丹參中原兒茶醛的分離提純方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種從中藥丹參藥材中提取高純度原兒茶醛的制 備方法。 技術(shù)背景
[0002] 原兒茶酸（Protocatechuicaldehyde)，異名冠心寧，為丹參水溶性活性成分之 一，其結(jié)構(gòu)為：
[0004] 原兒茶醛物理性質(zhì)：淡米色針狀結(jié)晶（水或甲苯）或灰白色粉末，雙晶形；熔點(diǎn) (m.p.)153°C_154°C;K= 2.8X10S(25°C);易溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯、乙醚和熱水；溶 于冷水；不溶于苯和氯仿；在水中的溶解度（g/l〇〇ml):5(20°C) ;33(99°C);在乙醇中的溶 解度：79(78°C);有引濕性，在水中易氧化變色。現(xiàn)代藥理研究表明：原兒茶醛有以下藥理 活性：1、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠脈血流量作用；2、對(duì)心臟和外周血管的作用：抗心肌缺血的 主要成分。3、抑制血小板聚集作用；4、具有廣譜抗菌抗炎作用等；5、抗氧化作用；6、對(duì)腦組 織缺血、再灌注損傷的保護(hù)作用；7、增強(qiáng)耐缺氧能力改善腎功能；8、鈣拮抗作用；9、修復(fù)受 損靜脈瓣膜，治療靜脈曲張。臨床應(yīng)用：活血化淤，通脈養(yǎng)心，用于冠心病、胸悶、心絞痛等。 因此原兒茶醛在醫(yī)藥方面具有廣泛的開發(fā)價(jià)值。同時(shí)它作為一種常用的合成原料藥，在純 度上也有很高的要求。
[0005] 文獻(xiàn)中關(guān)于丹參中高純度原兒茶醛的制備方法，尤其是適合工業(yè)放大生產(chǎn)的方 法極為少見。姚俊嚴(yán)和陳政雄等用乙醚萃取的方法從丹參和丹參制劑中得到了少量的原 兒茶醛，以供試驗(yàn)，但是由于沒有系統(tǒng)的工藝考察，因此不能稱之為制備方法。中國(guó)專利 CN1161954公開了一種從丹參中制備原兒茶醛的方法，采用簡(jiǎn)單的兩步層析法處理，無法達(dá) 到高純度的要求。目前現(xiàn)有制備方法得到的原兒茶醛純度低，雜質(zhì)多，穩(wěn)定性差存在諸多缺 點(diǎn)，長(zhǎng)期以來未能很好的解決。
[0006] 本發(fā)明目的在于解決上述問題，提供一種從丹參原兒茶醛的分離提純方法。
[0007] 丹參原兒茶醛的分離提純方法，包括以下步驟：
[0008] (1)將丹參飲片擇凈，烘干后，粉碎后過100目篩；
[0009] (2)將上述中藥粉末置入雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH值后加入與中藥粉末重量份數(shù)比為 100:1-1. 8的纖維素酶靜置30-60分鐘后，再加入2倍中藥粉末重量的冰塊，混合后得混合 液A;
[0010] (3)將混合液A置入超聲儀中間斷超聲，每隔4-8分鐘暫停30秒鐘，超聲10-30分 鐘后室溫下靜置12小時(shí)，如此反復(fù)超聲3次后，收集上清液得混合液B;
[0011] (4)將混合液B加熱回流，得回流液C，立即在冰浴條件下攪拌流液C，直至結(jié)晶不 再出現(xiàn)為止，過濾并收集結(jié)晶，真空干燥，得原兒茶醛純品。
[0012] 優(yōu)選的，所述步驟（2)中混合溶液pH為6-7. 5,所用pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、碳酸氫 鈉或碳酸鈉。
[0013] 優(yōu)選的，所述步驟（3)超聲波的超聲頻率是40-45KHZ。
[0014]優(yōu)選的，上述原兒茶醛的的收率為4. 9 ±0. 04 %，純度為99. 8 ±0. 01%。
[0015] 本發(fā)明的有益效果是：
[0016] 1、本發(fā)明根據(jù)原兒茶醛的物性設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)了一套針對(duì)丹參原兒茶醛的分離提純 制備工藝，利用提純產(chǎn)物溶于冷水的特性，在常壓低溫狀態(tài)下，高熱高濃度的原兒茶醛會(huì)隨 著溫度的驟降而溶解度降低，析出，避免了使用乙醇易爆溶劑、苯或氯仿等有毒溶劑，避免 引發(fā)生產(chǎn)安全事故。
