專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種治療腫瘤的孕甾藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及式(I)化合物及其合成方法。本發(fā)明也涉及該化合物在藥物上的用途和藥用制劑，特別是針對(duì)腫瘤、眼部血管新生的治療。
背景技術(shù)：
：血管新生包括兩個(gè)概念胚胎期的血管發(fā)生(vasculogenesis，VG)和出生后的血管生成(angiogenesis，AG)。VG指的是在沒(méi)有血管系統(tǒng)的情況下，由血管'內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitor,cells,EPCs)或成血管細(xì)胞(angioblasts)分化成內(nèi)皮細(xì)胞，并形成血管網(wǎng)。AG指的是在成體血管，由已經(jīng)存在的成熟內(nèi)皮細(xì)胞沖破管壁基質(zhì)遷移，增殖和重構(gòu)，以發(fā)芽方式使血管樹(shù)枝持續(xù)延長(zhǎng)。本發(fā)明中的血管新生是指出生后的血管生成(angiogenesis，AG)。血管新生(angiogenesis)不但是正常生理變化中(如生長(zhǎng)、傷口愈合)所必需有的過(guò)程，近年來(lái)科學(xué)家們也發(fā)現(xiàn)它和腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病的發(fā)展有密切的關(guān)系。抑制病理性的血管新生，可以治療或減緩腫瘤、老年性黃斑變性、惡性血液病等許多疾病。目前臨床治療腫瘤的方法大多是針對(duì)不同腫瘤采用不同的方法，并且絕大部分是針對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行治療。而腫瘤生長(zhǎng)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，它受到多種因素的影響，其中包括腫瘤血管網(wǎng)的建立。許多研究己經(jīng)證明腫瘤生長(zhǎng)必須依賴(lài)血管生成，通過(guò)抑制血管生成的某些環(huán)節(jié)或整個(gè)過(guò)程，進(jìn)而控制腫瘤的生長(zhǎng)，對(duì)腫瘤治療和防止腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有重要意義。70年代初隨著腫瘤生長(zhǎng)依賴(lài)于血管形成概念的提出，也相應(yīng)提出了抗血管形成治療的概念，即通過(guò)阻止新生血管的發(fā)生和/或新生血管網(wǎng)的擴(kuò)展和/或破壞新生血管來(lái)阻止小的實(shí)體瘤的產(chǎn)生或建立，以阻止腫瘤生長(zhǎng)、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。國(guó)外報(bào)道較多的肝素加氫化可的松.被公認(rèn)為能有效地抑制血管生成。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，其二者聯(lián)合應(yīng)用能抑制雞胚絨毛尿囊膜上血管的生成，井能使腫瘤消退和阻止轉(zhuǎn)移，還可抑制腫瘤引起的兔角膜血管新生。而血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是一類(lèi)多功能的生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)血管形成的作用，一般認(rèn)為抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)可以治療或減緩病理性血管新生。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)與新生血管有關(guān)的疾病如腫瘤、眼部新生血管疾病、惡性血液病、支氣管哮喘等疾病有密切關(guān)系，通過(guò)抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)，可以治療或減緩這些疾病，大量文獻(xiàn)均有這方面的報(bào)道如《綜述VEGF的結(jié)構(gòu)特征及生物學(xué)功能》(中華臨床醫(yī)學(xué)研究雜志，2007年13巻3期，388)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體在婦科疾病中的研究進(jìn)展》(河北醫(yī)藥2006年28巻12期，1192-1194)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與腫瘤關(guān)系研究進(jìn)展》(廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2006年23巻2期，333-335)、《VEGF相關(guān)抗腫瘤治療的研究現(xiàn)狀》(吉林醫(yī)學(xué)，2006年27巻5期，454-457)、《靶向VEGF治療惡性腫瘤的研究進(jìn)展》(現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2006年14巻3期，370-372)、《VEGF和PEDF對(duì)眼底新生血管的共同調(diào)節(jié)作用》(國(guó)外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)，2005年26巻ll期，819-821)、《眼底新生血管防治的研究進(jìn)展》(眼科新進(jìn)展，2000年20巻6期，449-451)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體與眼內(nèi)新生血管性疾病》(眼科研究，2003年21巻l期，103-106)、《VEGF與惡性血液病的關(guān)系》(國(guó)外醫(yī)學(xué):生理病理科學(xué)與臨床分冊(cè)，2004年24巻2期，183-185)、《腦白質(zhì)疏松患者血清VEGF水平的研究》(疑難病雜志，2007年6巻l期，10-11)、《血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與支氣管哮喘》(實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2007年第23巻第3期，433)。已知有多種藥物可抑制新血管的形成(血管生成或新生血管形成)。例如，在Crum等人的"一類(lèi)新的類(lèi)固醇在肝素或肝素片段的存在下抑制血管生成"(ANewClassofsteroidsInhibitsAngiogenesisinthePresenceOfHeparinoraHeparinFragment,Science，Vol.230:1375-1378,1985年12月20日)一文中，公開(kāi)了可在肝素或特定肝素片段的存在下抑制血管生成的類(lèi)固醇。作者將所述類(lèi)固醇稱(chēng)為"血管抑制(angiostatic)"類(lèi)固醇。此類(lèi)被發(fā)現(xiàn)具有血管抑制作用的類(lèi)固醇中所包括的有可的松和去氧可的松的二氫和四氫代謝物。在測(cè)試有關(guān)所述機(jī)理的假說(shuō)的后續(xù)研究中證明肝素/血管抑制類(lèi)固醇組合物導(dǎo)致基底膜支架溶解，在所述支架上連接有貼壁依賴(lài)性?xún)?nèi)皮，從而導(dǎo)致毛細(xì)管萎縮(involution);其中所述機(jī)制是類(lèi)固醇通過(guò)其來(lái)抑制血管生成的機(jī)制；參見(jiàn)Ingber等人的"通過(guò)血管抑制類(lèi)固醇來(lái)抑制血管生成的可能機(jī)理毛細(xì)管基底膜溶解的誘導(dǎo)"(APossibleMechanismforInhibitionofAngiogenesisbyAngiostaticSteroids:InductionofCapillaryBasementMembraneDissolution，EndocrinologyVol.119:1768-1775，1986)。在Aristoff等人的美國(guó)專(zhuān)利US4，975，537中公開(kāi)了一組可用于抑制血管生成的四氫類(lèi)固醇.該專(zhuān)利公開(kāi)所述化合物可用于治療頭部創(chuàng)傷、脊柱創(chuàng)傷、敗血癥性休克或創(chuàng)傷性休克、中風(fēng)和出血性休克。此外，該專(zhuān)利還討論了這些化合物在胚胎植入以及在治療癌癥、關(guān)節(jié)炎和動(dòng)脈硬化中的作用。