本發(fā)明涉及一種適用于棉花中4種有機氯農(nóng)藥殘留的檢測方法。技術(shù)背景棉花是世界上最主要的農(nóng)作物之一，棉花纖維是目前紡織工業(yè)用量最大的纖維品種，在棉花種植和收獲過程中大規(guī)模地使用農(nóng)藥，給紡織品的原材料-棉花纖維造成了巨大的安全隱患。隨著全球經(jīng)濟發(fā)展和社會的進步，人們對于生活質(zhì)量有了更高的要求，世界各地普遍掀起了“生態(tài)紡織品”的熱潮。由于農(nóng)藥的使用，使我國生產(chǎn)的部分棉花的品質(zhì)不能達到進口國的要求，綠色貿(mào)易壁壘已成為中國紡織品出口的主要障礙，這不僅影響中國出口產(chǎn)品在國際市場的聲譽，而且?guī)砹藝乐氐慕?jīng)濟損失。有機氯農(nóng)藥是用于防治植物病蟲害的有機化合物，在棉花種植過程中被廣泛使用，屬于神經(jīng)毒物和實質(zhì)臟器毒物，可致癌。有機氯農(nóng)藥具有揮發(fā)性低，化學性質(zhì)穩(wěn)定，易溶于有機溶劑和脂肪等特點，極易殘留在棉花纖維當中，給紡織品安全造成了極大隱患。許多發(fā)達國家對棉紡織品中農(nóng)藥殘留提出了嚴格的要求，生態(tài)紡織品標準oeko-texstandard100中羅列了多種禁用農(nóng)藥，包括碳氯靈(telodrin)、異艾氏劑(isodrin)、乙滴涕(perthane)、十氯酮(kepone)。目前在紡織領(lǐng)域，有機氯農(nóng)藥殘留的檢測對象多集中于紡織品，專門針對紡織品原材料一棉花纖維的報道不多，且并沒有上述4種有機氯農(nóng)藥同時檢測的報道，因此，建立棉花纖維中碳氯靈、異艾氏劑、乙滴涕、十氯酮的殘留檢測方法很有意義。傳統(tǒng)的農(nóng)藥殘留前處理方法費時費力，且十分昂貴。本發(fā)明對quechers方法進行了改良，即采用丙酮-正已烷提取，psa和c18粉末凈化，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(gc-ms)，用于棉花纖維中碳氯靈、異艾氏劑、乙滴涕、十氯酮殘留的定量檢測。技術(shù)實現(xiàn)要素：1.本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡便，準確，靈敏度高的適用于棉花中4種有機氯農(nóng)藥殘留的檢測方法，其特征在于包括以下步驟：1)制備待測樣品溶液：稱取棉花樣品1g，精確至0.01g，置于250ml具塞錐形瓶中，以丙酮-正已烷(1+9，v/v)作為提取劑；所述丙酮-正已烷的體積比為1∶9。2)提取凈化步驟：震蕩提取2min，超聲提取30min。將提取液過濾收集，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約10ml，后將其轉(zhuǎn)入預先加入psa和c18(50mg·ml-1)粉末的離心管中，渦旋混勻5min。離心3min，吸出上清液。所述離心為3500轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心；所述待測樣品與提取劑的料液比為1g/100ml。3)將上清液繼續(xù)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，丙酮定容至2ml，供gc-ms測定。2.制備標準溶液1)用正已烷分別將4種有機氯農(nóng)藥標準品分別溶解，配制成濃度為10μgml-1的標準儲配液。2)所述4種有機氯農(nóng)藥為：碳氯靈、異艾氏劑、乙滴涕、十氯酮，見表1。用丙酮將4種有機氯農(nóng)藥標準物質(zhì)溶解，配制成質(zhì)量濃度為2μg·ml-1的混合標準使用液。表1農(nóng)藥化學信息表3)基質(zhì)標準工作溶液的制備：精確稱取1g空白棉花樣本，按照前處理的流程制備，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干后用丙酮復溶至10ml，后將混合標準溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.05～1μg·ml-1的梯度基質(zhì)標準工作溶液。