一種口服膠束微球的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是一種口服膠束微球的制備方法及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 臨床上有些水中難溶性藥物如大多數(shù)抗癌藥因為口服生物利用度低而只能采用 靜脈注射給藥方式進(jìn)行疾病的治療。靜脈給藥需要頻繁的注射，患者的依從性較差，血藥濃 度波動較大導(dǎo)致明顯的毒副作用?？诜o藥患者可自行用藥，患者依從性高。這些藥物口服 后生物利用度低主要是因為可能存在明顯的肝首過效應(yīng)、胃腸不穩(wěn)定或代謝、腸吸收外排 或吸收飽和等障礙。目前這些藥物的普通制劑(藥物以分子狀態(tài)進(jìn)行胃腸吸收），口服后難 以克服這些障礙導(dǎo)致生物利用度很低。隨著社會的發(fā)展和生活水平的提高，口服藥物的開 發(fā)必然成發(fā)展趨勢。
[0003] 2-甲氧基雌二醇(2-ME)是一種水難溶性抗癌藥，主要通過抗血管生成效應(yīng)和抗瘤 生成效應(yīng)用于治療乳腺癌，前列腺癌等病癥。口服給藥存在明顯的肝首過效應(yīng)和腸吸收飽 和機(jī)制。目前其口服制劑給藥無效。因此，如何解決2-甲氧基雌二醇水難溶性，提高2-甲氧 基雌二醇的口服療效是需要認(rèn)真解決的技術(shù)問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種口服膠束微 球的制備方法及其應(yīng)用，可有效解決現(xiàn)有藥物口服生物利用度低，吸收差，毒副作用較大， 藥物突釋造成胃內(nèi)不適的問題。
[0005] 本發(fā)明方法解決的技術(shù)方案是，由以下步驟實現(xiàn)：
[0006] (1)、制備膠束混懸液：
[0007] 35-50°C水浴下，將80-100mg PEG5000-PLGA5000、5-10mg大豆磷脂（PC-80,磷脂酰 膽堿含量>80%，注射級）溶解在2-4ml水中，作為水相，將2-5mg 2-ME超聲溶解在400-600yL 甲醇中，然后逐滴加入到水相中，700-1000rpm攪拌9-12h，過0.45μπι濾膜，得膠束混懸液，4 °C保存；
[0008] (2)、制備膠束微球：
[0009] 用超純水將羧甲基殼聚糖(黏均分子量為2.5X100000)制成質(zhì)量濃度1-2%的羧 甲基殼聚糖溶液，用PH7.4的磷酸緩沖液將聚丙烯酸樹脂(Eudragit L100)制成質(zhì)量濃度1-2 %聚丙烯酸樹脂溶液，用lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH至5-7，將羧甲基殼聚糖溶液和聚丙 烯酸樹脂溶液按照體積比1:1-3混合，攪拌均勻，得微球材料混合溶液;取步驟(1)制得的膠 束混懸液與微球材料混合溶液按照體積比1:1-2在磁力攪拌下混合均勻，用超純水稀釋1-3 倍，經(jīng)噴霧干燥得膠束微球。
[0010] 所述方法制備的膠束微球在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明可以實現(xiàn)載藥膠束的腸靶向緩釋，延長膠束的腸吸收時間，相應(yīng)的延長載 藥膠束在血液中滯留時間，而且一定程度上克服肝首過效應(yīng)、腸吸收飽和和吸收外排等障 礙，提高小腸對載藥膠束的吸收率，一定程度上克服水難溶性藥物的口服吸收的障礙，可以 明顯提高這些藥物的口服生物利用度，從而發(fā)揮應(yīng)有的藥理作用，提高藥效，有顯著的經(jīng)濟(jì) 和社會效益。
【具體實施方式】
[0012] 以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的【具體實施方式】做詳細(xì)說明。
[0013] 實施例1
[0014] -種膠束微球的制備方法，由以下方法實現(xiàn)：
[0015] (1)、制備膠束混懸液：
[0016] 35°C水浴下，將80mg PEG5000-PLGA5000、10mg大豆磷脂（PC-80,磷脂酰膽堿含量〉 80 %，注射級）溶解在4ml水中，作為水相，將5mg 2-ME超聲溶解在500yL甲醇中，然后逐滴添 加到水相當(dāng)中，900r/min攪拌9h，過0.45μπι濾膜，得膠束混懸液，冰箱4°C保存；
[0017] (2)、制備膠束微球：
[0018] 用超純水將羧甲基殼聚糖(黏均分子量為2.5 X 100000)制成質(zhì)量濃度1 %的羧甲 基殼聚糖溶液，用PH7.4的磷酸緩沖液將聚丙烯酸樹脂(Eudragit L100)制成質(zhì)量濃度2% 聚丙烯酸樹脂溶液，并且用lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH至6,將羧甲基殼聚糖溶液和聚丙烯 酸樹脂(Eudragit LlOO)溶液按照體積比1:3混合并且攪拌均勻，得微球材料混合溶液，取 步驟(1)所得膠束混懸液與微球材料混合溶液按照體積比1:2在磁力攪拌下混合均勻，用超 純水稀釋2倍，經(jīng)噴霧干燥得膠束微球。
[0019] 實施例2
[0020] -種膠束微球的制備方法，由以下方法實現(xiàn)：
[0021] (1)、制備膠束混懸液：
