專利名稱：一種快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥材判斷方法，尤其涉及一種快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法。
背景技術(shù)：
川西猜芽菜(5keiiiia mussotii /7TaflcA)為龍膽科猜芽菜屬植物,為藏藥特有藥材，收載于中華人民共和國衛(wèi)生部《藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥第一部》(1992年版第六頁)，其性味為甘、苦、涼、糙。功能主治為清肝利膽、退諸熱。用于黃疸型肝炎，病毒性肝炎，血病。青海藥品標(biāo)準(zhǔn)(1992年版，第17頁)的藏茵陳中收載了川西獐芽菜和抱莖獐芽菜Franchetiana其性味為苦、寒。功能主治為清熱消炎，舒肝利膽。用于急性或慢性肝炎、黃疸型肝炎。而中國藏藥中記載的藏藥藥材一猜芽菜(藏語蒂達(dá))其正品為川西猜芽菜和當(dāng)藥diluta (Turcz. )Benth et Hook. f. (S. chinensis Franch. ) ) 單方與組方藥物入藥，主要用于肝、膽系統(tǒng)疾病的治療。我國衛(wèi)生部部頒的藏藥標(biāo)準(zhǔn)成方制劑中，收載的治療肝膽系統(tǒng)疾病及抗病毒藥品中所用的獐芽菜應(yīng)為川西獐芽菜，主產(chǎn)青海玉樹和川西北。但由于川西獐芽菜和抱莖獐芽菜兩種藥材的生物學(xué)特征極為相近，尤其是干燥藥材，其形態(tài)幾乎無法分辨，其藥品標(biāo)準(zhǔn)不能有效鑒定和區(qū)別兩種藥材的差異，尤其是缺乏對干燥原料藥材形態(tài)區(qū)別，造成入藥藥材的混淆。由于兩種藥材的功能和性味有一定差異，因此造成藥品療效不穩(wěn)定，民間用藥不對癥的情況。因此，本發(fā)明的目的旨在建立一種快速、專屬的識別兩種藥材的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種保證用藥正確性的快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法。 為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法，包括以下步驟
⑴精密吸取O. 232mg/ml的獐牙菜苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、20. 0μ 1，然后分別進(jìn)樣，采用高效液相色譜儀以甲醇-O. 02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按獐牙菜苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行分析，并測定積分峰面積，最后以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，獐牙菜苦苷含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算得到獐牙菜苦苷的回歸方程Y=96470. 4χ +226293. 15，r=0. 9998 ；
⑵精密吸取O. 61mg/ml的龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、20. O μ 1，然后分別進(jìn)樣，采用高效液相色譜儀以甲醇-O. 02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按龍膽苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行分析，并測定積分峰面積，最后以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，龍膽苦苷含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并分別計算得到龍膽苦苷的回歸方程Y= —294961. 8x + 2003098. 5，r=0. 9992 ；
(3)按常規(guī)方法分別對獐牙菜苦苷、龍膽苦苷的回歸方程依次進(jìn)行精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、重現(xiàn)性試驗、回收率試驗以驗證該回歸方程的可行性；
⑷采集獐牙菜樣品將采集或收購的已陰干干燥、揀選除雜后的獐牙菜經(jīng)粉碎過四號篩后，取疒3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 ml，密塞，稱定重量，在55 75°C溫度下加熱回流30min，室溫下冷卻，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過
O.45 μ m濾膜除去雜質(zhì)，精密量取10 μ I進(jìn)樣即得；
(5)對所述獐牙菜樣品采用高效液相色譜儀以甲醇-O.02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按獐牙菜苦苷峰、龍膽苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行測試，并利用所述獐牙菜苦苷的回歸方程、龍膽苦苷的回歸方程分別得到所述獐牙菜樣品中的獐牙菜苦苷含量和龍膽苦苷含量；
(6)當(dāng)獐牙菜苦苷含量均低于1%且龍膽苦苷含量均高于1%時，則該獐牙菜樣品為川西獐牙菜；當(dāng)獐牙菜苦苷含量均高于2%且龍膽苦 苷含量均低于1%時，則該獐牙菜樣品為抱莖獐牙菜。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點1、本發(fā)明利用高效液相色譜儀進(jìn)行兩種相似藥材的化學(xué)成分分析，根據(jù)化合物成分的不同分布，建立了兩種藥材快速、準(zhǔn)確的區(qū)分方法，從而保證了用藥的正確性。2、通過實際驗證，川西獐牙菜和抱莖獐牙菜同屬龍膽科獐芽菜屬植物，但其藥效成分獐牙菜苦苷、龍膽苦苷測定結(jié)果表明川西獐牙菜中藥效成分龍膽苦苷含量分布均高于1%，獐牙菜苦苷則低于1%，抱莖獐牙菜中藥效成分獐牙菜苦苷含量分布為29Γ16%，而龍膽苦苷則低于1%。換言之，根據(jù)兩種藥效成分的含量高低，可以判斷兩種獐牙菜的歸宿，川西獐牙菜中龍膽苦苷含量高，則獐牙菜苦苷含量低。抱莖獐牙菜中獐牙菜苦苷含量高，則龍膽苦苷含量低。該結(jié)果為兩種藥材的快速區(qū)別提供了可靠的鑒別依據(jù)，解決了兩種植物外觀形態(tài)相似，藥材混淆的根本問題。3、本發(fā)明方法簡便、快捷、準(zhǔn)確。


