專利名稱：測定鈣的試劑和測定方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用于測定鈣的試劑和測定方法。更具體地講，本發(fā)明涉及用于測定鈣的改進的試劑，和能夠準確測定來自活體的樣品中的鈣的改進了的測定方法，并且特別適用于臨床診斷，所述樣品，如血液樣品(例如，全血，血漿或血清)或來自活體的含水的液體樣品(例如，腦脊髓液，淋巴，唾液或尿液)。另外，本發(fā)明涉及用于螯合的空白對照試劑和用于測定金屬離子的產(chǎn)生顏色的試劑，包括讓螯合和產(chǎn)生顏色的試劑與所述金屬離子起反應(yīng)。
相關(guān)技術(shù)的說明作為定量分析樣品中鈣離子的方法，采用螯合和產(chǎn)生顏色的試劑的比色方法，通常適用于臨床實驗室檢測，并且適用于一般的化學(xué)分析領(lǐng)域。作為螯合和產(chǎn)生顏色的試劑，主要使用了o-甲酚酞絡(luò)合酮(o-CPC)，它的pH值最適合在堿性pH范圍內(nèi)呈色，其中，它與鈣結(jié)合，以便形成的螯合物是穩(wěn)定的。具體地講，pH10或以上的高pH范圍，例如，在JP-A-54-36996中所披露的。還有一種通過將8-羥基喹啉摻入偶氮胂-III中獲得的已知試劑，它被用作螯合和產(chǎn)生顏色試劑，以便穩(wěn)定這種試劑，正如在日本專利申請公開號06-505560中所披露的。另外，還有一種已知的用于鈣分析的集成型多層分析元件，它是將偶氮氯膦-III用作螯合和產(chǎn)生顏色的試劑而獲得的，并且具有通過使用光反射顆粒擴大的測定范圍，正如在JP-A-06-50976中所披露的。另外，JP-A-04-120464披露了通過將偶氮氯膦-III用作螯合和產(chǎn)生顏色的試劑能夠同時對鈣和鎂進行定量。
不過，通過使用螯合和產(chǎn)生顏色的試劑獲得的用于鈣測定的每一種常規(guī)試劑都留有改進的空間。例如，通過使用o-CPC獲得的用于測定的試劑應(yīng)當改進，因為它的pH為10或更高。就是說，由于這種試劑具有高pH，在使用時，通過吸收空氣中的碳酸氣體使它的pH顯著降低。另外，當所述試劑以溶液形式長時間保存時，它的pH會降低，使得測定值在某些場合下變得不準確。另一方面，通過使用偶氮胂-III獲得的用于鈣測定的試劑由于具有比使用o-CPC的方法更低的pH而是有利的。不過，偶氮胂-III是有機胂化合物，因此，無法避免由于處理這種試劑而導(dǎo)致的環(huán)境污染問題。對于偶氮氯膦-III來說，最適合它的顏色改變的pH范圍是弱酸性的，并且偶氮氯膦-III是不含胂的試劑。因此，相對于由高pH和毒性導(dǎo)致的問題而言，偶氮氯膦-III是優(yōu)選的。不過，用于鈣分析的集成型多層分析元件不是液體試劑，并且不會使它能夠處理大量的樣品，以便在短時間內(nèi)完成測定。另外，在同時定量鎂和鈣時，將偶氮氯膦-III添加到樣品中，以便同時將鎂和鈣結(jié)合在它上面，并且產(chǎn)生顏色，然后添加EGTA以便將鈣從它上面解離下來，并且導(dǎo)致顏色減弱，并且根據(jù)顏色減弱程度對鈣進行定量。由于偶氮氯膦-III能產(chǎn)生高的空白值，它限制了可以進行測定的范圍。
就是說，盡管業(yè)已提出了通過使用螯合和產(chǎn)生顏色的試劑獲得的用于鈣測定的若干種試劑，尚沒有提供能夠解決上述所有問題的試劑，即由高pH導(dǎo)致的碳酸氣體的吸收問題，使用有毒的胂化合物的問題，不能在短時間內(nèi)測定大量樣品的問題，以及高空白值，并因此導(dǎo)致可測定的范圍較窄的問題。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明的目的是為了解決上述問題，并且提供在保存穩(wěn)定性方面出色，不存在環(huán)境污染問題，并且能夠以溶液形式進行精確的鈣測定的試劑。
