專利名稱：：藥物的硝基氧基衍生物用于治療肌肉營養(yǎng)不良癥的應用的制作方法藥物柳肖基氧基衍生物用于治療肌肉營養(yǎng)不良癥的應用本發(fā)明涉及釋放一氧化氮的化合物用于延緩或逆轉肌肉營養(yǎng)不良癥，例如Duche皿e營養(yǎng)不良癥禾口Becker營養(yǎng)不良癥的用途。肌肉營養(yǎng)不良癥是由骨骼肌纖維的進行性退化弓胞的。存在于質(zhì)膜或內(nèi)膜中的幾種蛋白質(zhì)中的一種的缺乏都增加在收縮過程中損傷的可能性，并最終導致纖維退化，并伴隨嚴重的帶有免疫活性細胞滲入的局部炎癥。肌肉營養(yǎng)不良癥包括一組遺傳的、漸進的肌肉疾病，臨床上M:骨翻膽弱的選擇性分布加以識別。肌肉營養(yǎng)不良癥的最普通的鄉(xiāng)是Duchenne營養(yǎng)不良癥禾卩Becker營養(yǎng)不良癥，每一種都是由肌營養(yǎng)不良蛋白基因變異的遺傳性導致的，該基因位于Xp21基因部位。其它的營養(yǎng)不良癥包括但不限于肢帶肌肉營養(yǎng)不良癥、面肩胛肱骨(蘭-代二氏)肌肉營養(yǎng)不良癥、先天腳幾肉營養(yǎng)不良癥、強直幽幾營養(yǎng)不良癥、和Emeiy-Dreifoss肌肉營養(yǎng)不良癥。在最嚴重的情形中，例如Duche皿e肌肉營養(yǎng)不良癥，再生能力已經(jīng)耗盡，并且骨骼肌漸進地被脂肪和纖維組織所替代。這種情況導致患者表現(xiàn)出進1亍性的衰弱，并最終由于呼吸和/或心臟衰竭而死亡。Duchenne肌肉營養(yǎng)不良癥的癥狀差不多都出現(xiàn)在男性中，并大約在3-7歲的年齡開始，大多數(shù)患者在10-12歲被謝OT輪椅，許多人在20歲年齡左右由于呼吸并發(fā)癥而死亡。在嘗試的可能治療Duchenne肌肉營養(yǎng)不良癥的不同的藥物中，只有皮質(zhì)類固醇類藥物，例如強的松、潑尼松龍和地夫可特，顯示出提供暫時改善的可能性。這種改善主要因斷氐漸iai!度或穩(wěn)定肌肉力量和功能而產(chǎn)生。皮質(zhì)類固醇在治療上還可以導致副作用；因此還沒有對它們在標準治療上的用途形成一致意見。皮質(zhì)類固醇，例如強的松，被認為S31阻斷免疫細胞的活化和滲透而發(fā)揮作用，免疫細胞的活化和滲透是由疾病弓胞的肌肉纖維損傷形成的。采用皮質(zhì)類固醇作為肌肉營養(yǎng)不良癥的藥物進行長期治療會弓l起副作用，例如骨質(zhì)疏松癥、高血壓和皮質(zhì)醇增多綜合征、體重增加、白內(nèi)障、身材矮小癥、胃腸道綜合征、在使用潑尼松龍情況下的行為改變和在使用地夫可特的情況下的體重增加和白內(nèi)障。BredtD.S.在Proc.Natl.Acad.Sci.USA95(1998),14592-14593中報導了由肌肉NO合成酶產(chǎn)生的在結構和功能上與在肌纖維膜上的營養(yǎng)不良癥基因相關聯(lián)的一氧化氮(NO)，S3ilfiL管擴張調(diào)節(jié)，并因此在運動期間^f共氧，增加肌原纖維中的葡萄糖攝《調(diào)節(jié)與細胞能量代謝有關的酶的活性，來參與骨骼肌的生理學發(fā)展和功能。EP759899描述了非甾體抗炎藥物NSAIDs的硝基氧基衍生物。該文獻中報導的藥理學數(shù)據(jù)顯示了這些化合物與相應的母體藥物相比，具有良々子的抗炎、止痛和抗凝血活性以及增加的胃腸耐受性。該文獻沒有報導這些化合物具有治療肌肉退化性疾病的活性。WO2004/105754描述了他汀類的硝基衍生物，其具有較強的抗炎、抗凝血和抗血小板活性。該文獻報導了他汀類的硝基衍生物能夠用于治療或預防心血管疾病和外周血管疾病以及與內(nèi)皮機能有關的所有疾病，例如糖尿病患者的血管并發(fā)癥和動脈粥樣5更化。