在美國(guó)專(zhuān)利us4771，042中公開(kāi)了Aristoff等人的專(zhuān)利中所公開(kāi)的某些類(lèi)固醇與肝素或肝素片段組合來(lái)抑制溫血?jiǎng)游锏难苌?。Li等人，"通過(guò)硫酸化環(huán)糊精而增強(qiáng)效力的血管抑制類(lèi)固醇抑制角膜新生血管形成"(AngiostaticSteroidsPotentiatedbySulphatedCyclodextrinInhibitCornealNeovascularization,InvestigativeophthalmologyandVisualScience,Vol32(11):2898-2905，1991年10月)。類(lèi)固醇單獨(dú)使用可使新生血管形成多少減輕一些，但是僅單獨(dú)使用不能有效消退新生血管形成。四氫可的松己經(jīng)作為血管抑制類(lèi)固醇，在Folkman等人的"血管抑制類(lèi)固醇"(Angiostaticsteroids,Ann.Surg，Vol.206(3),1987)一文中公開(kāi)，其中該文獻(xiàn)提出血管抑制類(lèi)固醇可能可用于治療由新生血管形成異常所控制的疾病，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病、新生血管性青光眼以及晶狀體后纖維組織形成。CN03818826中介紹了乙酸阿奈可他是一種開(kāi)發(fā)用于抑制眼睛新血管生成的血管抑制劑。該發(fā)明涉及用于預(yù)防AMD相關(guān)性視力喪失、維持AMD患者的視力以及抑制AMD相關(guān)性損害發(fā)展的制劑和方法。該制劑和方法涉及鞏膜旁施用3-30mg的乙酸阿奈可他或其相應(yīng)的醇以提供經(jīng)鞏膜的藥物釋放。
發(fā)明內(nèi)容_在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了式(I)化合物，其中1，2位"-""^"表示為1，2位可以是雙鍵或單鍵。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>IR1二H、0H或0C0R5R5是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2=H或是C0R6R6是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝衛(wèi)-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3-五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝胁?個(gè)雜原子的五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a卣素或a甲基式(I)化合物的鹽是指R產(chǎn)OH時(shí)與之相連接形成的藥用鹽，藥用鹽優(yōu)選磷酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、硫酸的鹽，更優(yōu)選指磷酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、硫酸的鈉、鉀、鎂、鈣鹽。優(yōu)選R尸H、OH或OCORsRs是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2-H或C0R6R6是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3是五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a卣素或a甲基再優(yōu)選Rl=H、OH或0C0R5R5是五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2=H或C0R6&是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3是五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a鹵素或a甲基更優(yōu)選Rl=H、OH或0C0R5R5是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2=H或C0R6&是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a-F或a甲基特優(yōu)選Rl=H、OH或0C0CH3R2=HR3是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a-F或a甲基在本發(fā)明中提及本發(fā)明化合物是均包括其中式(I)化合物及其鹽、酯和溶劑合物。溶劑合物包括水合物。應(yīng)該注意，本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括式(I)化合物所有的立體異構(gòu)體和它們的混合物。優(yōu)選的化合物包括1.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基2.孕甾-4，9(11)-雙烯_3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基3.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基4.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基5.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基6.孕甾_1，4,9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基7.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基8.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基9.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-乙氧基10.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯2-乙氧基11.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，2卜雙羥基-17，21-雙醋酸酯-2-甲氧基更優(yōu)選1.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基2.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基3.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基4.孕甾-4，9(11)-雙烯-3,20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯一6a-甲基-2-甲氧基5.孕甾-4,9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯-2-甲氧基上述式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在抑制哺乳類(lèi)動(dòng)物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的藥物中的應(yīng)用，哺乳類(lèi)動(dòng)物優(yōu)選人類(lèi)。上述式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在治療哺乳類(lèi)動(dòng)物血管新生性疾病的藥物中的應(yīng)用，哺乳類(lèi)動(dòng)物優(yōu)選人類(lèi)。。血管新生性疾病，主要涉及腫瘤、眼部新生血管、惡性血液病、支氣管哮喘、腦白質(zhì)疏松疾病。腫瘤主要是各種實(shí)體腫瘤如胃部腫瘤、肺部腫瘤、肝部腫瘤、各種腺體腫瘤、鼻部腫瘤、眼部腫瘤、咽部腫瘤、喉部腫瘤等；惡性血液病是指血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，主要包括白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤及惡性組織細(xì)胞病等。本化合物還可在眼部新生血管生成造成的疾病中應(yīng)用眼部新生血管生成造成的疾病涉及角膜、虹膜、脈絡(luò)膜及視網(wǎng)膜等，其造成的滲出、出血和增生等病理改變對(duì)眼部結(jié)構(gòu)和功能的損害，是引起視力障礙的重要原因。大部分眼疾病均存在炎癥、缺血、缺氧等病理過(guò)程；因此，眼病與眼部新生血管形成有密切的關(guān)系。