本發(fā)明人研究了用于鈣測定的與所述問題相關(guān)的試劑，并因此意外地發(fā)現(xiàn)，在有釩酸鹽離子的情況下，偶氮氯膦-III能大大降低空白值。結(jié)果，發(fā)現(xiàn)了在通過使用偶氮氯膦-III或與它類似的化合物作為螯合和產(chǎn)生顏色的試劑，在足以與體液中的鈣起反應(yīng)的量的條件下，并且在與釩酸鹽離子組合使用時，能夠很好地解決由于高空白值導(dǎo)致的窄的測定范圍問題和低的測定精確度問題，這些問題是使用偶氮氯膦-III或類似化合物時的最大的缺陷，因此，擴大了要檢測的物種的測定范圍，并且能夠以高的精確度進行測定。本發(fā)明正是基于這一發(fā)現(xiàn)。
因此，本發(fā)明提供了用于測定鈣的試劑，它包括釩酸鹽離子和偶氮氯膦-III或與它類似的化合物。
另外，本發(fā)明提供了用于測定樣品中的鈣的方法，其特征在于在有釩酸鹽離子的條件下，讓樣品中的鈣與偶氮氯膦-III或與它類似的化合物起反應(yīng)，并且根據(jù)反應(yīng)產(chǎn)物導(dǎo)致的光學(xué)變化測定所述樣品中的鈣。
另外，本發(fā)明提供了用于螯合和產(chǎn)生顏色的試劑的空白對照試劑，它被用于根據(jù)通過螯合和產(chǎn)生顏色的試劑與金屬離子的反應(yīng)導(dǎo)致的光學(xué)變化測定金屬離子，該試劑包括作為活性成分的能夠抑制所述螯合和產(chǎn)生顏色的試劑本身呈色的釩酸鹽離子。
本發(fā)明的用于測定鈣的試劑和測定方法在以下各個方面都是出色的它們不存在由于高pH值導(dǎo)致的吸收碳酸氣體的問題；它們不存在使用含有胂酸鹽的有毒試劑的問題；它們能夠處理大量的樣品，以便在短時間內(nèi)完成測定，因為可將它們用在自動分析儀上，并且由于樣品空白值低，它們能夠測定寬的范圍。
優(yōu)選實施方案的說明本發(fā)明用于測定鈣的試劑的特征是，包括釩酸鹽離子和偶氮氯膦-III或與它類似的化合物。
在本發(fā)明的用于測定鈣的試劑中，將2，7-雙[(4-氯-2-磷酸苯基)偶氮]-4，5-二羥基-2，7-萘二磺酸二鈉(偶氮氯膦-III)[1914-99-4]或與它類似的化合物用作能夠結(jié)合鈣離子以便發(fā)生可檢測的光學(xué)變化的指示劑。偶氮氯膦-III是具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物或它的鹽。作為鹽，鈉鹽是優(yōu)選的。
所述類似化合物沒有特別的限制，只要它是，例如，具有以下構(gòu)架的化合物或它的鹽就行，它能與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生顏色。
在上述化合物中，迄今已知的化合物包括3-[(4-氯-2-磷酸苯基)偶氮]-4，5-二羥基-2，7-萘二磺酸二鈉(偶氮氯膦-I)[1938-82-5]，3，3-[(乙酰苯基)偶氮]-6(4-氯-2-磷酸苯基)偶氮]-4，5-二羥基-2，7-萘二磺酸二鈉(偶氮氯膦-mA)[86167-87-5]以及它的鹽。作為鹽，鈉鹽是優(yōu)選的。
在本發(fā)明中，釩酸鹽離子與偶氮氯膦-III或它的類似化合物同時使用。釩酸鹽離子能夠有效作用于作為空白對照試劑的偶氮氯膦-III或類似的化合物，即，它們能有效發(fā)揮作用，以便抑制偶氮氯膦-III本身或它的類似化合物呈色。
