專利名稱：：氟苯尼考注射用原位凝膠及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬動(dòng)物專用藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠及其制備方法。
背景技術(shù)：
：原位凝膠(insitugel)系利用高分子材料對(duì)外界環(huán)境刺激的響應(yīng),使聚合物發(fā)生分散狀態(tài)或構(gòu)象的可逆變化，由液體狀態(tài)變成半固體或固體凝膠狀態(tài)。由于原位凝膠系統(tǒng)在體內(nèi)形成固體植入物，因此可用于醫(yī)療裝置和藥物傳遞系統(tǒng)。注射型原位凝膠(injectableinsitugel)是將藥物和聚合物溶解于適宜的溶劑中，局部皮下或肌肉注射，在給藥部位生理?xiàng)l件下，聚合物凝固而形成半固體或固體藥物貯庫凝膠，并通過聚合物的不斷降解，藥物不斷的釋放出來，達(dá)到長(zhǎng)效緩釋作用。注射型原位凝膠具有良好的順應(yīng)性和緩控釋能力，用于病變部位的局部給藥，具有延長(zhǎng)釋藥周期、減少給藥次數(shù)、降低給藥劑量和減小藥物不良反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，克服了普通乳劑、脂質(zhì)體、微球和膠束的缺點(diǎn)，避免植入劑開刀植入時(shí)的痛苦，工藝相對(duì)簡(jiǎn)單，并可靶向給藥于病變部位緩慢釋放治療藥物，在病變組織痊愈后最終被降解排出等優(yōu)點(diǎn)。原位凝膠制劑制備簡(jiǎn)單、使用方便、黏膜組織親和力強(qiáng)、滯留時(shí)間長(zhǎng)，在藥物制劑中應(yīng)用廣泛，是近年來緩控釋制劑領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。根據(jù)其作用機(jī)制可分為溫度敏感凝膠、離子敏感凝膠、pH敏感凝膠和光敏感凝膠等。溫度敏感原位凝膠(thermosensitiveinsitugel)的優(yōu)勢(shì)在于:使用前(環(huán)境溫度下)為低黏度液體，應(yīng)用于人體后，在生理溫度下吸熱發(fā)生膠凝，形成柔軟、潤(rùn)滑、透明的凝膠；同時(shí)，其水溶液利用環(huán)境溫度與生理溫度的差異而遇熱形成凝膠(即反向膠凝)的性質(zhì)克服了離子敏感型、PH敏感型和光敏感型凝膠需要特定的生理?xiàng)l件或外在因素觸發(fā)膠凝的局限性，使其可以廣泛應(yīng)用于身體的眾多組織、器官或腔道。溫度敏感原位凝膠制備簡(jiǎn)單、使用方便、黏膜組織親和力強(qiáng)、滯留時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)使其特別適合作為動(dòng)物給藥系統(tǒng)的載體，不僅可解決常規(guī)注射液滯留時(shí)間短、生物利用度不高的問題，也有望克服傳統(tǒng)緩控釋制劑制備復(fù)雜、需要加大量有機(jī)溶劑等的問題，具有很好的應(yīng)用和發(fā)展前景。溫敏型原位凝膠多以泊洛沙姆為基質(zhì)材料。泊洛沙姆為非離子型表面活性劑，其為由聚氧乙烯(PEO)與聚氧丙烯(PPO)組成的ABA型嵌段共聚物，其中PEO具有相對(duì)親水性，PPO具有相對(duì)親油性。在低溫或低濃度時(shí)，在水溶液中以單體形式存在；當(dāng)環(huán)境溫度高于臨界膠束溫度(CMT)及泊洛沙姆濃度達(dá)到臨界膠束濃度(CMC)時(shí)，泊洛沙姆分子在水溶液中形成以疏水性PPO為內(nèi)核，親水性PEO為外殼的球狀、棒狀或?qū)訝钅z束；當(dāng)溫度升高至相轉(zhuǎn)變溫度時(shí)，膠束緊密堆積，形成半固體狀的凝膠。且膠凝溫度隨體系中P407的濃度增加而降低，隨P188的濃度增加而升高,調(diào)整體系中P407和P188的比例和濃度,可獲得不同的膠凝溫度。氟苯尼考(Florfenicol)為甲砜霉素的單氟衍生物。化學(xué)名稱:[R_(R*，R*)]_2，2-二氯-N-{1-氟甲基)-2-羥基-2-[4-(甲基磺?；?苯基]}乙基乙酰胺，在二甲基甲酰胺中極易溶解，甲醇中溶解，冰醋酸中略溶，水或氯仿中極微溶解。0.5%水溶液的pH值應(yīng)為4.56.5。為白色或類白色結(jié)晶性粉末，無臭，味苦。氟苯尼考為酰胺醇類動(dòng)物專用廣譜抑菌劑，對(duì)多種革蘭氏陰性菌、陽性菌、支原體、衣原體等均有作用。作用機(jī)理系抑制細(xì)菌70S核糖體，與50S亞基受體結(jié)合，阻斷肽?