專利名稱：透明蜂王漿溶液制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及透明蜂王漿溶液制造方法，更詳細(xì)地講涉及蜂王漿可全成分溶解利用且可保持與生蜂王漿同樣特性的透明蜂王漿溶液制造方法。
蜂王漿為幼工蜂分泌腺(下咽頭腺、大腮腺)分泌的帶乳白色的強(qiáng)酸味物質(zhì)，其中富含維生素，礦物質(zhì)，氨基酸，乙酰膽堿，10-羥基癸烯酸，甾醇，激素等營(yíng)養(yǎng)成分，而且平衡良好，自古就用作保健食品，醫(yī)藥品，化妝品，形式有生制品，膠囊或飲料等。
作為飲料，除了風(fēng)味等之外，透明性，色彩等外觀也不能不說(shuō)是重要的商品特性。但蜂王漿富含蛋白質(zhì)，為乳白色粘稠物質(zhì)，加入飲料等中作原料時(shí)，溶解性差，成為白色懸濁液或分離析出，在作為要求穩(wěn)定性和透明性的飲料原料使用時(shí)僅可作為可食用的原料。但現(xiàn)有飲料原料和蜂王漿簡(jiǎn)單混合后會(huì)生成白色懸濁物或沉淀，因此不能大量加蜂王漿。蜂王漿可生食或凍結(jié)后食用，可就這樣吸收，但因易腐敗，所以仍需冷藏和保存于冷凍庫(kù)中，然后取出食用。而且，由于粘稠狀態(tài)下特有的香味和收縮性，可就這樣食用并能吸收。因此，以粉末狀將糖類和蜂蜜等混合后成為易吸收形態(tài)，可這樣處理后再填入膠囊，制成片劑。此外，還可混入酒，果酒，花粉酒，清涼飲料等飲料中。
還可將蜂王漿懸浮在水中，抽出有效成分后，經(jīng)離心分離等辦法除去懸浮物所得透明溶液再用作飲料原料，但不僅僅回收的10-羥基癸烯酸少，而且大量加入時(shí)不可能抑制生成的白色懸濁物或沉淀的現(xiàn)象。另外，對(duì)于現(xiàn)有蜂王漿飲料，以生的蜂王漿計(jì)，每瓶中蜂王漿含量不超過(guò)50～500mg(50ml瓶中裝入0.1～1.0重量%)。順帶指出，在蜂王漿的公正食用規(guī)則中，作為該蜂王漿的有效成分，在定義其純度時(shí)是以10-羥基癸烯酸作指標(biāo)物質(zhì)的，生的蜂王漿中要求有1.4重量%以上，而干燥蜂王漿中要求有3.5重量以上%。
為克服這些缺陷，已提出在蜂王漿中加入一定濃度乙醇并加溫抽出，抽出后調(diào)為一定pH值范圍下離心分離或膜過(guò)濾所得的抽出液用于蜂王漿飲料(參照特開平1-215268號(hào)公報(bào))。
但該方法中除去了含10-羥基癸烯酸的物質(zhì)，蜂王漿中的有效成分，特別是在酸中不溶的蛋白質(zhì)。而蜂王漿又含有大量的蛋白質(zhì)(固形部分中36-42%，這涉及到蜂王漿所顯示的各種有用成分的營(yíng)養(yǎng)生理學(xué)機(jī)能。而且，蜂王漿是具有極高價(jià)值的食品原料，除去各種有用成分的醇抽出法也不能滿足營(yíng)養(yǎng)學(xué)上的要求。
另一方面，又提出制造含有蜂王漿的營(yíng)養(yǎng)成分且透明和穩(wěn)定的蜂王漿溶液的方法，其中分出蜂王漿的不溶成分，再將其與堿一起在水溶液中加溫處理(特願(yuàn)平2-333642號(hào))，而且還提出蜂王漿懸濁液用蛋白質(zhì)分解酶處理而使不溶成分可溶的方法(特願(yuàn)平2-333641號(hào))，其中前一方法需要不溶成分的分離工藝，而后一酶處理法中，蜂王漿中的蛋白質(zhì)與普通蛋白質(zhì)比較，具有蛋白酶分解而食用的性質(zhì)，因此為提高分解率，就必須使用大量的酶，使蜂王漿成為稀薄溶液再進(jìn)行處理。
本發(fā)明目的就是改進(jìn)這種酶處理法，提出使制造工藝簡(jiǎn)便但又廉價(jià)并可制成透明而又穩(wěn)定的蜂王漿制造法。
本發(fā)明目的還提供生蜂王漿中蛋白質(zhì)，總脂質(zhì)，10-羥基癸烯酸回收率高的透明蜂王漿溶液制造方法。
