一種定量加樣的膽固醇檢測芯片的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型屬于檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種定量加樣的膽固醇檢測的芯片。
【背景技術(shù)】
[0002]芯片技術(shù)是將生物或化學(xué)的基本操作單元集成到一塊芯片上完成。因其生物試樣消耗少，分析速度快，費用低等特點，已在醫(yī)藥、化學(xué)及生命科學(xué)等領(lǐng)域得到快速發(fā)展。
[0003]目前傳統(tǒng)芯片材料主要集中在石英、玻璃材料及高分子聚合物等。紙具有生物相容性好、成本低、操作簡單等特點，成為芯片制作的新型材料，將在快速檢測及監(jiān)控等領(lǐng)域具有潛在應(yīng)用價值。
[0004]本實用新型基于紙制芯片，結(jié)合膽固醇氧化酶、膽固醇酯水解酶、辣根過氧化物酶及其底物的顯色體系，提供了一種定量加樣的用于膽固醇檢測的新技術(shù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本實用新型目的是提出了一種能定量加樣的膽固醇檢測芯片。
[0006]本實用新型所采用的技術(shù)方案是:本實用新型的一種定量加樣的膽固醇檢測芯片，包括紙材料片，所述的紙材料片為方形，其特征是:在方形紙材料片上設(shè)置有一個樣品區(qū)、一個空白對照區(qū)和兩個膽固醇檢測區(qū);方形紙材料片的中心有樣品區(qū)，樣品區(qū)與自動微量注射栗連接，通過自動微量注射栗向樣品區(qū)中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)通過樣品流通微通道與樣品區(qū)連通，在方形紙材料片上的兩個膽固醇檢測區(qū)為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個膽固醇檢測區(qū)分別通過樣品流通微通道與樣品區(qū)連通。
[0007]本實用新型的有益效果為:本實用新型基于紙制芯片，結(jié)合膽固醇氧化酶、膽固醇酯水解酶、辣根過氧化物酶及其底物的顯色體系，提供了一種定量加樣的用于膽固醇檢測的新技術(shù)，可用于醫(yī)學(xué)快速診斷、食品安全等領(lǐng)域研究。
【附圖說明】
[0008]圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0009]圖中:I，樣品區(qū)；2，空白對照區(qū)；3，膽固醇檢測區(qū)；4，樣品流通微通道;5，紙材料片;6，自動微量注射栗。
【具體實施方式】
[0010]如圖1所示，本實用新型所述的一種定量加樣的膽固醇檢測芯片，包括紙材料片5，紙材料片為方形，其特征是:在方形紙材料片5上設(shè)置有一個樣品區(qū)1、空白對照區(qū)2和2個膽固醇檢測區(qū)3;方形紙材料片5的中心有樣品區(qū)I，樣品區(qū)I與自動微量注射栗6連接，通過自動微量注射栗6向樣品區(qū)I中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)2通過樣品流通微通道4與樣品區(qū)I連通，在方形紙材料片5上的2個膽固醇檢測區(qū)3為并排設(shè)置，并排設(shè)置的2個膽固醇檢測區(qū)3分別通過樣品流通微通道4與樣品區(qū)I連通;檢測時，通過自動微量注射栗將5yL樣品注入樣品區(qū)，經(jīng)樣品流通微通道4流通至膽固醇檢測區(qū)3，反應(yīng)Smin后，使用掃描儀掃描得到芯片檢測膽固醇的顯色圖像，用Photoshop讀取顯色值。根據(jù)顯色劑顏色的不同，即可測定膽固醇的濃度。
[0011]本實用新型所提供的芯片制作分為以下5個步驟:
[0012](I)利用矢量作圖軟件繪制好所需的芯片微通道構(gòu)型(I，樣品區(qū)；2，空白對照區(qū)；3，膽固醇檢測區(qū)；4，樣品流通微通道;5，紙材料片)；為檢測區(qū)和空白對照區(qū)直徑為3 mm,加樣品區(qū)直徑為4 _，微通道的管道為I _X1 mm。
