一種染料木素鉻配合物在治療糖尿病的醫(yī)用用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明公開一種染料木素鉻配合物在治療糖尿病的醫(yī)用用途，涉及一種用于治療 糖尿病的化合物，屬于醫(yī)學(xué)制藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 染料木素（Genistein)是一種具有多種生物活性的黃酮類化合物，化學(xué)命名為 5, 7, 4' -三羥基異黃酮，廣泛存在于大豆以及三葉草、金雀花、皂莢、槐角等傳統(tǒng)藥用植物 中，具有很高的藥用價(jià)值。
[0003] 染料木素鉻配合物的分子式：[C15H905]3Cr*2H20 ;分子量：895. 5 ;命名為：染料木 素鉻配合物；結(jié)構(gòu)式為：
經(jīng)檢索未見該染料木素鉻配合物在預(yù)防治療糖尿病方面的應(yīng)用報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了染料木素鉻配合物在治療糖尿病的醫(yī)用用途，可以通過(guò)結(jié)合鉻元素 降糖優(yōu)勢(shì)明顯提高自身的降糖活性，另一方面則可以降低無(wú)機(jī)鉻元素的毒性。
[0005] 本發(fā)明涉及的染料木素鉻配合物，通過(guò)動(dòng)物生長(zhǎng)狀況研究，空腹血糖值測(cè)定，糖耐 量試驗(yàn)，胰島素耐量實(shí)驗(yàn)表明染料木素鉻配合物具有很好的降糖效果，可以用來(lái)制備治療 II型糖尿病的藥物。
[0006] 通過(guò)以下試驗(yàn)例表明染料木素鉻配合物的降糖藥理活性： 一、染料木素鉻配合物的抗糖尿病藥理實(shí)驗(yàn)； 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果 5. 1試劑與儀器 藥品：本研究制備得到的染料木素鉻元素配合物；采用GLUC0CARD血糖儀及arkray血 糖試紙測(cè)定血糖。
[0007] 5. 2 動(dòng)物 采用DB小鼠+C57小鼠，DB小鼠購(gòu)自南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所，動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SC)(K(蘇）2010-0001 ;C57小鼠購(gòu)自南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所，動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SC)(K(蘇） 2010-0001〇
[0008] 5. 3實(shí)驗(yàn)方法 將32只DB小鼠隨機(jī)分為四組：模型組、染料木素組20mg/kg、有機(jī)鉻組20mg/kg、染料 木素鉻配合物組20mg/kg，另外一組為正常對(duì)照組C57小鼠，每組8只。按上述劑量分別灌胃 給予染料木素組、有機(jī)鉻組、染料木素鉻配合物組，模型組、C57組小鼠灌胃給予等體積水。 飼養(yǎng)溫度為21 ± 1°C，濕度為60 ±5%。用于小鼠的所有器具及食物均消毒，小鼠自由進(jìn)食、 進(jìn)水，保持墊料干燥，12h交替照明。上述5組小鼠均每日上午10:00左右持續(xù)灌胃給藥及 灌胃給水4周。
[0009] 灌胃給藥前測(cè)定各組小鼠空腹血糖及體重，連續(xù)灌胃四周，每周定時(shí)測(cè)定一次各 組小鼠空腹血糖及體重。
[0010] 5. 4實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (1)動(dòng)物生長(zhǎng)狀況 每日觀察動(dòng)物一次，觀察動(dòng)物精神狀況、行為和毛色有無(wú)異常。每周稱重并記錄動(dòng)物體 重變化情況。各組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體質(zhì)量比較見表1。
[0011] 表1各組小鼠治療前后體質(zhì)量變化比較（x土s，n=8)
與模型組比較：*P〈〇. 05 ;#P〈0. 01 ;#*P〈0. 001 表1可見，染料木素組、有機(jī)鉻組小鼠隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，前兩周體重并沒有明 顯下降，但從第三周開始時(shí)，該兩組小鼠體重出現(xiàn)明顯下降，與模型組比較有明顯差異 (P〈0. 05);、染料木素鉻配合物組小鼠從第二周開始體重明顯下降，與模型組比較有明顯差 異（P〈0. 05、P〈0. 01、P〈0. 001) ;C57組小鼠呈逐漸正常增長(zhǎng)趨勢(shì)。
[0012] (2 )空腹血糖值測(cè)定 空腹血糖值為每周六上午8點(diǎn)。用采血針針刺小鼠尾巴末端，將試紙插入血糖儀，全血 滴在血糖試紙上，記錄讀數(shù)。
[0013] 表2各組小鼠治療前后血糖水平變化比較（x土s，n=8)