本發(fā)明其它目的，特征及優(yōu)點(diǎn)詳見下述。
本發(fā)明入對(duì)于含有高濃度的蜂王漿全成分但又透明的飲料制造法進(jìn)行了銳意研究，其中調(diào)制蜂王漿懸濁液，讓其經(jīng)受對(duì)基質(zhì)作用部位不同的兩種以上蛋白酶的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)分解率，特別是難分解的蛋白質(zhì)分解度得以提高，正是基于此，才完成了本發(fā)明。
也就是說(shuō)，本發(fā)明提出(1)透明蜂王漿溶液制造方法，其特征是調(diào)制蜂王漿水懸濁液，向其中同時(shí)或依次添加對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上蛋白酶，溫度保持室溫以上，借助酶反應(yīng)使不溶物可溶化，(2)前記1項(xiàng)所述透明蜂王漿溶液制造方法，其特征是蛋白酶為胃蛋白酶，胰酶等哺乳動(dòng)物消化酶，(3)透明蜂王漿溶液制造方法，其特征是調(diào)制蜂王漿水懸濁液，向其中同時(shí)或依次添加對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上蛋白酶，溫度保持室溫以上，借助酶反應(yīng)使不溶物可溶化，然后加熱到60℃以上使酶反應(yīng)停止，從而得到透明蜂王漿溶液，再用該透明蜂王漿調(diào)制飲料，(4)前記第(3)項(xiàng)所述透明蜂王漿溶液制造方法，其特征是pH5.0～6.0加熱到60℃以上而使酶反應(yīng)停止，之后除去沉淀物而得透明蜂王漿溶液，再用該透明蜂王漿溶液調(diào)制飲料。
本發(fā)明原料所用蜂王漿不僅限于生蜂王漿，還可用冷凍或凍干蜂王漿等，必要時(shí)可用任何蜂王漿。
本發(fā)明方法中，加水或溫水調(diào)制成蜂王漿懸濁液。這時(shí)，若用醇(如乙醇)等作前處理(分別精制)，或用醇溶液調(diào)制成懸濁液，則如前所述，蜂王漿中的有用成分，特別是醇中不溶的蛋白質(zhì)回收率低，達(dá)不到本發(fā)明的有利特征，可調(diào)制成的蜂王漿濃度通?？筛哌_(dá)5～70%(重量%，下同)，優(yōu)選5～50%，更優(yōu)選10～50%的懸濁液。然后該懸濁液用碳酸鈉，氫氧化鈉或檸檬酸調(diào)節(jié)pH。
可自由地將pH調(diào)為所用酶發(fā)揮作用的pH范圍內(nèi)，pH太高，不僅會(huì)使風(fēng)味劣化，而且還是引起褐變等變質(zhì)的原因。因此優(yōu)選pH作用范圍2～9，更優(yōu)選3～8。
調(diào)節(jié)pH后的蜂王漿懸濁液加蛋白酶使蛋白酶質(zhì)分解，所用蛋白酶并不作特別限制，以微生物和植物來(lái)源的酸性，中性，堿性蛋白酶為主，通常也用胃蛋白酶，胰酶等來(lái)源于哺乳動(dòng)物的消化酶等，還可廣泛應(yīng)用食品加工所用酶，可從這些酶中選用兩種以上對(duì)基質(zhì)作用部位不同的酶，其中對(duì)基質(zhì)作用部位不同的蛋白酶指作用于基質(zhì)多肽鏈末端的蛋白酶和作用于內(nèi)部的蛋白酶或作用于N末端的酶類和作用于C末端的酶類等作用方式的特異性不同的蛋白酶。
酶處理?xiàng)l件可根據(jù)酶種類及添加量以及反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間而任意設(shè)定，通常處理1g的蜂王漿加酶之一種的量為20～500，優(yōu)選50～500，更優(yōu)選100～300單位，處理時(shí)間2～24小時(shí)，優(yōu)選4～20小時(shí)，更優(yōu)選8～18小時(shí)，反應(yīng)溫度可為20～60℃，而從防止褐變和分解效率角度看，以35～50℃為好。
