測定乳制品中磷含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了測定乳制品中磷含量的前處理方法及測定乳制品中磷含量的方法。所述測定乳制品中磷含量的前處理方法包括：將裝有所述乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中進行消解處理，得到消解產(chǎn)物。本發(fā)明的測定乳制品中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳制品中磷含量。
【專利說明】
測定乳制品中磷含量的方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及食品領域。具體地，本發(fā)明涉及測定乳制品中磷含量的方法。更具體 地，本發(fā)明涉及測定乳制品中磷含量的前處理方法及測定乳制品中磷含量的方法。
【背景技術】
[0002] 磷是乳品中的主要營養(yǎng)成分之一，準確快速測定乳制品中磷含量對保證產(chǎn)品質(zhì)量 是非常重要的。
[0003] 然而，目前測定乳制品中磷含量的方法仍有待改進。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術中存在的技術問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的 在于提供一種測定乳制品中磷含量的前處理方法及測定乳制品中磷含量的方法。由此，根 據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法及測定乳制品中磷含量的方法能夠 準確測定乳制品中磷含量。
[0005] 需要說明的是，本發(fā)明是基于發(fā)明人的下列發(fā)現(xiàn)而完成的：
[0006] 目前，通常測定乳及乳制品中磷含量的方法為:在乳制品中添加硝酸-高氯酸并在 電熱板上直接加熱消解，待消解液為3-5ml時冷卻定容，吸取一定體積測定液，通過指示劑 變化調(diào)節(jié)酸堿度，加顯色劑并用分光光度計測定吸光值后計算磷含量。然而，在實際檢測 中，電熱板加熱消解乳制品是在一個較開放的空間內(nèi)消解，容易帶入干擾物質(zhì)，進而影響檢 測結果。而且高氯酸加熱分解產(chǎn)生二氧化氯、氯氣等對環(huán)境產(chǎn)生污染，同時在消解后期實驗 產(chǎn)生的白煙如遇有機物極易產(chǎn)生威力強大的爆炸現(xiàn)象，而且實驗消解耗時長，消解過程極 易將周圍環(huán)境中干擾元素帶入。
[0007] 有鑒于此，本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過大量實驗發(fā)現(xiàn)，將裝有乳制品和酸溶液的微波消 解管在烘箱中進行消解處理，并利用分光光度法對消解產(chǎn)物進行檢測，進而確定乳制品中 磷含量。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法及測定乳制品中磷 含量的方法能夠準確測定乳制品中磷含量。
[0008] 為此，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種測定乳制品中磷含量的前處理方 法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述方法包括:將裝有所述乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘 箱中進行消解處理，得到消解產(chǎn)物。發(fā)明人經(jīng)過大量實驗發(fā)現(xiàn)，將乳制品與酸溶液置于微波 消解管中進行消解反應，為反應提供了一個封閉環(huán)境，防止引入干擾物質(zhì)而影響檢測結果。 此外，發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，將微波消解管置于烘箱中加熱消解，加熱過程中不會產(chǎn)生干擾物 質(zhì)，而將微波消解管置于微波消解儀中進行加熱消解過程中，會產(chǎn)生干擾物質(zhì)，需要向待反 應混合物中加入屏蔽干擾的物質(zhì)，例如氧化鑭。但是，額外引入屏蔽干擾的物質(zhì)會使檢測結 果偏高。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳 制品中的磷含量。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述測定乳制品中磷含量的前處理方法還可以具有下列附 加技術特征：
