多不飽和羥基脂肪酸的藥學上可接受的鹽的制作方法
【專利摘要】本公開提供15?脂氧合酶產物的藥學上可接受的穩(wěn)定鹽形式，例如15?HETrE賴氨酸鹽，包含其的組合物以及其制造和使用方法。
【專利說明】多不飽和羥基脂肪酸的藥學上可接受的鹽 優(yōu)先權要求
[00011本申請要求2013年11月15日提交的美國臨時專利申請序列號61/904,600的優(yōu)先 權，所述臨時專利申請的整個內容以引用的方式并入本文中并作為依據。
技術領域
[0002] 本公開大體上涉及15-脂氧合酶產物的藥學上可接受的穩(wěn)定鹽形式。
【背景技術】
[0003] 酶是高度選擇性催化劑，極大地促進生物化學反應的速率和特異性。在酶促反應 中，在過程開始時的分子(被稱為底物)被轉化成不同的分子(被稱為產物）。
[0004] 脂氧合酶是催化多不飽和脂肪酸的氧化的酶。15-脂氧合酶（15-L0X)是這樣一種 酶，其催化底物如亞麻酸、二高-γ亞麻酸、二十碳五烯酸和花生四烯酸氧化成相應的產物 13-H0DE、15-HETrE、15-0ΗΕΡΑ和15-ΗΕΤΕ。
[0005] 15-L0X負責將花生四烯酸轉化成各種生物活性代謝物，包括15-羥基_5,8,11，13-二十碳四烯酸（15-HETE)<a5-HETE已經通過促進支氣管收縮、粘液分泌和嗜曙紅細胞迀移 而牽涉于氣道和過敏性疾病如哮喘的發(fā)病機制中。雖然15-HETE已經牽涉于促炎性反應中， 但其他15-L0X產物如15-OHEPA、15-HETrE和13-H0DE已顯示具有抗炎作用并且可以是醫(yī)學 上有用的。
[0006] 以引用的方式并入的15-L0X產物的潛在醫(yī)學有用適應癥的實例包括(但不限于） 痤瘡治療(美國專利8，293,790)、紅斑治療(美國專利申請公開2013/0101533)、抗微生物劑 (美國專利申請公開2012/0264705)、脂肪肝治療（GB1300628.3)、神經病治療（W02010/ 125330A1)和皮膚炎癥治療(美國專利8，536，223)。
[0007] 15-L0X代謝產物在室溫下是不穩(wěn)定的并且需要被儲存在-20°c或更低的溫度下。 由于這種不穩(wěn)定性，15-L0X產物尚未被配制用于醫(yī)療用途。如下所示，這些化合物的問題是 15-L0X源羥基基團通過與脂肪酸的羧基基團形成酯鍵而形成脂肪酸二聚體的趨勢。
[0008] 由于不穩(wěn)定性和二聚體形成，其開發(fā)作為藥物的潛力一直是個挑戰(zhàn)。本文描述了 15-L0X產物的藥學上可接受的穩(wěn)定形式。

【發(fā)明內容】

[0009] 本公開提供包含15-脂氧合酶脂肪酸產物的穩(wěn)定的藥學上有用的鹽的組合物。
[0010] 本發(fā)明還提供包含任何本文所述的化合物和藥學上可接受的載體的藥物組合物。 [0011] 在一些實施方案中，所述脂肪酸是15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE。在另一個實施 方案中，所述鹽形式是15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鈉或賴氨酸鹽。在一個特定實施方 案中，本發(fā)明是15-HETrE的賴氨酸鹽。
【附圖說明】
[0012]圖1示出15-HETrE的X射線粉末衍射圖。
[0013] 圖2示出15-HETrE在10°C/分鐘的速率下從-70 °C至200 °C的差示掃描量熱法(DSC) 溫譜圖。
[0014] 圖3示出15-HETrE在200 °C/分鐘的速率下從-75°c至150 °C的快速差示掃描量熱法 (Hyper DSC)溫譜圖。
[0015] 圖4示出HETrE在cU-甲醇中在500MHz下的質子-NMR光譜。
[0016] 圖 5示出 15-HETrE 的 FT-IR 光譜。
[0017] 圖6示出呈游離酸形式的15-HETrE(頂部圖）與碳酸氫鈉（中間圖）和15-HETrE鈉鹽 (底部圖）的X射線粉末衍射圖的比較。
[0018] 圖7示出呈游離酸形式的15-HETrE(頂部光譜)與15-HETrE鈉鹽(底部光譜）的質子 NMR光譜的比較。
[0019 ] 圖8示出15-HETrE鈉鹽的FT-IR光譜。
[0020] 圖9示出15-HETrE鈉鹽的差示掃描量熱法(DSC)溫譜圖。
[0021] 圖10示出15-HETrE游離酸(頂部圖）、通過鹽裂解制備的賴氨酸(從上向下第二個 圖）、賴氨酸單水合物(從上向下第三個圖）和15-HETrE賴氨酸鹽(底部圖）的X射線粉末衍射 圖的比較。
[0022] 圖11示出賴氨酸(頂部光譜）、15-HETrE游離酸（中間光譜）和15-HETrE賴氨酸鹽 (底部光譜)的質子NMR光譜的比較。
[0023] 圖12示出15-HETrE賴氨酸鹽的FT-IR光譜。
[0024]圖13示出15-HETrE賴氨酸鹽的差示掃描量熱法(DSC)溫譜圖。
[0025]圖14示出15-HETrE游離酸（頂部圖）、通過鹽裂解制備的鳥氨酸（中間圖）和15-HETrE鳥氨酸鹽(底部圖）的X射線粉末衍射圖的比較。
[0026]圖15示出鳥氨酸（頂部光譜）、15-HETrE游離酸（中間光譜）和15-HETrE鳥氨酸鹽 (底部光譜)的質子NMR光譜的比較。
[0027] 圖16示出15-HETrE鳥氨酸鹽的FT-IR光譜。
[0028] 圖17示出15-HETrE鳥氨酸鹽在10°C/分鐘的速率下從30°C至300°C的差示掃描量 熱法(DSC)溫譜圖。
[0029] 圖18示出15-HETrE游離酸(頂部圖）、哌嗪（中間圖）和15-HETrE哌嗪鹽(底部圖）的 X射線粉末衍射圖的比較。
[0030] 圖19示出15-HETrE游離酸(頂部光譜)和15-HETrE哌嗪鹽(底部光譜）的質子NMR光 譜的比較。
[0031] 圖20A-H示出15-HETrE賴氨酸鹽在一級紅板下的10倍放大圖像（圖20A)和在交叉 偏振光下的10倍放大圖像（圖20B); 15-HETrE鈉鹽在一級紅板下的10倍放大圖像（圖20C)和 在交叉偏振光下的10倍放大圖像（圖20D); 15-HETrE鳥氨酸鹽在一級紅板下的10倍放大圖 像（圖20E)和在交叉偏振光下的10倍放大圖像（圖20F);和15-HETrE哌嗪鹽在一級紅板下的 10倍放大圖像(圖20G)和在交叉偏振光下的10倍放大圖像(圖20H)。
[0032]圖21示出15-HETrE賴氨酸鹽在動態(tài)水分吸附（DVS)分析之前(頂部圖）和之后（底 部圖）的X射線粉末衍射圖的比較。
[0033] 圖22示出15-HETrE賴氨酸鹽在d4-甲醇中的質子NMR光譜。
[0034]圖23示出15-HETrE賴氨酸鹽的熱重/差熱分析（"TG/DTA"）溫譜圖。
[0035]圖24示出15-HETrE賴氨酸鹽在10°C/分鐘的速率下從30°C至300°C的差示掃描量 熱法(DSC)溫譜圖。
[0036] 圖25A-D示出15-HETrE賴氨酸鹽在30°C下（圖25A)、在120°C下（圖25B)、在200°C下 (圖25C)和在環(huán)境溫度下在熔融后（圖25D)的熱臺顯微鏡圖像。
[0037]圖26示出15-HETrE賴氨酸鹽的動態(tài)水分吸附(DVS)等溫線。
[0038] 圖27示出15-HETrE賴氨酸鹽的FT-IR光譜。
[0039] 圖28示出 15-HETrE游離酸（"15-HETrE FFA"）當在-20°C 下、在2-8°C 下和在25°C 下 儲存至多24周時和15-HETrE賴氨酸鹽當在40°C和75%RH下（"15-HETrE賴氨酸鹽40/75"）和 在20°C和60%RH下（"15-HETrE賴氨酸鹽20/60"）在氮氣下封蓋儲存時的穩(wěn)定性。
[0040] 圖29示出從15-HETrE和葡甲胺(頂部圖）以及葡甲胺(底部圖）分離的固體的X射線 粉末衍射圖的比較。
[0041 ]圖30示出從15-HETrE和葡甲胺分離的固體的質子NMR光譜。
[0042]圖31A-B示出在一級紅板下（圖31A)和在交叉偏振光下（圖31B)捕獲的15-HETrE葡 甲胺鹽的10倍顯微照片。
【具體實施方式】
[0043] 13-H0DE是通過15-L0X對亞油酸的作用而形成的。亞油酸被氧化成13-過氧羥基十 八碳-9Z，11E-二烯酸（13-H0DE)。如本文所用，術語"13-H0DE"是指呈游離酸形式的13-H0DE〇
[0044] 15-羥基-二十碳-8(Z)，11 (Z)，13(E)-三烯酸（"15-HETrE" 或 "HETrE"）是二高-γ 亞麻酸(DGLA)的15-L0X衍生物。15-HETrE可以根據本領域中的方法從DGLA合成。如本文所 用，術語"15-HETrE"是指呈游離酸形式的15-HETrE(例如，15-羥基-二十碳-8⑵，11(Z)，13 (E)_三烯酸）。
[0045] 15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11 (Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸（"15-OHEPA"）是EPA的 15-L0X衍生物。15-OHEPA可以根據本領域中已知的方法從EPA合成。如本文所用，術語"15-0ΗΕΡΑ"是指呈游離酸形式的15-OHEPA(例如，15-羥基-二十碳-5，8，11，13，17-五烯酸）。
[0046] 如本文所用，術語"藥學上有用的"是指在化學上和物理上與其他藥物組分相容 (例如，基本上可混溶和/或不反應）的化合物和/或組合物，或者是指在常見儲存條件（例 如，室溫或冷藏)下通常穩(wěn)定持續(xù)足夠長時間以提供商業(yè)上可行的保存期的藥物組合物。
[0047] 在多個實施方案中，本發(fā)明提供藥物組合物，例如可局部遞送的組合物，其包含 13-H0DE、15-OHEPA、15-HETrE中的一種或多種或其混合物。