與模型組比較：*P〈〇. 05, **P〈0. 01，*#P〈0. 001 ;與染料木素鉻配合物組比較： ▲ P<0. 05,AAAP<0. 001 由表2可見，試驗(yàn)期間模型組與C57組小鼠血糖值均未出現(xiàn)明顯變化。給藥2周后開 始，染料木素組、有機(jī)鉻組小鼠血糖與模型組比較均有明顯降低作用（P〈〇. 05,P〈0. 01)。而 染料木素鉻配合物組小鼠血糖從給藥1周后開始明顯低于模型組，而且從給藥后2周開始 血糖明顯低于染料木素組、有機(jī)鉻組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈〇. 05,P〈0. 01，P〈0. 001)。
[0014] (3)糖耐量試驗(yàn) DB小鼠禁食(不禁食)12h后，然后各試驗(yàn)組小鼠分別以2g/kg劑量灌胃葡萄糖溶液，測(cè) 定給葡萄糖前（Omin)及30, 60和120min后的血糖值。
[0015] 表3各組小鼠糖耐量的影響（x土s，n=8)
與模型組比較：*P〈〇. 05, **P〈0. 01，*#P〈0. 001 ;與染料木素鉻配合物組比較： ▲ ▲▲P〈0. 001 由表3可見，給藥后120min染料木素組、有機(jī)鉻組小鼠血糖與模型組比較均有明顯降 低作用（P〈〇. 05)。而染料木素鉻配合物組組小鼠血糖從給藥后30min開始明顯低于模型 組，而且從給藥后60min開始血糖明顯低于染料木素組、有機(jī)鉻組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P〈0. 001)。
[0016] 治療組和模型組比較，2h各給藥組與模型組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈0. 05)，說(shuō)明 能顯著提高糖耐量水平，而且染料木素鉻配合物組糖耐量水平明顯高于結(jié)構(gòu)A及結(jié)構(gòu)B。
[0017] (4)胰島素耐量實(shí)驗(yàn) 大鼠禁食4h，腹腔注射諾和靈RlU/kg，測(cè)定注射前（Omin)及注射后30,60,120min Glu，以0時(shí)Glu為100%，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)血糖下降率，見表4。
[0018] 表4各組小鼠胰島素耐量的影響（x土s，n=8)
與模型組比較：#P〈〇. 01，*#P〈〇. 001 ;與AB配合物組比較：▲P〈0. 05, ▲▲P〈0. 01 注射胰島素后，染料木素組、有機(jī)鉻組血糖下降率與模型組比較無(wú)明顯差異，而染料木 素鉻配合物組小鼠血糖下降率從給藥后30min開始與模型組比較有顯著性差異（P〈0. 01， P〈0. 001)，表明染料木素鉻配合物組可以明顯增強(qiáng)DB小鼠對(duì)胰島素的敏感性，而染料木素 組、有機(jī)鉻組提高胰島素敏感性作用不顯著。
[0019] 結(jié)論：通過(guò)動(dòng)物生長(zhǎng)狀況研究，空腹血糖值測(cè)定，糖耐量試驗(yàn)，胰島素耐量實(shí)驗(yàn)表 明染料木素鉻配合物具有很好的降糖效果，染料木素通過(guò)結(jié)合鉻元素明顯提高自身的降糖 活性，可以用來(lái)制備治療II型糖尿病的藥物。
[0020] 二、染料木素鉻配合物的抗糖尿病藥理實(shí)驗(yàn)； 1試劑與儀器 藥品：本發(fā)明實(shí)施例1制備得到的化合物I;采用GLUC0CARD血糖儀及arkray血糖試 紙測(cè)定血糖。
[0021] 2 動(dòng)物 采用DB小鼠+C57小鼠，DB小鼠購(gòu)自南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所，動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SC)(K(蘇）2010-0001 ;C57小鼠購(gòu)自南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所，動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SC)(K(蘇） 2010-0001〇
[0022] 3實(shí)驗(yàn)方法：在此實(shí)施例中，將29只DB小鼠隨機(jī)分為四組，另外一組為C57小鼠， 8只。其中3組DB小鼠為受試組，每組7只，分別灌胃給予高（30mg/kg)、中（20mg/kg)、低 (10mg/kg)劑量的化合物I;另外一組DB小鼠為模型組，8只，灌胃給水；C57小鼠為正常 對(duì)照組，灌胃給水。實(shí)驗(yàn)前檢疫3d，飼養(yǎng)溫度為21±1°C，濕度為60±5%。用于小鼠的所有 器具及食物均消毒，小鼠自由進(jìn)食、進(jìn)水，保持墊料干燥，12h交替照明。上述5組小鼠均每 日上午10:00左右持續(xù)給藥及給水4周。
[0023] 灌胃給藥前測(cè)定各組小鼠空腹血糖及體重，連續(xù)灌胃四周，每周定時(shí)測(cè)定一次各 組小鼠空腹血糖及體重。
[0024] 1)動(dòng)物生長(zhǎng)狀況 每日觀察動(dòng)物一次，觀察動(dòng)物精神狀況、行為和毛色有無(wú)異常。每周稱重并記錄動(dòng)物體 重變化情況。各組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體質(zhì)量比較見表5。
[0025] 表5各組小鼠治療前后體質(zhì)量變化比較（x±3