盡管用于本發(fā)明的測定鈣的試劑中的釩酸鹽離子沒有特別的限制，只要它們適合本發(fā)明的目的就行，但包括諸如VO3-VO43-等的五價釩酸鹽離子是優(yōu)選的。當上述釩酸鹽離子在實踐中使用時，從溶解度角度看，優(yōu)選以鹽的形式使用它們，如與堿金屬(例如，鋰，鈉，或鉀)形成的鹽，或銨鹽等。
盡管任何樣品都可以作為用本發(fā)明的用于測定鈣的試劑進行測定的樣品，但來自活體的樣品是合適的，就是說，所述試劑適合測定來自活體的樣品中的鈣。來自活體的樣品包括例如，血液樣品(例如，全血，血漿和血清)，來自活體的含水液體樣品(例如，腦脊髓液、淋巴，唾液，和尿液)，以及它們的稀釋劑。在本發(fā)明中，即使在將諸如含有諸如EDTA的螯合劑的血清用作來自活體的樣品時，也可以精確地測定所述樣品中的鈣。而在使用所述血清時，使用o-CPC的方法卻不能精確測定。因此，本發(fā)明的用于測定鈣的試劑，在可應(yīng)用于各種樣品方面同樣是有利的。
本發(fā)明的用于測定鈣的試劑沒有特別的限制，只要它是包括釩酸鹽離子和偶氮氯膦-III或它的類似化合物就行。作為所述試劑，包括兩種試劑的試劑(下面，在某些場合下稱之為“雙試劑系統(tǒng)”)是優(yōu)選的，因為可將它用于生物化學(xué)自動分析儀上。在本發(fā)明中，對于所述雙試劑系統(tǒng)來說，它的第一種試劑優(yōu)選包括常用的緩沖劑(例如，乙酸鈉)和表面活性劑。所述雙試劑系統(tǒng)的第二種試劑包括偶氮氯膦-III作為必需成分，優(yōu)選包括常用的緩沖劑(例如，乙酸鈉)和表面活性劑，并且可以包括鹽(例如，氯化鈉)和防腐劑(例如，疊氮化鈉)。對于雙試劑系統(tǒng)來說，從試劑的穩(wěn)定性角度來看，優(yōu)選將釩酸鹽離子摻入諸如偶氮氯膦-III的第二種試劑。
優(yōu)選對本發(fā)明的用于測定鈣的試劑進行調(diào)節(jié)，以便用于使樣品與偶氮氯膦-III起反應(yīng)的液體的pH，例如，當本發(fā)明的試劑由兩種試劑組合時，通過將第一種試劑和第二種試劑混合獲得的液體的pH可以優(yōu)選為3.5-7.5，更優(yōu)選4.5-6.5，特別優(yōu)選4.8-6.2。當該液體的pH低于3.5時，在測定鈣時，樣品中的蛋白和偶氮氯膦-III傾向于彼此結(jié)合，因此難于精確地測定鈣。當所述液體的pH超過7.5時，獲得了高的試劑空白值，或?qū)︽V產(chǎn)生了影響。因此，在某些場合下不能夠精確測定。所述雙試劑系統(tǒng)的第一種試劑和第二種試劑優(yōu)選分別具有2.0-9.0的pH。同樣在這種情況下，通過混合第一種試劑和第二種試劑獲得的液體的pH優(yōu)選為3.5-7.5。從偶氮氯膦-III和釩酸鹽離子的穩(wěn)定性角度考慮，第二種試劑的pH更優(yōu)選為7.5-9.0，特別是，7.7-8.5的pH。
當在本發(fā)明中通過使用由兩種試劑，即第一種試劑和第二種試劑組成的用于測定的試劑測定鈣時，所使用的樣品，第一種試劑和第二種試劑之間的體積比例優(yōu)選為例如1∶(10-100)∶(2-25)。盡管它是根據(jù)所使用的自動分析儀等而改變的。
下面，將解釋本發(fā)明的測定方法。本發(fā)明的用于測定鈣的方法的特征是，在有釩酸鹽離子的條件下，讓樣品中的鈣與偶氮氯膦-III或它的類似化合物起反應(yīng)。
在本發(fā)明中，作為在與鈣起反應(yīng)時的濃度(下面在某些場合下稱之為“最終濃度”)，偶氮氯膦-III的最終濃度優(yōu)選為，例如0.01-10mM，更優(yōu)選0.05-2mM，特別優(yōu)選0.1-0.7mM，不過，可以根據(jù)所使用的樣品的量等對該濃度進行調(diào)整。當所述濃度不夠時，在某些場合下偶氮氯膦-III不容易結(jié)合鈣。當所述濃度太高時，獲得了高的空白值，因此，準確測定是困難的。