[0048]在一個實施方案中，本公開提供包含例如一定量(例如，治療有效量）的13-H0DE、 15-OHEPA、15-HETrE的鹽形式或其組合的局部用藥物組合物。在一個實施方案中，所述藥物 組合物包含約0.1重量％至約20重量％的13-H0DE、15-OHEPA、15-HETrE或其組合，例如約 0.1重量％、約0.2重量％、約0.3重量％、約0.4重量％、約0.5重量％、約0.6重量％、約0.7重 量％、約0.8重量％、約0.9重量％、約1重量％、約1.1重量％、約1.2重量％、約1.3重量％、約 1.4重量％、約1.5重量％、約1.6重量％、約1.7重量％、約1.8重量％、約1.9重量％、約2重 量％、約2.1重量％、約2.2重量％、約2.3重量％、約2.4重量％、約2.5重量％、約2.6重量％、 約2.7重量％、約2.8重量％、約2.9重量％、約3重量％、約3.1重量％、約3.2重量％、約3.3重 量％、約3.4重量％、約3.5重量％、約3.6重量％、約3.7重量％、約3.8重量％、約3.9重量％、 約4重量％、約4.1重量％、約4.2重量％、約4.3重量％、約4.4重量％、約4.5重量％、約4.6重 量％、約4.7重量％、約4.8重量％、約4.9重量％、約5重量％、約5.1重量％、約5.2重量％、約 5.3重量％、約5.4重量％、約5.5重量％、約5.6重量％、約5.7重量％、約5.8重量％、約5.9重 量％、約6重量％、約6.1重量％、約6.2重量％、約6.3重量％、約6.4重量％、約6.5重量％、約 6.6重量％、約6.7重量％、約6.8重量％、約6.9重量％、約7重量％、約7.1重量％、約7.2重 量％、約7.3重量％、約7.4重量％、約7.5重量％、約7.6重量％、約7.7重量％、約7.8重量％、 約7.9重量％、約8重量％、約8.1重量％、約8.2重量％、約8.3重量％、約8.4重量％、約8.5重 量％、約8.6重量％、約8.7重量％、約8.8重量％、約8.9重量％、約9重量％、約9.1重量％、約 9.2重量％、約9.3重量％、約9.4重量％、約9.5重量％、約9.6重量％、約9.7重量％、約9.8重 量％、約9.9重量％、約10重量％、約10.1重量％、約10.2重量％、約10.3重量％、約10.4重 量％、約10.5重量％、約10.6重量％、約10.7重量％、約10.8重量％、約10.9重量％、約11重 量％、約11.1重量％、約11.2重量％、約11.3重量％、約11.4重量％、約11.5重量％、約11.6 重量％、約11.7重量％、約11.8重量％、約11.9重量％、約12重量％、約12.1重量％、約12.2 重量％、約12.3重量％、約12.4重量％、約12.5重量％、約12.6重量％、約12.7重量％、約 12.8重量％、約12.9重量％、約13重量％、約13.1重量％、約13.2重量％、約13.3重量％、約 13.4重量％、約13.5重量％、約13.6重量％、約13.7重量％、約13.8重量％、約13.9重量％、 約14重量％、約14.1重量％、約14.2重量％、約14.3重量％、約14.4重量％、約14.5重量％、 約14.6重量％、約14.7重量％、約14.8重量％、約14.9重量％、約15重量％、約15.1重量％、 約15.2重量％、約15.3重量％、約15.4重量％、約15.5重量％、約15.6重量％、約15.7重 量％、約15.8重量％、約15.9重量％、約16重量％、約16.1重量％、約16.2重量％、約16.3重 量％、約16.4重量％、約16.5重量％、約16.6重量％、約16.7重量％、約16.8重量％、約16.9 重量％、約17重量％、約17.1重量％、約17.2重量％、約17.3重量％、約17.4重量％、約17.5 重量％、約17.6重量％、約17.7重量％、約17.8重量％、約17.9重量％、約18重量％、約18.1 重量％、約18.2重量％、約18.3重量％、約18.4重量％、約18.5重量％、約18.6重量％、約 18.7重量％、約18.8重量％、約18.9重量％、約19重量％、約19.1重量％、約19.2重量％、約 19.3重量％、約19.4重量％、約19.5重量％、約19.6重量％、約19.7重量％、約19.8重量％、 約19.9重量％或約20重量％的13-H0DE、15-OHEPA、15-HETrE或其組合。
[0049] 本領域技術人員已知的任何藥學上可接受的賦形劑可用于根據本公開的藥物組 合物中。被選擇用于治療和美容組合物中的任何賦形劑應該是藥學上和/或美容學上可接 受的并且適于治療組合物將被使用的形式，例如，乳膏、凝膠、乳劑、油劑、洗劑等。優(yōu)選地， 所述賦形劑對皮膚具有親和性，耐受性良好，并且當以足以提供所需稠度和施用容易性的 量使用時是穩(wěn)定的。僅舉例來說，根據本公開的藥物組合物可包含以下中的一種或多種:表 面活性劑、防腐劑、調味劑、共溶劑、粘度助劑、懸浮助劑和親脂相。
[0050] 在另一個方面，本發(fā)明提供包含治療有效量的15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽 形式的藥物組合物。所述15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式可為所述組合物中和如本 文所述的方法和用途中的唯一顯著活性成分。所述15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式 可為唯一活性成分?？蛇x地，所述15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式可與用于治療疾 病或病癥的其他藥劑組合用于共配制或共施用。如果使用另一種活性劑，則所述15-HETrE、 15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式可以共配制成單一劑量單位或者可以配制成兩種至多種劑量 單位以用于配合、組合或相伴施用。
[0051 ]在多個實施方案中，本發(fā)明提供藥物組合物，例如可經口遞送的組合物，其包含 15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式。在一個實施方案中，所述組合物包含治療有效量 的15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式。在一個實施方案中，所述藥物組合物包含約0.1 重量％至約99.9重量％、約1重量％至約95重量％、或約5重量％至約90重量％ 15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式，例如約1重量％、約2重量％、約3重量％、約4重量％、約5重 量％、約6重量％、約7重量％、約8重量％、約9重量％、約10重量％、約11重量％、約12重 量％、約13重量％、約14重量％、約15重量％、約16重量％、約17重量％、約18重量％、約19重 量％、約20重量％、約21重量％、約22重量％、約23重量％、約24重量％、約25重量％、約26重 量％、約27重量％、約28重量％、約29重量％、約30重量％、約31重量％、約32重量％、約33重 量％、約34重量％、約35重量％、約36重量％、約37重量％、約38重量％、約39重量％、約40重 量％、約41重量％、約42重量％、約43重量％、約44重量％、約45重量％、約46重量％、約47重 量％、約48重量％、約49重量％、約50重量％、約51重量％、約52重量％、約53重量％、約54重 量％、約55重量％、約56重量％、約57重量％、約58重量％、約59重量％、約60重量％、約61重 量％、約62重量％、約63重量％、約64重量％、約65重量％、約66重量％、約67重量％、約68重 量％、約69重量％、約70重量％、約71重量％、約72重量％、約73重量％、約74重量％、約75重 量％、約76重量％、約77重量％、約78重量％、約79重量％、約80重量％、約81重量％、約82重 量％、約83重量％、約84重量％、約85重量％、約86重量％、約87重量％、約88重量％、約89重 量％、約90重量％、約91重量％、約92重量％、約93重量％、約94重量％、約95重量％、約96重 量％、約97重量％、約98重量％、約99重量％、約99.5重量％或約99.9重量％ 15-OHEPA 或 13-HODE 的鹽形式。
[0052] 在一個實施方案中，所述藥物組合物大約包含至少約70重量％、至少約71重量％、 至少約72重量％、至少約73重量％、至少約74重量％、至少約75重量％、至少約76重量％、至 少約77重量％、至少約78重量％、至少約79重量％、至少約80重量％、至少約81重量％、至少 約82重量％、至少約83重量％、至少約84重量％、至少約85重量％、至少約86重量％、至少約 87重量％、至少約88重量％、至少約89重量％、至少約90重量％、至少約91重量％、至少約92 重量％、至少約93重量％、至少約94重量％、至少約95重量％、至少約96重量％、至少約97重 量％、至少約98重量％、至少約99重量％、至少約99.5重量％或約99.9重量％ 15-OHEPA 或 13-H0DE 的鹽形式。
[0053] 在一個實施方案中，所述藥物組合物包含至少約50重量％、至少約60重量％、至少 約70重量％、至少約80重量％或至少約90重量％的15-冊1'成、15-0冊?4或13-H0DE的鹽形 式。
[0054] 在另一個實施方案中，所述15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式以約lmg至約 10，000mg、約25mg 至約7500mg、約 25mg 至約 5000mg、約50mg 至約5000mg、約50mg 至約3000mg、 約 75mg至約 2500mg、或約 1 OOmg至約 1 OOOmg，例如約 lmg、約 2mg、約 3mg、約4mg、約 5mg、約6mg、 約 7mg、約 8mg、約 9mg、約1Omg、約1lmg、約12mg、約13mg、約14mg、約15mg、約16mg、約17mg、約 18mg、約19mg、約 20mg、約 2lmg、約 22mg、約 23mg、約 24mg、約 25mg、約 50mg、約75mg、約100mg、 約125mg、約150mg、約175mg、約200mg、約225mg、約250mg、約275mg、約300mg、約325mg、約 350mg、約375mg、約400mg、約425mg、約450mg、約475mg、約500mg、約525mg、約550mg、約 575mg、約600mg、約625mg、約650mg、約675mg、約700mg、約725mg、約750mg、約775mg、約 800mg、約825mg、約850mg、約875mg、約900mg、約925mg、約950mg、約975mg、約lOOOrng、約 1025mg、約1050mg、約1075mg、約llOOrng、約1025mg、約1050mg、約1075mg、約1200mg、約 1225mg、約1250mg、約1275mg、約1300mg、約1325mg、約1350mg、約1375mg、約1400mg、約 1425mg、約1450mg、約1475mg、約1500mg、約1525mg、約1550mg、約1575mg、約1600mg、約 1625mg、約1650mg、約1675mg、約1700mg、約1725mg、約1750mg、約1775mg、約1800mg、約 