其中眼部新生血管生成造成的疾病包括角膜新生血管性眼病在與角膜新生血管相關(guān)的眼部疾病中，最常見(jiàn)的是配戴角膜接觸鏡所致的角膜新生血管性疾病，其他引起角膜新生血管的眼部疾病有角膜外傷，堿及其他化學(xué)物質(zhì)燒傷，角膜手術(shù)，各種感染包括細(xì)菌感染、衣原體感染、病毒感染(單皰病毒和帶狀皰疹病毒等)、原蟲(chóng)感染(利什曼原蟲(chóng))等。虹膜新生血管性眼病常見(jiàn)有新生血管性青光眼，而視網(wǎng)膜脫離、創(chuàng)傷、糖尿病視網(wǎng)膜病變、腫瘤(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)、視網(wǎng)膜中央靜脈栓塞等是其常見(jiàn)的誘因。視網(wǎng)膜新生血管性眼病糖尿病、腫瘤、視網(wǎng)膜脫離、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞、視網(wǎng)膜靜脈周?chē)?、全身性紅斑狼瘡、Eales病、Coat病、Takavas病等均可引起。脈絡(luò)膜新生血管性眼病老年性黃斑變性、高度近視、中心性滲出性視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎、創(chuàng)傷、腫瘤、眼組織胞漿菌病綜合征、匍行性脈絡(luò)膜病變等均可引起該種眼病。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以認(rèn)為，本文所涉及的"治療"可以延伸為疾病的預(yù)防和以確定疾病的治療。式(I)化合物作為治療上述疾病時(shí)，其活性成分的用量為O.Olmg-20mg/Kg/天，優(yōu)選0.lmg-10mg/Kg/天，更優(yōu)選0.Img-2mg/Kg/天。作為治療人的疾病時(shí)，人的體重一般按照50Kg計(jì)算，所以本發(fā)明中所述人用劑量可以按照人的實(shí)際體重計(jì)算，也可以按照上述劑量X50計(jì)算。本發(fā)明化合物可配制成任何便于用藥的制劑，因此本發(fā)明在其范圍內(nèi)也包含本發(fā)明化合物，可與一種或多種生理學(xué)上可接受的稀釋劑或載體混合的藥物組合物。本發(fā)明化合物可配制成任何便于人用藥的制劑，該制劑治療疾病中其活性成分的用量為0.Olmg-20mg/Kg/天，優(yōu)選0.lmg-10mg/Kg/天，更優(yōu)選0.Img-2mg/Kg/天。作為治療人的疾病時(shí)，人的體重一般按照50Kg計(jì)算，所以本發(fā)明中所述人用量可以按照人的實(shí)際體重計(jì)算，也可以按照上述用量X50計(jì)算。一種藥物組合物，由活性成分和一種或幾種藥用輔料組成，而活性成分是上述任一項(xiàng)式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供制備這樣的藥物組合物的方法，該方法包括將各種組分混合。本發(fā)明化合物可安常規(guī)方法(例如)配制成口服、口腔、舌下、非腸道、注射、埋植、局部用藥或直腸給藥的制劑，尤其是口服或注射的制劑。其中口服制劑包括而不僅限于片劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑等口服的固體及口服液等可口服的液體；注射劑包括而不僅限于針劑、混懸劑、輸液劑等可注射的液體或粉針劑等可用于注射的固體?？诜苿┲械姆腔钚猿煞趾械矸?、乳糖、水中的一種或幾種。注射制劑中的非活性成分含有注射用水或注射用油。本發(fā)明的化合物和藥物制劑可以與一種或多種選自以下的其他治療劑聯(lián)合使用或是包含一種或幾種這樣的治療劑抑制腫瘤的藥物、治療眼部新生血管生成造成的疾病的藥物、治療哮喘的藥物。抑制腫瘤的藥物包括而不限于作用于DNA化學(xué)結(jié)構(gòu)的藥物(包括烷化劑、蒽環(huán)類(lèi)和鉬類(lèi)化合物)；影響核酸合成的藥物(主要是抗代謝物)；作用于DNA模板影響DNA轉(zhuǎn)錄或抑制DNA依賴(lài)RNA聚合酶而抑制RNA合成的藥物；影響蛋白質(zhì)合成的藥物(如高三尖杉酯堿、紫杉類(lèi)、長(zhǎng)春花堿和鬼臼堿類(lèi)等)；紫杉醇類(lèi)化合物；其他類(lèi)型的藥物(如激素、門(mén)冬酰胺酶、維甲類(lèi)化合物等)。抑制腫瘤的藥物優(yōu)選順鉑。治療眼部新生血管生成造成的疾病的藥物包括而不限于內(nèi)皮抑素(Erulostatin)、血管生成抑制因子、阿奈可他等。治療哮喘的藥物包括而不僅限于糖皮質(zhì)激素，白三烯抑制劑、P2-受體激動(dòng)劑、黃嘌呤類(lèi)藥物、抗膽堿藥、抗過(guò)敏藥。_本發(fā)明的再一方面提供了制備式(I)化合物方法，其中1，2位表示為1，2位可以是雙鍵或單鍵。以式(n)化合物為原料，通過(guò)以下方法合成式(I)化合物。R1=H、0H或0C0R5R5是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2=H或是C0R6R6是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝衛(wèi)-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3二五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮仁H，a卣素或a甲基式(I)化合物的鹽是指R「OH時(shí)與之相連接形成的藥用鹽，藥用鹽優(yōu)選磷酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、硫酸的鹽，更優(yōu)選指磷酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、硫酸的鈉、鉀、鎂、鈣鹽。優(yōu)選R尸H、OH或OCOR5Rs是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮fH或C0R6R6是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3是五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H，a鹵素或a甲基再優(yōu)選Rl=H、0H或0C0R5R5是五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2=H或C0R6&是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3是五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H，a鹵素或a甲基更優(yōu)選Rl=H、0H或0C0R5R5是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2二H或C0R6R6是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a-F或a甲基特優(yōu)選<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>R3是兩個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H，a-F或a甲基式(II)化合物2-鹵素-式(II)化合物式(I)化合物1.2-鹵素-式(II)化合物的合成將式(II)化合物全溶于有機(jī)溶媒中，加入鹵化劑，反應(yīng)得2-鹵素-式(II)化合物。其中有機(jī)溶媒是指為常規(guī)的有機(jī)溶劑，包括酮類(lèi)，如丙酮；鹵代烴，如氯仿；醚類(lèi)，如四氫呋喃等中的一種或多種。優(yōu)選氯仿、四氫呋喃，更優(yōu)選氯仿、四氫呋喃的混合物。2.式(I)化合物的合成將R30Na(或R30K)和2-鹵素-式(II)化合物投入有機(jī)溶媒中，加入催化劑，反應(yīng)生成得式(I)化合物。有機(jī)溶媒為常規(guī)的有機(jī)溶劑，包括低級(jí)脂肪醇，如甲醇或乙醇；酮類(lèi)，如丙酮；鹵代烴，如氯仿；醚類(lèi)，如四氫呋喃；胺類(lèi)，如二甲基甲酰胺(DMF)等中的一種或多種。優(yōu)選醇、DMF,更優(yōu)選,其中鹵化劑是指可以緩慢釋放鹵離子的試劑,如N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)，N-氯代琥珀酰亞胺(NCS)，其中優(yōu)選溴化劑，催化劑是指一價(jià)Cu的鹽，含磷脫水劑是指磷的氯化物，溴化劑優(yōu)選2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮、二溴海因、N-溴代琥珀酰亞胺，一價(jià)Cu的鹽優(yōu)選CuCl、醋酸亞銅。