核酸分離純化試劑盒組件的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本實(shí)用新型涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，更具體地說，它涉及一種應(yīng)用于吸附柱法提取全血中DNA基因組的試劑盒裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]核酸的分離純化是分子生物學(xué)的重要組成部分，是其下游PCR、酶切、DNA測序等各種實(shí)驗(yàn)過程的重要前處理環(huán)節(jié)，換句話說，核酸質(zhì)量的好壞直接決定后續(xù)試驗(yàn)的成敗。傳統(tǒng)的核酸分離提純方法是酚-氯仿抽提核酸，該法提取的缺點(diǎn)是不可避免的存有蛋白質(zhì)、糖類、鹽類以及有機(jī)溶劑等雜質(zhì)的污染;另一種較為常見的核酸提純方法就是吸附柱法，這種方法操作流程為:
[0003](I)首先，取一定量的血樣以及對應(yīng)量的PBl溶液加入試劑盒內(nèi)，并震蕩I分鐘左右；
[0004](2)向上一步的溶液中加入與PBl溶液等量的PB2溶液，再次震蕩一段時(shí)間；
[0005](3)將步驟二中的液體的一部分注入純化管柱中，這個(gè)部分包括有吸附柱和廢液收集管兩個(gè)部分套接而成，溶液加入到套設(shè)在廢液收集管中的吸附柱內(nèi)腔；
[0006](4)將這個(gè)純化管柱放置到離心機(jī)上進(jìn)行離心處理約I分鐘的時(shí)間，取出內(nèi)部的吸附柱，并清理掉廢液收集管中的廢液；
[0007]( 5)向上一步的溶液中加入PB3溶液，再次離心處理，并清理掉廢液收集管中的廢液；
[0008](6)向上一步的溶液中加入1^4溶液，再次離心處理，并清理掉廢液收集管中的廢液；
[0009](7)將上述步驟得到的、存儲(chǔ)于純化管柱中的物質(zhì)離心處理約3分鐘，并將吸附柱取出；
[0010](8)將存儲(chǔ)有離心處理后物質(zhì)的吸附柱安裝至另一個(gè)液體收集管中，向吸附柱中加入少量的PB5溶液，離心處理I分鐘左右，此時(shí)存儲(chǔ)在液體收集管中的液體即為核酸萃取液，是后續(xù)實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)對象。
[0011]上述過程中，步驟4至步驟7中需要多次對純化管柱進(jìn)行離心處理，在這個(gè)過程存在兩個(gè)問題，一是吸附柱在離心處理時(shí)容易在離心力的作用下脫離廢液收集管;二是吸附柱尺寸較小，內(nèi)部液體的量多則會(huì)導(dǎo)致離心不充分、少又會(huì)影響最后核酸萃取液的量。申請日為2009.6.16、申請?zhí)枮?00920076350.0的實(shí)用新型專利(以下稱為對比文件I)中公開了一種核酸分離吸附柱，包括吸附柱、廢液收集管，吸附柱套在廢液收集管內(nèi)，吸附層置于吸附柱底部，在吸附柱內(nèi)設(shè)有卡固吸附層的卡扣。其主要解決的是步驟4至步驟7中多次對純化管柱進(jìn)行離心處理時(shí)，容易出現(xiàn)的吸附柱脫離的廢液收集管的問題。
[0012]對比文件I中尚未解決的問題是吸附柱內(nèi)液體的定量問題，也就是說，從試劑盒到純化管柱的轉(zhuǎn)移過程需要引入其他定量儀器，以控制進(jìn)入吸附柱中的溶液的量，以保證離心處理的效果。不僅過程較為麻煩，并且儀器的清洗要求也較為嚴(yán)格，一旦清洗不到位會(huì)影響最終的核酸萃取液的效果。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0013]針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本實(shí)用新型的目的在于提供一種可以無需引入定量儀器，單靠自身結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)定量轉(zhuǎn)移液體至吸附柱內(nèi)的核酸分離純化試劑盒組件。
