本發(fā)明屬于可降解聚合物磁性納米粒子及其制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種在磁性納米粒子外殼包裹可降解聚合物材料作為藥物載體及其制備方法，特別涉及一種在磁性納米粒子外殼包裹可降解聚合物材料作為具有靶向功能的藥物載體及其制備方法。

背景技術(shù)：

近年來，基于fe3o4的磁性納米粒子具有超順磁性、細(xì)胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)，在藥物傳遞(治療)以及磁共振成像(醫(yī)學(xué)診斷)一體化研究方面得到了廣泛的應(yīng)用。為提高磁性納米粒子的穩(wěn)定性，本領(lǐng)域技術(shù)人員通常采用的技術(shù)解決手段是在磁性納米粒子包裹一層聚合物材料外殼來制備聚合物磁性納米粒子。該外殼不僅可保護(hù)fe3o4內(nèi)核不受外部化學(xué)環(huán)境的氧化或酸蝕等影響；同時(shí)也防止了磁性納米粒子發(fā)生聚集。然而，隨著對(duì)聚合物磁性納米粒子的深入研究，發(fā)現(xiàn)其在實(shí)現(xiàn)診斷治療過程中還存在一些制約磁性納米粒子大規(guī)模臨床應(yīng)用的缺陷：

(1)聚合物外殼無法降解。用聚合物材料作為外殼包裹磁性納米粒子來形成聚合物磁性納米粒子的技術(shù)，雖然具有方法簡單，納米粒子結(jié)構(gòu)清楚等優(yōu)點(diǎn)，但其形成的聚合物外殼一般無降解功能，很容易在人體中發(fā)生聚集，從而引起對(duì)肝、腎等器官的毒性(fangc.,kievitf.m.,veiseho.,stephenz.r.,wangt.,leed.,ellenbogenr.g.,zhangm.fabricationofmagneticnanoparticleswithcontrollabledrugloadingandreleasethroughasimpleassemblyapproach.journalofcontrolledrelease.2012,162:233–241)。

(2)納米粒子穩(wěn)定性不足。傳統(tǒng)技術(shù)一般是利用聚合物材料與磁性納米粒子之間的非共價(jià)鍵作用來形成聚合物磁性納米粒子。這一技術(shù)雖然簡便，但是由于形成的非共價(jià)鍵作用本身不夠穩(wěn)定，使得所制備的聚合物磁性納米粒子會(huì)在人體體液稀釋作用下，在溫度、離子濃度、ph值等影響因素下易崩解，使聚合物外殼與磁性納米粒子容易分離，穩(wěn)定性很差，不能實(shí)現(xiàn)其在人體內(nèi)長期循環(huán)的要求。另一方面，傳統(tǒng)技術(shù)中一般采取透析法，利用聚合物的親疏水性、氫鍵等弱作用力來包裹藥物，實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物分子的傳遞。由于這種技術(shù)手段所形成的藥物與聚合物之間的相互作用力較弱，藥物的負(fù)載穩(wěn)定性也較差，常常會(huì)在正常組織和細(xì)胞處將較多的藥物提前釋放，故此類磁性納米粒子普遍存在對(duì)正常組織細(xì)胞的毒副作用(chenj.,shim.,liup.,koa.,zhongw.,liaow.,xingm.,m.q.reduciblepolyamidoamine-magneticironoxideself-assemblednanoparticlesfordoxorubicindelivery.biomaterials,2014,35:1240–1248)。

(3)無靶向功能，使載藥后聚合物磁性納米粒子不能進(jìn)行準(zhǔn)確釋藥。由于傳統(tǒng)上一般是采用聚乙二醇、聚(n-異丙基丙烯酰胺)等親水性聚合物作為聚合物磁性納米粒子的外殼，從而保持其在溶液中的穩(wěn)定性。雖然該技術(shù)具有制備方法簡單的優(yōu)點(diǎn)，但其制備的聚合物磁性納米粒子無靶向功能，不能將聚合物磁性納米粒子有效傳遞進(jìn)入靶向細(xì)胞，釋藥殺傷腫瘤細(xì)胞。因此，載藥的聚合物磁性納米粒子在正常組織和細(xì)胞處易發(fā)生聚集，存在毒副作用的風(fēng)險(xiǎn)(尚樂,周慶翰.多功能磁性納米藥物載體的制備及表征.西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2016,42(5):531-537)。