對于釩酸鹽離子的濃度(mM)來說，它們的最終濃度優(yōu)選為偶氮氯膦-III的濃度的1-300倍，更優(yōu)選3-200倍，特別優(yōu)選5-100倍。當釩酸鹽離子的濃度太低時，在某些場合下獲得了高的空白值。
下面披露了通過使用用于測定鈣的由兩種試劑，即第一種試劑和第二種試劑組成的本發(fā)明的試劑測定血漿中鈣的具體例子。
將含有緩沖劑的第一種試劑和來自活體的樣品在特定溫度，優(yōu)選25-37℃下混合特定時間，例如，5分鐘。向所得到的液體中添加含有偶氮氯膦-III和釩酸鹽離子的第二種試劑，并且在特定溫度下，優(yōu)選25-37℃，將它們混合特定的時間，例如5分鐘，以便完成樣品中的鈣與偶氮氯膦-III的呈色反應(yīng)。測定了在由于偶氮氯膦-III而呈色之前和之后反應(yīng)溶液的吸光度值，并且計算由于著色而導(dǎo)致的吸光度值的改變。例如，來自活體的樣品中的鈣的濃度，可以通過與標準曲線比較吸光度值的改變而測定。所述吸光度值通常可以在660nm波長下測定。
當通過使用用于本發(fā)明測定的試劑測定鈣時，可以使用生物化學(xué)自動分析儀，如日立公司Model 7150，日立Model 7170S，或類似儀器。
下面將說明本發(fā)明的用于螯合和產(chǎn)生顏色的試劑的空白控試劑。本發(fā)明的空白控試劑以含有釩酸鹽離子為特征。
偶氮氯膦-III等能結(jié)合諸如鈣離子的各種金屬離子，并因此能夠測定金屬離子。不過，偶氮氯膦-III的溶液本身是高度有色的溶液，并因此在測定金屬離子時產(chǎn)生高的樣品空白值。結(jié)果，存在窄的金屬離子測定范圍的問題。釩酸鹽離子能將偶氮氯膦-III溶液的著色有效抑制在對照空白值上。因此，在通過使用偶氮氯膦-III或它的類似物測定諸如鈣離子的金屬離子時，可以將釩酸鹽離子用作偶氮氯膦-III或類似化合物的空白控試劑。
本發(fā)明的空白控試劑包括作為活性成分的釩酸鹽離子，當諸如鎂，鋇，或鈣離子等的金屬離子在通過使用除了偶氮氯膦-III或它的類似化合物之外的螯合和產(chǎn)生顏色的試劑進行測定時也可以使用，如二甲基砜偶氮(dimethylsulfonazo)-3，或偶氮胂-I等。為了在實踐中使用本發(fā)明的空白對照試劑，在本發(fā)明的用于測定鈣的上述方法中，在所述螯合和產(chǎn)生顏色的試劑與金屬離子起反應(yīng)時，添加釩酸鹽離子就足夠了。
實施例1和比較實施例1-4在有釩酸鹽離子的情況下用偶氮氯膦-III進行鈣測定1.方法進行實驗，以便判斷在有釩酸鹽離子的情況下，來自活體樣品中的鈣是否能用偶氮氯膦-III(在某些場合下稱之為CPZ-3)精確地測定。將在有釩酸鹽離子的情況下獲得的測定結(jié)果，與在有鎢酸鈉，硫酸錳(II)，硫酸銅(II)和沒有金屬離子的情況下獲得的測定結(jié)果進行比較。
作為樣品，第一種試劑和第二種試劑，使用了以下樣品和試劑。
樣品樣品來自活體，并且含有7.9mg/dL的鈣(通過使用o-CPC方法測定的值)。
第一種試劑磷酸二氫鈉50mM，pH6.0表面活性劑1.0％第二種試劑偶氮氯膦-III(CPZ-3)1.25mM氯化鈉150mM釩酸銨40mM表面活性劑1.0％比較實施例如下。在比較實施例1中沒有添加金屬離子。在比較實施例2中，添加了40mM的鎢酸鈉。在比較實施例3中，添加了40mM的硫酸錳(II)。在比較實施例4中，添加了40mM的硫酸銅(II)。