[0010] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述消解處理是在160攝氏度下進行6~8小時。由此，根據(jù) 本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述酸溶液為硝酸。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品 中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0012] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述微波消解管中裝有所述乳制品、酸溶液及雙氧水。由 此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳制品中的磷 含量。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，基于0.5克所述乳制品，所述硝酸的體積為8毫升，所述雙氧 水的體積為2毫升。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法能夠準確 地測定乳制品中的磷含量。
[0014] 在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種測定乳制品中磷含量的方法。根據(jù)本發(fā) 明的實施例，所述方法包括:利用前面所描述的測定乳制品中磷含量的前處理方法得到消 解產(chǎn)物;將所述消解產(chǎn)物與顯色劑進行反應，得到待測物；以及利用分光光度法對所述待測 物進行檢測，并基于檢測結果確定所述乳制品中磷含量。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳 制品中磷含量的方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0015] 在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明提出了一種測定乳制品中磷含量的方法。根據(jù)本發(fā) 明的實施例，所述方法包括：（1)樣品組:稱取乳制品樣品〇.5g(m)于微波消解管，再加入8ml 硝酸及2ml雙氧水，加蓋后置于160°C恒溫烘箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液；（2)空白組：向微波 消解管中加入8ml硝酸及2ml雙氧水，加蓋后置于160°C恒溫烘箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液； (3)分別吸取 Oml、2.5ml、5. Oml、7.5ml、IOml 和 15ml 磷的標準儲備液（10μg/ml)到 50ml 容量 瓶中，在每個容量瓶中加入IOml釩鉬酸銨試劑，用水定容至刻度，常溫下靜置15分鐘后用 Icm比色皿在440nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以磷的梯度濃度為橫坐標，繪制 標準曲線；（4)分別將樣品組和空白組的消化液進行下列處理:將消化液轉移至容量瓶中并 定容至50ml (V)，吸取IOml (V1)消化液于50ml容量瓶中，加 IOmL釩鉬酸銨試劑，混合均勻，在 25~30攝氏度下顯色15分鐘，加水定容至50mL(V2)，得到待測空白液和待測試樣液；（5)在 440nm波長下，以待測空白液調(diào)零，然后測定待測試樣液的吸光度，從標準曲線上查到吸光 度對應的磷濃度(c)，并按照下列公式計算磷含量，
[0016]
[0017] 式中：
[0018] X--樣品中磷的含量mg/1 OOg; C------從標準曲線中查的試樣溶液中磷的濃度μ g/ml;V-----樣品組消化后定容體積ml J1-----從樣品組消化后定容體積中吸取的體積 ml; V2--測定吸光值時容量瓶體積ml;m-----樣品組質(zhì)量g。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測 定乳制品中磷含量的方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0019] 本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變 得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。
【具體實施方式】
[0020] 下面詳細描述本發(fā)明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā) 明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0021] 本發(fā)明提出了測定乳制品中磷含量的前處理方法及測定乳制品中磷含量的方法， 下面將分別對其進行詳細描述。
[0022]測定乳制品中磷含量的前處理方法
[0023]在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種測定乳制品中磷含量的前處理方法。根 據(jù)本發(fā)明的實施例，該方法包括:將裝有乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中進行消 解處理，得到消解產(chǎn)物。消解處理的目的是使樣品在酸溶液并在加熱條件下破壞樣品中的 有機物或還原性物質(zhì)。發(fā)明人經(jīng)過大量實驗發(fā)現(xiàn)，將乳制品與酸溶液置于微波消解管中進 行消解反應，為反應提供了一個封閉環(huán)境，防止引入干擾物質(zhì)而影響檢測結果。此外，發(fā)明 人意外地發(fā)現(xiàn)，將微波消解管置于烘箱中加熱消解，加熱過程中不會產(chǎn)生干擾物質(zhì)，而將微 波消解管置于微波消解儀中進行加熱消解過程中，會產(chǎn)生干擾物質(zhì)，需要向待反應混合物 中加入屏蔽干擾的物質(zhì)，例如氧化鑭。但是，額外引入屏蔽干擾的物質(zhì)會使檢測結果偏高。 由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳制品中的 磷含量。