[0022] 45°C水浴下，將80mg PEG5000-PLGA5000、IOmg大豆磷脂（PC-80,磷脂酰膽堿含量〉 80%，注射級）溶解在2ml水中，作為水相，將2mg 2-ME超聲溶解在400yL甲醇中，然后逐滴添 加到水相當(dāng)中，l〇〇〇r/min攪拌IOh，過0.45μπι濾膜，得膠束混懸液，冰箱4°C保存；
[0023] (2)、制備膠束微球：
[0024] 用超純水將羧甲基殼聚糖(黏均分子量為2.5 X 100000)制成質(zhì)量濃度2%的羧甲 基殼聚糖溶液，用PH7.4的磷酸緩沖液將聚丙烯酸樹脂(Eudragit L100)制成質(zhì)量濃度2% 聚丙烯酸樹脂溶液，并且用lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH至6.5,將羧甲基殼聚糖溶液和聚丙 烯酸樹脂(Eudragit L100)溶液按照體積比1:1混合并且攪拌均勻，得微球材料混合溶液， 取步驟（1)所得膠束混懸液與微球材料混合溶液按照體積比1:1在磁力攪拌下混合均勻，用 超純水稀釋1.5倍，經(jīng)噴霧干燥得膠束微球。
[0025] 實施例3
[0026] -種膠束微球的制備方法，由以下方法實現(xiàn)：
[0027] (1)、制備膠束混懸液：
[0028] 40°C水浴下，將IOOmg PEG5000-PLGA5000、10mg大豆磷脂（PC-80，磷脂酰膽堿含量 >80%，注射級）溶解在3ml水中，作為水相，將4mg 2-ME超聲溶解在500yL甲醇中，然后逐滴 添加到水相當(dāng)中，l〇〇〇r/min攪拌12h，過0.45μπι濾膜，得膠束混懸液，冰箱4°C保存；
[0029] (2)、制備膠束微球：
[0030]用超純水將羧甲基殼聚糖(黏均分子量為2.5 X 100000)制成質(zhì)量濃度2%的羧甲 基殼聚糖溶液，用PH7.4的磷酸緩沖液將聚丙烯酸樹脂(Eudragit L100)制成質(zhì)量濃度1% 聚丙烯酸樹脂溶液，并且用lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH至5,將羧甲基殼聚糖溶液和聚丙烯 酸樹脂(Eudragit L100)溶液按照體積比1:1混合并且攪拌均勻，得微球材料混合溶液，取 步驟(1)所得膠束混懸液與微球材料混合溶液按照體積比1:1在磁力攪拌下混合均勻，用超 純水稀釋1倍，經(jīng)噴霧干燥得膠束微球。
[0031 ] 實施例4
[0032] -種膠束微球的制備方法，由以下方法實現(xiàn)：
[0033] (1)、制備膠束混懸液：
[0034] 50°C水浴下，將90mg PEG5000-PLGA5000、8mg大豆磷脂（PC-80,磷脂酰膽堿含量〉 80 %，注射級）溶解在3ml水中，作為水相，將3mg 2-ME超聲溶解在400yL甲醇中，然后逐滴添 加到水相當(dāng)中，l〇〇〇r/min攪拌IOh，過0.45μπι濾膜，得膠束混懸液，冰箱4°C保存；
[0035] (2)、制備膠束微球：
[0036]用超純水將羧甲基殼聚糖(黏均分子量為2.5 X 100000)制成質(zhì)量濃度2%的羧甲 基殼聚糖溶液，用PH7.4的磷酸緩沖液將聚丙烯酸樹脂(Eudragit L100)制成質(zhì)量濃度1% 聚丙烯酸樹脂溶液，并且用lmol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH至7,將羧甲基殼聚糖溶液和聚丙烯 酸樹脂(Eudragit L100)溶液按照體積比1:2混合并且攪拌均勻，得微球材料混合溶液，取 步驟(1)所得膠束混懸液與微球材料混合溶液按照體積比1:1在磁力攪拌下混合均勻，用超 純水稀釋3倍，經(jīng)噴霧干燥得膠束微球。
[0037 ]本發(fā)明方法制備的膠束微球可有效用于制備抗癌藥物，實現(xiàn)膠束微球在制備抗癌 藥物中的應(yīng)用。
[0038]本發(fā)明所述方法經(jīng)過反復(fù)多次試驗，均得出相同或相近的結(jié)果，相關(guān)實驗資料如 下：
[0039]本發(fā)明的膠束微球制劑抗皮下腫瘤活性的試驗數(shù)據(jù)具體如下：
[0040] 1.動物:SPF級Balb/c小鼠，雌性，42士2日齡，體重19 ± 2g，由湖南斯萊克景達(dá)實驗 動物有限公司提供。合格證編號：SCXK(湘）2011-0003。每組動物數(shù)：陰性對照組10只，給藥 組每組10只。
[0041 ] 2.移植瘤:小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)
[0042] 3.體內(nèi)抗瘤活性:取凍存的4T1細(xì)胞株，快速復(fù)蘇后于37°C、5 %C02及飽和濕度條 件下，培養(yǎng)24h后換液，繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長滿培養(yǎng)瓶底部70~80 %時，傳代1次，以后每2~ 3d傳代1次，傳至4~5代以后，開始大量培養(yǎng)。
[0043]將生長狀態(tài)良好的對數(shù)生長期4T1細(xì)胞，胰酶消化，離心收集細(xì)胞，用生理鹽水將 細(xì)胞濃度調(diào)節(jié)成5 X IO6個· πιΓ1的細(xì)胞懸液，在無菌超凈工作臺中，按每只0.2ml細(xì)胞懸液 量接種于Balb/C小鼠右側(cè)腹部皮下乳頭周圍，共30只。接種IOd后隨機(jī)分組，按照分組不同 給藥。陰性對照組即每天口服1次生理鹽