[0013](2)利用熱蠟打印機(jī)將繪制的芯片微通道構(gòu)型矢量圖，打印到定性濾紙上，得到用于膽固醇檢測的芯片。
[0014](3)膽固醇檢測液的配制:
[0015]I)混合顯色劑為50 mmol/L 4-氨基安替吡啉(4-AAP)，50 mmol/L N-乙基-N_(3_磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽(TOPS)，置于4°C避光保存?zhèn)溆茫弧?br>[0016]2)酶試劑為20 U/mL膽固醇酯水解酶(CEH)、10 U/mL膽固醇氧化酶(COD)，20 U/mL辣根過氧化酶(HRP)置于4°C避光保存?zhèn)溆谩?br>[0017]3)反應(yīng)液體系:4-AAP:TOPS:HRP:COD:CEH按體積5:5:1:1:1混合后，使用自動微量注射栗將IyL注射于膽固醇檢測區(qū)域。待進(jìn)行樣品檢測時膽固醇檢測區(qū)域顯藍(lán)紫色。
[0018](4)通過自動微量注射栗將5yL樣品注入樣品區(qū)，經(jīng)樣品流通微通道4流通至膽固醇檢測區(qū)3，反應(yīng)Smin后，使用掃描儀掃描得到芯片檢測膽固醇的顯色圖像，用Photoshop讀取顯色值。根據(jù)顯色劑顏色的不同，即可測定膽固醇的濃度。
[0019](5)血清樣品中膽固醇的測定:在pH值7.0，將50 mmol/L 4-AAP,50 mmol/L TOPS、20 U/mL HRP、10 U/mL COD、20 U/mLCEH的顯色體系按體積5:5:1:1:1混合后，取I yL顯色體系溶液滴加在膽固醇檢測區(qū);再用自動微量注射栗控制定量加5此血清樣品滴加到樣品區(qū)，經(jīng)微管道到達(dá)膽固醇檢測區(qū)反應(yīng)10 min，顯色后。利用掃描儀掃描得到芯片檢測膽固醇的顯色圖像，再利用Photoshop軟件對檢測區(qū)域顯色進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，根據(jù)實驗得出的標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程即可計算血清樣品中的膽固醇的含量。
【主權(quán)項】
1.一種定量加樣的膽固醇檢測芯片，包括紙材料片(5)，所述的紙材料片為方形，其特征是:在方形紙材料片(5)上設(shè)置有一個樣品區(qū)(1)、一個空白對照區(qū)(2)和兩個膽固醇檢測區(qū)(3);方形紙材料片(5)的中心有樣品區(qū)(1)，樣品區(qū)(I)與自動微量注射栗(6)連接，通過自動微量注射栗(6 )向樣品區(qū)(I)中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)(2 )通過樣品流通微通道(4)與樣品區(qū)(I)連通，在方形紙材料片(5)上的兩個膽固醇檢測區(qū)為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個膽固醇檢測區(qū)(3)分別通過樣品流通微通道(4)與樣品區(qū)連通。
【專利摘要】本實用新型公開<b>一種定量加樣的膽固醇檢測芯片</b>，包括紙材料片，所述的紙材料片為方形，其特征是：在方形紙材料片上設(shè)置有一個樣品區(qū)、一個空白對照區(qū)和兩個膽固醇檢測區(qū)；方形紙材料片的中心有樣品區(qū)，樣品區(qū)與自動微量注射泵連接，通過自動微量注射泵向樣品區(qū)中自動定量注射樣品，空白對照區(qū)通過樣品流通微通道與樣品區(qū)連通，在方形紙材料片上的兩個膽固醇檢測區(qū)為并排設(shè)置，并排設(shè)置的兩個膽固醇檢測區(qū)分別通過樣品流通微通道與樣品區(qū)連通。本實用新型制作簡便，檢測快速，易被推廣使用。
【IPC分類】G01N21/78
【公開號】CN205301178
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】姜煒煒
【申請人】姜煒煒
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2015年11月21日