1825mg、約1850mg、約1875mg、約1900mg、約1925mg、約1950mg、約1975mg、約2000mg、約 20251^、約205〇11^、約207511^、約210〇11^、約212511^、約215〇11^、約217511^、約220〇11^、約 2225mg、約2250mg、約2275mg、約2300mg、約2325mg、約2350mg、約2375mg、約2400mg、約 2425mg、約2450mg、約2475mg、約2500mg、2525mg、約2550mg、約2575mg、約2600mg、約2625mg、 約2650mg、約2675mg、約2700mg、約2725mg、約2750mg、約2775mg、約2800mg、約2825mg、約 2850mg、約2875mg、約2900mg、約2925mg、約2950mg、約2975mg、約3000mg、約3025mg、約 305011^、約307511^、約310011^、約312511^、約315011^、約317511^、約320011^、約322511^、約 3250mg、約3275mg、約3300mg、約3325mg、約3350mg、約3375mg、約3400mg、約3425mg、約 3450mg、約3475mg、約3500mg、約3525mg、約3550mg、約3575mg、約3600mg、約3625mg、約 365〇11^、約367511^、約370〇11^、約372511^、約375〇11^、約377511^、約380〇11^、約382511^、約 3850mg、約3875mg、約3900mg、約3925mg、約3950mg、約3975mg、約4000mg、約4025mg、約 405011^、約407511^、約410011^、約412511^、約415011^、約417511^、約420011^、約422511^、約 4250mg、約4275mg、約4300mg、約4325mg、約4350mg、約4375mg、約4400mg、約4425mg、約 4450mg、約4475mg、約4500mg、約4525mg、約4550mg、約4575mg、約4600mg、約4625mg、約 465〇11^、約467511^、約470〇11^、約472511^、約475〇11^、約477511^、約480〇11^、約482511^、約 485〇1^、約487511^、約490〇11^、約492511^、約495〇11^、約497511^、約500〇11^、約502511^、約 505011^、約507511^、約510011^、約512511^、約515011^、約517511^、約520011^、約522511^、約 5250mg、約5275mg、約5300mg、約5325mg、約5350mg、約5375mg、約5400mg、約5425mg、約 5450mg、約5475mg、約5500mg、約5525mg、約5550mg、約5575mg、約5600mg、約5625mg、約 565〇11^、約567511^、約570〇11^、約572511^、約575〇11^、約577511^、約580〇11^、約582511^、約 5850mg、約5875mg、約5900mg、約5925mg、約5950mg、約5975mg、約6000mg、約6025mg、約 605011^、約607511^、約610011^、約612511^、約615011^、約617511^、約620011^、約622511^、約 625〇11^、約627511^、約630〇11^、約632511^、約635〇11^、約637511^、約640〇11^、約642511^、約 645〇11^、約647511^、約650〇11^、約652511^、約655〇11^、約657511^、約660〇11^、約662511^、約 665〇11^、約667511^、約670〇11^、約672511^、約675〇11^、約677511^、約680〇11^、約682511^、約 6850mg、約6875mg、約6900mg、約6925mg、約6950mg、約6975mg、約7000mg、約7025mg、約 705011^、約707511^、約710011^、約712511^、約715011^、約717511^、約720011^、約722511^、約 7250mg、約7275mg、約7300mg、約7325mg、約7350mg、約7375mg、約7400mg、約7425mg、約 7450mg、約7475mg、約7500mg、約7525mg、約7550mg、約7575mg、約7600mg、約7625mg、約 7650mg、約7675mg、約7700mg、約7725mg、約7750mg、約7775mg、約7800mg、約7825mg、約 7850mg、約7875mg、約7900mg、約7925mg、約7950mg、約7975mg、約8000mg、約8025mg、約 805011^、約807511^、約810011^、約812511^、約815011^、約817511^、約820011^、約822511^、約 825〇11^、約827511^、約830〇11^、約832511^、約835〇11^、約837511^、約840〇11^、約842511^、約 8450mg、約8475mg、約8500mg、約8525mg、約8550mg、約8575mg、約8600mg、約8625mg、約 865〇11^、約867511^、約870〇11^、約872511^、約875〇11^、約877511^、約880〇11^、約882511^、約 8850mg、約8875mg、約8900mg、約8925mg、約8950mg、約8975mg、約9000mg、約9025mg、約 905011^、約907511^、約910011^、約912511^、約915011^、約917511^、約920011^、約922511^、約 925〇11^、約927511^、約930〇11^、約932511^、約935〇11^、約937511^、約940〇11^、約942511^、約 9450mg、約9475mg、約9500mg、約9525mg、約9550mg、約9575mg、約9600mg、約9625mg、約 9650mg、約9675mg、約9700mg、約9725mg、約9750mg、約9775mg、約9800mg、約9825mg、約 9850mg、約9875mg、約9900mg、約9925mg、約9950mg、約9975mg或約 10，000mg 的量存在于本發(fā) 明的組合物中。
[0055] 在一個實施方案中，本發(fā)明的組合物中存在的15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽 形式包含至少90重量％的15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式。含有15-HETrE、15-OHEPA或13-H0DE的鹽形式的組合物可以包含甚至更高純度，例如至少91重量％、至少92重 量％、至少93重量％、至少94重量％、至少95重量％、至少96重量％或至少97重量％的15-HETrE、15-OHEPA 或 13-H0DE 的鹽形式。
[0056]在一個實施方案中，本公開提供15-脂氧合酶產物的鹽。在一些實施方案中，所述 鹽是藥學上可接受的鹽。在一些實施方案中，所述鹽包含15-脂氧合酶產物的賴氨酸鹽。在 一些實施方案中，所述鹽包含15-脂氧合酶產物的鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽包含15-脂氧合酶產物的鳥氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽包含15-脂氧合酶產物的哌嗪鹽。在 一些實施方案中，所述鹽包含15-脂氧合酶產物的葡甲胺鹽。在一些實施方案中，所述鹽還 包含呈游離酸形式的15-脂氧合酶產物。在一些實施方案中，所述鹽選自：鈉、賴氨酸、鳥氨 酸、哌嗪、葡甲胺和其組合。在一些實施方案中，所述鹽是鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽 是賴氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽是鳥氨酸。在一些實施方案中，所述鹽是哌嗪鹽。在 一些實施方案中，所述鹽是葡甲胺鹽。在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物選自：13_ H0DE、15-HETrE、15-OHEPA、15-HETE和其組合。在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物是 13-H0DE。在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物是15-HETrE。在一些實施方案中，所述 15-脂氧合酶產物是15-OHEPA。在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物是15-HETE。
[0057]在一些實施方案中，本公開提供13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸的鹽。在一些 實施方案中，所述鹽是鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽是賴氨酸鹽。在一些實施方案中，所 述鹽是鳥氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽是哌嗪鹽。在一些實施方案中，所述鹽是葡甲 胺鹽。
[0058]在一些實施方案中，本公開提供15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸的 鹽。在一些實施方案中，所述鹽是鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽是賴氨酸鹽。在一些實施 方案中，所述鹽是鳥氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽是哌嗪鹽。在一些實施方案中，所述 鹽是葡甲胺鹽。
[0059]在一些實施方案中，本公開提供15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11 (Z)，13(Z)，17 (Z)_五烯酸的鹽。在一些實施方案中，所述鹽是鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽是賴氨酸 鹽。在一些實施方案中，所述鹽是鳥氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽是哌嗪鹽。在一些實 施方案中，所述鹽是葡甲胺鹽。
