專利名稱：倍他米松β－11物的自乳化組合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及自乳化技術和藥物制備技術領域，尤其涉及一種含有倍他米松β-11物的自乳化組合物，以及該組合物的制備方法和在倍他米松制備工藝中的應用。
背景技術：
自乳化系統(tǒng)(Self-Emulsifying System)是近年來發(fā)展較快的一種技術，是一種包含油相、表面活性劑(乳化劑)和助表面活性劑(助乳化劑)的固體或液體。其中油相多為脂肪酸酯類和經(jīng)過結構改造或水解后的植物油類，流動性、溶解性和自乳化性較好；表面活性劑通常為具有較高HLB值的非離子表面活性劑，同時加入適量的輔助表面活性劑能減少主要表面活性劑的用量，減少反復使用表面活性劑引發(fā)的安全問題。輔助表面活性劑的分子嵌入表面活性劑的分子中共同形成膠束的界面膜，由此形成的乳滴直徑可小于100納米。除了在給藥系統(tǒng)方面可提高藥物生物利用度外，自乳化技術有一顯著優(yōu)勢，可提高藥物的溶解度。
自乳化系統(tǒng)的基本特征是在環(huán)境溫度及溫和攪拌的情況下能自發(fā)形成水包油乳劑。用水稀釋后，乳化劑形成乳滴周圍的界面膜，從而降低界面能和形成聚集的屏障。在自乳化系統(tǒng)中，乳化所需要的自由能非常低，所以乳化過程會自然發(fā)生。這種自乳化性質對界面結構的要求是進行表面剪切時不需要阻力。當將兩相混合物(油/非離子型乳化劑)加入到水中時，形成在油和水之間的界面。隨著水分滲入，最終所有靠近界面的成分成為液晶相，液晶相的量依賴于雙相混合物中乳化劑的濃度。界面液晶相一旦形成，水分迅速滲入界面，在輕微的攪拌下，引起界面破裂和乳滴形成。
目前，已有采用自乳化技術(WO/00/71673，DE3738812A1)、也有微乳技術(WO/00/71672)應用于發(fā)酵過程，其目的都主要在于利用自乳化劑中的天然脂肪和油類，以及這類物質的衍生物，如甘油、甘油酯、脂肪酸或脂肪酯，作為微生物的養(yǎng)料，通過增加微生物的養(yǎng)料供給，以提高微生物的工作效率。
倍他米松合成反應過程的中間產物倍他米松β-11物具有孕甾結構，水溶性較差。在反應過程中(見下式)，受其溶解度的影響，其向倍他米松β-12物的生物轉化率低，反應底物投料量被迫減少；同時所需轉化時間長， 倍他米松β-11物 倍他米松β-12物嚴重影響倍他米松合成反應的速率。因此，解決倍他米松β-11物水難溶性所致向β-12物生物轉化率低的問題成為本領域技術人員長期以來一直試圖予以克服的技術難題。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的技術問題即是上述難題，提供一種倍他米松中間體——倍他米松β-11物的自乳化組合物，用于提高倍他米松合成反應的速率。
采用本發(fā)明自乳化組合物于倍他米松合成反應過程，無需加入額外高速攪拌，通?；瘜W反應的攪拌條件下即能形成納米級的微粒，增加難溶性甾體類中間藥物的溶解度，對于生產有重大意義。選取合適的油、乳化劑、助乳化劑以及適當優(yōu)化工藝條件，能增加甾體藥物生物轉化反應中底物的投入量，在相同生產時間內，僅增加少量乳化劑等輔料成本，就能大大提高最終產品產量，降低生產成本，提高產品競爭能力。
本發(fā)明倍他米松中間體自乳化組合物由倍他米松中間體β-11物、油相、乳化劑、助乳化劑、增稠劑等成分組成。
本發(fā)明倍他米松β-11物的自乳化組合物，其可以包括下列重量份的各組份倍他米松β-11物 10份油相 15-55份乳化劑 15-55份助乳化劑 13-46份增稠劑 0-10份其中，所說油相可以為植物油、脂肪酸酯類或礦物油。植物油包括蓖麻油、豆油、花生油、橄欖油，以及它們的混合物；本發(fā)明優(yōu)選蓖麻油。脂肪酸酯類包括中鏈三酸甘油酯，如MCT(三辛酸癸酸甘油酯)，Captex 355(oil)、Miglyol 812(oil)等各種椰子油C8/C10甘油三酯，Captex 200(oil，椰子油C8/C10丙二醇雙酯)，Capmul MCM(HLB＝5.5～6.0、椰子油C8/C10甘油單酯或雙酯)；和長鏈脂肪酸甘油酯，如Arlacel 80(油酸山梨醇酯)、Arlacel 86〔油酸甘油酯-丙二醇(重量比90∶10)〕、Peceol(油酸甘油酯)、Maisine(亞油酸甘油酯)、Myvero148-92〔純化向日葵油單甘油酯(含90w/w％亞油酸甘油酯)〕、油酸乙酯、Gelucire 44/14(聚乙二醇月桂酸甘油酯)等；本發(fā)明優(yōu)選MCT、油酸乙酯。礦物油包括白蠟油、液體石蠟等，以及它們的混合物。
