一種芋頭黏蛋白多肽及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及用于治療動脈粥樣硬化的多肽提取物。
【背景技術(shù)】
[0002] 動脈粥樣硬化（Atherosclerosis)是由于脂肪、血栓、結(jié)締組織和碳酸鈣在血管 (主要是動脈，但也包括靜脈）沉積所造成的一種對人體有害的狀態(tài)。其特點是動脈管壁增 厚變硬、失去彈性和管腔縮小。動脈粥樣硬化的癥狀主要決定于血管病變及受累器官的缺 血程度，主動脈粥樣硬化常無癥狀，冠狀動脈粥樣硬化者，若管徑狹窄達75 %以上，則可發(fā) 生心絞痛、心肌梗塞、心律失常，甚至猝死。腦動脈硬化可引起腦缺血、腦萎縮，或造成腦血 管破裂出血，腎動脈粥樣硬化常引起夜尿、頑固性高血壓、嚴(yán)重者可有腎功能不全。腸系膜 動脈粥樣硬化可表現(xiàn)為飽餐后腹痛便血等癥狀。下肢動脈粥樣硬化引起血管腔嚴(yán)重狹窄者 可出現(xiàn)間歇性跛行、足背動脈搏動消失，嚴(yán)重者甚至可發(fā)生壞疽。動脈粥樣硬化是一組稱為 動脈硬化的血管病中最常見、最重要的一種。
[0003]目前預(yù)防和治療動脈粥樣硬化的藥物，主要為針對控制易患因素。如患有動脈粥 樣硬化、應(yīng)及時控制血糖，包括飲食控制。2型動脈粥樣硬化的降糖藥物應(yīng)以不引起高胰島 素血癥為宜如達美康等；如有高血壓則應(yīng)給降壓藥，使血壓降至適當(dāng)水平，如有血膽固醇增 高，則應(yīng)控制高膽固醇適當(dāng)給予降脂藥物。
[0004] 芋頭又稱芋、芋艿，天南星科植物的地下球莖，營養(yǎng)豐富。芋頭性平，味甘、辛，有小 毒。能益脾胃，調(diào)中氣，化痰散結(jié)?？芍紊偈撤α?、痕瘍結(jié)核、久痢便血、癰毒等病癥。中醫(yī)認(rèn) 為芋頭有開胃生津、消炎鎮(zhèn)痛、補氣益腎等功效，可治胃痛、痢疾、慢性腎炎等。芋頭含有一 種黏蛋白，被人體吸收后能產(chǎn)生免疫球蛋白，或稱抗體球蛋白，可提高機體的抵抗力。黏蛋 白是一種多糖蛋白質(zhì)的混合物，對人體具有特殊的保健作用，能防止脂肪沉積在心血管上， 保持血管彈性，阻止動脈粥樣硬化過早發(fā)生。故芋頭黏蛋白可用于治療動脈粥樣硬化。盡 管如此，并沒有成熟開發(fā)的從芋頭黏蛋白提取物問世，用于預(yù)防或治療動脈粥樣硬化。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0005] 本發(fā)明目的是針對現(xiàn)有治療動脈粥樣硬化的藥物特點，設(shè)計一種芋頭黏蛋白多 肽，能安全、有效治療動脈粥樣硬化。
[0006] 技術(shù)方案
[0007] -種芋頭黏蛋白多肽，其序列為DALAYGKTPEQLLSEKVSDHLIPHK。所述多肽的制備方 法，其特征在于：步驟包括（1)煎煮，（2)酶解，（3)蛋白質(zhì)分離，（4)半制備RP-HPLC分離純 化，（5)凍干。所述的酶解采用中性蛋白酶、復(fù)合蛋白酶酶解。所述的蛋白質(zhì)分離采用大孔 樹脂、葡聚糖凝膠。所述多肽在治療動脈粥樣硬化的應(yīng)用。
[0008] 有益結(jié)果：
[0009] 本發(fā)明中的芋頭黏蛋白多肽，是從芋頭中提取多肽，安全性好，而且能有效的預(yù)防 或治療動脈粥樣硬化。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1
[0011] 多肽的制備方法
[0012] 將芋頭加水煎煮1. 5h后，冷卻至室溫；加入0. 5%中性蛋白酶和1%復(fù)合蛋白酶酶 解2h;采用大孔樹脂按照分子量分離蛋白質(zhì)，再用半制備RP-HPLC分離純化，得到的產(chǎn)物凍 干后，即為芋頭黏蛋白多肽。應(yīng)用上述方法提取的芋頭黏蛋白多肽，經(jīng)過質(zhì)譜鑒定，序列為 DALAYGKTPEQLLSEKVSDHLIPHK，該序列為全新序列?；蛴缮虾＜獱柡铣伞?br>[0013] 實施例2
[0014] 芋頭黏蛋白多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型的影響