測定方法如下。使用自動分析儀日立Model 7170S，在37℃下混合2.5μl的樣品和200μl的第一種試劑5分鐘，向得到的液體中添加50μl的第二種試劑，并且在相同溫度下進行5分鐘的著色反應(yīng)。在660nm的顯性波長下，測定著色反應(yīng)之前和之后的吸光度值差異。通過以下公式計算鈣濃度 公式1EAbs測定的吸光度值E空白空白溶液的吸光度值ESTD標準溶液的吸光度值STD濃度標準溶液的濃度2.結(jié)果表1表示所獲得的結(jié)果。
表1
根據(jù)表1中的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)在有釩酸鹽離子的條件下，來自活體的樣品中的鈣能夠通過與CPZ-3起反應(yīng)精確地測定。還發(fā)現(xiàn)，當所述測定是通過不添加金屬或者在有其它金屬而不是釩離子的情況下進行時，不能夠精確地測定鈣。在有釩酸鹽離子的情況下，CPZ-3與釩酸鹽離子形成了螯合復(fù)合物，以便改變接近660nm波長下的吸光度值。由此形成的CPZ-3和釩酸鹽離子的螯合復(fù)合物，抑制了CPZ-3與蛋白的非專一性反應(yīng)。另外，由于CPZ-3對Ca的專一性，比對釩酸鹽離子的專一性高，CPZ-3能夠在有釩酸鹽離子的情況下精確地測定Ca。另一方面，在不添加金屬離子的情況下，在測定來自活體的樣品中的鈣時，會發(fā)生CPZ-3與來自活體的樣品中的蛋白的非專一性反應(yīng)，因此提高了吸光度值，從而導(dǎo)致陽性誤差。在有任何其他添加的金屬的情況下，CPZ-3和添加的金屬的螯合復(fù)合物抑制了Ca與CPZ-3的反應(yīng)，因此，不能夠計算準確的鈣含量。以上事實表明，CPZ-3與每一種成分的結(jié)合強度如下Cu2+＞Ca2+＞VO3-＞蛋白＞W(wǎng)O42-，Mn2+例2研究反應(yīng)溶液中的pH通過在有釩酸鹽離子的條件下將發(fā)生螯合反應(yīng)的液體調(diào)整到各種不同的pH(pH4.0，5.0和6.0)，測定血清中的鈣。作為樣品，第一種試劑和第二種試劑，使用了以下成分樣品樣品來自活體，并且含有7.6mg/dL的鈣。
第一種試劑甘氨酸100mM(當pH4.0時)或乙酸鈉100mM(當pH5.0或6.0時)表面活性劑1.0％第二種試劑CPZ-3 1.25mM氯化鈉 150mM釩酸銨 40mM表面活性劑1.0％表2表示所獲得的結(jié)果表2
根據(jù)表2所示出的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)特別是在pH5.0或6.0的條件下進行所述反應(yīng)，對于鈣的測定來說是特別優(yōu)選的。
例3和比較實施方案5-7測定來自活體的并且含有EDTA的樣品中的鈣進行實驗，以便判斷來自活體并且含有EDTA(螯合劑)的樣品中的鈣是否能夠在有釩酸鹽離子的條件下，通過它與一種螯合和產(chǎn)生顏色的試劑-CPZ-3起反應(yīng)而精確地測定。
在比較實施例5中，所述測定是在有鎢酸鹽離子的情況下進行的。在比較實施例6中，所述測定是在沒有添加金屬離子的條件下進行的。作為比較實施例7，檢驗了使用甲酚肽絡(luò)合酮(o-CPC)并且不添加金屬離子的方法，它是用于測定鈣的一般方法。用于測定的第一種試劑和第二種試劑的組成如下樣品樣品來自活體并且含有EDTA(0，7.5或15mM)，并且鈣的含量為7.6mg/dL。
第一種試劑磷酸二氫鈉 50mM pH5.0表面活性劑 1.0％第二種試劑CPZ-3 1.25mM氯化鈉 150mM各種類型的金屬離子 40mM表面活性劑 1.0％表3示出了所獲得的結(jié)果，即鈣的測定值和相對值[(測定值×100)/實際含量]表3通過添加EDTA測定鈣濃度(確切含量7.6mg/dL)