[0014]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型提供了如下技術(shù)方案:一種核酸分離純化試劑盒組件，包括有上下開口的圓形試劑盒、廢液收集管以及懸空卡設(shè)于廢液收集管內(nèi)部的吸附柱，其特征是:所述圓形試劑盒的底部與卡接于吸附柱的上開口，圓形試劑盒的上開口上設(shè)置有用于定量擠壓并密封所述試劑盒內(nèi)部空間的推進(jìn)裝置。
[0015]通過采用上述技術(shù)方案，將圓形試劑盒與吸附柱卡接，吸附柱又卡接于廢液收集管內(nèi)，這樣，則在核酸提純的過程中，無需引入任何外部的儀器即可實(shí)現(xiàn)液體的轉(zhuǎn)移，尤其是在圓形試劑盒的頂部開口上設(shè)置的推進(jìn)裝置，通過推進(jìn)裝置的移動(dòng)，從而定量的擠壓圓形試劑盒的內(nèi)部空間，從而利用推進(jìn)的氣體壓力將圓形試劑盒內(nèi)部的液體定量的擠入吸附柱內(nèi)腔，完成【背景技術(shù)】中的前七步的內(nèi)容，整個(gè)過程無需計(jì)量設(shè)備，單靠自身結(jié)構(gòu)即可實(shí)現(xiàn)定量轉(zhuǎn)移液體的目的。
[0016]本實(shí)用新型進(jìn)一步設(shè)置為:所述圓形試劑盒底部的外圓表面上設(shè)置有卡槽，所述吸附柱上相應(yīng)位置處設(shè)置有與卡槽尺寸適配的凸棱。
[0017]通過采用上述技術(shù)方案，由于在萃取核酸的過程中需要多次進(jìn)行離心處理，因此，將吸附柱與圓形試劑盒底部利用卡槽與凸棱結(jié)構(gòu)的配合形成更為緊密的卡接關(guān)系，有利于提高在離心處理過程中兩者之間的卡接強(qiáng)度。
[0018]本實(shí)用新型進(jìn)一步設(shè)置為:所述圓形試劑盒下端呈倒錐形設(shè)置，所述卡槽設(shè)置于倒錐形面上尺寸與凸棱尺寸適配的位置處。
[0019]通過采用上述技術(shù)方案，由于核酸萃取液的配置過程中，通常圓形試劑盒的內(nèi)的液體量要遠(yuǎn)大于擠壓至吸附柱內(nèi)的液體的量，并且，由于圓形試劑盒的底部開口，為了防止內(nèi)部液體在不受擠壓時(shí)流入吸附柱內(nèi)，因此圓形試劑盒的底部開口要做的較小，以給予內(nèi)部液體一個(gè)較大的小孔阻尼力。因此，將圓形試劑盒底部設(shè)置成倒錐形的結(jié)構(gòu)有利于推進(jìn)裝置擠壓圓形試劑盒內(nèi)腔時(shí)，將內(nèi)部液體擠出，防止圓形試劑盒底部的液體難以流入吸附柱內(nèi)。
[0020]本實(shí)用新型進(jìn)一步設(shè)置為:所述推進(jìn)裝置與圓形試劑盒的上開口螺紋連接。
[0021]通過采用上述技術(shù)方案，螺紋結(jié)構(gòu)本身的螺距是一定值，因此，在設(shè)計(jì)之初已知曉螺紋連接的螺距，這個(gè)值可以直接作為推進(jìn)裝置的定量標(biāo)準(zhǔn)，即通過螺距、螺紋的公稱直徑直接計(jì)算出旋轉(zhuǎn)圈數(shù)與圓形試劑盒內(nèi)腔體積變化的關(guān)系，從而簡單、精確的實(shí)現(xiàn)推進(jìn)裝置的定量。
[0022]本實(shí)用新型進(jìn)一步設(shè)置為:所述吸附柱上與廢液收集管卡接的位置處設(shè)置有彈性卡環(huán)，所述廢液收集管內(nèi)腔對應(yīng)位置配和設(shè)置有凹槽，當(dāng)所述吸附柱卡接于廢液收集管內(nèi)時(shí)，所述彈性卡環(huán)與凹槽之間過盈配合。
[0023]通過采用上述技術(shù)方案，由于吸附柱與廢液收集管在立新處理時(shí)是與圓形試劑盒一起放置到離心設(shè)備上的，因此，兩者之間的卡接關(guān)系也要可靠，彈性卡環(huán)與凹槽過硬配合的形式，使兩者之間不僅具備卡接力，還有由彈性卡環(huán)擠壓凹槽帶來的壓力，因此，兩者的接合力更為可靠。
[0024]本實(shí)用新型進(jìn)一步設(shè)置為:所述圓形試劑盒的外壁上設(shè)置有用于標(biāo)記圓形試劑盒內(nèi)部液體體積的刻度線。
[0025]通過采用上述技術(shù)方案，由于吸附柱內(nèi)的液體過多或者過少均會(huì)影響最后的核酸萃取液的質(zhì)量，因此，刻度線的設(shè)置有利于精確的控制擠