磷脂酰絲氨酸的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種磷脂酰絲氨酸的制備方法，其中，所述制備方法包括：1)將大豆卵磷脂和水混合，制得混合物M1；2)向混合物M1中加入L?絲氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰絲氨酸粗制品；3)向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入溶劑萃取，制得磷脂酰絲氨酸半成品；4)將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品順次通過(guò)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂，制得磷脂酰絲氨酸；其中，所述溶劑由氯仿、乙醇、乙醚和水組成。上述設(shè)計(jì)通過(guò)將大豆卵磷脂先與水混合，而后加入L?絲氨酸和磷脂酶D反應(yīng)，采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶劑進(jìn)行萃取，經(jīng)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂過(guò)濾，實(shí)現(xiàn)了操作簡(jiǎn)單方便，且制得的磷脂酰絲氨酸純度較高，使得其使用范圍大大增加的效果。
【專利說(shuō)明】
磷脂酰絲氨酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及磷脂酰絲氨酸的生產(chǎn)制備領(lǐng)域，具體地，涉及磷脂酰絲氨酸的制備方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 磷脂酰絲氨酸又稱復(fù)合神經(jīng)酸，是細(xì)胞膜的活性物質(zhì)，尤其存在于大腦細(xì)胞中，其 主要功能是改善神經(jīng)細(xì)胞功能，調(diào)節(jié)神經(jīng)脈沖的傳導(dǎo)，增進(jìn)大腦記憶功能等。因而，在人體 中起著極為重要的作用。
[0003] 現(xiàn)今對(duì)于磷脂酰絲氨酸的制備主要為提取法，但是往往植物中磷脂酰絲氨酸的含 量較少，使得其提取需要用到大量的原料，且純度不高，而從動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行提取，往往也 只能使用動(dòng)物的腦細(xì)胞進(jìn)行提取，不僅原料成本高，且提取方法復(fù)雜。
[0004] 因此，提供一種制備方法相對(duì)簡(jiǎn)單，制得的磷脂酰絲氨酸純度較高的磷脂酰絲氨 酸的制備方法是本發(fā)明亟需解決的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中往往植物中磷脂酰絲氨酸 的含量較少，使得其提取需要用到大量的原料，且純度不高，而從動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行提取，往 往也只能使用動(dòng)物的腦細(xì)胞進(jìn)行提取，不僅原料成本高，且提取方法復(fù)雜的問(wèn)題，從而提供 一種制備方法相對(duì)簡(jiǎn)單，制得的磷脂酰絲氨酸純度較高的磷脂酰絲氨酸的制備方法。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了磷脂酰絲氨酸的制備方法，其中，所述制備方法 包括：
[0007] 1)將大豆卵磷脂和水混合，制得混合物Ml;
[0008] 2)向混合物Ml中加入L-絲氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰絲氨酸粗制品；
[0009] 3)向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入溶劑萃取，制得磷脂酰絲氨酸半成 品；
[0010] 4)將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品順次通過(guò)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂，制得磷脂 酰絲氨酸;其中，
[0011] 所述溶劑由氯仿、乙醇、乙醚和水組成。
[0012] 通過(guò)上述技術(shù)方案，本發(fā)明將大豆卵磷脂先與水混合，而后加入L-絲氨酸和磷脂 酶D反應(yīng)，制得磷脂酰絲氨酸粗制品，再將上述磷脂酰絲氨酸粗制品采用含有氯仿、乙醇、乙 醚和水的溶劑進(jìn)行萃取后，經(jīng)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂過(guò)濾，制得純度較高的磷脂酰絲氨酸， 上述操作不僅簡(jiǎn)單方便，且制得的磷脂酰絲氨酸純度較高，使得其使用范圍大大增加。
[0013] 本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的【具體實(shí)施方式】部分予以詳細(xì)說(shuō)明。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 以下對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體 實(shí)施方式僅用于說(shuō)明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。