[0017] 2、本發(fā)明提取過程中使用冰塊降溫，極大地降低了因產(chǎn)生頻率過高，引發(fā)溫度驟 升對(duì)除原兒茶醛外的其他水溶性活性物質(zhì)的破壞作用，降低中藥材的生物利用度，同時(shí)也 保證了生產(chǎn)過程的安全，避免瞬間高熱引發(fā)安全事故。
[0018] 3、本發(fā)明制備時(shí)間短，可為企業(yè)有效降低成本。
[0019] 本發(fā)明的制備方法是經(jīng)過不斷篩選得來的，與現(xiàn)有技術(shù)相比較，制備工藝操作簡(jiǎn) 單，制備過程安全，無毒，用料成本低，適合大規(guī)模生產(chǎn)，制備后得到的原兒茶醛純度高，雜 質(zhì)少，穩(wěn)定性好，符合國(guó)家用藥標(biāo)準(zhǔn)。
【附圖說明】
[0020] 圖1是實(shí)施例1丹參乙酸鎂和原兒茶醛混合對(duì)照品圖圖譜
[0021 ] 圖2是實(shí)施例1丹參提取物-原兒茶醛UPLC圖譜
[0022] 其中，1為丹參乙酸鎂峰圖，2為原兒茶醛峰圖。
【具體實(shí)施方式】：
[0023] 為便于本發(fā)明技術(shù)方案的理解，下面結(jié)合具體的實(shí)施方式進(jìn)行介紹。
[0024] 實(shí)施例1
[0025] 丹參原兒茶醛的分離提純方法，包括以下步驟：
[0026](1)將丹參飲片擇凈，烘干后，粉碎后過100目篩；
[0027] (2)將上述中藥粉末100g置入雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH值為7. 5后加入與中藥粉末重量 份數(shù)比為1. 5g纖維素酶靜置45分鐘后,再加入200g冰塊，混合后得混合液A;
[0028] ⑶將混合液A置入超聲儀中間斷超聲，超聲頻率為43KHz，每隔6分鐘暫停30秒 鐘，超聲20分鐘后室溫下靜置12小時(shí)，如此反復(fù)超聲3次后，收集上清液得混合液B;
[0029] (4)將混合液B加熱到99°C回流，得回流液C，立即在冰浴條件下攪拌流液C，直至 結(jié)晶不再出現(xiàn)為止，過濾并收集結(jié)晶體，真空干燥，得原兒茶醛純品。
[0030] 優(yōu)選的，上述原兒茶醛的的收率為4. 9%，純度為99. 9%。
[0031] 實(shí)施例2
[0032] 丹參原兒茶醛的分離提純方法，包括以下步驟：
[0033] (1)將丹參飲片擇凈，烘干后，粉碎后過100目篩；
[0034] (2)將上述中藥粉末100g置入雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH值為6后加入lg的纖維素酶靜 置60分鐘后,再加入200g冰塊，混合后得混合液A;
[0035] ⑶將混合液A置入超聲儀中間斷超聲，超聲頻率為40KHz，每隔4分鐘暫停30秒 鐘，超聲30分鐘后室溫下靜置12小時(shí)，如此反復(fù)超聲3次后，收集上清液得混合液B;
[0036] (4)將混合液B加熱到99°C回流，得回流液C，立即在冰浴條件下攪拌流液C，直至 結(jié)晶不再出現(xiàn)為止，過濾并收集結(jié)晶體，真空干燥，得原兒茶醛純品。
[0037] 優(yōu)選的，上述原兒茶醛的的收率為4. 92%，純度為99. 8%。
[0038] 實(shí)施例3
[0039] 丹參原兒茶醛的分離提純方法，包括以下步驟：
[0040] ⑴將丹參飲片擇凈，烘干后，粉碎后過100目篩；
[0041] (2)將上述中藥粉末100g置入雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH值為7后加入1. 8g的纖維素酶 靜置50分鐘后,再加入200g冰塊，混合后得混合液A;
[0042] ⑶將混合液A置入超聲儀中間斷超聲，超聲頻率為45KHz，每隔8分鐘暫停30秒 鐘，超聲10分鐘后室溫下靜置12小時(shí)，如此反復(fù)超聲3次后，收集上清液得混合液B;
[0043] (4)將混合液B加熱到99°C回流，得回流液C，立即在冰浴條件下攪拌流液C，直至 結(jié)晶不再出現(xiàn)為止，過濾并收集結(jié)晶體，真空干燥，得原兒茶醛純品。
[0044] 優(yōu)選的，上述原兒茶醛的的收率為4. 91%，純度為99. 7%。