用二種以上蛋白酶處理時(shí)，在其中酶的適宜pH和溫度比較接近的情況下，可同時(shí)加料進(jìn)行處理，以便于簡(jiǎn)化操作并得到比較高的分解率。另一方面，適宜pH和溫度不同的酶組合進(jìn)行酶處理時(shí)，可依次加料，其中處理?xiàng)l件可設(shè)定為各種酶發(fā)揮作用的適宜條件，從而得到多種蛋白酶組合進(jìn)行酶處理的蜂王漿溶液。酶處理過(guò)程中隨處理時(shí)間而測(cè)定蛋白質(zhì)分解率，在分解率達(dá)到最高的時(shí)間點(diǎn)停止處理，所用酶的最終分解率不同，在分解率達(dá)到75%以上，優(yōu)選85%以上的時(shí)間點(diǎn)結(jié)束反應(yīng)，于60℃以上，優(yōu)選60～100℃，更優(yōu)選70～90℃加熱5～30分鐘，優(yōu)選10～20分鐘而使酶失活。停止酶反應(yīng)后，離心分離或膜過(guò)濾除去不純物和不溶物而得透明蜂王漿溶液。
這樣用對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上蛋白酶組合進(jìn)行酶處理，與單一酶處理相比，蛋白質(zhì)分解率飛速提高，該蜂王漿加入酸性飲料時(shí)的穩(wěn)定性極優(yōu)。蛋白質(zhì)分解率保持在低水平下加入飲料時(shí)也有穩(wěn)定的例子，原因還不清楚，但在制造透明蜂王漿溶液時(shí)，優(yōu)選上述用對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上蛋白酶處理蜂王漿懸濁液的方法。
另一方面，蜂王漿用蛋白酶處理時(shí)，通常還可附加好的香味和美味，從味道角度看，選擇優(yōu)良的酶之組合是極其重要的。
本發(fā)明中，酶處理后的蜂王漿懸浮液pH5.0～6.0下60℃以上進(jìn)行加熱處理而使酶反應(yīng)停止，然后經(jīng)膜過(guò)濾或離心分離等辦法除去沉淀物而得透明蜂王漿溶液。調(diào)節(jié)pH時(shí)可采用氫氧化鈉，氫氧化鉀等堿，檸檬酸，葡糖酸，蘋果酸等有機(jī)酸。pH調(diào)為該范圍后停止酶反應(yīng)可提高粗蛋白質(zhì)，總脂質(zhì)回收率，特別是蜂王漿中作為有效成分的10-羥基癸烯酸回收率可顯著提高，同時(shí)各有用成分溶解穩(wěn)定性也可得到提高。
現(xiàn)今，食品蛋白質(zhì)經(jīng)消化酶得到的分解中，多次發(fā)現(xiàn)了有生理學(xué)機(jī)能的多肽。如果認(rèn)為經(jīng)口吸收的蜂王漿經(jīng)胃液中的胃蛋白酶，水液中的蛋白酶等將其中的蛋白質(zhì)成分分解成氨基酸和多肽后被生體吸收，那么可以說(shuō)發(fā)現(xiàn)飲用蜂王漿時(shí)的各種有用生理機(jī)能就與這些物質(zhì)有關(guān)。從上述可以看出，從維持機(jī)能性角度選擇所用酶組合就很重要，本發(fā)明中由胃蛋白酶和胰酶等哺乳動(dòng)物消化酶組合進(jìn)行酶處理而提出的透明蜂王漿溶液制造方法可達(dá)到這一目的。
這樣調(diào)制的透明蜂王漿溶液可就這樣用作飲料原料，由于易腐敗，所以用之前宜冷藏或冷凍保持。當(dāng)然，為防止腐敗和變質(zhì)，并從易吸取的角度考慮，可將其濃縮，而且可加乙醇，食鹽等而制成防腐效果高的液狀制品。此外，可加糊精，乳糖等干燥助劑并進(jìn)行噴霧干燥，凍干而得以粉化。
而且，可將上述蜂王漿溶液或酶加入飲料原料液中而調(diào)制成飲料溶液。這里所用飲料原料可可例如蜂蜜，ァセロラ，維生素C，ロ-ズヒツプ，咖啡，ステビァ，葡萄糖，果糖，果汁，洋酒，水等通常的飲料所用原料。這些原料調(diào)合，溶解，再加透明蜂王漿溶液，攪拌成均勻狀態(tài)，將溶液ァセプティツク充填或熱充填入瓶或罐等之中，就制成了蜂王漿飲料。
