果蔬中農(nóng)藥殘留的拉曼光譜檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 1874年歐特馬?勤德勒首次合成DDT，1939年瑞士化學(xué)家米勒（Paul Hermann MUller)發(fā)現(xiàn)了 DDT強(qiáng)大的殺蟲(chóng)劑功效，使農(nóng)藥從天然藥物與無(wú)機(jī)合成農(nóng)藥并存的時(shí)代直 接過(guò)渡到了有機(jī)農(nóng)藥合成時(shí)代。當(dāng)農(nóng)藥在保障蔬菜增收，糧食豐產(chǎn)的時(shí)候，帶來(lái)的問(wèn)題也逐 漸顯露，1962年農(nóng)藥殘留的概念被首次提出。1970年美國(guó)成立國(guó)家環(huán)保局（USEPA)開(kāi)始對(duì) 包括農(nóng)藥殘留在內(nèi)的全部環(huán)境進(jìn)行檢測(cè)。目前全世界化學(xué)合成的農(nóng)藥約有1.4萬(wàn)多種，常 用的有80種左右，20世紀(jì)70年代以來(lái)，伴隨著氣相和液相色譜的發(fā)展，農(nóng)藥殘留分析技術(shù) 不斷成熟，農(nóng)藥殘留開(kāi)始被人們關(guān)注。
[0003]經(jīng)過(guò)半個(gè)多世紀(jì)的研宄和演變，農(nóng)藥殘留分析技術(shù)日趨多樣化、便捷化、低成本化 和快速化。目前研宄中的檢測(cè)技術(shù)多達(dá)幾十種，檢測(cè)原理遍及各個(gè)學(xué)科。依據(jù)我國(guó)的蔬菜 種植和銷(xiāo)售狀態(tài)，我國(guó)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)體系主要分為田間地頭、市場(chǎng)和實(shí)驗(yàn)室三步檢測(cè)。不 同農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法適用于不同的步驟。試紙法和傳感器法被廣泛應(yīng)用于田間地頭的檢 測(cè)，酶抑制法和光譜技術(shù)等適用于市場(chǎng)的檢測(cè)，而條件較好的實(shí)驗(yàn)室則常用氣相色譜法、液 相色譜法、高效毛細(xì)管電泳技術(shù)、薄層色譜技術(shù)、色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等。
[0004] 上述農(nóng)藥殘留量檢測(cè)方法主要是生物、化學(xué)檢測(cè)方法，檢測(cè)時(shí)為了克服樣品組成 成分的復(fù)雜性，便于檢測(cè)和得到準(zhǔn)確可靠的檢測(cè)結(jié)果，需要采用特殊的樣品制備方法，如 常用的提取和凈化方法：索氏抽提法、浸漬-振蕩法、超聲波提取法、凈化技術(shù)、凝膠色譜 (GPC)凈化、固相萃取、基體分散固相萃?。∕SPD)、加速溶劑萃?。ˋSE)、超臨界萃取（SFE)、 固相萃?。⊿PE)凈化、固相微萃?。⊿PME)等。
[0005] 雖然上述農(nóng)殘檢測(cè)及樣品前處理方法對(duì)于檢測(cè)結(jié)果有突出的貢獻(xiàn)，但是，其操作 的高復(fù)雜性和高成本等特點(diǎn)限制了現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的應(yīng)用，并且，基于生物化學(xué)原理的檢測(cè)方法 耗時(shí)長(zhǎng)，結(jié)果的等待周期長(zhǎng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法， 本發(fā)明提供的檢測(cè)方法可以對(duì)果蔬中農(nóng)藥殘留進(jìn)行快速、無(wú)污染的檢測(cè)，無(wú)需復(fù)雜的樣品 制備。
[0007]本發(fā)明提供了一種果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，包括以下步驟：
[0008] a)對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行拉曼光譜檢測(cè)，得到待測(cè)樣品的拉曼光譜；
[0009]b)將所述步驟a)得到的拉曼光譜進(jìn)行一階導(dǎo)數(shù)處理，得到待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù) 譜圖；
[0010] C)將所述步驟b)得到的待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù)譜圖采用判別分析或距離匹配方法 建立定性模型；
[0011] d)將所述步驟b)得到的待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù)譜圖結(jié)合預(yù)設(shè)的定量模型真值，并 采用CLS、SMLR、PLS或PCR方法建立定量模型，得到樣品中各組分的含量。
[0012] 優(yōu)選的，所述步驟a)中拉曼光譜掃描為面掃描。
[0013] 優(yōu)選的，所述步驟a)中拉曼光譜參數(shù)為：激光波長(zhǎng)780nm，激光能量24,光柵 4001ines/mm，光闌50,估計(jì)分辨率4. 7~8. 7/cm，采集曝光時(shí)間3s，曝光次數(shù)3,背景曝光 次數(shù)512。
[0014] 優(yōu)選的，所述步驟a)之后、步驟b)之前還包括對(duì)步驟a)中拉曼光譜檢測(cè)得到的 譜圖進(jìn)行提取特征峰。
[0015] 優(yōu)選的，所述提取特征峰的方法選自基線校正、平滑處理和選取特定波段標(biāo)峰處 理中的一種或幾種。
[0016] 優(yōu)選的，所述提取特征峰的波段為100~SOOOcnT1。
[0017] 優(yōu)選的，所述步驟a)中拉曼光譜的增強(qiáng)方式為銀納米溶膠、金納米溶膠。
[0018] 優(yōu)選的，所述預(yù)設(shè)的定量模型真值按照以下方法獲得：
[0019] 將樣品進(jìn)行前處理，得到待測(cè)液；