該文獻同樣沒有報導這些化合物具有治療肌肉退化性疾病的活性。WO00/53191披露了一氧化氮(NO)、NO供體、NO活性抑制劑或NO生成調(diào)節(jié)齊lj在治療肌肉疾病，包括Duchenne營養(yǎng)不良癥、Becker營養(yǎng)不良癥、肢帶肌肉營養(yǎng)不良癥、面肩胛肱骨(蘭-代二氏)肌肉營養(yǎng)不良癥、先天'Wl肉營養(yǎng)不良癥、強直t制幾營養(yǎng)不良癥和Emery-Dreifoss肌肉營養(yǎng)不良癥方面的用途。該文獻特別披露了關于用地夫可特、地夫可牛*L-NAME(—禾中NOSWP制齊'J)或地夫可牛^"L-精氨酸(一種NO供體)處理的mdx營養(yǎng)不良癥小鼠的研究結果。在實驗中，從處理的動物中收集脛骨前肌的肌肉組織和膈膜，并評估中央核化指標(CNI)，該指標用于觀糧肌肉損傷的有用的指標。結果顯示向地夫可特添加NO供體沒有改善mdx小鼠的肌肉狀況，并且L-NAME只增加了地夫可特對膈膜的有益效果。作者的結論是實驗結果表明L-NAME或其它NOS抑制劑可以用于在施用中改善類固醇的效果。因此，有鑒定肯g夠減^幾肉纖維損傷和延遲患有肌肉營養(yǎng)不良癥患者的肌力喪失開始，但比普通治療弓胞更低程度的骨骼，腿化萎縮的治療齊啲需要。特別令人驚奇和意想不到的是，發(fā)現(xiàn)可釋放一氧化氮的通式M-X-Y-ONQ2的化合物，其中M是NSAID或他汀類治療齊啲殘基，能夠有效地延緩鵬轉(治療)肌肉營養(yǎng)不良癥。而且，它們還具有誘發(fā)更少副作用的優(yōu)點，它們會灘很好地被患者耐受并因此可以被用于長期的治療。本發(fā)明的一個目的是式(Ia)的釋放一氧化氮的藥物或其對映異構體或非對映異構體用于治療肌肉營養(yǎng)不良癥的應用，M-X-Y-ONO2(Ia)其中在式(Ia)中，M、X和Y具有如下含義M，自以下結構的殘基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(I)(11)其中RA是氫原子或-C(0)CH3:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(III)(iv)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>-X是-O-、-S-或-NR1-，其中W是H或者是直鏈敘鏈的d畫C6烷基；Y是具有如下定義的二價基團a)-直鏈或支鏈的Q-Qo亞烷基，優(yōu)選C1-C10亞烷基，其任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基選自鹵素原子、羥基、-ON02或T，其中T是-OC(O)C1-C10烷基)-ON02或-0(C-do烷基)-ON02;更雌Y是Q隱do亞烷基；-CrC7的亞環(huán)烷基，其任iii也lffi鏈或支鏈的C廣d。烷基，雌是CH3取代;(XXVII)(XXVIII>其中n是0-20的整數(shù)，優(yōu)選n是0-5的整數(shù)，更11是0;士是l-20的整數(shù)，優(yōu)選i^是l-5的整數(shù)，更優(yōu)選r^是l;劍牛是當Y選自b)或c)下提及的二價基團時，式(I)的-ON02基團被連接在<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>(XXIX)其中X「-OCO或-COO-和R2是H或CH3;na是l-20的整數(shù)；，n是l.112是0-2的整數(shù)；e)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>、na、112和112的定義同上<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>其中na和ie的定義同上，W是H或-COCH3;斜牛是當Y選自如d)-f)下所駄的二價基團時，-式(I)的ON02被連接在斜牛是當X是-NRL時，其中W如上定義，Y不能是f);g)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>r《《n其中X2是-0-或-S-;113是1-6的整數(shù)，是14的整數(shù)，和R2的定義同上。