按照CN200510014479.5"A9(11)甾體類(lèi)化合物的制備方法"專(zhuān)利申請(qǐng)中實(shí)施例7得到的孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a-羥基-6a-甲基、實(shí)施例9得到的孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a-羥基、實(shí)施例10得到的孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17a-羥基、實(shí)施例4得到的孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17a-羥基-6a-甲基。上述化合物可以常規(guī)的方法合成，例如通過(guò)CN200510122249.0"糠酸莫美他松中間體21-羥的制備方法"的方法制備以上化合物的21-羥基物孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17a，21-雙羥基-6a-甲基、孕甾-4，9(11)-雙烯陽(yáng)3，20曙雙酮-17a，21-雙羥基、孕甾-1,4，9(11)-三烯-3,20-雙酮-17a，21-雙羥基、孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17a，21-雙羥基-6a-甲基。式(II)化合物中的17，21位酯化物可以常規(guī)的方法合成，例如按照楊健等人報(bào)道(潑尼卡酯的合成，中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1999,30(11),490，)的合成方法得到。具體實(shí)施例方式本發(fā)明中柱層析方法層析柱的長(zhǎng)度最少70cm，內(nèi)部裝填254-硅膠，并將需要分離的有機(jī)物全溶于最少量的氯仿甲醇=1:l中，用最少量254-硅膠將該溶液吸收后置于層析柱內(nèi)硅膠的上部，使用流動(dòng)相洗脫，層析柱下用若干個(gè)10ml試管接經(jīng)過(guò)柱層析得到的溶液，控制流速為10ml/3min，將每個(gè)試管的溶液用HPLC進(jìn)行分析，將保留時(shí)間相同的試管溶液合并，取主點(diǎn)的化合物進(jìn)行重結(jié)晶，得到相應(yīng)的產(chǎn)物。確定主點(diǎn)的方法將需要分離的有機(jī)物用HPLC進(jìn)行分析，峰面積最大的點(diǎn)確定為主點(diǎn)，其保留時(shí)間為主點(diǎn)的保留時(shí)間。HPLC的條件設(shè)備HP1084B液相色譜儀，HP79850BLC終端和UV檢測(cè)器柱材料HypersilC18，5um,125X4.6mra檢測(cè)波長(zhǎng)242nm流動(dòng)相甲醇水=5.5:4.5柱溫45°C流速約L2ml/分實(shí)施例1孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基1.2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基的合成將8.5g孕甾-4，9(11)-雙烯_3，20-雙酮-17，21-雙羥基(式II化合物)投入300mL氯仿中，加入IOOmLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5'C,滴加含9.84g溴化劑2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿240mL，THF100mL)，80min滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h，反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入145mL10%亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。加入50mL無(wú)水乙醇，析出沉淀，過(guò)濾，濾液濃縮近千，柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2_溴-孕甾-4，9(11)_雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基2.71g。2.孕留-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基的合成將0.07mol的甲醇鈉，攪拌溶解后加入50mlDMF，然后投入2.5g2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基，全溶，加入醋酸亞酮0.2g，攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加0.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸干溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。油狀物柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基746.2mg固體。元素分析計(jì)算值C22H3005C70.56%H8.07%021.36%元素分析實(shí)測(cè)值C70.42%H8.11%力-NMR(CDC13):3.22(2-OCH3，H)，3.70(2位，H)，5.30(11位，H),1.66,1.41(l位，H)，5.74(4位，H)，2.03，1.91(6位，H)1.95(17-OH,H)，4.61(21位，H)2.03(21-0H，H)實(shí)施例2孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基1.2_溴-孕甾-4，9(11)-雙烯_3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯的合成將9.0g孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯(式II化合物)投入200mL氯仿中，加入50mLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5°C，滴加含9.04g溴化劑2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿240mL，THF100mL)，80min滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h，反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入135mL10X亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。加入50mL無(wú)水乙醇，析出沉淀，過(guò)濾，濾液濃縮近干，柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2-溴-孕甾-4,9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯2.38g。2.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基的合成將0.07mol的甲醇鈉，攪拌溶解后加入50mlDMF，然后投入2.3g2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯，全溶，加入醋酸亞酮0.2g，攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加0.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸千溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。油狀物柱層析，氯仿-丙酮(h5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基875.3mg固體。元素分析計(jì)算值C24H3206C69.21%H7.74%023.05%元素分析實(shí)測(cè)值C69.17%H7.81%'H-NMR(CDC13):3.23(2-0CH3'H),3.70(2位，H)，5.30(11位，H)，1.66,1.41(l位，H)，5.74(4位，H)，2.03，1.91(6位，H)1.90(17-OH,H)，5.23(21位，H)2.03(21-0C0CH3，H)實(shí)施例3孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基1.2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯的合成將IO.Og孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯(式n化合物)投入200mL氯仿中，加入50mLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5°C，滴加含9.00g溴化劑2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿240mL，THF100mL)，80min滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h，反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入135mL10%亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。