經(jīng)過(guò)本發(fā)明對(duì)基質(zhì)作用部位不同的兩種以上蛋白酶的作用，蜂王漿中的不溶物變得可溶化，制造成透明的蜂王漿溶液，用于飲料中時(shí)，因出現(xiàn)白色懸濁物，沉淀，凝集物等而成為飲料劣化原因的蛋白質(zhì)可極好地進(jìn)行分解而低分子化，所以用于飲料時(shí)就完全沒有必要擔(dān)心了。
而制造工藝極其簡(jiǎn)便，所需設(shè)備少，不僅便宜，而且可實(shí)現(xiàn)大批量生產(chǎn)。
本法所得可溶化蜂王漿成分的組成與生的蜂王漿的成分并無(wú)大差別，而味道又好，從有效利用蜂王漿的全成分角質(zhì)出發(fā)是極優(yōu)異的。
特別是蜂王漿水懸濁液用胃蛋白酶，胰酶等消化酶處理后的可溶化蜂王漿制法中，可以認(rèn)為難消化的蜂王漿蛋白質(zhì)達(dá)到了預(yù)消化后被吸收的目的，所以可生成生理活性多肽等并制成極富機(jī)能性的透明蜂王漿溶液。
下述試驗(yàn)例和實(shí)施例及比較例詳述本發(fā)明，但本發(fā)明并不僅限于此。
所用酶中，作為酸性蛋白酶代表用的是來(lái)自ァスペルギルスオリゼ的蛋白酶(蛋白酶M，效價(jià)5500單位/g，天野制藥制)，作為中性蛋白酶的代表用的是來(lái)自バチルスズブチリス的蛋白酶(蛋白酶N，效價(jià)150000單位/g，天野制藥制)，而作為哺乳動(dòng)物消化酶用的是胃蛋白酶(效價(jià)1∶10000，天野制藥制)和胰酶(胰酶F，效價(jià)26000單位/g，天野制藥制)，蜂王漿用的是10%(W/W)水溶液。
實(shí)施例110%蜂王漿水懸濁液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH4后加胃蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)(胃蛋白酶處理液)。該處理液用20%氫氧化鈉水溶液調(diào)為pH8后加胰酶1g，45℃酶處理6小時(shí)。所得溶液用20%氫氧化鈉溶液或10%檸檬酸溶液調(diào)為pH5.5，80℃再加熱10分鐘使酶失活，然后過(guò)濾除去雜質(zhì)和不溶物而得透明蜂王漿溶液，再將該蜂王漿溶液減壓濃縮至所用生蜂王漿的重量。
實(shí)施例2同于實(shí)施例1調(diào)制的胃蛋白酶處理液1kg中加入酸性蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例3同于實(shí)施例1調(diào)制的胃蛋白酶處理液1kg用20%氫氧化鈉調(diào)為pH7后加中性蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例410%蜂王漿水懸濁液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH4后加酸性蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)(酸性蛋白酶處理液)。在該處理液中加胃蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例5同于實(shí)施例4調(diào)制的酸性蛋白酶處理液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH7后加中性蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例6同于實(shí)施例4調(diào)制的酸性蛋白酶處理液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH8后加胰酶1g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例710%蜂王漿水懸濁液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH7后加中性蛋白酶1g，45℃酶處理6小時(shí)(中性蛋白酶處理液)。