[0060] 在一些實施方案中，本公開提供15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸的鹽。在一些 實施方案中，所述鹽是鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽是賴氨酸鹽。在一些實施方案中，所 述鹽是鳥氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽是哌嗪鹽。在一些實施方案中，所述鹽是葡甲 胺鹽。
[0061] 在一些實施方案中，本公開提供包含13-過氧羥基十八碳-9Z，11E_二烯酸、15-羥 基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)_ 三烯酸、15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(Z)，17(Z)_ 五烯酸和/或15-羥基_5,8,11，13-二十碳四烯酸的鹽的組合物。在一些實施方案中，所述鹽 包含或者是鈉鹽。在一些實施方案中，所述鹽包含或者是賴氨酸鹽。在一些實施方案中，所 述鹽包含或者是鳥氨酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽包含或者是哌嗪鹽。在一些實施方案 中，所述鹽包含或者是葡甲胺鹽。
[0062]在一些實施方案中，本公開提供包含15-脂氧合酶產物的鹽形式的藥物組合物。在 一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物的鹽形式包含13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯 酸、15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸、15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13 (Z)，17(Z)_五烯酸和/或15-羥基_5,8,11，13-二十碳四烯酸中的任何一種或多種的鹽。在 一些實施方案中，所述藥物組合物還包含賦形劑。
[0063] 在一些實施方案中，在儲存至少約4周后，所述藥物組合物包含至少約98%、至少 約99%或約100%的初始量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式。在一些實施方案中，在儲存 至少約10周后，所述藥物組合物包含至少約90 %、至少約91 %、至少約92 %、至少約93 %、至 少約94%、至少約95%、至少約96%、至少約97 %、至少約98%、至少約99%或約100 %的初 始量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式。在一些實施方案中，在儲存至少約24周后，所述藥 物組合物包含至少約86%、至少約87%、至少約88%、至少約89%、至少約90%、至少約 91 %、至少約92%、至少約93%、至少約94%、至少約95 %、至少約96%、至少約97 %、至少約 98%、至少約99%或約100%的初始量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式。在任何前述實施 方案中，所述藥物組合物可被儲存在2-8°C下、在20°C下、在25°C下或在40°C下。在一些實施 方案中，所述藥物組合物被儲存在60 % RH下或在75 % RH下。
[0064]在一些實施方案中，所述藥物組合物包含治療有效量的所述15-脂氧合酶產物的 鹽。在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物的鹽形式的治療有效量是約0.1重量％至約 20重量％。
[0065]在一些實施方案中，所述藥物組合物呈適合局部施用的形式。
[0066]在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物的鹽形式是藥物組合物中的唯一顯著 活性成分或唯一活性成分。在其他實施方案中，所述藥物組合物還包含另一種活性劑。
[0067] 在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物的鹽形式和所述另外的活性劑被共同 配制成單一劑量單位。在一些實施方案中，所述15-脂氧合酶產物的鹽形式和所述另外的活 性劑被配制成至少兩種劑量單位以用于配合、組合或相伴施用。
[0068] 本發(fā)明包括用于治療或改善有需要的個體中對15-L0X產物有反應的疾病或病癥 的治療方法，其包括向有需要的個體施用有效量的本文公開的15-L0X產物的鹽形式。
[0069] 施用方法包括在治療過程期間的不同時間或者以組合形式同時施用有效量的本 發(fā)明的化合物或組合物。本發(fā)明的方法包括所有已知治療性處理方案。
[0070] "有效量"是指藥物物質（即本發(fā)明的15-L0X產物的鹽形式)在個體中引起所需生 物反應的量。這種反應包括所治療疾病或病癥的癥狀的減輕。在這種治療方法中所公開的 15-L0X產物的鹽形式的有效量是約0.001毫克/千克/天至約100毫克/千克/天、0.01毫克/ 千克/天至約10毫克/千克/天，優(yōu)選地約〇. 5毫克/千克/天至5毫克/千克/天。
[0071] 本發(fā)明包括所公開的15-L0X產物的鹽形式用于制備用于在有需要的個體中治療 或改善慢性病癥或疾病或感染的組合物的用途，其中所述組合物包含一種或多種所公開的 15-L0X產物的鹽形式和任選的藥學上可接受的載體的混合物。
[0072] "藥學上可接受的載體"是指具有足夠純度和質量以用于配制本發(fā)明組合物的化 合物和組合物，其當適當施用至動物或人類時，不產生不良反應，并且被用作藥物物質（即 本發(fā)明的15-L0X產物的鹽形式）的媒介物。"藥學上可接受的載體"還應包括如下物質，其 (i)可與所述組合物的其他成分相容而不會使得所述組合物不適合其預期目的，和（i i)適 用于如本文所提供的個體而無不適當的不良副作用（例如毒性、刺激性和過敏反應）。當其 風險超過所述組合物提供的益處時，副作用是"不適當的"。藥學上可接受的載體的非限制 性實例包括(但不限于)任何標準藥物載體如磷酸鹽緩沖鹽水溶液、無菌等滲鹽水、水，和乳 液例如油/水乳液和微乳液。
[0073] "藥學上可接受的稀釋劑"是指具有足夠純度和質量以用于配制本發(fā)明組合物的 化合物和組合物，其當適當施用至動物或人類時，不產生不良反應，并且被用作藥物物質 (即本發(fā)明的15-L0X產物的鹽形式)的稀釋劑。
[0074] 因此，在一些實施方案中，本公開提供治療有需要的個體中的疾病或病癥的方法， 所述方法包括向所述個體施用如本文所公開的藥物組合物。在一些實施方案中，所述疾病 或病癥選自：痤瘡、紅斑、感染、脂肪肝、神經病和皮膚炎癥。在一些實施方案中，所述藥物組 合物以足以提供治療有效量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式的量施用至所述個體。在一 些實施方案中，所述治療有效量是約〇. 001毫克/千克/天至約100毫克/千克/天。
[0075] 在一些實施方案中，本公開提供制造 15-L0X化合物（例如，13-H0DE、15-HETrE或 15-OHEPA)的方法。在一些實施方案中，所述方法包括在氧氣存在下使相應的15-L0X前體化 合物(例如，亞油酸、DGLA或EPA)與脂氧合酶(例如，包含脂氧合酶的組合物)接觸。在一些實 施方案中，所述氧氣在大于大氣壓的壓力（例如，2-3巴）下存在，任選地在還原劑(例如，半 胱氨酸)存在下，形成15-L0X化合物。在一些實施方案中，進行成鹽步驟，其包括將成鹽劑與 所述15-L0X化合物混合。在一些實施方案中，所述成鹽步驟在無氧或基本上無氧條件下進 行。在一些實施方案中，所述成鹽步驟在與使15-L0X前體化合物與脂氧合酶接觸的步驟相 同或不同的容器中進行。在一些實施方案中，所述方法還包括過濾所得15-L0X化合物鹽。在 一些實施方案中，所述方法不包括15-L0X化合物鹽的色譜純化。
[0076]在一些實施方案中，所述方法包括在堿性pH(例如，約9-10)下在化學計量過量的 半胱氨酸存在下在加壓氧氣毯覆下（例如，在約2巴、約2.5巴或約3巴下)使DGLA與化學計量 過量的脂氧合酶接觸并攪拌直至DGLA完全消耗。在一些實施方案中，所述方法還包括酸化 至約pH 3-4(例如，通過添加適當量的固體檸檬酸)和分離濾液中所含的15-HETrE游離酸。 在一些實施方案中，然后對從濾液分離的15-HETrE游離酸進行成鹽步驟，例如通過在相同 或另一容器中在無氧或基本上無氧條件下暴露于成鹽劑如L-賴氨酸。在一些實施方案中， 用溶劑(例如，MtBE)洗滌所得鹽(例如賴氨酸鹽)一次至約4次。在一些實施方案中，在不使 用色譜純化技術的情況下，所得15-HETrE賴氨酸鹽具有至少90%、至少約92%或至少95% 的純度。 實施例 實施例1:15-HETrE的鹽
[0077]使用24種共成型劑和酸來篩選15-HETrE的穩(wěn)定形式，但大部分得到油狀物或凝 膠。從篩選中分離具有改進處理特性的鹽:鈉、鳥氨酸、賴氨酸、葡甲胺和哌嗪，但都不良結 晶。五種鹽中的四種是粘性固體，但賴氨酸鹽以粉末形式存在并且在環(huán)境溫度下在真空下 化學穩(wěn)定8天。 表1:用于15-(S)-HETrE的鹽和共晶體篩選的共成形劑/酸
1這些共成形劑不是藥學上可接受的，但檢查看看處理是否可針對制造而改進。 實施例2:15-HETrE油狀物的表征
[0078] 15-HETrE是粘稠油狀物并且通過XRH)分析確定為X射線無定形的（圖1)。在材料的 差示掃描量熱法(DSC)分析期間未觀測到熱事件（圖2)。通過hyper DSC分析在-52°C下注意 至lj 15-HETrE的可能的玻璃化轉變(Tg)。在較高溫度下注意到其他熱事件，但在無進一步分 析的情況下，其原因是未知的（圖3)。所述材料的 1H-NMR光譜表明它與分子結構相一致（圖 4)。15-冊1'也的?1'-11?光譜示于圖5中。游離酸的羰基伸展在1707〇11_ 1下是可見的。 實施例3:所收到的15-HETrE的溶解度篩選