表5 口」見，高、中、低刑量組隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，前三周體里并沒有明M卜降，甚全中刑 量組出現(xiàn)體重上升趨勢(shì)。但在第四周時(shí)，各給藥組體重出現(xiàn)明顯下降，與給藥前有明顯差異 (P〈0. 05)，模型組也有下降但是和C57均無(wú)差異（P>0. 05)。
[0026] 2)空腹血糖值測(cè)定 空腹血糖值為每周六上午8點(diǎn)。用采血針針刺小鼠尾巴末端，將試紙插入血糖儀，全血 滴在血糖試紙上，記錄讀數(shù)。表6可見，實(shí)驗(yàn)期間模型組與C57組小鼠血糖值均未出現(xiàn)明顯 變化。試驗(yàn)4周后，高、中、低劑量組對(duì)糖尿病小鼠均有降血糖作用，高、中劑量組與模型組 比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈〇. 05)。
[0027] 表6各組小鼠治療前后血糖水平變化比較（x± 3
3) 糖耐量試驗(yàn) DB小鼠禁食(不禁食)12h后，然后各試驗(yàn)組小鼠分別以2g/kg劑量灌胃葡萄糖溶液，測(cè) 定給葡萄糖前（Omin)及30, 60和120min后的血糖值，計(jì)算糖耐量曲線下面積（AUC)。
[0028] 由表7可見，模型組各個(gè)時(shí)段與C57組相比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈0. 05)，說(shuō)明 模型組糖耐量水平下降。治療組和模型組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈〇. 05)，說(shuō)明能顯著 提高糖耐量水平。
[0029] 表7各組小鼠糖耐量的影響（x± 3
4) 胰島素耐量實(shí)驗(yàn) 大鼠禁食4h，腹腔注射諾和靈RlU/kg，測(cè)定注射前（Omin)及注射后30,60,120min Glu，以0時(shí)Glu為100%，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)Glu變化，以Glu變化（％)為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)， 參見圖1。
[0030] 結(jié)論：注射胰島素后，中劑量組和高劑量組血糖變化率較大，與模型組相比有明顯 下降（P〈0. 05)，血糖下降率明顯提高，表明染料木素鉻配合物可以明顯增強(qiáng)DB小鼠對(duì)胰島 素的敏感性。
[0031] 本發(fā)明的積極效果在于：提供了染料木素鉻配合物在制備治療糖尿病的藥物的新 醫(yī)用用途，該配合物具有降低血糖，能顯著提高糖耐量水平，明顯增強(qiáng)DB小鼠對(duì)胰島素的 敏感性，活性較染料木素及鉻有較大的增強(qiáng)，具有明顯的醫(yī)療效果，有可以作為降糖活性候 選物。
【附圖說(shuō)明】
[0032] 圖1為本發(fā)明胰島素耐量實(shí)驗(yàn)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0033] 以下通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明，但這些實(shí)施例并不用于限制本發(fā) 明的保護(hù)范圍。
[0034] 實(shí)施例1 以染料木素鉻配合物為活性成分可制成藥物學(xué)上的治療II型糖尿病的任何藥物。
[0035] 取染料木素鉻配合物300g加入適量淀粉，混勻，60°C以下干燥，裝膠囊1000粒， 即得本品膠囊制劑。此項(xiàng)目符合中華人民共和國(guó)藥典2000版膠囊項(xiàng)目的有關(guān)要求。
[0036] 實(shí)施例2: 取染料木素鉻配合物500g加入適量淀粉、潤(rùn)滑劑，混勻，60°C以下干燥，壓片，即得 1000片。此項(xiàng)目符合中華人民共和國(guó)藥典2000版片劑項(xiàng)目的有關(guān)要求。
[0037] 實(shí)施例3: 取染料木素鉻配合物800g加入適量淀粉，混勻，60°C以下干燥，制粒，即得1000袋顆粒 劑。此項(xiàng)目符合中華人民共和國(guó)藥典2000版顆粒項(xiàng)目的有關(guān)要求。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.染料木素鉻配合物在制備治療糖尿病藥物中的醫(yī)用用途。
【專利摘要】本發(fā)明提供了染料木素鉻配合物在治療糖尿病的醫(yī)用用途，通過(guò)動(dòng)物生長(zhǎng)狀況研究，空腹血糖值測(cè)定，糖耐量試驗(yàn)，胰島素耐量實(shí)驗(yàn)表明染料木素鉻配合物具有很好的降糖效果，可以用來(lái)制備治療Ⅱ型糖尿病的藥物；可以通過(guò)結(jié)合鉻元素降糖優(yōu)勢(shì)明顯提高自身的降糖活性，另一方面則可以降低無(wú)機(jī)鉻元素的毒性。
【IPC分類】A61K31/555, A61P3/10
【公開號(hào)】CN105106221
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510601960
【發(fā)明人】徐暾海, 李朋收, 劉銅華, 徐雅娟, 解生旭, 張曼祺
【申請(qǐng)人】北京中醫(yī)藥大學(xué)
【公開日】2015年12月2日
【申請(qǐng)日】2015年9月21日