在該溶液中加胰酶1g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例810%蜂王漿水懸濁液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH4后加酸性蛋白酶和胃蛋白酶，各加0.5g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
實(shí)施例910%蜂王漿水懸濁液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH8后加中性蛋白酶和胰酶，各加0.5g，45℃酶處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液。
比較例1實(shí)施例1的胃蛋白酶處理液加熱后過(guò)濾而得透明蜂王漿溶液。
比較例2實(shí)施例4的酸性蛋白酶處理液加熱后過(guò)濾而得透明蜂王漿溶液。
比較例310%蜂王漿水懸濁液1kg用20%氫氧化鈉溶液調(diào)為pH8后加胰酶1g，45℃處理6小時(shí)，酶處理結(jié)束后同于實(shí)施例1而得透明蜂王漿溶液。
比較例4實(shí)施例7的中性蛋白酶處理液加熱后過(guò)濾而得透明蜂王漿溶液。
試驗(yàn)例1實(shí)施例和比較例的蜂王漿溶液酶處理過(guò)程中0，2，4，6小時(shí)時(shí)取樣并測(cè)定蛋白質(zhì)分解率。樣品2.0ml中用等量10%三氯乙酸(TCA)進(jìn)行離心分離，其上層輕微稀釋后經(jīng)洛雷法比色定量測(cè)定分解率，再推算TCA可溶性成分量。用加入等量水代替TCA溶液后的溶液同樣比色定量求得蜂王漿中的粗蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì)分解率如下式求得蜂王漿溶液的粗蛋白質(zhì)含量(a)
蜂王漿溶液的TCA可溶成分含量(b)酶處理樣品的TCA可溶成分含量(c)分解率＝ (c-b)/(a-b) ×100%6小時(shí)處理后的蛋白質(zhì)分解率如表1所示，由各時(shí)間點(diǎn)的分解率推算可確認(rèn)達(dá)到的最高分解率。根據(jù)這一結(jié)果，如同蜂王漿溶液用單一酶處理一樣，用來(lái)源不同的二種酶同時(shí)或分階段處理時(shí)就可得到更高的分解率。
試驗(yàn)例2實(shí)施例和比較例調(diào)制的透明蜂王漿溶液加入市售透明酸性飲料(pH3)中達(dá)到2%的蜂王漿濃度，100℃加熱殺菌10分鐘。冷卻后室溫放置，調(diào)查飲料穩(wěn)定性和味道(苦味，香味，收斂味)，表1列出了1周后穩(wěn)定性評(píng)定結(jié)果，表2列出了味道的判定結(jié)果，表3列出了實(shí)施例1可溶化蜂王漿組成。
對(duì)本實(shí)用新型