[0015] 本發(fā)明提供了一種磷脂酰絲氨酸的制備方法，其中，所述制備方法包括：
[0016] 1)將大豆卵磷脂和水混合，制得混合物Ml;
[0017] 2)向混合物Ml中加入L-絲氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰絲氨酸粗制品；
[0018] 3)向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入溶劑萃取，制得磷脂酰絲氨酸半成 品；
[0019] 4)將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品順次通過(guò)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂，制得磷脂 酰絲氨酸;其中，
[0020] 所述溶劑由氯仿、乙醇、乙醚和水組成。
[0021] 上述設(shè)計(jì)通過(guò)將大豆卵磷脂先與水混合，而后加入L-絲氨酸和磷脂酶D反應(yīng)，制得 磷脂酰絲氨酸粗制品，再將上述磷脂酰絲氨酸粗制品采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶劑 進(jìn)行萃取后，經(jīng)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂過(guò)濾，制得純度較高的磷脂酰絲氨酸，上述操作不僅 簡(jiǎn)單方便，且制得的磷脂酰絲氨酸純度較高，使得其使用范圍大大增加。
[0022] 在本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，為了使原料的使用率更高，進(jìn)一步降低生產(chǎn) 成本，相對(duì)于100重量份的步驟1)中的所述水，所述大豆卵磷脂的用量為30-50重量份，所述 L-絲氨酸的用量為15-20重量份，所述磷脂酶D的用量為1-5重量份，所述溶劑的用量為200-500重量份。
[0023]溶劑中各成分的含量可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)節(jié)，例如，在本發(fā)明的一種優(yōu)選的 實(shí)施方式中，為了進(jìn)一步提高制得的磷脂酰絲氨酸的純度，相對(duì)于100重量份的所述溶劑中 的水，所述氯仿的用量為20-80重量份，所述乙醇的用量為30-60重量份，所述乙醚的用量為 10-30重量份。
[0024] 步驟2)中的混合過(guò)程可以為靜置混合，混合條件可以不作限定，當(dāng)然，在本發(fā)明的 一種更為優(yōu)選的實(shí)施方式中，步驟2)中混合過(guò)程的混合溫度為25-30°C，混合時(shí)間為25-35h〇
[0025] 為了進(jìn)一步提高制得的磷脂酰絲氨酸的純度，在本發(fā)明的一種更為優(yōu)選的實(shí)施方 式中，步驟3)中萃取次數(shù)可以進(jìn)一步選擇為2-4次。
[0026] 步驟4)中的離子交換樹(shù)脂可以為本領(lǐng)域常規(guī)使用的離子交換樹(shù)脂類型，例如，在 本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，步驟4)中所述離子交換樹(shù)脂可以進(jìn)一步選擇為陽(yáng)離子交 換樹(shù)脂。
[0027] 以下將通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。以下實(shí)施例中，所述大豆卵磷脂、所述 L-絲氨酸、所述磷脂酶D、所述氯仿、所述乙醇和所述乙醚為常規(guī)市售品。
[0028] 實(shí)施例1
[0029] 將150g水、30g氯仿、45g乙醇和15g乙醚混合，制得溶劑;將30g大豆卵磷脂和100g 水混合，制得混合物Ml;向混合物Ml中加入15gL-絲氨酸和Ig磷脂酶D在25°C的條件下混合 25h，制得磷脂酰絲氨酸粗制品；向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入200g溶劑萃取， 重復(fù)上述萃取過(guò)程2次，制得磷脂酰絲氨酸半成品;將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品順次 通過(guò)硅膠柱和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，制得磷脂酰絲氨酸Al。
[0030] 實(shí)施例2
[0031] 將200g水、160g氯仿、120g乙醇和60g乙醚混合，制得溶劑；將50g大豆卵磷脂和 100g水混合，制得混合物Ml;向混合物Ml中加入20gL-絲氨酸和5g磷脂酶D在30°C的條件下 混合35h，制得磷脂酰絲氨酸粗制品；向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入500g溶劑萃 取，重復(fù)上述萃取過(guò)程4次，制得磷脂酰絲氨酸半成品；將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品 順次通過(guò)硅膠柱和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，制得磷脂酰絲氨酸A2。
[0032] 實(shí)施例3