[0020] 將待測(cè)液采用氣相色譜檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)，得到檢測(cè)結(jié)果作為真值；所述氣相色 譜檢測(cè)條件為：
[0021] 柱溫：程序升溫60°C保持lmin，以30°C /min上升到210°C，保持lOmin，再以 10°C/min升到240°C，保持6min，共25min;檢測(cè)器溫度為260°C，進(jìn)樣口溫度為250°C，不 分流；載氣為氮?dú)猓兌?91999%)，流量12ml/min，氫氣流量60ml/min，空氣流量450ml/ min〇
[0022] 優(yōu)選的，所述前處理方法具體為：樣品和乙腈混合震蕩，得到提取液；提取液與無(wú) 水硫酸鎂、氯化鈉混合震蕩、離心得到清液和沉淀；取清液與C18、PSA混合離心、過(guò)膜得到 待測(cè)液。
[0023] 優(yōu)選的，所述建立定性模型選取的波段為500~1500CHT1。
[0024] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，包括以下步驟： a)對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行拉曼光譜檢測(cè)，得到待測(cè)樣品的拉曼光譜；b)將所述步驟a)得到的拉曼 光譜進(jìn)行一階導(dǎo)數(shù)處理，得到待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù)譜圖；c)將所述步驟b)得到的待測(cè)樣品 的一階導(dǎo)數(shù)譜圖采用判別分析或距離匹配方法建立定性模型；d)將所述步驟b)得到的待 測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù)譜圖結(jié)合預(yù)設(shè)的定量模型真值，并采用CLS、SMLR、PLS或PCR方法建立定 量模型，得到樣品中各組分的含量。通過(guò)本發(fā)明所述的農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法建立了定性和 定量模型，可以準(zhǔn)確的區(qū)別農(nóng)藥，正確率為100%，并且適用于定性分析果蔬中含有何種農(nóng) 藥。本發(fā)明建立的定性和定量模型擬合效果好，適用于果蔬制品的快速無(wú)損檢測(cè)。并且本 發(fā)明采用預(yù)設(shè)的定量模型真值使得結(jié)果準(zhǔn)確性更高。
【附圖說(shuō)明】
[0025] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例4制備得到的面掃描拉曼成像圖；
[0026] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例4制備得到的拉曼光譜圖；
[0027] 圖3為基線校正后的光譜圖與原圖對(duì)比圖；
[0028] 圖4是將基線校正過(guò)的光譜圖進(jìn)行1-5次平滑處理后的光譜圖；
[0029] 圖5為本發(fā)明實(shí)施例4制備得到的拉曼光譜圖提取特征峰圖；
[0030] 圖6為本發(fā)明實(shí)施例8采用判別分析的方法建立的定性模型；
[0031] 圖7為本發(fā)明實(shí)施例9采用距離匹配的方法建立的定性模型；
[0032]圖8為馬拉硫磷定量分析模型擬合曲線圖；
[0033]圖9為馬拉硫磷定量分析模型真值-擬合值殘差圖；
[0034] 圖10為二嗪農(nóng)定量分析模型擬合曲線圖；
[0035]圖11為二嗪農(nóng)定量分析模型真值-擬合值殘差圖。
【具體實(shí)施方式】
[0036] 本發(fā)明提供了一種果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，包括以下步驟：
[0037] a)對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行拉曼光譜檢測(cè)，得到待測(cè)樣品的拉曼光譜；
[0038] b)將所述步驟a)得到的拉曼光譜進(jìn)行一階導(dǎo)數(shù)處理，得到待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù) 譜圖；
[0039] c)將所述步驟b)得到的待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù)譜圖采用判別分析或距離匹配方法 建立定性模型；
[0040] d)將所述步驟b)得到的待測(cè)樣品的一階導(dǎo)數(shù)譜圖結(jié)合預(yù)設(shè)的定量模型真值，并 采用CLS、SMLR、PLS或PCR方法建立定量模型，得到樣品中各組分的含量。
[0041] 在本發(fā)明中，首先對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)，得到待測(cè)樣品的拉曼 光譜。
[0042] 首先是待測(cè)樣品的配制。在本發(fā)明中，可以根據(jù)國(guó)標(biāo)的農(nóng)藥殘留量限值配制相應(yīng) 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品的濃度范圍，如二嗪農(nóng)標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度在〇. 02~3. 29mg/kg，馬拉硫磷標(biāo) 準(zhǔn)品質(zhì)量濃度為〇? 1~15. 3mg/kg。
[0043] 待測(cè)蔬果取汁液，置于冷藏室避光保存，使用前20±3°C平衡。
[0044] 本發(fā)明對(duì)于所述標(biāo)準(zhǔn)品的來(lái)源不進(jìn)行限定，優(yōu)選可以購(gòu)自中國(guó)計(jì)量科學(xué)研宄院標(biāo) 準(zhǔn)物質(zhì)所。
[0045] 本發(fā)明對(duì)于所述儀器不進(jìn)行限定，優(yōu)選可以為T(mén)hermo Fisher公司生產(chǎn)的DXR激 光共焦