；D(zhuǎn)移，抑制肽鏈延伸，干擾蛋白質(zhì)合成而產(chǎn)生抗菌作用。其結(jié)構(gòu)中a-甲基的-OH因被-F取代，不受乙酰轉(zhuǎn)移酶破壞，故對(duì)同類藥物甲砜霉素和氯霉素部分耐藥菌株仍有效。動(dòng)物內(nèi)服和肌注氟苯尼考后在體內(nèi)吸收迅速，分布廣泛，血藥濃度高，能較長(zhǎng)時(shí)間的維持血藥濃度，主要經(jīng)肝、腎代謝，半衰期長(zhǎng)。動(dòng)物種類及給藥途徑不同，其藥代動(dòng)力學(xué)略有差異。肉雞、犢牛內(nèi)服的生物利用分別為55.3%、88%;豬內(nèi)服吸收完全。牛靜注及肌注半衰期分為2.6h、18.3h;豬靜注及肌注半衰期分為6.7h、17.2h;雞靜注半衰期為5.36h。大部分以原型(50%-60%)從尿中排出。氟苯尼考最早由美國(guó)先靈-德雅(Schering-Plough)公司在八十年代后期成功研制，先后在日本、挪威、法國(guó)、英國(guó)、奧地利、墨西哥和西班牙等國(guó)注冊(cè)上市，我國(guó)于1999年引進(jìn)并批準(zhǔn)上市，主要用于敏感細(xì)菌所致的豬、牛、雞及魚細(xì)菌性疾病的防治。在豬病臨床，主要用于防治豬胸膜肺炎放線桿菌、巴氏桿菌、鏈球菌和支氣管敗血博得德特菌引起的細(xì)菌感染性疾病。防治仔豬人工感染的胸膜肺炎放線桿菌試驗(yàn)顯示其能完全阻止胸膜肺炎放線桿菌的存活和繁殖，治愈率達(dá)98%，效果優(yōu)于甲砜霉素，為防治豬胸膜肺炎放線桿菌感染的首選藥。氟苯尼考已批準(zhǔn)的獸用產(chǎn)品劑型及規(guī)格有:(1)氟苯尼考注射液:50mg/mL;lOOmg/mL；150mg/mL；200mg/mL;300mg/mL。牛肌注休藥期為28d,皮下注射為38d。禁用于20月齡或稍大的雌性奶牛。禁用于肉用小牛。豬、雞肌內(nèi)注射每Ikg體重每次15-20mg，48小時(shí)一次，連用2次。休藥期:豬14日，雞28日。(2)氟苯尼考粉:①2%;②5%;③10%;④20%。內(nèi)服:每100公斤體重，豬、雞20-30mg。一天2次，連用35天。休藥期:豬20日，雞5日。(3)氟苯尼考預(yù)混劑:2%0混飼-MIOOOkg飼料，豬1000-2000g(以本品計(jì))，連用7日。(4)氟苯尼考溶液:蛋雞產(chǎn)蛋期禁用。未見氟苯尼考注射用原位凝膠批準(zhǔn)文號(hào)。氟苯尼考文獻(xiàn)報(bào)道的劑型尚有:氟苯尼考顆粒劑、混懸劑、水性混懸注射劑、可溶性粉、固體分散體、環(huán)糊精包合物、微球、微乳等。未見氟苯尼考注射用原位凝膠報(bào)道。氟苯尼考相關(guān)劑型專利申報(bào)已公開的有:復(fù)方氟苯尼考注射液、腸溶顆粒、水溶性氟苯尼考、油乳注射液、速溶氟苯尼考、微囊、脂質(zhì)體、混懸注射液、微乳、可溶性粉、固體分散體、肺靶向微球、結(jié)腸靶向丸劑等。未見氟苯尼考注射用原位凝膠的報(bào)道及公開專利。動(dòng)物疾病防治，一個(gè)療程往往需要數(shù)次給藥，選擇合適的給藥方式，保證患畜能夠攝入足夠的藥量，是達(dá)到預(yù)期防治效果的前提。由于大多數(shù)藥物都有一定的味道，飲水或拌料(口服)給藥受到一定限制，且由于生病，動(dòng)物食欲、飲欲下降甚或拒食、拒飲，影響了口服攝藥，繼而影響了療效；常規(guī)注射制劑，一個(gè)療程往往需要重復(fù)數(shù)次給藥，頻繁注射和保定動(dòng)物即費(fèi)時(shí)費(fèi)事，又易造成動(dòng)物應(yīng)激反而加重病情，甚或造成新的疾病，影響藥物療效和疾病轉(zhuǎn)歸。藥物以原位凝膠植入劑給藥，一次給藥可維持較長(zhǎng)時(shí)間的有效血液濃度，并能保持相對(duì)穩(wěn)態(tài)的血液濃度，有利于更好的發(fā)揮藥物作用，提高用藥依從性，減少給藥次數(shù)，減少藥物不良反應(yīng)，提高經(jīng)濟(jì)效益。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，提供一種氟苯尼考注射用原位凝膠。本發(fā)明的另一目的是提供該氟苯尼考注射用原位凝膠的制備方法。本發(fā)明的目的可通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):氟苯尼考注射用原位凝膠包含如下組分:氟苯尼考20-35重量份、泊洛沙姆40715.5-30.5重量份、泊洛沙姆1880.5-10.5重量份、水25-70重量份、高分子阻滯劑0.01-8.0重量份、增溶劑0.01-10重量份、pH調(diào)節(jié)劑0.01-0.2重量份、防腐劑0.01-3.0重量份。