本發(fā)明的一個,的具體實施方式包括式(Ib)的釋放一氧化氮的藥物在治療肌肉營養(yǎng)不良癥中的應用；式(Ib)的化合物公知是2-(乙酰氧萄苯甲酸3-(基氧基甲萄)苯基酯。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>(lb)本發(fā)明的另一個優(yōu)選的具體實M^式包括式(mb)的釋放一氧化氮的藥物或其對映異構#^延緩或反轉肌肉營養(yǎng)不良癥中的應用；式(mb)的化合物公知是2-氟-a-甲基-4[U'-聯(lián)苯基]4-乙酸4-硝基氧基丁基酯。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>(IIIb)本發(fā)明的另一個，的具體實施方式包括通式(Ia)的釋放一氧化氮的藥物在治療肌肉營養(yǎng)不良癥中的應用，其中在式(Ia)中M選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>(XXXVI)(XXXVII)X是氧原子，Y選自(XXXIX)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>(XXVII)其中n是0-5的整數(shù)；并且士是l-5的整數(shù)，更優(yōu)選i^是l。另一個具體實施方式是釋放一氧化氮的藥物在治療肌肉營養(yǎng)不良癥中的應用，其中藥物選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>(XXXVb)其為公知的[1S-[la(卩S5S、2o^6a鄰-(R、8aa]]-l，2,6,7,8,8a-六氫-卩,5,6-三羥基-2-甲基_8_(2_甲基_1_氧代丁氧萄-1-萘庚酸4-(硝基氧基)丁基酯或稱為普伐他汀4-(硝基氧基)丁基酯；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>(XXXVC)其為公知的[13-[10(卩8*郭*),20[,6058(3-(11*),830|]-1,2,6,7,8,83-六氫-(3，5,6-三羥基-2-甲基_8_(2_甲基_1_氧代丁氧萄-1-萘庚酸4-(硝基氧基甲萄苯甲基酯或稱為普伐他汀4-(硝基氧基甲基)苯甲基酯；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>(XXXVIIb)其為公知的@民汲)-2(4-氟苯基)^務二羥基-5-(1-甲基乙萄-3-苯基"4-[(苯基氨萄羰基]-m-吡H-庚酸3-(硝基氧萄丁基酯或稱為阿伐他汀3-(硝基氧萄丁基酯；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>(XXXVIIc)其為公知的@民汲)-2(4-氟苯基)-|3,5-二羥基-5-(1-甲基乙萄-3-苯基4-[(苯基氨萄羰基HH-吡卩備l-庚酸3-(硝基氧基甲萄苯甲基酯^f爾為阿伐他汀3-(硝基氧基甲基)苯甲基酯。給藥的劑量依據(jù)例如年齡、體重、癥狀、需要的治療效果、給藥途徑和治療持續(xù)時間而決定。