[0024]根據(jù)本發(fā)明的實施例，消解處理是在160攝氏度下進行6~8小時。發(fā)明人經(jīng)過大量 實驗優(yōu)化上述最優(yōu)消解處理條件，溫度過低或時間過短，消解處理不充分，導致檢測結果偏 低。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，酸溶液為硝酸。發(fā)明人經(jīng)過大量實驗篩選到以硝酸作為酸 溶液進行消解處理，檢測結果的準確性較高，且較安全。其他酸性溶液不宜使用，例如硫酸 和高氯酸，使用過程容易造成危險。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，微波消解管中裝有乳制品、酸溶液及雙氧水。雙氧水的添加 起到催化劑作用，使消解速度加快，消解時間縮短。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例，微波消 解管中裝有〇. 5~1克乳制品、5~10毫升酸溶液及1~5毫升雙氧水。發(fā)明人經(jīng)過大量實驗優(yōu) 化得到上述最優(yōu)添加量。由于反應是在密閉環(huán)境下進行的，若乳制品的添加量過多，反應產(chǎn) 生的氣體越多，壓力較大。若反應很激烈，較快地產(chǎn)生氣體，使壓力瞬間增大，就有引起爆炸 的危險。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明的一個更優(yōu)選實施例，基于0.5克乳制品，硝酸的體積為8毫升，雙氧水 的體積為2毫升。發(fā)明人經(jīng)過大量實驗優(yōu)化得到上述最優(yōu)添加量之比。若硝酸和雙氧水的添 加量過多，無過多的樣品與之反應，造成了試劑的浪費。若硝酸和雙氧水的添加量過少，將 導致部分樣品無法完成消解，進而導致檢測結果偏低。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制 品中磷含量的前處理方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0028]測定乳制品中磷含量的方法
[0029]在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種測定乳制品中磷含量的方法。根據(jù)本發(fā) 明的實施例，該方法包括:利用前面所描述的測定乳制品中磷含量的前處理方法得到消解 產(chǎn)物;將消解產(chǎn)物與顯色劑進行反應，得到待測物；以及利用分光光度法對待測物進行檢 測，并基于檢測結果確定乳制品中磷含量。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測定乳制品中磷含量 的方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0030] 本領域技術人員能夠理解的是，前面針對測定乳制品中磷含量的前處理方法所描 述的特征和優(yōu)點同樣適用于該測定乳制品中磷含量的方法，在此不再贅述。
[0031] 另外，本發(fā)明提出了另一種測定乳制品中磷含量的方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該 方法包括：（1)樣品組:稱取乳制品樣品〇.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml雙氧 水，加蓋后置于160°C恒溫烘箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液；（2)空白組：向微波消解管中加入 8ml硝酸及2ml雙氧水，加蓋后置于160°C恒溫烘箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液；（3)分別吸取 Oml、2.5ml、5.Oml、7.5ml、IOml和15ml磷的標準儲備液（10μg/ml)到50ml容量瓶中，在每個 容量瓶中加入IOml釩鉬酸銨試劑，用水定容至刻度，常溫下靜置15分鐘后用Icm比色皿在 440nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以磷的梯度濃度為橫坐標，繪制標準曲線； (4)分別將樣品組和空白組的消化液進行下列處理：將消化液轉移至容量瓶中并定容至 50ml (V)，吸取IOml (V1)消化液于50ml容量瓶中，加 IOmL釩鉬酸銨試劑，混合均勻，在25~30 攝氏度下顯色15分鐘，加水定容至50mL(V2)，得到待測空白液和待測試樣液；（5)在440nm波 長下，以待測空白液調(diào)零，然后測定待測試樣液的吸光度，從標準曲線上查到吸光度對應的 磷濃度(c)，并按照下列公式計算磷含量，