所述的凝膠基質(zhì)選自泊洛沙姆108、124、188、237、338、407的任意一種或多種；優(yōu)選泊洛沙姆40715.5-30.5重量份，泊洛沙姆1880.5-10.5重量份。所述的高分子阻滯劑選自聚乙烯醇、聚維酮、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥乙纖維素、羥丙纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、磷脂的任意一種或多種。所述的增溶劑選自吐溫、聚山梨酯類、聚氧乙烯脂肪酸酯類、聚氧乙烯脂肪酸醇醚類、酒石酸及酒石酸鈉、有機(jī)酸及其鹽類、酰胺或胺類化合物、聚乙二醇類、多元醇中的任意一種或多種。所述的pH調(diào)節(jié)劑選自酒石酸及其鈉鹽、乳酸、醋酸及其鈉鹽、枸櫞酸及其鈉鹽、鹽酸、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、單乙醇胺等的任意一種或多種。所述的防腐劑選自羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎溴銨、苯扎氯銨、苯甲醇、苯甲酸鈉、山梨酸鉀、硫柳汞以及季胺鹽類化合物的任意一種或多種。所述的氟苯尼考注射用原位凝膠的制備方法包含如下步驟:(a)將氟苯尼考原藥于150°C干熱處理2h，備用。(b)取注射用水適量，先將選用的增溶劑、pH調(diào)節(jié)劑和防腐劑溶解，再將處方量的凝膠基質(zhì)和選用的高分子輔料撒在水面上，4°C左右冷藏過夜，得到澄清、無團(tuán)塊、分散均勻的溶液，微孔濾過，備用。(c)將(a)處理后的氟苯尼考按處方量加入(b)中，攪拌均勻，既得。氟苯尼考注射用原位凝膠體外釋放度曲線具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:20%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考200gFI27260gF68IOg羧甲基纖維素鈉0.90g苯甲酸鈉4.0g注射用水加至IOOOml制備方法:(a)氟苯尼考原藥于150°C干熱處理lh，備用。(b)取注射用水適量，先將苯甲酸鈉溶解后，將處方量的凝膠基質(zhì)及羧甲基纖維素鈉撒在水面上，4°C左右冷藏過夜，待其溶脹并溶解，得到澄清、無團(tuán)塊、分散均勻的溶液，微孔濾膜濾過，備用。(c)將(a)處理后的氟苯尼考按處方量加入溶脹好的基質(zhì)中，均勻攪拌，既得。將所制備的原位凝膠進(jìn)行體外性能評(píng)價(jià)，包括膠凝溫度、膠凝時(shí)間、熱可逆性、釋放度、黏度、PH值的測(cè)定等。各項(xiàng)目測(cè)定方法如下，其測(cè)定結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。凝膠溫度測(cè)定(采用試管倒轉(zhuǎn)法)取儲(chǔ)存于冰箱中的凝膠溶液34mL至試管，將溫度計(jì)插入凝膠溶液中。將試管置于水浴中(水浴液面高出試管內(nèi)容凝膠溶液3cm)，緩慢升溫，升溫速率約為每Imin2min升高I°C。將試管傾斜90°，觀察內(nèi)容物不流動(dòng)時(shí)的溫度即定義為膠凝溫度。每個(gè)樣品測(cè)定3次，結(jié)果取其平均值。膠凝時(shí)間測(cè)定原位凝膠溶液，25°C放置0.5h，置于已預(yù)熱至37°C的試管中并保溫,記錄相變時(shí)間。熱可逆性測(cè)定將凝膠加熱至特定溫度(30，35，40，45，50，55，60，70°C)，然后緩慢冷卻至室溫，即算作一次加熱循環(huán)，檢驗(yàn)直至凝膠不再具備溫敏性或者成分發(fā)生改變，若重復(fù)10次仍具有溫敏性，記做循環(huán)次數(shù)>10。釋放度測(cè)定精密吸取IOml原位凝膠制劑，置于預(yù)先已稱重的平底具塞刻度試管中，再行稱重。將該試管置于37.3±0.2°C的恒溫水浴振蕩器中平衡lOmin，使聚合物溶液完全形成凝膠。小心加入經(jīng)預(yù)熱的37°C5mL緩沖液(pH7.4，含SDS0.5%)作為釋放介質(zhì)，在95次/min恒溫水浴振蕩，分別在15、40、60min，1.33、2、3、5、8、12、24、48、60、72、84、96h立即傾出全部釋放介質(zhì)，將容器內(nèi)外表面用濾紙吸干，迅速稱量并紀(jì)錄，然后重新放入恒溫水浴振蕩器中平衡lOmin，再補(bǔ)充釋放介質(zhì)5mL。