一種多西他賽凍干粉的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥制劑技術領域，具體涉及一種多西他賽凍干粉。
【背景技術】
[0002] 多西他賽（多西紫杉醇，Docetaxel，C43H53N0 14)，是在天然抗腫瘤藥物紫杉醇的結 構基礎上，經(jīng)結構修飾后獲得的一種新的抗腫瘤藥物，其抗譜與紫杉醇類似，作用機制是促 進微管蛋白聚合和阻止微管解聚，從而抑制癌細胞的有絲分裂和增殖，藥效比紫杉醇強。
[0003] 體外的研究表明，在人乳腺、結腸、膀胱和上皮樣的細胞株，其IC50比紫杉醇低9 倍。體內研究表明，多西他賽具有有高度抗腫瘤活性，用藥后鼠腫瘤和小鼠移植腫瘤可完全 消退。更重要的是，多西他賽對紫杉醇耐藥的細胞株不會自發(fā)地產生對多烯紫杉醇的交叉 耐藥性。
[0004] 多西他賽為白色或類白色的粉末，是高度脂溶性且難溶于水的藥物，其在水中的 溶解度為6-7 μ g/ml。為了增加其溶解性，目前市售的多西他賽制劑均配方中均需添加吐溫 80作為表面活性劑。而采用吐溫80有兩大缺點。
[0005] 第一個缺點是給患者帶來較強的不良反應。吐溫80可能引起包括過敏反應、溶血 作用、心血管不良反應和體液潴留等在內的不良反應。（《吐溫-80引起動物類過敏反應的 原因初步探索》，《毒理學雜志》2007年04期；《藥用輔料吐溫80的藥理、藥動學及分析方法 研究進展》，《中國藥事》2008年第22卷第8期）。因此需要提前給患者口服糖皮質激素類 藥物進行脫敏，對已經(jīng)發(fā)生過敏反應的病人需要注射腎上腺素，這無疑加重了患者的負擔。
[0006] 第二個缺點是給藥方法比較復雜，增加了使用的難度。以泰索帝為例：需要首先 混合濃縮藥物與稀釋溶液以制備預混合溶液，然后用〇. 9%的生理鹽水將預混合溶液稀釋， 制得預混合稀釋液后的4小時內對得到的預混合稀釋液進行約1小時的滴注。此過程中需 要小心地將混合了稀釋溶液的濃縮藥物顛倒45秒，而不進行攪拌，這樣得到的溶液中可能 形成氣泡，因此需要將該溶液靜置5分鐘以使氣泡排出。齊魯制藥生產的多西他賽注射液 "多帕菲"的產品說明書中有如下的說明文字："每瓶標示量為lml:20mg的多帕菲，實際裝 有1. 2ml濃度為20mg/ml的多西他賽溶液，相當于24mg的多西他賽。此容積已經(jīng)對在準備 過程中由于藥液粘稠導致的藥液粘著瓶壁及不能抽出的"死容積"等原因造成的液體損失 進行了補充。使用時，用注射器將每瓶溶液抽取干凈并稀釋到5 %葡萄糖注射液或0. 9 %氯 化鈉注射液中。為避免藥物過量引起毒副反應。切勿用溶劑洗涮西林瓶和注射器！ "。
[0007] 聚合物膠束是由兩親性嵌段共聚物自發(fā)形成的一種核殼結構，具有納米級粒徑。 聚合物膠束作為一種給藥載體由Bader等在1984年首次提出。使用兩親性嵌段共聚物將 藥物包封在膠束的疏水內核內，達到增溶難溶性藥物進一步提高生物利用度的效果。此外， 良好的聚合物膠束能延長藥物體內循環(huán)時間，降低藥物毒性，及能通過EPR效應達到被動 靶向作用。
[0008] 凍干粉是一種保藏藥物的有效方法。將需要干燥的制品在低溫下使其所含的水分 凍結，然后放在真空的環(huán)境下干燥，讓水分由固體狀態(tài)直接升華為水蒸氣并從制品中排除 而使制品活性干燥。該方法有效地防止了制品理化及生物特性的改變，有效保護熱敏性藥 物有效成份的穩(wěn)定性；凍干制品在干燥后形態(tài)疏松、顏色基本不發(fā)生改變，加水或者親水性 有機溶劑后能夠快速溶解并恢復原有水溶液的理化特性和生物活性；由于干燥在真空條件 下進行，對于一些易氧化的物質具有很好的保護作用；制品經(jīng)過凍干后水份含量非常低，使 制品的穩(wěn)定性提高，受污染的機會減小，這不僅方便了運輸還延長了制品保存期限。
[0009] 目前對于多西他賽凍干粉的研究成果并未取得突破，尤其在組分、復溶后的粒 徑和載藥量等方面。郝守祝公開了一種多西他賽凍干粉的制備方法（《一種多西他賽的 藥用組合物、制備方法及用途》專利【申請?zhí)枴?00780000695. 1)，但在凍干粉中依然含有吐 溫80。山東大學張娜等利用PLA-PEG共聚物得到多西他賽膠束凍干粉，但復溶后的粒徑 在200nm以上（《載多烯紫杉醇納米?；旌夏z束制劑及凍干劑的制備方法》，專利【申請?zhí)枴?201010151501. 1)。