從表3中的結(jié)果可以看出，在有釩酸鹽離子的情況下，來自活體的并且含有EDTA的樣品中的鈣可以通過它與CPZ-3的反應(yīng)精確地測定。另一方面，發(fā)現(xiàn)在用鎢酸鹽離子取代釩酸鹽離子的情況下，不能夠精確地測定鈣。另外，在不添加釩酸鹽離子的情況下，通過采用CPZ-3的方法和采用o-CPC的方法(常規(guī)方法)不能測定鈣。
本發(fā)明的用于測定鈣的試劑和測定方法具有以下優(yōu)點所述試劑即使是在長時間保存時也是穩(wěn)定的，并且不會出現(xiàn)毒性問題，并且所述試劑和方法能夠準確并且快速地測定大量樣品中的鈣，在用于臨床實驗室檢測的診斷藥物領(lǐng)域是非常有效的。
權(quán)利要求
1.一種用于測定鈣的試劑，包括釩酸鹽離子和偶氮氯膦-III或與它類似的化合物。
2.如權(quán)利要求1的用于測定鈣的試劑，它是用于測定來自活體的樣品中的鈣的試劑，它可能含有螯合劑。
3.如權(quán)利要求1或2的用于測定鈣的試劑，對它進行調(diào)整，以便所述試劑與樣品起反應(yīng)的反應(yīng)溶液的pH可以為3.5-7.5。
4.如權(quán)利要求1-3中任意一項的用于測定鈣的試劑，它是雙試劑系統(tǒng)，由包括緩沖劑和選擇性地包括表面活性劑的第一種試劑，和包括釩酸鹽離子和偶氮氯膦-III或與它類似的化合物的第二種試劑組成。
5.如權(quán)利要求4的用于測定鈣的試劑，對它進行調(diào)整，以便通過混合所述第一種試劑和第二種試劑所獲得的液體的pH可以為3.5-7.5。
6.一種用于測定樣品中的鈣的方法，其特征在于在有釩酸鹽離子的情況下，讓所述樣品中的鈣與偶氮氯膦-III或與它類似的化合物起反應(yīng)，并且根據(jù)由于所述反應(yīng)產(chǎn)物導(dǎo)致的光學(xué)變化測定所述樣品中的鈣。
7.如權(quán)利要求6的測定方法，其中，所述樣品是來自活體的樣品，它可能含有螯合劑。
8.如權(quán)利要求6或7的測定方法，其中，所述樣品中的鈣與偶氮氯膦-III或與它類似的化合物起反應(yīng)時的pH為3.5-7.5。
9.一種用于螯合和產(chǎn)生顏色的試劑的空白對照試劑，其被用于根據(jù)由螯合和產(chǎn)生顏色的試劑與金屬離子的反應(yīng)所導(dǎo)致的光學(xué)變化測定金屬離子，該試劑包括能夠抑制所述螯合和產(chǎn)生顏色的試劑本身著色的作為活性成分的釩酸鹽離子。
10.如權(quán)利要求9的空白對照試劑，其中，所述螯合和產(chǎn)生顏色的試劑是偶氮氯膦-III或與它類似的化合物。
11.如權(quán)利要求9或10的空白對照試劑，它被用于測定鈣。
全文摘要
一種用于測定來自活體的樣品中的鈣的方法，包括在有釩酸鹽離子的條件下，讓所述樣品中的鈣與偶氮氯膦－III或與它類似的化合物起反應(yīng)，然后根據(jù)由所述反應(yīng)產(chǎn)物導(dǎo)致的光學(xué)變化，測定所述樣品中的鈣，該方法在以下各個方面都是出色的它不存在由于高pH導(dǎo)致的吸收碳酸氣體的問題；它不存在使用含有胂的有毒試劑的問題；它能夠在短時間內(nèi)對大量樣品進行測定，因為可將它應(yīng)用在自動分析儀上；并且它具有大的測定范圍，因為具有低的樣品空白值。
文檔編號G01N33/50GK1719235SQ200510083250
公開日2006年1月11日 申請日期2005年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月8日
發(fā)明者野田健太, 小島良, 片山勝博 申請人:日東紡績株式會社