專(zhuān)利名稱(chēng)：吊瓜組培育苗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物組織培養(yǎng)方法，特別涉及一種借助于基本培養(yǎng)基附加不同成分對(duì)吊瓜進(jìn)行工廠化快速繁殖的吊瓜組培育苗方法。屬植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
吊瓜，又名栝樓(Trivbosantnes Kirilouii)，系葫蘆科栝樓屬，是多年生宿根草質(zhì)藤本植物，在我國(guó)已有多年種植歷史，吊瓜有藥用吊瓜和食用吊瓜(主要收獲瓜籽)，根椐《本草綱目》記載，吊瓜有健胃、潤(rùn)肺、化痰、散節(jié)、滑潤(rùn)作用，主治痰熱咳嗽、肺痰咳血、胸悶、消瀉和便秘等癥，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明。吊瓜籽還有消炎、抗癌功效，上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社的《抗癌新法精編》介紹，其對(duì)肺癌、胃癌、胰島素乳腺癌療效顯著。吊瓜籽營(yíng)養(yǎng)豐富，其中蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素、微量元素及生物堿、黃酮類(lèi)、疳類(lèi)和有機(jī)類(lèi)等含量頗豐，是不可多得的藥膳食品，長(zhǎng)期食用有益健康，其籽炒制后香味適口，是天然綠色保健品，因而市場(chǎng)需求大，供不應(yīng)求，價(jià)格攀升。
吊瓜不但有食用和藥用價(jià)值，還是一種優(yōu)良的遮蔭、觀果的綠化品種，6～9月果未成熟時(shí)濃蔭遮日，未成熟的吊瓜淡綠色，表覆青黑色的狹條斑，9月以后，果實(shí)呈橙紅色，有光澤，十分醒目耀眼，可廣泛應(yīng)用于公園的池塘邊做垂吊遮蔭，也可作為休閑遮蔭棚架植物，形成風(fēng)格獨(dú)特的一景。
食用吊瓜是浙江長(zhǎng)興一帶農(nóng)民自發(fā)從野生吊瓜資源馴化而來(lái)農(nóng)家品種。它雌雄異株，目前吊瓜的繁殖生產(chǎn)上主要靠種子播種法和2～3年生塊根切段繁殖，以塊根繁殖為主。用種子播種繁殖，不結(jié)果的雄株占自然繁殖的幼苗的70％左右，育苗成本高，繁殖率低。用塊根切段繁殖，由于受到塊根數(shù)量的限制，繁殖效率低，且費(fèi)工費(fèi)時(shí)，直接影響種植面積的擴(kuò)大，優(yōu)良品種的推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足，提供一種繁殖周期短，繁殖系數(shù)高的吊瓜組培育苗方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種吊瓜組培育苗方法，其特征在于該法包括以下工藝步驟步驟一、外植體的選取在春夏之交取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖為外植體；步驟二、外植體的處理剪取芽或藤狀莖，去除藤狀莖上的葉片及卷須，切成一葉莖段，流水沖洗20～30分鐘，用潔凈干紗布吸干表面水分，在超凈工作臺(tái)內(nèi)，用70％～75％的酒精浸泡10～15秒，倒出酒精液，用無(wú)菌水沖洗1～2遍，再用0.1％的氯化汞溶液振蕩消毒8～10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗3～4次，用無(wú)菌紗布吸干表面水分，最后剪去接觸藥液的莖段兩端少許，待接種；
步驟三、外植體接種將步驟二得經(jīng)消毒并整理好的芽或莖段，按生物學(xué)極性方向接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi)，每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段，培養(yǎng)瓶I內(nèi)的培養(yǎng)基I由MS+BA0.1～0.5+KT0.01～0.2+IAA0.05～0.2+0.5％的瓊脂粉+2～3％的蔗糖組成，用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8～6.0，接種好芽或莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的培養(yǎng)室，培養(yǎng)25～30天，即可長(zhǎng)成4～5節(jié)帶葉莖蔓；步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓又剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi)，每瓶插單莖段4～6個(gè)。