[0015] 建立小鼠動脈粥樣硬化模型。雄性8周齡的C57BL/6J小鼠40只，隨機分為4組， 分別為：A組為空白對照組：普通飼料喂養(yǎng)；B組為模型對照組：造模+高脂飼料喂養(yǎng)；C組 為藥物干預(yù)組：造模+高脂飼料+芋頭黏蛋白多肽（l〇mg/kg/d) ;D為陽性藥干預(yù)組：造模 +高脂飼料+奧利司他片（20mg/kg/d)。連續(xù)12周。A組小鼠飼料為普通飼料，B、C、D組 小鼠用高脂高膽固醇飼料（含15%豬油+0. 25%膽固醇）喂養(yǎng)，以加速動脈粥樣硬化模 型的形成。12周后，記錄小鼠體重，檢測多肽對血清膽固醇的影響：血清總膽固醇（total cholesterol，TC)、甘油三酯（tryglyeride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoproteincholesterol，HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇（lowdensitylipoprotein cholesterol，HDL-C)的水平；，檢測小鼠主動脈粥樣硬化形成情況：對小鼠主動脈大體和 主動脈根部冰凍切片行油紅〇染色，對動脈粥樣斑塊面積進行定量。
[0016] 結(jié)果：各組實驗小鼠實驗期間體重都有增長趨勢。隨著喂養(yǎng)時間的變化，高脂飲食 喂養(yǎng)組的體重增長較正常飲食組快（P〈〇. 05,見表1)。多肽組小鼠體重增長與正常飲食組 相當(dāng)（P>0. 05)，與模型組相比體重較輕（P〈0. 05)。多肽組與高脂高膽固醇喂養(yǎng)的模型小鼠 組相比，TG、TC、HDL-C、LDL-C水平顯著降低（P〈0. 01，見表2)，動脈粥樣斑塊面積顯著性減 ?。≒〈0. 01，見表3)，與模型對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
[0017] 表1芋頭黏蛋白多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型小鼠體重的影響
[0018]
[0019] *p〈0. 05, #p〈0. 01 與模型組相比
[0020] 表2芋頭黏蛋白多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型小鼠膽固醇的影響
[0021]
[0023] *p〈0. 05, #p〈0. 01 與模型組相比
[0024] 表3芋頭黏蛋白多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型小鼠動脈粥樣硬化面積的影響
[0025]
[0026] *p〈0. 05, #p〈0. 01 與模型組相比
[0027] 結(jié)論：芋頭黏蛋白多肽對小鼠動脈粥樣硬化具有治療作用。
【主權(quán)項】
1. 一種芋頭黏蛋白多肽，其特征在于：其序列為DALAYGKTPEQLLSEKVSDHLIPHK。2. -種權(quán)利要求1所述多肽的制備方法，其特征在于：步驟包括（1)煎煮，（2)酶解， (3)蛋白質(zhì)分離，（4)半制備RP-HPLC分離純化，（5)凍干。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的多肽的制備方法，其特征在于：所述的酶解采用中性蛋白酶、 復(fù)合蛋白酶酶解。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的多肽的制備方法，其特征在于：所述的蛋白質(zhì)分離采用大孔 樹脂、葡聚糖凝膠。5. 權(quán)利要求1-4任一項的多肽在治療動脈粥樣硬化的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及芋頭黏蛋白多肽，能預(yù)防或治療動脈粥樣硬化。所述的多肽序列為DALAYGKTPEQLLSEKVSDHLIPHK。所述多肽的制備方法，步驟包括（1）煎煮，（2）酶解，（3）蛋白質(zhì)分離，（4）半制備RP-HPLC分離純化，（5）凍干。所述的酶解采用中性蛋白酶、復(fù)合蛋白酶酶解。所述的蛋白質(zhì)分離采用大孔樹脂、葡聚糖凝膠。所述多肽在治療動脈粥樣硬化的應(yīng)用。本發(fā)明中的芋頭黏蛋白多肽，是從芋頭中提取多肽，安全性好，而且能有效的預(yù)防或治療動脈粥樣硬化。
【IPC分類】C07K14/415, A61K38/56, A61P9/10, C12P21/06, C07K1/14
【公開號】CN105111292
【申請?zhí)枴緾N201510563847
【發(fā)明人】羅瑞雪
【申請人】蘇州普羅達生物科技有限公司
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年9月8日