4)將基質(zhì)混合標準工作溶液注入氣相色譜-質(zhì)譜儀，采用全掃描的方式在m/z40～500范圍內(nèi)分析4種農(nóng)藥的混合標準溶液，然后根據(jù)各農(nóng)藥的相對保留時間質(zhì)譜圖，確定其在選擇離子監(jiān)測(sim)模式下的保留時間和監(jiān)測離子。5)將梯度基質(zhì)標準工作液注入gc-ms，選擇離子監(jiān)測(sim)模式下測定，記錄定量離子對的峰面積，以濃度作為橫坐標，峰面積為縱坐標，制作標準曲線方程。6)gc-ms檢測條件：色譜柱agilentdb-5ms，30m×0.25mm×0.25μm；載氣氦氣(純度＞99.999％，柱流速1.0ml·min-1)，離子源溫度240℃，電離能量70ev，四級桿溫度150℃，gc-ms接口溫度280℃，離子化方式e1，采集方式sim，柱升溫程序：初始溫度60℃，保溫1min后以20℃·min-1升至220℃，保溫1min；再以5℃·min-1升至280℃，保溫10min；4種有機氯農(nóng)藥的目標及定量離子如表2。表24種有機氯農(nóng)藥的目標離子與定量離子附圖說明下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實施方式作進一步說明。圖1(見說明書附圖)是4種有機氯農(nóng)藥的gc-ms選擇性離子色譜圖(農(nóng)藥混合標準的選擇性離子流圖)。1.碳氯靈2.異艾氏劑3.乙滴涕4.十氯酮。具體實施方式以下結(jié)合實施例和對比例對本發(fā)明進行闡述，然而本發(fā)明的保護范圍并非僅僅局限于以下實施例。所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員依據(jù)本發(fā)明的公開的內(nèi)容，均可實現(xiàn)本發(fā)明的結(jié)果。1.試劑和材料除非另有說明，在分析中所用的試劑均為hplc級，所有水均為一級水。1.1正已烷：hplc級。1.2丙酮：hplc級。注：所有溶劑均用0.45μm濾膜過濾。1.3標準物質(zhì)：碳氯靈、異艾氏劑、乙滴涕、十氯酮(見表1)。1.4標準儲備溶液：用正已烷分別將4種有機氯農(nóng)藥標準品分別溶解，配制成濃度為10μg·ml-1的標準儲配液。1.5工作溶液1.5.1混合標準使用液：用丙酮將4種有機氯農(nóng)藥標準物質(zhì)溶解，配制成質(zhì)量濃度為2μg·ml-1的混合標準使用液。1.5.2基質(zhì)標準工作溶液的：精確稱取1g空白棉花樣本，按照前處理的流程制備，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干后用丙酮復溶至10ml，后將混合標準溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.05～1μg·ml-1的梯度基質(zhì)標準工作溶液。2.設備和儀器2.1agilent6890n/59731氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。2.2超聲波發(fā)生器。2.3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。2.4渦旋混合儀：高速離心機。3.制備樣品待測溶液3.1制備待測樣品溶液：稱取棉花樣品1g，精確至001g，置于250ml具塞錐形瓶中，以丙酮-正已烷(1+9，v/v)作為提取劑；所述丙酮-正已烷的體積比為1∶9。3.2提取凈化步驟：震蕩提取2min，超聲提取30min。將提取液過濾收集，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約10ml，后將其轉(zhuǎn)入預先加入psa和c18(50mg·ml-1)粉末的離心管中，渦旋混勻5min。離心3min，吸出上清液。所述離心為3500轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心。上述待測樣品與提取劑的料液比為1g/100ml。3.3將上清液繼續(xù)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，丙酮定容至2ml，供gc-ms測定。4.