[0032]
[0033] 式中：
[0034] X--樣品中磷的含量mg/1 OOg; C------從標準曲線中查的試樣溶液中磷的濃度μ g/ml;V-----樣品組消化后定容體積ml J1-----從樣品組消化后定容體積中吸取的體積 ml; V2--測定吸光值時容量瓶體積ml;m-----樣品組質(zhì)量g。由此，根據(jù)本發(fā)明實施例的測 定乳制品中磷含量的方法能夠準確地測定乳制品中的磷含量。
[0035]下面將結合實施例對本發(fā)明的方案進行解釋。本領域技術人員將會理解，下面的 實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術或條 件的，按照本領域內(nèi)的文獻所描述的技術或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀 器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0036]釩鉬酸銨試劑：
[0037] A液：25g鉬酸銨[(NH4)6M07024 · 4H20)]，溶于400mL水中。
[0038] B液：1.25g偏釩酸銨(NH4VO3)溶于300mL沸水中，冷卻后加250mL硝酸，將A液緩緩傾 入B液中，不斷攪勻，并用水稀釋至1L，貯于棕色瓶中。
[0039] 實施例1
[0040] 在該實施例中，按照下列方法測定乳制品中磷含量：
[0041] (1)樣品組:稱取乳樣〇.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml雙氧水，加蓋后 置于160°C恒溫烘箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液；
[0042] (2)空白組：向微波消解管中加入8ml硝酸及2ml雙氧水，加蓋后置于160°C恒溫烘 箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液；
[0043] (3)分別吸取 Oml、2 · 5ml、5 · Oml、7 · 5ml、IOml 和 15ml 磷的標準儲備液（lOμg/ml)到 50ml容量瓶中，在每個容量瓶中加入IOml釩鉬酸銨試劑，用水定容至刻度，常溫下靜置15分 鐘后用Icm比色皿在440nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以磷的梯度濃度為橫坐 標，繪制標準曲線；
[0044] (4)分別將樣品組和空白組的消化液進行下列處理：
[0045] 將消化液轉移至容量瓶中并定容至50ml (V )，吸取I Oml (V1)消化液于50ml容量瓶 中，加 IOmL釩鉬酸銨試劑，混合均勻，在25~30攝氏度下顯色15分鐘，加水定容至50mL(V2)， 得到待測空白液和待測試樣液；
[0046] (5)在440nm波長下，以待測空白液調(diào)零。然后測定待測試樣液的吸光度，從標準曲 線上查到吸光度對應的磷濃度(c)，并按照下列公式計算磷含量，
[0047]
[0048] 式中：
[0049] X--樣品中磷的含量mg/100g;
[0050] C------從標準曲線中查的試樣溶液中磷的濃度μg/ml;
[00511 V-----樣品組消化后定容體積ml;
[0052] Vi--從樣品組消化后定容體積中吸取的體積ml;
[0053] V2--測定吸光值時容量瓶體積ml;
[0054] m-----樣品組質(zhì)量g。
[0055] 對比例1
[0056] 在該對比例中，按照國標GB5413.22-2010的方法測定乳制品中磷含量，檢測結果 如表1所示。
[0057]表1國標方法和本發(fā)明測定磷含量的方法比較

[0060]國標中要求在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術 平均值的5%，實施例1與對比例1的方法測得結果相對偏差均在國標要求范圍內(nèi)，但是實施 例1的測定結果均高于對比例1的測定值，原因主要是國標測定時消解是在開放的條件下進 行，測定元素會隨消解蒸汽揮發(fā)損失一部分，從而導致檢測結果偏低。
[0061 ] 對比例2
[0062]在該對比例中，按照實施例1的方法測定乳制品中磷含量，區(qū)別在于，將烘箱替換 成微波消解儀，即將待消解物在微波消解儀中進行消解反應。
[0063]表2測定磷含量的方法比較
[0065]由上表比對可知，實施例2與對比例2的方法測得結果相對偏差有超出國標要求范 圍內(nèi)，實施例2測定結果均高于對比例2測定結果。
[0066] 實施例2可重復性
[0067] 按照實施例1的方法測定不同乳制品及各乳制品的平行樣進行檢測，結果如下表 所示。可以看出，平行樣之間的相對偏差在國標要求范圍內(nèi)，可重復性較好。
[0068] 表2可重復性檢測
[0070] 實施例3
[0071 ]在該實施中，按照下列方法測定回收率：
[0072] (1)將乳制品與磷標準品溶液進行混合，得到加標樣品；