(4)造影效果不佳。傳統(tǒng)技術(shù)制備的聚合物磁性納米粒子，因聚合物材料與磁性納米粒子之間的相互作用力較弱(如疏水鍵、氫鍵等非共價(jià)鍵力)，其包裹的磁性納米粒子含量偏少，導(dǎo)致橫向弛豫性能(r2)偏低，造影效果不佳，影響了聚合物磁性納米粒子作為磁性造影的臨床應(yīng)用(liuy.,yangk.,chengl.,zhuj.,max.,xuh.,liy.,guol.,guh.,liuz.pegylatedfept@fe2o3core-shellmagneticnanoparticles:potentialtheranosticapplicationsandinvivotoxicitystudies.nanomedicine:nanotechnology,biology,andmedicine,2013,9:1077–1088)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)上述現(xiàn)有聚合物磁性納米粒子存在的問題，提供一種可降解聚合物磁性納米粒子，即其聚合物外殼可降解，且與磁性納米粒子通過配位鍵結(jié)合穩(wěn)定，藥物的負(fù)載穩(wěn)定性好，具有靶向功能以及造影效果好的特點(diǎn)。

本發(fā)明另一目的是提供上述可降解聚合物磁性納米粒子的制備方法。

本發(fā)明提供的一種可降解聚合物磁性納米粒子，該納米粒子是以含雙乙烯基二硫鍵的化合物作為偶聯(lián)劑，將多巴胺、抗腫瘤藥物基團(tuán)、靶向功能基團(tuán)通過共價(jià)鍵連接的方式與該偶聯(lián)劑主鏈相連，并聚合制成可降解外殼，再通過可降解外殼上的多巴胺與四氧化三鐵納米粒子表面進(jìn)行配位鍵結(jié)合，將可降解外殼化學(xué)包裹在四氧化三鐵納米粒子外表面上，該可降解聚合物磁性納米粒子最高載藥量為857μg抗腫瘤藥物每毫克鐵，且在加入谷胱甘肽(gsh)的條件下藥物累計(jì)釋放量最高為79.1％。

上述含雙乙烯基二硫鍵的化合物為n,n'-雙(丙稀酰)胱胺(bacy)。

上述抗腫瘤藥物基團(tuán)為鹽酸阿霉素(dox)基團(tuán)。

上述靶向功能基團(tuán)為葉酸聚乙二醇(fa-peg-nh2)基團(tuán)。

本發(fā)明提供的制備上述可降解聚合物磁性納米粒子方法的工藝步驟和條件如下：

(1)參照現(xiàn)有技術(shù)制備得四氧化三鐵納米粒子；

(2)按質(zhì)量份數(shù)計(jì)，將含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑5～15份，鹽酸多巴胺(da)2～10份，抗腫瘤藥物2～10份，氨基聚乙二醇(mpeg-nh2)10～50份，靶向修飾劑2～10份混合均勻，同時(shí)將三乙胺溶解于溶劑i中配置成體積濃度為0.5～1％的三乙胺溶液，然后再將三乙胺溶液滴加入上述混合物中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于20～50℃反應(yīng)20～48小時(shí)，所得粗產(chǎn)物用溶劑i洗滌沉淀，沉淀物溶解于去離子水中透析，冷凍干燥得到的暗紅色固體即為可降解聚合物；

(3)按質(zhì)量份數(shù)計(jì)，將步驟(2)所得可降解聚合物10～20份溶解在溶劑ii中配置成質(zhì)量體積濃度為0.05～0.10g/l的溶液，并加入2～10份步驟(1)所得四氧化三鐵納米粒子混合，然后將混合物溶解于四氫呋喃形成以可降解聚合物質(zhì)量計(jì)濃度為0.6～1.4mg/ml的溶液，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫避光攪拌反應(yīng)24～48小時(shí)，離心分離混合溶液得到粗產(chǎn)品，利用去離子水對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行洗滌、透析，冷凍干燥后得到可降解聚合物磁性納米粒子；

其中，所述的溶劑i為n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、四氫呋喃(thf)、二甲基亞砜(dmso)、乙酸乙酯、二氯甲烷或乙醚中的任一種；

其中，所述的溶劑ii為n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、n,n-二甲基乙酰胺或二甲基亞砜(dmso)中的任一種。

上述步驟(1)中所述參照現(xiàn)有技術(shù)制備得四氧化三鐵納米粒子具體是參照文獻(xiàn)(陳亭汝，孫瑾.fe3o4磁性納米粒子的共沉淀法制備研究[j].應(yīng)用化工，2009，38(2):227-228.)中所記載的方法制備的，為了適應(yīng)本發(fā)明，調(diào)整其工藝參數(shù)如下：