[0079] 使用等分試樣添加方法在10種溶劑中估計15-HETrE的溶解度。發(fā)現15-HETrE在所 測試的所有溶劑中都是可混溶的，在所有情況下都顯示高溶解性。然而，當與丙烯酸1，1，1， 3，3，3-六氟異丙酯（"HFIPA"）組合時，觀測到從透明無色到血紅色到深紫色/黑色的快速顏 色變化。這被認為是由于15-HETrE的降解，因此HFIPA不用于15-HETrE的任何進一步研究 中。溶解度數據示于下表2中。 表2:15-HETrE在多種溶劑中的估計溶解度。
[0080] 所述實驗得到凝膠或油狀物。通過XRPD對這些材料的分析已表明它們由X射線無 定形材料或者X射線無定形材料和共成形劑構成。四種共成形劑提供固體或半固體材料并 且相比于原料具有改進的處理特性:NaHC〇3、鳥氨酸、賴氨酸和哌嗪。 實施例4:15-HETrE鈉鹽
[0081] 在乙醇/水共溶劑體系蒸發(fā)后，分離出呈灰白色蠟狀固體形式的根據實施例1使用 NaHC03和15-HETrE制備的材料。溶解在乙醇中，接著蒸發(fā)，改進了所述材料的可處理性。此 外通過與MTBE-起制漿分離出無序材料。
[0082] 當通過XRH)分析時，發(fā)現所述材料由非常無序的結晶材料構成（圖6)。此外也存在 一些無定形內含物。
[0083] 在所述材料的h-NMR光譜中觀測到的峰位移表明鈉鹽形成（圖7)。
[0084]所述鈉鹽樣品的FT-IR分析未顯示在1707CHT1下在游離酸中存在的羰基伸展，表明 鹽形成（圖8)。
[0085] 15-HETrE鈉鹽的DSC分析顯示具有起始溫度71.3°C的小吸熱峰（圖9)。在游離酸的 熱分析期間未觀測到這個吸熱峰(參見例如圖2-3)。 實施例5:15-HETrE賴氨酸鹽
[0086]根據實施例1使用賴氨酸和15-HETrE制備的材料。所述材料是從乙醇/水共溶劑體 系的蒸發(fā)以灰白色粉末狀固體形式分離的。溶解在乙醇中，接著蒸發(fā)，改進了所述材料的可 處理性。
[0087]當通過XRH)分析時，所述材料由無序結晶材料構成，并且可含有一些無定形內含 物(圖10)。在低角度下的等距衍射峰表明形成中間相，例如液晶。
[0088]從包括蒸發(fā)、研磨和超聲處理(純物質和在溶劑存在下）的多個實驗觀測到相同的 XRPD 圖。
[0089]在所述材料的匪R光譜中觀測到的15-HETrE和賴氨酸的峰位移指示可能的鹽 形成（圖11)。15-HETrE:賴氨酸的比率為0.9:1。
[0090] 賴氨酸鹽樣品的FT-IR分析顯示，在1707CHT1下在游離酸中存在的強羰基伸展已消 失，這表明鹽形成（圖12)。
[0091] 15-HETrE賴氨酸鹽的DSC分析顯示起始溫度分別為87.1°C和115.5°C的兩個小吸 熱峰(圖13)。在游離酸的熱分析期間未觀測到這些吸熱峰(參見例如圖2-3)。 實施例6:15-HETrE鳥氨酸鹽
[0092] 在乙醇/水共溶劑體系蒸發(fā)后，分離出呈灰白色蠟狀/油性固體形式的根據實施例 1使用鳥氨酸和15-HETrE制備的材料。溶解在乙醇中，接著蒸發(fā)，改進了所述材料的可處理 性。當通過XRH)分析時，所述材料由非常無序的結晶材料構成，并且可含有一些無定形內含 物(圖14)。
[0093] 從包括蒸發(fā)、研磨、沉淀和超聲處理(純物質和在溶劑存在下）的多個實驗觀測到 相同的XRH)圖。
[0094] 在1H-匪R光譜中觀測到15-HETrE和鳥氨酸的峰位移，指示可能的鹽形成（圖15)。 冊1'也:鳥氨酸的比率測量為1:0.8。
[0095]鳥氨酸鹽樣品的FT-IR分析顯示，在1707CHT1下在游離酸中存在的強羰基伸展已消 失，這表明鹽形成（圖16)。
[0096] 15-HETrE賴氨酸鹽的DSC分析顯示起始溫度分別為34.7°C和約120°C的兩個吸熱 峰（圖17)。第一吸熱峰可能是由于所述材料的熔融，而第二較大吸熱峰可能是由于所述材 料的分解。在游離酸的熱分析期間未觀測到這些吸熱峰(參見例如圖2-3)。 實施例7:HETrE哌嗪鹽
[0097]從純哌嗪和15-HETrE的超聲處理分離出黃色半固體材料，接著蒸發(fā)1:1乙酸異丁 酯和乙醇共溶劑體系。
[0098] XRH)分析顯示所述鹽由非常無序的結晶材料構成（圖18)。也可能存在一些無定形 內含物。
[0099] 在疑似鹽的1H-NMR光譜中觀測到峰位移，這表明鹽形成（圖19)。15-HETrE:哌嗪的 比率為1:0.66。 實施例8:15-HETrE的鈉、賴氨酸、鳥氨酸和哌嗪鹽的特性 [0100]將根據實施例4-7制備的15-HETrE鹽的特性相對于彼此和相對于15-HETrE游離酸 API進行比較。鈉、鳥氨酸和哌嗪鹽各自是粘性或蠟狀固體，但賴氨酸鹽可制成粉末形式并 且在環(huán)境溫度下在真空下化學穩(wěn)定8天。
[0101]表3比較了在篩選期間評估的每種鹽的特性并且包括結晶度、外觀、根據匪R的溶 劑含量、化學穩(wěn)定性、制備方法和根據NMR分析的化學計量。
[0102]賴氨酸鹽代表用于開發(fā)的最佳候選物，因為它可制備成可處理粉末并且通過多種 方法制造。通過h-NMR和FT-IR光譜分析證實鹽形成并且所述鹽展示等摩爾化學計量。 表3:從鹽/共晶體篩選分離的固體特性的表格
[0103] 鈉鹽作為備用候選物用于進一步研究，因為它是蠟狀固體并且是通過多種不同方 法制造的?；瘜W計量不能通過NMR光譜分析確定。
[0104] 鳥氨酸鹽不建議用于進一步研究，因為它的粘性很大并且隨時間顯示黃色著色。 哌嗪鹽表現出最差的處理特性并且是粘性的半固體材料，其似乎在環(huán)境溫度下在暴露于空 氣時流動，這可能是由于水分吸收。
[0105] 每種鹽的顯微照片圖像顯示于圖20A-H中。在交叉偏振光下在存在和不存在一級 紅色濾光片(其增強結晶和無定形內含物之間的對比度)的情況下捕捉每種鹽的圖像。比例 尺長度代表200μπι。明亮顏色是結晶度的證據。 實施例9:15-HETrE賴氨酸鹽規(guī)模放大
[0106] 發(fā)現制漿方法作為先前使用的旋轉蒸發(fā)方法的替代方案以使用EtOAc作為溶劑來 制備賴氨酸鹽，但當規(guī)模放大時不能產生所述鹽。在800mg規(guī)模上，向EtOAc添加9%Me0H產 生鹽，純度為96%。已開始對于賴氨酸鹽的穩(wěn)定性研究（20°C/60%RH空氣/N2和40°C/75% RH空氣/N2,開放/封閉小瓶）。
[0107] 未發(fā)現通過制漿來制備15-HETrE鈉鹽并避免需要旋轉蒸發(fā)的替代方法。如果使用 水，則堿溶解，但所得鹽也高度可溶并且因此不會沉淀。如果排除水，則堿不溶解并且因此 不與15-HETrE反應。使用依次從10%Et0H水溶液和EtOH旋轉蒸發(fā)，完成15-HETrE鈉鹽的規(guī) 模放大和表征。所回收材料具有黃色著色。如通過UPLC分析所測量的純度為約81%。 實施例10:規(guī)模放大的15-HETrE-賴氨酸鹽的表征
[0108] 通過XRPD分析根據實施例9制備的15-HETrE-賴氨酸鹽并且發(fā)現其由無序結晶材 料構成(圖21)。
[0109] 通過1Η-NMR光譜分析(溶劑:d4-MeOD)證實鹽形成，如通過賴氨酸和14-HETrE質子 的峰位移所證明（圖22)。HETrE:賴氨酸的比率測量為1:1。
[0110] 15-HETrE-賴氨酸鹽的TG/DTA分析顯示在<160°C下可忽略的重量損失，這表明所 述鹽是無水的。注意到在116°C(起始)下的小吸熱峰，但原因未知（圖23)。
[0111] DSC溫譜圖顯示在88 °C和115 °C下起始的多個小吸熱峰，接著是較寬的吸熱峰，其 可能與熔融和分解事件相關（圖24)。
[0112] 所述鹽在30°C與200°C之間的熱臺顯微鏡分析顯示沒有可觀測的熔融直至約140 °C，但所述材料在200°C下未完全熔融（圖25A-D)。
[0113]所述材料的Hyper DSC分析表明，玻璃化轉變(Tg)溫度是16°C (半心值，圖26)。
[0114] 15-HETrE賴氨酸鹽的DVS分析顯示，在低于70%RH下重量增加不到1 %，但在70-80%RH之間增加另外1% (圖26)，并且表明所述材料根據歐洲藥典分類是吸濕的。在高于 80 %RH下的重量增加足夠大以表明樣品潮解。樣品的DVS后XRH)分析表明，它與輸入材料相 一致(圖21)。
[0115] 圖27示出根據實施例9制備的15-HETrE賴氨酸鹽的FT-IR光譜。 實施例11:15-HETrE賴氨酸鹽的規(guī)模放大和可操作性研究
[0116] 最初通過旋轉蒸發(fā)分離15-HETrE賴氨酸鹽以除去殘余溶劑并降低固體的粘性。然 而，進行少量實驗以找出可用于在更大規(guī)模上制備呈無水固體形式的鹽的更合適方法。
[0117] 設置制漿實驗以在不同條件下形成賴氨酸鹽。根據下表4添加溶劑，溶劑:反溶劑 比率為1:3。 表4:制備HETrE賴氨酸鹽的制漿實驗
[0118] 15-HETrE賴氨酸漿液得到具有一些蠟狀黃色固體的灰白色粉末。XRH)圖與先前的 15-HETrE賴氨酸鹽圖匹配。EtOAc中的樣品1946-035-01經過選擇以放大規(guī)模至100mg，接著 lg規(guī)模。
[0119] 所述材料在1 OOmg下成功地放大規(guī)模，然而，當在1 g規(guī)模上制備鹽時遇到問題。 [0120]完成反應相比于先前所觀測花費更長時間（6天對1天）。
[0121]所述材料看起來非常細并且不能容易地過濾。通過離心分離15-HETrE賴氨酸鹽， 傾析并在真空下干燥。所述材料以黃色固體形式分離，但被殘余賴氨酸污染。
[0122] 進行其他實驗來找出替代溶劑并且發(fā)現Et0Ac-Me0H(9:l)最適合作為在添加1小 時內發(fā)生的成鹽。其他溶劑組合產生鹽，但需要若干小時或過夜混合。依次在250mg和800mg 規(guī)模上進行規(guī)模放大是成功的并且在幾個小時內形成鹽，過濾并干燥。
[0123] 對于800mg規(guī)模批料，根據UPLC的純度是96 %，而對于250mg規(guī)模批料，根據UPLC的 純度是97 %。
[0124] 圖28示出15-HETrE-賴氨酸鹽相比于15-HETrE游離脂肪酸在不同條件下的穩(wěn)定 性。游離15-HETrE是不穩(wěn)定的并且在所有條件(排除-20°C)下降解。15-HETrE-賴氨酸鹽在 20 °C和40 %濕度下以及在40 °C和75 %濕度下是穩(wěn)定的，這使得所述賴氨酸鹽可用于制藥應 用。在更大規(guī)模上制備呈白色粉末形式的15-HETrE賴氨酸鹽用于結晶化篩選。XRH)分析表 明它是無序的并且與先前分析非常相似。 表5:15-HETrE賴氨酸鹽的結晶化篩選
實施例12:15-HETrE鈉鹽的規(guī)模放大和可操作性研究
[0125] 根據XRH)分析（圖9)，15-HETrE鈉鹽是高度無序的，并且是蠟狀固體。
[0126] 通過1H-NMR光譜分析(溶劑:ck-MeOD)對材料進行分析，表明已經發(fā)生成鹽，如通過 15-HETrE質子的峰位移所證明（圖10)?；瘜W計量不能通過1H-NMR光譜分析確定。