培養(yǎng)瓶II內(nèi)的培養(yǎng)基II由MS+BA0.3～0.5+KT0.2～0.3+NAA0.01～0.1+0.5％的瓊脂粉+2～3％的蔗糖組成，用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8～6.0，接種好莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的條件下培養(yǎng)25～30天，可長(zhǎng)成4～5節(jié)帶葉莖蔓，如此反復(fù)繼代，則小苗按幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，直到達(dá)到目標(biāo)苗數(shù)；步驟五、生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi)，每瓶插10個(gè)莖段，培養(yǎng)瓶III內(nèi)的培養(yǎng)基III由MS0+0.6％瓊脂+15～20％蔗糖組成，接種好莖段的培養(yǎng)瓶III放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的條件下培養(yǎng)20～30天，即可100％的生根；
本發(fā)明在已知結(jié)瓜的株上選取芽或莖納入組培繁殖體系，則可源源不斷地為生產(chǎn)提供優(yōu)質(zhì)種苗，滿足生產(chǎn)的需求。用本發(fā)明組培吊瓜育苗方法具有繁殖周期短，繁殖系數(shù)高，25～30天為一周期，繁殖系數(shù)3～4倍，周年生產(chǎn)，1個(gè)芽可生產(chǎn)數(shù)萬(wàn)株苗，節(jié)約大量2～3年生的塊根，克服了籽播雌株率低(約30％左右)，幼苗需1年以上待籽播苗結(jié)果才能確定，浪費(fèi)人力、物力、地力，采用組培育苗方法完全可滿足吊瓜苗的規(guī)?；a(chǎn)的要求。因此，本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了優(yōu)質(zhì)高效吊瓜的生產(chǎn)規(guī)?；?。
具體實(shí)施例方式
下面為本發(fā)明采用食用吊瓜組培育苗方法的最佳方式步驟一、外植體的選取在5月份取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖。
步驟二、外植體的處理剪取芽或藤狀莖，去除藤狀莖上的葉片及卷須，切成一葉莖段，先用1％洗潔精液振蕩洗滌8分鐘，再流水沖洗30分鐘，用潔凈干紗布吸干表面水分。在超凈工作臺(tái)內(nèi)，把芽或莖段放入經(jīng)高壓滅菌的廣口瓶?jī)?nèi)，先用70％的酒精浸泡10秒，倒出酒精液，用無(wú)菌水沖洗2遍，再用0.1％的氯化汞溶液振蕩消毒10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗4次，每次不少于4分鐘，倒去無(wú)菌水洗液，用無(wú)菌紗布吸干表面水分，最后剪去接觸藥液的莖段兩端少許，待接種。
步驟三、外植體接種將步驟二得經(jīng)消毒并整理好的芽或莖段，按生物學(xué)極性方向接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi)，每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段。
培養(yǎng)瓶I內(nèi)的培養(yǎng)基I由MS+BA0.3+KT0.1+IAA0.1+0.5％的瓊脂粉+3％的蔗糖組成，用1NNaOH或1N HCl調(diào)pH值6.0，接種好芽或莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25℃、光照2000lx、光照12小時(shí)、黑暗12小時(shí)的環(huán)境中培養(yǎng)30天，可長(zhǎng)成4～5節(jié)帶葉莖蔓。
步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi)，每瓶插單莖段4～6個(gè)。
培養(yǎng)瓶II內(nèi)的培養(yǎng)基II由MS+BA0.3+KT0.2+NAA0.1+0.5％的瓊脂粉+3％的蔗糖組成，用1NNaOH或1N HCl調(diào)pH值6.0，接種好莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照2000lx、光照12小時(shí)、黑暗12小時(shí)的環(huán)境中培養(yǎng)30天，可長(zhǎng)成4～5節(jié)帶葉莖蔓，如此反復(fù)繼代，則小苗按幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，直到達(dá)到目標(biāo)苗數(shù)。
步驟五、生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi)，每瓶插10個(gè)莖段。
培養(yǎng)瓶III內(nèi)的培養(yǎng)基III由MS0+0.6％瓊脂+15％蔗糖組成，接種好莖段的培養(yǎng)瓶III放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的條件下培養(yǎng)20天左右，即可100％的生根。
步驟六、移栽煉苗把步驟五得培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的苗小心取出，沖洗干凈根上瓊脂，移栽在50穴的穴盤(pán)內(nèi)，穴盤(pán)內(nèi)裝有經(jīng)800～1000倍敵克松溶液消毒的基質(zhì)內(nèi)，基質(zhì)由珍珠巖∶蛭石∶草炭土＝1∶1∶1。移栽后淋透1000倍多菌靈，遮光5～7天，濕度保持90％以上，溫度20～25℃。移栽后8～15天，早晚見(jiàn)光，中午遮蔭，噴一次1000倍多菌靈液，保持濕度80～90％，溫度20～25℃。移栽后16～23天，逐漸增加光照直到全日照，保持濕度60～70％，噴一次1000倍多菌靈液+0.3％磷酸二氫鉀液，保持溫度在25℃左右，新白根生根、葉片蠟質(zhì)層形成，逐漸適應(yīng)外界環(huán)境，煉苗即完成，可上缽培養(yǎng)10～15天，即可下田移栽。