對于成年人，口服給藥通常每人每次lmg至1000mg，每天若干次，和非胃腸道給藥(iti^靜脈給藥)通常lmg至100mg，每天若干次，或在1-24小時內(nèi)持續(xù)給藥。如上所述，所用的劑量依據(jù)于各種情況。因此，會有劑量低于或高于上i^特定的范圍的情況。本發(fā)明的化合物可以以例如固體組合物、液體組合物或其它供口服給藥、注射、涂敷或栓劑等非胃腸道給藥的形式給藥。式(Ia)的釋放一氧化氮的藥物，其中M選自式(I)-(XXIV)的殘基并且X如上定義，其常規(guī)合成被描述在EP7559899中。式(Ib)的2-(乙酰氧萄苯甲酸3-(硝基氧基甲萄苯甲基酯的合成被描述在EPl194397中。式(la)的釋放一氧化氮的化合物，其中M選自式(XXXIV)-(XXXIX)的殘基，其常規(guī)合成以及普伐他汀4-(硝基氧基)丁基酯的合成被描述在^VO2004/105754中。實施例1肌肉營養(yǎng)不良癥模型(a-肌聚糖不足的小鼠)。對照動物模型參照DuclosF.等人的JCellBiol.1998Sep21;142(6):1461-71實驗化合物是-式(Ib)的2-乙酰氧基苯甲酸3-(硝基氧基甲萄苯基酯；-式(XXXVb)的普伐他汀4-灘基氧萄丁基酯；-式(mb)的2-氟-a-甲基4[U'-麟基]4-乙酸4-硝基氧基丁基酯；-潑尼松龍作為皮質(zhì)類固@物參照。將四組無a-肌聚糖(SG)的CWBI^小鼠用1乙酰氧基苯甲酸3-(硝基氧基甲萄苯甲酸酯(化合物Ib)(100mg/kg)、普伐他汀4-(硝基氧萄丁基酯(化合物XXXVb)(12mg/kg),2-氟-oc-甲基4[U'-聯(lián)苯萄4-乙酸4-硝基氧基丁基酯(化合物fflb)(30mg/kg)、潑尼松龍(3mg/kg)或載齊U處理，每^M過食物會好。在標注的時間點(范圍從20-80天)J^I31自由轉輪檢測法測定骨骼肌的功能。24小時后處死動物，對組織進行分離并從組織學上分析其特征。在iOTAzanMalloryi^術染色后對滲AiS纟于評估；在蘇7^紫染色區(qū)域測定壞死纖維；應用可商購的試劑盒對轉輪檢測前24小時取得的血液樣本測定肌酸激斷SampaolesiM.,etalScience301,487492,2003)。娜被報告在表1中。自由轉輪運動應用自主的轉,動作為運動范例，以避免ftf可由于強迫的單調(diào)運動的應激而會影響生理變化。將小鼠在裝備了磁性計數(shù)器的聚碳酸酯轉輪中單獨圈養(yǎng)24小時，輸出端是一^i十速器，允許將每天的轉數(shù)定量。數(shù)據(jù)被報告在表2中。肌酸激酶活性測量采用肌酸激酶試劑(Sigma),根據(jù)制造商的說明書，對對照和藥物處理動物的血清肌酸激酶活性進行定量和動態(tài)檢測。從2-7個月大的小鼠尾部收集血液，在13,000rpm車琉下離心10併中得到血清，檢測前在-80°C下貯存。被報告在表1中。組織學分離未處理的和藥物處理的小鼠的膈膜和脛骨前肌并置于Kllllk冷凍介質(zhì)中，快速冷凍荊頓恒冷切片機按肌肉纖維橫向切成8,厚的片。切片既可用蘇木紫和曙紅，也可用AzanMalloiy染色，以評估炎癥滲入物和壞死纖維的數(shù)量(18-10片組織)。|射艮告在表1中。結果顯示測定的化合物0b)、(XXXVb)和(mb)在斷氐這些動物局部組織學、功能學和生物化學改變方面有顯著的效果。特別地，處理的動物炎癥滲入物顯著減少，纖維壞死幾乎不可察覺(表l)。肌酸激酶的血漿水平、肌肉損傷的標志在處理過的動物中都顯著下降；一貫地，它們在自由轉輪測試中表現(xiàn)顯著地更好(表2)?？偠灾?，數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的化合物對比潑尼松龍有更好的效果，潑尼松龍^擇用該病理學的藥物。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>權利要求1.