[0033] 將200g水、100g氯仿、100g乙醇和40g乙醚混合，制得溶劑；將40g大豆卵磷脂和 100g水混合，制得混合物Ml;向混合物Ml中加入18gL-絲氨酸和3g磷脂酶D在28°C的條件下 混合30h，制得磷脂酰絲氨酸粗制品；向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入400g溶劑萃 取，重復(fù)上述萃取過(guò)程3次，制得磷脂酰絲氨酸半成品；將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品 順次通過(guò)硅膠柱和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，制得磷脂酰絲氨酸A3。
[0034] 實(shí)施例4
[0035]按照實(shí)施例1的制備方法進(jìn)行制備，不同的是，所述氯仿的用量為20g，所述乙醇的 用量為30g，所述乙醚的用量為10g，制得磷脂酰絲氨酸A4。
[0036] 實(shí)施例5
[0037]按照實(shí)施例2的制備方法進(jìn)行制備，不同的是，所述氯仿的用量為200g，所述乙醇 的用量為150g，所述乙醚的用量為100g，制得磷脂酰絲氨酸A5。
[0038] 實(shí)施例6
[0039]按照實(shí)施例1的制備方法進(jìn)行制備，不同的是，所述L-絲氨酸的用量為10g，所述磷 脂酶D的用量為0.5g，制得磷脂酰絲氨酸A6。
[0040] 實(shí)施例7
[0041]按照實(shí)施例2的制備方法進(jìn)行制備，不同的是，所述L-絲氨酸的用量為30g，所述磷 脂酶D的用量為Sg，制得磷脂酰絲氨酸A7。
[0042] 對(duì)比例1
[0043]按照實(shí)施例3的制備方法進(jìn)行制備，不同的是，不添加乙醚，制得磷脂酰絲氨酸D1。 [0044] 對(duì)比例2
[0045]按照實(shí)施例3的制備方法進(jìn)行制備，不同的是，將乙醇改為乙醚，制得磷脂酰絲氨 酸D2。
[0046] 測(cè)試?yán)?br>[0047]分別檢測(cè)上述制得的A1_A7、D1和D2中磷脂酰絲氨酸的含量，得到的結(jié)果如表1所 不。
[0048]表 1

[0050] 以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中 的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡(jiǎn)單變型，這 些簡(jiǎn)單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0051] 另外需要說(shuō)明的是，在上述【具體實(shí)施方式】中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征，在不矛 盾的情況下，可以通過(guò)任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對(duì)各種可 能的組合方式不再另行說(shuō)明。
[0052]此外，本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本 發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開(kāi)的內(nèi)容。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種磷脂酰絲氨酸的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括： 1) 將大豆卵磷脂和水混合，制得混合物Ml; 2) 向混合物Ml中加入L-絲氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰絲氨酸粗制品； 3) 向上述制得的磷脂酰絲氨酸粗制品中加入溶劑萃取，制得磷脂酰絲氨酸半成品； 4) 將上述制得的磷脂酰絲氨酸半成品順次通過(guò)硅膠柱和離子交換樹(shù)脂，制得磷脂酰絲 氨酸;其中， 所述溶劑由氯仿、乙醇、乙醚和水組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其中，相對(duì)于100重量份的步驟1)中的所述水，所述 大豆卵磷脂的用量為30-50重量份，所述L-絲氨酸的用量為15-20重量份，所述磷脂酶D的用 量為1-5重量份，所述溶劑的用量為200-500重量份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其中，相對(duì)于100重量份的所述溶劑中的水，所 述氯仿的用量為20-80重量份，所述乙醇的用量為30-60重量份，所述乙醚的用量為10-30重 量份。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其中，步驟2)中混合過(guò)程的混合溫度為25-30 °C，混合時(shí)間為25-35h。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其中，步驟3)中萃取次數(shù)為2-4次。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其中，步驟4)中所述離子交換樹(shù)脂為陽(yáng)離子交 換樹(shù)脂。
【文檔編號(hào)】C12P7/64GK106086097SQ201610403742
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月8日
【發(fā)明人】蘇福男
【申請(qǐng)人】蕪湖福民生物藥業(yè)有限公司