[0045] 實(shí)施例4
[0046] 丹參原兒茶醛的分離提純方法，包括以下步驟：
[0047] (1)將丹參飲片擇凈，烘干后，粉碎后過100目篩；
[0048] (2)將上述中藥粉末100g置入雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH值為7后加入1. 8g的纖維素酶 靜置45分鐘后,再加入200g冰塊，混合后得混合液A;
[0049] ⑶將混合液A置入超聲儀中間斷超聲，超聲頻率為40KHz，每隔8分鐘暫停30秒 鐘，超聲20分鐘后室溫下靜置12小時(shí)，如此反復(fù)超聲3次后，收集上清液得混合液B;
[0050] (4)將混合液B加熱到99°C回流，得回流液C，立即在冰浴條件下攪拌流液C，直至 結(jié)晶不再出現(xiàn)為止，過濾并收集結(jié)晶體，真空干燥，得原兒茶醛純品。
[0051] 優(yōu)選的，上述原兒茶醛的的收率為4. 89%，純度為99. 8%。
[0052] 上述技術(shù)方案僅體現(xiàn)了本發(fā)明技術(shù)方案的優(yōu)選技術(shù)方案，本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員 對(duì)其中某些部分所可能做出的一些變動(dòng)均體現(xiàn)了本發(fā)明的原理，屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍之 內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 丹參中原兒茶醛的分離提純方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 將丹參飲片擇凈，烘干后，粉碎后過100目篩； (2) 將上述中藥粉末置入雙蒸水中，調(diào)節(jié)pH值后加入與中藥粉末重量份數(shù)比為 100:1-1. 8的纖維素酶靜置30-60分鐘后，再加入2倍中藥粉末重量的冰塊，混合后得混合 液A; ⑶將混合液A置入超聲儀中間斷超聲，每隔4-8分鐘暫停30秒鐘，超聲10-30分鐘后 室溫下靜置12小時(shí)，如此反復(fù)超聲3次后，收集上清液得混合液B; (4)將混合液B加熱回流，得回流液C，立即在冰浴條件下攪拌流液C，直至結(jié)晶不再出 現(xiàn)為止，過濾并收集結(jié)晶，真空干燥，得原兒茶醛純品。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參中原兒茶醛的分離提純方法，其特征在于所述步驟（2) 中混合溶液pH為6-7. 5,所用pH調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、碳酸氫鈉或碳酸鈉。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參中原兒茶醛的分離提純方法，其特征在于所述步驟（3) 超聲波的超聲頻率是40-45KHZ。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的丹參中原兒茶醛的分離提純方法，其特征在于所述 原兒茶醛的的收率為4. 9 ±0. 04 %，純度為99. 8 ±0. 01%。
【專利摘要】丹參中原兒茶醛的分離提純方法，所述方法包括以下步驟：粉碎、水溶性物質(zhì)提取、回流收集提取液、低溫析出原兒茶醛、真空干燥，得純品。該方法利用提純產(chǎn)物溶于冷水的特性，在常壓低溫狀態(tài)下，高熱高濃度的原兒茶醛會(huì)隨著溫度的驟降而溶解度降低，析出，避免了使用乙醇易爆溶劑、苯或氯仿等有毒溶劑，避免引發(fā)生產(chǎn)安全事故，該方法制備的原兒茶醛收率為4.9±0.04％，純度為99.8±0.01％。
【IPC分類】C07C45/81, C07C45/78, C07C47/565
【公開號(hào)】CN105461530
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410464649
【發(fā)明人】田東奎, 張樹偉
【申請(qǐng)人】天津法莫西醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2014年9月12日