下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。圖1為本發(fā)明中獐牙菜苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖2為本發(fā)明中龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實施例方式一種快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法，包括以下步驟
⑴精密吸取O. 232mg/ml的獐牙菜苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、20. 0μ 1，然后分別進(jìn)樣，采用高效液相色譜儀以甲醇-O. 02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按獐牙菜苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行分析，并測定積分峰面積，最后以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，獐牙菜苦苷含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(參見圖1)，并計算得到獐牙菜苦苷的回歸方程Y=96470. 4x + 226293. 15，r=0. 9998，表示獐牙菜苦苷在O. 93 μ g 4. 64 μ g范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(表I)。表 I 獐牙菜苦苷線性關(guān)系試驗
權(quán)利要求
1.一種快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法，包括以下步驟⑴精密吸取O. 232mg/ml的獐牙菜苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、 20. 0μ 1，然后分別進(jìn)樣，采用高效液相色譜儀以甲醇-O. 02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按獐牙菜苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行分析，并測定積分峰面積，最后以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，獐牙菜苦苷含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算得到獐牙菜苦苷的回歸方程Y=96470. 4χ + 226293. 15，r=0. 9998 ；⑵精密吸取O. 61mg/ml的龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液4. O μ 1、8. O μ1、12. O μ1、16. O μ1、.20.O μ 1，然后分別進(jìn)樣，采用高效液相色譜儀以甲醇-O. 02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按龍膽苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行分析，并測定積分峰面積，最后以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，龍膽苦苷含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并分別計算得到龍膽苦苷的回歸方程Y= — 294961. 8x + 2003098. 5，r=0. 9992 ；(3)按常規(guī)方法分別對獐牙菜苦苷、龍膽苦苷的回歸方程依次進(jìn)行精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、重現(xiàn)性試驗、回收率試驗以驗證該回歸方程的可行性；⑷采集獐牙菜樣品將采集或收購的已陰干干燥、揀選除雜后的獐牙菜經(jīng)粉碎過四號篩后，取疒3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇.50 ml，密塞，稱定重量，在 55 75°C溫度下加熱回流30min，室溫下冷卻，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過O.45 μ m濾膜除去雜質(zhì)，精密量取10 μ I進(jìn)樣即得；(5)對所述獐牙菜樣品采用高效液相色譜儀以甲醇-O.02%磷酸溶液為流動相，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，在檢測波長24(T260nm，理論塔板數(shù)按獐牙菜苦苷峰、龍膽苦苷峰計算不低于3000的條件下進(jìn)行測試，并利用所述獐牙菜苦苷的回歸方程、 龍膽苦苷的回歸方程分別得到所述獐牙菜樣品中的獐牙菜苦苷含量和龍膽苦苷含量；(6)當(dāng)獐牙菜苦苷含量均低于1%且龍膽苦苷含量均高于1%時，則該獐牙菜樣品為川西獐牙菜；當(dāng)獐牙菜苦苷含量均高于2%且龍膽苦苷含量均低于1%時，則該獐牙菜樣品為抱莖獐牙菜。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種快速區(qū)別兩種相似藥材的判斷方法，該方法包括以下步驟⑴精密吸取不同體積的獐牙菜苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液，采用高效液相色譜儀進(jìn)行分析、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線、計算回歸方程；⑵精密吸取不同體積的龍膽苦苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液，采用高效液相色譜儀進(jìn)行分析、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線、計算回歸方程；⑶分別對獐牙菜苦苷、龍膽苦苷的回歸方程進(jìn)行驗證；⑷采集獐牙菜樣品；⑸對獐牙菜樣品進(jìn)行測試，分別得到獐牙菜樣品中的獐牙菜苦苷含量和龍膽苦苷含量；⑹當(dāng)獐牙菜苦苷含量均低于1%且龍膽苦苷含量均高于1%時，則該獐牙菜樣品為川西獐牙菜；當(dāng)獐牙菜苦苷含量均高于2%且龍膽苦苷含量均低于1%時，則該獐牙菜樣品為抱莖獐牙菜。本發(fā)明簡便、快捷、可保證用藥正確性。
文檔編號G01N30/88GK103033584SQ20121055107
公開日2013年4月10日 申請日期2012年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月18日
發(fā)明者紀(jì)蘭菊, 孫洪發(fā), 張小龍, 張海濤, 馮麗娟 申請人:中國科學(xué)院西北高原生物研究所