[0127] 15-HETrE鈉鹽的TG/DTA分析顯示在高于環(huán)境溫度下的連續(xù)逐漸重量損失，這對非 常無序的材料是不常見的并且可能是由于揮發(fā)性組分的損失。
[0128] DSC溫譜圖顯示一系列復雜的小的熱事件，其原因未知。
[0129] 從hyper DSC溫譜圖未觀測到不同的玻璃化轉變(Tg)信號。
[0130] 15-HETrE鈉鹽的DVS分析顯示樣品在低于40%RH下重量增加不到1 %，但其后重量 增加按指數規(guī)律增加并且在高RH下潮解。這表明所述材料根據歐洲藥典分類是非常吸濕 的。未進行DVS后XRH)分析，因為所述材料潮解。
[0131] 圖15示出根據這個實施例制備的15-HETrE鈉鹽的FT-IR光譜。
[0132] 最初通過旋轉蒸發(fā)分離15-HETrE鈉鹽以除去殘余溶劑并降低固體的粘性。然而， 進行少量實驗以找出可用于在更大規(guī)模上制備呈無水固體形式的鹽的更合適方法。
[0133] 設置制漿實驗以在不同條件下形成鈉鹽。根據下表添加溶劑，溶劑:反溶劑比率為 1:3〇
[0134] 對于非水性漿液，堿以固體形式添加但不溶解。也嘗試以水溶液形式添加堿，但未 發(fā)生鹽的沉淀并且溶劑必須被蒸發(fā)。因此，未找到制備HETrE鈉鹽的合適的制漿方法。
[0135] 使用旋轉蒸發(fā)在克規(guī)模上進行規(guī)模放大并且產生鹽，但固體顯示黃色著色。
[0136] 如通過UPLC測量的純度為約81 %。 表6:嘗試通過制漿方法來制備15-HETrE鈉鹽
注釋1:添加另外560yL MTBE以嘗試形成沉淀物。 注釋2:添加飽和NaHC03水溶液以制漿。 表7: HETrE鈉鹽的結晶化篩選
實施例13:15-HETrE鈉葡甲胺鹽的規(guī)模放大和可操作性研究
[0137] 從15-HETrE與N-甲基-D-葡糖胺(葡甲胺)制備的樣品得到凝膠并且儲存在冷凍條 件下以促進結晶化。在一段時間后，注意到所述材料已固化并且XRH)圖指示存在結晶度，但 也存在一些無定形內含物（圖29)。所述XRH)圖不同于葡甲胺的XRH)圖，這表明形成獨特的 固體形式。
[0138] 樣品的質子NMR光譜指示1:1化學計量并且注意到峰位移，這表明鹽形成（圖30)。 檢測到一摩爾的EtOH，其可表明溶劑化物形成。
[0139] 雖然XRro圖指示它是從篩選產生的最大結晶性樣品，但所述樣品是粘性固體并且 當在顯微鏡載玻片之間受壓時流動，這表明液晶特性（圖31A-B)。圖31A-B中的比例尺代表 200μπι。將所述材料在真空下干燥過夜以除去殘余EtOH并且所述樣品仍是粘性的。
[0140]在較大規(guī)模上制備呈粘稠油狀物形式的15-HETrE葡甲胺鹽以用于結晶化篩選。
[0141] 然后將葡甲胺鹽再分到多個小瓶中并且經受不同應力條件并且用氮氣吹掃樣品 (表8)。使用水性和非水性條件并且使用分子篩干燥溶劑。也用氮氣吹掃溶劑。
[0142] 大部分樣品當在不同條件下受壓時仍是凝膠。然而，一種樣品在冰箱中從ACN-EtOH中部分結晶。將所述樣品用于接種其他樣品，但未注意到進一步結晶。 表8:15-HETrE葡甲胺鹽的結晶化篩選
[0143] 基于這些結果，15-HETrE賴氨酸和鈉鹽仍代表用于進一步研究的最佳候選物，因 為它們比葡甲胺鹽的粘性小。然而，葡甲胺鹽的特性可顯示進一步加工的改進。 實施例 14:從DGLA制備 15- (S) -HETrE
[0144] 通過在水（10L)中裝入硼酸（61.88，1!11〇1)和似0!1(120.(^，3111〇1)來制備硼酸鈉緩 沖液(〇. 1M)。向20L哈氏合金(hastealloy)容器中裝入10.0L硼酸鈉緩沖液，接著裝入半胱 氨酸（237.28，1.958111 〇1，2.0當量）。緩沖液和半胱氨酸在攪拌下完全溶解后，添加061^ (300g，9 · 79mol)并且將混合物在pH 9 · 6下冷卻至0-5 °C。添加 LP)(1酶粉末(2 · 66g，8 · 85mg/g DGLA，1.8兆單位/克DGLA，0.88重量％ )并且利用純氧將容器加壓至2.5巴。在攪拌一小時 后，緩慢地釋放氧頭壓力以避免起泡。移出等分試樣并用檸檬酸溶液（25%w/v)酸化至pH 3。將所述等分試樣用氘化氯仿萃取，經硫酸鈉干燥，過濾并通過NMR分析。
[0145] 添加另外的 LPX1 酶粉末（0· 503g，1 · 8mg/g DGLA，0.36 兆單位 / 克 DGLA，0 · 18 重 量％ )和另外1當量的半胱氨酸（117.0g，0.979mo 1)并且將混合物在氧氣下再攪拌1小時。如 上所述對另一個等分試樣的分析表明反應完成。
[0146] 將混合物用氮氣（2巴，2個循環(huán)）吹掃并在氮氣毯覆下在900rpm下攪拌過夜。然后 將混合物裝入氮氣毯覆的10L汽油罐中。然后在氬氣毯覆下將混合物添加至20L反應器中并 且以50g份添加固體檸檬酸直至pH降至3.5。
[0147] 在氬氣下利用燒結漏斗收集沉淀的固體。在將固體再轉移至反應器之后，添加 3L 甲基叔丁基醚(MtBE)并且將混合物在400rpm下攪拌10分鐘。將這些步驟再重復兩次，然后 利用40°C浴(旋轉蒸發(fā)儀)在250毫巴下蒸發(fā)殘余溶劑，直至不再觀測到餾出物。用氬氣使旋 轉蒸發(fā)儀通風。 實施例15:通過色譜法純化粗15- (S) -HETrE
[0148] 將實施例14中制備的粗15-(S)-HETrE的一半溶解在130mL MtBE/環(huán)己烷(20:80v/ v)溶劑混合物中。將溶液分成兩份;使用已經用環(huán)己烷預洗脫的Biotage 75L二氧化硅濾筒 純化每一份。以5個階段實現15-(S)-HETrE的洗脫：（1 )MtBE/環(huán)己烷（10:90): 4L; (2)MtBE/ 環(huán)己烷（20:80) :3L; (3)MtBE/環(huán)己烷（30:70) :2L; (4)MtBE/環(huán)己烷（50:50) :4L;和（5)MtBE: 2L。將根據TLC分析包括15-(S)-HETrE的級分（級分4-9)合并并在氬氣下利用旋轉蒸發(fā)儀 (250毫巴，在40°C下）濃縮，直至不再觀測到餾出物。純度為95.5% (根據h-NMR)或96.4% (根據 uHPLC)。 實施例16:15-(S)-HETrE L-賴氨酸鹽的制備
[0149] 將L-賴氨酸單水合物（399±2mg)懸浮在20mL snap cap小瓶中的醇（表9)中，將 15- (S) -HETrE (803 ± 2mg)溶解在非極性溶劑(4mL)中并添加至賴氨酸的攪拌懸浮液，再使 用非極性溶劑(2mL)來沖洗HETrE小瓶并添加至賴氨酸/HETrE懸浮液。然后添加余量的非極 性溶劑(所添加溶劑總體積為8mL)，對于實驗3至10在此時添加晶種，并在250rpm下攪拌過 夜。
[0150] 反應編號1和2未被接種；反應編號3至10利用從反應編號1的濾餅獲得的晶種接 種。
[0151] 每個反應的產物外觀是白色的。利用燒結漏斗(3號，10_直徑)在輕度真空下進行 過濾。一些濾餅產物外觀是黃色的。將約200yL的第一濾液轉移至HPLC小瓶中。剩余反應混 合物的過濾(在高真空與中度真空之間交替)得到濾餅，將其轉移至真空腔室并干燥過夜， 然后儲存在冷凍器中。鹽本身不溶于氯仿和DMS0中，但易溶于水中。
[0152] 通過將賴氨酸的α質子校準為1，使用在D20中的NMR分析來確定鹽的賴氨酸含量 (表 10)〇
[0153] 反應的觀測結果總結于表11中。
過濾時間:濾餅達到半干狀態(tài)(不濕)的時間 濾餅外觀:干燥后的濾餅外觀，《=白色，y =黃色(濾餅顏色），H=堅硬，P =粉末狀 衆(zhòng)液迀移性:1 =稀薄，流動性很大，2 =中等濃稠，流動，3 =濃稠，但大部分在沖洗之前 轉移，4 =濃稠，不容易轉移，5 =非常濃稠，在無新鮮稀釋劑的情況下不流動 排放(抽吸過濾）：1 =容易，2 =中等，3 =困難，4 =無
[0154] 反應編號1至10的雜質概況示于表12中。 表12.雜質概況
實施例17:甲醇作為共溶劑的研究
[0155]基于實施例16的結果，研究了甲醇與乙酸乙酯或乙酸異丙酯的比率以確定對15-(S)-HETrE產率的影響，如表13中所示。 表13.
[0156] 反應的結果總結于表14中。 表14.
* =最初通過較大的過濾器過濾反應物，但轉移至較小的燒結漏斗。 # =濾餅在濾餅邊緣具有黃色堅硬特性。 過濾時間:濾餅達到半干狀態(tài)(不濕)的時間 濾餅外觀:干燥后的濾餅外觀，《=白色，y =黃色(濾餅顏色），H=堅硬，P =粉末狀 衆(zhòng)液迀移性:1 =稀薄，流動性很大，2 =中等濃稠，流動，3 =濃稠，但大部分在沖洗之前 轉移，4 =濃稠，不容易轉移，5 =非常濃稠，在無新鮮稀釋劑的情況下不流動 排放(抽吸過濾）：1 =容易，2 =中等，3 =困難，4 =無
[0157] 實驗的賴氨酸鹽和液體部分的雜質概況總結于表15中。 表15.雜質概況
實施例18.賴氨酸與15- (S) -HETrE的比率
[0158] 使用實施例16的方案研究了賴氨酸與15-(S)-HETrE的比率的影響。所用的賴氨酸 與15-(S)-HETrE的初始比率示于表16中。 表16.
[0159] 六個反應的結果總結于表17中。 表17.
過濾時間:濾餅達到半干狀態(tài)(不濕)的時間 濾餅外觀:干燥后的濾餅外觀，《=白色，y =黃色(濾餅顏色），H=堅硬，P =粉末狀 衆(zhòng)液迀移性:1 =稀薄，流動性很大，2 =中等濃稠，流動，3 =濃稠，但大部分在沖洗之前 轉移，4 =濃稠，不容易轉移，5 =非常濃稠，在無新鮮稀釋劑的情況下不流動
[0160] 如表18中所示，通過NMR測定賴氨酸與15- (S) -HETrE的最終比率。 表18.
[0161] 六個反應的雜質概況示于表19中。 表19.雜質概況
實施例19.在15- (S) -HETrE成鹽條件下去除DGLA
[0162] 為了確定成鹽條件是否可同時從反應混合物中清除殘余DGLA，將根據表20的各種 溶劑體系中的DGLA的量摻雜到15-(S)-HETrE中，然后根據實施例16添加甲醇賴氨酸。 表20.
[0163] 六個反應的結果總結于表21中。 表21 ·
過濾時間:濾餅達到半干狀態(tài)(不濕)的時間 濾餅外觀:干燥后的濾餅外觀，《=白色，y =黃色(濾餅顏色），H=堅硬，P =粉末狀 衆(zhòng)液迀移性:1 =稀薄，流動性很大，2 =中等濃稠，流動，3 =濃稠，但大部分在沖洗之前 轉移，4 =濃稠，不容易轉移，5 =非常濃稠，在無新鮮稀釋劑的情況下不流動
[0164] 如表22中所示，通過NMR測定賴氨酸與15-(S)-HETrE的最終比率。 表22.
