培養(yǎng)容器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及培養(yǎng)容器，其特別適用于例如有關(guān)在任意環(huán)境下培養(yǎng)的細(xì)胞之間相互作用的實(shí)驗(yàn)研究等。
【背景技術(shù)】
[0002]曾有人提出了能夠同時(shí)培養(yǎng)多種細(xì)胞并研究這些細(xì)胞間的相互作用的培養(yǎng)器皿(專利文獻(xiàn)1)。
[0003]現(xiàn)有的培養(yǎng)器皿是所謂的多井形器皿，其通過(guò)在共同的平板狀容器主體上形成多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)用的井(凹處)并以包圍容器主體外周的方式設(shè)置高的外壁而構(gòu)成。因此，在各井內(nèi)培養(yǎng)規(guī)定的細(xì)胞時(shí)，將共同的液體培養(yǎng)基注入外壁的內(nèi)側(cè)并使充滿各井，能夠觀察經(jīng)由液體培養(yǎng)基發(fā)現(xiàn)的各井的細(xì)胞之間的相互作用。若將例如從肝臟、腎臟、心臟、脾臟、肺、血管等各臟器取出的細(xì)胞種類在各井內(nèi)培養(yǎng)，則能夠模擬活體內(nèi)的各臟器的細(xì)胞種類之間的相互作用。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0005]專利文獻(xiàn)
[0006]專利文獻(xiàn)1:日本專利特許第4609799號(hào)公報(bào)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]發(fā)明所要解決的技術(shù)問題
[0008]在上述現(xiàn)有技術(shù)中，用于細(xì)胞培養(yǎng)的井因形成在共同的容器主體上而不能夠單獨(dú)地設(shè)定各細(xì)胞種類的培養(yǎng)環(huán)境，因而存在有時(shí)不能夠獲取必要的研究數(shù)據(jù)這樣的問題。例如，在因癌細(xì)胞的增殖而導(dǎo)致腫瘤增大時(shí)，因?yàn)樗闹行牟孔兂傻脱醐h(huán)境而誘導(dǎo)血管新生，在對(duì)有關(guān)誘導(dǎo)血管新生的細(xì)胞因子或外來(lái)體等分泌因子或者它們的舉動(dòng)等進(jìn)行的研究中，對(duì)在包括低氧環(huán)境的各種培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)的癌細(xì)胞或正常細(xì)胞之間的相互作用的觀察必不可少。此外，因?yàn)楣餐闹黧w上的井因過(guò)濾器的原因而不能單個(gè)分離，所以還存在本質(zhì)上不適合鑒定細(xì)胞因子或外來(lái)體等分泌因子的問題。
[0009]因此，本發(fā)明的目的在于，以現(xiàn)有技術(shù)的問題為鑒，提供一種培養(yǎng)容器，其通過(guò)組合可以連接的第一容器和第二容器，例如不僅能夠觀察任意環(huán)境下單獨(dú)培養(yǎng)的細(xì)胞之間的相互作用，還能很好地適用于分泌因子的鑒定、細(xì)胞、臟器、微生物等對(duì)象的培養(yǎng)、再生、制造、觀察等。
[0010]解決技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案
[0011]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明的結(jié)構(gòu)主要是:具有由透明的熱塑性塑料材料成形的第一容器以及第二容器，第一容器以及第二容器分別是具有橫向開口且上部開放的有底容器，在經(jīng)由形成于第一容器以及第二容器的連接機(jī)構(gòu)使各開口相對(duì)地連接時(shí)，各開口水密地連通。
[0012]并且，各開口能夠形成為上方為圓弧的半圓狀。
[0013]此外，在第一容器上可以將包圍開口的筒體向外形成，在第二容器上可以形成與第一容器連接時(shí)對(duì)筒體進(jìn)行定位的導(dǎo)向部，第二容器可以在開口的前表面保持過(guò)濾器，也可以將支撐過(guò)濾器的支撐桿設(shè)在開口處。
[0014]此外，第一容器以及第二容器可以分別將底面形成為分體的透明板，也可以分別通過(guò)可被剝離的過(guò)濾器將各開口封閉，也可以分別將內(nèi)部與各開口一起一分為二。
[0015]并且，第一容器以及第二容器能夠經(jīng)由設(shè)有一對(duì)對(duì)稱形狀的橫向開口的第三容器而連接，且第一容器、第二容器以及第三容器能夠分別將內(nèi)部分割為多個(gè)室，且按每個(gè)室設(shè)置開口。
[0016]發(fā)明效果
[0017]根據(jù)上述發(fā)明的結(jié)構(gòu)，第一容器以及第二容器例如能夠在相互獨(dú)立的個(gè)別的環(huán)境下放置，在各自的環(huán)境下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。另一方面，第一容器以及第二容器在使各自的開口相對(duì)地經(jīng)由連接機(jī)構(gòu)連接時(shí)，各開口能水密地連通。因此，若向第一容器和第二容器注入相同的液體培養(yǎng)基，則第一容器和第二容器內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞的分泌物會(huì)經(jīng)由液體培養(yǎng)基相互交流，因此，通過(guò)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，就能夠觀察在不同環(huán)境下培養(yǎng)的細(xì)胞之間的相互作用。此外，第一容器和第二容器由例如聚苯乙烯一類的透明的熱塑性塑料材料成形，并且對(duì)內(nèi)表面實(shí)施了等離子處理等親水化處理，這樣一來(lái)，則具有細(xì)胞或臟器、微生物等對(duì)象容易固定其上且容易觀察的優(yōu)點(diǎn)。此外，通過(guò)將第一容器與第二容器經(jīng)由過(guò)濾器連接在一起，還能夠很好地適用于分泌因子的鑒定。