如下圖1是本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意2是構(gòu)成控制部件的比較放大器電子原理3是電熱控溫管構(gòu)造中(1)控制部件(2)電熱及測(cè)溫部件(3)電熱體導(dǎo)線(4)溫度傳感器導(dǎo)線(5)硬質(zhì)玻璃管體(6)溫度傳感器(7)電熱體圖1中的控制部件就是由圖2所示的比較放大器構(gòu)成，它是一個(gè)由運(yùn)算放大器F007組成的恒溫電路，采用電容降壓，并由一個(gè)雙向可控硅控制負(fù)載，這一部分元件可置于一個(gè)小型塑料合中，設(shè)有發(fā)光二極管指示工作狀態(tài)。圖3中的電熱控溫管內(nèi)，溫度傳感器(6)與電熱體(7)相互隔離絕緣安置，確保溫度傳感器接受的溫度為被加熱液體的實(shí)際溫度(誤差∠±0.5℃)。管內(nèi)用填充物(如石膏粉、水泥或環(huán)氧樹脂)塞實(shí)固定。溫度傳感器(6)和電熱體(7)引出線分別按圖導(dǎo)2中的
和“負(fù)載”兩端。
實(shí)際應(yīng)用時(shí)，將電熱控溫管置于盛有液體的顯影盤內(nèi)一側(cè)(用夾具或膠紙稍加固定)然后將插頭接220V電源就進(jìn)入自動(dòng)工作狀態(tài)。隨著照片顯影操作，液體處于攪動(dòng)狀態(tài)促使熱量的均勻擴(kuò)散，從而確保顯影效果。
表2酶處理蜂王漿官能檢查苦味 香味 收斂味實(shí)施例 1 -
-¨ 2
-
¨ 3 + - +¨ 4
-
¨ 5 - - -¨ 6 - + +¨ 7 -
-¨ 8
+ -¨ 9 -
-實(shí)施例1
- -¨ 2 - + +¨ 3 -
-¨ 4 - + +(注)測(cè)定方法系由10名人員進(jìn)行官能試驗(yàn)，其評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)依程度定為0～4的5個(gè)階段，再根據(jù)合計(jì)點(diǎn)判定為30點(diǎn)以上(
)，29～20(
)，19～10(+)，不滿10(-)。
表3生蜂王漿和酶處理可溶化蜂王漿的成分組成(%)生蜂王漿 實(shí)施例1的可溶化蜂王漿粗蛋白質(zhì) 12.5 12.3糖質(zhì) 15.0 14.8脂質(zhì) 4.7 4.5
癸烯酸 1.8 1.7水分 66.4 64.0如表1結(jié)果所示，蜂王漿溶液用來(lái)源不同的二種酶同時(shí)或分階段處理所得透明蜂王漿溶液加入飲料中極其穩(wěn)定，沒有生成白色懸濁物以及沉淀、凝集物的危險(xiǎn)。
如表1和2結(jié)果所示，比較例1中用胃蛋白酶處理時(shí)苦味很濃，而且胃蛋白酶加胰酶處理時(shí)(實(shí)施例1)分解率增高，味道為強(qiáng)香味，而且還留有蜂王漿的味道。比較例2中用酸性蛋白酶處理，沒有苦味，但有收斂味并稍有香味，味道讓人感到非常難吃。另一方面，這種酸性蛋白酶和胰酶組合時(shí)的實(shí)施例6中，分解率和穩(wěn)定性得以提高，從味道角度看，與實(shí)施例1比較，就稍顯不足。
但2種酶作用時(shí)，分解率，穩(wěn)定性以及味道的評(píng)價(jià)作深入分析就可以發(fā)現(xiàn)，如實(shí)施例1，7的組合就特別好。
實(shí)施例10同于實(shí)施例1將30%蜂王漿水懸濁液用胃蛋白酶和胰酶分階段處理后分割溶液，將各pH調(diào)為3.0～6.8，加熱使酶失活，液溫保持60℃過(guò)濾，此時(shí)測(cè)定固形物，粗蛋白質(zhì)，總脂質(zhì)，10-羥基癸烯酸的回收率，結(jié)果如表4所示，其中回收率為過(guò)濾后的濃度除以過(guò)濾前的濃度(%)。
然后將各pH下過(guò)濾所得的透明蜂王漿溶液稀釋10倍(濃度約3%)，在其溶入0.3(W/V)檸檬酸，各溶液加熱后冷卻并觀察有無(wú)沉淀等，結(jié)果如表5所示。
表4<
表5<
如表4和5的結(jié)果所示，酶處理后調(diào)為pH5.0～6.0并過(guò)濾的透明蜂王漿溶液各成分回收率平均都很高，而且作為稀釋飲料時(shí)的加熱穩(wěn)定性亦很大優(yōu)越。