制備標準溶液4.1標準儲備液：用正已烷分別將4種有機氯農(nóng)藥標準品分別溶解，配制成濃度為10μg·ml-1的標準儲配液。4.2混合標準使用液：用丙酮將4種有機氯農(nóng)藥標準物質(zhì)溶解，配制成質(zhì)量濃度為2μg·ml-1的混合標準使用液。4.3基質(zhì)標準工作溶液的：精確稱取1g空白棉花樣本，按照前處理的流程制備，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干后用丙酮復溶至10ml，后將混合標準溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.05～1μg·ml-1的梯度基質(zhì)標準工作溶液。5.將基質(zhì)混合標準工作溶液注入氣相色譜-質(zhì)譜儀，采用全掃描的方式在m/z40～500范圍內(nèi)分析4種農(nóng)藥的混合標準溶液，然后根據(jù)各農(nóng)藥的相對保留時間質(zhì)譜圖，確定其在選擇離子監(jiān)測(sim)模式下的保留時間和監(jiān)測離子。6.將梯度基質(zhì)標準工作液注入gc-ms，選擇離子監(jiān)測(sim)模式下測定，記錄定量離子對的峰面積，以濃度作為橫坐標，峰面積為縱坐標，制作標準曲線方程。gc-ms檢測條件具體如下：a.色譜柱agilentdb-5ms，30m×0.25mm×0.25μm；b.載氣氦氣(純度＞99.999％，柱流速1.0ml·min-1)；c.離子源溫度240℃；d.電離能量70ev；e四級桿溫度150℃；f.gc-ms接口溫度280℃；g.離子化方式e1；h.采集方式sim；i.柱升溫程序：初始溫度60℃，保溫1min后以20℃·min-1升至220℃，保溫1min；再以5℃·min-1升至280℃，保溫10min。7.本發(fā)明公開的gc-ms法在濃度為0.05、0.1、0.25、0.5、0.8、1μg·ml-1時，線性關(guān)系良好，見表3.。表34種有機氯農(nóng)藥的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和定量限注：上表中x代表濃度(μg/ml)，y代表峰面積。8.定性分析8.1在相同試驗條件下，樣品中待測物與同時檢測的標準物質(zhì)具有相同的保留時間，且樣品定性離子的相對豐度與濃度接近的標準溶液譜圖中對應的定性離子的相對豐度進行比較，若偏差不超過表4規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在對應的待測物。表4定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度，％＞50＞20～50＞10～20≤10允許的最大偏差，％±20±25±30±509.定量分析本方法采用外標法定量，根據(jù)樣液中被測物質(zhì)含量情況，選定濃度相近的標準工作溶液，對標準工作溶腋與樣液等體積參插進樣測定。注1：如果樣液的檢測響應值超出儀器檢測的線性范圍，可適當稀釋后測定。注2：在上述色譜條件下，4種有機氯農(nóng)藥的gc-ms的總離子流色譜圖參見圖110.檢測低限以3倍信噪比(s/n＝3)確定最低檢出濃度，本方法對適用于棉花4種有機氯農(nóng)藥殘留同時測定，測定線見表3。11.樣品添加回收率實驗及精密度實驗分別在空白棉試樣中加入4種有機氯農(nóng)藥的混合標準溶液，添加濃度分別為0.5mg·kg-1，1.5mg·kg-1，每個濃度設置6個重復，按上述前處理和分析方法，測定農(nóng)藥在棉花試樣中的添加回收率，見表3。12.實際樣品檢測將實驗室隨機抽取的幾份棉花樣品，按上述操作步驟，進行提取、濃縮、定容，每個樣品平行6次，用gc-ms進行測定，得到的樣品測定結(jié)果見表5。表5實際樣品測定結(jié)果從的結(jié)果可以看出，使用本發(fā)明方法對隨機抽取的棉花樣品進行檢測，4種有機氯農(nóng)藥均未檢出，表明本方法具有較強的實用性和準確性。最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個具體實施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導出或聯(lián)想到的所有變形，均應認為是本發(fā)明的保護范圍。當前第1頁12