[0018]通過(guò)將各開口形成為上方為圓弧的半圓狀，下側(cè)的直線部分與第一容器及第二容器的底面之間的空間能夠作為有效空間利用于對(duì)對(duì)象的培養(yǎng)、再生、制造、觀察等。此外，雖然各開口的形狀無(wú)須一定為準(zhǔn)確的半圓，比半圓大點(diǎn)小點(diǎn)都沒關(guān)系，但是比半圓設(shè)置得大點(diǎn)可以增大有效開口面積，這點(diǎn)是有利的。
[0019]在連接第一容器與第二容器時(shí)，包圍第一容器的開口的向外的筒體例如前端會(huì)抵接于第二容器開口的周圍，所以能夠使雙方的開口容易地水密地連通。另外，此時(shí)，形成在第二容器的導(dǎo)向部對(duì)第一容器的筒體的前端進(jìn)行定位，能夠適當(dāng)?shù)卦O(shè)定筒體與第二容器的開口之間的相對(duì)位置關(guān)系。但是，也可以在第二容器的開口形成向外的筒體，并將對(duì)第一容器的筒體進(jìn)行定位的導(dǎo)向部形成在第二容器的筒體的前端。
[0020]保持在第二容器的開口的前表面的過(guò)濾器例如將對(duì)第一容器和第二容器內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞之間的相互作用有影響的分泌物即分泌因子按其尺寸進(jìn)行分隔，對(duì)其鑒定分析等做出貢獻(xiàn)。其中，過(guò)濾器的滲透孔徑可以在考慮例如直徑約30-100nm的所謂外來(lái)體的大小的基礎(chǔ)上進(jìn)行選擇。此外，若將支撐過(guò)濾器的支撐桿設(shè)在第二容器的開口處，則即使開口變大也能將過(guò)濾器穩(wěn)定地保持住。
[0021]通過(guò)將第一容器和第二容器的底面設(shè)為透明板，對(duì)經(jīng)由透明板對(duì)對(duì)象進(jìn)行顯微鏡觀察時(shí)是有利的。由于透明板很薄，因此光的透過(guò)性更為良好，使得用高倍率顯微鏡觀察變得容易。
[0022]若經(jīng)由可被剝離的過(guò)濾器封閉第一容器和第二容器的各開口，則通過(guò)將過(guò)濾器剝離去除，能夠使第一容器和第二容器內(nèi)的液體培養(yǎng)基一并連通，從而能夠排除如將液體培養(yǎng)基追加注入開口后再連通時(shí)的對(duì)象干擾、因分泌因子的稀釋等而導(dǎo)致問題的可能性。
[0023]若將第一容器和第二容器的內(nèi)部分割成兩室，則能夠有效地用于例如在各室內(nèi)按相同條件培養(yǎng)的正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的比較試驗(yàn)或篩查等。
[0024]在將第一容器與第二容器經(jīng)由設(shè)有一對(duì)對(duì)稱形狀的橫向開口的第三容器連接時(shí)，能夠觀察例如3種以上的培養(yǎng)細(xì)胞間的相互作用。其中，第三容器能夠以1個(gè)以上的任意個(gè)數(shù)串聯(lián)連接后設(shè)置于第一容器與第二容器之間。并且，第三容器的開口分別與第一容器及第二容器的各開口相匹配。并且，第三容器基本上形成為與第一容器和第二容器相同的材料、形狀、大小，且形成與第一容器和第二容器的連接機(jī)構(gòu)組合的連接機(jī)構(gòu)。
[0025]在將第一容器、第二容器及第三容器各自的內(nèi)部分割為多個(gè)室時(shí)，例如能夠在每個(gè)室內(nèi)收納不同的細(xì)胞種類并在同一條件下進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)比較試驗(yàn)或篩查等更為有效。此夕卜，此時(shí)的第一容器、第二容器及第三容器以各室為單位設(shè)有開口，所以通過(guò)按各室的開口分別安裝適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾器，例如能夠更加有效地通過(guò)培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的分泌因子進(jìn)行比較試驗(yàn)。
【附圖說(shuō)明】
[0026]圖1是整體結(jié)構(gòu)分解立體圖。
[0027]圖2是第一容器的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖。
[0028]圖3是圖2的主要部分放大說(shuō)明圖。
[0029]圖4是第二容器的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖。
[0030]圖5是圖4的主要部分放大說(shuō)明圖。
[0031]圖6是連接狀態(tài)說(shuō)明圖。
[0032]圖7是圖6的主要部分放大說(shuō)明圖。
[0033]圖8是連接動(dòng)作說(shuō)明圖(1)。
[0034]圖9是連接動(dòng)作說(shuō)明圖(2)。
[0035]圖10是連接動(dòng)作說(shuō)明圖(3)。
[0036]圖11是使用狀態(tài)示意說(shuō)明圖。
[0037]圖12是表示其他實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖(1)。
[0038]圖13是表示其他實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖(2)。
[0039]圖14是表示其他實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖(3)。
[0040]圖15是表示其他實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖(4)。
[0041]圖16是表示其他實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)說(shuō)明圖(5)