實(shí)施例11同于實(shí)施例10將30%蜂王漿水懸濁液用胃蛋白酶和胰酶分階段處理后溶液分成2份，其pH調(diào)為4和5，加熱后液溫分別保持20～70℃并過(guò)濾，測(cè)定此時(shí)的總脂質(zhì)和10-羥基癸烯酸回收率，結(jié)果如表6所示，回收率同于實(shí)施例測(cè)定。
表6
如表6結(jié)果所示，pH5.5下過(guò)濾時(shí)總脂質(zhì)和10-羥基癸烯酸回收率受過(guò)濾溫度的影響不大，pH4.0時(shí)溫度高，則回收率亦提高，但其值與pH5.5時(shí)相比，仍非常小。
試驗(yàn)例3蜂王漿按以下處理。
1)胃蛋白酶單獨(dú)處理30%蜂王漿水懸濁液同于實(shí)施例1調(diào)為pH4后加0.5%胃蛋白酶液，45℃酶處理2小時(shí)，然后將溶液調(diào)為pH5.5，80℃加熱10分鐘后，加0.3%(W/V)ラジオライト＃100，液溫60℃時(shí)過(guò)濾(試料1)。
2)胰酶單獨(dú)處理30%蜂王漿水懸濁液調(diào)為pH8.0后加0.5胰酶F，45℃酶處理4小時(shí)，然后調(diào)為pH5.5，之后同1)處理(試料2)。
3)胃蛋白酶-胰酶2階段處理30%蜂王漿水懸濁液同實(shí)施例1用胃蛋白酶和胰酶作2階段酶處理，酶處理結(jié)束后的溶液同實(shí)施例1處理而得透明蜂王漿溶液(試料3)。
4)用醇溶液以及胃蛋白酶-胰酶進(jìn)行的2階段酶處理除在15%乙醇溶液中調(diào)制30%蜂王漿溶液以外，同上述3)得到透明蜂王漿溶液(試料4)。
然后測(cè)定上述所得各蜂王漿溶液中的固形物，粗蛋白質(zhì)，總脂質(zhì)和10-羥基癸烯酸回收率及pH3下的加熱穩(wěn)定性，結(jié)果如表7所示。
表7
從表7結(jié)果可以看出，試料3(酶2階段處理)的各成分回收率高，可以說(shuō)加熱穩(wěn)定性優(yōu)異。而試驗(yàn)1(胃蛋白酶單獨(dú)處理)各成分回收率(特別是粗蛋白質(zhì)回收率)低，加熱穩(wěn)定性差，試料2(胰酶單獨(dú)處理)各成分回收率也低，加熱穩(wěn)定性亦差，試驗(yàn)4(醇溶液中酶2階段處理)的總脂質(zhì)和10-羥基癸烯酸回收率低，加熱穩(wěn)定性也不好。
比較例5生蜂王漿80g中加水400ml并充分?jǐn)嚢瓒梅渫鯘{水懸濁液后加入淀粉酶，纖維素酶和脂肪酶，各加2.4g，30℃反應(yīng)2小時(shí)，然后用1N氫氧化鈉將溶液調(diào)為pH7.0，其中加入蛋白酶N1.5g，55℃反應(yīng)90分鐘，溶液再用檸檬酸下調(diào)為pH4.0，95℃加熱處理30分鐘后離心分離得上層清液，向其中加入キトサンビ-ズ(1mm粒徑)5g，室溫?cái)嚢?小時(shí)后過(guò)濾得透明蜂王漿溶液。
測(cè)定此時(shí)的各成分回收率(過(guò)濾后的濃度/離心分離前的濃度%)，稀釋10倍，調(diào)為pH3的溶液加熱穩(wěn)定性也進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果如表8所示。
比較例6生蜂王漿10g中加15%乙醇100ml而制成懸浮液，再加入蛋白酶M1.0g并40℃反應(yīng)90分鐘，加熱處理后加殼聚糖1g，室溫?cái)嚢?小時(shí)后用濾紙過(guò)濾而得透明蜂王漿溶液。
各成分回收率可用過(guò)濾前的濃度求得，并試驗(yàn)同于比較例5稀釋后的穩(wěn)定性，結(jié)果如表8所示。
表8
如表8結(jié)果所示，用蛋白酶以外的酶和蛋白酶進(jìn)行2階段酶處理(比較例5)時(shí)加熱穩(wěn)定性良好，但各成分(特別是總脂質(zhì))回收率低，而且15%乙醇懸濁液中僅用蛋白酶進(jìn)行1階段處理(比較例6)時(shí)回收率低，加熱穩(wěn)定性亦差。