如此反復(fù)操作，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。黏度測(cè)定使用旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)測(cè)定室溫(25°C)下凝膠的黏度。pH值測(cè)定用酸度計(jì)測(cè)定處方凝膠溶液室溫下的pH值。實(shí)施例2:`20%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考200gF127200gF6816g聚維酮3.50g苯甲酸鈉4.0g注射用水加至IOOOml制備方法及體外性能評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。實(shí)施例3:20%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考200gF127280gF6826g卡波姆0.45g氫氧化鈉0.2g苯扎溴銨0.5g注射用水加至IOOOml先將卡波姆用適當(dāng)注射用水浸潤(rùn)，用氫氧化鈉水溶液致溶解，其他操作及體外性能評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。實(shí)施例4:20%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考200gF127190gF6813g殼聚糖2.0g醋酸0.2g三氯叔丁醇1.0g注射用水加至1OOOml先將殼聚糖用適當(dāng)注射用水浸潤(rùn)，用醋酸水溶液致溶解，其他操作及體外性能評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。具體制備方法及體外評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。實(shí)施例5:20%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考200gFI27240gF6814g海藻酸鈉0.20g酒石酸鈉1.0g苯扎氯銨0.5g注射用水加至IOOOml具體制備方法及體外評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。實(shí)施例6:25%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考250gFI27200gF6814gHPMC0.4g吐溫-805.0g酒石酸鈉l.0g苯甲醇IOg注射用水加至IOOOml具體制備方法及體外評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。實(shí)施例1:30%氟苯尼考注射用原位凝膠處方氟苯尼考300gFI27200gF6817gHPMC0.4g吐溫-805.0g酒石酸鈉l.0g苯扎氯銨0.5g注射用水加至IOOOml具體制備方法及體外評(píng)價(jià)方法同實(shí)施I。結(jié)果見表1，體外釋放結(jié)果見附圖。表I氟苯尼考注射用原位凝膠體外性能評(píng)價(jià)權(quán)利要求1.制備氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于包含如下組分:氟苯尼考20-35重量份、泊洛沙姆40715.5-30.5重量份、泊洛沙姆1880.5-10.5重量份、水25-70重量份、高分子阻滯劑0.01-8.0重量份、增溶劑0.01-10重量份、pH調(diào)節(jié)劑0.01-2.0重量份、防腐劑0.01-3.0重量份。所述的氟苯尼考注射用原位凝膠的制備方法為:(a)將氟苯尼考原藥于150°C干熱處理2h，備用。(b)取注射用水適量，先將選用的增溶劑、pH調(diào)節(jié)劑和防腐劑溶解，再將處方量的凝膠基質(zhì)和選用的高分子輔料撒在水面上，4°C左右冷藏過夜，得到澄清、無團(tuán)塊、分散均勻的溶液，微孔濾過，備用。(c)將(a)處理后的氟苯尼考按處方量加入(b)中，攪拌均勻，既得。2.一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于:利用不同型號(hào)泊洛沙姆的組合，制備了含有藥物及凝膠基質(zhì)、高分子阻滯劑、增溶劑、PH調(diào)節(jié)劑、防腐劑的注射用原位凝膠。