將fecl3·6h2o和feso4按照摩爾比為1:(1～10)混合，并溶解于去離子水中配制成0.5～2g/ml的溶液，然后在氮?dú)鈿夥涨覝囟葹?0～90℃下，邊攪拌邊加入以去離子水體積計(jì)2～10％的堿液，反應(yīng)30～60min，再加入以去離子水體積計(jì)2～6％的油酸，繼續(xù)反應(yīng)3～6h，所得粗產(chǎn)品經(jīng)磁鐵收集后，再用去離子水洗滌、離心分離、干燥即得四氧化三鐵納米粒子。其中所用堿液為市售濃度為25～28％的濃氨水或配制的濃度為10％的氫氧化鈉溶液。

上述步驟(2)中所述的含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑為n,n'-雙(丙稀酰)胱胺(bacy)，其是參考文獻(xiàn)(pany.j.,cheny.y.,wangd.r.,weic.,guoj.,lud.r.,chuc.c.,wangc.c.redox/phdualstimuli-responsivebiodegradablenanohydrogelswithvaryingresponsestodithiothreitolandglutathioneforcontrolleddrugrelease.biomaterials,2012,33:6570–6579)所公開的方法制備的。

上述步驟(2)中所述的抗腫瘤藥物為鹽酸阿霉素(dox)。

上述步驟(2)中所述的靶向修飾劑為葉酸聚乙二醇(fa-peg-nh2)。

本發(fā)明具有以下有益效果：

(1)由于本發(fā)明制備工藝中所采用含雙乙烯基二硫鍵偶聯(lián)劑是由胱胺二鹽酸鹽與丙烯酰氯進(jìn)行縮合反應(yīng)而制得，其不僅可作為直鏈?zhǔn)脚悸?lián)劑，在磁性粒子聚合物外殼上形成主鏈，并與dox、葉酸聚乙二醇進(jìn)行鏈接，而且因其上含有二硫鍵結(jié)構(gòu)，還可在谷胱甘肽(gsh)作用下被還原成-sh基，因而可使得其制成的聚合物外殼既能同時(shí)承載藥物和靶向修飾劑，又具有還原響應(yīng)性，解決了傳統(tǒng)聚合物磁性納米粒子載藥體在人體內(nèi)難以降解的問題。

(2)由于本發(fā)明在制備可降解聚合物外殼的技術(shù)方案中，其合成原理是采用的麥克爾(michael)加成反應(yīng)技術(shù)，即是直接將多巴胺與聚合物主鏈進(jìn)行鏈接，而鏈接的多巴胺又能夠與四氧化三鐵納米粒子表面通過配位鍵進(jìn)行牢固結(jié)合，因而使得聚合物外殼與磁性納米粒子的聯(lián)結(jié)具有良好的穩(wěn)定性，解決了傳統(tǒng)聚合物磁性納米粒子在人體體液稀釋、溫度、離子濃度、ph值等影響因素下容易崩解、診斷效率低的問題。

(3)由于本發(fā)明能夠通過麥克爾加成反應(yīng)技術(shù)，將藥物鹽酸阿霉素(dox)與聚合物主鏈通過共價(jià)鍵進(jìn)行鏈接，因而使得藥物負(fù)載穩(wěn)定性較高，不僅在正常生理?xiàng)l件下聚合物外殼負(fù)載的藥物不釋放，且當(dāng)聚合物磁性納米粒子進(jìn)入細(xì)胞后就可在谷胱甘肽(gsh)作用下降解，快速釋放鹽酸阿霉素(dox)，殺傷腫瘤細(xì)胞，解決了傳統(tǒng)聚合物磁性納米粒子載藥穩(wěn)定性差、提前釋藥的問題。

(4)由于本發(fā)明通過麥克爾加成反應(yīng)技術(shù)還能將葉酸聚乙二醇與聚合物主鏈進(jìn)行鏈接，而葉酸基團(tuán)可與腫瘤細(xì)胞表面的葉酸受體結(jié)合，因而使得聚合物磁性納米粒子能夠有效傳遞進(jìn)入靶向腫瘤細(xì)胞，解決了現(xiàn)有技術(shù)中聚合物磁性納米粒子無靶向功能，易在正常組織和細(xì)胞處發(fā)生聚集，存在毒副作用的問題。