以上詳細(xì)說(shuō)明了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但應(yīng)當(dāng)看到，在本發(fā)明構(gòu)思及保護(hù)范圍內(nèi)仍可作出各種不同的實(shí)施方式，因此在本發(fā)明權(quán)利要求書限定范圍內(nèi)并不能限定其特定的實(shí)施方式。
權(quán)利要求
1.透明蜂王漿溶液制造方法，其特征是調(diào)制蜂王漿水懸濁液，其中同時(shí)或依次加入對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上的蛋白質(zhì)溫度保持室溫以上，借助酶反應(yīng)使不溶物可溶化。
2.權(quán)利要求1的制造方法，其特征是蛋白酶選自哺乳動(dòng)物消化酶。
3.權(quán)利要求1的制造方法，其特征是蜂王漿水懸濁液中蜂王漿濃度5～70重量%。
4.權(quán)利要求1的制造方法，其特征是1種蛋白酶加量為1g蜂王漿加20～500單位。
5.權(quán)利要求1的制造方法，其特征是蛋白酶作用的蜂王漿水懸濁液pH2～9。
6.權(quán)利要求1的制造方法，其特征是蛋白酶作用溫度20～60℃。
7.權(quán)利要求1的制造方法，其特征是蛋白酶作用時(shí)間2～24小時(shí)。
8.透明蜂王漿溶液制造方法，其特征是調(diào)制蜂王漿水懸濁液，其中同時(shí)或依次加入對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上蛋白酶，溫度保持室溫以上，借助酶反應(yīng)使不溶物可溶化后加熱到60℃以上使酶反應(yīng)停止而得透明蜂王漿溶液，再用該透明蜂王漿溶液調(diào)制飲料。
9.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是pH5.0～6.0加熱到60℃以上使酶反應(yīng)停止，然后除去沉淀物而得透明蜂王漿溶液，再用該透明蜂王漿溶液調(diào)制成飲料。
10.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是蛋白酶選自哺乳動(dòng)物消化酶。
11.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是蜂王漿水懸濁液中蜂王漿濃度5～70重量%。
12.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是1種蛋白酶加量為1g蜂王漿加20～500單位。
13.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是蛋白酶作用的蜂王漿水懸濁液pH2～9。
14.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是蛋白酶作用溫度20～60℃。
15.權(quán)利要求8的制造方法，其特征是蛋白酶作用時(shí)間2～24小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明提供制造工藝簡(jiǎn)便且廉價(jià)的透明穩(wěn)定蜂王漿溶液制造方法，其中調(diào)制蜂王漿水懸濁液，向其中同時(shí)或依次添加對(duì)基質(zhì)作用部位不同的二種以上蛋白酶，溫度保持室溫以上，借助酶反應(yīng)使不溶物可溶化。
文檔編號(hào)A23L2/52GK1070804SQ9211035
公開日1993年4月14日 申請(qǐng)日期1992年9月8日 優(yōu)先權(quán)日1991年9月9日
發(fā)明者野村潤(rùn)一郎, 梅澤淳子, 湯淺高之, 小林洋一 申請(qǐng)人:拜奧斯有限公司