加入50mL無(wú)水乙醇，析出沉淀，過(guò)濾，濾液濃縮近干，柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯3.84g。2.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基的合成將0.07mol的甲醇鈉，攪拌溶解后加入50mlDMF，然后投入2.3g2-溴-孕甾-4,9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯，全溶，加入醋酸亞酮0.2g，攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加0.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸干溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。柱層析，氯仿-丙酮(2:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17,21_雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基924.6mg固體。元素分析計(jì)算值C26H3606C70.24%H8.16%021.59%元素分析實(shí)測(cè)值C70.11%H8.10%'H-NMR(CDC1》3.23(2-0CH3，H),3.70(2位，H),5.30(11位，H)，1.66,1.41(l位，H)，5.74(4位，H),2.03,1.91(6位，H),1.89(17-0H，H)，5.20(21位，H)，2.27,1.73,0.99(21-0C0CH2CH2CH3，按照H的順序得到的數(shù)據(jù))實(shí)施例4孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基1.2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，2卜雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基的合成將IO.Og孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基(式II化合物)投入250mL氯仿中，加入80mLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5'C，滴加含9.00g溴化劑2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿240mL，THF100mL)，80min滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h，反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入140mL10%亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。加入50mL無(wú)水乙醇，析出沉淀，過(guò)濾，濾液濃縮近干，柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基3.96g。2.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基一21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基的合成將0.06mol的甲醇鈉，攪拌溶解后加入50mlDMF，然后投入2.5g2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基，全溶，加入醋酸亞酮O.2g，攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加0.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸干溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基984.2mg固體。元素分析計(jì)算值C25H3406C69.74%H7.96%022.30%元素分析實(shí)測(cè)值C69.59%H8.01%'H-NMR(CDCl3):3.24(2-0CH3，H),3.70(2位，H),5.30(11位，H)'1.66,1.41(l位，H)，5.73(4位，H)，2.36(6位，H),1.18(6_CH3,H),1.89(17-0H，H)，5.21(21位，H)，2.05(21-0C0CH"H)實(shí)施例5孕甾-1，4，9(11)-三烯-3,20-雙酮-17,21-雙羥基2-甲氧基1.2-溴-孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基的合成將10.0g孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基(式II化合物)投入200mL氯仿中，加入IOOmLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5'C，滴加含9.50g溴化劑2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿250mL，THF100mL)，80tnin滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h,反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入140mL10%亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。油狀物柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2-溴-孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17,21-雙羥基4.57g。2.孕甾-1，4，9(11)-三烯-3,20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基的合成將0.06mol的甲醇鈉，攪拌溶解后加入50mlDMF，然后投入2.5g2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3,20-雙酮-17，21-雙羥基，全溶，加入醋酸亞酮0.2g,攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加O.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸干溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基_2-甲氧基1.0028固體。元素分析計(jì)算值C22H2805C70.94%H7.58%021.48%元素分析實(shí)測(cè)值C70.88%H7.54%'H-NMR(CDC1》3.55(2-OCH3,H),5.13(1位，H),5.34(11位，H)，6.14(4位，H)，2.01,1.82(6位，H),1.92(17-0H，H)，4.73(21位，H),2.00(21-0H，H)實(shí)施例6孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基以孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21_雙羥基-21醋酸酯為原料按照實(shí)施例2的方法合成孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基。