[0165] 六個反應的雜質數據示于表23中。 表23.雜質數據
[0166] 如表24中所示，通過CAD測定15-(S)-HETrE賴氨酸鹽的DGLA含量。 表24. 15-(S)-HETrE賴氨酸鹽的DGLA含量
實施例20.再制漿實驗
[0167] 進行實驗來確定在暴露于乙酸乙酯后15-(S)_HETrE與賴氨酸的比率是否將改變。 將15-(S)-HETrE賴氨酸鹽（1 OOmg)懸浮在HPLC級乙酸乙酯（lmL)中并在室溫下劇烈攪拌過 夜。然后如先前實施例中所述過濾懸浮液。起始15-(S)-HETrE賴氨酸鹽（"制衆(zhòng)前"）和制漿 的過濾鹽（"再制漿后"）的雜質概況示于表25中。 表25 ·

[0168] NMR光譜分析證實15-( S) -HETrE:賴氨酸的比率無變化。 實施例21. 15-(S)-HETrE賴氨酸鹽的溶劑誘導降解
[0169] 進行實驗來確定15-(S)-HETrE賴氨酸鹽當與乙酸乙酯或甲醇接觸時的降解(如果 存在的話）。將15-(S)-HETrE賴氨酸鹽(1 OOmg)溶解在溶劑（lmL)中并攪拌過夜。所得混合物 相比于原始15-(S)-HETrE賴氨酸鹽的UPLC分析示于表26中。
實施例22.接種時間選擇
[0170] 進行實驗來確定有效添加晶種的時間選擇。設置與實施例16類似的兩個實驗。將 溶解在乙酸乙酯中的15-(S)-HETrE以總乙酸乙酯進料百分比形式添加(參見表27)，并且添 加至賴氨酸水合物(399±2mg)于甲醇（1.2mL)中的攪拌懸浮液中并觀測一段時間。
[0171] 在實驗1和2的每個中，向賴氨酸懸浮液添加15-(S)-HETrE溶液產生粘稠非流動懸 浮液。 實施例23. 15-(S)-HETrE甲酯的制備
[0172] 通過將15-(S)-HETrE(100mg)、碳酸鉀（129mg，3當量）和碘代甲烷（220mg，5當量） 組合在DMF(0.5mL)中來制備15-(S) -HETrE甲酯。將混合物在室溫下攪拌18小時。在用水 (5mL)淬滅后，用MtBE(2X5mL)萃取有機相并且將合并的有機相用鹽水(5mL)洗滌，干燥并 濃縮。 實施例24. 15-(S)-HETrE賴氨酸鹽的制備
[0173] 進行一系列實驗來確定各種工藝參數。
[0174] 反應021-A:懸浮在甲醇中的L-賴氨酸
[0175] 將L-賴氨酸單水合物(798 ± 2mg)懸浮在充氮的50mL三頸圓底燒瓶(RBF)中的脫氣 甲醇(3.2mL)中。將15-(S)-HETrE(1606±2mg)溶解在脫氣乙酸乙酯（12.8mL)中并添加至賴 氨酸的攪拌懸浮液。隨后添加晶種（l〇〇mg)并在250rpm下攪拌過夜。將懸浮液在氮氣下通過 3號燒結玻璃漏斗(40mm直徑)過濾并用乙酸乙酯（12mL，3 X 4mL)份洗滌。
[0176] 反應021-B:懸浮在乙酸乙酯中的L-賴氨酸
[0177] 將L-賴氨酸單水合物（798 ± 2mg)懸浮在充氮的50mL三頸RBF中的脫氣乙酸乙酯 (12.8mL)中。將15-(S)-HETrE (1606 ± 2mg)溶解在脫氣甲醇(3.2mL)中并添加至賴氨酸的攪 拌懸浮液。隨后添加晶種（l〇〇mg)并在250rpm下攪拌過夜。將懸浮液在氮氣下通過3號燒結 玻璃漏斗(40mm直徑)過濾并用乙酸乙酯（12mL，3 X 4mL)份洗滌。
[0178] 反應 021-C:添加熱 15-(S)_HETrE
[0179] 如上述進行實驗，不同之處在于將15-(S)_HETrE溶液加熱至45°C，然后添加至賴 氨酸懸浮液中。
[0180] 反應021-D:向熱賴氨酸懸浮液添加15-(S)-HETrE
[0181] 如上述進行實驗，不同之處在于將賴氨酸懸浮液加熱至45°C持續(xù)15分鐘以平衡， 然后添加15-(S)-HETrE溶液。然后添加晶種（100mg)，并且將混合物攪拌5分鐘并使其在油 浴中冷卻至室溫。
[0182] 反應021-E:不添加晶種
[0183]進行與反應021-D相同的實驗，不同之處在于不添加晶種。
[0184] 反應021-F:另外的溫度循環(huán)
[0185] 利用如下另一種溫度循環(huán)來重復反應021-E:在45°C下發(fā)生成鹽后，將混合物冷卻 至20°C，然后再加熱至45°C并保持2小時。最后冷卻至20°C過夜。
[0186] 反應021-G:另外的攪拌時間
[0187] 重復反應021-E，不同之處在于將混合物從45°C冷卻至20°C并攪拌6小時，然后收 集15-(S)-HETrE賴氨酸鹽。
[0188] 反應021-A至021-G的結果示于表28中。 表28.
[0189] 如表29中所示，通過NMR測定賴氨酸與15-( S) -HETrE的比率。 表29.
[0190] 每個反應的雜質概況示于表30中。 表30.雜質概況
[0191] 將反應021-D中制備的鹽(400mg)在乙酸乙酯/甲醇（80/20,2mL)中在以下條件下 再制漿： 021-D-A:在20。(:下攪拌6小時。 021-D-B:在使溫度從20 °C勻變到45 °C的同時攪拌，然后在45 °C下攪拌2小時，然后冷卻 至20°C (總攪拌時間：6小時）。
[0192] NMR和雜質數據分別示于表31和表32中。 表31 ·
表32.
[0193]重復反應021-D和021-E，其中使用加壓過濾器進行最終鹽的過濾。鹽的產率和純 度、NMR數據和雜質概況分別示于表33-35中。 表33.
實施例25.洗滌溶劑
[0194] 進行實驗來確定不同洗滌溶劑(參見表36)對15-(S)-HETrE賴氨酸鹽的產率和純 度的影響。
[0195] NMR和雜質數據分別示于表37和38中。
實施例26.乙酸異丙酯
[0196] 進行實驗來檢查在使15-(S)-HETrE暴露于乙酸異丙酯后是否將觀測到任何降解。 將15- (S) -HETrE (1 OOmg)溶解在乙酸異丙酯（lmL)中并攪拌過夜。將此直接取樣用于UPLC分 析(表39)。 表39.
實施例27.半純化和粗制15-(S)-HETrE的賴氨酸鹽形成
[0197] 進行實驗來確定鹽形成對15-(S)-HETrE原料純度的影響?；谌缤ㄟ^UPLC分析所 測定的15- (S) -HETrE純度來調整所用賴氨酸的量。將15- (S) -HETrE (10g)裝載在預濕柱上 并用環(huán)己烷:MtBE(50:50)(350mL)洗脫直至15-(S)-HETrE斑點根據TLC不再是顯而易見的。 將相關級分濃縮。產率和純度數據示于表40中；NMR和雜質概況分別示于表41-42中。

實施例28.在0 °C下的成鹽
[0198] 將L-賴氨酸單水合物(820mg)懸浮在25mL RBF中的乙酸乙酯(脫氣，3.2mL)中并加 熱至45°C。將15-(S)-HETrE(1606 ± 2mg)溶解在甲醇（12.8mL)中并添加至賴氨酸的攪拌懸 浮液。使懸浮液在油浴中冷卻至室溫并且然后將燒瓶轉移至水浴并經一段時間冷卻至〇°C， 此后將其再攪拌2小時。通過壓力過濾收集鹽并用母液洗滌。產率和過濾性能數據示于表43 中。
實施例29.在甲醇或乙醇中的成鹽
[0199] 將L-賴氨酸單水合物(399±2mg)懸浮在20mL snap cap小瓶中的1.6mL甲醇(反應 031-A)或乙醇（反應031-B)中，將15-(S)-HETrE(803±2mg)溶解在相同的醇（6.4mL)中并添 加至賴氨酸的攪拌懸浮液，并在250rpm下攪拌過夜。在甲醇溶劑體系中未觀測到成鹽。用來 自先前實驗的鹽接種不誘導成鹽。在乙醇體系中形成賴氨酸鹽。產率和純度數據示于表44 中；NMR和雜質概況分別不于表45-46中。

實施例30.來自各種15- (S) -HETrE原料的雜質概況
[0200]根據與實施例16-致的方法從具有不同純度水平的15-(S)-HETrE原料(下文縮寫 為"FA"）來制備15-(S)-HETrE賴氨酸鹽。如通過UPLC所測定，所得賴氨酸鹽（下文縮寫為 "HLS"）的雜質概況示于表47中。 表47.雜質概況
表47注釋： (1) 在柱色譜法期間清除的雜質。 (2) 在成鹽后濃度降低的雜質。 其他實施例 其他實施例1: 一種15-脂氧合酶產物的鹽。 其他實施例2:如其他實施例1所述的鹽，其中所述鹽是藥學上可接受的鹽。 其他實施例3:如其他實施例1或其他實施例2所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧 合酶產物的賴氨酸鹽。 其他實施例4:如其他實施例1至3中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧 合酶產物的鈉鹽。 其他實施例5:如其他實施例1至4中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧 合酶產物的鳥氨酸鹽。 其他實施例6:如其他實施例1至5中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧 合酶產物的哌嗪鹽。 其他實施例7:如其他實施例1至6中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧 合酶產物的葡甲胺鹽。 其他實施例8:如其他實施例1至7中的任一項所述的鹽，其還包含呈游離酸形式的所述 15-脂氧合酶產物。 其他實施例9:如其他實施例1至8中的任一項所述的鹽，其中所述鹽選自：鈉、賴氨酸、 鳥氨酸、哌嗪、葡甲胺和其組合。 其他實施例10:如其他實施例1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是鈉。 其他實施例11:如其他實施例1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是賴氨酸。 其他實施例12:如其他實施例1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是鳥氨酸。 其他實施例13:如其他實施例1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是哌嗪。 其他實施例14:如其他實施例1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是葡甲胺。 其他實施例15:如其他實施例1至14中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物 選自：13-HODE、15-HETrE、15-OHEPA、15-HETE和其組合。 其他實施例16:如其他實施例1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物 是13-HODE。 其他實施例17:如其他實施例1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物 是15-HETrE。 其他實施例18:如其他實施例1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物 是15-OHEPA。 其他實施例19:如其他實施例1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物 是15-HETE。 其他實施例20: -種13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸鈉鹽。 其他實施例21:-種13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸賴氨酸鹽。 其他實施例22: -種13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸鳥氨酸鹽。 其他實施例23: -種13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸哌嗪鹽。 其他實施例24: -種13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸葡甲胺鹽。 其他實施例25:-種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸鈉鹽。 其他實施例26:-種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸賴氨酸鹽。 其他實施例27:-種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸鳥氨酸鹽。 其他實施例28:-種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸哌嗪鹽。 其他實施例29:-種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸葡甲胺鹽。 其他實施例30:-種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鈉 鹽。 其他實施例31:-種15-過氧羥基-二十碳_5(2)，8(2)，11(2)，13化），17(2)_五烯酸賴 氨酸鹽。 其他實施例32:-種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鳥 氨酸鹽。 其他實施例33:-種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸哌 嗪鹽。 其他實施例34:-種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸葡 甲胺鹽。 其他實施例35:-種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鈉鹽。 其他實施例36:-種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸賴氨酸鹽。 其他實施例37:-種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鳥氨酸鹽。 其他實施例38:-種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸哌嗪鹽。 其他實施例39:-種15-過氧羥基_5,8,11，13-二十碳四烯酸葡甲胺鹽。 其他實施例40: -種13-過氧羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸鈉鹽。 其他實施例41: 一種13-羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸賴氨酸鹽。 其他實施例42: -種13-羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸鳥氨酸鹽。 其他實施例43: -種13-羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸哌嗪鹽。 其他實施例44: 一種13-羥基十八碳-9Z，11E-二烯酸葡甲胺鹽。 其他實施例45:-種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸鈉鹽。 其他實施例46:-種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸賴氨酸鹽。 其他實施例47:-種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸鳥氨酸鹽。 其他實施例48:-種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸哌嗪鹽。 其他實施例49: 一種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸葡甲胺鹽。 其他實施例50:-種15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鈉鹽。 其他實施例51:-種15-羥基-二十碳_5(2)，8(2)，11(2)，13化），17(2)_五烯酸賴氨酸 鹽。 其他實施例52:-種15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鳥氨酸 鹽。 其他實施例53:-種15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸哌嗪鹽。 其他實施例54:-種15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，11(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸葡甲胺 鹽。 