[0073] (2)分別測定加標樣品及乳制品中的磷含量，并按照公式（回收率％ =(加標樣品 中磷含量-乳制品中磷含量）X稱樣量/(磷標準品溶液中磷含量X磷標準品溶液體積））計 算得到回收率。
[0074] 依據(jù)GB/T27404-2008中被測組分含量> 100mg/kg時回收率范圍95 %-105%，由下 表可知，本發(fā)明的方法測得回收率均在國標要求范圍內(nèi)。
[0075] 表3回收率
[0078]在本說明書的描述中，參考術語"一個實施例"、"一些實施例"、"示例"、"具體示 例"、或"一些示例"等的描述意指結合該實施例或示例描述的具體特征、結構、材料或者特 點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術語的示意性表述不 必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結構、材料或者特點可以在任 一個或多個實施例或示例中以合適的方式結合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領域的技 術人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結 合和組合。
[0079] 盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例 性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領域的普通技術人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述 實施例進行變化、修改、替換和變型。
【主權項】
1. 一種測定乳制品中磷含量的方法，其特征在于，包括： (1) 樣品組:稱取乳制品樣品〇.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml雙氧水，加蓋 后置于160°C恒溫烘箱內(nèi)，保溫6h，得到消化液； (2) 空白組：向微波消解管中加入8ml硝酸及2ml雙氧水，加蓋后置于160°C恒溫烘箱內(nèi)， 保溫6h，得到消化液； (3) 分別吸取Oml、2 · 5ml、5 ·Oml、7 · 5ml、IOml和15ml磷的標準儲備液（10μg/ml)到50ml 容量瓶中，在每個容量瓶中加入IOml釩鉬酸銨試劑，用水定容至刻度，常溫下靜置15分鐘后 用Icm比色皿在440nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以磷的梯度濃度為橫坐標，繪 制標準曲線； (4) 分別將樣品組和空白組的消化液進行下列處理： 將消化液轉移至容量瓶中并定容至50ml (V)，吸取IOml (V1)消化液于50ml容量瓶中，加 IOmL釩鉬酸銨試劑，混合均勻，在25~30攝氏度下顯色15分鐘，加水定容至50mL(V2)，得到 待測空白液和待測試樣液； (5) 在440nm波長下，以待測空白液調(diào)零，然后測定待測試樣液的吸光度，從標準曲線上 查到吸光度對應的磷濃度(c)，并按照下列公式計筧磷含量，式中： X----樣品中磷的含量mg/1 OOg; C------從標準曲線中查的試樣溶液中磷的濃度μg/ml; V--樣品組消化后定容體積ml; Vi--從樣品組消化后定容體積中吸取的體積ml; V2--測定吸光值時容量瓶體積ml; m-----樣品組質(zhì)量g。2. -種測定乳制品中磷含量的前處理方法，其特征在于，包括： 將裝有所述乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中進行消解處理，得到消解產(chǎn)物。3. 根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述消解處理是在160攝氏度下進行6~8 小時。4. 根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述酸溶液為硝酸。5. 根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于， 所述微波消解管中裝有所述乳制品、酸溶液及雙氧水， 優(yōu)選地， 所述微波消解管中裝有0.5~1克所述乳制品、5~10毫升所述酸溶液及1~5毫升所述 雙氧水， 更優(yōu)選地， 基于〇. 5克所述乳制品，所述硝酸的體積為8毫升，所述雙氧水的體積為2毫升。6. -種測定乳制品中磷含量的方法，其特征在于，包括： 利用權利要求2~5任一項所述測定乳制品中磷含量的前處理方法得到消解產(chǎn)物； 將所述消解產(chǎn)物與顯色劑進行反應，得到待測物；以及 利用分光光度法對所述待測物進行檢測，并基于檢測結果確定所述乳制品中磷含量。
【文檔編號】G01N1/44GK105891133SQ201610219213
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年4月8日
【發(fā)明人】胡彩霞, 李秋琴, 王佳, 馬文麗, 劉美霞, 吳騰
【申請人】內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團）股份有限公司