元素分析計(jì)算值C24H3006C69.54%H7.30%023.16%元素分析實(shí)測(cè)值:C69.38%H7.34%'H-NMR(CDCl3):3.55(2-OCH3'H),5.13(1位，H)，5.34(11位，H)，6.14(4位，H)，2.01,1.82(6位，H)，1.90(17-0H，H)，5.22(21位，H),2.05(21-0C0CH"H)實(shí)施例7孕甾-1,4,9(11)-三烯_3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-丁酸酯-2-甲氧基的合成以孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-丁酸酯為原料按照實(shí)施例3的方法合成孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-丁酸酯-2-甲氧基。元素分析計(jì)算值C26H3406C70.56%H7.74%021.69%元素分析實(shí)測(cè)值C70.49%H7.78%'H-NMR(CDCL):3.55(2-OCH3，H)'5.13(1位，H),5.34(11位，H)，6.14(4位，H)，2.01,1.82(6位，H)，1.92(17-0H，H)，5.24(21位，H),2.31,1.75,0.99(21-0C0CH2CH2CH3，按照H的順序得到的數(shù)據(jù))-實(shí)施例8孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17,21-雙羥基-21-醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基以孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-醋酸酯-6a-甲基為原料按照實(shí)施例4的方法合成孕甾-1，4,9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基。元素分析計(jì)算值C25H3206C70.07%H7.53%022.40%元素分析實(shí)測(cè)值C70.04%H7.56%'H-鍾(CDCl3):3.55(2-0CH3，H),5.13(1位，H),5.34(11位，H),6.14(4位，H),2.32(6位,H),l.16(6-CH3，H)，1.89(17-0H，H),5.22(21位,H)，2.05(21_0C0CH3，H)實(shí)施例9孕甾-l'4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-乙氧基1.2-溴-孕甾-1，4，9(11)-三烯_3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯的合成將10.0g孕甾-l，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17,21-雙羥基-21醋酸酯(式II化合物)投入200mL氯仿中，加入100mLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5"C，滴加含9.50g溴化劑2,4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿250inL，THF100mL)，80min滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h,反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入140mL10%亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。油狀物柱層析，氯仿-丙酮(1:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2-溴-孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯4.27g。2.孕甾-1，4，9(11)-三烯_3，20-雙酮-17,21-雙羥基-21醋酸酯-2-乙氧基的合成將0.06mol的乙醇鈉，攪拌溶解后加入80mlDMF，然后投入4.00g2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17,21-雙羥基-21醋酸酯，全溶，加入醋酸亞酮O.25g，攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加0.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸干溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。柱層析，氯仿-丙酮(2:5)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-乙氧基l.860g固體。元素分析計(jì)算值C25H3206C70.07%H7.53%022.40%元素分析實(shí)測(cè)值C69.98%H7.58%'H-醒(CDCl3):1.24，3.95(2_0CH2CH3,按照H的順序得到的數(shù)據(jù))，5.22(1位,H),5.41(11位，H)，6.10(4位，H),2.01,L82(6位，H)，1.90(17-0H，H)，5.24(21位，H),2.05(21-0C0CH"H)實(shí)施例10孕甾-4，9(11)-雙烯_3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17,21-雙醋酸酯-2-甲氧基1.2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯的合成將IO.Og孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯(式II化合物)投入200mL氯仿中，加入50mLTHF，攪拌成清液。冰鹽浴冷卻至-5°C，滴加含9.OOg溴化劑2，4，4，6-四溴-2，5-二烯環(huán)己酮的氯仿和THF溶液(氯仿250mL，THF100mL)，80min滴加完畢。移去冰鹽浴，室溫?cái)嚢鑜h，反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)液中加入140mL10%亞硫酸鈉水溶液攪拌5min，取有機(jī)層水洗l次。合并水層，氯仿反抽1次。合并氯仿層水洗l次，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮蒸干溶劑，得油狀物。油狀物柱層析，氯仿-丙酮(1:2)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯_3，20-雙酮-17,21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯3.97g。2.孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯-2-甲氧基的合成將0.06mol的甲醇鈉，攪拌溶解后加入80mlDMF，然后投入3.50g2-溴-孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯，全溶，加入醋酸亞酮0.25g，攪拌回流22h。22h后補(bǔ)加0.2g醋酸亞酮，繼續(xù)攪拌回流2h后結(jié)束反應(yīng)。減壓蒸干溶劑，加水稀釋?zhuān)}酸酸化至pH2，有沉淀，減壓抽濾，水洗至中性。用氯仿全溶，氯仿液水洗2次，無(wú)水硫酸鈉干燥，活性炭脫色，減壓濃縮近干，得油狀物。柱層析，氯仿-丙酮(h2)展開(kāi)，取主點(diǎn)用氯仿洗脫，將該氯仿減壓濃縮，沖入兩次甲醇重結(jié)晶，得孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯-2-甲氧基1.740g固體。元素分析計(jì)算值C26H3407C68.10%H7.47%024.42%元素分析實(shí)測(cè)值C67.99%H7.51%'H-麗R(CDCl3):3.23(2-0CH3,H)'3.70(2位，H)，5.30(11位，H),1.66,1.41(l位，H)，5.74(4位，H)，2.03，1.91(6位，H)1.90(17-OH，H)，5.23(21位，H)，2.03(21-0C0CH3，H),2.00(17-0H3，H)實(shí)施例ll:主藥孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21-醋酸酯-2-甲氧基5g輔料煙酰胺70g苯甲醇7.5ml注射用水加至1000ml制備將孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基先用少量注射用水調(diào)勻待用，再將煙酰胺溶于適量注射用水中，加入活性炭0.1g,攪拌均勻后放置15min，粗濾脫碳，加注射用水至約900ml，水浴上加熱至80~90°C，慢慢加入已用注射用水調(diào)好的孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基，保溫2030min，完全溶解后冷卻至室溫。