(5)由于本發(fā)明制備方法能將可降解聚合物與四氧化三鐵納米粒子二者間利用配體交換反應(yīng)技術(shù)制備得到可降解聚合物磁性納米粒子，這不僅使四氧化三鐵納米粒子可在聚合物外殼包裹作用下形成磁性粒子簇，進(jìn)而發(fā)生磁耦合現(xiàn)象，因而可有效提高其作為磁共振成像造影劑的橫向弛豫性能(r2)，解決了傳統(tǒng)聚合物磁性納米粒子磁共振成像造影效果不佳的問題。

(6)由本發(fā)明提供方法制備所得的聚合物磁性納米粒子不僅載藥量可達(dá)857μgdox每毫克鐵，優(yōu)于同類產(chǎn)品，且在gsh條件下藥物累計(jì)釋放量最高可達(dá)79.1％，也高于同類產(chǎn)品。

(7)本發(fā)明提供的制備方法簡單，條件溫和，可控性強(qiáng)，易于操作，便于推廣應(yīng)用。

附圖說明

圖1是用胱胺二鹽酸鹽和丙烯酰氯制備得到的含雙乙烯基二硫鍵偶聯(lián)劑的核磁氫譜圖。其中，δ(ppm)：6.6(c：酰胺鍵上的氫)，δ(ppm)：6.2(b：雙鍵中靠近羰基的碳上的氫)，δ(ppm)：5.6和6.4(a：雙鍵中遠(yuǎn)離羰基的碳上的氫)，δ(ppm)：2.9(靠近二硫鍵亞甲基上的氫)，δ(ppm)：3.6(靠近酰胺亞甲基上氫)。結(jié)果表明所制備的偶聯(lián)劑與預(yù)期一致。

圖2是用鹽酸多巴胺，鹽酸阿霉素，偶聯(lián)劑，甲氧基聚乙二醇氨基和葉酸聚乙二醇氨基制備得到的可降解聚合物的核磁氫譜圖。其中，δ(ppm)：8.5-8.8(多巴胺上酚羥基氫)，δ(ppm)：8.2(多巴胺上氨基氫)，δ(ppm)：7-7.8(葉酸苯環(huán)上的氫)，δ(ppm)：6.3-6.6(b、c：多巴胺苯環(huán)上的氫)，δ(ppm)：5.4(阿霉素上酚羥基氫)，δ(ppm)：4.0(阿霉素上甲氧基上的氫)δ(ppm)：3.5(聚乙二醇上的氫)，δ(ppm)：3.3(多巴胺上氨基相鄰碳?xì)?，δ(ppm)：2.7(偶聯(lián)劑二硫鍵旁碳上的氫)。結(jié)果表明所制備的可降解聚合物與預(yù)期一致。

圖3是含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑、四氧化三鐵納米粒子和可降解聚合物磁性納米粒子的紅外光譜譜圖。在可降解聚合物磁性納米粒子的譜圖中1650cm^-1附近出現(xiàn)的明顯酰胺鍵-羰基特征吸收峰，表明已成功制備可降解聚合物磁性納米粒子。在可降解聚合物磁性納米粒子的譜圖中580cm^-1附近有明顯的fe-o鍵的特征吸收峰，結(jié)果表明已成功制備可降解聚合物磁性納米粒子。

圖4是可降解聚合物磁性納米粒子在10mm的gsh作用下降解后的粒徑變化圖。由圖可以看出，加入gsh后，其粒徑呈現(xiàn)出先逐漸增大的趨勢，這是因?yàn)間sh使聚合物中的二硫鍵斷裂，納米粒子發(fā)生溶脹，粒徑增大。結(jié)果表明所制備的可降解聚合物磁性納米粒子對(duì)gsh具有很好的還原響應(yīng)性。

圖5為實(shí)施例1中可降解聚合物磁性納米粒子在室溫、ph＝7.4條件下，用動(dòng)態(tài)光散射(dls)測得的一周內(nèi)粒徑變化圖。結(jié)果表明，隨著時(shí)間的增加，膠束的粒徑?jīng)]有明顯變化，說明該納米粒子在室溫下結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。

圖6為可降解聚合物磁性納米粒子在水中的透射電鏡照片，從照片中可見納米粒子呈球形分布，其平均粒徑約120nm左右。結(jié)果表明所制備的可降解聚合物磁性納米粒子在水中分散良好，符合本發(fā)明中對(duì)納米粒子的要求。