式(Ia)的釋放一氧化氮的化合物或其對映異構體或非對映異構體在制備用于治療肌肉營養(yǎng)不良癥的藥物中的應用，M-X-Y-ONO2(Ia)其中在式(Ia)中，M、X和Y具有如下含義M是選自以下結構的殘基其中RA是氫原子或-C(O)CH3，X是-O-、-S-或-NR1-，其中R1是H或者是直鏈或支鏈的C1-C6烷基；Y是具有如下定義的二價基團a)-直鏈或支鏈的C1-C20亞烷基，優(yōu)選C1-C10亞烷基，任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基選自鹵素原子、羥基、-ONO2或T，其中T是-OC(O)(C1-C10烷基)-ONO2或-O(C1-C10烷基)-ONO2；更優(yōu)選Y是C1-C10的亞烷基；-C5-C7的亞環(huán)烷基，其任選地被直鏈或支鏈的C1-C10烷基，優(yōu)選CH3取代；b)c)其中n是0-20的整數(shù)，優(yōu)選n是0-5的整數(shù)，更優(yōu)選n是0；n1是1-20的整數(shù)，優(yōu)選n1是1-5的整數(shù)，更優(yōu)選n1是1；條件是當Y選自b)或c)下提及的二價基團時，則式(I)的-ONO2基團被連接在-(CH2)n1-上；d)其中X1＝-OCO-或-COO-并且R2是H或CH3；na是1-20的整數(shù)；優(yōu)選n是1-5的整數(shù)；n2是0-2的整數(shù)；e)其中Y1是-CH2-CH2-(CH2)n2-；或-CH＝CH-(CH2)n2-；X1、na、n2和R2的定義同上；f)其中na和R2的定義同上，R3是H或-COCH3；條件是當Y選自d)、f)下所提及的二價基團時，則式(I)的-ONO2被連接在-(CH2)na上；條件是當X是當-NR1-時，其中R1如上所定義，Y不能是f)；g)其中X2是-O-或-S-；n3是1-6的整數(shù)，優(yōu)選是1-4的整數(shù)，并且R2的定義同上。2.根據(jù)權利要求l所述的應用，其中式(Ia)的化合物是式(Ib)的2-(乙ONO，3.根據(jù)權利要求l所述的應用，其中式(la)的化合物是式(fflb)的2-氟<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(fflb)4.根據(jù)權利要求l所述的應用，其中在式(Ia)中M選自:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(XXXVII)(XXXIX)X是氧原子，Y選自-直鏈的Q-d。的亞烷基；b)(XXVII>其中n是0-5的整數(shù)；并且士是l-5的整數(shù)，更優(yōu)選i^是l。5.根據(jù)權利要求4所述的應用，其中式(Ia)的化合物選自:普伐他汀4-(硝基氧^)丁基酯；普伐他汀4-(硝基氧基甲萄苯甲基酯;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>(XXXVIIb>阿伐他汀3-(硝基氧基甲萄苯甲基酯。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>(XXXVIIc)全文摘要本發(fā)明涉及釋放一氧化氮的化合物用于延緩或逆轉肌肉營養(yǎng)不良癥，例如Duchenne型營養(yǎng)不良癥和Becker型營養(yǎng)不良癥的用途。文檔編號A61K31/381GK101378739SQ200780004219公開日2009年3月4日申請日期2007年1月23日優(yōu)先權日2006年2月3日發(fā)明者E·克萊門蒂,E·翁吉尼,G·科素,S·布魯尼利申請人:尼科克斯公司