加入苯甲醇，調(diào)節(jié)pH至5.56.0，調(diào)整體積至1000ml，然后在10'C以下放置8h,過(guò)濾至澄明、灌封，IO(TC流通蒸氣滅菌15min即可。實(shí)施例12:用細(xì)碎的乳糖將20mg孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2_甲氧基稀釋混合成200mg的藥物組合物，裝入4號(hào)硬膠囊中。藥理實(shí)施例1:體外實(shí)驗(yàn)采用生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的雞胚絨毛尿囊膜(CAM)血管增生模型觀察式(I)化合物對(duì)血管增生的影響，了解式(I)化合物對(duì)血管生成的作用。實(shí)驗(yàn)材料受精3日齡雞胚玻璃纖維濾紙血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)Chemicon公司產(chǎn)品將實(shí)施例1-10所制成的化合物先用DMS0溶解，再用PBS稀釋至所需要的濃度(DMS0濃度〈0.1%)實(shí)驗(yàn)方法1.CAM模型的建立75%乙醇清洗雞胚卵殼于超凈臺(tái)中吹干，水平放置5min后，在IOO腿培養(yǎng)皿邊緣小心將卵殼敲碎，卵內(nèi)容物置于培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿中預(yù)先加有IOmlDMEM培養(yǎng)基)。將此培養(yǎng)皿放入150mm大培養(yǎng)皿中(大培養(yǎng)皿中加少許水)，蓋上皿蓋，置于37。C、5%0)2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2.對(duì)CAM血管增生的影響用打孔機(jī)將玻璃纖維濾紙制成直徑3mm的小圓片，濕熱滅菌,將試劑各IOwl滴于玻璃纖維濾紙上，制成藥膜，吹干備用。雞胚培養(yǎng)3d后，隨機(jī)分成13組，每組10個(gè)，將實(shí)施例l-ll所得的化合物設(shè)為ll個(gè)給藥組(lg/U，同時(shí)給予生長(zhǎng)因子(2ug/L)，以及生長(zhǎng)因子(VEGF)單獨(dú)刺激組(陽(yáng)性對(duì)照組)和PBS(磷酸鹽緩沖液，PH7.4)刺激組(陰性對(duì)照組)。將藥膜貼于CAM和卵黃囊膜(yolksacmembrane，YSM)外2/3處血管較少的部位。加藥48h后，顯微鏡下觀察，計(jì)數(shù)藥膜周?chē)?mm內(nèi)大、中、小血管數(shù)。表l對(duì)CAM血管增生的影響表(元土*，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>3.結(jié)果l式(I)化合物對(duì)VEGF誘導(dǎo)的CAM血管增生的影響結(jié)果表l，PBS組血管生長(zhǎng)良好.VEGF組小血管增生明顯，式(I)化合物的各組血管增生明顯受到抑制.小血管顯著減少，基本回到正常水平。CAM是經(jīng)典的血管生成評(píng)價(jià)模型，具有方法簡(jiǎn)便、易觀察、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn).是目前最常用的在體模型。VEGF是重要的促血管生成因子，能剌激內(nèi)皮細(xì)胞的增生和遷移，促進(jìn)血管生成，且在多種腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)過(guò)度表達(dá)。本研究表明式(I)化合物抑制VEGF誘導(dǎo)的CAM血管增生，表明式(I)化合物具有抑制VEGF的促血管生成作用。式(I)化合物對(duì)血管生成有抑制作用，進(jìn)一步證實(shí)了具有抑制腫瘤血管生成的潛力。藥理實(shí)施例2:體內(nèi)實(shí)驗(yàn)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及瘤株實(shí)驗(yàn)選用昆明種小鼠，雄性，170只，分17組。體重(20士2)g小鼠肉瘤瘤株S1802.藥品順鉑(DDP)注射液20ml:20mg/支。3.方法3.1瘤鼠模型的建立小鼠肉瘤S180瘤株，腹腔傳代接種。待腹水生長(zhǎng)良好時(shí)，抽出腹水，細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為2X107個(gè)細(xì)胞/ml，在小鼠腋下皮下注射S180肉瘤細(xì)胞，每只接種O.25ml，于第ll天觀察局部腫瘤生長(zhǎng)情況。3.2治療及分組170只小鼠于接種當(dāng)天隨機(jī)分為17組。按下列表格給與藥物試驗(yàn)分組情況表<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注實(shí)施例試驗(yàn)組中給藥量按活性成分計(jì)。根據(jù)文獻(xiàn)"順鉑對(duì)小鼠骨髓遺傳毒性的研究"(《癌變.畸變.突變》，1996年8巻6期，362-365)中的介紹，對(duì)小鼠采用0.5mg/kg的給藥量。用藥10d，末次灌胃后60min，處死各組小鼠，剝?nèi)×鰤K、稱(chēng)重，瘤塊作病理組織切片。按公式計(jì)算抑瘤率抑瘤率=(對(duì)照組平均瘤重-實(shí)驗(yàn)組平均瘤重)/對(duì)照組平均瘤重X100X。3.3微血管染色免疫組化SABC法染色血管，即用型微血管染色試劑盒(CD31)為武漢博士德生物公司產(chǎn)品。各組瘤體剝離后，切取標(biāo)本，固定，包埋，切片。經(jīng)染色后的切片，內(nèi)皮細(xì)胞揭染，血管呈黃褐色，易于辨認(rèn)。MVD的測(cè)定MVD按照Weidner等人(WeidnerN，SempleJP，WelchWR。etal.TumorangiogenesisandMetastastasiscorrelationininvasivebreastcarcinonma，NEnglJ"Med，1991，324，1-8)的方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，計(jì)算腫瘤內(nèi)著色的毛細(xì)血管和微小血管，即在低倍鏡視野下掃視整個(gè)腫瘤組織切片，選擇最密集的微血管標(biāo)記區(qū)，凡呈現(xiàn)黃褐色標(biāo)記清晰的單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞串均作為一個(gè)可計(jì)數(shù)的微血管，有較厚肌壁的大血管及管腔面積大于8個(gè)紅細(xì)胞直徑的血管不計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)方法先在低倍鏡(10X10)視野下掃視整個(gè)組織切片，在腫瘤浸潤(rùn)區(qū)選擇最密集的3個(gè)微血管標(biāo)記區(qū)視野，即所謂的"新生血管熱點(diǎn)區(qū)"，然后在相同的背底、背體條件下，以高倍鏡(20X20)視野(0.72mm2)為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)所有染色的微血管數(shù)，取其平均值作為該樣本的測(cè)定值。3.4VEGF免疫組化VEGF免疫組化檢測(cè)試劑盒(即用型)，光學(xué)顯微鏡下觀察VEGF陽(yáng)性染色以腫瘤細(xì)胞及其附近的血管內(nèi)皮細(xì)胞槳或胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。然后每張染色切片通過(guò)MPIAS—1000高清晰度彩色病理圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行吸光度(面密度)和強(qiáng)度(灰度)測(cè)定。3.5統(tǒng)計(jì)方法運(yùn)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，采用q檢驗(yàn)。P〈0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.結(jié)果4.1S180各組小鼠移植瘤重變化比較瘤重的變化各治療組瘤重均顯著低于對(duì)照組，與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各種式(I)化合物對(duì)S180移植瘤有明顯抑制作用，與DDP合用具有增效作用，而不同劑量的式(I)化合物對(duì)S180移植瘤也具有劑量正相關(guān)的抑制作用，具體情況見(jiàn)表2。