該凝膠具有適宜的相轉(zhuǎn)化溫度，能夠在室溫條件下以液體狀態(tài)給藥并在機(jī)體內(nèi)凝固成凝膠。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于所述的制劑中的溫敏性凝膠基質(zhì)選自泊洛沙姆中的泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，其中泊洛沙姆407為15.5-30.5重量份，泊洛沙姆188占0.5-10.5重量份。調(diào)節(jié)不同型號(hào)泊洛沙姆之間用量及比例可控制該制劑的相變溫度介于32°C-37°C之間。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于所述的高分子阻滯劑選自聚乙烯醇、聚維酮、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥乙纖維素、羥丙纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、透明質(zhì)酸、黃原膠、殼聚糖、羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、磷脂的任意一種或多種。水溶性高分子阻滯劑濃度小于8%，目的是延長(zhǎng)藥物在機(jī)體內(nèi)的滯留時(shí)間，調(diào)節(jié)藥物的釋放速度，平衡血藥濃度，改善凝膠的流變學(xué)性質(zhì)。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于所述的增溶劑選自吐溫、聚山梨酯類、聚氧乙烯脂肪酸酯類、聚氧乙烯脂肪酸醇醚類、酒石酸及酒石酸鈉、有機(jī)酸及其鹽類、酰胺或胺類化合物、聚乙二醇類、多元醇中的任意一種或多種。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于所述的PH調(diào)節(jié)劑選自酒石酸及其鈉鹽、乳酸、醋酸及其鈉鹽、枸櫞酸及其鈉鹽、鹽酸、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、單乙醇胺等的任意一種或多種。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠，其特征在于所述的防腐劑選自羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、苯扎溴銨、苯扎氯銨、苯甲醇、苯甲酸鈉、山梨酸鉀、硫柳汞以及季胺鹽類化合物的任意一種或多種。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的氟苯尼考注射用原位凝膠的制備方法，其特征在于包含如下步驟:(a)將氟苯尼考原藥于150°C干熱處理2h，備用。(b)取注射用水適量，先將選用的增溶劑、PH調(diào)節(jié)劑和防腐劑溶解，再將處方量的凝膠基質(zhì)和選用的高分子輔料撒在水面上，4°C左右冷藏過夜，得到澄清、無團(tuán)塊、分散均勻的溶液，微孔濾過，備用。(c)將(a)處理后的氟苯尼考按處方量加入(b)中，攪拌均勻，既得。全文摘要本發(fā)明屬動(dòng)物專用藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種氟苯尼考注射用原位凝膠制劑及其制備方法。本發(fā)明以水為溶媒，由動(dòng)物專用抗菌藥物氟苯尼考及本領(lǐng)域公認(rèn)的原位凝膠基質(zhì)及其他藥劑學(xué)必要輔料制成，并闡明了制備方法。本發(fā)明制劑在室溫下為自由流動(dòng)的液體，肌肉注射或皮下注射給藥后形成半固體凝膠，實(shí)現(xiàn)一個(gè)療程僅給藥一次。具有制備簡(jiǎn)單、性質(zhì)穩(wěn)定、給藥方便、給藥持效時(shí)間長(zhǎng)，療效確切，動(dòng)物適應(yīng)性強(qiáng)、無毒副作用和不良反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明具有廣譜抗菌作用，適用于防治豬、羊、犬、貓、牛等動(dòng)物各種敏感菌感染。文檔編號(hào)A61P31/04GK103202802SQ20131013829公開日2013年7月17日申請(qǐng)日期2013年4月22日優(yōu)先權(quán)日2013年4月22日發(fā)明者余祖功,耿智霞,蔣凡,郭凡溪,陳秋生申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)