所述的乳化劑選自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、天然植物油甘油三酯(LabrafilM)、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯(Labrasol)、聚山梨酯類[吐溫(Tween)40、Tween60、Tween80]、磺化琥珀酸二辛酯鈉(Aerosol)、泊洛沙姆F68/188，以及它們的混合物；本發(fā)明優(yōu)選聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油和Tween80中的一種或幾種。
所述的助乳化劑選自乙醇、丙二醇(1，2-丙二醇)、甘油、分子量為200-600的聚乙二醇、LabrafilM、乙二醇單乙基醚(transcutol P)，以及它們的混合物；本發(fā)明優(yōu)選乙醇、丙二醇、LabrafilM及transcutol P中的一種或幾種。
所述的增稠劑選用羥丙基甲基纖維素。
上述倍他米松β-11物與油相的重量比優(yōu)選為0.25-0.33。
油相與乳化劑的重量比優(yōu)選0.67～1.2。
油相與助乳化劑的重量比優(yōu)選0.86～2.67。
本發(fā)明還提供上述自乳化組合物的制備方法。其包括將上述自乳化組合物的各組分置于50L配料罐中，通蒸汽，80℃加熱回流0.5h后即得。加至發(fā)酵液中，采用激光粒度儀測定，乳滴平均粒徑100～310nm，較佳為100-200nm，90％粒徑累積值為150～550nm，優(yōu)選190-350nm。
本發(fā)明倍他米松β-11物的自乳化組合物用于制備倍他米松。即將配制好的自乳化組合物80℃加熱、回流后，加入培養(yǎng)好的發(fā)酵液中即可。
其中，發(fā)酵液的培養(yǎng)采用現(xiàn)有技術，包括轉化培養(yǎng)基棉籽餅粉0.8w/w％、Glu(葡萄糖)w/w4.8％、KCl 0.024w/w％、KNO30.6w/w％，余量為緩沖液；緩沖液配方MgSO40.05w/w％、K2HPO40.2w/w％、KH2PO40.1w/w％、KNO30.1w/w％；把霉菌綠僵菌(Metarrhizium sp.)斜面種接入轉化培養(yǎng)基進行種子培養(yǎng)，接種量0.2％(w/w)，培養(yǎng)溫度28℃，種子長好后，投入底物(倍他米松β-11物的自乳化組合物)轉化。種子培養(yǎng)和轉化在同一個罐中進行。
通常待種子長好后，把一定量泡敵(2-5滴/500ml)加入到底物中混勻后投入到轉化培養(yǎng)基中，開始轉化。轉化45h后，補充損失的緩沖液繼續(xù)轉化至發(fā)酵完成。
綜上所述，本發(fā)明具有如下優(yōu)點
1.本發(fā)明自乳化組合物，配料易得，配制簡單，成本低廉，適宜工業(yè)化應用。
2.本發(fā)明自乳化組合物顯著提高倍他米松β-11物向倍他米松β-12物的生物轉化率。
3.本發(fā)明自乳化組合物克服了倍他米松β-11物水溶性差的這一本領域技術人員長期以來一直難以克服的技術難題，提高了倍他米松合成反應速率。
具體實施例方式
下面用實施例來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。