表2式(I)化合物對(duì)S180移植瘤的抑制作用(it"免)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>4.3式(I)化合物對(duì)小鼠S180肉瘤組織VEGF表達(dá)的影響免疫組化結(jié)果顯示，光學(xué)顯微鏡下觀察對(duì)照組腫瘤組織及其間質(zhì)見(jiàn)大量呈片狀或團(tuán)塊狀分布的棕黃色顆粒，各用藥組陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞明顯減少。對(duì)VEGF表達(dá)平均面積密度和平均灰度結(jié)果見(jiàn)表4。表4S180肉瘤組織VEGF表達(dá)數(shù)據(jù)表(**"免》<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>5結(jié)論侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移潛能是惡性腫瘤的基本特征，也是惡性腫瘤患者致死的主要原因，有確切證據(jù)表明，90%以上的惡性腫瘤患者最終死于腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，而且轉(zhuǎn)移通常早期發(fā)生，在臨床診斷出原發(fā)瘤時(shí)約50%的患者已產(chǎn)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。對(duì)于快速增殖、極少凋亡、多灶性分布、異質(zhì)性生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)移瘤，目前的手術(shù)、放療、化療等常規(guī)治療手段常遭失敗，最終患者死亡。轉(zhuǎn)移實(shí)乃惡性腫瘤頑固性和難治性的根本原因。研究表明在實(shí)體瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中，持續(xù)的血管生成是一個(gè)關(guān)鍵因素。當(dāng)瘤細(xì)胞分裂增值到一定的體積時(shí)(一般不超過(guò)l2mm2)，如果仍無(wú)血管長(zhǎng)入提供必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧以及增殖所需要的各種因子，其死亡的細(xì)胞數(shù)和增生的細(xì)胞數(shù)大致相等，瘤細(xì)胞團(tuán)停止擴(kuò)張達(dá)到相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。當(dāng)腫瘤誘發(fā)宿主為血管增殖，一些新生血管長(zhǎng)入腫瘤組織后，腫瘤細(xì)胞群迅速增加，體積增大，向周?chē)M織浸潤(rùn)，并具有轉(zhuǎn)移傾向。藥理實(shí)施例2體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，式(I)化合物組與對(duì)照組的MVD、VEGF比均明顯降低，而且式(I)化合物與順鉑聯(lián)合組MVD、VEGF值降低更明顯，這表明式(I)化合物和順鉑聯(lián)合治療腫瘤，具有協(xié)同作用，減少血管新生，提高了抗癌效果。通過(guò)藥理實(shí)施例1和2中的數(shù)據(jù)可以證明，式(I)化合物對(duì)哺乳動(dòng)物的血管新生和VEGF具有抑制作用，可以治療或預(yù)防與此有關(guān)的疾病。權(quán)利要求1.一種式(I)化合物或鹽或溶劑化合物R1＝H、OH或OCOR5R5是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2＝H或是COR6R6是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮3＝五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4＝H，α鹵素或α甲基1，2位id="icf0002"file="A2007100584140002C2.tif"wi="15"he="3"top="113"left="34"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>表示可以為單鍵或雙鍵。2.如權(quán)力要求1的化合物，其為°孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-2-甲氧基孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17,21-雙羥基2-甲氧基孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-2-甲氧基孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21丁酸酯-2-甲氧基孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-甲氧基孕甾-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯-6a-甲基-2-乙氧基孕甾-1，4，9(11)-三烯-3，20-雙酮-17，21-雙羥基-21醋酸酯2-乙氧基孕留-4，9(11)-雙烯-3，20-雙酮-17,21-雙羥基-17，21-雙醋酸酯-2-甲氧基或它們的任一種的鹽或溶劑合物。3.權(quán)利要求1中任一項(xiàng)式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在抑制哺乳類(lèi)動(dòng)物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的藥物中的應(yīng)用。4.權(quán)利要求1中任一項(xiàng)式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在治療哺乳類(lèi)動(dòng)物血管新生性疾病的藥物中的應(yīng)用。5.如權(quán)力要求3或4所述的哺乳類(lèi)動(dòng)物，其特征在于是人類(lèi)。6.如權(quán)力要求3所述的抑制哺乳類(lèi)動(dòng)物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的藥物，其特征在于治療劑量為O.Olmg-20mg/Kg/天。7.如權(quán)力要求4所述的抑制哺乳類(lèi)動(dòng)物血管新生性疾病的藥物，其特征在于治療劑量為0.Olmg-20mg/Kg/天。8.—種藥物組合物，由活性成分和一種或幾種藥用輔料組成，其特征在于活性成分是權(quán)利要求1中任一項(xiàng)式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物。9.如權(quán)力要求8所述的藥物組合物，其特征在于活性成分還可以包括抑制腫瘤的藥物、治療眼部新生血管生成造成的疾病的藥物或治療哮喘的藥物。10.—種制備權(quán)力要求1或2的式(I)化合物方法，其特征在于<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>式(II)化合物2-鹵素-式(II)化合物式(I)化合物2-卣素-式(II)化合物的合成將式(II)化合物全溶于有機(jī)溶媒中，加入鹵化劑，反應(yīng)得2-鹵素-式(II)化合物。式(I)化合物的合成將R30Na(或R30K)和2-鹵素-式(II)化合物投入有機(jī)溶媒中，加入催化劑，反應(yīng)生成得式(I)化合物。R1=H、0H或0C0R5R5是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝衛(wèi)-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮2=H或是C0R6R6是十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝衛(wèi)-2個(gè)雜原子的十個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔?=五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔锘蚝?-2個(gè)雜原子的五個(gè)碳以?xún)?nèi)的碳?xì)浠衔颮4=H,a卣素或a甲基全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及式(I)化合物及其合成方法。本發(fā)明也涉及該化合物在藥物上的用途和藥用制劑，特別是針對(duì)腫瘤、眼部血管新生的治療。文檔編號(hào)A61K31/57GK101353368SQ20071005841公開(kāi)日2009年1月28日申請(qǐng)日期2007年7月27日優(yōu)先權(quán)日2007年7月27日發(fā)明者盧彥昌,亮孫,郭文莉,松陳申請(qǐng)人:天津藥業(yè)研究院有限公司