圖7為可降解聚合物磁性納米粒子在阿霉素/pbs(ph＝7.4)/gsh環(huán)境下的藥物釋放曲線圖。從圖中可見在pbs緩沖液中，載藥的可降解聚合物磁性納米粒子的藥物累計(jì)釋放量只有25.4％，加入gsh后藥物累計(jì)釋放量最高可達(dá)79.1％。結(jié)果表明，載藥的可降解聚合物磁性納米粒子在gsh作用下，能夠快速高效釋藥。

具體實(shí)施方式

下面給出實(shí)施例以對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。有必要在此指出的是以下實(shí)施例不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，如果該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員根據(jù)上述本發(fā)明內(nèi)容對(duì)本發(fā)明作出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。

特別說明的是，以下實(shí)施例中產(chǎn)品所用表征與處理方法：(1)紅外表征所用傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜儀(ftir)型號(hào)為thermo公司的nicoletis50，測試時(shí)用kbr磨成粉，壓片，測試范圍400～4000cm^-1。(2)核磁表征所用核磁共振譜儀(nmr)的型號(hào)為bruker-400mhz，測試時(shí)以tms為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿(cdcl3)或氘代dmso為溶劑。(3)動(dòng)態(tài)光散射(dls)所用儀器型號(hào)為nano-zs90，測量時(shí)溫度25℃。紫外可見光光度計(jì)(uv-vis)：tu1950，測量波長為480nm。透射電子顯微鏡(tem)為日立h-600，加速電壓為75kv，納米粒子濃度2mg/ml。(4)處理和分析數(shù)據(jù)所用軟件為chemdraw，mestrenova，origin等。(5)以下實(shí)施例中所用的濃氨水為濃度25～28％的市售濃氨水，所述氫氧化鈉溶液為配制的濃度為10％的氫氧化鈉溶液。

實(shí)施例1

將摩爾比為1:2的fecl3·6h2o和feso4，加入50ml去離子水中配制成0.7g/ml的溶液，通入氮?dú)獠⒃?0℃下進(jìn)行機(jī)械攪拌，然后加入5ml濃氨水反應(yīng)50min后，再加入油酸1ml，繼續(xù)反應(yīng)6h。所得粗產(chǎn)品經(jīng)磁鐵收集后，再用去離子水洗滌、離心分離、干燥即得產(chǎn)品四氧化三鐵納米粒子。

將含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑130mg、da72mg、dox70mg、mpeg-nh2328mg、fa-peg-nh252mg混合均勻，同時(shí)將50μl三乙胺溶解于10mldmso配置成體積濃度為0.5％的溶液，再滴加入上述混合物中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于20℃反應(yīng)20小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后粗產(chǎn)品用乙醚洗滌沉淀，沉淀物溶解于去離子水中透析，冷凍干燥得到暗紅色固體即為可降解聚合物。

將可降解聚合物20mg溶解于200μldmso中，并加入2mg四氧化三鐵納米粒子混合，然后將混合物溶解于20ml的thf中，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫避光攪拌反應(yīng)24小時(shí)，離心分離得到粗產(chǎn)品，利用去離子水對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行洗滌、透析、冷凍干燥后得到可降解聚合物磁性納米粒子。

實(shí)施例2

將摩爾比為1:3的fecl3·6h2o和feso4，加入50ml去離子水中配制成0.5g/ml的溶液，通入氮?dú)獠⒃?0℃下進(jìn)行機(jī)械攪拌，然后加入4ml濃氨水反應(yīng)40min后，再加入油酸1ml，繼續(xù)反應(yīng)4h。所得粗產(chǎn)品經(jīng)磁鐵收集后，再用去離子水洗滌、離心分離、干燥即得產(chǎn)品四氧化三鐵納米粒子。

將含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑50mg、da20mg、dox20mg、mpeg-nh2100mg、fa-peg-nh220mg混合均勻，同時(shí)將80μl三乙胺溶解于10mldmso配置成體積濃度為0.8％的溶液，再滴加入上述混合物中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于30℃反應(yīng)48小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后粗產(chǎn)品用乙醚洗滌沉淀，沉淀物溶解于去離子水中透析，冷凍干燥得到暗紅色固體即為可降解聚合物。