【發(fā)明內容】

[0010] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種多西他賽凍干粉。其通過將聚 乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸作為載體材料與多西他賽制成凍干粉獲得，其配方簡單，復 溶后的粒徑較小、穩(wěn)定性較高，凍干粉中多西他賽載藥量最高可超過20%，制備工藝簡單， 易于工業(yè)應用。
[0011] 本發(fā)明的技術解決方案如下。
[0012] -種多西他賽凍干粉，其包括質量比為（3. 24~27. 75) :100的多西他賽和聚乙二 醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸兩組分；其采用注射用水、生理鹽水或葡萄糖注射液復溶后，粒 徑在20. 0~29. 2nm之間。
[0013] 上述聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸的分子式如下所示：
[0015] 其中a = 10_200，b = 3-30。聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸的平均分子量為 2000-7000。嵌段聚乙二醇穩(wěn)定性很高，較難被降解；嵌段聚丙交酯只有在強酸性條件下才 易發(fā)生降解；接枝氨基酸在中性條件下反應。因此聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸在正 常體液環(huán)境中的穩(wěn)定性較高?？梢酝ㄟ^質譜分析等手段得到聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴 氨酸中不同嵌段平均分子量的數(shù)值。
[0016] 上述多西他賽凍干粉中，還包括賦形劑；所述賦形劑選自乳糖、甘露醇、右旋糖苷、 甘氨酸、葡萄糖中的一種或多種。
[0017] 上述多西他賽凍干粉，通過下述具體步驟制備得到：
[0018] a.擱板預降溫至0°C后放入載多西他賽的膠束制劑，降溫至_45°C以下，確保載藥 膠束溶液溫度降至_45°C，維持2_4h ;
[0019] b.上述步驟結束后開啟真空泵，抽真空1-1. 5h ;
[0020] c.隔板溫度設定由_45°C升至_25°C，維持12h以上，極限真空度設定為 0. 013Bar ；
[0021] d.隔板溫度設定由_25°C升至0°C，維持8h以上，極限真空度設定為0. 013Bar ;
[0022] e.隔板溫度設定由0°C升至5°C，維持3h以上，極限真空度設定為0. 013Bar ;
[0023] f.隔板溫度設定由5°C升至20°C，制品溫度達到20°C后，維持4h以上，然后結束 凍干，得到疏松塊狀的多西他賽凍干粉。
[0024] 上述載多西他賽的膠束制劑通過直接溶解法、透析法或者薄膜水化法制備得到。
[0025] 本發(fā)明中，當多西他賽凍干粉中包括賦形劑時，通過先將賦形劑添加到載多西他 賽的膠束制劑中，再凍干的工藝制備得到。
[0026] 本發(fā)明中，所述的多西他賽是指無水多西他賽原料藥，按照C43H53N0 14計，純度在 98. 0%以上。
[0027] 本發(fā)明中，研究表明，聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸無明顯的致癌性，無生殖 毒性，無致畸、致突變性，在體內可降解為乳酸、氨基酸PEG，均可直接排出體外。對小鼠進行 急性毒性試驗，小鼠的LD50>2. 00g/kg ;長毒試驗中，1. 00g/kg劑量，1次/天，每周連續(xù)給 藥2天，停藥5天，連續(xù)給藥13周后，恢復4周后觀察，未見明顯毒副作用。
[0028] 細胞毒性測試表明，聚乙二醇甲醚-聚丙交酯-賴氨酸的細胞毒性比目前公認無 毒的嵌段共聚物mPEG-PLA更低（見下表1)。
[0029] 表1 :MTT法肝細胞毒性測試結果
[0031] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有以下有益效果：
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