權(quán)利要求
1.一種吊瓜組培育苗方法，其特征在于該法包括以下工藝步驟步驟一、外植體的選取在春夏之交取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖為外植體；步驟二、外植體的處理剪取芽或藤狀莖，去除藤狀莖上的葉片及卷須，切成一葉莖段，流水沖洗20～30分鐘，用潔凈干紗布吸干表面水分，在超凈工作臺(tái)內(nèi)，用70％～75％的酒精浸泡10～15秒，倒出酒精液，用無(wú)菌水沖洗1～2遍，再用0.1％的氯化汞溶液振蕩消毒8～10分鐘，再用無(wú)菌水沖洗3～4次，用無(wú)菌紗布吸干表面水分，最后剪去接觸藥液的莖段兩端少許，待接種；步驟三、外植體接種將步驟二得經(jīng)消毒并整理好的芽或莖段，按生物學(xué)極性方向接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi)，每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段，培養(yǎng)瓶I內(nèi)的培養(yǎng)基I由MS+BA0.1～0.5+KT0.01～0.2+IAA0.05～0.2+0.5％的瓊脂粉+2～3％的蔗糖組成，用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8～6.0，接種好芽或莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的培養(yǎng)室，培養(yǎng)25～30天，即可長(zhǎng)成4～5節(jié)帶葉莖蔓；步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓又剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi)，每瓶插單莖段4～6個(gè)，培養(yǎng)瓶II內(nèi)的培養(yǎng)基II由MS+BA0.3～0.5+KT0.2～0.3+NAA0.01～0.1+0.5％的瓊脂粉+2～3％的蔗糖組成，用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8～6.0，接種好莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的條件下培養(yǎng)25～30天，可長(zhǎng)成4～5節(jié)帶葉莖蔓，如此反復(fù)繼代，則小苗按幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，直到達(dá)到目標(biāo)苗數(shù)；步驟五、生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi)，每瓶插10個(gè)莖段，培養(yǎng)瓶III內(nèi)的培養(yǎng)基III由MS0+0.6％瓊脂+15～20％蔗糖組成，接種好莖段的培養(yǎng)瓶III放在溫度25±2℃、光照1500～2500lx、光照10～12小時(shí)、黑暗12～14小時(shí)的條件下培養(yǎng)20～30天，即可生根。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種吊瓜組培育苗方法，包括以下工藝步驟1.外植體的選取在春夏之交取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖為外植體；2.外植體的處理剪取芽或藤狀莖，去除藤狀莖上的葉片及卷須，切成一葉莖段，待接種；3.外植體接種將步驟二得芽或莖段，接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi)，每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段，4.繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓又剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi)，每瓶插單莖段4～6個(gè)；5.生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段，接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi)，每瓶插10個(gè)莖段，培養(yǎng)20～30天，即可生根。本發(fā)明繁殖周期短，繁殖系數(shù)高。
文檔編號(hào)C12N5/04GK1985582SQ200610161470
公開(kāi)日2007年6月27日 申請(qǐng)日期2006年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月18日
發(fā)明者吳有光, 方建民, 劉喚英 申請(qǐng)人:江蘇陽(yáng)光生態(tài)農(nóng)林開(kāi)發(fā)股份有限公司