實施例1倍他米松β-11物 80g中鏈三酸甘油酯(MCT) 150g無水乙醇 130g1，2-丙二醇 160g聚氧乙烯氫化蓖麻油RH40 250g羥丙基甲基纖維素E15 70g將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌(種子)生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑200nm，90％粒徑累積值為360nm。
實施例2倍他米松β-11物 80g中鏈三酸甘油酯(MCT) 240gLabrafilM(助乳化劑) 200g吐溫80 80g聚氧乙烯氫化蓖麻油RH40 200g
將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑227nm，90％粒徑累積值為395nm。
實施例3倍他米松β-11物 80g蓖麻油 230g1，2-丙二醇 120gTranscutol P 220g聚氧乙烯氫化蓖麻油RH40 250g將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑120nm，90％粒徑累積值為198nm。
實施例4倍他米松β-11物 80g蓖麻油 240gTranscutol P 110gLabrasol 180g聚氧乙烯蓖麻油 240g將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑242nm，90％粒徑累積值為474nm。
實施例5倍他米松β-11物 80g油酸乙酯 300gTranscutol P 350g聚氧乙烯氫化蓖麻油RH40 340g
將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑299nm，90％粒徑累積值為500nm。
實施例6倍他米松β-11物 80g蓖麻油 300g大豆油 120g無水乙醇 120g聚乙二醇400 120g吐溫80 100g聚氧乙烯氫化蓖麻油RH40 340g將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑310nm，90％粒徑累積值為550nm。
實施例7倍他米松β-11物 80g液體石蠟 260g無水乙醇 130Transcutol P 230g聚氧乙烯蓖麻油 120g將以上處方量物質和80ml泡敵混合后加熱，80℃回流0.5h，加至霉菌生長好的發(fā)酵液中進行轉化。加至發(fā)酵液中后，平均粒徑280nm，90％粒徑累積值為492nm。
對照實施例1倍他米松β-11物 80g無水乙醇 400g
把以上處方量倍他米松溶于乙醇中，攪拌，溶解后待用。
對照實施例2(現(xiàn)有生產使用配方)倍他米松β-11物 45g無水乙醇 200g把以上處方量倍他米松溶于乙醇中，攪拌，溶解后待用。
試驗實施例1轉化率、單位時間產量比較操作將上述實施例的倍他米松β-11物及處方量的油相、乳化劑、助乳化劑、增稠劑(如有的話)置于50L配料罐中，通蒸汽，80℃加熱回流0.5h后，加大配料罐的壓力，將其中回流好的濃縮液體和80ml泡敵混合后壓入500L、包括長好后的種子及發(fā)酵液的發(fā)酵罐中，28℃，空氣流量1.0m3/min，攪拌條件(270轉/分鐘)下反應65小時；將對照實施例1、2的倍他米松β-11物的乙醇溶液，壓入500L的發(fā)酵罐中，28℃，空氣流量1.0m3/min，攪拌條件(270轉/分鐘)下反應65小時或84小時。結果見下表表1本發(fā)明倍他米松β-11物的自乳化組合物與對比實施例轉化結果比較


注瓶號分A、B便于驗證同一樣品數(shù)據(jù)的準確性、重復性。
實驗結果顯示，相同投料量下，本發(fā)明自乳化組合物加入發(fā)酵液中，形成均一的乳液，沒有沉淀出現(xiàn)，穩(wěn)定性好；無大量泡沫產生，適合工業(yè)化生產，反應時間大大縮短。與現(xiàn)有生產產量相比，相同反應時間內轉化率和產量均有較大程度增加。且隨著乳滴粒徑的減少，轉化率明顯增加，水解點少。
權利要求
1.一種倍他米松β-11物的自乳化組合物，其包括下列重量份的各組份倍他米松β-11物 10份油相 15-55份乳化劑 15-55份助乳化劑 13-46份增稠劑 0-10份。
