申請日】2015年3月12日
【發(fā)明人】王金輝, 李國玉, 王航宇, 羅麗, 黃健, 張珂, 焦佳媛, 馬玲
【申請人】石河子大學