將可降解聚合物10mg溶解于200μldmso中，并加入10mg四氧化三鐵納米粒子混合，然后將混合物溶解于14ml的thf中，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫避光攪拌反應(yīng)48小時(shí)，離心分離得到粗產(chǎn)品，利用去離子水對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行洗滌、透析、冷凍干燥后得到可降解聚合物磁性納米粒子。

實(shí)施例3

將摩爾比為1:4的fecl3·6h2o和feso4，加入50ml去離子水中配制成1g/ml的溶液，通入氮?dú)獠⒃?0℃下進(jìn)行機(jī)械攪拌，然后加入1ml氫氧化鈉溶液反應(yīng)30min后，再加入油酸3ml，繼續(xù)反應(yīng)5h。所得粗產(chǎn)品經(jīng)磁鐵收集后，再用去離子水洗滌、離心分離、干燥即得產(chǎn)品四氧化三鐵納米粒子。

將含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑150mg、da100mg、dox100mg、mpeg-nh2500mg、fa-peg-nh2100mg混合均勻，同時(shí)將90μl三乙胺溶解于10mldmf配置成體積濃度為0.9％的溶液，再滴加入上述混合物中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于50℃反應(yīng)36小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后粗產(chǎn)品用乙醚洗滌沉淀，沉淀物溶解于去離子水中透析，冷凍干燥得到暗紅色固體即為可降解聚合物。

將可降解聚合物14mg溶解于200μldmf中，并加入5mg四氧化三鐵納米粒子混合，然后將混合物溶解于10ml的thf中，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫避光攪拌反應(yīng)36小時(shí)，離心分離得到粗產(chǎn)品，利用去離子水對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行洗滌、透析、冷凍干燥后得到可降解聚合物磁性納米粒子。

實(shí)施例4

將摩爾比為1:1的fecl3·6h2o和feso4，加入50ml去離子水中配制成1.5g/ml的溶液，通入氮?dú)獠⒃?0℃下進(jìn)行機(jī)械攪拌，然后加入3ml氫氧化鈉溶液反應(yīng)30min后，再加入油酸2ml，繼續(xù)反應(yīng)3h。所得粗產(chǎn)品經(jīng)磁鐵收集后，再用去離子水洗滌、離心分離、干燥即得產(chǎn)品四氧化三鐵納米粒子。

將含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑110mg、da36mg、dox35mg、mpeg-nh2164mg、fa-peg-nh226mg混合均勻，同時(shí)將100μl三乙胺溶解于10mldmf配置成體積濃度為1.0％的溶液，再滴加入上述混合物中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于40℃反應(yīng)40小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后粗產(chǎn)品用乙醚洗滌沉淀，沉淀物溶解于去離子水中透析，冷凍干燥得到暗紅色固體即為可降解聚合物。

將可降解聚合物12mg溶解于200μldmso中，并加入8mg四氧化三鐵納米粒子混合，然后將混合物溶解于20ml的thf中，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫避光攪拌反應(yīng)40小時(shí)，離心分離得到粗產(chǎn)品，利用去離子水對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行洗滌、透析、冷凍干燥后得到可降解聚合物磁性納米粒子。

實(shí)施例5

將摩爾比為1:10的fecl3·6h2o和feso4，加入50ml去離子水中配制成2g/ml的溶液，通入氮?dú)獠⒃?0℃下進(jìn)行機(jī)械攪拌，然后加入1ml氫氧化鈉溶液反應(yīng)60min后，再加入油酸3ml，繼續(xù)反應(yīng)6h。所得粗產(chǎn)品經(jīng)磁鐵收集后，再用去離子水洗滌、離心分離、干燥即得產(chǎn)品四氧化三鐵納米粒子。

將含雙乙烯基二硫鍵的偶聯(lián)劑130mg、da56mg、dox65mg、mpeg-nh2204mg、fa-peg-nh266mg混合均勻，同時(shí)將50μl三乙胺溶解于10mlthf配置成體積濃度為0.5％的溶液，再滴加入上述混合物中，并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下于50℃反應(yīng)24小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后粗產(chǎn)品用乙醚洗滌沉淀，沉淀物溶解于去離子水中透析，冷凍干燥得到暗紅色固體即為可降解聚合物。

將可降解聚合物18mg溶解于200μldmso中，并加入6mg四氧化三鐵納米粒子混合，然后將混合物溶解于20ml的thf中，于氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫避光攪拌反應(yīng)24小時(shí)，離心分離得到粗產(chǎn)品，利用去離子水對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行洗滌、透析、冷凍干燥后得到可降解聚合物磁性納米粒子。