2.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于所述的油相為植物油、脂肪酸酯或礦物油。
3.如權利要求2所述的自乳化組合物，其特征在于所述的植物油選自蓖麻油、豆油、花生油和橄欖油。
4.如權利要求2所述的自乳化組合物，其特征在于所述的脂肪酸酯為中鏈三酸甘油酯或長鏈脂肪酸甘油酯。
5.如權利要求4所述的自乳化組合物，其特征在于所述的中鏈三酸甘油酯選自三辛酸癸酸甘油酯、椰子油C8/C10甘油三酯、椰子油C8/C10甘油單酯或雙酯、以及椰子油C8/C10丙二醇雙酯。
6.如權利要求4所述自乳化組合物，其特征在于所述的長鏈脂肪酸甘油酯選自油酸山梨醇酯、油酸甘油酯-丙二醇、油酸甘油酯、亞油酸甘油酯、純化向日葵油單甘油酯、油酸乙酯以及聚乙二醇月桂酸甘油酯。
7.如權利要求2所述的自乳化組合物，其特征在于所述的礦物油為白蠟油或液體石蠟。
8.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于所述的乳化劑選自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、天然植物油甘油三酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、聚山梨酯類、磺化琥珀酸二辛酯鈉以及泊洛沙姆中的一種或幾種。
9.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于所述的助乳化劑選自乙醇、丙二醇、甘油、天然植物油甘油三酯、分子量為200-600的聚乙二醇以及乙二醇單乙基醚中的一種或幾種。
10.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于所述的增稠劑為羥丙基甲基纖維素。
11.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于該倍他米松β-11物和油相的重量比為0.25～0.33。
12.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于該油相與乳化劑的重量比為0.67～1.2。
13.如權利要求1所述的自乳化組合物，其特征在于該油相與助乳化劑的重量比為0.86～2.67。
14.如權利要求1-13任一項所述的自乳化組合物，其特征在于該自乳化組合物的乳滴平均粒徑100～310nm。
15.如權利要求14所述的自乳化組合物，其特征在于該乳滴平均粒徑為100～200nm。
16.如權利要求1-13任一項所述的自乳化組合物，其特征在于該自乳化組合物的90％乳滴粒徑累積值150～550nm。
17.如權利要求16所述的自乳化組合物，其特征在于所述的90％乳滴粒徑累積值為190～350nm。
18.如權利要求1-13任一項所述的自乳化組合物的制備方法，其包括以下步驟把按處方量的倍他米松β-11物，及油相、乳化劑、助乳化劑、增稠劑置于配料罐中，通蒸汽，80℃加熱回流0.5h。
19.如權利要求1-13任一項所述的自乳化組合物在制備倍他米松中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種倍他米松β－11物自乳化組合物及其在制備倍他米松中的應用。本發(fā)明自乳化組合物包括倍他米松β－11物10份、油相15－55份、助乳化劑15－46份、乳化劑15－55份。該組合物在制備倍他米松的發(fā)酵液中能均勻分散成乳液，粒徑均勻；所用試劑、溶劑易得；在增加少量輔料成本的條件下，能夠較大程度提高增加倍他米松β－11物向β－12物生物轉化步驟中底物的投料量，增加轉化率，大大提高產量，降低能耗及成本。
文檔編號A61K47/14GK1965808SQ20061011876
公開日2007年5月23日 申請日期2006年11月24日 優(yōu)先權日2006年11月24日
發(fā)明者甘勇, 韓建生, 楊凌風, 楊怡靜, 甘莉, 朱春柳, 劉坤 申請人:上海醫(yī)藥(集團)有限公司, 中國科學院上海藥物研究所