其他實施例55:-種15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鈉鹽。 其他實施例56:-種15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸賴氨酸鹽。 其他實施例57:-種15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鳥氨酸鹽。 其他實施例58:-種15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸哌嗪鹽。 其他實施例59:-種15-羥基-5，8,11，13-二十碳四烯酸葡甲胺鹽。 其他實施例60: -種組合物，其包含如其他實施例1至59中的任一項所述的鹽。 其他實施例61:-種藥物組合物，其包含15-脂氧合酶產物的鹽形式。 其他實施例62:如其他實施例61所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形 式包含如其他實施例1至59中的任一項所述的鹽。 其他實施例63:如其他實施例61或其他實施例62所述的藥物組合物，其還包含賦形劑。 其他實施例64:如其他實施例61至63中的任一項所述的藥物組合物，其中在儲存至少 約4周后，所述藥物組合物包含至少約98 %、至少約99 %或約100 %的初始量的所述15-脂氧 合酶產物的鹽形式。 其他實施例65:如其他實施例61至64中的任一項所述的藥物組合物，其中在儲存至少 約10周后，所述藥物組合物包含至少約90%、至少約91 %、至少約92%、至少約93 %、至少約 94%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%或約100%的初始量 的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式。 其他實施例66:如其他實施例61至65中的任一項所述的藥物組合物，其中在儲存至少 約24周后，所述藥物組合物包含至少約86%、至少約87%、至少約88%、至少約89%、至少約 90%、至少約91 %、至少約92%、至少約93 %、至少約94%、至少約95%、至少約96%、至少約 97%、至少約98%、至少約99%或約100%的初始量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式。 其他實施例67:如其他實施例64至66中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組 合物被儲存在2-8 °C下、在20 °C下、在25 °C下或在40 °C下。 其他實施例68:如其他實施例64至67中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組 合物被儲存在60 % RH下或在75 % RH下。 其他實施例69:如其他實施例61至68中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組 合物包含治療有效量的所述15-脂氧合酶產物的鹽。 其他實施例70:如其他實施例69所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形 式的所述治療有效量是約〇. 1重量％至約20重量％。 其他實施例71:如其他實施例61至70中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組 合物呈適合局部施用的形式。 其他實施例72:如其他實施例61至71中的任一項所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧 合酶產物的鹽形式是所述藥物組合物中的唯一顯著活性成分或唯一活性成分。 其他實施例73:如其他實施例61至71中的任一項所述的藥物組合物，其還包含另一種 活性劑。 其他實施例74:如其他實施例73所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形 式和所述另外的活性劑被共配制成單一劑量單位。 其他實施例75:如其他實施例73所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形 式和所述另外的活性劑被配制成至少兩種劑量單位以用于配合、組合或相伴施用。 其他實施例76:-種治療有需要的個體中的疾病或病癥的方法，所述方法包括向所述 個體施用如其他實施例61至75中的任一項所述的藥物組合物。 其他實施例77:如其他實施例76所述的方法，其中所述疾病或病癥選自：痤瘡、紅斑、感 染、脂肪肝、神經病和皮膚炎癥。 其他實施例78:如其他實施例76或其他實施例77所述的方法，其中所述藥物組合物以 足以提供治療有效量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式的量施用至所述個體。 其他實施例79:如其他實施例78所述的方法，其中所述治療有效量是約0.001毫克/千 克/天至約100毫克/千克/天。
【主權項】
1. 一種15-脂氧合酶產物的鹽。2. 如權利要求1所述的鹽，其中所述鹽是藥學上可接受的鹽。3. 如權利要求1或權利要求2所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧合酶產物的賴氨 酸鹽。4. 如權利要求1至3中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧合酶產物的鈉 鹽。5. 如權利要求1至4中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧合酶產物的鳥 氨酸鹽。6. 如權利要求1至5中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧合酶產物的哌 嗪鹽。7. 如權利要求1至6中的任一項所述的鹽，其中所述鹽包含所述15-脂氧合酶產物的葡 甲胺鹽。8. 如權利要求1至7中的任一項所述的鹽，其還包含呈游離酸形式的所述15-脂氧合酶 產物。9. 如權利要求1至8中的任一項所述的鹽，其中所述鹽選自：鈉、賴氨酸、鳥氨酸、哌嗪、 葡甲胺和其組合。10. 如權利要求1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是鈉。11. 如權利要求1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是賴氨酸。12. 如權利要求1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是鳥氨酸。13. 如權利要求1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是哌嗪。14. 如權利要求1至9中的任一項所述的鹽，其中所述鹽是葡甲胺。15. 如權利要求1至14中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物選自：13-HODE、 15-HETrE、15-OHEPA、15-HETE 和其組合。16. 如權利要求1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物是13-HODE。17. 如權利要求1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物是15-HETrE。18. 如權利要求1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物是15-OHEPA。19. 如權利要求1至15中的任一項所述的鹽，其中所述15-脂氧合酶產物是15-HETE。20. -種13-過氧羥基十八碳-9Z，IIE-二烯酸鈉鹽。21. -種13-過氧羥基十八碳-9Z，IIE-二烯酸賴氨酸鹽。22. -種13-過氧羥基十八碳-9Z，IlE-二烯酸鳥氨酸鹽。23. -種13-過氧羥基十八碳-9Z，IlE-二烯酸哌嗪鹽。24. -種13-過氧羥基十八碳-9Z，IIE-二烯酸葡甲胺鹽。25. -種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)_三烯酸鈉鹽。26. -種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)-三烯酸賴氨酸鹽。27. -種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z) ,13(E)-三烯酸鳥氨酸鹽。28. -種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，Il(Z) ,13(E)-三烯酸哌嗪鹽。29. -種15-過氧羥基-二十碳-8(Z)，11(Z) ,13(E)-三烯酸葡甲胺鹽。30. -種 15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鈉鹽。31. -種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸賴氨酸鹽。32. -種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鳥氨酸鹽。33. -種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸哌嗪鹽。34. -種15-過氧羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸葡甲胺鹽。35. -種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鈉鹽。36. -種15-過氧羥基-5,8,11，13-二十碳四稀酸賴氨酸鹽。37. -種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鳥氨酸鹽。38. -種15-過氧羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸哌嗪鹽。39. -種15-過氧羥基_5,8,11，13-二十碳四烯酸葡甲胺鹽。40. -種13-過氧羥基十八碳-9Z，IIE-二烯酸鈉鹽。41. 一種13-羥基十八碳-9Z, IlE-二烯酸賴氨酸鹽。42. -種13-羥基十八碳-9Z, IlE-二烯酸鳥氨酸鹽。43. -種13-羥基十八碳-9Z, IlE-二烯酸哌嗪鹽。44. 一種13-羥基十八碳-9Z，IIE-二烯酸葡甲胺鹽。45. -種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)_三烯酸鈉鹽。46. -種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)_三烯酸賴氨酸鹽。47. -種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)_三烯酸鳥氨酸鹽。48. -種15-羥基-二十碳-8(Z)，Il(Z) ,13(E)-三烯酸哌嗪鹽。49. 一種15-羥基-二十碳-8(Z)，11(Z)，13(E)_三烯酸葡甲胺鹽。50. -種 15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鈉鹽。51. -種 15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸賴氨酸鹽。52. -種 15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸鳥氨酸鹽。53. -種 15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸哌嗪鹽。54. -種 15-羥基-二十碳-5(Z)，8(Z)，Il(Z)，13(E)，17(Z)_五烯酸葡甲胺鹽。55. -種15-羥基_5,8,11,13-二十碳四烯酸鈉鹽。56. -種15-羥基-5,8,11，13-二十碳四稀酸賴氨酸鹽。57. -種15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸鳥氨酸鹽。58. -種15-羥基-5，8，11，13-二十碳四烯酸哌嗪鹽。59. -種15-羥基_5,8,11，13-二十碳四烯酸葡甲胺鹽。60. -種組合物，其包含如權利要求1至59中的任一項所述的鹽。61. -種藥物組合物，其包含15-脂氧合酶產物的鹽形式。62. 如權利要求61所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形式包含如權利 要求1至59中的任一項所述的鹽。63. 如權利要求61或權利要求62所述的藥物組合物，其還包含賦形劑。64. 如權利要求61至63中的任一項所述的藥物組合物，其中在儲存至少約4周后，所述 藥物組合物包含至少約98%、至少約99 %或約100 %的初始量的所述15-脂氧合酶產物的鹽 形式。65. 如權利要求61至64中的任一項所述的藥物組合物，其中在儲存至少約10周后，所述 藥物組合物包含至少約90 %、至少約91 %、至少約92 %、至少約93 %、至少約94%、至少約 95%、至少約96%、至少約97 %、至少約98%、至少約99%或約100 %的初始量的所述15-月旨 氧合酶產物的鹽形式。66. 如權利要求61至65中的任一項所述的藥物組合物，其中在儲存至少約24周后，所述 藥物組合物包含至少約86 %、至少約87 %、至少約88 %、至少約89 %、至少約90 %、至少約 91 %、至少約92%、至少約93%、至少約94%、至少約95 %、至少約96%、至少約97 %、至少約 98 %、至少約99 %或約100 %的初始量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式。67. 如權利要求64至66中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物被儲存在 2-8°C下、在20°C下、在25°C下或在40°C下。68. 如權利要求64至67中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物被儲存在 60 % RH下或在75 % RH下。69. 如權利要求61至68中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物包含治療 有效量的所述15-脂氧合酶產物的鹽。70. 如權利要求69所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形式的所述治療 有效量是約0.1重量％至約20重量％。71. 如權利要求61至70中的任一項所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物呈適合局 部施用的形式。72. 如權利要求61至71中的任一項所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽 形式是所述藥物組合物中的唯一顯著活性成分或唯一活性成分。73. 如權利要求61至71中的任一項所述的藥物組合物，其還包含另一種活性劑。74. 如權利要求73所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形式和所述另外 的活性劑被共配制成單一劑量單位。75. 如權利要求73所述的藥物組合物，其中所述15-脂氧合酶產物的鹽形式和所述另外 的活性劑被配制成至少兩種劑量單位以用于配合、組合或相伴施用。76. -種治療有需要的個體中的疾病或病癥的方法，所述方法包括向所述個體施用如 權利要求61至75中的任一項所述的藥物組合物。77. 如權利要求76所述的方法，其中所述疾病或病癥選自：痤瘡、紅斑、感染、脂肪肝、神 經病和皮膚炎癥。78. 如權利要求76或權利要求77所述的方法，其中所述藥物組合物以足以提供治療有 效量的所述15-脂氧合酶產物的鹽形式的量施用至所述個體。79. 如權利要求78所述的方法，其中所述治療有效量是約0.001毫克/千克/天至約100 毫克/千克/天。
【文檔編號】C07C241/04GK105899485SQ201480071412
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2014年11月17日
【發(fā)明人】M·曼庫, D·考夫蘭, B·唐斯
【申請人】尊嚴科學有限公司